Name: Murine model van centraal veneuze stenose met behulp van Aortocaval fistel met een uitstroom stenose (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-07-11T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 17 s
Description: Leer een reproduceerbaar murien model voor centrale veneuze stenose via een aortocavale fistel. Deze techniek bootst het klinische beloop van menselijke AVF na en helpt onderzoekers bij het bestuderen van fistelmaturatiefalen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd gesteund door de Amerikaanse National Institute of Health (NIH) Grant R01-HL128406; het Amerikaanse ministerie van veteranen zaken biomedische laboratoriumonderzoek en ontwikkelingsprogramma Merit Review Award I01-BX002336; Naast de middelen en het gebruik van faciliteiten in het VA Connecticut Healthcare System, West Haven, CT.

Alle experimenten werden uitgevoerd met goedkeuring van het institutioneel Dierenzorg-en gebruiks Comité van Yale University (IACUC).
1. anesthesie en pre-operatieve procedures
<ol><li>Steriliseer alle chirurgische instrumenten en materialen door autoclaven. Schakel het thermische ondersteunings apparaat in om er zeker van te zijn dat het warm is (40 – 42 °C).</li>
	<li>Plaats een 9 – 11 weken oude C57BL/6 muis in een acryl inductie kamer en anesthetiseer het met verdampte 2,5% Isofluraan en 0,8 L/min zuurstof. Anesthesie inductie duurt ongeveer 3 min.</li>
	<li>Verwijder de muis uit de kamer. Bevestig een diep vlak van anesthesie door een teen pinch, een oorknijper en een staart knijpen. Plaats de muis in liggende positie op het chirurgische gebied en lever 2,5% Isofluraan met behulp van een siliconen masker. Voorzie buprenorfine van 0,1 mg/kg analgetisch en breng oogheelkundige zalf aan op de ogen.</li>
	<li>Verwijder bont van de ventrale kant van de nek naar de onderbuik met Nair, een haarverwijderaar.</li>
	<li>Reinig en Desinfecteer de operatieplaats met behulp van een twee-stestscrub met 10% Povidon-jodium en 70% isopropanol. Breng een chirurgische Drape aan.</li>
</ol>2. operatieve procedures
<ol><li>
Blootstelling van de klem-en punctie plaatsen
	<ol>
<li>Bereid steriele instrumenten en draagster iele handschoenen om de steriliteit gedurende de hele operatie te behouden.</li>
		<li>Maak een huid-diepe middellijn abdominale incisie met een scalpel van het niveau van de onderste lever rand tot net boven de pubis. Snijd door de spier massa met een schaar om de buikholte te openen.</li>
		<li>Steek een oprolmechanisme in de buik en trek de darmen naar de rechterkant. Houd ze vochtig door het verpakken in een zout-geweekt gaas. Retreive de blaas en de zaadblaasjes (bij mannelijke muizen) en trek ze naar de caudale kant. Ontleden het mesenterie tussen het rectum en het retroperitoneum met een micro-naald houder om een volledig beeld te krijgen van de aorta en de IVC.</li>
		<li>Ontleden de infra-renale aorta en IVC en bloc van de laterale en dorsale rondom retroperitoneale weefsels met een micro-naald houder om ze samen te klemmen.</li>
		<li>Ontleden de omringende weefsels om de aorta prikplaats te blootstellen op ongeveer driekwart van de afstand van de linker Nierader tot de aorta bifurcatie.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
IVC dissectie
	<ol>
<li>Dissect tussen de infra-renale IVC en aorta onmiddellijk distale naar de linker Nierader. Verleng de dissectie naar de helft tussen de linker Nierader en de aorta bifurcatie, zodat de infra-renale IVC, zowel stroomopwaarts als stroomafwaarts naar de stenose, postoperatief kan worden waargenomen. Opmerking: botte dissectie tussen de IVC en aorta moet worden uitgevoerd van onmiddellijk distale naar de linker Nierader waar het bindweefsel tussen de IVC en de aorta relatief los is.</li>
		<li>Maak een venster om de IVC van de aorta op dat niveau te scheiden en ontleden de IVC van het omringende weefsel. Plaats een 8-0 polyamide monofilament hecht in de eerste plaats onder de IVC en aorta (Figuur 1a), plaats dan de hechting onder alleen de IVC (Figuur 1b) door de hechting te trekken door het raam. Opmerking: omdat de IVC fragiel is, is het ontleden langs de aorta adventitia handig om een venster te maken om te voorkomen dat de IVC en kleine IVC-of aorta-takken beschadigd raken. Als er bloedingen optreden, is het waarschijnlijk oncontroleerbaar. Als de IVC verschillende zijtakken heeft, plaats dan een 8-0 hecht aan de takken.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
AVF-creatie
	<ol>
<li>Buig een 25 G naald naar een hoek van 45 – 60 ° op een punt ~ 4 mm van de naaldpunt.</li>
		<li>Klem de infra-renale aorta en IVC door een microchirurgische clip toe te passen.</li>
		<li>Draai de aorta mediaal en caudally door het bindweefsel rond de bifurcatie te grijpen om de prikplaats van de aorta uit te rekken tot aan de ventrale kant.</li>
		<li>Door de aorta in een geschikte positie te houden, door de aorta in de IVC te prikken met behulp van de bereide 25 G naald (figuur 1c).</li>
		<li>Laat de aorta los en bedek de prikplaats met het omringende weefsel dat omhoog trekt vanaf de linkerkant van de aorta. Haal de naald eruit en druk voorzichtig op de prikplaats met een wattenstaafje voor hemostase.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Creatie van de IVC stenose
	<ol>
<li>Plaats een punt van een 22 G IV katheter (Zie de tabel met materialen) op de IVC longitudinaal. Ligate de I.V. katheter en IVC samen met een 8-0 hecht (figuur 1d) en verwijder vervolgens de i.v.-katheter.</li>
		<li>Bevestig primaire hemostase (Figuur 1e) en ontklem de aorta en IVC. Bedek de punctieplaats 1 min meer om hemostase te garanderen. Let op: niet te lang klemmen om te voorkomen dat IVC trombose distale van de stenose.</li>
		<li>Terugkeer organen naar hun oorspronkelijke posities en sluit de buik met 6-0 hechtingen.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. postoperatieve ingrepen
<ol><li>Na afsluiting van de abdominale wond, stop Isofluraan inademing. Zet de muis in een individuele bedding-vrije kooi en plaats de kooi op een thermisch ondersteunings apparaat om hypothermie te voorkomen. Opmerking: de muis wordt waargenomen totdat ze borstbeen recumbency bereiken en onderhouden. Pas postoperatieve verzorging toe, waaronder analgesie en wondverzorging in overeenstemming met aanbevelingen van het lokale IACUC. Voor analgesie gebruiken we buprenorfine bij 0,1 mg/kg intrasmuscularly elke 12 h voor 48 h na de chirurgische ingrepen en daarna indien nodig.</li>
	<li>Bevestig de AVF-patentie postoperatief met behulp van Doppler-echografie (Zie de tabel met materialen). Meet bovendien, indien nodig, andere vaten en stromings karakteristieken.</li>
</ol>

<ol><li>Dember, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+clopidogrel+on+early+failure+of+arteriovenous+fistulas+for+hemodialysis%3A+a+randomized+controlled+trial%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">Effect of clopidogrel on early failure of arteriovenous fistulas for hemodialysis: a randomized controlled trial.</a> JAMA. 299 (18), 2164-2171 (2008).</li>
<li>Dixon, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Why+don%27t+fistulas+mature%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Kidney+International%22%5BJournal%5D)">Why don't fistulas mature?</a> Kidney International. 70 (8), 1413-1422 (2006).</li>
<li>Wilmink, T., Hollingworth, L., Powers, S., Allen, C., Dasgupta, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Natural+History+of+Common+Autologous+Arteriovenous+Fistulae%3A+Consequences+for+Planning+of+Dialysis%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Vascular+and+Endovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Natural History of Common Autologous Arteriovenous Fistulae: Consequences for Planning of Dialysis.</a> European Journal of Vascular and Endovascular Surgery. 51 (1), 134-140 (2016).</li>
<li>Al-Jaishi, A. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patency+rates+of+the+arteriovenous+fistula+for+hemodialysis%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Kidney+Diseases%22%5BJournal%5D)">Patency rates of the arteriovenous fistula for hemodialysis: a systematic review and meta-analysis.</a> American Journal of Kidney Diseases. 63 (3), 464-478 (2014).</li>
<li>Rocco, M. V., Bleyer, A. J., Burkart, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Utilization+of+inpatient+and+outpatient+resources+for+the+management+of+hemodialysis+access+complications%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Kidney+Diseases%22%5BJournal%5D)">Utilization of inpatient and outpatient resources for the management of hemodialysis access complications.</a> American Journal of Kidney Diseases. 28 (2), 250-256 (1996).</li>
<li>Roy-Chaudhury, P., Sukhatme, V. P., Cheung, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemodialysis+vascular+access+dysfunction%3A+a+cellular+and+molecular+viewpoint%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Society+of+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Hemodialysis vascular access dysfunction: a cellular and molecular viewpoint.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 17 (4), 1112-1127 (2006).</li>
<li>Quencer, K. B., Arici, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Arteriovenous+Fistulas+and+Their+Characteristic+Sites+of+Stenosis%5BTitle%5D)+AND+%22AJR%3A+American+Journal+of+Roentgenology%22%5BJournal%5D)">Arteriovenous Fistulas and Their Characteristic Sites of Stenosis.</a> AJR: American Journal of Roentgenology. 205 (4), 726-734 (2015).</li>
<li>Kian, K., Asif, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cephalic+arch+stenosis%5BTitle%5D)+AND+%22Semin+Dial%22%5BJournal%5D)">Cephalic arch stenosis.</a> Semin Dial. 21 (1), 78-82 (2008).</li>
<li>Agarwal, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Central+vein+stenosis%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Kidney+Diseases%22%5BJournal%5D)">Central vein stenosis.</a> American Journal of Kidney Diseases. 61 (6), 1001-1015 (2013).</li>
<li>Glanz, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Axillary+and+subclavian+vein+stenosis%3A+percutaneous+angioplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Axillary and subclavian vein stenosis: percutaneous angioplasty.</a> Radiology. 168 (2), 371-373 (1988).</li>
<li>Yamamoto, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mouse+aortocaval+fistula+recapitulates+human+arteriovenous+fistula+maturation%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology%3A+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">The mouse aortocaval fistula recapitulates human arteriovenous fistula maturation.</a> American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 305 (12), H1718-H1725 (2013).</li>
<li>North American Symptomatic Carotid Endarterectomy Trial. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods%2C+patient+characteristics%2C+and+progress%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Methods, patient characteristics, and progress.</a> Stroke. 22 (6), 711-720 (1991).</li>
<li>Kuwahara, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD44+Promotes+Inflammation+and+Extracellular+Matrix+Production+During+Arteriovenous+Fistula+Maturation%5BTitle%5D)+AND+%22Arteriosclerosis%2C+Thrombosis%2C+and+Vascular+Biology%22%5BJournal%5D)">CD44 Promotes Inflammation and Extracellular Matrix Production During Arteriovenous Fistula Maturation.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 37 (6), 1147-1156 (2017).</li>
<li>Protack, C. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eph-B4+regulates+adaptive+venous+remodeling+to+improve+arteriovenous+fistula+patency%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Eph-B4 regulates adaptive venous remodeling to improve arteriovenous fistula patency.</a> Scientific Reports. 7 (1), 15386(2017).</li>
<li>Payne, H., Brill, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stenosis+of+the+Inferior+Vena+Cava%3A+A+Murine+Model+of+Deep+Vein+Thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Stenosis of the Inferior Vena Cava: A Murine Model of Deep Vein Thrombosis.</a> J Vis Exp. (130), (2017).</li>
<li>Nam, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Partial+carotid+ligation+is+a+model+of+acutely+induced+disturbed+flow%2C+leading+to+rapid+endothelial+dysfunction+and+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology%3A+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Partial carotid ligation is a model of acutely induced disturbed flow, leading to rapid endothelial dysfunction and atherosclerosis.</a> American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 297 (4), H1535-H1543 (2009).</li>
<li>Ene-Iordache, B., Remuzzi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disturbed+flow+in+radial-cephalic+arteriovenous+fistulae+for+haemodialysis%3A+low+and+oscillating+shear+stress+locates+the+sites+of+stenosis%5BTitle%5D)+AND+%22Nephrology%2C+Dialysis%2C+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Disturbed flow in radial-cephalic arteriovenous fistulae for haemodialysis: low and oscillating shear stress locates the sites of stenosis.</a> Nephrology, Dialysis, Transplantation. 27 (1), 358-368 (2012).</li>
<li>Yamamoto, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disturbed+shear+stress+reduces+Klf2+expression+in+arterial-venous+fistulae+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+reports%22%5BJournal%5D)">Disturbed shear stress reduces Klf2 expression in arterial-venous fistulae in vivo.</a> Physiological reports. 3, (2015).</li>
<li>Remuzzi, A., Ene-Iordache, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+paradigms+for+dialysis+vascular+access%3A+upstream+hemodynamics+and+vascular+remodeling+in+dialysis+access+stenosis%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Journal+of+the+American+Society+of+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Novel paradigms for dialysis vascular access: upstream hemodynamics and vascular remodeling in dialysis access stenosis.</a> Clinical Journal of the American Society of Nephrology. 8 (12), 2186-2193 (2013).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Het Murine AVF-model is gebruikt om de basismechanismen en moleculaire gebeurtenissen te bestuderen die leiden tot AVF-rijping13,14. In deze studie hebben we een vastgesteld Murine AVF-model aangepast om een roman Murine aortocaval-fistel-model te maken met een IVC-stenose in het uitstroomkanaal van de fistel. Ons ligatie model is vergelijkbaar met verschillende eerder beschreven Murine modellen die vasculaire ligatie gebruiken. Een Murine model van diepe veneuze...

Arterioveneuze fistels (AVF) zijn de meest voorkomende toegangen voor hemodialyse, met superieure doorgankelijkheid en verminderde infectie in vergelijking met andere toegangen zoals grafts of centrale veneuze katheters. Echter, tot 60% van AVF niet te rijpen1,2,3; een recente systematische evaluatie meldde dat de primaire patentie percentages op 1 jaar slechts 60%4waren. Stenose langs de veneuze uitstroom voornamelijk veroorzaakt falen van AVF rijping5,6. Er zijn bepaalde karakteristieke locaties vatbaar voor stenose proximale aan de fistel: het juxtaanastomotische Swing segment voor de radiocephalische fistel, de cefalie boog regio voor de brachiocephalische fistels en de centrale ader voor de fistel met eerder Geplaatst ipsilaterale subclavia of interne jugulaire ader katheters7,8.
Centraal veneuze stenose is vaak asymptomatisch bij patiënten zonder AVF, maar kan ipsilaterale extremiteiten oedeem veroorzaken door veneuze hypertensie en falen van fistels rijping wanneer uitgedaagd door fistels flow9. De pathofysiologie van centraal veneuze stenose is het meest waarschijnlijk gerelateerd aan ontsteking en de geactiveerde coagulatie Cascade na plaatsing van het apparaat. Bovendien, constante beweging van de tip van de katheter evenals verhoogde stroom van de fistel kan shear stress veranderen, resulterend in bloedplaatjes afzetting en veneuze wand verdikking10. Om de basismechanismen van het AVF-falen als gevolg van centraal veneuze stenose te begrijpen, is een diermodel dat centraal veneuze stenose nabootsen met een AVF vereist.
We hebben een Murine aortocaval fistel model dat is gemakkelijk uit te voeren en beheersen en aan van de klinische cursus van menselijke AVF gevestigd. 11 we hebben de concepten en techniek van verschillende eerder vastgestelde Murine modellen toegepast om een nieuw MURINE AVF-model met veneuze stenose te creëren. We introduceren een Murine aortocaval fistel model met een IVC stenose in de uitstroom fistel dat kan worden gebruikt voor de studie van centraal veneuze stenose.

<table><tbody><tr><td>20-60 Mhz scan head</td><td>VisualSonics Inc.</td><td>RMV-704</td><td></td></tr><tr><td>8-0 Sterile Micro Suture, 6mm (140 &micro;), 3/8 Circle, TAP Point Needle</td><td>AROSuture</td><td>T06A08N14-13</td><td>polyamide monofilament sutures</td></tr><tr><td>Induction Chamber, 2 Liter 3.75"B x 9.00"D x 3.75"H</td><td>VetEquip</td><td>941444</td><td></td></tr><tr><td>Isoflo, Isofluraan vloeistof</td><td>Zoetis</td><td>26675-46-7</td><td></td></tr><tr><td>Muizen, C57BL/6J</td><td>The Jackson Laboratory</td><td>664</td><td></td></tr><tr><td>Microgolf verwarmingskussen voor huisdieren</td><td>Snuggle Safe</td><td>6250</td><td></td></tr><tr><td>PrecisionGlide naald 25G</td><td>BD</td><td>305122</td><td></td></tr><tr><td>Surflo I.V. katheter 22G</td><td>Terumo</td><td>SR-OX2225CA</td><td>0.85mm buitendiameter</td></tr><tr><td>Vasculair klem</td><td>Roboz Surgical Instrument</td><td>RS-5424</td><td></td></tr><tr><td>Vevo770 High Resolution Imaging System</td><td>VisualSonics Inc.</td><td>770</td><td></td></tr></tbody></table>

murine model van centraal veneuze stenose met behulp van aortocaval fistel met een uitstroom stenose

Murine Model of Central Venous Stenosis using Aortocaval Fistula with an Outflow Stenosis

Centraal veneuze stenose is een belangrijke entiteit die bijdraagt aan Arterioveneuze fistel (AVF) falen. Een Murine AVF-model werd aangepast om een gedeeltelijke ligatie te creëren van de inferieure vena cava (IVC) in de uitstroom van de fistel, het nabootsen van de centrale veneuze stenose. Technische aspecten van dit model worden geïntroduceerd. De aorta en de IVC worden blootgesteld, na een abdominale incisie. De infra-renale aorta en IVC worden ontleed voor proximale opspanning en de distale aorta wordt blootgesteld voor punctie. De IVC op het middelpunt tussen de linker Nierader en de aorta bifurcatie wordt zorgvuldig ontleed om een 8-0 te plaatsen hechting onder de IVC. Na het klemmen van de aorta en de IVC, wordt een AVF gecreëerd door de infra-renale aorta door te prikken via beide wanden in de IVC met een 25 G naald, gevolgd door het ligeren van een 22 G intra-veneuze (IV) katheter en IVC samen. De katheter wordt vervolgens verwijderd, waardoor een reproduceerbare veneuze stenose zonder occlusie. De aorta en IVC zijn ongeklemd na het bevestigen van primaire hemostase. Dit nieuwe model van centrale ader stenose is gemakkelijk uit te voeren, reproduceerbaar, en zal onderzoeken naar AVF falen vergemakkelijken.

Mannelijke muizen onderging de bovengenoemde operatie om zowel een AVF als een IVC stenose te creëren. Controle muizen ondergingen alleen laparotomie en dissectie van de weefsels rond de IVC, bijvoorbeeld een schijn procedure, of alleen het creëren van een IVC stenose zonder gelijktijdige creatie van een AVF.
De IVC werd waargenomen met Doppler-echografie op dag 7 na de chirurgische ingreep (Figuur 2</strong...

Een aortocaval fistel werd gecreëerd door het prikken van de Murine infra-nieraorta door beide muren in de inferieure Vena Cava en werd gevolgd door het creëren van een stenose in zijn uitstroom via gedeeltelijke ligatie van de inferieure vena cava. Dit reproduceerbare model kan worden gebruikt om centraal veneuze stenose te bestuderen.

Murine model van centraal veneuze stenose met behulp van Aortocaval fistel met een uitstroom stenose

Central venous stenosis is an important entity contributing to arteriovenous fistula (AVF) failure. A murine AVF model was modified to create a partial ...

Centrale veneuze stenose kan zowel aortocaval fistel, of AVF, primaire falen van de rijping, evenals later falen in een werkende fistel veroorzaken. Deze techniek maakt gebruik van een aangepaste versie van een gevestigde murine AVF-model dat de klinische loop van de menselijke AVF samenvat en gemakkelijk onder de knie wordt door middel van verschillende kritieke stappen. Bevestig voor het begin van de procedure een gebrek aan respons op teenknijpen in een negen-tot 11 weken oude C57-Black/6-muis en plaats de muis in de supinepositie in het chirurgische gebied.Breng zalf aan op de ogen van het dier en verwijder de vacht van de ventrale kant van de nek naar de onderbuik. Reinig en ontsmet de chirurgische plaats met drie opeenvolgende 10%povidone-jodium en 70% isopropanol scrubs, en plaats een chirurgische gordijnen over het dier. Voor klem en punctie site blootstelling, plaats de muis onder een ontleden microscoop en, met behulp van steriele techniek en een scalpel, maak een huid-diepe, middellijn, abdominale incisie van de onderste lever rand tot net boven de schaamstreek.Snijd door het spierstelsel met een schaar om de buikholte te openen en steek een oprolmechanisme in de buik. Verplaats de darmen naar de rechterkant, en wikkel ze in een zout-doorweekt gaas. Verplaats de blaas en de zaadblaasjes naar de staartzijde van het dier en gebruik een microneedlehouder om de mesenterie tussen het rectum en het retroperitoneum te ontleden om een volledig zicht op de aorta en inferieure vena cava, of IVC, veilig te stellen.Gebruik vervolgens de microneedlehouder om de infraroodaorta en IVC en bloc te ontleden uit de laterale en dorsale omringende retroperitoneale weefsels om de weefsels aan elkaar te kruisen en de omliggende weefsels te ontleden om de aortapunctieplaats bloot te stellen op ongeveer driekwart van de afstand van de linker nierader naar de aortabifurcatie. Voor isolatie van het IVC, ontleden tussen de infrarood IVC en de aorta onmiddellijk distal naar de linker nierader en de dissectie distally uit te breiden tot halverwege tussen de linker nierader en de aorta bifurcatie voor post-operatieve infrarood IVC observatie. Maak een venster om het IVC te scheiden van de aorta en ontleed het IVC van het omliggende weefsel.Plaats dan voorzichtig een 8-0 polyamide monofilament hechting onder het IVC en de aorta voordat u het hechtingseind door het venster trekt om de hechting alleen onder het IVC te plaatsen. Om de AVF te maken, buig je eerst een naald van 25 meter naar een hoek van 45 tot 60 graden van de naaldpunt en klem je de infraroodaorta en IVC met een microchirurgische clip. Het bindweefsel rond de splitsing grijpen, de aorta mediaal en caudally draaien om de punctieplaats van de aorta enigszins aan de ventrale kant bloot te leggen en gebruik de 25-gauge naald om door de aorta in het IVC te prikken.Wanneer het weefsel is doorboord, laat u de aorta los en trekt u vanaf de linkerkant van de aorta naar de punctieplaats met het omringende weefsel. Verwijder vervolgens de naald en druk zachtjes op de punctieplaats met een wattenstaafje voor hemostase. Voor het maken van IVC-stenose plaatst u de punt van een 22-gauge intraveneuze katheter in de lengterichting op het IVC en bindt u de katheter met een 8-0 hechting.Wanneer de hechting is geplaatst, verwijdert u de katheter en bevestigt u de primaire hemostase voordat de aorta en het IVC worden losgemaakt. Bedek de punctieplaats nog een minuut om hemostase te garanderen en breng de organen terug naar hun buikholte voordat ze de buik sluiten met 6-0 hechtingen. Plaats vervolgens de muis in een individuele beddengoedvrije kooi op een thermisch ondersteuningsapparaat met controle tot volledig herstel, en gebruik Doppler echografie om de patency van de fistel te bevestigen.Op dag zeven na de chirurgische ingreep worden de fistel- en stenosegebieden van het IVC gemakkelijk gedetecteerd in de longitudinale weergave. Bij muizen met een stenose zonder AVF vertoont het stenosesegment een veneuze golfvorm met meer spectrale verbreding dan schijnbare muizen, maar zonder veel pulsatiliteit. Bij muizen met een AVF en een stenose vertoont het stenosesegment een pulsatile golfvorm naast spectrale verbreding, en de tijdgemiddelde maximale snelheid van de stroom bij de stenose bij muizen met een AVF met stenose is aanzienlijk hoger dan bij muizen met stenose alleen.De gemiddelde IVC-diameter bij de stenose bij muizen met stenose alleen is vergelijkbaar met die bij muizen met een AVF en stenose. Bovendien, met behulp van ofwel de upstream of downstream-segment als referentie, het percentage stenose is aanzienlijk groter bij muizen met een AVF in aanvulling op een stenose. Wanneer u de IN-katheter en het IVC aan elkaar bindt, is het belangrijk om ze stevig te binden om een reproduceerbare stenose te creëren.De toepassing van deze procedure op murine veneuze graft implantatie model zou kunnen beantwoorden hoe de occlusie van veneuze graft stenose te overwinnen.

murine-model-central-venous-stenosis-using-aortocaval-fistula-with-an

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Het doel is om een ​​arterioveneuze fistel die is eenvoudig en reproduceerbaar te produceren. Deze methode maakt geen gebruik van hechtingen of lijm lijm. Derhalve kunnen de monsters worden met de minste hoeveelheid vreemde materialen voor analyse.

Technische aspecten van de muis Aortocaval Fistula

We beschrijven een methode waarbij een betrouwbaar model van cerebrale veneuze hypertensie bij volwassen muizen. Dit model wordt algemeen beschreven en getest in de rat. Deze nieuwe tegenhanger in de muizen opent de mogelijkheid om genetische gemodificeerde dieren en daardoor verbreedt de toepassing van het model.

Volwassen muis Veneuze Hypertensie Model: halsslagader op externe halsader Anastomosis.

Histologische en biochemische veranderingen na aneurysma endograft uitsluiting zijn nog onduidelijk. We beschrijven een nieuw model van endograft implantatie op een muizen aneurysma. Door trombus analyse met en zonder hardnekkig circulerende bloed-interface en nieuwe endovasculaire biomaterialen evaluatie, zal dit model helpen om beter te begrijpen endovasculaire aneurysma uitsluiting pathobiology.

Een nieuw muizenmodel van endovasculaire aortaaneurismareparatie

Hier presenteren we een muizenmodel van arterioveneuze fistel (AVF) falen waarin een klinisch relevante anastomotische configuratie is opgenomen. Dit model kan worden gebruikt om de pathofysiologie te bestuderen en mogelijke therapeutische interventies te testen.

A Novel muizenmodel van fistel Failure: de chirurgische procedure in detail

We beschrijven hier stenose in de vena cava inferior als lymfkliertest model van diep-veneuze trombose. Dit model recapituleert bloed stroom beperking, een van de grote trekkers van veneuze trombose bij de mens.

Stenose van de Vena Cava Inferior: een lymfkliertest Model van diep-veneuze trombose

Hier presenteren we een protocol van heterotopische aorta transplantatie in muizen met behulp van de niet-hecht manchet techniek in een cervicale Murine model. Dit model kan worden gebruikt om de onderliggende pathologie van chronische transplantaat vasculopathie (CAV) te bestuderen en kan helpen bij het evalueren van nieuwe therapeutische middelen om de vorming ervan te voorkomen.

Murine cervicaal aorta transplantatie model met behulp van een gemodificeerde niet-hecht manchet techniek

Het huidige protocol is gericht op het experimenteel creëren van veneuze intimale hyperplasie door het onderwerpen van aderen aan arteriële bloeddruk voor het ontwikkelen van strategieën om veneuze intimale hyperplasie te verzachten na revascularisatie chirurgie met behulp van adergrafts.

Een konijn veneuze interposition model nabootsen revascularisatie chirurgie met behulp van ader grafts te beoordelen Intimal Hyperplasie onder arteriële bloeddruk

Dit protocol beschrijft de chirurgische stappen van murine gemeenschappelijke iliacale arterioveneuze fistelcreatie. We hebben dit model ontwikkeld om hemodialyse-toegangsgerelateerde ledemaat pathofysiologie te bestuderen.

Een muizenmodel van hemodialyse toegangsgerelateerde handdisfunctie

Dit protocol presenteert de opstelling en bevestiging van een postnataal rechterventrikelvolume-overbelasting (VO)-model bij muizen met abdominale arterioveneuze fistel (AVF), dat kan worden toegepast om te onderzoeken hoe VO bijdraagt aan de postnatale hartontwikkeling.

Opstelling en bevestiging van een postnataal muismodel met overbelasting van het rechterventrikelvolume

Hier presenteren we een muizenmodel voor anastomose van de dijbeenslagader, en bieden we onderzoekers een waardevol diermodel om vasculaire anastomosestenose te bestuderen en te simuleren. Deze ontwikkeling is cruciaal voor het vergroten van ons begrip van de pathofysiologie die aan deze aandoening ten grondslag ligt en voor het mogelijk maken van nauwkeuriger en effectiever onderzoek naar vaatziekten.

Ontwikkeling van een muizenmodel voor anastomosestenose van de dijbeenslagader

Leer een reproduceerbaar murien model voor centrale veneuze stenose via een aortocavale fistel. Deze techniek bootst het klinische beloop van menselijke AVF na en helpt onderzoekers bij het bestuderen van fistelmaturatiefalen.

Murine model van centraal veneuze stenose met behulp van Aortocaval fistel met een uitstroom stenose

Meer video's verkennen