Nest Building Behavior als een vroege indicator van gedrags tekorten bij muizen

Nestgedrag is een nuttige manier om activiteiten van het dagelijks leven in wilde en transgene muizen te beoordelen. Het is vooral handig bij het documenteren van cognitieve achteruitgang in neurodegeneratie over de levensduur. Deze techniek is een economische eenvoudige en elegante beoordeling van de dagelijkse levende activiteiten in muizen.

Het kan ook worden uitgevoerd in een korte periode van tijd met minimale training. In ons laboratorium raden we versnipperd papier aan, omdat papier consistentere resultaten oplevert. Pilot studies kunnen echter worden uitgevoerd om te bepalen welk materiaal het beste past bij uw doelen en uw budget.

In een aparte testruimte, stel de omgevingsomstandigheden, zodat ze consistent zijn in proeven en zijn identiek aan de behuizing kamer, en bieden voedsel, en water aan de kooien addlibitum. Wijs elke muis een willekeurig identificatienummer of een willekeurige letter toe. En neem de originele dier-ID en andere noodzakelijke identificatie in een kolonie record om ervoor te zorgen dat de assistenten en veeteelt personeel blind blijven voor de voorwaarden.

Bestel willekeurig de kooiplaatsing in de testruimte, zodat de wildtype en transgene muizen niet ten onrechte worden gescheiden. En bedek de bodem van elke kooi met 100 gram droog gewicht van maïskolf beddengoed voor het vierkant, twist, en versnipperd papier proeven. En 100 gram zachte kolf beddengoed voor de zachte kolf proeven.

Dan, net voor de invoering van een muis aan een kooi, plaats een enkele geperste katoenen vierkant, een enkele papieren twist, geen extra materiaal toegevoegd aan de zachte kolf beddengoed, of 2,5 gram schoon versnipperd wit printer papier gesneden in vijf tot zeven centimeter strips. Op hetzelfde moment van de dag, aan het begin van de lichtcyclus, breng de thuiskooi met de muizen in de testruimte. En breng elke muis in zijn toegewezen nestkooi met het materiaal al in de kooi.

Wanneer alle muizen zijn geplaatst, breng de kooien terug naar de woonkamer en laat de muizen de proef 24 uur ongestoord voltooien. Verwijder aan het einde van de proef voorzichtig het deksel van elke kooi. En wanneer elke muis van het nest is afgestapt, fotografeer dan elk nest dat de toegewezen ID op de foto vastlegt en het uiterlijk van materialen buiten de kooi minimaliseert.

Wanneer elk nest is gefotografeerd, breng elke muis voorzichtig over in individuele tijdelijke kooien. En begeleid het beddengoed en eventuele nestmaterialen uit elke kooi. Vervang vervolgens het beddengoed, zorg voor het volgende nestmateriaal in de reeks.

En breng de muis terug naar de nestkast. Wanneer alle proeven zijn voltooid, terug de muizen naar hun huis kooien en observeren van de muizen voor eventuele agressief gedrag. Om de betrouwbaarheid van de interrede te behouden, worden voor elk nestmateriaal basislijnafbeeldingen verstrekt aan ten minste twee personen die blind zijn voor de studie.

En bieden een reeks van monster nesten om de scorers vertrouwd te maken met elk type materiaal. Bij het scoren van de nesten, een score van een moet worden toegewezen wanneer de versnipperd papier of kleine vierkantjes blijven verspreid over de kooi, of het katoenen vierkant of twist blijft onaangeroerd. Een score van twee wordt toegekend wanneer een deel van het materiaal in een nest is geconstrueerd, maar meer dan 50% van het materiaal is niet gebruikt voor de nestconstructie.

Een score van drie wordt toegekend wanneer een merkbaar nest wordt geconstrueerd, maar verschillende stukken zijn nog steeds verspreid. Een score van vier wordt toegekend wanneer bijna al het materiaal wordt gebruikt voor het nest, maar een paar stukken materiaal blijven verspreid of zijn in de buurt van het nest. Een score van vijf wordt toegekend wanneer bijna al het materiaal wordt gebruikt om een niet-identificeerbaar nest te maken.

Laat de scorer een pauze nemen en opnieuw basislijn foto's om vermoeidheid en bias te voorkomen tijdens de scoring procedure als dat nodig is. Wanneer alle kooien zijn gescoord, voert u de scores in en formateert u het gegevensbestand om in een lang formaat te zijn, zodat de scores van dieren in afzonderlijke kolommen staan. In deze representatieve analyse van alle vier de geleverde materialen scoorden wildtypemuizen hoger op de nestkwaliteit in vergelijking met APOE e4-muizen.

Met versnipperd papier beoordeeld aanzienlijk hoger in kwaliteit dan het vierkant, beddengoed, of draai materialen. Zonder verschillen waargenomen tussen het vierkant, beddengoed, en draai materialen. Bovendien bouwen de 5,5 maanden oude gemuteerde dieren in dit experiment met htau-muizen een nesten uit versnipperd papier dat aanzienlijk het slechtst was dan die welke door hun leeftijd waren gemaakt, overeenkomend met wildtype tegenhangers.

Scores moeten blind blijven voor de experimentele omstandigheden en de scorecriteria bekijken. Met de conclusies die goed en geldig moeten zijn, moeten ook de inter- en intra-raterreabiliteiten worden beoordeeld. Graven en Circadian wheel running zijn twee andere gemeenschappelijke manieren van de beoordeling van activiteiten van het dagelijks leven.

En ze kunnen dienen om het nestgedrag te complimenteren. Nesting kan worden gebruikt als een bijkomende beoordeling om mogelijke daling van cognitie te voorspellen, het verbreden van de adem van gedragsbeoordelingen in combinatie met Morris water doolhof en circadiane wiel lopen.