Name: Gecombineerd gebruik van staart ader metastase assays en real-time in vivo beeldvorming om borstkanker te kwantificeren gemetastaseerde kolonisatie en last in de longen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-12-19T16:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 32 s
Description: Leer een niet-invasieve methode voor real-time monitoring van borstkankermetastasen met staartaderinjecties en in vivo beeldvorming. Kwantificeer metastasekolonisatie en groei in de longen zonder histologische kleuring.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

We danken Emily Norton voor het bijstaan van virale infecties en het kritisch lezen van het manuscript. We bedanken Ryan Kanai ook voor hulp bij het verwerven van beelden van de longen en Kate E. Tubbesing voor hulp bij beeldanalyse van de groene metastasen in de longen. We danken het personeel van de dierenonderzoekfaciliteit voor hun ondersteuning en voor hulp bij de voorbereiding van deze video. Dit werk werd gesteund door een Susan G. komen Career Catalyst subsidie die werd toegekend aan J.M.L. (#CCR17477184).

De auteurs hebben niets te onthullen.

Kritieke stappen van de methode Het is van cruciaal belang om het aantal geïnjecteerde cellen te optimaliseren (stap 3) voor een bepaalde cellijn en muis stam, omdat dit het aantal metastasen dat vorm en de lengte van het experiment sterk kan beïnvloeden. Als te veel cellen worden geïnjecteerd of de metastasen te lang groeien, kunnen de metastasen moeilijk te tellen zijn, waardoor de effecten van de genetische manipulatie moeilijk te beoordelen zijn. Echter, als er te weinig cellen worden geïnjecteerd...

Kanker blijft de tweede leidende doodsoorzaak wereldwijd1 en metastase is verantwoordelijk voor de meerderheid van deze sterfgevallen2,3. Een beperkt begrip van de moleculaire mechanismen die de gemetastaseerde kolonisatie en de daaropvolgende groei beheersen, heeft echter de ontwikkeling van effectieve behandelingen voor gemetastaseerde ziekte belemmerd. De identificatie van nieuwe therapeutische doelstellingen vereist een assay om te testen hoe verontrust expressie of functie van een kandidaatgen invloed heeft op metastase vorming en groei. Hoewel autochtone Mouse-modellen hun voordelen hebben, zijn ze tijdrovend en duur om te genereren, waardoor ze geschikter zijn voor doel validatie in plaats van doel detectie. Transplantatie modelsystemen waarbij het aspirant-gen in kankercellen in vitro wordt verstoord en vervolgens effecten op gemetastaseerd potentieel worden beoordeeld in vivo, zijn minder duur en hoger doorvoer dan autochtone modellen. Bovendien zijn virale vectoren voor stabiele levering van RNAi, CRISPR/CAS9 en transgenen op grote schaal beschikbaar, waardoor het relatief gemakkelijk is om vrijwel elk gen of genen van belang in een kankercellijnen te perturb. Deze aanpak kan ook worden gebruikt om de rol van kandidaatgenen bij gemetastaseerde kolonisatie en groei in menselijke kankercellijnen te testen door de cellen in immuungecompromitteerde of gehumaniseerde muizen te verplanten.
De twee soorten assays die worden gebruikt om metastase vorming te testen door getransplanteerde kankercellen in vivo zijn spontane metastase-assays en experimentele metastase-assays. In spontane metastase testen4,5, kankercellen worden geïnjecteerd in muizen, toegestaan om een primaire tumor te vormen, en vervolgens spontane metastasen vorming en daaropvolgende groei worden getest. De sterkte van dit model is dat de cellen alle stappen van het metastatische proces moeten voltooien om gemetastaseerde tumoren te vormen. Echter, veel kanker cellijnen niet metastaseren efficiënt in spontane metastase modellen, en elke manipulatie van de cellen die invloed hebben op primaire tumorgroei kan de resultaten van de metastase assay Verwar. Experimentele metastase-assays, waarin kankercellen direct in omloop worden geïnjecteerd, worden gebruikt om deze valkuilen te voorkomen. Gemeenschappelijke experimentele metastase-assays omvatten de staart ader injectie6,7,8 (en gedemonstreerd hier), intracardiale injectie9, en portaal ader injectie10.
Het doel van het hier gepresenteerde protocol is om een in vivo experimentele metastase test te bieden die een onderzoeker in staat stelt om metastase vorming en groei in real time te monitoren, alsook om het aantal en de grootte van het eindpunt in de longen van dezelfde muis te kwantificeren. Om dit te bereiken, wordt de traditionele experimentele staart ader metastase assays6,7,8 gecombineerd met levende dieren beeldvorming, met behulp van een in vivo beeldapparaat9,11,12,13,14. Tumor cellen met een stabiel uitdrukken van beide plaats en een fluorescerend eiwit worden geïnjecteerd in muizen via de laterale staart ader en vervolgens wordt het in vivo beeldapparaat gebruikt om veranderingen in de gemetastaseerde belasting in de longen na verloop van tijd te meten (Figuur 1). De in vivo levende dier beeldvormings inrichting kan echter de grootte van individuele metastasen niet onderscheiden of meten. Zo wordt aan het einde van het experiment een fluorescerende stereomicroscoop gebruikt om het aantal te tellen en de grootte van de fluorescerende metastasen in de longen te meten zonder de noodzaak voor snijden en histologie of immunohistochemie (Figuur 1). Dit protocol kan worden gebruikt om te testen hoe het veranderen van de uitdrukking of functie van een kandidaatgen invloed heeft op metastase vorming en groei. Potentiële therapeutische verbindingen zoals kleine moleculen of functie blokkerende antilichamen kunnen ook worden getest.
Om deze aanpak te demonstreren, hebben we eerst een proof of concept experiment uitgevoerd waarin de essentiële replicatiefactor, replicatie eiwit a3 (RPA3) is neergeslagen in gemetastaseerde muizen borstkankercellen. We laten zien dat muizen die geïnjecteerd zijn met RPA3 knockdown cellen significant minder gemetastaseerde last hebben op elk tijdstip in vergelijking met muizen die met controle cellen worden geïnjecteerd. Analyse van de metastasen-bevattende longen toont aan dat deze verlaagde gemetastaseerde belasting het resultaat is van significant gereduceerde gemetastaseerde kolonisatie en verminderde groei van de uitzaaiingen die vormen. Om deze techniek verder aan te tonen, hebben we getest of gelijktijdige knock-down van Ja-geassocieerde eiwitten (YAP) en transcriptionele co-Activator met een PDZ-bindend motief (TAZ) de metastatische kolonisatie of daaropvolgende groei belemmert. YAP en TAZ zijn twee gerelateerde transcriptionele co-Activators die de kritische stroomafwaartse Effectors van de Hippo pathway zijn. We15,16 en anderen hebben betrokken Yap en taz in metastasen (beoordeeld in17,18,19), wat suggereert dat deze eiwitten goede therapeutische doelen zijn. Consequent, ontdekten we dat muizen geïnjecteerd met YAP/TAZ knockdown cellen aanzienlijk verminderde gemetastaseerd Last. Analyse van de longen toonde aan dat de YAP/TAZ knockdown cellen veel minder metastasen vormden en dat de metastasen die vorm kregen kleiner waren. Deze experimenten laten zien hoe experimentele metastase testen een onderzoeker in staat stellen om snel en goedkoop de rol van een kandidaat-gen in metastase vorming en groei te onderzoeken. Ze laten verder zien hoe het gecombineerde gebruik van levende dierlijke beeldvorming en fluorescerende kwantificering van metastasen in hele longen de onderzoeker in staat stelt om de stappen tijdens gemetastaseerde kolonisatie beter te begrijpen.

<table><tbody><tr><td>10% SDS-PAGE Gel</td><td></td><td></td><td>Voor western blot</td></tr><tr><td>2.5% Trypsin</td><td>Gibco</td><td>15090-046</td><td>Trypsin voor weefselkweek</td></tr><tr><td>96 well flat bottom witte assay plate</td><td>Corning</td><td>3922</td><td>Voor het meten van luciferase en renilla signaal in gekweekte cellen</td></tr><tr><td>Alcohol wipes</td><td></td><td></td><td>Voor het steriliseren van de injectieplaats voor staartvene injecties</td></tr><tr><td>BALB/C muizen (vrouwelijk, 6 weken)</td><td>Taconic</td><td>BALB-F</td><td>Voor metastatische kolonisatie en belastingsmetingen in staartvene</td></tr><tr><td>BSA regular</td><td>VWR Ameresco</td><td>97061-416</td><td>Voor western blot</td></tr><tr><td>Cell lysis buffer</td><td>Cell Signaling</td><td></td><td>Voor het verzamelen van protine monsters</td></tr><tr><td>Celltreat Syringe Filters, PES 30mm, 0.45 &mu;m</td><td>Celltreat</td><td>40-229749-CS</td><td>Voor het filteren van viraal supernatant</td></tr><tr><td>CO2 en euthanasiekam</td><td></td><td></td><td>Voor het euthanaseren van de muizen</td></tr><tr><td>Dual-luciferase reporter assay kit</td><td>Promega</td><td>E1960</td><td>Voor het meten van luciferase en renilla signaal in gekweekte cellen</td></tr><tr><td>Dulbecco&amp;39;s fosfaat gebufferde zoutoplossing</td><td>Himedia</td><td>TS1006</td><td>Voor PBS</td></tr><tr><td>EDTA</td><td>VWR</td><td>97061-406</td><td>Wordt gebruikt om trypsin voor weefselkweek te verdunnen</td></tr><tr><td>FBS 100% US origin</td><td>VWR</td><td>97068-085</td><td>Onderdeel van compleet groeimedium</td></tr><tr><td>Fujifilm LAS-3000 gel imager</td><td>Fujifilm</td><td></td><td>Voor western blot</td></tr><tr><td>GAPDH(14C10) Rabbit mAb</td><td>Cell Signaling</td><td>2118</td><td>Voor western blot</td></tr><tr><td>Goat anti-rabbit IgG (H+L) Secundaire Antilichaam, HRP-conjugaat</td><td>Thermo Scientific</td><td>31460</td><td>Voor western blot</td></tr><tr><td>Human embryonic kidney cells, HEK-293FT</td><td>Invitrogen</td><td>R70007</td><td>Cellijn gebruikt voor het verpakken van virus</td></tr><tr><td>HyClone DMEM/Hoge glucose</td><td>GE Healthcare life sciences</td><td>SH30243.01</td><td>Onderdeel van compleet groeimedium</td></tr><tr><td>Hygromycin B, Ultra Pure Grade</td><td>VWR Ameresco</td><td>97064-810</td><td>Voor antibiotica selectie van geïnfecteerde cellen</td></tr><tr><td>I3-P/i3 Multi-Mode Microplate/EA</td><td>Molecular devices</td><td></td><td>Voor het meten van luciferase en renilla signaal in gekweekte cellen</td></tr><tr><td>Imagej</td><td></td><td></td><td>Gebruikt voor beeldanalyse van longmetastasen: drempel ingesteld op 25 &amp; 100</td></tr><tr><td>Immuno-Blot PVDF Membraan</td><td>Biorad</td><td>1620177</td><td>Voor western blot</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td></td><td></td><td>Voor muizenanesthesie</td></tr><tr><td>IVIS Lumina XRMS In Vivo Imaging System (in vivo apparaat voor live dierenbeeldvorming)</td><td>PerkinElmer</td><td>CLS136340</td><td>Voor in vivo beeldvorming van metastatische belasting</td></tr><tr><td>Leica M205 FA &amp; Lecia DCF3000 G (GFP en helder veld filters)</td><td>Leica Microsystems</td><td></td><td>Microscoop en camera voor het visualiseren, tellen en fotograferen van metastasen in de longen; 10X vergroting, 3.5 sec belichting, 1.4 versterking</td></tr><tr><td>L-Glutamine</td><td>Gibco</td><td>25030-081</td><td>Onderdeel van compleet groeimedium</td></tr><tr><td>Lipofectamine 3000</td><td>Life technologies</td><td>L3000008</td><td>Voor YAP/TAZ-TEAD reporter transfectie</td></tr><tr><td>Living Image 3.2 (beeldsoftwareprogramma)</td><td>PerkinElmer</td><td></td><td>Software voor IVIS</td></tr><tr><td>Muizen borstkanker cellen, 4T1</td><td>Karmanos Cancer Institute</td><td>Aslakson, CJ et al.,1992</td><td>Muizen metastatische borstkanker cellijn</td></tr><tr><td>Multi-Gauge versie 3.0</td><td>Fujifilm</td><td></td><td>Software voor het kwantificeren van western blot band intensiteit</td></tr><tr><td>Opti-MEM (transfectie buffer)</td><td>Gibco</td><td>31985-062</td><td>Voor het verpakken van virus en transfectie</td></tr><tr><td>Penicilline Streptomycine</td><td>Gibco</td><td>15140-122</td><td>Onderdeel van compleet groeimedium</td></tr><tr><td>Pierce BCA eiwit assay kit</td><td>Thermo Scientific</td><td>23225</td><td>Voor het kwantificeren van eiwitconcentratie</td></tr><tr><td>Pierce Fosfatase Remmer Mini Tablets</td><td>Thermo Scientific</td><td>A32957</td><td>Toegevoegd aan cell lysis buffer</td></tr><tr><td>Pierce Protease Remmer Mini Tablets</td><td>Thermo Scientific</td><td>A32953</td><td>Toegevoegd aan cell lysis buffer</td></tr><tr><td>Polybrene (hexadimethrine bromide)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>45-H9268</td><td>Voor infectie</td></tr><tr><td>Puromycin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>45-P7255</td><td>Voor antibiotica selectie van geïnfecteerde cellen</td></tr><tr><td>Rodent restrainer</td><td></td><td></td><td>Voor het vasthouden van muizen tijdens staartvene injectie</td></tr><tr><td>SDS-PAGE loopbuffer</td><td></td><td></td><td>Voor western blot</td></tr><tr><td>TAZ (V3886) Antilichaam</td><td>Cell Signaling</td><td>4883</td><td>Voor western blot</td></tr><tr><td>TBST buffer</td><td></td><td></td><td>Voor western blot</td></tr><tr><td>TC20 geautomatiseerde celteller</td><td>Bio-Rad</td><td></td><td>Voor het tellen van cellen</td></tr><tr><td>Vectors</td><td></td><td></td><td>Zie Tabel 1 voor een volledige lijst van vectoren</td></tr><tr><td>VWR Inverted Fluorescentie Microscoop</td><td>VWR</td><td>89404-464</td><td>Voor het visualiseren van fluorescentie in ZSGreen gelabelde cellen</td></tr><tr><td>Western transfer buffer</td><td></td><td></td><td>Voor western blot</td></tr><tr><td>XenoLight D-Luciferin K+ Zout</td><td>PerkinElmer</td><td>122799</td><td>Substraat geïnjecteerd in muizen voor in vivo bioluminescente IVIS beelden</td></tr><tr><td>X-tremeGENE 9 DNA transfectiereagent (lipide oplossing voor transfectie)</td><td>Roche</td><td>6365787001</td><td>Voor het verpakken van virus</td></tr><tr><td>YAP (D8H1X) XP Rabbit mAb</td><td>Cell Signaling</td><td>14074</td><td>Voor western blot</td></tr></tbody></table>

gecombineerd gebruik van staart ader metastase assays en real-time in vivo beeldvorming om borstkanker te kwantificeren gemetastaseerde kolonisatie en last in de longen

Combined Use of Tail Vein Metastasis Assays and Real-Time In Vivo Imaging to Quantify Breast Cancer Metastatic Colonization and Burden in the Lungs

Metastase is de belangrijkste oorzaak van kanker-gerelateerde sterfgevallen en er zijn beperkte therapeutische opties voor patiënten met gemetastaseerde ziekte. De identificatie en het testen van nieuwe therapeutische doelstellingen die de ontwikkeling van betere behandelingen voor gemetastaseerde ziekten zullen vergemakkelijken, vereisen preklinische in vivo-modellen. Gedemonstreerd hier is een syngene muismodel voor borstkanker gemetastaseerde kolonisatie en daaropvolgende groei. Gemetastaseerde kankercellen worden stabiel met virale vectoren gecodeerd Firefly plaats en zsgreen eiwitten. Kandidaatgenen worden vervolgens stabiel gemanipuleerd in Luciferase/ZsGreen-uitdrukken van kankercellen en vervolgens worden de cellen via de laterale staart ader geïnjecteerd in muizen om gemetastaseerde kolonisatie en groei te assay. Een in vivo imaging-apparaat wordt vervolgens gebruikt om de Bioluminescentie of fluorescentie van de tumorcellen in de levende dieren te meten om veranderingen in de gemetastaseerde last na verloop van tijd te kwantificeren. De uitdrukking van het fluorescerende eiwit maakt het mogelijk het aantal en de grootte van metastasen in de longen aan het einde van het experiment te kwantificeren zonder dat er een snij-of histologische kleuring nodig is. Deze aanpak biedt een relatief snelle en eenvoudige manier om de rol van kandidaatgenen in gemetastaseerde kolonisatie en groei te testen, en biedt veel meer informatie dan de traditionele metastase-assays van de staart ader. Met deze aanpak tonen we aan dat gelijktijdige knock-down van Ja geassocieerde eiwitten (YAP) en transcriptionele co-Activator met een PDZ-bindend motief (TAZ) in borstkankercellen leidt tot een verminderde metastatische last in de longen en dat deze lagere last het resultaat is van een significant verminderde gemetastaseerde kolonisatie en verminderde groei van metastasen.

Om de bovenstaande aanpak te demonstreren, hebben we een proof of concept experiment uitgevoerd waarin een kritische replicatiefactor, RPA3 werd neergeslagen in een metastatische muis borstkanker cellijn (4T122). Terwijl het protocol beschrijft het labelen van de cellen met zowel plaats en fluorescentie eiwitten voorafgaand aan genetische manipulatie, we gebruikten een gemodificeerde aanpak omdat de RNAi vectoren ook zsgreen leveren (Figuur 2a). Ten e...

De beschreven aanpak combineert experimentele staart ader metastase assays met in vivo levende dierlijke beeldvorming zodat real-time monitoring van borstkanker metastase vorming en groei in aanvulling op de kwantificering van metastasen aantal en grootte in de longen.

Gecombineerd gebruik van staart ader metastase assays en real-time in vivo beeldvorming om borstkanker te kwantificeren gemetastaseerde kolonisatie en last in de longen

Metastasis is the main cause of cancer-related deaths and there are limited therapeutic options for patients with metastatic disease. The identification ...

Ons protocol kan worden gebruikt om snel en eenvoudig de rol van elk kandidaat-gen te testen in gemetastaseerde kolonisatie en groei. Het protocol maakt het ook mogelijk om realtime monitoring van metastase, vorming en groei mogelijk te maken, evenals kwantificering van metastasenummer en grootte bij dezelfde dieren zonder dat resectie of histologische kleuring nodig is. Plaat vier T1 cellen op 150.000 cellen per put in een 12-well plaat in complete groeimedia.Incubeer bij 37 graden Celsius 5%kooldioxide 's nachts. De volgende dag, aspirate de groeimedia uit de cellen. Voeg 500 microliters luciferase virale supernatant en 500 microliter fluorescerend eiwit virale supernatant om tegelijkertijd infecteren de cellen met zowel de luciferase en fluorescerende eiwit virale supernatants.Voeg vervolgens een microliter van acht milligram per milliliter hexadimethrine bromide en incubaal toe bij 37 graden Celsius en 5% kooldioxide gedurende 24 tot 48 uur. Probeer de vier T1-cellen met 500 microliter trypsine. Na twee tot vijf minuten, breng alle cellen naar een schaal van zes centimeter in vier milliliter van selectiemedia, waardoor het blussen van de trypsine.Nadat de selectie is voltooid,

combined-use-tail-vein-metastasis-assays-real-time-vivo-imaging-to

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Kankeronderzoek

De nieuwe protocol gerapporteerd in deze studie kan selectieve detectie van longmetastasen in cel resolutie in muizen door...

Verbeterde visualisatie van longmetastasen bij Single Cell resolutie in Muizen van de gecombineerde<em&gt; In-situ</em&gt; Perfusie van het longweefsel en X-gal kleuring van<em&gt; LacZ</em&gt;-Label tumorcellen

In de pathogenese van bot metastase, angiogenese is een cruciaal proces en vormt derhalve een doel voor beeldvorming en therapie. Hier presenteren we een rat model van site-specifieke borstkanker botmetastase en beschrijven strategieën om niet-invasieve beeld...

Multi-modale beeldvorming van angiogenese in een Naakt ratmodel van borstkanker botmetastase Met behulp van Magnetic Resonance Imaging, Volumetrische computertomografie en Echografie

Deze video beschrijft een techniek van het injecteren van gelabelde kankercellen met behulp van staartaderinjectie in een muismodel. We monitoren verder de vorming van borstkankermetastasen en groei met behulp van real-time in vivo live dierbeeldvorming.

Staartaderinjectie: een methode om kankercellen toe te dienen voor gemetastaseerde studies in een muismodel

Dit manuscript beschrijft een methode om te kwantificeren tumor cel accumulatie in de longen in een diermodel van uitzaaiing van de tumor.

Long Tumor cel aanwerving Assay

Dit protocol wordt beschreven hoe kwantitatieve real-time PCR (QRT-PCR) gebruikt om tumorcel specifieke mRNA die metastase in de muis longweefsel detecteren.

Evaluatie van longmetastase in muizenborsttumorvirus Modellen van kwantitatieve real-time PCR

Beschrijven we een betrekkelijk eenvoudige werkwijze voor ex vivo beeldvorming van levende het tumorcel-stroma interacties binnen longmetastasen, gebruik fluorescente reporters in muizen. Gebruik draaiende schijf confocale microscopie Deze techniek maakt visualisatie van levende cellen gedurende ten minste 4 uur en kan worden aangepast om andere inflammatoire longaandoeningen bestuderen.

Ex vivo Live-Imaging van Lung metastase en hun Microenvironment

Dit werk presets een geavanceerd protocol om nauwkeurig te beoordelen tumor laden door detectie van groene fluorescerende eiwitten en bioluminescentie signalen, alsmede de integratie van kwantitatieve moleculaire detectie techniek.

Studeren Triple Negatieve Borstkanker met behulp van Orthotopische Borstkanker Model

Intraveneuze injectie van kankercellen wordt vaak gebruikt in metastaseonderzoek, maar de gemetastaseerde tumorbelasting kan moeilijk te analyseren zijn. Hierin demonstreren we een staartaderinjectiemodel van metastase en nemen we een nieuwe benadering op om de resulterende gemetastaseerde longtumorbelasting te analyseren.

Pathologische analyse van longmetastase na laterale staartaderinjectie van tumorcellen

We beschrijven een meer consistente en snelle methode om longmetastase te kwantificeren in het 4T1 borstkankermodel met behulp van Fiji-ImageJ.

Computergebaseerde beeldanalyse gebruiken om de kwantificering van longmetastase in het 4T1 Breast Cancer Model te verbeteren

Hier presenteren we een protocol voor de chirurgische implantatie van een permanent inwonend optisch venster voor de muriene thorax, dat een hoge resolutie, intravitale beeldvorming van de long mogelijk maakt. De duurzaamheid van het venster maakt het zeer geschikt voor de studie van dynamische cellulaire processen in de longen, vooral die welke langzaam evolueren, zoals gemetastaseerde progressie van verspreide tumorcellen.

Een permanent venster voor het onderzoeken van kankermetastase naar de longen

Het manuscript beschrijft een methodologie voor het opzetten en longitudinaal monitoren van spontane longmetastasen van orthotopisch geïnjecteerde borsttumoren, die vatbaar is voor interventie in alle stadia van de metastatische cascade.

In vivo Beeldvorming om spontane longmetastasen van orthotopisch geïnjecteerde borsttumorcellen te meten

Leer een niet-invasieve methode voor real-time monitoring van borstkankermetastasen met staartaderinjecties en in vivo beeldvorming. Kwantificeer metastasekolonisatie en groei in de longen zonder histologische kleuring.

Gecombineerd gebruik van staart ader metastase assays en real-time in vivo beeldvorming om borstkanker te kwantificeren gemetastaseerde kolonisatie en last in de longen (Video) | JoVE Journal

Gecombineerd gebruik van staart ader metastase assays en real-time in vivo beeldvorming om borstkanker te kwantificeren gemetastaseerde kolonisatie en last in de longen

Meer video's verkennen