Analyse van leren en geheugen vermogen in een ziekte van Alzheimer muis model met behulp van de Morris water Maze

Het Morris Water Maze, of MWM experiment, is uitgegroeid tot de meest gebruikte en klassieke gedragsexperiment om het ruimtelijk leren en geheugen vermogen van dieren te evalueren. Hoewel er veel artikelen over MWM, in de praktijk, onderzoekers nog steeds het gevoel verward. Daarom is deze intuïtieve en rigoureuze procesvideo bijzonder belangrijk.

We eerder uitgevoerd MWM-gebaseerde studie, suggereerde dat acupunctuur symptomen van AD model muizen kan verlichten. Hierin introduceren we het werkingsprotocol van MWM dat in onze recente studies wordt gebruikt om onderzoekers een eenvoudige en zichtbare methode te bieden om het ruimtelijk leren en het geheugen van AD-modeldieren te beoordelen. MWM is een krachtige techniek om cognitieve functie te beoordelen en wordt veel gebruikt in studies.

Er zijn echter geen gedefinieerde of standaardparameters om de taak uit te voeren, zoals de grootte van de groep en het platform. Dus, echte demonstratie van de methode is van cruciaal belang. Begin met het opzetten voor de Morris Water Maze of MWM test volgens manuscript richtingen.

Het MWM-apparaat en het signaalverwervings- en verwerkingssysteem moeten zich bevinden in een experimentruimte die is ontworpen om geluidsisolatie te behouden. Een ronde witte tank omgeven door een ondoorzichtige doek moet worden geplaatst in het midden van de MWM-apparaat. Een videocamera moet aan het plafond van het apparaat worden bevestigd en met een geautomatiseerd volgsysteem worden aangesloten op een videorecorder.

Verdeel de waterdoolhoftank in vier gelijke gebieden met behulp van lijnen met het label noord, zuid, oost en west, die conceptueel het zwembadoppervlak in vier kwadranten zullen verdelen. Plaats vervolgens een unieke visuele cue op de muur van elk kwadrant in het zicht van de muis. Vul de ronde tank met water voor een diepte van 30 centimeter, En voeg 150 gram melkpoeder aan het water om het ondoorzichtig te maken.

Om de proef visible platform uit te voeren, plaatst u een plastic cirkelvormig platform een centimeter boven het wateroppervlak in willekeurig kwadrant en plaatst u er een zwarte vlag op. Laat elke muis voorzichtig los in het water van een van de vier startlocaties tegenover de tankwand. Activeer het computertrackingprogramma zodra de muis in het water wordt losgelaten en geef elke muis 60 seconden om het platform te bereiken.

Plaats aan het einde van elke proefversie de muis op het platform en laat hem 10 tot 30 seconden blijven. Observeer de zwembanen van de muizen op de computer. Nota van de tijd die de muis nodig had om het platform te vinden als vluchtlatentie en analyseer de zwemsnelheid van de muis.

Droog vervolgens de muis met handdoeken en verwarm deze met een elektrische kachel. Verplaats het platform en voer vier proeven per muis uit, waarbij een muis in een ander kwadrant wordt gestart. Laat de muis tussen elke proef gedurende 15 tot 20 minuten herstellen.

Om de Hidden Platform-proef uit te voeren, plaatst u hetzelfde platform zonder vlag in het zuidoostenkwadrant. Plaats de muis vervolgens willekeurig in een van de vier kwadranten en geef hem 60 seconden om het verborgen platform te vinden. Als de muis het platform niet in 60 seconden kan vinden, leid het dan naar het platform en laat het 10 tot 30 seconden staan.

Neem de vluchtlatentie van elk proces op. Droog de muis met handdoeken, en houd het warm met een elektrische kachel. Voer vier proeven per muis uit met 15 tot 20 minuten tussen elke proefversie, waarbij de muis telkens in een ander kwadrant wordt gestart.

Herhaal de proeven gedurende vijf opeenvolgende dagen met het platform en visuele aanwijzingen op constante posities. Verwijder het platform om de Probe-proef uit te voeren en plaats de muis in het water tegenover de tankwand in het noordwestelijke kwadrant. Record zijn zwemafstand, snelheid, en platform crossover nummer.

Droog de muis als u klaar bent en houd hem warm. Om de Reverse-proef uit te voeren, plaatst u het platform in het noordwestenkwadrant en herhaalt u de Hidden Platform-proef. Dit protocol werd gebruikt om de effecten van Handmatige Acupunctuur of MA op het leren en geheugen van muizen met de ziekte van Alzheimer te onderzoeken.

Voor de MA-groep begon de behandeling 15 dagen voor het MWM-testen en werd de hele 11 testdagen voortgezet. Tijdens de Visible Platform test op de eerste dag van MWM werden geen statistische verschillen waargenomen in de vluchtlatentie of zwemsnelheid tussen de groepen. Tijdens het Hidden Platform and the Reversal-onderzoek bleef de vluchtlatentie van de ziekte van Alzheimer of de AD-groep hoog, terwijl de latentie van de andere drie groepen geleidelijk afnam.

Belangrijk is dat de vluchtlatentie van de MA-groep korter was dan die van de AD-groep. Tijdens de Probe-studie was het platformoversteeknummer van muizen in de MA-groep lager dan dat van de controlegroep, maar aanzienlijk hoger dan dat van de AD-groep. Bovendien was het percentage tijd dat de MA-muizen in het kwadrant doorbrachten waar het platform zich eerder bevond vergelijkbaar met de drugsgroep, die minder dan controle was, maar groter dan AD. Het is belangrijk om te onthouden dat als de muis het platform niet in 60 seconden kan vinden, de onderzoeker het naar het platform moet leiden en het 10 tot 30 seconden moet laten blijven.

Er zijn geen specifieke normen voor afmetingen van het zwembad en platform grootte. Deze parameters moeten in voorlopige experimenten worden geoptimaliseerd volgens de experimentele eisen en de toestand van de proefdieren. De meeste studies moeten worden uitgevoerd op basisexperimenten zoals MWM.

Momenteel ligt de flexibiliteit van MWM als experimenteel instrument alleen in de mogelijkheid om de basisprotocollen te kiezen volgens de voorgestelde studie, en daarom kan deze test worden toegepast om de cognitieve functie dieper te beoordelen.