Name: Een inductie systeem voor geclusterde stoma door suiker oplossing onderdompeling behandeling in Arabidopsis thaliana zaailingen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-02-15T14:30:00.000+00:00
Duration: 4 min 32 s
Description: Leer een inductiemethode voor geclusterde stoma in Arabidopsis thaliana zaailingen via suikeroplossing. Deze techniek maakt confocale observatie van chloroplasten en microtubuli in sluitcellen mogelijk voor plantontwikkelingsbiologie.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Wij zijn dankbaar aan Prof. Seiichiro Hasezawa voor zijn vriendelijke ondersteuning van ons werk. Dit werk werd gesteund door subsidies van de Society van Japan voor de promotie van wetenschap (JSPS) KAKENHgrant nummers 17K 19380 en 18 H 05492, van The Sumitomo Foundation een subsidie ontvangen voor elementaire wetenschap onderzoeksprojecten nummer 160146, en de Canon Stichting T.H. toekennen Dit experimenteel systeem werd ontwikkeld onder een financiële steun van de JSPS KAKENHgrant nummer 26891006 naar K. A. Wij danken Robbie Lewis, MSc, uit Edanz groep (www.edanzediting.com/ac) voor het bewerken van een ontwerp voor van het manuscript.

1. voorbereiding van 3% Sucrose-bevattende 1/2 Murashige-Skoog middellange-oplossing
<ol><li>1.1 g Murashige-Skoog middellange zouten en 15 g van sacharose toevoegen aan een bekerglas.</li>
	<li>Voeg 490 mL gedestilleerd water toe en meng goed met een roer-bar.</li>
	<li>Breng de pH op 5.8 met behulp van KOH.</li>
	<li>Verdun met gedestilleerd water tot 500 mL en breng de oplossing kwantitatief over in een middelgrote fles.</li>
	<li>De oplossing steriliseren in autoclaaf (121 ° C, 20 min). Indien niet onmiddellijk wordt gebruikt, kan deze oplossing na sterilisatie bij 4 ° C worden bewaard.</li>
</ol>2. de inductie van geclusterde stoma door Sucrose-bevattende middellange oplossing onderdompeling behandeling
<ol><li>Het steriliseren van de zaden.<ol>
<li>Bereid de sterilisatie-oplossing door het toevoegen van 500 µL van 5% actief chloor NaClO oplossing en 1 µL van 10% Triton X-100 tot 500 µL steriel water.</li>
		<li>Plaats ca. 50 transgene A. thaliana zaden uitvoering een fluorescerende marker zoals CT-GFP11 of GFP-TUB612 in een 1.5-mL-buis.</li>
		<li>Voeg 1 mL oplossing van 70% ethanol en meng goed door vijf keer omkeren. Verlof voor 1 min.</li>
		<li>De zaden zullen zinken naar de bodem van de buis. Op een schone bankje, zachtjes verwijderen van de 70%-ethanol met behulp van een micropipet, en voeg 1 mL van sterilisatie oplossing. Meng goed door het omkeren van de vijf keer en laat gedurende 5 min.</li>
		<li>Wassen van de zaden. Nog steeds werken onder aseptische condities op een schone bankje, zachtjes verwijderen de oplossing om met een micropipet en voeg 1 mL steriel water. Herhaal deze stap vijf keer.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Voeg 1,5 mL van gesteriliseerde 3% sucrose-bevattende 1/2 Murashige-Skoog middellange-oplossing aan elk putje van de plaat van een 24-well op een schone bankje.</li>
	<li>Voeg twee gesteriliseerde zaden in elk putje. Tape de deksel op het bord van de 24-well met behulp van twee lagen van parafilm.</li>
	<li>De 24-well plaat overbrengen in een groei kamer set bij 23.5 ° C met een 12-h/12-h licht-donker cyclus met gebruikmaking van 100 µmol m−2 s−1 wit licht en incubeer gedurende 14 dagen.</li>
</ol>3. de microscopische observatie van geclusterde stoma
<ol><li>Plaats 30 µL van 3% sucrose-bevattende 1/2 Murashige-Skoog middellange-oplossing van een putje van de plaat 24-well in het midden van een glasplaatje (grootte: 76 × 26 mm, dikte: 1.0-1.2 mm).</li>
	<li>Verwijder een zaadlob uit een zaailing van de 14-dagen oude met behulp van ontleden schaar. De zaadlob drijven met de waarneming zijde naar boven op de daling van de oplossing.</li>
	<li>Bereiden de zaadlob specimen volgens onze vorige methode13. In wezen, het plaatsen van 30 µL van de oplossing in het midden van een glas cover (grootte: 18 × 18 mm, dikte: 0.12-0.17 mm). De glazen deksel ondersteboven en plaats deze op de zaadlob zachtjes. Veeg overtollige buffer met behulp van een pluisvrije weefsel.</li>
	<li>Stel een specimen op het podium van een Microscoop confocale laser en selecteer van geclusterde guard cellen voor observatie met behulp van lichte veld verlichting.</li>
	<li>Confocale beelden van fluorescently geëtiketteerde intracellulaire structuren volgens de instructies van de fabrikant van de Microscoop te verwerven.</li>
</ol>

<ol><li>Raschke, K., Fellows, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stomatal+movement+in+Zea+mays%3A+shuttle+of+potassium+and+chloride+between+guard+cells+and+subsidiary+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Planta%22%5BJournal%5D)">Stomatal movement in Zea mays: shuttle of potassium and chloride between guard cells and subsidiary cells.</a> Planta. 101 (4), 296-316 (1971).</li>
<li>Higaki, T., Hashimoto-Sugimoto, M., Akita, K., Iba, K., Hasezawa, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamics+and+environmental+responses+of+PATROL1+in+Arabidopsis+subsidiary+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+and+Cell+Physiology%22%5BJournal%5D)">Dynamics and environmental responses of PATROL1 in Arabidopsis subsidiary cells.</a> Plant and Cell Physiology. 55 (4), 773-780 (2013).</li>
<li>Bergmann, D. C., Sack, F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stomatal+development%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Plant+Biology%22%5BJournal%5D)">Stomatal development.</a> Annual Review of Plant Biology. 58, 163-181 (2007).</li>
<li>Pillitteri, L. J., Torii, K. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+stomatal+development%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Plant+Biology%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of stomatal development.</a> Annual Review of Plant Biology. 63, 591-614 (2012).</li>
<li>Sakai, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+chemical+compound+bubblin+induces+stomatal+mispatterning+in+Arabidopsis+by+disrupting+the+intrinsic+polarity+of+stomatal+lineage+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">The chemical compound bubblin induces stomatal mispatterning in Arabidopsis by disrupting the intrinsic polarity of stomatal lineage cells.</a> Development. 144 (3), 499-506 (2017).</li>
<li>Akita, K., Hasezawa, S., Higaki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Breaking+of+plant+stomatal+one-cell-spacing+rule+by+sugar+solution+immersion%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+One%22%5BJournal%5D)">Breaking of plant stomatal one-cell-spacing rule by sugar solution immersion.</a> PLOS One. 8 (9), 72456(2013).</li>
<li>Chen, X. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Arabidopsis+callose+synthase+gene+GSL8+is+required+for+cytokinesis+and+cell+patterning%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Physiology%22%5BJournal%5D)">The Arabidopsis callose synthase gene GSL8 is required for cytokinesis and cell patterning.</a> Plant Physiology. 150 (1), 105-113 (2009).</li>
<li>Guseman, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dysregulation+of+cell-to-cell+connectivity+and+stomatal+patterning+by+loss-of-function+mutation+in+Arabidopsis+chorus+%28glucan+synthase-like+8%29%5BTitle%5D)+AND+%22Development%22%5BJournal%5D)">Dysregulation of cell-to-cell connectivity and stomatal patterning by loss-of-function mutation in Arabidopsis chorus (glucan synthase-like 8).</a> Development. 137 (10), 1731-1741 (2010).</li>
<li>Akita, K., Hasezawa, S., Higaki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cortical+microtubules+and+fusicoccin+response+in+clustered+stomatal+guard+cells+induced+by+sucrose+solution+immersion%5BTitle%5D)+AND+%22Plant+Signaling+and+Behavior%22%5BJournal%5D)">Cortical microtubules and fusicoccin response in clustered stomatal guard cells induced by sucrose solution immersion.</a> Plant Signaling and Behavior. 13 (4), 1454815(2018).</li>
<li>Akita, K., Hasezawa, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sugar+solution+induces+clustered+lips%5BTitle%5D)+AND+%22Cytologia%22%5BJournal%5D)">Sugar solution induces clustered lips.</a> Cytologia. 79 (2), 125-126 (2014).</li>
<li>Holzinger, A., Buchner, O., Lütz, C., Hanson, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temperature-sensitive+formation+of+chloroplast+protrusions+and+stromules+in+mesophyll+cells+of+Arabidopsis+thaliana%5BTitle%5D)+AND+%22Protoplasma%22%5BJournal%5D)">Temperature-sensitive formation of chloroplast protrusions and stromules in mesophyll cells of Arabidopsis thaliana.</a> Protoplasma. 230 (1-2), 23-30 (2007).</li>
<li>Abe, T., Hashimoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Altered+microtubule+dynamics+by+expression+of+modified+%CE%B1-tubulin+protein+causes+right-handed+helical+growth+in+transgenic+Arabidopsis+plants%5BTitle%5D)+AND+%22The+Plant+Journal%22%5BJournal%5D)">Altered microtubule dynamics by expression of modified α-tubulin protein causes right-handed helical growth in transgenic Arabidopsis plants.</a> The Plant Journal. 43 (2), 191-204 (2005).</li>
<li>Higaki, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+imaging+of+plant+cell+surface+dynamics+with+variable-angle+epifluorescence+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Real-time imaging of plant cell surface dynamics with variable-angle epifluorescence microscopy.</a> Journal of Visualized Experiments. (106), 53437(2015).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Protocollen voor inductie van geclusterde stoma hebben in A. thaliana zaailingen wij gepresenteerd door onderdompeling worden behandeld als een sacharose-bevattende middellange oplossing. Zoals u hier ziet, deze methode is zeer eenvoudig en vereist geen speciale vaardigheid maar efficiënt geclusterde stoma kan veroorzaken. Meer dan 45 gewichtspercenten guard cellen zijn geclusterd met 3% sucrose-bevattende middellange oplossing (gemiddelde waarden van meer dan 20 onafhankelijke waarnemingen)6</...

De plant stoma is een essentieel orgaan voor gasuitwisseling voor fotosynthese en transpiratie en stomatal verkeer wordt bereikt door ingrijpende veranderingen in de guard cellen tot ion-gedreven opname- en release van water. Onder een Microscoop, kunnen we zien een patroon van de verdeelde distributie van stoma op de oppervlakken van bladeren en stengels. Deze verdeelde verdeling van stoma wordt beschouwd als om te helpen stomatal beweging, die wordt geregeld door ion en water uitwisseling tussen guard cellen en naburige epidermale cellen1,2. Experimentele inductie systemen voor geclusterde stoma zijn nuttig voor het onderzoek naar het belang van de verdeelde verdeling van stoma.
Er werd gemeld dat de ruimtelijke clustering van stoma kan worden opgewekt door genetische modificatie van essentiële genen voor guard cel differentiatie3,4 of behandeling met een chemisch samengestelde5. We ook gemeld dat onderdompeling behandeling met een middellange oplossing aangevuld met inbegrip van sacharose, glucose, suikers en fructose veroorzaakt stomatal clusters in de zaadlobben van Arabidopsis thaliana zaailingen6. Verminderde callose in nieuwe celwanden scheiden meristemoids en epidermale cellen in de epidermis van sacharose-behandelde zaadlob, suggereren dat sacharose oplossing onderdompeling behandeling negatief beïnvloedt de celwand, waardoor de lekkage werd waargenomen en ectopische actie van belangrijke genproducten voor guard celdifferentiatie (bijvoorbeeld transcriptiefactoren) naar aangrenzende epidermale cellen6. Een soortgelijk mechanisme werd voorgesteld van studies over gsl8/chor mutanten7,8. Onze experimenteel systeem voor reproduceerbare inductie van geclusterde stoma met behulp van sacharose-bevattende middellange oplossing is vrij eenvoudig en goedkoop. Het kan ook worden gebruikt om te onderzoeken van intracellulaire structuren zoals organellen en het cytoskelet in de geclusterde guard cellen wanneer toegepast op transgene lijnen uiten fluorescente markeringen dat etiket intracellulaire structuren9, 10.

<table><tbody><tr><td>24-well plate</td><td>Sumitomo Bakelite</td><td>MS-0824R</td><td></td></tr><tr><td>488 nm laser</td><td>Furukawa Denko</td><td>HPU-50101-PFS2</td><td></td></tr><tr><td>488 nm laser</td><td>Olympus</td><td>Sapphire488-20/O</td><td></td></tr><tr><td>510 nm long-pass filter</td><td>Olympus</td><td>BA510IF</td><td></td></tr><tr><td>524 - 546 nm band-pass filter</td><td>Semrock</td><td>FF01-535/22-25</td><td></td></tr><tr><td>530 nm short-pass filter</td><td>Olympus</td><td>BA530RIF</td><td></td></tr><tr><td>561 nm laser</td><td>CVI Melles Griot</td><td>85-YCA-025-040</td><td></td></tr><tr><td>604 - 644 nm band-pass filter</td><td>Semrock</td><td>FF01-624/40-25</td><td></td></tr><tr><td>Confocal laser scanning head</td><td>Yokogawa</td><td>CSU10</td><td></td></tr><tr><td>Confocal laser scanning head</td><td>Olympus</td><td>FV300</td><td></td></tr><tr><td>Cooled CCD camera</td><td>Photometrics</td><td>CoolSNAP HQ2</td><td></td></tr><tr><td>Image acquisition software</td><td>Molecular Devices</td><td>MetaMorph version 7.8.2.0</td><td></td></tr><tr><td>Image acquisition software</td><td>Olympus</td><td>FLUOVIEW v5.0</td><td></td></tr><tr><td>Immersion oil</td><td>Olympus</td><td>Immersion Oil Type-F</td><td>ne = 1.518 (23 graden)</td></tr><tr><td>Inverted microscope</td><td>Olympus</td><td>IX-70</td><td></td></tr><tr><td>Inverted microscope</td><td>Olympus</td><td>IX-71</td><td></td></tr><tr><td>Murashige and Skoog Plant Salt Mixture</td><td>FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation</td><td>392-00591</td><td>Murashige T and Skoog F (1962) A revised medium for rapid growth and bio assays with tobacco tissue cultures. Physiologia Plantarum 15(3), 473-497.</td></tr><tr><td>Objective lens&nbsp;</td><td>Olympus</td><td>UPlanApo 100x / 1.35 NA Oil Iris 1.35</td><td>NA = 1.35</td></tr><tr><td>Objective lens&nbsp;</td><td>Olympus</td><td>UPlanAPO 40x / 0.85 NA</td><td>NA = 0.85</td></tr><tr><td>Sucrose</td><td>FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation</td><td>196-00015</td><td></td></tr></tbody></table>

een inductie systeem voor geclusterde stoma door suiker oplossing onderdompeling behandeling in arabidopsis thaliana zaailingen

An Induction System for Clustered Stomata by Sugar Solution Immersion Treatment in Arabidopsis thaliana Seedlings

Stomatal verkeer bemiddelt de gasuitwisseling plant, die essentieel is voor de fotosynthese en transpiratie. Stomatal te openen en te sluiten zijn bereikt door een aanzienlijke toename en afname guard cel volume, respectievelijk. Omdat shuttle vervoer van ionen en water tussen guard cellen en grotere naburige epidermale cellen tijdens stomatal beweging plaatsvindt, hebben de verdeelde verdeling van plant stoma wordt beschouwd als een optimale verdeling voor stomatal verkeer. Experimentele systemen voor storing veroorzaakt het verdeelde patroon van stoma zijn handig voor het onderzoeken van de spatiëring patroon van betekenis. Verschillende belangrijke genen die samenhangt met de verdeelde stomatal verdeling zijn geïdentificeerd en geclusterde stoma experimenteel kunnen worden opgewekt door een wijziging van deze genen. Als alternatief, geclusterde stoma kunnen ook worden veroorzaakt door exogene behandelingen zonder genetische modificatie. In dit artikel beschrijven we een eenvoudige induktie systeem voor geclusterde stoma in Arabidopsis thaliana zaailingen door onderdompeling worden behandeld als een sacharose-bevattende middellange oplossing. Onze methode is makkelijk en is rechtstreeks toepasselijk in transgene of mutant lijnen. Grotere chloroplasten worden gepresenteerd als een cel biologische keurmerk van sacharose-geïnduceerde geclusterde guard cellen. Bovendien, wordt een vertegenwoordiger van de confocal microscopische opname van corticale microtubuli weergegeven als een voorbeeld van intracellulaire observatie van geclusterde guard cellen. De radiale richting van corticale microtubuli is in geclusterde guard cellen zoals in verdeelde guard cellen in controlevoorwaarden gehandhaafd.

Hier, heeft het protocol voor een eenvoudige methode van inducerende stomatal clustering met sacharose-bevattende middellange oplossing in A. thaliana zaailingen voorgelegd. De geclusterde guard cellen gekweekt in sacharose-bevattende middellange oplossing (Figuur 1B) hebben grotere chloroplasten dan guard cellen gekweekt in sacharose-vrije controlevoorwaarden(Figuur 1). De uitbreiding v...

Het doel van dit protocol is om aan te tonen hoe voor het opwekken van geclusterde stoma in zaadlobben van Arabidopsis thaliana zaailingen door onderdompeling behandeling met een suiker-bevattende middellange oplossing en hoe waarnemen van intracellulaire structuren zoals chloroplasten en microtubuli in de geclusterde guard cellen met behulp van confocale laser microscopie.

Een inductie systeem voor geclusterde stoma door suiker oplossing onderdompeling behandeling in Arabidopsis thaliana zaailingen

Stomatal movement mediates plant gas exchange, which is essential for photosynthesis and transpiration. Stomatal opening and closing are accomplished by a ...

Deze methode heeft een belangrijke vraag beantwoord van de plantenontwikkelingsbiologie. Dat wil zeggen, wat is het belang van ruimtelijke verdeling van stomata? Ons inductiesysteem voor geclusterde stomata met behulp van sacharoseoplossing is vrij eenvoudig en direct toepasbaar op transgene of gemuteerde lijnen van Arabidopsis thaliana.Voeg om te beginnen 1,1 gram Murashige-Skoog medium zouten en 15 gram sacharose toe aan een beker. Voeg 490 milliliter gedestilleerd water toe aan het bekerglas en meng met de roerstaaf. Gebruik kaliumhydroxide om de pH aan te passen aan 5,8.Verdun vervolgens de oplossing met 500 milliliter gedestilleerd water en breng de verdunde oplossing over op een middelgrote fles. Daarna, autoclave de oplossing. Bereid de sterilisatieoplossing voor volgens het tekstprotocol.Dan, werken onder aseptische omstandigheden, plaats ongeveer 50 transgene A.thaliana zaden die een fluorescerende marker in een 1,5 milliliter buis. Voeg vervolgens een milliliter van 70% ethanol toe aan de buis en meng door de buis vijf keer om te keren. Nadat de zaden naar de bodem van de buis zijn gezonken, verwijdert u de ethanol voorzichtig met een micropipet.Voeg een milliliter sterilisatieoplossing toe aan de zaden en omker de buis vijf keer om te mengen. Verwijder voorzichtig de sterilisatieoplossing uit de zaden met een micropipet. Voeg vervolgens een milliliter steriel water toe.Voeg 1,5 milliliter van de Murashige-Skoog oplossing toe aan elke put van een 24 putplaat. Voeg vervolgens twee gesteriliseerde zaden aan elke put. Met behulp van twee lagen parafilm, tape het deksel op de plaat.Breng de plaat vervolgens over naar een groeikamer om 14 dagen te broeden. Breng eerst 30 microliters van Murashige-Skoog-oplossing over van de 24 putplaat naar het midden van een glazen glijbaan. Verwijder met behulp van een schaar de cotyledon uit een 14 dagen oude zaailing.Zweef de cotyledon met de observatie kant naar boven op de daling van Murashige-Skoog oplossing. Bereid de cotyledon volgens de methoden die eerder beschreven in het Journal of Visualized Experiments. Zet het exemplaar op het podium van een confocale lasermicroscoop.Gebruik ten slotte heldere veldverlichting om geclusterde beschermcellen te selecteren voor observatie. In dit protocol werd stomatale clustering geïnduceerd in A.thaliana zaailingen. De geclusterde beschermcellen gekweekt in de sacharose met een medium met grotere chloroplasten dan beschermcellen gekweekt in sacharose-vrije omstandigheden.De vergroting van de chloroplasten werd bevestigd met een chloroplast stroma marker en chlorofyl autofluorescenten, wat suggereert dat sacharosebehandeling resulteerde in ophoping van zetmeelkorrels in de chloroplasten. Bovendien, confocale observatie van GFP tub-6 bleek dat de corticale microtubuli waren radiaal georiënteerd in de sacharose behandelde cellen, net als in de sacharose-vrije wachtcellen. Eigenlijk ontdekten we deze methode per ongeluk.Na de bevinding hebben we de milieurespons van geclusterde stomata onderzocht. Wij geloven dat ons systeem kan helpen om de betekenis van de stomata distributie te onderzoeken.

an-induction-system-for-clustered-stomata-sugar-solution-immersion

Research

JoVE Journal

Environment

Milieu

We presenteren de procedure om een zaadhuid beddengoed assay (SCBA) monteren van Arabidopsis thaliana zaden. De MKBA bleek een krachtig instrument genetisch en in vitro onderzoeken worden hoe het endosperm controles zaadkieming slapende zaden en in reactie op licht signalen. De MKBA is in beginsel van toepassing onder elke situatie waar het endosperm wordt vermoed dat de embryonale groei beïnvloeden.

Een zaadhuid Bedding Assay om Genetisch Explore<em&gt; In Vitro</em&gt; Hoe de Endosperm Controls zaadontkieming in<em&gt; Arabidopsis thaliana</em

Ca2 + signalering reguleert diverse biologische processen in planten. Hier presenteren we benaderingen voor het toezicht op abiotische stress geïnduceerde ruimtelijke en temporele Ca2 + signalen in Arabidopsis cellen en weefsels met behulp van de genetisch gecodeerde Ca 2 +-indicatoren Aequorin of Case12.

Meten Ruimtelijke en temporele Ca 2 + Signalen in Arabidopsis Planten

Het Lateral Root Inducible System (LRIS) maakt gelijktijdige inductie van laterale wortels mogelijk en wordt gepresenteerd voor Arabidopsis thaliana en maïs.

Laterale Root Induceerbare System in<em&gt; Arabidopsis</em&gt; En maïs

Dit artikel beschrijft de methoden voor het screenen van de genen die plasmodesmal doorlaatbaarheid en dus auxine verloop tijdens trope respons. Dit omvat het meten van de mate van respons in tropische hypocotyl   van Arabidopsis thaliana en controleren plasmodesmal permeabiliteit door 8-hydroxypyreen-1,3,6-trisulfonzuur (HPTS) laad- en tenslotte callose niveau assessment.

Een strategie om de rol van callose gemedieerde Plasmodesmal Poortsignalen in de Tropic Response valideren

Dit protocol beschrijft een methode voor de waarneming van de embryogenese Arabidopsis via zaadknop goedkeuring, gevolgd door de inspectie van embryo patroonformatie onder een microscoop.

Een methode voor het karakteriseren van de embryogenese Arabidopsis

Een zachte touch-Force laad machine is opgebouwd uit menselijke haar borstels, robotarmen en een controller. De haar borstels worden aangedreven door robotarmen die op de machine zijn geïnstalleerd en bewegen periodiek om touch-Force op planten toe te passen. De sterkte van machinaal aangedreven haar aanrakingen is vergelijkbaar met die van handmatig aangebrachte aanrakingen.

Een arbeidsbesparende en herhaalbare Touch-Force signalering Mutant screen protocol voor de studie van Thigmomorphogenesis van een model plant Arabidopsis thaliana

Hier beschrijven we de generatie en toepassing van een geheel van transgene Arabidopsis thaliana lijnen inschakelen afleidbare, weefsel-specifieke expressie in de drie belangrijkste meristems, het schieten apicale meristeem, de wortel apicale meristeem en het cambium.

Afleidbare, cel Type-specifieke uiting in Arabidopsis thaliana via LhGR-gemedieerde Trans-activering

Wij bieden een methode voor het identificeren van modulatoren van bladtranspiratie door grootschalige screening van een samengestelde bibliotheek.

Identificatie van nieuwe regulatoren van plantaardige transpiratie door grootschalige thermische beeldvorming screening in Helianthus Annuus

Het atoomkrachtmicroscopie-inkepingsprotocol biedt de mogelijkheid om de rol van de fysische eigenschappen van de celwand van een bepaalde cel van een weefsel of orgaan te ontleden tijdens normale of beperkte groei (d.w.z. onder watertekort).

Atomic Force Microscopie om de fysieke eigenschappen van epidermale cellen van levende Arabidopsis-wortels te bestuderen

Dit artikel beschrijft twee fenotyperingsmethoden zonder het gebruik van epidermale peelings om de genen te karakteriseren die de stomatale ontwikkeling regelen. De eerste methode demonstreert hoe een stomataal fenotype kan worden geanalyseerd met behulp van een toluidineblauwe O-gekleurde plantenepidermis. De tweede methode beschrijft hoe stomatale liganden te identificeren en hun biologische activiteiten te volgen.

Identificatie van de genen die betrokken zijn bij de ontwikkeling van stomato via epidermale fenotypescores

Hier presenteren we een eenvoudige methode voor directe observatie en geautomatiseerde meting van stomatale reacties op bacteriële invasie in Arabidopsis thaliana. Deze methode maakt gebruik van een draagbaar stomatale beeldvormingsapparaat, samen met een beeldanalysepijplijn die is ontworpen voor bladbeelden die door het apparaat zijn vastgelegd.

Directe observatie en geautomatiseerde meting van stomatale responsen op Pseudomonas syringae pv. tomaat DC3000 in Arabidopsis thaliana

Leer een inductiemethode voor geclusterde stoma in Arabidopsis thaliana zaailingen via suikeroplossing. Deze techniek maakt confocale observatie van chloroplasten en microtubuli in sluitcellen mogelijk voor plantontwikkelingsbiologie.

Een inductie systeem voor geclusterde stoma door suiker oplossing onderdompeling behandeling in Arabidopsis thaliana zaailingen

Meer video's verkennen