Name: Meting van pulse propagatiesnelheid, distensibiliteit en spanning in een abdominale aortaaneurysma muismodel (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-02-23T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 32 s
Description: Leer hoe u hoge frequentie echografie gebruikt om pulsgolfsnelheid, distensibiliteit en radiale spanning te meten in een muismodel van abdominale aorta-aneurysma. Deze niet-invasieve techniek ondersteunt preklinisch onderzoek naar therapeutische effecten.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd ondersteund door R01HL124155 (CPH) en financiering van het Research Institute van de Universiteit van Missouri aan CPH.

Het protocol voor de behandeling van muizen en echografie werd goedgekeurd door de Universiteit van Missouri Institutional Animal Care and Use Committee (dier protocol nummer 8799) en werd uitgevoerd volgens AAALAC International.
1. Uitrustingsopstelling en voorbereiding van muizen
<ol><li>Installatie van apparatuur<ol>
<li>Zet het ultrasone instrument, ultrasone gelwarmer en het verwarmingskussen aan.</li>
		<li>Open het echografieprogramma en voer de studienaam en beschrijvende informatie voor elke muis in.</li>
		<li>Selecteer de toepassing als Algemene beeldvorming.</li>
		<li>Kies de juiste transducer voor buikbeeldvorming(figuur 1B,C). In dit experiment wordt MS400-transducer gebruikt.</li>
		<li>Zorg ervoor dat anesthesie isoflurane en zuurstofniveaus voldoende zijn voor elke experimentele sessie.</li>
		<li>Reinig het echografieplatform voor echografie.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Muisvoorbereiding<ol>
<li>Plaats de muiskooi bovenop een verwarmingskussen (36,5 tot 38,5 °C).</li>
		<li>Houd de muis voorzichtig bij zijn staartbasis en plaats in de met zuurstof gevulde isofluranekamer.</li>
		<li>Direct de isoflurane en zuurstofstroom naar de inductiekamer.</li>
		<li>Zet de isoflurane vaporizer aan en stel het isofluraneniveau in op 1-2% vol/vol. Zet de zuurstoftankdruk in op 1-2 L/min.</li>
		<li>Na ~ 2 min, bevestig de voldoende diepte van anesthesie door de afwezigheid van ontwenningsreflexen bij het knijpen van het voetpad van de muis.</li>
		<li>Schakel vervolgens de toevoertak van de inductiekamer uit en zet de tak in die naar de anesthesieneuskegel is gericht.</li>
		<li>Breng de muis van de inductiekamer naar de echografie fase en plaats de anesthesie kegel over de neus van het dier.</li>
		<li>Kantel het beeldverwerkingsplatform van dieren rond 10° naar de rechterbenedenhoek voor een optimaal scannen(figuur 1B).</li>
		<li>Zet een druppel steriele oogheelkundige oplossing in beide ogen van muizen om te voorkomen dat drogen onder anesthesie.</li>
		<li>Plaats de muis in de supinepositie met zijn neus ingebracht in de anesthesiekegel.</li>
		<li>Breng de elektrodegel aan op alle vier de poten met behulp van een wattenstaafje en plak de poten op de koperen leads op het beeldplatform voor elektrocardiogramvoorelektrocardiogram(figuur 1C).</li>
		<li>Gebruik tondeuse om haar te scheren op de imaging site en breng vervolgens ontharingscrème aan om de resterende vacht te verwijderen. Laat voor minder dan 1 min.</li>
		<li>Veeg voorzichtig de crème en het haar af met een vochtige papieren handdoek.</li>
		<li>Controleer de ademhaling en zorg ervoor dat de hartslag wordt gehandhaafd tussen 450-550 slagen/min. Als onder dit niveau, verminder de isoflurane stroom en wacht tot de hartslag herstelt.</li>
		<li>Breng voorverwarmde ultrasone gel (37 °C) aan op de voorbereide huidplaats en bevestig de transducer aan de houder en lager totdat deze de gel raakt (figuur 1C).</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. Echografie van de abdominale aorta
<ol><li>Plaats de transducer horizontaal (d.w.z. loodrecht op de middellijn van de muis).</li>
	<li>Maak de ultrasone gel glad en verwijder bellen met behulp van de houten stok van een wattenstaafje.</li>
	<li>Laat de transducer zakken en plaats 0,5 - 1 cm onder het middenrif na het aanraken van de gel. Nu beginnen met de beelden te observeren.</li>
	<li>Visualiseer de abdominale aorta in de korte asweergave(figuur 1C). OPMERKING: B-modus is de standaard en meest effectieve modus om anatomisch lokaliseren van de aorta en de positie van de transducer. De abdominale aorta wordt geïdentificeerd door de aanwezigheid van pulsatiemetbehulp van kleur Doppler en power Doppler modi in de korte as (dat wil zeggen, de omtrek dwarsdoorsnede van de aorta). Pas de micromanipulators op het dierenstadium en de transducer aan om de doorsnede van de aorta naar het midden van het beeld te brengen.</li>
	<li>Draai de transducer 90° met de klok mee en pas de x-assige micromanipulatorknop langzaam aan om de aorta in lange asweergave (lengtedeel van de aorta) te visualiseren. OPMERKING: In veel gevallen kunnen gastro-intestinale gassen het beeld verstoren, of de aorta kan niet onder de optimale hoek zijn om een duidelijke lange asweergave mogelijk te maken. Pas de hoek van de transducer langzaam en horizontaal aan totdat een acceptabele lange asweergave is verkregen. Als er problemen aanhouden, verhoog de transducer, controleer op luchtbellen onder de transducer, pas de kantelhoek van het dierenstadium lichtjes aan, pas gels opnieuw aan en herhaal alle stappen opnieuw.</li>
	<li>Stel de focuszone en diepte in op het gebied van de aorta met respectievelijk de focuszone en focusdiepte-schakelingen. Pas de time gain compensatie slider handmatig aan om het lumen van de aorta donkerder te maken om een optimaal contrast van de aortawand te bereiken.</li>
	<li>Pas de y-as manipulator aan om de vertakkingen punten van de superieure mesenterische en de juiste nierslagaders te visualiseren. Gebruik de rechter nierslagader als oriëntatiepunt om het beeld van de suprarenalaorta(Figuur 2A)vast te leggen.</li>
	<li>Neem minstens 100 frames van B-modus beelden op de suprarenal aorta.</li>
	<li>Druk op cinestore om de Afbeeldingen van de B-modus op te slaan.</li>
	<li>Druk op de M-modus knop op het instrumententoetsenbord om opname in de M-modus in te schakelen. Rol de cursor bal om de gele indicator lijn te brengen naar een normale aorta secties met duidelijke vaat wand beeld, of naar de secties waar maximale diameter van aneurysma wordt waargenomen.</li>
	<li>Druk op de SV/gate-schakelaar en pas de cursorbal aan om ervoor te zorgen dat de wanden van het schip in de meetbeugel zijn opgenomen. Druk op update om m-modus metingen op te nemen en druk op cinestore vast te leggen (Figuur 2A,B). OPMERKING: Maximale diameter van het aneurysma mag niet in hetzelfde beeldvormingsvlak zitten als het optimale lange aszicht van de aorta. Pas de x-axis manipulatorknop iets aan voor elke M-modus meting om ervoor te zorgen dat het MILD van elke sectie wordt vastgelegd.</li>
	<li>Als u ECG-gated Kilohertz Visualization (EKV)-afbeeldingen wilt verkrijgen, drukt u op de B-modus knop om terug te gaan naar de B-modus opname. OPMERKING: Als de beelden niet scherp zijn, past u de x-asmanipulator aan om het scherpste beeld van de bovenste wand van het lumen over een sectielengte te bereiken (d.w.z. > 6 mm).</li>
	<li>Druk op de knop Fysio-instellingen op het toetsenbord en selecteer Transpiratiegating. Pas de gating Delay en Window handmatig aan om de gegevens alleen op te nemen tijdens de vlakkere delen van de ademhalingsgolf. De opnamesecties worden weergegeven als gekleurde blokken op de tracering van de ademhalingsgolf. OPMERKING: Zonder de aanpassing van de ademhaling gating, zullen de EKV beelden worden wazig als gevolg van de normale beweging van het dier tijdens de ademhaling.</li>
	<li>Druk op de EKV-knop om de EKV-modus in te schakelen. Selecteer in het juiste menu Standaardresolutie en framesnelheid 3000 of hoger. Selecteer Doorgaan met het opnemen van EKV-afbeeldingen. Druk op cinestore om de beelden op te slaan. Gebruik ekv-modus afbeelding om metingen van de pulsvermeerderingssnelheid (PPV), distensibility en radiale belasting te verkrijgen. OPMERKING: EKV-opname kan mislukken als er abnormale schommelingen in de ademhaling zijn, het dier te snel reaspirantis, of de instellingen voor framerates te hoog zijn. Stel in dat geval de framerate lager in en wacht tot de ademhaling van het dier stabiliseert. Het instellen van de framerate op 3000 is meestal geschikt voor zowel muizen als ratten.</li>
</ol>3. Stappen na beeldvorming
<ol><li>Veeg voorzichtig de ultrasone gel uit de buikstreek van de muis met een papieren handdoek bevochtigd met warm water.</li>
	<li>Plaats de muis terug in zijn huiskooi op een verwarmingskussen.</li>
	<li>Zet de isoflurane machine uit, maak het dierenbeeldvormingsplatform schoon en transducer met vochtige doekjes.</li>
	<li>Breng de beeldgegevens die tijdens de echografie worden verzameld over naar de harde schijf.</li>
	<li>Zet het echo-instrument uit.</li>
	<li>Nadat de muis herstelt van anesthesie en alert is, verwijder het verwarmingskussen en breng de kooi terug naar het dierenhuisvestingsrek.</li>
</ol>4. Analyse van abdominale aortabeelden
<ol><li>Analyse van M-modus beelden om MILD te meten<ol>
<li>Open het echografieprogramma en voer de studienaam en beschrijvende informatie voor elke muis in.</li>
		<li>Open de ultrasone gegevens in de analysesoftware en open de M-modus afbeelding en pauzeer de hartslag.</li>
		<li>Klik op Metingen.
</li>
		<li>Selecteer het vasculaire pakket uit de vervolgkeuzemogelijkheden. Klik op Diepte en trek een lijn over het aortalumen dat zich uitstrekt van binnenwand tot muur(figuur 2C,D). OPMERKING: Voor consistentie moeten de metingen worden uitgevoerd in de systolische fase van de hartcyclus wanneer de aorta maximaal wordt uitgebreid. Teken drie lijnen over drie verschillende hartslagen om nauwkeurige en gemiddelde metingen van MILD te verkrijgen. In AAA worden de metingen uitgevoerd bij de maximale dilatatie van de aorta. Het is ook raadzaam om de dieren 4-6 uur te vasten voorafgaand aan het verzamelen van beelden om interferentie van de beweeglijkheid van de darm te voorkomen en de helderheid van het beeld te garanderen.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Analyse voor pulsvermeerderingssnelheid (PPV)<ol>
<li>Open de EKV-afbeelding en pauzeer de hartslag.</li>
		<li>Open een nieuw venster op de analysesoftware (bijvoorbeeld Vevo Vac) door op het naampictogram te klikken.</li>
		<li>Klik op de optie PPV (pijl in figuur 3D). Een klein venster zal verder verschijnen met het beeld van de aorta.</li>
		<li>Teken een rechthoekige doos door op de bovenste vaatwand te klikken en sleep de aanwijzer ongeveer 4 mm die zowel de wanden van de suprarenalaorta bedekt. LET OP: Houd de lengte van de doos consistent (~ 4 mm) voor alle afbeeldingen. De gebruiker kan het rechthoekige vak aanpassen door te draaien om het vak uit te lijnen en de lijn te selecteren en vervolgens naar een nieuwe positie op het schip te slepen dat wordt geanalyseerd om de meest geschikte en duidelijke buiging van de pulsgolf te verkrijgen. De verticale regels van gegevens uit de rechthoek worden weergegeven en geïdentificeerd als de linker (bovenste afbeelding) en rechts (onderste afbeelding) op de ROI. Voor een betere visualisatie van de buiging van de pulsgolf is het soms nuttig om de tekendoos alleen op de bovenste wand te plaatsen, zoals weergegeven in figuur 3. De software berekent automatisch de PPV (m/s). Het is echter altijd beter om de paarse lijnen handmatig aan te passen om het exacte buigpunt op de pulsgolven in te stellen en PPV zal dienovereenkomstig veranderen.</li>
		<li>Selecteer ten slotte de opdracht Accepteren om de PPV-waarden op te slaan. Exporteer de cijfers en de gegevens naar het station voor gegevensopslag.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Analyse op distensibiliteit en radiale belasting<ol>
<li>Open de EKV-afbeelding en pauzeer de hartslag.</li>
		<li>Klik op het software-icoontje. De software opent een nieuw venster.</li>
		<li>Klik op het spoor nieuwe ROI en teken een rechthoekige doos op de beide wanden van het schip. De software traceert automatisch de boven- en onderwanden van het schip. De gebruiker kan de tracering aanpassen om op de muur uit te lijnen door op groene punten te klikken(figuur 4A,B).</li>
		<li>Accepteer nu het spoor. De software berekent de distensibility (1/Mpa) in de geselecteerde ROI.</li>
		<li>Selecteer voor de radiale belastingmeting de juiste drukoptie in de menubalken linksboven. De beelden voor radiale spanning en tangentiale belasting worden geopend.</li>
		<li>Verkrijg de waarde voor radiale belasting (%) door de cursor op de piek van de curve te verplaatsen. De gegevens exporteren als afbeeldingen of in videoformaat(figuur 4A,B).</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Wanhainen, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+to+Define+an+Abdominal+Aortic+Aneurysm+%E2%80%94+Influence+on+Epidemiology+and+Clinical+Practice%5BTitle%5D)+AND+%22Scandinavian+Journal+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">How to Define an Abdominal Aortic Aneurysm — Influence on Epidemiology and Clinical Practice.</a> Scandinavian Journal of Surgery. 97, 105-109 (2008).</li>
<li>Benjamin, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+Disease+and+Stroke+Statistics%E2%80%942018+Update%3A+A+Report+From+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart Disease and Stroke Statistics—2018 Update: A Report From the American Heart Association.</a> Circulation. 137, 67(2018).</li>
<li>Xu, J., Shi, G. -P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascular+wall+extracellular+matrix+proteins+and+vascular+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Biochimica+et+biophysica+acta%22%5BJournal%5D)">Vascular wall extracellular matrix proteins and vascular diseases.</a> Biochimica et biophysica acta. 1842, 2106-2119 (2014).</li>
<li>Daugherty, A., Manning, M. W., Cassis, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Angiotensin+II+promotes+atherosclerotic+lesions+and+aneurysms+in+apolipoprotein+E-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Angiotensin II promotes atherosclerotic lesions and aneurysms in apolipoprotein E-deficient mice.</a> Journal of Clinical Investigation. 105, 1605-1612 (2000).</li>
<li>Au - Sawada, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasound+Imaging+of+the+Thoracic+and+Abdominal+Aorta+in+Mice+to+Determine+Aneurysm+Dimensions%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Ultrasound Imaging of the Thoracic and Abdominal Aorta in Mice to Determine Aneurysm Dimensions.</a> Journal of Visualized Experiments. , 59013(2019).</li>
<li>Raaz, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Segmental+Aortic+Stiffening+Contributes+to+Experimental+Abdominal+Aortic+Aneurysm+Development%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Segmental Aortic Stiffening Contributes to Experimental Abdominal Aortic Aneurysm Development.</a> Circulation. 131, 1783-1795 (2015).</li>
<li>van Disseldorp, E. M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+limited+field-of-view+on+wall+stress+analysis+in+abdominal+aortic+aneurysms%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomechanics%22%5BJournal%5D)">Influence of limited field-of-view on wall stress analysis in abdominal aortic aneurysms.</a> Journal of Biomechanics. 49, 2405-2412 (2016).</li>
<li>Miyatani, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulse+wave+velocity+for+assessment+of+arterial+stiffness+among+people+with+spinal+cord+injury%3A+a+pilot+study%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Spinal+Cord+Medicine%22%5BJournal%5D)">Pulse wave velocity for assessment of arterial stiffness among people with spinal cord injury: a pilot study.</a> Journal of Spinal Cord Medicine. 32, 72-78 (2009).</li>
<li>Sharma, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deficiency+of+IL12p40+%28Interleukin+12+p40%29+Promotes+Ang+II+%28Angiotensin+II%29-Induced+Abdominal+Aortic+Aneurysm%5BTitle%5D)+AND+%22Arteriosclerosis%2C+Thrombosis%2C+and+Vascular+Biology%22%5BJournal%5D)">Deficiency of IL12p40 (Interleukin 12 p40) Promotes Ang II (Angiotensin II)-Induced Abdominal Aortic Aneurysm.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 39, 212-223 (2019).</li>
<li>Raaz, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Segmental+Aortic+Stiffening+Contributes+to+Experimental+Abdominal+Aortic+Aneurysm+Development%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Segmental Aortic Stiffening Contributes to Experimental Abdominal Aortic Aneurysm Development.</a> Circulation. 131, 1783-1795 (2015).</li>
<li>Sharma, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacological+inhibition+of+Notch+signaling+regresses+pre-established+abdominal+aortic+aneurysm%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Pharmacological inhibition of Notch signaling regresses pre-established abdominal aortic aneurysm.</a> Scientific Reports. , (2019).</li>
<li>Bray, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Notch+signalling%3A+a+simple+pathway+becomes+complex%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Molecular+and+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Notch signalling: a simple pathway becomes complex.</a> Nature Reviews Molecular and Cell Biology. 7, 678-689 (2006).</li>
<li>Hans, C. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+Notch1+signaling+reduces+abdominal+aortic+aneurysm+in+mice+by+attenuating+macrophage-mediated+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Arteriosclerosis%2C+Thrombosis+and+Vascular+Biology%22%5BJournal%5D)">Inhibition of Notch1 signaling reduces abdominal aortic aneurysm in mice by attenuating macrophage-mediated inflammation.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis and Vascular Biology. 32, 3012-3023 (2012).</li>
<li>Cheng, J., Koenig, S. N., Kuivaniemi, H. S., Garg, V., Hans, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacological+inhibitor+of+notch+signaling+stabilizes+the+progression+of+small+abdominal+aortic+aneurysm+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+American+Heart+Association%22%5BJournal%5D)">Pharmacological inhibitor of notch signaling stabilizes the progression of small abdominal aortic aneurysm in a mouse model.</a> Journal of American Heart Association. 3, 001064(2014).</li>
<li>Hans, C. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcriptomics+analysis+reveals+new+insights+into+the+roles+of+Notch1+signaling+on+macrophage+polarization%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">Transcriptomics analysis reveals new insights into the roles of Notch1 signaling on macrophage polarization.</a> The Journal of Immunology. 200, (2018).</li>
<li>Paraskevas, K. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+aortic+stiffness+%28aortic+pulse-wave+velocity%29+before+and+after+elective+abdominal+aortic+aneurysm+repair+procedures%3A+a+pilot+study%5BTitle%5D)+AND+%22Open+Cardiovascular+Medicine+Journal%22%5BJournal%5D)">Evaluation of aortic stiffness (aortic pulse-wave velocity) before and after elective abdominal aortic aneurysm repair procedures: a pilot study.</a> Open Cardiovascular Medicine Journal. 3, 173-175 (2009).</li>
<li>Fortier, C., Desjardins, M. P., Agharazii, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aortic-Brachial+Pulse+Wave+Velocity+Ratio%3A+A+Measure+of+Arterial+Stiffness+Gradient+Not+Affected+by+Mean+Arterial+Pressure%5BTitle%5D)+AND+%22Pulse%22%5BJournal%5D)">Aortic-Brachial Pulse Wave Velocity Ratio: A Measure of Arterial Stiffness Gradient Not Affected by Mean Arterial Pressure.</a> Pulse. 5, 117-124 (2017).</li>
<li>Golledge, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abdominal+aortic+aneurysm%3A+update+on+pathogenesis+and+medical+treatments%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Abdominal aortic aneurysm: update on pathogenesis and medical treatments.</a> Nature Reviews Cardiology. 16 (4), 225-242 (2019).</li>
<li>Choksy, S. A., Wilmink, A. B., Quick, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ruptured+abdominal+aortic+aneurysm+in+the+Huntingdon+district%3A+a+10-year+experience%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+the+Royal+College+of+Surgeons+of+England%22%5BJournal%5D)">Ruptured abdominal aortic aneurysm in the Huntingdon district: a 10-year experience.</a> Annals of the Royal College of Surgeons of England. 81, 27-31 (1999).</li>
<li>Luo, F., Zhou, X. -L., Li, J. -J., Hui, R. -T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflammatory+response+is+associated+with+aortic+dissection%5BTitle%5D)+AND+%22Ageing+Research+Reviews%22%5BJournal%5D)">Inflammatory response is associated with aortic dissection.</a> Ageing Research Reviews. 8, 31-35 (2009).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Echografie biedt een krachtige techniek voor het bepalen van functionele eigenschappen van de aorta door metingen van PPV, distensibility en radiale belasting. Deze metingen zijn bijzonder leerzaam voor het bestuderen van muismodellen van AAA en de in vivo benadering maakt het mogelijk om longitudinale gegevens te verzamelen die potentieel belangrijk zijn voor het begrijpen van de temporele ontwikkeling van de aortapathologie. Met name metingen van in vivo aortastijfheid worden lokaal bepaald in de abdominale aorta door ...

Een abdominale aorta-aneurysma (AAA) vertegenwoordigt een significante hart-en vaatziekten gekenmerkt door een permanente gelokaliseerde verwijding van de aorta overschrijding van de oorspronkelijke diameter van het vat met 1,5 keer1. AAA behoort tot de top 13 oorzaken van sterfte in de Verenigde Staten2. De progressie van AAA wordt toegeschreven aan de degeneratie van de aortawand en elastine fragmentatie, wat uiteindelijk leidt tot aortabreuk. Deze veranderingen in de aortawand kunnen optreden zonder een significante toename van de maximale intraluminale diameter (MILD), wat erop wijst dat MILD alleen niet voldoende is om de ernst van de ziekte te voorspellen3. Daarom moeten aanvullende factoren worden geïdentificeerd om de eerste veranderingen in de aortawand te detecteren, wat de opties voor vroegtijdige behandeling kan leiden. Het algemene doel van dit protocol is om een praktische handleiding te bieden voor het beoordelen van aortafunctionele eigenschappen met behulp van echografie zoals gekenmerkt door metingen van de pulsvermeerderingssnelheid (PPV), distensibility en radiale belasting.
Een goed gekarakteriseerd experimenteel model om AAA te bestuderen, voor het eerst beschreven door Daugherty en collega's, omvat onderhuidse infusie van angiotensine II (AngII) via osmotische pompen in Apoe-/- muizen4. Nauwkeurige meting van MILD met behulp van echografie is instrumenteel geweest bij het karakteriseren van AAA in dit muismodel5. Hoewel histologische veranderingen tijdens de ontwikkeling van AAA uitgebreid zijn bestudeerd, zijn veranderingen in de functionele eigenschappen van de vaatwand zoals aortastijfheid niet goed gekarakteriseerd. Dit protocol benadrukt het gebruik van hoogfrequente echografie in combinatie met de geavanceerde analyses als krachtige instrumenten voor het bestuderen van de temporele progressie van AAA. Met name deze benaderingen stellen ons in staat om de functionele eigenschappen van de vaatwand te beoordelen, gemeten door PPV, distensibility en radiale belasting.
Recente klinische studies bij proefpersonen met AAA, evenals in het door murine elastase geïnduceerde AAA-model, wijzen op een positieve correlatie tussen aortastijfheid en aortadiameter6,7. PPV, een indicator van aortastijfheid, wordt aanvaard als een uitstekende meting voor het kwantificeren van veranderingen in stijfheid in vaatwand6,8. PPV wordt berekend door de transittijd van de pulsgolfvorm te meten op twee plaatsen langs de vasculatuur, waardoor een regionale beoordeling van aortastijfheid wordt gegeven. We hebben onlangs aangetoond dat verhoogde aortastijfheid zoals gemeten door PPV, en op cellulair niveau zoals bepaald met behulp van atoomkracht microscopie, positief correleert met aneurysma ontwikkeling9. Verder suggereert de literatuur dat aortastijfheid kan voorafgaan aan aneurysmale dilatatie en dus nuttige informatie kan geven over regionale intrinsieke eigenschappen van de vaatwand tijdens de ontwikkeling van AAA10. Op dezelfde manier zijn distensibility- en stammetingen de kwantificeringsinstrumenten om eerdere veranderingen in arteriële fitness te meten. Gezonde slagaders zijn flexibel en elastisch, terwijl met verhoogde stijfheid en minder elasticiteit, distensibility en spanning wordt verminderd. Hier bieden we een praktische gids en stap voor stap protocol voor het gebruik van een hoogfrequent echografisch systeem om MILD, PPV, distensibility en radiale belasting bij muizen te meten. Het protocol biedt technische benaderingen die moeten worden gebruikt in combinatie met de basisinformatie die door handleidingen voor specifieke echografie-instrumenten en de bijbehorende video tutorial. Belangrijk is dat in onze handen het beschreven beeldvormingsprotocol reproduceerbare en nauwkeurige gegevens biedt die waardevol lijken in de studie van de ontwikkeling en progressie van experimentele AAA.
Om het nut van echografie verder aan te tonen, bieden we voorbeeldbeelden en metingen uit onze eigen studies gericht op het gebruik van farmacologische benaderingen voor het voorkomen van experimentele AAA11. Specifiek, inkeping signalering is voorgesteld om betrokken te zijn bij meerdere aspecten van vasculaire ontwikkeling en ontsteking12. Met behulp van genhaploinsiënsiciëntie en farmacologische benaderingen hebben we eerder aangetoond dat Notch-remming de ontwikkeling van AAA bij muizen vermindert door infiltratie van macrofagen op de plaats van vasculaire schade13,14,15te voorkomen. Voor het huidige artikel, met behulp van de farmacologische benadering voor Notch remming richten we ons op de relatie tussen aortastijfheid en factoren met betrekking tot AAA. Deze studies illustreren dat Notch remming vermindert aortastijfheid, dat is een maatregel van AAA progressie11.

<table><tbody><tr><td>Angiotensin II</td><td>Sigma</td><td>A9525</td><td></td></tr><tr><td>Apoe-/- muizen</td><td>The Jackon lab</td><td><img src="/files/ftp_upload/60515/60515mateq.jpg"/></td><td></td></tr><tr><td>Clippers</td><td>WAHL</td><td>1854</td><td></td></tr><tr><td>Wattenstaafje</td><td>Q-tips</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DAPT</td><td>Sigma</td><td>D5942</td><td></td></tr><tr><td>Ontharingscreme</td><td>Nair</td><td>LL9038</td><td></td></tr><tr><td>Elektrodecreme</td><td>Sigma</td><td>17-05</td><td></td></tr><tr><td>Gelverwarmer</td><td>Thermasonic (Parker)</td><td>82-03 (LED)</td><td></td></tr><tr><td>Verwarmingskussen</td><td>Stryker</td><td>T/pump professional</td><td></td></tr><tr><td>Isofluraan</td><td>VetOne</td><td>Fluriso TM</td><td></td></tr><tr><td>Isofluraanverdamper</td><td>Visualsonics</td><td>VS4244</td><td></td></tr><tr><td>Smeermiddel voor oogzalf</td><td>Lacri-lube</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Osmotische pompen</td><td>Alzet</td><td>Model 2004</td><td></td></tr><tr><td>Zuurstoftank</td><td>Air gas</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Transducer</td><td>Visualsonics</td><td>MS-400 of MS550D</td><td></td></tr><tr><td>Ultrasoon gel</td><td>Parker</td><td>Aquasonic clear</td><td></td></tr><tr><td>Ultrasound Imaging System</td><td>Visualsonics</td><td>Vevo 2100</td><td></td></tr><tr><td>Vevo Vasc Software</td><td>Visualsonics</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

meting van pulse propagatiesnelheid, distensibiliteit en spanning in een abdominale aortaaneurysma muismodel

Measurement of Pulse Propagation Velocity, Distensibility and Strain in an Abdominal Aortic Aneurysm Mouse Model

Een abdominale aorta-aneurysma (AAA) wordt gedefinieerd als een gelokaliseerde verwijding van de abdominale aorta die de maximale intraluminale diameter (MILD) overschrijdt met 1,5 keer van zijn oorspronkelijke grootte. Klinische en experimentele studies hebben aangetoond dat kleine aneurysma's kunnen scheuren, terwijl een subpopulatie van grote aneurysma's stabiel kan blijven. Zo kan kennis van de structurele eigenschappen van de vaatwand, naast de meting van de intraluminale diameter van de aorta, belangrijke informatie verschaffen om de stabiliteit van de AAA te beoordelen. Aorta versteviging is onlangs naar voren gekomen als een betrouwbaar instrument om vroege veranderingen in de vaatwand te bepalen. Pulsvermeerderingssnelheid (PPV) samen met de distensibility en radiale belasting zijn zeer nuttige echografie-gebaseerde methoden die relevant zijn voor de beoordeling van aortastijfheid. Het primaire doel van dit protocol is om een uitgebreide techniek voor het gebruik van echografie systeem om beelden te verwerven en analyseren van de structurele en functionele eigenschappen van de aorta zoals bepaald door MILD, PPV, distensibility en radiale stam.

Representatieve M-modus beelden van de normale en aneurysmaal buikaorta van muizen worden weergegeven in figuur 2A en figuur 2B, respectievelijk. De suprarenalabdominale aorta wordt geïdentificeerd door de locatie naast de rechter nierslagader en de superieure mesenteriale slagader (Figuur 2A). Representatieve beelden die worden gebruikt voor de berekening van MILD, bij drie verschi...

Dit manuscript beschrijft een gedetailleerd protocol voor het gebruik van hoge frequentie echografie om luminale diameter, puls vermeerderingssnelheid, distensibiliteit en radiale belasting op een muis model van abdominale aorta aneurysma te meten.

Meting van pulse propagatiesnelheid, distensibiliteit en spanning in een abdominale aortaaneurysma muismodel

An abdominal aortic aneurysm (AAA) is defined as a localized dilation of the abdominal aorta that exceeds the maximal intraluminal diameter (MILD) by 1.5 ...

Echografie en functionele analyse zijn zeer krachtige technieken om de groei en stabiliteit van abdominale aorta-aneurysma's te bepalen, voorbij de traditionele methoden van aortagrootte en diameter. Deze niet-invasieve techniek meet de pulsgolfsnelheid, afstandsvermogen en in de afstand van de aorta om subtiele veranderingen in de aortafuncties samen met de aortadiameter te monitoren. Aortastijfheid is een indicator van de progressie van abdominale aorta-aneurysma's en de stabiliteit kan nuttig zijn bij het beoordelen van de effecten van therapeutische middelen van belang in preklinische studies.Ook kunnen snelheids- en stammetingen ook worden gecorreleerd aan de vasculaire veranderingen die optreden tijdens de ontwikkeling van verschillende hart- en vaatziekten, zoals hypertensie, diabetes, obesitas en atherosclerose. Het aantonen van de procedure zal Dr.Sun, een onderzoek assistent professor van de Imaging Core faciliteit. Om de muis voor te bereiden op de beeldvormingsprocedure, pas u na het bevestigen van een gebrek aan reactie op pedaalreflex oogkrondietische oplossing toe op de ogen van de verdoofde muis en plaatst u de muis in de liggende positie op het beeldvormingsplatform van het dier dat 10 graden naar rechtsonder is gekanteld.Breng elektrodegel aan op alle vier de poten en plak de poten op de koperen elektrocardiogramleads op het beeldvormingsplatform. Gebruik tondeuse om het haar te scheren op de imaging site, en depilatory crème toe te passen op de blootgestelde huid. Na minder dan een minuut, gebruik maken van een vochtige papieren handdoek om de crème en haar te verwijderen, en breng 37 graden Celsius ultrasone gel op de voorbereide site.Gebruik vervolgens het houten uiteinde van een wattenstaafje om de gel glad te maken en eventuele bellen te verwijderen. Voor abdominale aorta beeldvorming bevestigt u de transducer aan de houder en plaatst u de transducer loodrecht op de middellijn van de muis. Laat de transducer zakken totdat deze de gel raakt en plaats de punt 0,5 tot een centimeter onder het middenrif.Wanneer de transducer op zijn plaats is, visualiseert u de abdominale aorta in de korte asweergave. Draai vervolgens voorzichtig de transducer 90 graden met de klok mee en pas langzaam de X-asmicromanipulatorknop aan om de aorta in de lange-asweergave te visualiseren. Gebruik de focuszone en focusdiepteschakelingen om de focuszone en diepte in te stellen op het gebied van de aorta.Stel handmatig de tijdwinstcompensatieschuifregelaar aan om het lumen van de aorta donkerder te maken om een optimaal contrast van de aortawand te bereiken. Pas de Y-asmanipulator aan om de vertakkingspunten van de superieure mesenterische en de juiste nierslagaders te visualiseren. De juiste nierslagader kan worden gebruikt als een mijlpaal om een beeld van de super nieraorta vast te leggen.Nadat u ten minste 100 frames B-modusafbeeldingen op de supernale aorta hebt opgenomen, slaat u de afbeeldingen op en selecteert u de eindmodus. Rol de cursorbal om de gele indicatorlijn naar een normale aortasectie te brengen met een duidelijk afbeelding van de vaatwand of naar de secties waar de maximale diameter van het aneurysma wordt waargenomen. Klik op de SV-poortschakelaar en pas de cursorbal aan om ervoor te zorgen dat de scheepswanden in de meetbeugel zijn opgenomen.Druk vervolgens op update om de metingen in de M-modus op te nemen en stuur naar de winkel om de metingen vast te leggen. Om EKV-afbeeldingen te verkrijgen, drukt u op de B-modusknop om terug te gaan naar b-modusopname en drukt u op de knop Fysio-instellingen om de selectie van ademhalingsgating mogelijk te maken. Pas handmatig de gatingvertraging en het venster aan om de gegevens alleen op te nemen tijdens de vlakkere delen van de ademhalingsgolf.De opnamesecties worden weergegeven als gekleurde blokken op het traceren van de ademhalingsgolf. Druk op de EKV-knop om de EKV-modus in te schakelen. Stel in het juiste menu het aankooptype in op standaardresolutie, de framesnelheid op 3, 000 of hoger en klik op Scannen om de EKV-afbeeldingen op te nemen.Druk vervolgens op verzenden naar winkel om de afbeeldingen op te slaan en gebruik de EKV-modusafbeelding om metingen van de PPV, distensibility en radiale belasting te verkrijgen. Om het milde te meten, opent u het echografieprogramma en voert u de studienaam en beschrijvende informatie voor elke muis in. Open de echografiegegevens en het M-modusbeeld en pauzeer de hartslag.Klik op metingen en selecteer het vasculaire pakket en diepte in de vervolgkeuzeopties. Teken vervolgens een lijn over het aortalumen dat zich uitstrekt van binnenwand tot muur. Open voor PPV-analyse de EKV-afbeelding en pauzeer de hartslag.Klik op het pictogram om een nieuw venster op de analysesoftware te openen en selecteer de optie PPV. Er verschijnt een klein venster met de afbeelding van de aorta. Klik op de bovenste scheepswand en sleep de aanwijzer om beide wanden van de super nieraorta te bedekken met een vak van ongeveer vier millimeter en klik vervolgens op Accepteren om de PPV-waarden op te slaan.Voor distensibility-analyse in de geopende EKV-afbeelding klikt u op het softwarepictogram en selecteert u Nieuwe interessegebied traceren om een rechthoekig vak op beide wanden van het schip te tekenen. De software traceert automatisch de boven- en onderwanden van het schip. Klik op de groene punten om de trace align indien nodig aan te passen en klik op Accepteren.De software berekent de distensibility binnen het geselecteerde gebied van belang. Om de radiale stammeting te verkrijgen, selecteert u de juiste stamoptie in het menu en klikt u op Stam. De beelden voor radiale spanning en tangentiële stam zal openen.Beweeg vervolgens de cursor naar de piek van de curve om de waarde voor de radiale stam te verkrijgen. Voor een optimale reproduceerbaarheid en detectie van bepaalde stadia moeten de beelden door dezelfde persoon op dezelfde anatomische locatie worden geanalyseerd om consistentie in de gegevens te garanderen. Hier worden representatieve M-mode beelden van normale en aneurysma's muis abdominale aorta getoond.De super nierguuraorta kan worden geïdentificeerd door de locatie naast de rechtertak van de nierslagader en de superieure mesenterische slagader. Zoals geïllustreerd in deze beelden, mild kan worden berekend met behulp van drie verschillende hartslagen van de systolische cardiale cyclus in zowel normale als aneurysma's aortas. In het geval van een aorta-aneurysma kan de luminale diameter worden bepaald door een loodrechte gele lijn te trekken tussen de twee binnenranden van het lumen op het gebied van maximale dilatatie.In deze representatieve analyse, trans-abdominale echografie bleek een geleidelijke toename van milde en PPV en een afname van de distensibility en radiale stam in reactie op angiotensine II op dag 28. Angiotensin II-infusie nam licht toe vanaf dag 28 tot 56, terwijl de behandeling met een inkepingsremmer geen significante invloed had op mild in vergelijking met angiostatine II alleen. Het is belangrijk op te merken dat PPV sterk correleerde met mild op dag 28, terwijl op dag 56 de correlatie relatief zwak was.Histologisch, angiotensin II infusie verhoogde collageen afbraak en proteolytische activiteit in de medialaag van de aorta. Notch remmer behandeling, echter, geminimaliseerd deze veranderingen in de extra cellulaire matrix afbraak. Echt het opzetten van het dier en de sonde en het identificeren van de abdominale aorta zijn de meest kritieke stappen.Beginners Ik adviseer om de micromanipulator knop te gebruiken om fijne aanpassingen te maken. Met behulp van deze methode kunnen we ook de blokstroom in de aorta of de nierslagader meten, de hartfunctie evalueren en controleren op perifere vasculaire aandoeningen. Na het bereiken van bepaalde grootte, abdominale aorta-aneurysma's groeien niet overmatig.Onder deze omstandigheden worden bepaalde structuurveranderingen snel gedetecteerd door deze technieken in reactie op farmacologische agentia of andere manipulaties. Tijdens het toedienen van de anesthesie moet u de houtskool en oplosmiddel gebruiken voor isofluorent, en de uitlaatslijtage. Zorg er ook voor dat er geen lekkage is uit het neusgat.

measurement-pulse-propagation-velocity-distensibility-strain-an

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie en Infectie

We beschrijven een techniek voor het meten van de aortica-stijfheid uit zijn druk-diameter relatie in vivo bij muizen. De diameter van de aorta wordt geregistreerd door middel van echografie en de aortadruk wordt invasief gemeten met een solid-state drukkatheter. De bloeddruk wordt incrementeel gewijzigd en de resulterende diameter wordt gemeten.

Meten Oplopend stijfheid van de aorta In Vivo In Muizen met behulp van echografie

Arteriële stijfheid is een belangrijke factor bij hart-en vaatziekten en pulsgolfsnelheid (PWV) kan als een surrogaat index voor arteriële stijfheid worden beschouwd. Dit protocol beschrijft een beeld processing algoritme voor het berekenen van PWV in muizen op basis van echografie beeldverwerking die van toepassing zijn op verschillende arteriële sites is.

Ultrasound-gebaseerde Pulse Wave Velocity Evaluatie in Muizen

Polyurethaan katheter inbrengen in de aorta lumen en hechtdraad Afbinding van de aorta induceren chronische hypoxie als gevolg van hypoperfusie van de adventitial Wasa vasorum. Dit artikel beschrijft een roman diermodel van abdominale aorta aneurysma (AAA) met eigenschappen die vergelijkbaar zijn met die van AAA bij de mens.

Oprichting van een knaagdier Model van abdominale aorta aneurysma door het blokkeren van Adventitial Vasa Vasorum perfusie

Dit artikel beschrijft een gedetailleerde methodologie van het gebruik van een radiopaak loodhoudende silicone rubber te perfuse de lymfkliertest therapieën voor de diameter van de aorta kwantificering in een muismodel van aorta aneurysma en dissectie.

Kwantitatieve analyse van de Micro-CT van Aortopathy in een muismodel van β-aminopropionitrile-geïnduceerde aorta aneurysma en dissectie

Echografie imaging is geworden een gemeenschappelijke modaliteit te bepalen de luminal afmetingen van borst- en buikholte aorta aneurysma in muizen. Dit protocol beschrijft de procedure om het verkrijgen van betrouwbare en reproduceerbare tweedimensionale ultrasound beelden van de oplopende en abdominale aorta in muizen.

Echografie beeldvorming van de borst- en buikholte Aorta bij muizen om te bepalen van de afmetingen van het aneurysma

Het huidige protocol beschrijft een gestandaardiseerde chirurgische methode voor het elastase-geïnduceerde AAA-model door de directe toepassing van elastase op de adventitia van infrarode abdominale aorta bij muizen.

Muis Abdominale Aorta Aneurysma Model Geïnduceerd door Perivasculaire Toepassing van Elastase

Dit protocol beschrijft een calciumfosfaat-geïnduceerd abdominaal aorta-aneurysma (AAA) muismodel om de pathologische kenmerken en moleculaire mechanismen van AAAs te bestuderen.

Een calciumfosfaat-geïnduceerd muis abdominaal aorta-aneurysma model

Dit manuscript presenteert een protocol voor het opstellen van een abdominaal aorta-aneurysmamodel van muizen met behulp van calciumchloride en elastase, waarbij de voordelen van eerdere modelleringsmethoden worden gecombineerd. Dit model kan worden gebruikt om de pathofysiologische mechanismen te onderzoeken die ten grondslag liggen aan abdominale aorta-aneurysma's.

Een abdominaal aorta-aneurysmamodel van muizen door periadventitiële infiltratie van calciumchloride en elastase

Dit protocol beschrijft een methodische chirurgische benadering voor het modelleren van geavanceerde abdominale aorta-aneurysma's bij muizen door een combinatie van het rechtstreeks aanbrengen van elastase op de infrarenale aorta en het toedienen van ß-aminopropionitril via drinkwater.

Geavanceerde modellering van abdominale aorta-aneurysma's bij muizen door combinatie van topisch elastase en oraal ß-aminopropionitril

Dit protocol biedt een herhaalbare en betrouwbare methode om abdominale aorta-aneurysma's (AAA's) in C57BL/6-muizen op te wekken met behulp van elastine-sensitisatie en perivasculaire elastase-toepassing, als een AAA-model dat een immuunsensitisatiecomponent bevat.

Betrouwbare creatie van een model voor muriene abdominale aorta-aneurysma met behulp van elastine-sensitisatie en perivasculaire elastase

Leer hoe u hoge frequentie echografie gebruikt om pulsgolfsnelheid, distensibiliteit en radiale spanning te meten in een muismodel van abdominale aorta-aneurysma. Deze niet-invasieve techniek ondersteunt preklinisch onderzoek naar therapeutische effecten.

Meting van pulse propagatiesnelheid, distensibiliteit en spanning in een abdominale aortaaneurysma muismodel

Meer video's verkennen