Name: Evaluatie van de Host-Pathogen reacties en werkzaamheid van het vaccin in muizen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-02-22T13:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 52 s
Description: Leer hoe je vaccinwerkzaamheid en gastheer-pathogeenreacties evalueert in muizen met dit in vivo-protocol. Deze methode meet bacteriële belasting en immuunrespons voor vaccinontwikkeling.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd gesteund door 1R01AI125560-01 en start-up middelen aan The Ohio State University.

<ol><li>Tacken, P. J., Figdor, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+antigen+delivery+and+activation+of+dendritic+cells+in+vivo%3A+steps+towards+cost+effective+vaccines%5BTitle%5D)+AND+%22Seminars+in+Immunology%22%5BJournal%5D)">Targeted antigen delivery and activation of dendritic cells in vivo: steps towards cost effective vaccines.</a> Seminars in Immunology. 23 (1), 12-20 (2011).</li>
<li>Kilgore, P. E., Salim, A. M., Zervos, M. J., Schmitt, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pertussis%3A+Microbiology%2C+Disease%2C+Treatment%2C+and+Prevention%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Microbiology+Reviews%22%5BJournal%5D)">Pertussis: Microbiology, Disease, Treatment, and Prevention.</a> Clinical Microbiology Reviews. 29 (3), 449-486 (2016).</li>
<li>Dorji, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bordetella+Pertussis+virulence+factors+in+the+continuing+evolution+of+whooping+cough+vaccines+for+improved+performance%5BTitle%5D)+AND+%22Medical+Microbiology+and+Immunology%22%5BJournal%5D)">Bordetella Pertussis virulence factors in the continuing evolution of whooping cough vaccines for improved performance.</a> Medical Microbiology and Immunology. 207 (1), 3-26 (2018).</li>
<li>Feldstein, L. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+Routine+Vaccination+Coverage%2C+2016%5BTitle%5D)+AND+%22Morbidity+and+Mortality+Weekly+Report%22%5BJournal%5D)">Global Routine Vaccination Coverage, 2016.</a> Morbidity and Mortality Weekly Report. 66 (45), 1252-1255 (2017).</li>
<li>Cherry, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemic+pertussis+in+2012--the+resurgence+of+a+vaccine-preventable+disease%5BTitle%5D)+AND+%22New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Epidemic pertussis in 2012--the resurgence of a vaccine-preventable disease.</a> New England Journal of Medicine. 367 (9), 785-787 (2012).</li>
<li>Celentano, L. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resurgence+of+pertussis+in+Europe%5BTitle%5D)+AND+%22The+Pediatric+Infectious+Disease+Journal%22%5BJournal%5D)">Resurgence of pertussis in Europe.</a> The Pediatric Infectious Disease Journal. 24 (9), 761-765 (2005).</li>
<li>McNabb, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Summary+of+notifiable+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Morbidity+and+Mortality+Weekly+Report+p%22%5BJournal%5D)">Summary of notifiable diseases.</a> Morbidity and Mortality Weekly Report p. 54 (53), 1-92 (2007).</li>
<li>Sealey, K. L., Belcher, T., Preston, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bordetella+pertussis+epidemiology+and+evolution+in+the+light+of+pertussis+resurgence%5BTitle%5D)+AND+%22Infection%2C+Genetics%2C+and+Evolution%22%5BJournal%5D)">Bordetella pertussis epidemiology and evolution in the light of pertussis resurgence.</a> Infection, Genetics, and Evolution. 40, 136-143 (2016).</li>
<li>Warfel, J. M., Merkel, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+baboon+model+of+pertussis%3A+effective+use+and+lessons+for+pertussis+vaccines%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Reviews+of+Vaccines%22%5BJournal%5D)">The baboon model of pertussis: effective use and lessons for pertussis vaccines.</a> Expert Reviews of Vaccines. 13 (10), 1241-1252 (2014).</li>
<li>Jennings-Gee, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+adjuvant+Bordetella+Colonization+Factor+A+attenuates+alum-induced+Th2+responses+and+enhances+Bordetella+pertussis+clearance+from+mouse+lungs%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">The adjuvant Bordetella Colonization Factor A attenuates alum-induced Th2 responses and enhances Bordetella pertussis clearance from mouse lungs.</a> Infection and Immunity. , (2018).</li>
<li>Sukumar, N., Mishra, M., Sloan, G. P., Ogi, T., Deora, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+Bvg+phase-dependent+regulation+and+combinatorial+role+in+pathogenesis+of+two+Bordetella+paralogs%2C+BipA+and+BcfA%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Bacteriology%22%5BJournal%5D)">Differential Bvg phase-dependent regulation and combinatorial role in pathogenesis of two Bordetella paralogs, BipA and BcfA.</a> Journal of Bacteriology. 189 (10), 3695-3704 (2007).</li>
<li>Stainer, D. W., Scholte, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+chemically+defined+medium+for+the+production+of+phase+I+Bordetella+pertussis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+General+Microbiology%22%5BJournal%5D)">A simple chemically defined medium for the production of phase I Bordetella pertussis.</a> Journal of General Microbiology. 63 (2), 211-220 (1970).</li>
<li>Bordet, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Le+microbe+de+le+coqueluche%5BTitle%5D)+AND+%22Annales+de+l%27Institut+Pasteur%22%5BJournal%5D)">Le microbe de le coqueluche.</a> Annales de l'Institut Pasteur. 20, 731-741 (1906).</li>
<li>Cook, M. J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCook%2C+MJ+%22The+Anatomy+of+the+Laboratory+Mouse%22">The Anatomy of the Laboratory Mouse</a>. , Academic Press. (1965).</li>
<li>Sutton, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accuracy+of+Plate+Counts%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Validation+Techniques%22%5BJournal%5D)">Accuracy of Plate Counts.</a> Journal of Validation Techniques. 17 (3), 42-46 (2011).</li>
<li>Conover, M. S., Sloan, G. P., Love, C. F., Sukumar, N., Deora, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Bps+polysaccharide+of+Bordetella+pertussis+promotes+colonization+and+biofilm+formation+in+the+nose+by+functioning+as+an+adhesin%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Microbiology%22%5BJournal%5D)">The Bps polysaccharide of Bordetella pertussis promotes colonization and biofilm formation in the nose by functioning as an adhesin.</a> Molecular Microbiology. 77 (6), 1439-1455 (2010).</li>
<li>Cattelan, N., Jennings-Gee, J., Dubey, P., Yantorno, O. M., Deora, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperbiofilm+Formation+by+Bordetella+pertussis+Strains+Correlates+with+Enhanced+Virulence+Traits%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Hyperbiofilm Formation by Bordetella pertussis Strains Correlates with Enhanced Virulence Traits.</a> Infection and Immunity. 85 (12), (2017).</li>
<li>Andreasen, C., Carbonetti, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pertussis+toxin+inhibits+early+chemokine+production+to+delay+neutrophil+recruitment+in+response+to+Bordetella+pertussis+respiratory+tract+infection+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Pertussis toxin inhibits early chemokine production to delay neutrophil recruitment in response to Bordetella pertussis respiratory tract infection in mice.</a> Infection and Immunity. 76 (11), 5139-5148 (2008).</li>
<li>Mills, K. H., Gerdts, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+and+pig+models+for+studies+of+natural+and+vaccine-induced+immunity+to+Bordetella+pertussis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">Mouse and pig models for studies of natural and vaccine-induced immunity to Bordetella pertussis.</a> Journal of Infectious Diseases. 209, Suppl 1 16-19 (2014).</li>
<li>Dunne, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+TLR2+agonist+from+Bordetella+pertussis+is+a+potent+adjuvant+that+promotes+protective+immunity+with+an+acellular+pertussis+vaccine%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunology%22%5BJournal%5D)">A novel TLR2 agonist from Bordetella pertussis is a potent adjuvant that promotes protective immunity with an acellular pertussis vaccine.</a> Mucosal Immunology. 8 (3), 607-617 (2015).</li>
<li>Denoel, P., Godfroid, F., Guiso, N., Hallander, H., Poolman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+acellular+pertussis+vaccines-induced+immunity+against+infection+due+to+Bordetella+pertussis+variant+isolates+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Vaccine%22%5BJournal%5D)">Comparison of acellular pertussis vaccines-induced immunity against infection due to Bordetella pertussis variant isolates in a mouse model.</a> Vaccine. 23 (46-47), 5333-5341 (2005).</li>
<li>Marr, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+activity+of+the+Bordetella+pertussis+BrkA+autotransporter+in+the+murine+lung+colonization+model%5BTitle%5D)+AND+%22Vaccine%22%5BJournal%5D)">Protective activity of the Bordetella pertussis BrkA autotransporter in the murine lung colonization model.</a> Vaccine. 26 (34), 4306-4311 (2008).</li>
<li>Feunou, P. F., Bertout, J., Locht, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((T-+and+B-cell-mediated+protection+induced+by+novel%2C+live+attenuated+pertussis+vaccine+in+mice.+Cross+protection+against+parapertussis%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">T- and B-cell-mediated protection induced by novel, live attenuated pertussis vaccine in mice. Cross protection against parapertussis.</a> PLoS One. 5 (4), 10178(2010).</li>
<li>Mills, K. H., Ryan, M., Ryan, E., Mahon, B. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+murine+model+in+which+protection+correlates+with+pertussis+vaccine+efficacy+in+children+reveals+complementary+roles+for+humoral+and+cell-mediated+immunity+in+protection+against+Bordetella+pertussis%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">A murine model in which protection correlates with pertussis vaccine efficacy in children reveals complementary roles for humoral and cell-mediated immunity in protection against Bordetella pertussis.</a> Infection and Immunity. 66 (2), 594-602 (1998).</li>
<li>Higgs, R., Higgins, S. C., Ross, P. J., Mills, K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunity+to+the+respiratory+pathogen+Bordetella+pertussis%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunology%22%5BJournal%5D)">Immunity to the respiratory pathogen Bordetella pertussis.</a> Mucosal Immunology. 5 (5), 485-500 (2012).</li>
<li>Alving, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Design+and+selection+of+vaccine+adjuvants%3A+animal+models+and+human+trials%5BTitle%5D)+AND+%22Vaccine%22%5BJournal%5D)">Design and selection of vaccine adjuvants: animal models and human trials.</a> Vaccine. 20, Suppl 3 56-64 (2002).</li>
<li>Ipp, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adverse+reactions+to+diphtheria%2C+tetanus%2C+pertussis-polio+vaccination+at+18+months+of+age%3A+effect+of+injection+site+and+needle+length%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Adverse reactions to diphtheria, tetanus, pertussis-polio vaccination at 18 months of age: effect of injection site and needle length.</a> Pediatrics. 83 (5), 679-682 (1989).</li>
<li>Fessard, C., Riche, O., Cohen, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intramuscular+versus+subcutaneous+injection+for+hepatitis+B+vaccine%5BTitle%5D)+AND+%22Vaccine%22%5BJournal%5D)">Intramuscular versus subcutaneous injection for hepatitis B vaccine.</a> Vaccine. 6 (6), 469(1988).</li>
<li>Bergeson, P. S., Singer, S. A., Kaplan, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intramuscular+injections+in+children%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatrics%22%5BJournal%5D)">Intramuscular injections in children.</a> Pediatrics. 70 (6), 944-948 (1982).</li>
<li>Zhang, L., Wang, W., Wang, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+vaccine+administration+modality+on+immunogenicity+and+efficacy%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Review+of+Vaccines%22%5BJournal%5D)">Effect of vaccine administration modality on immunogenicity and efficacy.</a> Expert Review of Vaccines. 14 (11), 1509-1523 (2015).</li>
<li>Ross, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relative+Contribution+of+Th1+and+Th17+Cells+in+Adaptive+Immunity+to+Bordetella+pertussis%3A+Towards+the+Rational+Design+of+an+Improved+Acellular+Pertussis+Vaccine%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Pathogens%22%5BJournal%5D)">Relative Contribution of Th1 and Th17 Cells in Adaptive Immunity to Bordetella pertussis: Towards the Rational Design of an Improved Acellular Pertussis Vaccine.</a> PLoS Pathogens. 9 (4), 1003264(2013).</li>
<li>Warfel, J. M., Zimmerman, L. I., Merkel, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acellular+pertussis+vaccines+protect+against+disease+but+fail+to+prevent+infection+and+transmission+in+a+nonhuman+primate+model%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+USA%22%5BJournal%5D)">Acellular pertussis vaccines protect against disease but fail to prevent infection and transmission in a nonhuman primate model.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences USA. 111 (2), 787-792 (2014).</li>
<li>Allen, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sustained+protective+immunity+against+Bordetella+pertussis+nasal+colonization+by+intranasal+immunization+with+a+vaccine-adjuvant+combination+that+induces+IL-17-secreting+TRM+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunology%22%5BJournal%5D)">Sustained protective immunity against Bordetella pertussis nasal colonization by intranasal immunization with a vaccine-adjuvant combination that induces IL-17-secreting TRM cells.</a> Mucosal Immunology. , (2018).</li>
<li>Solans, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-17-dependent+SIgA-mediated+protection+against+nasal+Bordetella+pertussis+infection+by+live+attenuated+BPZE1+vaccine%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunology%22%5BJournal%5D)">IL-17-dependent SIgA-mediated protection against nasal Bordetella pertussis infection by live attenuated BPZE1 vaccine.</a> Mucosal Immunology. , (2018).</li>
<li>Miller, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualization+of+murine+intranasal+dosing+efficiency+using+luminescent+Francisella+tularensis%3A+effect+of+instillation+volume+and+form+of+anesthesia%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Visualization of murine intranasal dosing efficiency using luminescent Francisella tularensis: effect of instillation volume and form of anesthesia.</a> PLoS One. 7 (2), 31359(2012).</li>
<li>Sato, Y., Izumiya, K., Sato, H., Cowell, J. L., Manclark, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aerosol+infection+of+mice+with+Bordetella+pertussis%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Aerosol infection of mice with Bordetella pertussis.</a> Infection and Immunity. 29 (1), 261-266 (1980).</li>
<li>Warfel, J. M., Beren, J., Merkel, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Airborne+transmission+of+Bordetella+pertussis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">Airborne transmission of Bordetella pertussis.</a> Journal of Infectious Diseases. 206 (6), 902-906 (2012).</li>
<li>Scanlon, K. M., Snyder, Y. G., Skerry, C., Carbonetti, N. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fatal+Pertussis+in+the+Neonatal+Mouse+Model+Is+Associated+with+Pertussis+Toxin-Mediated+Pathology+beyond+the+Airways%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Fatal Pertussis in the Neonatal Mouse Model Is Associated with Pertussis Toxin-Mediated Pathology beyond the Airways.</a> Infection and Immunity. 85 (11), (2017).</li>
<li>Martinez de Tejada, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neither+the+Bvg-+phase+nor+the+vrg6+locus+of+Bordetella+pertussis+is+required+for+respiratory+infection+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Neither the Bvg- phase nor the vrg6 locus of Bordetella pertussis is required for respiratory infection in mice.</a> Infection and Immunity. 66 (6), 2762-2768 (1998).</li>
<li>Higgins, S. C., Jarnicki, A. G., Lavelle, E. C., Mills, K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TLR4+mediates+vaccine-induced+protective+cellular+immunity+to+Bordetella+pertussis%3A+role+of+IL-17-producing+T-cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">TLR4 mediates vaccine-induced protective cellular immunity to Bordetella pertussis: role of IL-17-producing T-cells.</a> Journal of Immunology. 177 (11), 7980-7989 (2006).</li>
<li>Mahon, B. P., Brady, M. T., Mills, K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protection+against+Bordetella+pertussis+in+mice+in+the+absence+of+detectable+circulating+antibody%3A+implications+for+long-term+immunity+in+children%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">Protection against Bordetella pertussis in mice in the absence of detectable circulating antibody: implications for long-term immunity in children.</a> Journal of Infectious Diseases. 181 (6), 2087-2091 (2000).</li>
<li>Karlsson, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+the+ELISPOT+and+cytokine+flow+cytometry+assays+for+the+enumeration+of+antigen-specific+T-cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunological+Methods%22%5BJournal%5D)">Comparison of the ELISPOT and cytokine flow cytometry assays for the enumeration of antigen-specific T-cells.</a> Journal of Immunological Methods. 283 (1-2), 141-153 (2003).</li>
<li>Hagen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+Multi-Donor+Study+of+IFNgamma+Secretion+and+Expression+by+Human+PBMCs+Using+ELISPOT+Side-by-Side+with+ELISA+and+Flow+Cytometry+Assays%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Comparative Multi-Donor Study of IFNgamma Secretion and Expression by Human PBMCs Using ELISPOT Side-by-Side with ELISA and Flow Cytometry Assays.</a> Cells. 4 (1), 84-95 (2015).</li>
<li>Raeven, R. H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+and+cellular+signatures+underlying+superior+immunity+against+Bordetella+pertussis+upon+pulmonary+vaccination%5BTitle%5D)+AND+%22Mucosal+Immunology%22%5BJournal%5D)">Molecular and cellular signatures underlying superior immunity against Bordetella pertussis upon pulmonary vaccination.</a> Mucosal Immunology. 11 (3), 1009(2018).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Het uitgebreide protocol hier beschreven om te bestuderen van de vaccin-geïnduceerde immuniteit aan B. pertussis infectie zal ook toestaan dat evaluatie van host reacties op een verscheidenheid van andere ziekteverwekkers. Het protocol wordt beschreven methoden leveren inentingen te bepalen vaccin werkzaamheid volgende pathogen uitdaging en parallelle dissectie van immune functie. Bij de aanpassing van het protocol te bestuderen van andere ziekteverwekkers, zou verschillende parameters moeten worden gewijzigd. D...

Vaccins vertegenwoordigen een van de grootste verworvenheden van de volksgezondheid van de 20e eeuw, maar we nog steeds niet volledig begrijpen de mechanismen waarmee succesvolle vaccins protectieve immuniteit stimuleren. De identificatie van moleculaire signaturen (bv., cel activatie markeringen, uitbreiding van cellulaire subtypen en patronen van genexpressie) veroorzaakt na vaccinatie een overvloed aan informatie biedt voor het voorspellen en het genereren van een doeltreffend immuunrespons. De complexiteit van de gastheer-pathogeen reacties kan niet voldoende worden gerepliceerd met behulp van in vitro cel cultuur systemen1. In vivo vaccin modellen zijn ontworpen om gelijktijdig meerdere soorten van immuun cellen binnen de host te evalueren. Dit biedt een voordeel wanneer karakteriseren vaccin antigeen verwerking en presentatie, differentiële cytokine secretie en uitbreiding van immuuncellen. Het protocol hier beschreven biedt een gedetailleerde methode om te bepalen van de werkzaamheid van het vaccin door evaluatie van de systemische en lokale immuunrespons en kwantificering van pathogen last in weefsels van belang. In het hier gegeven voorbeeld test de werkzaamheid van een experimenteel vaccin voor het pathogene agens Bordetella pertussis (B. pertussis).
B. pertussis is een gram-negatieve bacterie die is het etiologische agens van de respiratoire aandoeningen kinkhoest (pertussis)2,3. Nauw contact met besmette personen (symptomatisch of asymptomatisch) leidt tot transmissie, kolonisatie, en ziekte. Ondanks de aanzienlijke wereldwijde vaccin dekking4, kinkhoest wordt beschouwd als een resurging ziekte in veel landen over de hele wereld en is een belangrijke oorzaak van vermijdbare jeugd sterfgevallen5,6,7, 8. in 2015, B. pertussis en kinkhoest werden opgenomen in het nationale Instituut van allergie en besmettelijke ziekten (NIAID) opkomende infectieziekten pathogenen/lijst, nadruk op de behoefte aan ontwikkeling van een beter vaccin dat verleent langlevende protectieve immuniteit.
Een actief gebied van onderzoek bepalen van pertussis heropleving is momenteel de ontwikkeling van een vaccin (aPV) van de volgende generatie Acellulair kinkhoest met een optimale combinatie van roman hulpstoffen en antigenen om na te bootsen de immune reactie ontlokte door de geheel-cel kinkhoest vaccin (wPV)9. Met behulp van het protocol beschreven, we onlangs gemeld dat de wijziging van een huidige FDA-goedgekeurde aPV door toevoeging van een nieuwe adjuvans, Bordetella kolonisatie factor A (BcfA), resulteerden in efficiëntere daling van B. pertussis bacteriële verontreiniging vanaf muis longen10,11. Deze verhoogde bescherming werd vergezeld door het scheeftrekken van een aluin-geïnduceerde Th1/Th2 immune reactie op het meer beschermende Th1/Th17 immuun profiel10. Dit protocol is gedetailleerde en uitgebreide, waardoor de onderzoeker maximale informatie verkrijgen door de gelijktijdige evaluatie van host- en immuun reacties op een scala aan pathogenen.
Het protocol beschreven hier volgt het schema van de representatieve vaccin, afgebeeld in Figuur 1, om de optimale host immuunrespons.

<table><tbody><tr><td>2L inductiekamer</td><td>Vet Equip</td><td>941444</td><td></td></tr><tr><td>Fluriso</td><td>Vet One</td><td>V1 501017</td><td>elk merk is geschikt</td></tr><tr><td>Bordet Gengou Agar Base</td><td>BD bioscience</td><td>248200</td><td></td></tr><tr><td>Caseïne</td><td>Sigma</td><td>C-7078</td><td></td></tr><tr><td>Casaminozuren</td><td>VWR</td><td>J851-500G</td><td>Strainer Scholte (SS) media componenten</td></tr><tr><td>L-Glutaminzuur</td><td>Research Products Int</td><td>G36020-500</td><td></td></tr><tr><td>L-Proline</td><td>Research Products Int</td><td>P50200-500</td><td></td></tr><tr><td>Natriumchloride</td><td>Fisher</td><td>BP358-10</td><td></td></tr><tr><td>Kaliumfosfaat monobasisch</td><td>Fisher</td><td>BP362-1</td><td></td></tr><tr><td>Kaliumchloride</td><td>Fisher</td><td>P217-500</td><td></td></tr><tr><td>Magnesiumchloride hexahydraat</td><td>Fisher</td><td>M2670-500G</td><td></td></tr><tr><td>Calciumchloride</td><td>Fisher</td><td>C75-500</td><td></td></tr><tr><td>Tris base</td><td>Fisher</td><td>BP153-1</td><td></td></tr><tr><td>L-cysteïne HCl</td><td>Fisher</td><td>BP376-100</td><td>SS media supplementen</td></tr><tr><td>Ferrosulfaat heptahydraat</td><td>Sigma</td><td>F-7002</td><td></td></tr><tr><td>Niacine</td><td>Research Products Int</td><td>N20080-100</td><td></td></tr><tr><td>Glutathione</td><td>Research Products Int</td><td>G22010-25</td><td></td></tr><tr><td>Ascorbinezuur</td><td>Research Products Int</td><td>A50040-500</td><td></td></tr><tr><td>RPMI 1640</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>11875093</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>Sigma</td><td>F2442-500mL</td><td>&nbsp;elke VS bron, niet-hitte-inactivering</td></tr><tr><td>Gentamicine</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>15710064</td><td></td></tr><tr><td>B-mercaptoethanol</td><td>Fisher&nbsp;</td><td>BP176-100</td><td></td></tr><tr><td>15mL dounce weefselgrinder</td><td>Wheaton</td><td>357544</td><td>elk soortgelijk merk is geschikt</td></tr><tr><td>Snoerloze handhomogenisator</td><td>Kontes/Sigma&nbsp;</td><td>Z359971-1EA</td><td>elk soortgelijk merk is geschikt</td></tr><tr><td>Instrumenten - schaar, kromme schaar, pincetten, fijne pincetten, driehoekige spreiders</td><td></td><td></td><td>elk merk is geschikt</td></tr><tr><td>3mL spuiten</td><td>BD bioscience</td><td>309657</td><td></td></tr><tr><td>15mL conische buizen</td><td>Fisher&nbsp;</td><td>339651</td><td></td></tr><tr><td>1,5mL microfugebuizen</td><td>Denville</td><td>C2170</td><td></td></tr><tr><td>70um celstrainers</td><td>Fisher&nbsp;</td><td>22363548</td><td></td></tr><tr><td>60mm platen</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>130181</td><td></td></tr><tr><td>48-wells weefselkweekplaten</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>08-772-1C</td><td></td></tr><tr><td>1mL insulinespuit 28G1/2</td><td>Fisher Scientific/Excel Int.</td><td>14-841-31</td><td></td></tr><tr><td>Muis IFN-gamma ELISA Ready-SET-Go! Kit</td><td>Invitrogen / eBioscience</td><td>50-173-21</td><td></td></tr><tr><td>Muis IL-17 ELISA Ready-SET-Go! Kit</td><td>Invitrogen / eBioscience</td><td>50-173-77</td><td></td></tr><tr><td>Muis IL-5 ELISA Ready-SET-Go! Kit</td><td>Invitrogen / eBioscience</td><td>50-172-09</td><td></td></tr></tbody></table>

evaluatie van de host-pathogen reacties en werkzaamheid van het vaccin in muizen

Evaluation of Host-Pathogen Responses and Vaccine Efficacy in Mice

Vaccins zijn een 20th century medisch wonder. Ze hebben drastisch verminderd de morbiditeit en mortaliteit veroorzaakt door infectieziekten en bijgedragen tot een opvallende toename van de levensverwachting rond de hele wereld. Bepaling van de werkzaamheid van het vaccin blijft echter een uitdaging. Opkomende bewijs suggereert dat de huidige Acellulair vaccin (aPV) voor Bordetella pertussis (B. pertussis) suboptimaal immuniteit induceert. Daarom een belangrijke uitdaging is het ontwerpen van een volgende generatie vaccin dat protectieve immuniteit zonder de negatieve bijwerkingen van een geheel-cel vaccin (wPV induceert). Hier beschrijven we een protocol dat we gebruikt om te testen van de werkzaamheid van een veelbelovende, roman adjuvans immuun reacties op een beschermende Th1/Th17 fenotype scheef en promoot een betere Goedkeuringvande een uitdaging van B. pertussis uit de lymfkliertest luchtwegen. Dit artikel beschrijft het protocol voor muis immunisatie, bacteriële inoculatie weefsel oogsten en analyse van de immuunrespons. Met behulp van deze methode, binnen ons model, hebben wij met succes cruciale mechanismen ontlokte door een veelbelovende, volgende-generatie Acellulair kinkhoest vaccin toegelicht. Deze methode kan worden toegepast op elke infectieziekte model om te bepalen van de werkzaamheid van het vaccin.

Het model beschreven toont een methode om te evalueren van de efficiëntie van het vaccin en immuunresponsen tijdens gastheer-pathogeen interacties. Figuur 1 toont de planning van de representatieve vaccin gebruikt om te immunizeren en infecteren van muizen en oogsten van weefsels voor analyse. Figuur 2 toont de setup van het systeem van de verdoving werkzaam voor het opwekken van muizen, waardoor onderzoekers inentingen en bacter...

Hier presenteren we een elegante protocol voor in vivo evaluatie van vaccin effectiviteit en host immuunrespons. Dit protocol kan worden aangepast voor vaccin modellen die studeren virale, bacteriële of parasitische ziekteverwekkers.

Evaluatie van de Host-Pathogen reacties en werkzaamheid van het vaccin in muizen

Vaccines are a 20th century medical marvel. They have dramatically reduced the morbidity and mortality caused by infectious diseases and contributed to a ...

Het protocol maakt het mogelijk gastheerreacties op een verscheidenheid aan ziekteverwekkers en vaccinformuleringen te evalueren. Het belangrijkste voordeel van deze techniek is dat het mogelijk maakt de evaluatie van bacteriële last en immuunresponsen in vivo, met behulp van een kanekeurbare dier model. Het aantonen van deze procedure is Kacy Yount, een afgestudeerde student van mijn laboratorium.Voor immunisatie, bevestigen een gebrek aan reactie op teen knijpen in een verdoofde, zes-tot-twaalf weken oude muis, en laad een een milliliter insulinespuit, uitgerust met een 28,5 meter naald met een 0,1 milliliter van het vaccin van belang. Houd de spuit in een hoek van 45 graden, met de schuine kant naar boven gericht, steek de naald ongeveer vijf millimeter in de deltoid van de muis en injecteer het vaccin. Houd de naald ingebracht in de spier voor vijf tot tien seconden, draai dan de spuit 180 graden, zodat de schuine kant naar beneden wordt gericht om een afdichting te creëren, en om vaccinlekkage te voorkomen, voordat langzaam intrekken van de naald van de injectieplaats.Breng de muis vervolgens terug naar zijn kooi, met monitoring, tot volledig herstel. Ongeveer twee weken na het stimuleren, infecteren geïmmuniseerde muizen. Pak een verdoofde muis bij de scruff van de rugborax, achter de schouderbladen en nek, en plaats de muis rechtop om toegang te krijgen tot de neus.Met behulp van een 200 microliter pipetpunt, breng langzaam 20 tot 25 microliter van het bacteriële entmateriaal van belang aan elke nare van het dier, waarbij de muis in de muis blijft totdat het volledige entmateriaal is ingeademd. Lever vervolgens een gelijk volume van steriele PBS aan een groep muizen als een negatieve controle. Plaats op het juiste experimentele eindpunt een geïnfecteerde muisventilatiezijde op een dissectiebord en beveilig de ledematen.Nat het lichaam met 70%ethanol, en gebruik tangen om de huid te klemmen onder de buik in het midden van het bekken. Met behulp van een scherpe schaar, maak een verticale cut-up tot aan de onderkaak, en ontleden de huid van de buikvlieswand. Verplaats de huid naar de zijkanten van het karkas om een onbelemmerd veld te creëren voor steriele orgaanoogst en pak het intacte buikvlies onder de ribbenkast, op of nabij de lever.Snijd het buikvlies in de richting van de ribbenkast om het onderste spijsverteringskanaal bloot te stellen, en beweeg de dikke darm naar links om de milt te onthullen. Met behulp van gebogen tangen, pak de milt, en ontleden weg het bindweefsel met een schaar. Plaats de milt vervolgens in een conische buis van 15 milliliter met 3 milliliter RPMI en 5% foetaal runderserum op ijs.Gebruik tangen om de ribbenkast te stabiliseren bij het xyphoid-proces en snijd het middenrif open. De longen moeten leeglopen en naar de wervelkolom vallen. Snijd de ribbenkast aan de zijkanten open om de borstplaat te verwijderen en snijd de longslagaders en aders om de superieure kwab van de rechterlong te isoleren en te verwijderen.Bevestig de kwab in een 15 milliliter conische buis van 10% neutraal gebufferd formaline bij kamertemperatuur gedurende ten minste 24 uur, en isoleer de resterende lobben van de rechter- en linkerlongen. Plaats vervolgens lobben in een 15 milliliter conische buis, met twee milliliter van 1%caseïne in PBS op ijs. Gebruik een een milliliter pipetman met tip om het bloed te vullen de borstholte te verzamelen, en breng het bloed in een vooraf gelabelde 1,5 milliliter microcentrifuge buis op ijs.Verwijder de parotid, sublingual, en submaxillaire klieren en lymfeklieren die de luchtpijp bedekken, en open en verwijder de beschermende membranen rond de luchtpijp. Met behulp van fijne tangen en scharen, zorgvuldig scheiden van de luchtpijp van de slokdarm, en elk ander bindweefsel van de bovenkant van de sleutelbeenderen aan de onderkant van de onderkaak. Gebruik tangen om de luchtpijp vast te houden en snijd de luchtpijp boven in het sleutelbeen.Trek de luchtpijp naar beneden om de elasticiteit te maximaliseren, en snijd de luchtpijp aan de onderkant van de onderkaak, recht boven het strottenhoofd, isoleren ongeveer een centimeter weefsel. Plaats het orgaan vervolgens in een voorgelabelde 1,5 milliliter microcentrifugebuis, met 0,3 milliliter 1%caseïne in PBS op ijs. Draai nu de muis voor duidelijke toegang tot de neus, en spray het hoofd met 70% ethanol.Handgreep het dier direct achter de schedel, en gebruik een schaar om het zachte vlees van de snuit weg te snijden, beginnend vanaf de onderkant van de neus en omhoog bewegend. Verwijder de vacht, huid en snorharen van rond de neus, en steek de uiteinden van een gebogen schaar in de nares met de bochten naar beneden gericht. Snijd de neuspassage naar de ogen open en creëer een V-achtige formatie.Gebruik vervolgens fijne tangen om het neusseptum en het zachte weefsel binnen de formatie te verzamelen en plaats het weefsel in een vooraf gelabelde 1,5 milliliter microcentrifugebuis met 0,3 milliliter van 1%caseïne in PBS, op ijs. Om het longweefsel te verwerken, breng de gehele longmonster buis inhoud in een steriele 15 milliliter Dounce homogenisator, en gebruik een stamper om het weefsel te homogeniseren. Dissociate het monster totdat er geen grote deeltjes weefsel blijven, en de gehomogeniseerde suspensie terug te keren naar de oorspronkelijke 15 milliliter buis.Verwijder een 0,3 milliliter aliquot voor plating kolonie vormende eenheden, en het verzamelen van de rest van het homogenaat door centrifugatie. Aliquot 0,5 milliliter supernatant in vooraf gelabelde microcentrifugebuizen voor opslag bij 20 graden Celsius tot cytokine expressie analyse door Eliza. Verdun vervolgens in de serie 0,1 milliliter aliquots van de braakgelegde gehomogeniseerde longsuspensie in 0,9 milliliter steriele PBS per verdunning en gebruik een steriele driehoeksspreader op plaat 0,1 milliliter van elke empirisch gekozen verdunning op voorgelabelde 10%Bordet-Gengou plus streptomycineplaten.Hier worden representatieve optische dichtheid 600 metingen en berekeningen getoond om een bacteriële suspensie met één optische dichtheid te bereiken, om een honderdvoudig verdund bacterieoculum voor te bereiden dat aan muizen moet worden geleverd. Na zeven dagen van vaccin antigeen stimulatie, geïmmuniseerde miltcellen uit de combinatie vaccin groep produceren interferon gamma, en IL17, terwijl aanzienlijk naar beneden reguleren IL5, het bevorderen van een T helper, een T helper 17 polarisatie van de immuunrespons tijdens een B-pertussis infectie. Kolonievormende eenheidssommatie van bacteriën die zijn hersteld van problemen met de luchtwegen van een met B-pertussis geïnfecteerde muis, kan worden gebruikt om de beschermende effecten van het vaccin van belang te beoordelen.Werk zo snel en efficiënt mogelijk om weefselnecrose te voorkomen en bewaar het geïsoleerde weefsel op ijs om de levensvatbaarheid van de teruggewonnen bacteriën te behouden. ELISpot flow cytometrie en DNA- en RNA-isolatie kunnen worden uitgevoerd om immuuncellen te evalueren, de productie van analyten te analyseren en epigenetische en transcriptomische analyses mogelijk te maken. Bij het werken met besmettelijke stoffen zoals Bordetella kinkhoest, is het belangrijk om te onthouden om de juiste PPE te dragen, en werken in een gecertificeerde bioveiligheid kast om te voorkomen dat pathogene overdracht.Dit protocol beschrijft CFU-opsomking van de luchtwegen, met name de neuszieke keelholte. Om vragen in het vaccin en infectieziekten velden over het richten van bacteriële kolonisatie in de neus.

evaluation-of-host-pathogen-responses-and-vaccine-efficacy-in-mice

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie en Infectie

In this video, we describe a protocol to test the efficacy of an acellular pertussis vaccine against Bordetella pertussis infection in mice. Post-vaccination, the mice were subjected to infection, and their tissue homogenate was cultured to analyze the bacterial colonies as a readout of the vaccine-induced protective immunity.

Evaluation of Vaccine-Induced Immunity Against Bacterial Infection in a Mouse Model

De gastheer immuunrespons op pathogene infectie een strak gereguleerd proces. Met behulp van een lipopolysaccharide long exposure model in muizen, is het mogelijk om hoge resolutie evaluaties van de complexe mechanismen van pathogenese voeren.

Het gebruik van Oropharyngeal Intratracheaal PAMP Administratie en bronchoalveolaire lavage om de immuunrespons van de gastheer in Muizen Evalueer

Diermodellen hebben bewezen waardevolle instrumenten definiëren gastheer en pathogeen specifieke mechanismen die bijdragen aan de ontwikkeling van chronische ontsteking. Hier beschrijven we een muismodel van orale infectie met het humaan pathogeen Porphyromonas gingivalis en detail methoden om de progressie van inflammatie lokale en systemische plaatsen.

Een muismodel voor pathogenen geïnduceerde Chronische ontsteking op lokale en systemische sites

Wij beschrijven hierin de methodologie die we hanteerden om de beschermende werkzaamheid en longimmuunrespons te vergelijken die werd geïnduceerd door intranasale en subcutane immunisatie met BCG in een muismodel. Onze resultaten tonen de voordelen van longvaccinatie aan en suggereren een rol voor IL17-gemedieerde respons in vaccin-geïnduceerde bescherming.

Beschermende werkzaamheid en Pulmonale immuunrespons na subcutane en intranasale BCG Administration in Muizen

Dit protocol beschrijft het enten van C57BL / 6J muizen met de EGD stam van Listeria monocytogenes (L. monocytogenes) en interferon-γ (IFN-γ) responsen door natuurlijke killer (NK) cellen, natuurlijke killercellen (NKT) cellen te meten, en adaptieve T-lymfocyten na de infectie. Dit protocol beschrijft ook hoe om te overleven onderzoek bij muizen na infectie met een aangepaste LD 50 dosis van de ziekteverwekker.

Experimentele infectie met<em&gt; Listeria monocytogenes</em&gt; Als een model voor de studie Host Interferon-γ Responses

Influenza A virussen (IAVs) zijn belangrijke menselijke respiratoire pathogenen. Om te begrijpen van de pathogeniteit van IAVs en om de preklinische testen van nieuwe vaccin benaderingen, zijn diermodellen nabootsen menselijke fysiologie vereist. Hier beschrijven we technieken om IAV pathogenese, humorale reacties en vaccin werkzaamheid met behulp van een muismodel van infectie te evalueren.

Influenza-A Virus Studies in een muismodel van infectie

Wij presenteren hier een aanvraag voor een standaard immunologische techniek (CFSE gekleurd OT-ik proliferatie) willen snel controleren adjuvans-gemedieerde cytotoxische T lymfocyten (CTL) generatie in vivo. Deze snelle inschatting van CTL capaciteiten is nuttig voor de ontwikkeling van profylactische vaccins tegen intracellulaire pathogenen, alsmede therapeutische kanker vaccins.

Snelle In Vivo beoordeling van adjuvante van cytotoxische T-lymfocyten de mogelijkheden van de generatie voor vaccinontwikkeling

Een aanpak wordt beschreven voor real-time detectie van de ingeboren immune reactie op het verwonden van cutane en Staphylococcus aureus -infectie van muizen. Door vergelijking LysM-EGFP muizen (die bezitten fluorescerende neutrofielen) met een LysM-EGFP gekruist immunodeficiëntie muis stam, we vooraf ons begrip van de infectie en de ontwikkeling van benaderingen ter bestrijding van de infectie.

Een muismodel te beoordelen ingeboren immuunreactie op Staphylococcus aureus -infectie

Dit artikel beschrijft protocollen voor het evalueren van de Tfh- en GC B-respons in het muismodel van influenzavirusinfectie.

Evaluatie van T Folliculaire HelperCellen en Kiemcentrum Respons Tijdens Influenza A Virus Infectie bij Muizen

Hier presenteren we een effectieve en efficiënte methode voor injecties met knaagdierstaartaders met behulp van een uniek ontworpen opwarmings- / beperkingsapparaat. Door het stroomlijnen van de initiatie van vasodilatatie- en inperkingsprocessen, maakt dit protocol nauwkeurige en tijdige intraveneuze injecties van grote groepen dieren met minimale nood mogelijk.

Een eigentijds opwarmings-/inperkingsapparaat voor efficiënte staartaderinjecties in een murien schimmel sepsismodel

Het huidige protocol bereidt en evalueert de fysieke eigenschappen, immuunrespons en in vivo beschermend effect van een nieuw nano-emulsie-adjuvans vaccin.

Evaluatie van de immuunrespons van een nano-emulsie-adjuvansvaccin tegen methicilline-resistente Staphylococcus aureus (MRSA) -infectie

Leer hoe je vaccinwerkzaamheid en gastheer-pathogeenreacties evalueert in muizen met dit in vivo-protocol. Deze methode meet bacteriële belasting en immuunrespons voor vaccinontwikkeling.

Evaluatie van de Host-Pathogen reacties en werkzaamheid van het vaccin in muizen

Meer video's verkennen