Name: Fabricage van de Microscoop fase voor verticale observatie met temperatuur regelfunctie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-07-31T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 21 s
Description: Leer hoe u een temperatuurgeregelde microscoopfase voor verticale observatie fabriceert met aluminium platen en een laserbewerkingsmachine. Deze methode maakt het bestuderen van temperatuurafhankelijk gedrag van biologische monsters onder invloed van zwaartekracht mogelijk.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De auteurs hebben geen erkenningen.

<ol><li>Drum, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electron+Microscope+Observations+of+Diatos%5BTitle%5D)+AND+%22Osterreichische+Botanische+Zeitschrift%22%5BJournal%5D)">Electron Microscope Observations of Diatos.</a> Osterreichische Botanische Zeitschrift. 116, 321(1969).</li>
<li>McBride, T. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparing+Random+Distributions+of+Datom+Values+on+Microscope+Slides%5BTitle%5D)+AND+%22Limnology+and+Oceangraphy%22%5BJournal%5D)">Preparing Random Distributions of Datom Values on Microscope Slides.</a> Limnology and Oceangraphy. 33, 1627-1629 (1988).</li>
<li>Liu, X. Y., Lu, Z., Sun, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orientation+Control+of+Biological+Cells+Under+Inverted+Microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE-ASME+Transactions+on+Mechatronics%22%5BJournal%5D)">Orientation Control of Biological Cells Under Inverted Microscopy.</a> IEEE-ASME Transactions on Mechatronics. 16, 918-924 (2011).</li>
<li>Kahle, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+a+Compact%2C+Easy-to-Use+Inverted+Fluorescence+Microscope%5BTitle%5D)+AND+%22American+Laboratory%22%5BJournal%5D)">Applications of a Compact, Easy-to-Use Inverted Fluorescence Microscope.</a> American Laboratory. 43, 11-14 (2011).</li>
<li>Prunet, N., Jack, T. P., Meyerowitz, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+confocal+imaging+of+Arabidopsis+flower+buds%5BTitle%5D)+AND+%22Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">Live confocal imaging of Arabidopsis flower buds.</a> Developmental Biology. , 114-120 (2016).</li>
<li>Nimchuk, Z. L., Perdue, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+Imaging+of+Shoot+Meristems+on+an+Inverted+Confocal+Microscope+Using+an+Objective+Lens+Inverter+Attachment%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Plant+Science%22%5BJournal%5D)">Live Imaging of Shoot Meristems on an Inverted Confocal Microscope Using an Objective Lens Inverter Attachment.</a> Frontiers in Plant Science. 8, 10(2017).</li>
<li>Hedde, P. N., Malacrida, L., Ahrar, S., Siryaporn, A., Gratton, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((sideSPIM+-+selective+plane+illumination+based+on+a+conventional+inverted+microscope%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedical+Optics+Express%22%5BJournal%5D)">sideSPIM - selective plane illumination based on a conventional inverted microscope.</a> Biomedical Optics Express. 8, 3918-3937 (2017).</li>
<li>Crowe, W. E., Wills, N. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+Method+for+Monitoring+Changes+in+Cell+Height+using+Fluorescent+Microbeads+and+an+Ussing-type+Chamber+for+the+Inverted+Microscope%5BTitle%5D)+AND+%22Pflugers+Archiv-Europian+journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">A simple Method for Monitoring Changes in Cell Height using Fluorescent Microbeads and an Ussing-type Chamber for the Inverted Microscope.</a> Pflugers Archiv-Europian journal of Physiology. , 349-357 (1991).</li>
<li>Bavister, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Minichamber+Device+for+Maintaining+a+Constant+Carbon-Dioxide+in+Air+Atmosphere+during+Prolonged+Culture+of+Cells+on+the+Stage+of+an+Inverted+Microscope%5BTitle%5D)+AND+%22In+Vitro+Cellular+%26+Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">A Minichamber Device for Maintaining a Constant Carbon-Dioxide in Air Atmosphere during Prolonged Culture of Cells on the Stage of an Inverted Microscope.</a> In Vitro Cellular & Developmental Biology. 24, 759-763 (1988).</li>
<li>Makler, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+New+version+of+the+10-MU-M+Chamber+and+its+use+for+Semen+Analysis+with+Inverted+Microscope%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Andrology%22%5BJournal%5D)">A New version of the 10-MU-M Chamber and its use for Semen Analysis with Inverted Microscope.</a> Archives of Andrology. 13, 195-197 (1984).</li>
<li>Xu, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Flexible+microassembly+methods+for+micro%2Fnanofluidic+chips+with+an+inverted+microscope%5BTitle%5D)+AND+%22Microelectronic+Engineering%22%5BJournal%5D)">Flexible microassembly methods for micro/nanofluidic chips with an inverted microscope.</a> Microelectronic Engineering. 97, 1-7 (2012).</li>
<li>Datyner, N. B., Gintant, G. A., Cohen, I. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Versatile+Temperature+Controlled+Tissue+Bath+for+Studies+of+Isolated+Cells+using+an+Inverted+Microscope%5BTitle%5D)+AND+%22Pflugers+Archive-+Europian+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Versatile Temperature Controlled Tissue Bath for Studies of Isolated Cells using an Inverted Microscope.</a> Pflugers Archive- Europian Journal of Physiology. 403, 318-323 (1985).</li>
<li>Claudet, C., Bednar, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magneto-optical+tweezers+built+around+an+inverted+microscope%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+Optics%22%5BJournal%5D)">Magneto-optical tweezers built around an inverted microscope.</a> Applied Optics. 44, 3454-3457 (2005).</li>
<li>Yamaoka, N., Suetomo, Y., Yoshihisa, T., Sonobe, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motion+analysis+and+ultrastructural+study+of+a+colonial+diatom%2C+Bacillaria+paxillifer%5BTitle%5D)+AND+%22Microscopy%22%5BJournal%5D)">Motion analysis and ultrastructural study of a colonial diatom, Bacillaria paxillifer.</a> Microscopy. 65, 211-221 (2016).</li>
<li>Apoya-Horton, M. D., Yin, L., Underwood, G. J. C., Gretz, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Movement+modalities+and+responses+to+environmental+changes+of+the+mudflat+diatom+Cylindrotheca+closterium+%28Bacillariophyceae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Phycology%22%5BJournal%5D)">Movement modalities and responses to environmental changes of the mudflat diatom Cylindrotheca closterium (Bacillariophyceae).</a> Journal of Phycology. 42, 379-390 (2006).</li>
<li>Bannon, C. C., Campbell, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sinking+towards+destiny%3A+High+throughput+measurement+of+phytoplankton+sinking+rates+through+time-resolved+fluorescence+plate+spectroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Sinking towards destiny: High throughput measurement of phytoplankton sinking rates through time-resolved fluorescence plate spectroscopy.</a> PLoS One. 12, 16(2017).</li>
<li>Clarkson, N., Davies, M. S., Dixey, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diatom+motility+and+low+frequency+electromagnetic+fields+-+A+new+technique+in+the+search+for+independent+replication+of+results%5BTitle%5D)+AND+%22Bioelectromagnetics%22%5BJournal%5D)">Diatom motility and low frequency electromagnetic fields - A new technique in the search for independent replication of results.</a> Bioelectromagnetics. 20, 94-100 (1999).</li>
<li>Iwasa, K., Shimizu, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motility+of+Diatom%2C+Phaeodactylum-Tricornutum%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Cell+Research%22%5BJournal%5D)">Motility of Diatom, Phaeodactylum-Tricornutum.</a> Experimental Cell Research. 74, (1972).</li>
<li>Edgar, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mucilage+Secretions+of+Moving+Diatoms%5BTitle%5D)+AND+%22Protoplasma%22%5BJournal%5D)">Mucilage Secretions of Moving Diatoms.</a> Protoplasma. 118, 44-48 (1983).</li>
<li>Edgar, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diatom+Locomotion%5BTitle%5D)+AND+%22Computer-Assisted+Analysis+of+Cine+Film+British+Phycological+Journal%22%5BJournal%5D)">Diatom Locomotion.</a> Computer-Assisted Analysis of Cine Film British Phycological Journal. 14, 83-101 (1979).</li>
<li>Iversen, M. H., Ploug, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temperature+effects+on+carbon-specific+respiration+rate+and+sinking+velocity+of+diatom+aggregates+-+potential+implications+for+deep+ocean+export+processes%5BTitle%5D)+AND+%22Biogeosciences%22%5BJournal%5D)">Temperature effects on carbon-specific respiration rate and sinking velocity of diatom aggregates - potential implications for deep ocean export processes.</a> Biogeosciences. 10, 4073-4085 (2013).</li>
<li>Riebesell, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+Sinking+and+Sedimentation-Rate+Measurements+in+a+Diatom+Winter+Spring+Bloom%5BTitle%5D)+AND+%22Marine+Ecology+Progress+Series%22%5BJournal%5D)">Comparison of Sinking and Sedimentation-Rate Measurements in a Diatom Winter Spring Bloom.</a> Marine Ecology Progress Series. 54, 109-119 (1989).</li>
<li>Drum, R. W., Hopkins, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diatom+Locomotion+-+An+Explanation%5BTitle%5D)+AND+%22Protoplasma%22%5BJournal%5D)">Diatom Locomotion - An Explanation.</a> Protoplasma. 62, (1966).</li>
</ol>

De auteurs hebben geen conflicten om te onthullen.

Traject analyse van bewegende diatoom cellen is een nuttige benadering voor het evalueren van de beweeglijkheid van de diatoom. Echter, terwijl een normale omgekeerde Microscoop monsters horizontaal observeert, is het niet geschikt voor observaties van de invloed van de zwaartekracht of zwevende beweging in de verticale richting. Hier ontwikkeld en beschreven is een verticale Microscoop fase met temperatuurregeling en bevestigd aan een omgekeerde Microscoop, die is geroteerd door 90 °. Deze Microscoop fase met temperatuu...

Optische microscopie is een techniek gebruikt om observeerbare details te verhogen via vergroting van een monster met lenzen en zichtbaar licht. In optische microscopie wordt licht op een monster gericht, vervolgens overgebracht, gereflecteerd, of fluorescerende licht wordt opgevangen door vergrootglazen voor observatie. Er zijn verschillende soorten Microscoop beschikbaar die verschillen in ontwerp om tegemoet te komen aan verschillende toepassingen en observatie methoden. De verschillende ontwerpen omvatten een rechtopstaande Microscoop, die is gestructureerd om een monster van onder te verlichten voor observatie van bovenaf, en een omgekeerde Microscoop, die het monster van bovenaf verlicht voor observatie van onderen. Staande microscopen zijn het meest voorkomende en meest gebruikte ontwerp. Omgekeerde microscopen worden vaak gebruikt om monsters te observeren die een lens niet in de verte van bovenaf kunnen sluiten, zoals gekweekte cellen die zich aan de onderkant van een container hechten. Veel onderzoeksgroepen hebben waarnemingen gerapporteerd in een breed scala van velden met behulp van omgekeerde microscopen1,2,3,4,5,6,7. Veel extra apparaten zijn ook ontwikkeld die profiteren van de functies van omgekeerde microscopen8,9,10,11,12,13 .
Momenteel is de Microscoop fase in alle conventionele Microscoop ontwerpen horizontaal en ongeschikt voor het observeren van monsters die beweging in het verticale vlak produceren (door zwaartekracht, drijfvermogen, beweging, enz.). Om deze waarnemingen mogelijk te maken, moeten de Microscoop fase en het lichtpad worden gedraaid naar verticaal. De verticale trap is vereist voor het verticaal monteren van glaasjes of Monsterhouders zoals een Petri schaaltje op het podium. Om dit aan te pakken, is er al een zijwaartse omgekeerde Microscoop gekanteld met 90 ° bedacht. Het bevestigen van samples met tape of andere lijmen geeft echter niet de noodzakelijke langdurige immobiliteit. Hier beschreven is een apparaat dat de nodige stabiliteit kan bereiken. Dit apparaat maakt observatie mogelijk na verloop van tijd van de monster beweging in het verticale vlak. Het monteren van een siliconen rubberen kachel heeft het ook mogelijk gemaakt om de invloed van temperatuur variatie op het monster gedrag te observeren. Temperatuur gegevens worden via Wi-Fi overgebracht naar een Internet server en de temperatuurinstellingen en logboek bewaking kunnen op afstand vanaf een PC of smartphone worden bestuurd. Naar onze kennis is het podium bevestigd aan een zijwaartse gekantelde Microscoop, gekanteld met 90 °, nog niet gemeld in voorgaande studies.
De Microscoop fase bestaat uit drie aluminium platen. De middelste aluminium plaat is gemonteerd op de onderste aluminium plaat die aan het podium wordt bevestigd. Het Silicone rubber met de temperatuursensor is bevestigd tussen de middelste en bovenste aluminium platen. Elastiekjes worden gebruikt om het monster aan te brengen. De klauwen zijn links en rechts vier punten van de bovenste aluminium plaat bevestigd om de elastiekjes te beveiligen. Het controle circuit van de temperatuurregelaar ontvangt een signaal van de temperatuursensor ingebed in Silicone rubber en moduleert elektrische stroom door de Pulsbreedtemodulatie (PWM) methode. De temperatuur kan geleidelijk worden verhoogd tot 50 °C in stappen van 1 °C. Dit apparaat is handig voor toepassingen waarin verticale monster bewegingen afhankelijk van de temperatuur kunnen zijn.
Dit verslag geeft voorbeelden van temperatuureffecten op het drijvende fenomeen van diatomen. Als voorbeelden van diatoom observatiestudies werden metingen van sedimentatie snelheid van celclusters, bewegingsanalyses, ultrafijne structuur studies, etc. gerapporteerd14,15,16,17 , 18 , 19 , 20 , 21 , 22 , 23. de soortelijke zwaarte van diatomen die in water met fotosynthetische organismen zweven, is iets hoger dan dat van water, zodat ze de neiging hebben om te zinken; ze zullen echter stijgen als er zelfs lichte convectie optreedt. Om dit fenomeen te bestuderen, wordt een glazen glijbaan verticaal op een Microscoop-fase aangebracht en worden de effecten van stijgende temperatuur op diatoom verticale beweging waargenomen.

<table><tbody><tr><td>AC-adapter 12V2A</td><td>Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd.</td><td>AD-D120P200</td><td>Tokyo, Japan</td></tr><tr><td>ADS1015 Substraat</td><td>Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd.</td><td>adafruit PRODUCT ID: 1083</td><td>Tokyo, Japan</td></tr><tr><td>Alminium plaat (achterplaat)</td><td>Inovaal Co., Ltd.</td><td>B 150mm&times;L 200?&times;D 1.5mm</td><td>Gifu, Japan</td></tr><tr><td>Alminium plaat (voorplaat)</td><td>Inovaal Co., Ltd.</td><td>B 150mm&times;L 200?&times;D 2mm</td><td>Gifu, Japan</td></tr><tr><td>Alminium plaat (middelste onderste plaat)</td><td>Inovaal Co., Ltd.</td><td>B 150mm&times;L 200?&times;D 4mm</td><td>Gifu, Japan</td></tr><tr><td>Alminium plaat (middelste bovenste plaat)</td><td>Inovaal Co., Ltd.</td><td>B 150mm&times;L 200?&times;D 5mm</td><td>Gifu, Japan</td></tr><tr><td>Aluminium voetstuk (onderste plaat)</td><td>Inovaal Co., Ltd.</td><td>D 100mm&times;D 3mm (30&Phi;)</td><td>Gifu, Japan</td></tr><tr><td>Aluminium voetstuk (bovenste plaat)</td><td>Inovaal Co., Ltd.</td><td>D 100mm&times;D 3mm (30&Phi;)</td><td>Gifu, Japan</td></tr><tr><td>Bold Gemodificeerd basaal zoetwatervoedingsoplossing</td><td>Sigma-Aldrich Co. LLC</td><td>B5282-500ML</td><td>St. Louis, USA</td></tr><tr><td>Controller behuizing</td><td>Marutsu Elec Co., Ltd.</td><td>pff-13-3-9</td><td>Tokyo, Japan</td></tr><tr><td>CPU</td><td>Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd.</td><td>ESP-WROOM-02D</td><td>Tokyo, Japan</td></tr><tr><td>Omgekeerde microscoop</td><td>Olympus Corporation</td><td>CKX 53</td><td>Tokyo, Japan</td></tr><tr><td>Epoxyharskleefstof voor laagtemperaturen</td><td>ThreeBond Co., Ltd.</td><td>TB2086M</td><td>Tokyo, Japan</td></tr><tr><td>Multiturn semi-vast volume Verticaal type 500 &Omega;</td><td>Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd.</td><td>3296W-1-501LF</td><td>Tokyo, Japan</td></tr><tr><td>OLED module</td><td>Akihabara Inc.</td><td>M096P4W</td><td>Tokyo, Japan</td></tr><tr><td>Gedrukte kurk (voor ondersteuning van elektrode)</td><td>Tera Co., Ltd.</td><td>B 42mm&times;L 30?</td><td>Ishikawa, Japan</td></tr><tr><td>Gedrukte kurk (onderste schijf)</td><td>Tera Co., Ltd.</td><td>D 100mm&times;D 0.5mm (20&Phi;)</td><td>Ishikawa, Japan</td></tr><tr><td>Gedrukte kurk (bovenste schijf)</td><td>Tera Co., Ltd.</td><td>D 100mm&times;D 2.5mm (20&Phi;)</td><td>Ishikawa, Japan</td></tr><tr><td>Roterende encoder met schakelaar met 2-kleurig LED</td><td>Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd.</td><td>P-05772</td><td>Tokyo, Japan</td></tr><tr><td>Siliconenrubber verwarming</td><td>Three High Co., Ltd.</td><td>D 100mm&times;D 2.5mm (20&Phi;)</td><td>Kanagawa, Japan</td></tr><tr><td>Substraat</td><td>Seeed Technology Co., Ltd.</td><td>mh5.0</td><td>Shenzhen, China</td></tr><tr><td>Temperatuursensor</td><td>Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd.</td><td>NXFT15XH103FA2B050</td><td>Tokyo, Japan</td></tr><tr><td>Drie-terminal DC / DC-regelaar 3.3 V</td><td>Marutsu Elec Co., Ltd.</td><td>BR301</td><td>Tokyo, Japan</td></tr><tr><td>Universele flexibele arm</td><td>Banggood Technology Co., Ltd.</td><td>YP-003-2</td><td>Hong Kong, China</td></tr><tr><td>USB-kabel USB-A - MicroUSB</td><td>Akizuki Denshi Tsusho Co., Ltd.</td><td>USB CABLE A-MICROB</td><td>Tokyo, Japan</td></tr><tr><td>Videocamera</td><td>Sony Corporation</td><td>HDR-CX590</td><td>Tokyo, Japan</td></tr></tbody></table>

fabricage van de microscoop fase voor verticale observatie met temperatuur regelfunctie

Fabrication of Microscope Stage for Vertical Observation with Temperature Control Function

Monsters worden meestal op een horizontale Microscoop-fase geplaatst voor microscopische observatie. Echter, om de invloed van de zwaartekracht op een monster of studie drijven gedrag te observeren, is het noodzakelijk om de Microscoop fase verticaal te maken. Om dit te bereiken, is een zijwaartse omgekeerde Microscoop gekanteld met 90 ° bedacht. Om monsters met deze Microscoop te observeren, moeten Monsterhouders zoals Petri schalen of glaasjes verticaal op het podium worden vastgezet. Er is een apparaat ontwikkeld dat de Monsterhouders op een verticale Microscoop-fase kan beveiligen en hier wordt beschreven. Bevestiging van dit apparaat aan het werkgebied maakt observatie van de monster dynamiek in het verticale vlak mogelijk. De mogelijkheid om de temperatuur te reguleren met een silicone rubberen kachel maakt ook observatie van temperatuurafhankelijke monster gedragingen mogelijk. Bovendien worden de temperatuur gegevens overgebracht naar een Internet server. Temperatuurinstellingen en logboek bewaking kunnen op afstand vanaf een PC of smartphone worden bediend.

Figuur 2 toont de temperatuurverdeling van de rubberen kachel. De oppervlaktetemperatuur van de rubberen kachel was bij elke temperatuur uniform. Figuur 3 toont de responsiviteit van de gemeten temperatuur om temperatuurveranderingen in te stellen. De oranje lijn toont de ingestelde temperatuur en de blauwe lijn toont de verandering van de monstertemperatuur. De overschrijding van de gemeten waarde naar de instelling verandering ...

Hier gepresenteerd is een protocol met behulp van een temperatuur gecontroleerde Microscoop fase die het mogelijk maakt een monster container te monteren op een verticale Microscoop.

Fabricage van de Microscoop fase voor verticale observatie met temperatuur regelfunctie

Samples are usually placed onto a horizontal microscope stage for microscopic observation. However, to observe the influence of gravity on a sample or ...

Dit apparaat kan worden gebruikt om een monster vast te stellen aan een verticale microscoop stadium om observatie van de invloed van de zwaartekracht en het werken aan het monster van belang. Bevestiging van dit apparaat aan het stadium maakt het mogelijk de monsterdynamiek in het verticale frame te observeren en maakt het mogelijk temperatuurafhankelijk monstergedrag te observeren. Om de aluminium platen te fabriceren, gebruik maken van een laser processing machine om een 101-millimeter gat te snijden in het midden van een 150 door 200 door twee-millimeter aluminium plaat te worden gebruikt als de voorhoede plaat.Maak klauwen op acht punten rond de buitenkant van de plaat om twee elastiekjes te laten aanbrengen over de lengte of de breedte van de plaat. Vervolgens snijd een 130-millimeter gat in het midden van een 150 door 200 door vijf-millimeter aluminium plaat te worden gebruikt als de middelste-bovenste plaat, en maak acht inkepingen om de plaatsing van twee elastiekjes over de lengte of breedte van de plaat mogelijk te maken. Snijd vervolgens een gat van 130 millimeter in het midden van een 150 bij 200 bij 200 bij 200 millimeter aluminiumplaat die als midden-onderplaat moet worden gebruikt, en snijd een gat van 30 millimeter in het midden van een 150 bij 200 bij 1,5 millimeter aluminiumplaat die als basisplaat moet worden gebruikt.Om de sokkels te fabriceren, snijd een gat van 30 millimeter in het midden van een 100 millimeter diameter, drie millimeter dikke aluminium plaat, en maak een 42-millimeter brede door 30-millimeter diepe inkeping aan de ene kant van de plaat. Snijd vervolgens een gat van 30 millimeter in het midden van een aluminium plaat met een diameter van 100 millimeter, vier millimeter dik, en boor drie gaten van drie millimeter 25 millimeter uit het midden van de plaat en 120 graden van elkaar verdeeld. Voor de fabricage van de geperste kurkschijven gebruikt u een waterstraalsnijmachine om een gat van 20 millimeter in het midden van een 100 millimeter diameter, twee millimeter dikke geperste kurkschijf te snijden en een 42 millimeter brede door 30 millimeter diepe en een vier millimeter brede bij vijf millimeter diepe inkeping aan elke kant van de schijf te maken.Snijd vervolgens een gat van 20 millimeter in het midden van een 100 millimeter diameter, een millimeter dikke geperste kurkschijf, en maak een 42 millimeter brede door 30-millimeter diepe en een vier millimeter brede door 40-millimeter diepe inkeping aan elke kant van de schijf. Snijd vervolgens een 42 millimeter brede door 30 millimeter diepe geperste kurkplaat van een schijf met een diameter van 100 millimeter. Om een siliconen rubberkachel te fabriceren, knip een gat van 20 millimeter in het midden van een 100 millimeter diameter, 2,5 millimeter dikke siliconen rubberschijf met een ingebouwde nichrome draad.Stapel vervolgens de gefabriceerde onderdelen zoals aangetoond, de bevestiging van de juiste stukken met schroeven of lijm als dat nodig is. Gebruik een speciale kabel om de rubberkachel en de kachel van de controllercase op te nemen om de microscoopfase aan te sluiten op het systeem en gebruik de controller om een Wi-Fi-signaal uit te rusten en de stroom van de rubberkachel te regelen. Sluit na het bouwen van het systeem de thermistordraad aan op de sensorterminal op de controllercase en ontvang het temperatuursignaal gemeten door de thermistor.Gebruik de knop op de controller om de ingestelde temperatuur te wijzigen. Breng vervolgens de gemeten temperatuur, ingestelde temperatuur en tijdsinformatie bij het meten van de controller naar de server via het internet. Om het monster te analyseren, plaats het monster op de microscoop stadium loodrecht op het grondoppervlak, en gebruik de vier in de lengte klauwen om het monster te beveiligen met twee elastiekjes.Gebruik de controller om de temperatuur in te stellen op 40 graden Celsius en controleer de temperatuur op het display. Druk vervolgens op de knop om de temperatuurregeling te starten. De blauwe LED licht op, wat de start van de warmtetoevoer aangeeft.In deze cijfers worden representatieve temperatuurverdelingen van de rubberkachel weergegeven. De oppervlaktetemperatuur van de rubberkachel was bij elke temperatuur uniform. Hier wordt een voorbeeld getoond van de reactiesnelheid van de gemeten temperatuur om de temperatuurveranderingen in te stellen.De oranje lijn geeft de ingestelde temperatuur aan en de blauwe lijn geeft de verandering van de monstertemperatuur weer. Als de apparatuur correct is geassembleerd, is de overschrijding van de gemeten waarde voor de instellingswijziging doorgaans klein en is de tracking snel. In dit experiment werd de temperatuurafhankelijke verticale beweging van diatomeeën met succes geregistreerd, waardoor de locus van de verticale beweging van de diatomeeën kon worden gedetecteerd.De effecten van thermische convectie op het verticale zwevende fenomeen van de diatomeeëncellen kunnen dan worden gevisualiseerd door directe observatie. Wanneer de sensor is losgekoppeld van het monster of als de microcontroller niet goed werkt, controleert u of de stroom naar de kachel van de microcontroller is afgesneden. Met behulp van deze methode kan het effect van temperatuurveranderingen op de verticale beweging van een organisme in water worden waargenomen.Aangezien de structuur van het deel van de fase dat zich aan de microscoop hecht ingewikkeld is, zullen toekomstige studies de vereenvoudiging van die structuur aanpakken. Om monsters te koelen tot lager dan kamertemperatuur vereist een ingewikkeld koelapparaat dat ook in overweging is voor toekomstige werkzaamheden.

fabrication-microscope-stage-for-vertical-observation-with

Research

JoVE Journal

Engineering

Techniek

Tonen we de fabricage van een low-cost cryogene trap is ontworpen om de meeste gereflecteerde licht microscopen te passen. Dit lab-built cryogene stage maakt een efficiënte en betrouwbare correlatieve beeldvorming tussen de cryo-licht-en cryo-elektronenmicroscopie.

Low-Cost Cryo-Light Microscopie Stage Fabrication voor Gecorreleerde Light / Electron Microscopy

We presenteren een compact reflectie digitale holografische systeem (CDHM) voor inspectie en karakterisering van MEMS. Een lens-less ontwerp met behulp van een divergerende ingang golf verstrekken van natuurlijke geometrische vergroting wordt aangetoond. Zowel statische als dynamische studies worden gepresenteerd.

Compact Lens-less Digitale Holografische Microscoop voor MEMS Inspectie en karakterisering

Beschrijven we het proces van fabricage en beproeving van fotonische thermometers.

Fabricage en beproeving van fotonische Thermometers

Een gedetailleerde instructies wordt beschreven op het bouwen van een sterk geneigd geveegd Tegel (HIST.) Microscoop en het gebruik ervan voor single-molecuul imaging.

Een gids voor het bouwen van een sterk geneigd geveegd tegel Microscoop voor uitgebreide veld-of-view Single-molecuul Imaging

In dit manuscript wordt de implementatie beschreven van een gestimuleerde Raman verstrooiing (SRS) Microscoop, verkregen door de integratie van een SRS experimentele opstelling met een laser scanning microscoop. De SRS-Microscoop is gebaseerd op twee femtosecondelaser (FS) laserbronnen, een TI-Sapphire (TI: SA) en gesynchroniseerde optische parametrische oscillator (OPO).

Implementatie van een niet-lineaire Microscoop op basis van gestimuleerde Raman verstrooiing

In dit werk beschrijven we een techniek die wordt gebruikt om nieuwe kristallen (van der Waals heterostructures) te maken door het stapelen van ultradunne gelaagde 2D-materialen met nauwkeurige controle over positie en relatieve oriëntatie.

Van der Waals Heterostructures met precieze rotatie uitlijning

Het doel van dit protocol is om temperatuur te gebruiken om de stroomsnelheden van driedimensionale actieve vloeistoffen te regelen. Het voordeel van deze methode maakt het niet alleen mogelijk om stroomsnelheden in situ te reguleren, maar maakt ook dynamische controle mogelijk, zoals periodiek afstemmen van stroomsnelheden op en neer.

Controle van de stroomsnelheden van 3D-actieve vloeistoffen op basis van microtubulus met behulp van temperatuur

We rapporteren een stage-top, flexibele omgevingskamer voor time-lapse beeldvorming van levende cellen met behulp van rechtop gestimuleerde Raman-verstrooiingsmicroscopie met verzonden signaaldetectie. Lipidedruppeltjes werden afgebeeld in SKOV3-cellen behandeld met oliezuur gedurende maximaal 24 uur met een tijdsinterval van 3 minuten.

Een flexibele kamer voor time-lapse live-cell imaging met gestimuleerde Raman-verstrooiingsmicroscopie

Dit protocol beschrijft de constructie van een goedkoop, discreet, vezelgekoppeld en lucht-gespreid Fabry-Perot etalon met verschillende toepassingen, zoals in trace-gas spectroscopie. De fabricage is mogelijk in elke faciliteit met standaard optische laboratoriumapparatuur beschikbaar.

Fabricage van een goedkope, vezelgekoppelde en lucht-gespreide Fabry-Pérot Etalon

Dit artikel beschrijft protocollen voor het bouwen en bedienen van een koeltrap om C. elegans massaal op hun oorspronkelijke teeltplaten te immobiliseren.

Assemblage en werking van een koelfase om C. elegans op hun kweekplaten te immobiliseren

Dit protocol beschrijft in detail hoe een fluorescentiemicroscoop met één objectief en lichtvel kan worden gebouwd en hoe deze kan worden gebruikt voor het visualiseren van cytoskeletnetwerken.

Ontwerp en bouw van een aanpasbare, single-objectief, light-sheet fluorescentiemicroscoop voor de visualisatie van cytoskeletnetwerken

Leer hoe u een temperatuurgeregelde microscoopfase voor verticale observatie fabriceert met aluminium platen en een laserbewerkingsmachine. Deze methode maakt het bestuderen van temperatuurafhankelijk gedrag van biologische monsters onder invloed van zwaartekracht mogelijk.

Fabricage van de Microscoop fase voor verticale observatie met temperatuur regelfunctie

Meer video's verkennen