13 mei 2019
Hier bieden we een nuttige aanpak voor het bestuderen van het mechanisme van rechter ventriculaire mislukking. Een handiger en efficiënter aanpak van de longslagader vernauwing wordt vastgesteld met behulp van chirurgische instrumenten gemaakt inhouse. Bovendien worden methoden voor het evalueren van de kwaliteit van deze aanpak door echocardiografie en catheterisatie geleverd.
Deze methode biedt een nuttige techniek voor het bestuderen van de mechanismen van rechter ventriculaire falen. De belangrijkste voordelen van deze techniek zijn tijd te besparen en het verhogen van het slagingspercentage voor chirurgie. Deze techniek kan ons helpen imitatie rechter hart hypertrofie en falen bij de mens door vernauwing van de longslagader om een longdruk overbelasting te creëren.
Deze methode kan worden toegepast op de transversale aortavernauwing techniek en kan inzicht geven in post-harttransplantatie complicaties, en aangeboren hart-en vaatziekten studies. De procedure zal worden aangetoond door Xiaoxia Huang, een technicus uit mijn laboratorium. Voordat u met de procedure begint, passeert u een stuk 6-0 gevlochten zijdehechting door een 25-meter naald gedemonteerd uit een spuit van één milliliter.
Gebruik hemostatische tangen om de naald 90 graden te buigen. Buig dan een naald van 22 meter 120 graden. Na bevestiging van een gebrek aan reactie op teen knijpen, plaats een verdoofde muis in de supine positie op een 37 graden Celsius verwarming pad, en zet de snijtanden met een hechting.
Bevestig de ledematen met tape, en gebruik ontharingscrème om het haar te verwijderen van de nek naar het xiphoid proces. Desinfecteer de blootgestelde huid met sequentiële jodium en 75% ethanoldoekjes en gebruik punttang om de tong iets te extraheren. Verhoog de onderkaak met een op maat gemaakte spatel om de glottis bloot te leggen, en gebruik een koude lichtbron om de zorgvuldige invoeging van een op maat gemaakte luchtpijpfiula door de glottis te leiden.
Pas de mini-ventilatorparameters aan en stel de ademhalingssnelheid in op 150 ademhalingen per minuut en een getijdenvolume van 300 microliters. Sluit vervolgens de buis en de ventilator aan om te bevestigen dat de canule correct is ingebracht voordat de canule met tape is bevestigd. Om de borst te openen, maak een ongeveer 10 millimeter huid incisie parallel aan de tweede rib.
Gebruik schaar en elleboog pincet om de pectoralis grote en kleine spieren te scheiden boven de tweede intercostale ruimte. Tel de ribben uit de achtersteven hoek om de tweede intercostale ruimte te identificeren en gebruik een schaar om deze ruimte te openen. Scheid vervolgens de parenchyma en thymus botweg tot de longstam zichtbaar is.
Om de longslagader te vernauwen, gebruikt u de elleboogcet om de longstam en de opgaande aorta botweg te scheiden. Gebruik de 90 graden klinknaald om de hechting door het bindweefsel tussen de longstam en de opgaande aorta door te geven. Plaats de 120 graden vulling naald op de longstam.
Gebruik de 6-0 gevlochten zijdehechting om de opvulnaalden aan de longstam te binden, waarbij de opvulnaald onmiddellijk na het vullen van de longconus wordt waargenomen. Snijd beide uiteinden van de hechtingen en blijf de vulling van de longconus observeren om te beoordelen of er een vernauwing aanwezig is. Evalueer vervolgens de pedaalreflex van het dier opnieuw om het succes van de ligatie te garanderen en sluit de borst en huid met een 5-0 nylon hechting.
Breng ten minste drie dagen na de operatie ultrasone gel aan op de borst van de longslagader vernauwd dier. Plaats een 30 megahertz sonde op de borst op een 30 graden tegen de klok mee positie ten opzichte van de linker parasternale lijn, terwijl oriënterende de inkeping in de caudal richting. Regel de Y- en X-assen onder de B-modus totdat de mitralisklep, aorta en linker ventrikelkamer duidelijk zichtbaar zijn.
Draai de sonde 30 tot 40 graden op de Y-as naar de borst. Regel de Y- en X-assen totdat de longconus duidelijk zichtbaar is en plaats de cursor op het puntje van de kkmonale klepfolders om de piekstroomsnelheid te meten. Selecteer kleur en PW en plaats de gepulseerde golf stippellijn parallel aan de richting van de bloedstroom.
Stel de linkerkant van de pad, zodat het hoger is dan de rechterkant, waardoor de sonde georiënteerd 30 graden aan de horizon langs de rechter binnenste axillaire lijn, met de inkeping wees in de caudal richting. Regel de X- en Y-assen tot de rechterventrikel duidelijk zichtbaar is. Klik vervolgens twee keer op M-modus om de indicatorlijn weer te geven.
Acht weken na de operatie, intuberen van de muis zoals aangetoond, en maak een 1,5 centimeter bilaterale incisie onder de xiphoid proces door het middenrif om de borstholte te openen. Snijd door de ribben om het hart bloot te leggen, en gebruik een 23-meter naald om de rechter ventrikel vrije muur te penetreren. Druk het punctiepunt voorzichtig met een wattenstaafje om bloedingen te stoppen en gebruik de katheterpunt om de ventrikel door de wond te prikken.
Wanneer de curve stabiel is, regelen de punt van de katheter in de richting van de rechter ventrikel uitstroomkanaal. Klik op selecteren en analyseren om de systolische bloeddruk en diastolische druk van de rechter ventrikel op te nemen, maximale stijgingspercentage, exponentiële tijdconstante van ontspanning en hartslag gedurende 10 minuten. Breng vervolgens de katheter uit het hart over in een container met zout.
Vergeleken met de Sham groep, een hogere pieksnelheid, grotere druk gradiënt, en een grotere rechter ventrikel wanddikte worden verkregen uit de parasternale lange as uitzicht op acht weken na de operatie in de Pulmonary Artery Constriction groep. Bovendien wordt de systolische functie van de rechter ventrikel aanzienlijk verminderd in de Pulmonary Arter Constriction-groep, in vergelijking met de Sham-groep, acht weken na de operatie. De Pulmonary Artery Constriction groep heeft een hogere rechter ventrikel druk in de systole en diastole, en de contractiliteit index is verminderd in vergelijking met die van de Sham groep.
De rechter ventrikel Tau en de maximale stijging zijn ook groter in de Pulmonary Artery Constriction groep dan die in de Sham groep. Aantonen dat rechter ventrikel disfunctie wordt geïnduceerd bij muizen na acht weken van longslagader banding. Invasieve hemodynamische testen in de rechter ventrikel, blijkt dat de hartslag stabiel blijft voor en na de katheter monitoring.
In vergelijking met de Sham-groep zijn de afmetingen van de rechterventrikel aanzienlijk vergroot en is het juiste ventrikelgewicht hoger. Bovendien toont histologisch onderzoek aan dat hartfibrose in het gebied dat onder cardiomyocyten valt groter is in de groep Pulmonary Artery Constriction dan in de Sham-groep. Het belangrijkste onderdeel van de procedure is ervoor te zorgen dat de longslagader correct en volledig wordt gescheiden.
Om een onjuiste scheiding te voorkomen, moet het scheidingspunt zich in de buurt van de tak van de longslagader bevallen, waar het bindweefsel tussen de slagaders losser zal zijn. Met deze methode hebben we gezorgd voor een meer handige en efficiënte benadering van het induceren van rechts ventriculaire hypertrofie. Over het algemeen zijn de chirurgische ingreep en evaluatiebenaderingen zeer veilig.
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's
Deze studie introduceert een verfijnde aanpak om de mechanismen van rechterventrikelfalen te onderzoeken middels longslagaderconstrictie in een muismodel. De methode verbetert de chirurgische efficiëntie en stelt een kader vast voor het beoordelen van de geïnduceerde veranderingen via echocardiografie en catheterisatie.
Deze benadering van longslagaderconstrictie (PAC) bij muizen biedt een reproduceerbaar model voor het bestuderen van mechanismen van rechterventrikelfalen, waarmee een kritisch gat in de ontwikkeling van cardiovasculaire geneesmiddelen wordt gedicht. Het model maakt mechanistische risicoreductie van therapeutische targets mogelijk door pathologie te simuleren die is veroorzaakt door drukoverbelasting, relevant voor pulmonale hypertensie en aangeboren hartafwijkingen. De hoge chirurgische slagingskans en de gestandaardiseerde evaluatie ondersteunen preklinische targetvalidatie en workflows voor assay-ontwikkeling.
Het PAC-model past binnen het ontdekkingscontinuüm, van het testen van target-hypotheses tot de preklinische evaluatie van de effectiviteit, ter ondersteuning van go/no-go-beslissingen in cardiovasculaire programma's.