26 maart 2020
Dit artikel beschrijft een methode voor het meten van retinale vasculatuur reactiviteit in vivo met menselijke proefpersonen met behulp van een gas ademhaling provocatie techniek om vasoactieve stimuli te leveren tijdens het verwerven van retinale beelden.
ROCTA-gebaseerde beoordeling van retinale vasculaire reactiviteit zal onderzoekers en clinici in staat stellen om retinale vasculaire functie te onderzoeken op het capillaire niveau op een niet-invasieve en veilige manier. Omdat OCTA een door de FDA goedgekeurde beeldvormingsmodaliteit is, kan onze techniek in toekomstige klinische proeven van toepassing zijn als een eindpuntmaat van retinale capillaire functie. De retinale versiculaire reactiviteit van een onderwerp weerspiegelt waarschijnlijk hun retinale vasculaire integriteit voordat klinisch zichtbare tekenen van schade zichtbaar zijn, en biedt daarom een vroege beoordeling van retinale vasculaire pathologie.
Het gasleveringsapparaat kan gemakkelijk worden aangepast aan de meeste soorten oogheelkundige beeldvormingsapparaten en gebruikt in een breed scala van instemmende volwassenen, onderworpen populaties en retinale vasculaire ziekten. Het aantonen van de procedure met Dr.Ashimatey zal Elizabeth Corona, een lab oogheelkundige dienst specialist, en Sam Kushner-Lenhoff, een medische student in mijn laboratorium. Om het apparaat te monteren, gebruik je eerst een adapter om de Douglas-zak aan te sluiten op de schone boorbuis.
Sluit vervolgens de schone boorbuis aan op de driewegklep op de driewegklepselectieve inlaatpoort. Deze combinatie zal de luchtbesturingseenheid worden genoemd. Gebruik vervolgens een geschikte adapter om een eigen rubberen buis in de mondpoort van de niet-ademende klep te plaatsen.
Steek het ellebooggewricht in het andere uiteinde van de slang. Sluit het ellebooggewricht aan op de gasafgiftebuizen. Deze opstelling zal de niet-terugademende eenheid worden genoemd.
Gebruik de eigen rubberen buizen in de juiste adapters om de luchtregeleenheid bij de uitlaatpoort van de driewegklep aan te sluiten op de niet-ademende eenheid in de inlaatpoort van de tweeweg niet-ademende klep. Nu, wikkel afdichting tape rond eventuele losse verbindingen in het gas niet-rebreathing apparaat om een hermetische pasvorm te garanderen. Voltooi de opstelling door het open uiteinde van de gasafgiftebuizen aan te sluiten op een steriel mondstuk.
De volledige gasafvoer setup is hier te zien. Ontsmet de OCTA-kop- en kinsteun voordat u begint met een alcoholuitstrijkje. Plaats een pulsoximeter op de vinger van het onderwerp en begin met het monitoren van de zuurstofverzadigingsniveaus en de puls.
Pas de hoogte van de OCTA setup aan, zodat het onderwerp zijn kin gemakkelijk op de kinsteun kan laten rusten zonder over te uit te stellen of hun nek te buigen. Enloop de gasleveringsbuizen met het mondstuk bevestiging door het hoofd en kinsteun, met het mondstuk naar het onderwerp. Steek het mondstuk in de mond van het onderwerp en moedig het onderwerp aan om de ademhaling te oefenen door de niet-ademende opstelling om vertrouwdheid met het apparaat te bereiken.
Instrueer het onderwerp om diep adem te halen om de uitwisseling van gas te vergemakkelijken en plaats de neus clip op het onderwerp om ervoor te zorgen dat ze ademen door het mondstuk. Schakel de driewegklep indien nodig over naar het juiste kanaal. Hier wordt een luchtcontrolebasislijntest uitgevoerd, zodat de klep in configuratie twee blijft.
En let op de tijd als het begin van een gasinhalatie. Zorgvuldig tijd het begin van de beeldaanwinst, als beelden verkregen vóór een minuut van de blootstelling aan gas kan niet voldoende tijd gehad om de nieuwe gas provocatie voorwaarde weerspiegelen. Laat het onderwerp plaats hun kin op de zijkant van de kin rust tegenover het oog wordt afgebeeld en bewegen hun hoofd naar voren totdat het voorhoofd is in stevig contact met het hoofd rust.
Met het onderwerp naar voren gericht en fixeren op het doel in het midden van hun uitzicht, het centrum van de scan waargenomen in de iris weergave van het live beeld en gebruik maken van de linker en rechter pijlen om de kin rust te verplaatsen totdat de iris komt in focus. Na bevestiging dat de foveal dip is gecentreerd in de OTC-scan, het verwerven van een beeld. Het scannen duurt meestal enkele seconden.
Bekijk de OCTA-afbeelding na de voltooiing van de scan om te bevestigen dat deze van voldoende kwaliteit is en selecteer Opslaan of herscan het oog naar gelang van het geval. Wanneer er geen scans meer van het oog met dit gasmengsel nodig zijn, laat het onderwerp achterover leunen van de machine en verwijder de neus clip en mondstuk. Terwijl het onderwerp neemt een pauze, vul de Douglas zak met de gewenste lucht mengsel en zet vervolgens de drie-weg klep op configuratie twee.
Herhaal de procedure zoals net aangetoond, maar vergeet niet om de drie-weg klep te draaien op het juiste moment. Wanneer alle afbeeldingen zijn verworven, gooi de wegwerpelementen van de setup en gebruik een alcoholuitstrijkje om het hoofd en de kinsteun af te vegen. Veeg de onderwerpstoel, OCTA-tafel en OCTA-handgrepen af met een ontsmettingsmiddel om eventueel dolend speeksel te verwijderen en koppel de setup los in de basiscomponenten.
Om de Douglas tas te legen, rol de zak van het distale uiteinde naar de inlaatpoort aangesloten op de drie-weg klep en bewaar de zak op een geschikte locatie voor toekomstige ophalen. Vul vervolgens een container die groot genoeg is om de gasafgiftebuizen onder te dompelen met een voldoende verdund en goed gemengd wasmiddel ontsmettingsmiddel en week de tweeweg niet-rebreathingklep, het ellebooggewricht, de eigen rubberen buizen en buizenadapters in het ontsmettingsmiddelbad. Na ten minste 10 minuten, grondig spoelen alle materialen met water en de lucht drogen ze op een papieren handdoek op een schoon aanrecht.
Vervolgens, zet alle gedroogde onderdelen in opslag tot de volgende analyse. Horizontale B-scans worden vaak waargenomen op het OCTA-apparaat. Wanneer goed uitgelijnd en gezien als een 2-D in-face beeld, zullen deze B-scans vormen een OCTA angiogram.
Het OCTA-angiogram wordt geëxporteerd vanuit het apparaat en wordt gebruikt voor beeldanalyse. Om deze gegevens te kwantificeren op een manier die vergelijkingen tussen onderwerpen en tussen verschillende omstandigheden mogelijk maakt, kan een statistiek zoals de dichtheid van het scheepsskelet worden berekend op een geskeletteerd OCTA-beeld. Een warmtekaart van deze geskeletteerde beelden kan vervolgens worden gebruikt om de verandering in de dichtheid van het vat kwalitatief aan te tonen.
Het is belangrijk om de procedure grondig uit te leggen aan het onderwerp. Laat ze oefenen met ademhalen via het testapparaat, zodat ze eventuele vragen kunnen stellen als dat nodig is. Elke retinale of oculaire beeldvorming procedure kan gemakkelijk worden aangepast aan retinale vasculaire reactiviteit metingen zoals de onze mogelijk te maken.
Deze methode kan ook worden toegepast op elk ziekteproces dat de vasculaire functie in het oog kan beïnvloeden. Volg het onderwerp en hun vitale functies nauw en stop het experiment als u zich zorgen maakt of eventuele tekenen van nood waarneemt.
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's
Dit artikel beschrijft een non-invasieve methode voor het beoordelen van de reactiviteit van de retinale vasculatuur in vivo met behulp van optische coherentietomografie-angiografie (OCTA) en een provocatietechniek met gasinhalatie om vasoactieve stimuli toe te dienen. Deze aanpak stelt onderzoekers en clinici in staat om de retinale vasculaire functie op capillair niveau te evalueren, wat vroegtijdige inzichten biedt in retinale vasculaire pathologie.
Het beoordelen van de vasculaire reactiviteit van het netvlies op capillair niveau maakt vroege detectie van vasculaire dysfunctie mogelijk in preklinische en klinische onderzoeksomgevingen. Deze niet-invasieve, op OCTA gebaseerde methode biedt kwantificeerbare functionele eindpunten die targetvalidatie en mechanische risicoreductie ondersteunen bij de ontwikkeling van oogheelkundige geneesmiddelen. De aanpasbaarheid aan diverse proefpopulaties en gasmengsels vergroot de translationele relevantie voor diabetische retinopathie en andere vasculaire netvliessiekten.
Deze methode is geïntegreerd in het ontdekkingscontinuüm door functionele vasculaire read-outs te bieden die informeren naar de fasen van targetvalidatie en leadidentificatie.