Name: Evaluatie van coronaire stroom reserve na myocardiale ischemie reperfusie bij ratten (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-06-28T13:20:00.000+00:00
Duration: 6 min 32 s
Description: Leer de evaluatie van coronaire stroomreserve bij ratten na myocardiale ischemie-reperfusie met behulp van transthoracale Doppler-echocardiografie. Deze methode biedt een waardevol instrument voor het diagnosticeren van microvasculaire dysfunctie.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

We willen de Helmsley Foundation bedanken voor het leveren van ultrasone apparatuur om onze experimenten uit te voeren. Dit werk werd gesteund door NIA R01 053585 Grant.

Alle procedures werden uitgevoerd in overeenstemming met de protocollen goedgekeurd door de Universiteit van Louisville institutioneel Dierenzorg-en gebruiks Comité (IACUC-goedgekeurd protocol 18223) en de NIH-gids voor de verzorging en het gebruik van proefdieren11.
1. dieren
<ol><li>Gebruik 4 maanden oude vrouwelijke Fisher 344 ratten (BW ~ 150-180 g) voor de studie.</li>
</ol>2. ultrasone beeldvorming vóór IR-chirurgie
<ol><li>Anesthetiseer de rat met Isofluraan-inductie kamer bij 5% met 1,5 – 2,0 l/min O2 stroom, gevolgd door 1,5 – 2,0% met 1,5 – 2,0 L/min O2 -stroom. Deze anesthesie wordt gehandhaafd gedurende het experiment, tijdens de rust en stress stadia.</li>
	<li>Plaats het dier in rugligging en Scheer de thorax. Handhaaf de lichaamstemperatuur bij 37-38 °C met behulp van het ingebouwde verwarmende platform. Bewaak de hartslag met behulp van de software. Opmerking: juiste anesthesie is cruciaal voor het handhaven van de hartslag tegen normale fysiologische tarieven (tussen 295-350 beats/min).</li>
	<li>Breng oftalmische dierenarts zalf om de droogheid van de ogen voorafgaand aan de beeldvorming te voorkomen.</li>
	<li>Voer een echocardiografie uit met een lineaire sonde van 13 – 24 MHz (bijv. MS250) (Figuur 1a).</li>
	<li>Plaats het dier in de liggende positie op het verwarmde platform. Zorg ervoor dat de anesthesie wordt bestuurd via de neuskegel. Plaats vervolgens de sonde om de parasternal Short Axis View (PSAX) te verkrijgen met behulp van het railsysteem (Figuur 1b).</li>
	<li>Als u de sonde in de rostrale migratoire richting van de PSAX beweegt, lokaliseert u de longslagader (Figuur 1b).</li>
	<li>Beweeg de sonde lichtjes in de richting caudal van de longslagader om de jongen te bekijken en de afbeelding op te slaan. Opmerking: de LAD is moeilijk te vinden zonder kleur Doppler, dus B-mode beelden van de LAD zijn niet altijd mogelijk.</li>
	<li>Wanneer individuele verschillen het moeilijk maken om de LAD coronaire slagader te lokaliseren, volg dan de onderstaande techniek:<ol>
<li>Beweeg de sonde laterale naar de longslagader.</li>
		<li>Hoek van het platform, zodat het dier is geneigd, omgekeerd, of iets naar de rechterkant, zodat de linker ventrikel is gemakkelijker zichtbaar met de sonde.</li>
	</ol></li>
	<li>Zodra het beeld in B-modus is vastgelegd of Cine-opgeslagen, klikt u op de kleur Doppler op het aanraakscherm (afbeelding 1c). Visualiseer de coronaire slagader (witte pijl geeft LAD aan) in de korte as (figuur 1c). De rode kleur, zoals te zien in real time, is indicatief voor de richting van de stroming (d.w.z., de bloedstroom is naar de sonde).</li>
	<li>Na het visualiseren van LAD op een Color-Doppler-modus, verander de modus in de pulse wave (PW)-modus. Zoek naar de aanwezigheid van een gele-indicator lijn op de coronaire slagader (Figuur 2a).</li>
	<li>Plaats de gele PW-lijn in het midden van de coronaire slagader. Zorg ervoor dat de hoek evenwijdig is aan de richting van de stroming. Opmerking: snelheid van de stroom is sterk afhankelijk van de hoek van de PW-lijn, dus zorg ervoor dat u de hoek van de on-screen sonde met de hoek van de jongen. Gebruik het aanraakscherm om de hoek aan te passen; De PW-hoek moet kleiner zijn dan 60 °.</li>
	<li>Gebruik Cine Store om de snelheid van de rust Lad coronaire stroming op de piek diastole als golfvormen (Figuur 2b) vast te leggen.</li>
	<li>Na het verkrijgen van rust LAD stroomsnelheid, meet de maximale stromingssnelheid van LAD tijdens de stress te berekenen CFR. Om de maximale stromingssnelheid tijdens de stress te meten, dobutamine bezielen in een dosis van 20 μg/kg/min via de staart ader8 (figuur 2c). Opmerking: dobutamine infusie mag niet meer dan 8 min. gebruik een infusiepomp en stel de diameter van de infusiepomp in op 14,43 voor BD 10 mL spuit.<ol>
<li>Gebruik 25-G infusievlinder set voor de cannulatie van de staart ader. Om de infusie naald te plaatsen, plaats een kleine strook gaas rond de onderkant van de staart van de rat, pak dan met hemostatica en draai de tourniquet om druk toe te passen en de ader te vergroten.</li>
		<li>Plaats de naald in de directe verbinding met de dobutamine spuit. Opmerking: Neem extra zorg niet per ongeluk introduceren drug bij het opstellen van bloed om de juiste plaatsing van de naald in de staart ader. Zorg er ook voor dat u geen luchtbel in de ader invoert, omdat een embolie dodelijk kan zijn voor het dier.</li>
		<li>Zodra de naald is geplaatst, stabiliseren met een lijm en een stuk van de chirurgische tape, het veiligstellen van de infusielijn aan de staart.</li>
		<li>Verwijder de hemostats en tourniquet om de stroom te herstellen.</li>
		<li>Plaats de dobutamine spuit in de infusiepomp en stel deze in om 20 μg/kg/min te injecteren.</li>
		<li>Tijdens de infusie met dobutamine, zorgvuldig controleren de LAD piek en hartslag. Neem periodiek LAD PW-pieken op in de Doppler-modus, vooral wanneer deze toeneemt als reactie op dobutamine. Opmerking: de stress Challenge geïnduceerd door dobutamine zorgt ervoor dat het hart harder werkt; Dit resulteert vaak in de beweging van het hart en de jongen. Wees voorbereid om het dier, de sonde of beide te verplaatsen om de jongen in beeld te houden.</li>
		<li>Nadat LAD pieken en hartslag tijdens de Challenge zijn vastgesteld, stopt u de infusie met dobutamine, verwijdert u de infusieset van de staart ader en verwijdert u het dier uit het platform. Laat het dier in zijn huis kooi herstellen.</li>
	</ol></li>
	<li>Selecteer Peak vel tool om de piek diastolische snelheden te verkrijgen uit de afbeeldingen getoond in Figuur 2b en C.</li>
	<li>Bereken de CFR index als de verhouding van de LAD stress (dobutamine) piek diastolische stromingssnelheid naar de rust LAD piek diastolische stromingssnelheid (Figuur 2a).</li>
</ol>3. ischemie reperfusie letsel
<ol><li>Anesthetize rat met Isofluraan-inductie kamer bij 5% met 1,5 – 2,0 l/min O2 stroom gevolgd door 1,5 – 2,0% met 1,5 – 2,0 L/min O2 stroom.</li>
	<li>Bevestig de diepte van de anesthesie door het ontbreken van de pedaal terugtrekking reflex. Gebruik oftalmische dierenarts zalf op de ogen om droogheid te voorkomen. Handhaaf de juiste lichaamstemperatuur van 37-38 °C met behulp van een verwarmingskussen of een dier temperatuurregelaar.</li>
	<li>Dien pre-chirurgische Meloxicam, 5 mg/kg intramusculair, 15 minuten voor de operatie, gevolgd door 2 mL subcutane bolus van 0,9% zoutoplossing om uitdroging tijdens de operatie te voorkomen. Er werden steriele handschoenen en instrumenten gebruikt en er werden aseptische technieken toegepast. Met behulp van de Fiber-Optic lichtbron, intuberen rat met behulp van 18-gauge IV katheter en aansluiten op de ventilator.</li>
	<li>Ligate LAD met 8-0 Monofilament hecht tot 15 mm opening op de 5ste intercostale ruimte. Bind een gewone knoop en laat voor 30 min. visueel bevestigen ischemie in alle ratten via verkleuring van het hart oppervlak12. Laat de ligatuur na 30 minuten los en verifieer reperfusie door de roodheid van het eerder verkleurde gebied van de hartspier voor 1-2 min12.</li>
	<li>Sluit de ribbenkast met 4-0 absorbabel hechtmiddel met een onderbroken hecht patroon en sluit vervolgens de huid met behulp van 5-0 niet-absorbabel zijde hechtmiddel met continu hecht patroon.</li>
	<li>Verwijder het dier van de anesthesie. Laat het dier in de huis kooi herstellen. 5mg/kg Meloxicam werd elke 24 uur intramusculair geïnjecteerd alvorens het dier te euthanatatie (72uur na de operatie).</li>
</ol>4. ultrasone beeldvorming na IR-chirurgie
<ol><li>72 h na IR chirurgie, meet de coronaire stroming en CFR opnieuw. Vergelijk de metingen tot vóór IR-metingen. Herhaal de stappen 2,1 tot en met 2,15 zoals hierboven beschreven.</li>
</ol>

<ol><li>Eltzschig, H. K., Eckle, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemia+and+reperfusion--from+mechanism+to+translation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+medicine%22%5BJournal%5D)">Ischemia and reperfusion--from mechanism to translation.</a> Nature medicine. 17 (11), 1391-1401 (2011).</li>
<li>French, C. J., Zaman, A. K., Sobel, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Failure+of+erythropoietin+to+render+jeopardized+ischemic+myocardium+amenable+to+incremental+salvage+by+early+reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Coronary+Artery+Disease%22%5BJournal%5D)">Failure of erythropoietin to render jeopardized ischemic myocardium amenable to incremental salvage by early reperfusion.</a> Coronary Artery Disease. 20 (4), 295-299 (2009).</li>
<li>Marzilli, M., Mariani, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemia-reperfusion+and+microvascular+dysfunction%3A+implications+for+salvage+of+jeopardized+myocardium+and+reduction+of+infarct+size%5BTitle%5D)+AND+%22Italian+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Ischemia-reperfusion and microvascular dysfunction: implications for salvage of jeopardized myocardium and reduction of infarct size.</a> Italian Heart Journal. 2 Suppl 3, 40s-42s (2001).</li>
<li>Prasad, A., Gersh, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Management+of+microvascular+dysfunction+and+reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+%28British+Cardiac+Society%29%22%5BJournal%5D)">Management of microvascular dysfunction and reperfusion injury.</a> Heart (British Cardiac Society). 91 (12), 1530-1532 (2005).</li>
<li>Ishihara, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+coronary+flow+reserve+immediately+after+coronary+angioplasty+in+patients+with+acute+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22British+heart+journal%22%5BJournal%5D)">Impaired coronary flow reserve immediately after coronary angioplasty in patients with acute myocardial infarction.</a> British heart journal. 69 (4), 288-292 (1993).</li>
<li>Camici, P. G., d'Amati, G., Rimoldi, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+microvascular+dysfunction%3A+mechanisms+and+functional+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Coronary microvascular dysfunction: mechanisms and functional assessment.</a> Nature Reviews Cardiology. 12 (1), 48-62 (2015).</li>
<li>Chung, K. S., Nguyen, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+measures+of+coronary+microcirculation%3A+Taking+the+long+road+to+the+clinic%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Nuclear+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Non-invasive measures of coronary microcirculation: Taking the long road to the clinic.</a> Journal of Nuclear Cardiology. , (2017).</li>
<li>Kelm, N. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipose-derived+cells+improve+left+ventricular+diastolic+function+and+increase+microvascular+perfusion+in+advanced+age%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Adipose-derived cells improve left ventricular diastolic function and increase microvascular perfusion in advanced age.</a> PLoS One. 13 (8), e0202934(2018).</li>
<li>Pan, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Late+recovery+of+coronary+flow+reserve+in+patients+successfully+treated+with+a+percutaneous+procedure%5BTitle%5D)+AND+%22Revista+Espa%C3%B1ola+de+Cardiolog%C3%ADa%22%5BJournal%5D)">Late recovery of coronary flow reserve in patients successfully treated with a percutaneous procedure.</a> Revista Española de Cardiología. 56 (5), 459-464 (2003).</li>
<li>Samim, A., Nugent, L., Mehta, P. K., Shufelt, C., Bairey Merz, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+of+angina+and+microvascular+coronary+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Current+treatment+options+in+cardiovascular+medicine%22%5BJournal%5D)">Treatment of angina and microvascular coronary dysfunction.</a> Current treatment options in cardiovascular medicine. 12 (4), 355-364 (2010).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Guide+for+the+Care+and+Use+of+Laboratory+Animals%22">Guide for the Care and Use of Laboratory Animals</a>. , 8th edition, The National Academies Collection: Reports funded by National Institutes of Health (2011).</li>
<li>Ciuffreda, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+experimental+model+of+myocardial+ischemia%2Freperfusion+injury%3A+an+ethical+approach+to+set+up+the+analgesic+management+of+acute+post-surgical+pain%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+one%22%5BJournal%5D)">Rat experimental model of myocardial ischemia/reperfusion injury: an ethical approach to set up the analgesic management of acute post-surgical pain.</a> PloS one. 9 (4), e95913-e95913 (2014).</li>
<li>van de Hoef, T. P., Siebes, M., Spaan, J. A. E., Piek, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fundamentals+in+clinical+coronary+physiology%3A+why+coronary+flow+is+more+important+than+coronary+pressure%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Fundamentals in clinical coronary physiology: why coronary flow is more important than coronary pressure.</a> European Heart Journal. 36 (47), 3312-3319 (2015).</li>
<li>Naya, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preserved+coronary+flow+reserve+effectively+excludes+high-risk+coronary+artery+disease+on+angiography%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+nuclear+medicine+%3A+official+publication%2C+Society+of+Nuclear+Medicine%22%5BJournal%5D)">Preserved coronary flow reserve effectively excludes high-risk coronary artery disease on angiography.</a> Journal of nuclear medicine : official publication, Society of Nuclear Medicine. 55 (2), 248-255 (2014).</li>
<li>Cortigiani, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnostic+and+prognostic+value+of+Doppler+echocardiographic+coronary+flow+reserve+in+the+left+anterior+descending+artery%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+%28British+Cardiac+Society%29%22%5BJournal%5D)">Diagnostic and prognostic value of Doppler echocardiographic coronary flow reserve in the left anterior descending artery.</a> Heart (British Cardiac Society). 97 (21), 1758(2011).</li>
<li>Kawata, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prognostic+value+of+coronary+flow+reserve+assessed+by+transthoracic+Doppler+echocardiography+on+long-term+outcome+in+asymptomatic+patients+with+type+2+diabetes+without+overt+coronary+artery+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+diabetology%22%5BJournal%5D)">Prognostic value of coronary flow reserve assessed by transthoracic Doppler echocardiography on long-term outcome in asymptomatic patients with type 2 diabetes without overt coronary artery disease.</a> Cardiovascular diabetology. 12, 121-121 (2013).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen

De belangrijkste bevindingen van de huidige studie zijn dat IR verhoogt de rust Lad coronaire slagader snelheid en schaadt CFR, zelfs bij afwezigheid van eventuele residuele angiografische stenose.
Het begrijpen van de coronaire fysiologie is een essentieel onderdeel van de klinische besluitvorming voor cardiologen voor de behandeling van coronaire hartziekte. CFR is een van de belangrijke functionele parameters in het begrijpen van de pathofysiologie van coronaire microcirculatie<sup class="x...

Myocardiale ischemie reperfusie (IR) is een aandoening waarbij de bloedtoevoer beperkt is tot het hart, gevolgd door de restauratie van perfusie en gelijktijdige reoxygenatie1. Occlusie van coronaire slagaders kan worden veroorzaakt door een embolus of cholesterol plaque ruptuur, wat resulteert in een ernstige onbalans van metabole vraag en aanbod, waardoor weefselhypoxie. Berging van het in gevaar gebracht myocardium, verbetering van de linker ventriculaire functie, en verbetering van de overleving bij patiënten met acuut myocardinfarct zijn waargenomen door de reperfusie therapie. Echter, na rekanalisatie van de coronaire slagader, functionele afwijkingen van kleine coronaire vaten kunnen optreden2,3,4,5. Een aanzienlijk deel van de patiënten, misschien wel 40%, niet herwinnen microvasculaire en myocardiale perfusie ondanks het herstel van coronaire stroming. Visualisatie en evaluatie van de coronaire Microvasculatuur kan moeilijk zijn in vivo, maar er zijn een aantal invasieve en niet-invasieve technieken die kunnen worden gebruikt voor het beoordelen van parameters direct afhankelijk van de coronaire microvasculaire functie6 ,7. Ook kan de endotheliale functie worden beoordeeld op het niveau van de coronaire circulatie via het CFR5.
Transthoracic Doppler echocardiografie is een niet-invasief hulpmiddel dat ons toelaat om coronaire stromingssnelheid en CFR5te bestuderen. CFR vertegenwoordigt de verhouding van maximale coronaire bloedtoevoer naar de rust coronaire bloedstroom8. Tijdens de stress-uitdaging, een normaal hart verhoogt de coronaire bloedstroom tot vier keer boven de rust waarde. Cardiovasculair risico neemt toe wanneer CFR wordt verminderd9. Ishihara et al toonde aan dat het CFR onmiddellijk na de coronaire angioplastie5ernstig werd aangetast. Bij afwezigheid van coronaire arteriestenose neemt CFR af tijdens de coronaire microvasculaire disfunctie en is aanwezig bij ongeveer de helft van de patiënten met stabiele coronaire hartziekte10.
Het algemene doel van deze methode is niet-invasieve visualisatie van linker anterieure aflopende coronaire slagader (LAD) functie bij ratten via echocardiografie, die kan worden gebruikt om CFR te berekenen. Dit biedt een belangrijk beoordelings instrument voor het diagnosticeren van microvasculaire disfunctie en het evalueren van mogelijke therapeutische behandelingen.

<table><tbody><tr><td>10 mL spuit</td><td>BD Syringe</td><td>302995</td><td></td></tr><tr><td>250S 13&ndash;24 MHz lineaire sonde</td><td>FUJIFILM VisualSonics Inc</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dobutamine hydrochloride</td><td>Sigma</td><td>D0676-10mg</td><td></td></tr><tr><td>Isofluraan</td><td>RRC</td><td>27376</td><td></td></tr><tr><td>Legato 100 Spuitpomp</td><td>KD Scientific</td><td>788100</td><td></td></tr><tr><td>Vevo 3100</td><td>FUJIFILM VisualSonics Inc</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gevleugeld infuusset, 27G x 1/2",</td><td>Medline.com</td><td>TMOSV27ELZ</td><td></td></tr></tbody></table>

evaluatie van coronaire stroom reserve na myocardiale ischemie reperfusie bij ratten

Evaluation of Coronary Flow Reserve After Myocardial Ischemia Reperfusion in Rats

Coronaire hartziekte is de belangrijkste doodsoorzaak wereldwijd. Na een acuut myocardinfarct is vroege en succesvolle myocardiale interventie via rekanalisatie van de coronaire slagader de meest effectieve strategie voor het verminderen van de grootte van ischemisch myocardium. De coronaire Microvasculatuur kan niet worden gevisualiseerd en afgebeeld in vivo, maar er zijn verschillende invasieve en niet-invasieve technieken die kunnen worden gebruikt voor het beoordelen van parameters die rechtstreeks afhankelijk zijn van coronaire microvasculaire functie. De endotheliale functie na ischemie reperfusie kan ook worden beoordeeld op het niveau van de coronaire circulatie via de coronaire stroomreserve (CFR). In deze studie werd de pieksnelheid van linker anterieure aflopende (LAD) coronaire slagaders gemeten bij ratten in vivo via Transthoracische Doppler echocardiografie tijdens rust-en stress-uitdaging (geïnduceerd door dobutamine). Een normaal hart kan zijn coronaire bloedstroom tot vier keer boven de rust waarden verhogen tijdens stress-inductie. Na ischemie reperfusie, we vonden een significant verminderde CFR, die kan worden gebruikt als een marker van coronaire microvasculaire dysfunctie. CFR heeft een venster geopend over het belang van microvasculaire disfunctie en is aangetoond dat het cardiovasculaire risico voorspelt, onafhankelijk van de vraag of de ernstige obstructieve aandoening aanwezig is.

Voor deze studie gebruikten we 12 vrouwelijke Fisher 344 ratten. We voerden een stresstest uit met dobutamine en gemeten LAD coronaire slagsnelheid vóór en 72 uur na de IR-operatie. Vóór de IR-operatie werd de rust LAD coronaire slagader snelheid gemeten als 423 ± 59 mm/s, die werd verhoogd na infusie met dobutamine (1005 ± 77mm/s) (Figuur 3a). Na 72 h van ischemie reperfusie, rust LAD coronaire snelheid was significant hoger in vergelijking met de rust LAD c...

Coronaire stroomreserve (CFR), wordt gedefinieerd als de verhouding van de maximale coronaire bloedtoevoer naar de rust coronaire bloedstroom. We presenteren een protocol voor het evalueren van CFR bij ratten via echografie, die de mogelijkheid biedt om cardiovasculaire risicofactoren te voorspellen bij afwezigheid van obstructieve coronaire ziekte.

Evaluatie van coronaire stroom reserve na myocardiale ischemie reperfusie bij ratten

Coronary artery disease is the leading cause of death worldwide. After an acute myocardial infarction, early and successful myocardial intervention via ...

Het algemene doel van deze methode is de visualisatie van de linker voorste dalende kransslagader functie bij ratten met behulp van echocardiografie om coronaire flow reserve te berekenen. Deze methode biedt een belangrijk beoordelingsinstrument voor een diagnose van microvasculaire disfunctie in zieke harten en voor de evaluatie van mogelijke behandelingen gedurende de hele studie. Hoewel is aangetoond dat reperfusietherapie in gevaar gebracht myocardium te redden en de linker ventriculaire functie te verbeteren, functionele afwijkingen van kleine kransslagaders kunnen optreden na herkanalisatie van de kransslagader.Deze methode kan inzicht geven in de coronaire microcirculatie van ratten, evenals in andere modellen, waaronder een hartinfarct, en drukvolume overbelasting van de linker ventrikel. Vóór pre-ischemie reperfusie chirurgie echografie, bevestigen een gebrek aan reactie op teen knijpen in een verdoofde Fischer 344 rat. Scheer het haar van de borst.Breng zalf aan op de ogen van het dier en plaats het dier in de supinepositie op een ingebouwde opwarmingsplatform van 37 tot 38 graden Celsius. Sluit de lineaire sonde van 13 tot 24 megahertz aan op de ultrasone machine. Stel de voorinstelling voor de toepassing in op de instelling voor cardiale beeldvorming en gebruik het railsysteem om de sonde te positioneren om de parasternale korte asweergave te verkrijgen.Gebruik de XY-asmicromanipulator om de sonde in de rozenrichting te bewegen om de longslagader te lokaliseren. Verplaats de sonde, waardoor de linker ventrikel beter zichtbaar is. Zodra de B-modus afbeelding is vastgelegd en Cine opgeslagen, klikt u op kleur Doppler en visualiseert u de kransslagader in de korte as.De rode kleur, zoals waargenomen in real time, is indicatief voor de richting van de stroom. Na het visualiseren van de onderste voorste dalende kransslagader in kleur Doppler-modus, verander de modus naar de pulsgolf en zoek naar de aanwezigheid van een gele indicatorlijn op de kransslagader. Plaats de gele pulsgolflijn in het midden van de kransslagader, waarbij u ervoor zorgt dat de hoek parallel loopt aan de richting van de stroom en gebruik Cine Store om de snelheid van de rustende linker voorste dalende coronaire stroming en de piekdiastol van de golfvormen vast te leggen.Na het verkrijgen van de rustende linker voorste dalende stroomsnelheid, plaats een kleine strook gaas rond de basis van de staart en gebruik hemostats te grijpen en draai de tourniquet om druk uit te oefenen, waardoor de ader te vergroten. Plaats voorzichtig een 25-gauge infusie vlindernaald bevestigd aan een 10-milliliter spuit geladen met dobutamine in de verwijde staart ader en stabiliseren van de naald met lijm en een stuk chirurgische tape. Wanneer de infuuslijn is bevestigd, verwijder de hemostats en tourniquet om de stroom te herstellen en plaats de spuit in een infuuspomp die 20 microgram per kilogram per minuut injecteert.Tijdens de infusie, zorgvuldig controleren van de linker voorste dalende slagader piek en hartslag, periodiek opnemen van de linker voorste dalende slagader pulsgolf pieken in de Doppler-modus onder de dobutamine-geïnduceerde stress voorwaarden. Nadat de voorste dalende kransslagaderpieken en hartslag tijdens de uitdaging zijn afgeplat, stopt u de infusie, verwijdert u de staartaderinfusieset en verwijdert u het dier van het platform. Gebruik vervolgens het gereedschap voor pieksnelheid om de hoge diastolische snelheden uit de beelden te verkrijgen en bereken de coronaire stroomreserve-index als de verhouding van de linker voorste dalende slagaderstress piek diastolische stroomsnelheid naar de rustende linker voorste dalende slagader piek diastolische stroomsnelheid.Met behulp van een glasvezellichtbron, intuberen rat met een 18-gauge IV katheter en aansluiten op de katheter op een ventilator. Gebruik vervolgens een 8-0 monofilament hechting om de linker voorste aflopende slagader te binden door een 15-millimeter opening op de vijfde intercostale ruimte met een duidelijke knoop gedurende 30 minuten. Aan het einde van de ischemieperiode bevestigt u de ischemie visueel via verkleuring van het hartoppervlak en laat u de ligatuur vrij.Reperfusie kan worden geverifieerd door de roodheid van de eerder verkleurde gebied van de hartspier. 72 uur na de operatie, meet de coronaire stroom en de coronaire stroomreserve zoals aangetoond, en vergelijk de metingen met die verkregen vóór de schade. In dit representatieve experiment, vóór de ischemie reperfusie operatie, de rustende linker voorste dalende kransslagader snelheid werd gemeten als ongeveer 423 millimeter per seconde tot meer dan het dubbele van de snelheid na dobutamine infusie.72 uur na ischemie reperfusie, de rustende links voorste dalende kransslagader snelheid was aanzienlijk hoger in vergelijking met de rustende linker voorste dalende kranssnelheid voor de operatie. De stressrespons op een dobutaminetest na de verwonding werd aanzienlijk verminderd in vergelijking met de respons vóór de operatiereacties. De coronaire stroomreserve wordt berekend als de verhouding van de piekstroomsnelheid tijdens stress en de ruststroomsnelheid en was ongeveer 2,1 bij jonge ratten voor de operatie, maar aanzienlijk verminderd 72 uur na de verwonding.Bovendien waren er geen significante veranderingen in de systolische functie van de linker ventrikel 72 uur na de blessure. Na de ontwikkeling, deze techniek zal onderzoekers in staat stellen om te verkennen en echografie van kransslagaders te gebruiken in kleine diermodellen die nauwkeurig na te bootsen menselijke aandoeningen. Na het bekijken van deze video, moet u een zeer goed begrip van hoe coronaire bloedstroom te meten en te evalueren coronaire microcirculatie in een klein dier hart-en vaatziekten model.

evaluation-coronary-flow-reserve-after-myocardial-ischemia

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

De rat model van acuut myocard infarct (AMI) is nuttig om het gevolg van een MI op cardiale pathofysiologische en fysiologische functie te bestuderen.

Acuut myocardinfarct in ratten

Dit protocol beschrijft varkens myocardiaal infarct (MI)-model met een 90 min gesloten borst coronaire ballon occlusie van de LAD (LAD), gevolgd door reperfusie. Bovendien is het protocol voor meerdere uitkomstparameters, zoals hartfunctie, hemodynamica, microvasculaire weerstand en infarctgrootte, worden ook gepresenteerd.

Myocardinfarct en Functional Outcome Assessment in Pigs

Coronaire flow reserve (CFR) is nuttig voor de beoordeling van myocard zuurstofbehoefte en evaluatie van cardiovasculair risico. Deze studie stelt een stapsgewijze transthoracale Doppler echocardiografische (TTDE) methode vast voor longitudinale monitoring van de veranderingen in CFR, zoals gemeten vanuit de kransslagader bij muizen, onder de experimentele drukoverbelasting van aortische banding.

Echografie gebaseerde beoordeling van coronaire Flow en Coronaire Flow Reserve Met behulp van de druk overbelasting Model in Muizen

Het geïsoleerde rattenhart is een duurzaam model voor ischemie-reperfusieletsel. Hier beschrijven we het proces van het oogsten van het kloppende hart van een rat via in situ aortacanuletie, Langendorff-perfusie van het hart, gesimuleerde ischemie-reperfusieletsel en infarctkleuring om de omvang van het ischemische letsel te bevestigen.

Inductie en beoordeling van ischemie-reperfusie schade in Langendorff-geperfuseerde Rat Hearts

Myocardiale ischemie-reperfusie model van rattenhart wordt verbeterd door gebruik te maken van een zelfgemaakt retractor, polyvinylchloride buis, en een unieke knoopmethode. Elektrocardiogram, trifenyltetrazoliumchloride en histologische kleuring en procentuele overlevingsanalyseresultaten toonden aan dat de verbeterde modelgroep hogere succes- en overlevingskansen heeft dan de reeds bestaande modelgroep.

Verbeterd knaagdiermodel van myocardiale ischemie en reperfusieletsel

Hierin presenteren we een protocol dat zich richt op de kwaliteitscontrole van de linker voorste dalende coronaire ligatie door de traditionele procedure bij ratten voor acuut myocardiale ischemie-reperfusieonderzoek technisch te wijzigen.

Linker anterieure dalende kransslagaderligatie voor ischemie-reperfusieonderzoek: modelverbetering via technische modificaties en kwaliteitscontrole

De huidige studie demonstreert een zeer reproduceerbaar diermodel van acute regionale myocardischemie en reperfusieletsel bij konijnen met behulp van een linker mini-thoracotomie voor overlevingsgevallen of een middellijnsternotomie voor niet-overlevingsgevallen.

Model van ischemie en reperfusieletsel bij konijnen

Het huidige protocol beschrijft een aangepast parasternale langsasaanzicht voor snelle en nauwkeurige lokalisatie van de linker voorste dalende slagader. Deze aanpak is ontworpen om eenvoudiger en gebruiksvriendelijker te zijn en tegelijkertijd het onderzoek naar dynamische veranderingen in de coronaire flowreserve na myocardischemie-reperfusie bij muizen te vergemakkelijken.

Dynamische beoordelingen van coronaire stroomreserve na reperfusie van myocardischemie bij muizen

Chirurgisch trauma veroorzaakt een ontstekingsreactie. Cytokines en endogene liganden zijn bekend voor het moduleren van een myocard infarct grootte na ischemie en reperfusie. We presenteren een aangepaste gesloten kist model van muizen ischemie en reperfusie met behulp van gewichten opknoping om de effecten van thoracotomie te minimaliseren.

Een murine Closed-borst Model van myocardiale ischemie en reperfusie

We introduceren een chirurgische methode experimentele ischemie / reperfusie (I / R) letsel veroorzaken simuleren myocardiaal infarct (MI) in muismodellen die zorgt voor meer duidelijkheid in positionering van de ligatie van de LAD (LAD) om de reproduceerbaarheid te verhogen MI van experimenten in muizen.

Een muizenmodel van myocard ischemie-reperfusie schade door de eileiders van de LAD

Leer de evaluatie van coronaire stroomreserve bij ratten na myocardiale ischemie-reperfusie met behulp van transthoracale Doppler-echocardiografie. Deze methode biedt een waardevol instrument voor het diagnosticeren van microvasculaire dysfunctie.

Evaluatie van coronaire stroom reserve na myocardiale ischemie reperfusie bij ratten

Meer video's verkennen