Het bestuderen van Linker Ventriculaire Omgekeerde Remodeling door Aorta Debanding in Knaagdieren

Aorta Debanding is een nuttig experimenteel model voor het bestuderen van myocardomkering bij knaagdieren en voor een opzwepend nieuw inzicht in de mechanismen van cardiomyocytenregressie en isolisch functioneel herstel. Dit metaal vergemakkelijkt de evolutie van critique reverse modeling in VIVO en het verzamelen van biologische monsters voor in-vitro- en moleculaire studies op verschillende tijdstippen tijdens de ziekteprogressie. Deze techniek bootst de progressie van myocardremodellering en omgekeerde remodellering na en maakt het mogelijk om de mechanismen van onvolledig myocardherstel te verkennen.

Dit protocol geeft inzicht in de mechanismen en de lijn volledige en onvolledige myocard omgekeerde remodellering in chronische druk overbelasting gerelateerde pathologieën zoals oog pretentie of aorta stenose. Sluit de orotracheale buis aan op de ventilator om de mechanische ventilatie te starten en stel de ventilator in op een frequentie van 160 ademhalingen per minuut en een getijdevolume van 10 milliliter per kilogram. Voordat u met de bandprocedure begint, bevestigt u een gebrek aan reactie op pijnreflex in een zes tot acht weken oude C57 zwarte zesmuis, scheert en breng ontharingscrème aan van de halslijn tot het midden van de borsthoogte van de muis en breng zalf aan op de ogen van het dier.

Plaats een rectale sonde en de oximeter voor het bewaken van de temperatuur bloed oxygenatie en hartslag. Plaats de muis in de rechter laterale decubitus op een verwarmingskussen en plak de ledematen vast aan het magnetische fixatorterugtreksysteem om het dier tijdens de procedure in de juiste positie te houden. Desinfecteer vervolgens de borstkas met opeenvolgende 70% alcohol en povidone-jodiumoplossing en open de huidspier en ribben om de band naar de aorta uit te voeren.

Breng aan het einde van de procedure povidone-jodiumoplossing aan op de plaats van de huid hechting en dien analgesie tweemaal daags toe gedurende twee tot drie dagen, injecteer vervolgens steriele zoutoplossing intraperitoneale Lea om uitdroging te voorkomen in gevallen van significante bloedingen tijdens de operatie en plaats het dier in een couveuse met monitoring tot volledig herstel. Zeven weken na de banderolleren operatie, voorzichtig ontleden aan de weefsels, hechting en fibrose rond de aorta in de helft van de gestreepte dieren totdat de vernauwing zichtbaar wordt. Ontleed de aorta voorzichtig en scheid de hechtdraad van het vat en gebruik vervolgens een schaar om de hechtdraad te knippen.

Merk op dat een langdurige occlusie van het ax indigo water tijdens binding of demonisch kan leiden tot longoedeem, een overmatige activering van ontstekingsroutes. Sluit de borstwand met een eenvoudige onderbroken of continue zes oude polypropyleen hechtingen met behulp van het minimum aantal mogelijke hechtingen en sluit de huid met een zes O zijde polypropyleen hechtdraad in een continu hechtpatroon en voer vervolgens de postoperatieve zorg uit zoals aangetoond. Verwijder om de twee tot drie weken na de operatie de vacht van de neklijn naar het midden van de borst, zoals aangetoond, en plaats het dier op een verwarmingskussen in de liggende positie Plaats ECG-elektroden op de blootgestelde huid en bevestig de aanwezigheid van een goed ECG-spoor en een hartslag tussen 300 en 350 slagen per minuut.

Controleer de temperatuur en breng echogel aan op het borstgebied. Plaats de muizen in dorsale ligfiets lichtjes naar rechts gedraaid en start de echocardiografie met behulp van de juiste instellingen. Plaats vervolgens een ultrasone sonde over de thorax en beoordeel de drukgradiënt over de aorta.

Neem tweedimensionale geleide beelden van de aorta op die de aan- of afwezigheid van de oplopende aortavernauwing laten zien om de effectiviteit van de banderolleren en debanding anatomisch te visualiseren. Om de hypertrofie te beoordelen, plaatst u de sonde op een korte as van de linkerventrikel op papillair spierniveau en drukt u op de modustraceringsknop om de linker ventrikel voorwand, linkerventrikeldiameter en linkerventrikel posterieure wand in diacetyl en systole te visualiseren. Beoordeel vervolgens de systolische functie en bereken de ejectiefractie en fractionele verkorting volgens standaardprotocollen.

Om de diastolische functie te beoordelen, bepaalt u de piek van de postgolf Doppler van de vroege en bladmitrale stroomsnelheid met behulp van een atypisch vierkamerzicht net boven de mitralisfolders en registreert u de laterale mitralis-ringvormige vroege diastolische en piek systolische snelheden met behulp van postweefsel dopplerbeeldvorming en het apicale vierkamerzicht. Het succes van aortavernauwing kan worden geverifieerd door een verhoogde linkerventrikel en systolische druk. En door Doppler aorta stroomsnelheden groter dan 2,5 meter per seconde.

In vergelijking met Sham geopereerde dieren, buigen geïnduceerde linker ventrikel hypertrofie wordt aangetoond door een toename van de linker ventrikel massa en een verminderde diastolische functie zoals blijkt uit een hogere vuldruk en linker ventriculaire eind diastolische druk. Histologisch veroorzaakt zeven weken aortabanding significante cardiomyocytenhypertrofie en fibrose. In mijn onderworpen aan debanding, als succesvolle verwijdering van de aorta stenose kan worden geverifieerd door echo Doppler snelheden.

Algehele debanding bevordert een significante afname van de nabelasting en de linkerventrikelhypertrofie beoordeeld door LV-massa. Bovendien wordt ook een normalisatie van de diastolische functie waargenomen. Wanneer je het zorgvuldig speelt, is het vermijden van langdurige ethische collusie om te garanderen dat de zuurstoftoevoer in het bloed boven de 90% blijft Dit minimummodel stelt ons in staat om mijn hartremodellering te bestuderen en de remodellering op verschillende tijdstippen van de ziekteprogressie om te keren en zelfs de meest ontregelde paden op elk moment wakker te maken.

Deze procedure maakt het mogelijk om het therapeutische potentieel van veelbelovende geneesmiddelen te beoordelen en om de impact van verschillende co-morbiditeiten in myocard reverse remolding en herstel te bestuderen.