October 3rd, 2019
Microplate ondersteunende Pipetteer Lichtstraler (M.A.P.L.E.) is een computergestuurd apparaat dat systematisch de micro titer putten verlicht om richtlijnen te geven voor de handmatige bereiding van microplaten. M.A.P.L.E. verbetert de nauwkeurigheid van microplaat voorbereiding tijdens het automatiseren van gegevens administratie. Daarnaast kan het helpen met het onderzoeken van de kwaliteit van de microplaat of hulp bij het opsporen van fouten.
Traditionele handoverdracht methoden van bulk reagentia in microtiter platen zijn traag en gevoelig voor menselijke fouten. Deze technologie verdubbelt meer dan de efficiëntie van het proces en helpt die fout te elimineren. Deze techniek kan gebruikers helpen bij het begrijpen van bewerkingen die in microplaten worden uitgevoerd, de kans op fouten te verminderen en de efficiëntie van de gebruiker te verhogen tijdens handmatige pipettingbewerkingen.
Deze techniek zal een positieve invloed hebben op de resultaten in preklinische en klinische omgevingen door fouten te verwijderen en te verminderen die duur en zelfs levensbedreigend kunnen zijn als ze niet worden gecorrigeerd. Dit open source systeem kan eenvoudig worden aangepast voor andere toepassingen, zoals microplate kopie inspecties, om inconsistenties in compound of bioassay plaatsing te elimineren, voor chemie en biologische behoeften. Het aantonen van de monster overdracht procedure zal Lina Deluca, een Compound Manager van de lead identificatie laboratorium.
Als u een semi-geautomatiseerde plaat-op-plaat monsteroverdracht wilt instellen, gebruikt u een bewerkingstoepassing voor spreadsheets om een CSV-bestand te genereren dat bron- en doelplaten bevat, waarbij de streepjescode van de kolommenbron, de doelcode, de bronbron goed, de doelbron en het overdrachtsvolume worden gelabeld. Neem onder de kolommen één rij in het bestand op voor elke gewenste pipettingbewerking die de alfa-numerieke streepjescode van de bronspatsorf aangeeft, als er een is, de alfa-numerieke streepjescode van het doelmicroplate, als er een is, de alfa-numerieke rij en kolom-id voor de put die in de bronplaat moet worden gepipeteerd, de alfa-numerieke rij en kolom-id voor de put die vanaf de doelplaat moet worden gepipeteerd , en het volume dat moet worden overgebracht van de bron goed in de bron barcode kolom, naar de bestemming goed in de bestemming barcode. Open het Light Guide Program om het microplate assistive pipetting light emitter plate-to-plate grafische user interface applicatie te openen en klik op Cherrypick-bestand selecteren.
Open in het venster van de bestandsbrowser het CSV-bestand. De toepassing ontleedt de eerste rij van het CSV-bestand en verlicht de bijbehorende putten in de bron- en bestemmingsplaten. Gebruik de vorige put"en Volgende goed"-knoppen om het CSV-bestand naar wens te doorkruisen.
De grafische gebruikersinterface markeert in het grijs alle rijen die eerder zijn verlicht en markeert in het bruin de momenteel actieve rijen. Voer de pipetbewerkingen uit wanneer dat nodig is om monsters tussen de bronput van de bronplaat over te brengen naar de bestemmingsput van de bestemmingsplaat. Naast de gebruikersinterface kunnen de barcodes van de plaat worden geverifieerd via de LCD-schermen die aan de verlichtingspanelen zijn bevestigd.
Klik vervolgens op Volgende goed"om door te gaan tot het einde van het CSV-bestand is bereikt. Als u een nieuw CSV-bestand wilt laden, klikt u op Elk gewenst moment op Cherrypick-bestand selecteren. Als u het programma wilt afsluiten, klikt u op de rode X in de rechterbovenhoek van de interface.
Open voor multi-well verlichting de microplate assistive pipetting light emitter serial delution application en geef de gewenste titratiemodus, plaatdichtheid en start rijen of kolommen. Gebruik de knoppen Volgende en Vorige om door de rijen of kolommen in volgorde te navigeren vanaf de eerste startrij of kolom tot de laatste rij of kolom in de plaat. Elke keer dat op de knop Volgende of Vorige wordt geklikt, verlicht het lichtpaneel de bijbehorende LED's over de microplaat.
Ga door tot het einde van de titratiereeks is bereikt voordat u het programma verlaat. Om een test visueel te simuleren, plaatst u een microplaat in de draagbare lichtgeleider. De lichtgeleider bevat een batterij en alle elektronica die nodig is om onafhankelijk van een computer te worden gebruikt om de handleiding te kunnen gebruiken in een handheld-modus die kan worden bediend met ingebouwde drukknoppen om tussen demonstratiemodi te schakelen.
Gebruik de schakelaar voor de schakelaar voor de draagbare lichtgeleider om het systeem van stroom te voorzien en selecteer de juiste draagbare lichtgeleidermodus voor het experiment. Gebruik in de demomodus high-throughput screening de juiste drukknopknop aan de bovenkant van de draagbare lichtgeleider om door de voorbeeldverlichtingspatronen te schakelen. De putten verlicht met rode kleur simuleren het reagens afzien van een test, bijvoorbeeld, cellen opgehangen in de media.
De putten verlicht met de gele kleur simuleren detectie reagens toevoeging. Vervolgens wordt een excitatielichtbron gesimuleerd waarbij alle putten blauw worden, gevolgd door simulatie van uitgezonden licht. De eerste en laatste kolom van putten worden verlicht in het groen, en de middelste monster veld kolommen zijn verlicht in het blauw om aan te geven dat de plaat wordt gelezen op een microplate lezer.
Willekeurige putten in het monsterveld hebben ook een groene kleur van verschillende intensiteit om hits te vertegenwoordigen. Als u de lichtgeleider wilt schakelen tussen de demomodus voor hoge doorvoerscreening en de demomodus titratie, drukt u op de linker drukknopschakelaar. Wanneer de lichtgeleider de titratiedemomodus ingaat, worden alle putten in de kolommen drie en 13 verlicht met de gele kleur.
Als u op de meest rechtse drukknopknop drukt, worden de volgende kolommen achter elkaar verlicht. Wanneer de drukknop wordt ingedrukt nadat de kolommen 12 en 22 zijn bereikt, worden de putten in de kolommen vier tot en met 12 en 13 tot en met 22 verlicht in een afnemende intensiteit van geel om de titratie weer te geven. Voor artefactverlichting plaatst u de microplaat in de draagbare lichtgeleider en drukt u twee keer op de linker-meest drukknopschakelaar om de lichtgeleider in de verlichtingsmodus te schakelen.
Gebruik de juiste drukknop om te schakelen tussen een set vooraf gedefinieerde kleuren die nodig zijn voor de toepassing. Het lichtpaneel zet alle LED's in rood, blauw, groen, oranje, wit, violet, geel en indigo in volgorde met elke druk op de rechterknop. Optioneel kan een camera of smartphone worden gebruikt om de verlichte plaat te fotograferen voor het bijhouden van gegevens of documentatie van het werk.
De overdracht van monsters tussen platen en het prepareren van een seriële verdunning kan worden bereikt zonder de zorg van afleiding of het uit het oog verliezen van wat pipetting operaties blijven. Het MAPLE-platform kan worden gebruikt om de microplaat te verlichten om potentiële artefacten te identificeren, zoals neerslag, lege putten, gedeeltelijk gevulde putten of luchtbellen. Gebruikers kunnen dan maatregelen nemen om monsters te verbeteren voordat ze worden verstrekt aan downstream laboratoriumprocessen.
In dit representatieve experiment bestond de werklijst uit 49 pipettingbewerkingen van twee 384-well source microplates met een willekeurig assortiment gekleurde kleurstoffen die Jove in een enkele 384-put bestemmingsmicroplate spellen. De lay-out van de putten in de bestemmingsplaat bevestigt dat de gebruiker in de juiste putten is gepipeteerd. Het kleurpatroon van de putten in de doelplaat kan worden gebruikt om fouten te identificeren waarvoor de gebruiker niet uit de juiste put van de bronplaten heeft gepipet.
De resultaten van deze head-to-head-test laten een gemiddelde tijdsbesparing van 50% zien wanneer gebruikers deze test hebben uitgevoerd met BEHULP van MAPLE versus een offline afgedrukte werklijst. Verder was het foutenpercentage van de platen gemaakt met maple 0%voor alle gebruikers, terwijl een 6% foutenpercentage werd waargenomen voor een beginnende gebruiker met behulp van een werklijst voor de monster voorbereiding taak. Drug synergie formuleringen vereisen een 2D-matrix preparaat op basis van een seriële verdunning per kolom voor de eerste drug en een seriële verdunning per rij voor het tweede medicijn.
We onderzoeken het gebruik van LED-lichtpanelen om microdroplet dispensing te verlichten. Door led-licht te besstroppen, kunnen we beelden van vloeibare monsters vastleggen voor kwaliteitscontrole en -analyse. Dit instrument kan de blootstelling van een gebruiker aan gevaarlijke stoffen en agentia verminderen door de interactietijd te beperken en het juiste gebruik van reagens te vergemakkelijken.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
De Microplate Assistive Pipetting Light Emitter (M.A.P.L.E.) is een computergestuurd apparaat dat is ontworpen om de handmatige voorbereiding van microplates te verbeteren. Door microtiterputjes systematisch te verlichten, verbetert M.A.P.L.E. de nauwkeurigheid en automatiseert het het bijhouden van gegevens, waardoor menselijke fouten aanzienlijk worden verminderd.
Manual microplate preparation in early discovery workflows is prone to human error, particularly as well density increases, impacting data integrity and compound tracking. The M.A.P.L.E. system addresses this by providing visual guidance for pipetting operations, reducing errors and improving efficiency in assay setup and quality control. This supports predictive confidence in hit-picking and serial dilution workflows critical to lead identification and preclinical progression.
The M.A.P.L.E. system integrates into early discovery workflows by improving the accuracy and reproducibility of manual microplate operations that precede automated screening or lead optimization.