March 18th, 2019
We beschrijven een gedrags protocol ontworpen om te beoordelen hoe de zebravis persoonlijkheden beïnvloeden hun reactie op het water stromen en zwakke magnetische velden. Vissen met de zelfde persoonlijkheden worden gescheiden op basis van hun exploratief gedrag. Vervolgens wordt hun gedrag rheotactic oriëntatie in een tunnel zwemmen met een lage stroomsnelheid en onder verschillende magnetische voorwaarden waargenomen.
Dit protocol maakt verkenning mogelijk over hoe de interne toestand of persoonlijkheid van een zebravis de oriëntatierespons beïnvloedt op signalen uit de omgeving, zoals waterstromen of magnetische velden. Deze techniek wordt gebruikt om te observeren hoe zowel interne factoren als omgevingssignalen van invloed zijn op de oriëntatie van de zebravissen. Het kan echter ook worden toegepast op een breed scala aan experimentele ontwerpen.
Deze methode kan inzicht geven in gedragsecologie van sensorbiologieonderzoek. En is soort flexibel, dus het is geschikt voor elk waterdier dat actief zwemt. Wij adviseren dat u bij het uitvoeren van de experimenten vertrouwd raakt met het gedrag van het dier dat u wilt gebruiken en hoe u dierenstress minimaliseren.
Voor persoonlijkheidsselectie in zebravissen verzamelen individuele vissen met behulp van een 250 milliliter bekerglas in een net om ze te verplaatsen naar een transfer tank en de overdracht van de vis aan de donkere kant van de persoonlijkheid selectie tank. Na een uur acclimatiseren open de schuifdeur en laat de personen die u uit het gat verlaat de zonnige kant van de tank gedurende 10 minuten verkennen. Aan het einde van de exploratieperiode, voorzichtig verzamelen van de vis in twee gescheiden containers, het verzamelen van de proactieve vis van de zonnige kant en na extra vijf minuten de reactieve vis uit de donkere doos.
Als u een magnetisch veld wilt instellen met een dimensionale magneetveldmanipulatie, houdt u de tunnel open en schakelt u de power unit en magnetometer in. Plaats een magnetische sonde aangesloten op een gas Tesla meter in de tunnel en controleer de spanning die nodig is om de gekozen magnetische veld waarde te verkrijgen langs de belangrijkste as van de tunnel. Koppel vervolgens de sonde los en sluit de stroomtunnel aan op het zwemapparaat.
Om een magnetisch veld met driedimensionale magnetische veld manipulatie, zet de computer, digitaal naar analoge converter in coil drivers en stel het gekozen magnetisch veld op de x, y, z assen. Plaats vervolgens de tunnel in het midden van de Helmholtz paren set. Wanneer het magnetisch veld dat keuze is ingesteld, selecteert u een tot vijf vissen voor de reotactische test.
Breng de vis in de tunnel, stel de stroomsnelheid in de tunnel op 4,5 liter per minuut en zet de pomp aan. Zorg ervoor dat u de uitlaatklep te sluiten voordat het gevoel van de tunnel met water en breng de vis en open het voor het instellen van de vloer rechts. Nadat de dieren daar een uur in de zwemtunnel zijn geacclimateerd, begin dan met het registreren van het gedrag van de vissen in de tunnel en begin met het verhogen van de stroomsnelheid volgens het gekozen experimentele protocol.
De zelfde zwemmende tunnel met de verwijderde rol, kan in het centrum van de reeks helmholtzparen worden geplaatst. Aan het einde van het rheotaxi-experiment maak je foto's van individuele vissen in een amorfe metrische kamer en open je de foto's in beeld J.Let op het geslacht van het dier. Mannelijke zebravissen zijn slank en hebben de neiging om geelachtig, terwijl vrouwtjes zijn meer afgerond en hebben de neiging om blauw en wit kleurstoffen hebben.
Klik vervolgens op analyseren en stel schaal in. Als u de schaal van de afbeelding in centimeters wilt instellen, trekt u met behulp van de cameraschaal als referentie en met het geselecteerde gesegmenteerde lijngereedschap een lijn van de snuitpunt naar de vertroetelde pentakel om de standaardlengte of de staartpunt voor de totale lengte te meten. Klik vervolgens op Analyseren en meten en registreren van de lineaire lengte van het dier in centimeters.
Als u de zebravisactiviteit in de tunnel wilt volgen, opent u het juiste videoanalyse- en modelleringssoftwareprogramma. Klik op Bestand, Importeren en video en open een van de video's en klik op het coördinatensysteem om de lengte-eenheden in te stellen op centimeters en de tijdeenheden, op seconden. Klik op coördinatenassen en stel het referentiesysteem in om de positie van de vis na verloop van tijd met de x-as langs de tunnel te volgen, waarbij de oorsprong wordt geplaatst in de lage hoek van de muur bij de wateruitlaat.
Klik op nieuw bijhouden in kalibratie om de schaal in te stellen en nieuw in punt tot massa bij te houden, om te beginnen met het bijhouden van één vis tegelijk. Geavanceerde de video handmatig op een halve seconde, vijf frame intervallen en markeer de tijd en positie van het dier op elke upstream downstream beurt en bij elke downstream stroomopwaartse beurt. Selecteer aan het einde van elke trackingsessie de X- en tijdwaarden uit de tabel.
Klik met de rechtermuisknop op de gegevens en klik op het kopiëren van gegevens in volledige precisie. Sla vervolgens de tijdwaarden en x-waarden op van alle draaiende posities in een spreadsheetbestand. Het berekenen van de totale upstream- en downstreamtijd, evenals de waarden van de rheotactische index en percentages voor elke volledige stap.
In dit representatieve experiment, na een uur acclimatisatie periode in de tunnel zoals aangetoond, een show op een moment werd video opgenomen tijdens het zwemmen in de tunnel in het water stroom werd versneld met een stapsgewijze toename van de stroomsnelheid voor zeven stappen. Tijdens deze proeven werd het magnetisch veld in één dimensie aangestuurd. Tijdens de bijgehouden tijd werden de termen van elke vis bij elke stroomsnelheid gemarkeerd en gebruikt als referentiepunten voor de berekening van de rheotactische index van elke vis op volle snelheid.
Wanneer de rheotactische index hoger is dan 50% en aangeeft dat het dier een positieve rheotactische respons had die overeenkomt met een prevalentie van stroomopwaarts zwemmen, duidt een rheotactische index die niet significant verschilt van 50%, op een afwezigheid van een reotactische respons. Arc teken transformatie van de gemiddelde rheotactische index procent waarden van alle vijf vissen in dit experiment aangetoond een sigmoïdale toename van de rheotactische index waarde wanneer de watersnelheid toeneemt, waardoor kwantificering van de zebravis rheotaxis met behulp van een eenvoudige wiskundige methode. Uit deze krommen blijkt dat onder magnetische velden van verschillende richtingen de rheotactische responsieve van proactieve vissen niet wordt beïnvloed en de respons van de twee experimentele groepen wordt vertegenwoordigd door dezelfde curve.
Aan de andere kant veranderen reactieve vissen de rheotactische oriëntatie afhankelijk van het magnetisch veld en wordt de respons vertegenwoordigd door aanzienlijk verschillende krommen. Vergeet niet dat dit een gedrags-experiment en de vis gedrag kan worden beïnvloed door stress. Het hanteren en overbrengen van vis kan lastig zijn.
Dus, train jezelf voor de experimenten. Deze rheotactische magnetische techniek heeft ons in staat gesteld om de effecten van persoonlijkheid op de magnetale gevoeligheid bij zebravissen en de andere aquatische gewervelde dieren en ongewervelde dieren verder te onderzoeken.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Dit protocol onderzoekt hoe de interne toestand of persoonlijkheid van zebravissen hun oriëntatierespons op omgevingssignalen zoals waterstromingen en magnetische velden beïnvloedt. Door zebravissen met verschillende exploratief gedrag te observeren, kunnen onderzoekers inzichten verkrijgen in gedragsecologie en sensorische biologie.