Name: Metingen van fysiologische stressreacties in C. Elegans (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-05-21T13:30:00.000+00:00
Duration: 10 min 36 s
Description: Leer fysiologische stressreacties meten in C. elegans met behulp van fluorescerende transcriptiereporters en high-throughput assays. Deze methode onderzoekt genetische en farmacologische effecten op beschermende cellulaire paden.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

R.BZ. wordt ondersteund door de EMBO long term fellowship en The Larry L. Hillblom Foundation. R.H.S wordt ondersteund door subsidie 5F32AG03202023-02 via het National Institute of Aging (NIA) en de Glenn Foundation for Medical Research Postdoctoral Fellowship. A.F. wordt ondersteund door subsidie F32AG051355 via het NIA. H.K.G. wordt ondersteund door subsidie DGE1752814 via het National Science Foundation Graduate Research Fellowship Program. M.G.M. wordt ondersteund door 1F31AG060660-01 tot en met NIA. A.D. wordt ondersteund door de Thomas and Stacey Siebel Foundation, het Howard Hughes Medical Institute en 4R01AG042679-04 en 5R01AG055891-02 van NIA en 5R01ES021667-09 van NIEHS. Wij danken Larry Joe, Melissa Sanchez, Naame Kelet en Anel Esquivel voor belangrijke technische bijstand. Wij danken het Morimoto lab en de CGC (gefinancierd door NIH Office of Research Infrastructure Program P40 OD010440) voor stammen.

De auteurs hebben niets te onthullen.

Hier worden methoden beschreven om cellulaire stressreacties in C. eleganste ondervragen, met behulp van fluorescerende transcriptieverslaggevers en fysiologische stressoverlevingstesten. De verslaggevers maken allemaal gebruik van GFP expressie gedreven onder de promotor van een downstream transcriptie doel van de transcriptie factoren die betrokken zijn bij de montage cellulaire stress reacties. Het gebruik van hsp-4p::GFP gemoduleerd door XBP-1s-gemedieerde UPRER, hsp-6p::GFP geco...

Het vermogen van een organisme om te reageren op veranderingen in de intra- en buitencellulaire omgeving is cruciaal voor zijn overleving en aanpassing. Dit wordt bereikt op cellulair niveau door middel van tal van beschermende trajecten die de integriteit van de cel te waarborgen. Terwijl tal van cellulaire componenten zijn onderworpen aan stress-geassocieerde schade, een belangrijke betrokkenheid van cellulaire stress reacties is het herstellen en beschermen van de homeostase van de cellulaire proteome. Echter, de compartimentering van eiwitten in speciale structuren, genaamd organellen, vormt een uitdaging voor de cel, omdat het niet kan vertrouwen op een gecentraliseerde vorm van eiwit kwaliteitscontrole om ervoor te zorgen dat alle eiwitten in de cel goed worden gevouwen en functioneel. Daarom, om te gaan met verstoringen van hun eiwitten, organellen hebben ontwikkeld speciale kwaliteitscontrole mechanismen, die kunnen voelen verkeerd gevouwen eiwitten en activeren van een stress reactie in een poging om de stress te verlichten in dat compartiment. De cytosol is bijvoorbeeld afhankelijk van de hitteschokrespons (HSR), terwijl het endoplasmatische reticulum (ER) en mitochondriën afhankelijk zijn van hun compartimentspecifieke ontvouwde eiwitrespons (UPR). De OxSR dient om de toxische effecten van reactieve zuurstofsoorten (ROS) te verlichten. Elke stressreactie wordt geactiveerd in aanwezigheid van cellulaire uitdagingen en milieubeledigingen en induceert een op maat gemaakte transcriptiereactie. De kenmerken van deze reacties omvatten het synthetiseren van moleculen die verkeerd gevouwen eiwitten (zoals chaperonen) opnieuw vouwen die gericht zijn op de juiste organelle, of als alternatief beschadigde eiwitten verwijderen door eiwitafbraak. Het niet activeren van deze stressreacties resulteert in accumulatie van beschadigde eiwitten, cellulaire disfunctie die wordt gepropageerd tot systemisch falen van weefsels en uiteindelijk de dood van het organisme. De functie en regulering van de verschillende stressreacties worden elders herzien1.
Veel inzichten met betrekking tot de regulering en activiteit van cellulaire stress reacties zijn toegeschreven aan de nematode, Caenorhabditis elegans, een meercellig model organisme in genetisch onderzoek. Nematoden maken het niet alleen mogelijk om stressreacties op cellulair niveau te bestuderen, maar ook op het organismeniveau; nematoden zijn gebruikt om de effecten van genetische verstoringen of blootstelling aan drugs en verontreinigende stoffen op hun groei en overleving te bestuderen. Hun snelle generatie tijd, isogene, transparantie, genetische traktaat, en gebruiksgemak tijdens experimenten maken ze ideaal voor dergelijke studies. Bovendien maken de relatief snelle fysiologische reactie op stress (tussen uren en een paar dagen) en de evolutionaire conservering van cellulaire paden nematoden een prominent hulpmiddel bij het bestuderen van stressbestendigheid.
Er zijn twee veelgebruikte E. coli stammen gebruikt als een voedselbron om Te groeien C. elegans: standaard OP50, een B-stam waarin de meeste experimenten is historisch uitgevoerd2 en HT115, een K-12 stam die wordt gebruikt voor bijna alle RNAi experimenten3,4. Het is belangrijk op te merken dat er aanzienlijke verschillen zijn tussen OP50 en HT115 bacteriële diëten. Groei op deze verschillende bacteriële bronnen is aangetoond dat grote verschillen in metabolisch profiel veroorzaken, mitochondriale DNA-kopie nummer, en een aantal belangrijke fenotypes, waaronder levensduur5. Sommige van deze verschillen worden toegeschreven aan vitamine B12-tekort geassocieerd met groei op OP50-bacteriën, wat kan resulteren in defecten in mitochondriale homeostase en verhoogde gevoeligheid voor ziekteverwekkers en spanningen. Al deze fenotypes zijn aangetoond te worden verlicht door de groei op HT115 bacteriën, die hogere niveaus van vitamine B126hebben. Daarom wordt aanbevolen dat alle experimenten op fysiologische stressreacties worden uitgevoerd op HT115-bacteriën, ongeacht de noodzaak van RNAi-aandoeningen. Echter, vanwege het gemak van het onderhoud van dieren op OP50, alle standaard groei (dat wil zeggen, onderhoud en versterking van dieren) kan worden uitgevoerd op OP50, als significante verschillen in de experimentele paradigma's hier beschreven werden niet gedetecteerd in wormen gehandhaafd op OP50, zolang ze werden verplaatst naar HT115 post synchronisatie (dat wil zeggen, van luik post-bleken met of zonder L1 arresteren) tot experimenten.
Hier wordt de karakterisering van de activiteit van cellulaire stressreacties met behulp van twee functionele methoden beschreven. Opgemerkt moet worden dat de gepresenteerde protocollen voornamelijk gericht zijn op cellulaire stressreacties en hun impact op eiwithomeostase. Ten eerste, fluorescerende transcriptie verslaggevers worden gebruikt, die worden gereguleerd door endogene genpromotoren die specifiek worden geactiveerd in reactie op verschillende cellulaire spanningen. Deze fluorescerende transcriptie verslaggevers zijn gebaseerd op de transcriptie-inductie van specifieke genen die inheems deel uitmaken van de stress respons. HSP-4, een hitteshockeiwit orthologous voor de menselijke chaperonne HSPA5/BiP, wordt bijvoorbeeld geactiveerd bij ER-stress en lokaliseert naar de ER om de stress te verlichten. In omstandigheden van ER-stress (bijvoorbeeld blootstelling aan tunicamycine), wordt een groen fluorescerend eiwit (GFP), geplaatst onder de verordening van de hsp-4 promotor, gesynthetiseerd in hoge niveaus zoals kan worden beoordeeld door fluorescerende microscopie of kwantitatief gemeten met behulp van grote deeltjesstroomcytometrie van nematoden7. Op dezelfde manier wordt de promotor van een mitochondriale chaperonne, hsp-6 (orthologous tot zoogdier HSPA9), gebruikt om de activering van de UPRMT8te controleren , en de promotor van de cytosolic chaperonne hsp-16.2 (orthologous voor de menselijke kristalline alfagenen) wordt gebruikt voor de beoordeling van de activiteit van de HSR9. Deze verslaggevers laten een snelle karakterisering van de trajecten geactiveerd in reactie op verschillende verstoringen.
Vaak worden de hier gepresenteerde verslaggevers afgebeeld met behulp van microscopie, die een kwalitatieve output van de activering van stressreacties biedt. Hoewel beeldvormingstechnieken zowel informatie geven over de intensiteit als de weefsellocatie van de hierboven beschreven verslaggevers, is de kwantificering niet altijd nauwkeurig of robuust. Hoewel het mogelijk is om fluorescerende activering te kwantificeren met behulp van imaging analyse tools, deze methoden zijn relatief lage doorvoer en steekproef grootte is klein, als gevolg van het relatief lage aantal dieren afgebeeld. Het gemak en de mogelijkheid om grote hoeveelheden dieren snel te verkrijgen maken C. elegans een ideaal model systeem om de activering van fluorescerende stress verslaggevers test door het gebruik van een grote deeltjesstroom cytometer. Een cytometer met grote deeltjesstroom is in staat om op te nemen, te analyseren en te sorteren op basis van grootte en fluorescentie van veel levende dieren. Met behulp van deze methode is het mogelijk om de fluorescerende intensiteit, grootte en ook ruimtelijke (2D) informatie te krijgen voor duizenden wormen. Het systeem wordt aangestuurd met Behulp van FlowPilot, die het mogelijk maakt voor real-time data-acquisitie en analyse van de gemeten parameters. Hier worden methoden voor zowel microscopische beeldvorming als kwantitatieve analyse met behulp van een cytometer met grote deeltjesstroom aangeboden als methoden om de activering van stressreacties te meten.
Naast reporter analyse, de gevoeligheid of weerstand van dieren tegen stress kan worden gemeten met behulp van fysiologische stress testen. Dit wordt bereikt door dieren bloot te stellen aan stressvolle omgevingen die specifieke cellulaire stresspaden activeren. Hier worden verschillende methoden verstrekt om de gevoeligheid van hele dieren voor specifieke soorten stressoren te meten.
ER-stress wordt toegepast op C. elegans met behulp van het chemische middel, tunicamycine, dat N-gekoppelde glycosylation blokkeert, waardoor ophoping van verkeerd gevouwen eiwitten in de ER10ontstaat. In C. elegansleidt de groei bij blootstelling aan tunicamycine tot grote verstoringen in de ER-functie en een aanzienlijk verminderde levensduur11. Door het meten van de overleving van dieren op tunicamycine-bevattende platen, er stress gevoeligheid van dieren kan worden gekwantificeerd. Bijvoorbeeld, dieren met buitenbaarmoederlijke UPRER-inductie en dus verhoogde weerstand tegen eiwit misfolding stress in de ER hebben een verhoogde overleving bij blootstelling aan tunicamycine in vergelijking met wilde dieren12.
Oxidatieve en mitochondriale stress wordt toegepast op C. elegans door dieren bloot te stellen aan het chemische middel, paraquat. Paraquat is een veel gebruikt herbicide, die superoxide vorming specifiek in de mitochondriën13veroorzaakt. Als gevolg van de specifieke lokalisatie van mitochondriën afgeleide reactieve zuurstofsoorten (ROS), paraquat tests worden vaak gebruikt als een "mitochondriale" stress test. Superoxide wordt echter snel omgezet in waterstofperoxide door mitochondriale superoxide dismutases (SOD's)14. Waterstofperoxide kan vervolgens diffuus uit de mitochondriën en oxidatieve stress veroorzaken in andere compartimenten van de cel. Daarom beschrijven we paraquat overlevingstesten als het meten van de gevoeligheid voor zowel mitochondriale als oxidatieve stress (andere oxidatieve stresstesten zijn te vinden15).
Thermotolerantie testen worden uitgevoerd in C. elegans door het plaatsen van dieren in verhoogde temperaturen. De omgevingstemperaturen voor aaltjes zijn ~15-20 °C en thermische belasting wordt veroorzaakt bij temperaturen boven 25 °C16,17. Thermotolerantietesten worden over het algemeen uitgevoerd bij temperaturen variërend van 30-37 °C, omdat dieren grote cellulaire defecten vertonen bij deze temperatuur en overlevingstests binnen 24 uur16,18worden voltooid. Hier zijn twee alternatieve methoden voorzien voor het uitvoeren van thermotolerantietests: groei bij 34 °C en groei bij 37 °C. Samen kunnen de hier gepresenteerde protocollen worden gebruikt om grootschalige schermen uit te voeren in combinatie met standaard genknock-down met behulp van RNA-interferentie of chemische drugsbibliotheken.
Het protocol kan worden opgesplitst in 4 brede procedures- groei van C. elegans en voorbereiding op beeldvorming (secties 1 en 2), beeldvorming van transcriptieverslaggevers met behulp van fluorescerende microscopie (secties 3-5), kwantitatieve metingen van verslaggevers met behulp van een cytometer met grote deeltjesstroom (sectie 6) en fysiologische tests om stressgevoeligheid te meten in C. elegans (sectie 7).

<table><tbody><tr><td>Antimycin A</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A8674</td><td>voor mitochondriale stress</td></tr><tr><td>Bacto Peptone</td><td>Fisher Scientific</td><td>DF0118072</td><td>voor NGM platen</td></tr><tr><td>BD Difco granulated agar</td><td>VWR</td><td>90000-782</td><td>voor NGM platen</td></tr><tr><td>Calcium chloride dihydrate</td><td>VWR</td><td>97061-904</td><td>voor NGM platen</td></tr><tr><td>Carbenicillin</td><td>BioPioneer</td><td>C0051-25</td><td>voor RNAi</td></tr><tr><td>Cholesterol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>57-88-5</td><td>voor NGM platen</td></tr><tr><td>COPAS Biosorter</td><td>Union Biometrica</td><td>350-5000-000</td><td>uitgerust met een lichtbron van 488 nm.</td></tr><tr><td>COPAS Cleaning Solution</td><td>Union Biometrica</td><td>300-5072-000</td><td>om te gebruiken met COPAS</td></tr><tr><td>COPAS Sheath Solution</td><td>Union Biometrica</td><td>300-5070-100</td><td>om te gebruiken met COPAS</td></tr><tr><td>DMSO</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>472301</td><td>oplosmiddel voor geneesmiddelen</td></tr><tr><td>IPTG dioxaanvrij</td><td>Denville Scientific</td><td>CI8280-4</td><td>voor RNAi</td></tr><tr><td>LB Broth Miller</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP1426500</td><td>voor LB</td></tr><tr><td>M205FA stereoscoop</td><td>Leica</td><td>10450040</td><td>uitgerust met een Leica DFC3000G monochromatische CCD-camera, standaard Leica GFP-filter (ex 395-455, EM 480 LP) en LAS X-software</td></tr><tr><td>Magnesium sulfate heptahydrate</td><td>VWR</td><td>EM-MX0070-3</td><td>voor NGM platen, M9</td></tr><tr><td>Paraquat</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>36541</td><td>voor oxidatieve/mitochondriale stress</td></tr><tr><td>Potassium Chloride</td><td>Fisher</td><td>P217-500</td><td>voor bleekvloeistofoplossing</td></tr><tr><td>Potassium phosphate dibasic</td><td>VWR</td><td>EM-PX1570-2</td><td>voor NGM platen</td></tr><tr><td>Potassium phosphate monobasic</td><td>VWR</td><td>EM-PX1565-5</td><td>voor M9</td></tr><tr><td>Revolve</td><td>ECHO</td><td>75990-514</td><td>uitgerust met een Olympus 4x Plan Fluorite NA 0.13 objectieflens, standaard Olympus FITC-filter (ex 470/40; em 525/50; DM 560) en een iPad Pro voor camera en om ECHO-software aan te sturen</td></tr><tr><td>Sodium Azide</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>71289-50G</td><td>voor beeldvorming</td></tr><tr><td>Sodium Chloride</td><td>EMD Millipore</td><td>SX0420-5</td><td>voor NGM platen, M9</td></tr><tr><td>Sodium phosphate dibasic</td><td>VWR</td><td>71003-472</td><td>voor M9</td></tr><tr><td>Tert-butyl hydroperoxide</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>458139</td><td>voor oxidatieve stress</td></tr><tr><td>Tetracycline hydrochloride</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T7660-5G</td><td>voor RNAi</td></tr><tr><td>Tunicamycin</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T7765-50MG</td><td>voor ER-stress</td></tr></tbody></table>

metingen van fysiologische stressreacties in c. elegans

Measurements of Physiological Stress Responses in C. Elegans

Organismen worden vaak blootgesteld aan fluctuerende omgevingen en veranderingen in intracellulaire homeostase, die schadelijke effecten kunnen hebben op hun proteome en fysiologie. Zo hebben organismen ontwikkeld gerichte en specifieke stress reacties gewijd aan schade te herstellen en te handhaven homeostase. Deze mechanismen omvatten de ontvouwde eiwitrespons van het endoplasmatische reticulum (UPRER),de ontvouwde eiwitrespons van de mitochondriën (UPRMT),de hitteschokrespons (HSR) en de oxidatieve stressrespons (OxSR). De hier gepresenteerde protocollen beschrijven methoden om de activering van deze trajecten en hun fysiologische gevolgen in de nematode, C. elegans, te detecteren en te karakteriseren. Ten eerste wordt het gebruik van trajectspecifieke fluorescerende transcriptieverslaggevers beschreven voor snelle cellulaire karakterisering, medicijnscreening of grootschalige genetische screening (bijvoorbeeld RNAi of gemuteerde bibliotheken). Daarnaast worden complementaire, robuuste fysiologische testen beschreven, die kunnen worden gebruikt om de gevoeligheid van dieren voor specifieke stressoren direct te beoordelen, wat dient als functionele validatie van de transcriptieverslaggevers. Samen maken deze methoden een snelle karakterisering van de cellulaire en fysiologische effecten van interne en externe proteotoxische verstoringen mogelijk.

Met behulp van transcriptie verslaggevers om activering van stress reacties te meten Hier worden fluorescerende transcriptieverslaggevers gebruikt, die dienen als robuuste instrumenten om de activering van de meeste stressreacties in C. elegans te meten. GFP-expressie wordt gedreven onder de promotor van canonieke doelen van master transcriptional regulators die betrokken zijn bij het reageren op compartimentspecifieke spanningen. Een uitgebreide lijst van vee...

Hier karakteriseren we cellulaire proteotoxische stressreacties in de nematode C. elegans door het meten van de activering van fluorescerende transcriptieverslaggevers en assaying gevoeligheid voor fysiologische stress.

Metingen van fysiologische stressreacties in C. Elegans

Organisms are often exposed to fluctuating environments and changes in intracellular homeostasis, which can have detrimental effects on their proteome and ...

Deze methoden kunnen worden gebruikt om stressreacties in C.elegans te karakteriseren en om te bepalen of genetische of farmacologische verstoringen de activering van beschermende cellulaire paden beïnvloeden. Deze methoden maken snelle en hoge doorvoer testen van honderden verstoringen, zoals gen knockdown zowel op de moleculaire en fysiologische niveaus. Om ervoor te zorgen dat de test correct wordt uitgevoerd, omvatten positieve en negatieve controles.Synchroniseer gezonde, goed gevoede dieren tot het juiste stadium en gebruik verse platen voor het experiment. Visualisatie van micromanipulatie van de wormen met een pick kan nieuwe gebruikers helpen begrijpen hoe de wormen kunnen worden opgesteld en beoordeeld op levensvatbaarheid. Het aantonen van de procedures zal Worden Phil Frankino, Holly Gildea, en Melissa Metcalf, afgestudeerde studenten in ons laboratorium.Om dieren te gebruiken die GFP uitdrukken onder de promotor van het hitteshockeiwit vier voor activering van het endoplasmische reticulum ontvouwde eiwitrespons, kweek je gesynchroniseerde reporterdieren bij 20 graden Celsius tot de L4-fase en was je de wormen van de plaat met M9-medium en breng je over in een buis. Na

measurements-of-physiological-stress-responses-in-c-elegans

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

We hebben een video-rate volgen microscoop systeem dat kan opnemen en te...

C. elegans Tracking en Behavioral Measurement

Deze video introduceert een overlevingstest op korte termijn die een behandeling op acute toxiciteit test of een genetische stam test op resistentie tegen een toxische aandoening.  Het voorbeeldprotocol toont een voorbeeld overlevingstest waarbij wormen worden getest op hun vermogen om oxidatieve stress veroorzaakt door paraquat (PQ) te weerstaan.

C. elegans Overlevingstest: een toxiciteitstest op korte termijn

Om de relatie tussen eiwithomeostase, stress en veroudering te bestuderen, hebben we veranderingen in eiwitvouwing gemonitord door eiwitdisfunctie, eiwitlocalisatie in de cel en eiwitstabiliteit op organismisch, cellulair en eiwitniveau te volgen, met behulp van de genetisch hanteerbare metazoa Caenorhabditis elegans als modelsysteem.

Gebruik Caenorhabditis elegans Als een modelsysteem voor de Protein Homeostase studeren in een meercellige

Een ei-in-worm (EIW) test is een handige methode om eierleggende gedrag te kwantificeren. Veranderingen in eileg kan een gedragsmatige reactie van het modelorganisme...

Het meten van de effecten van bacteriën op<em&gt; C. Elegans</em&gt; Gedrag Met behulp van een Ei Retention Assay

Een protocol wordt beschreven dat gebruikt anoxie / uithongering C. elegans model ischemie / reperfusie. Functionele resultaten omvatten een verhoogde mortaliteit, zichtbare afwijkingen in GFP-gelabelde neuronale processen, en verminderde gedragsreacties die neuronale functie nodig hebt.

Een Anoxia-verhongering Model voor ischemie / reperfusie in<em&gt; C. elegans</em

C. elegans is een aantrekkelijk modelorganisme om signaaltransductieroutes te bestuderen die betrokken zijn bij oxidatieve stressresistentie. Hier bieden we een protocol om oxidatieve stressresistentie van C. elegans dieren in vloeibare fase te meten, met behulp van verschillende oxiderende agentia in 96-wells platen.

Het meten van oxidatieve stress Weerstand van<em&gt; Caenorhabditis elegans</em&gt; In 96-well microtiterplaten

Hier worden gestandaardiseerde protocollen gepresenteerd om de inductie van de warmteschokrespons (HSR) in Caenorhabditis elegans te beoordelen met behulp van RT-qPCR op moleculair niveau, tl-verslaggevers op cellulair niveau en thermorecovery op organism niveau.

Gestandaardiseerde methoden voor het meten van inductie van de heat shock response in Caenorhabditis elegans

Proteostatische achteruitgang is een kenmerk van veroudering en vergemakkelijkt het begin van neurodegeneratieve ziekten. We schetsen een protocol om proteostase kwantificeerbaar te meten in twee verschillende Caenorhabditis elegans-weefsels door heterologe expressie van polyglutamine-herhalingen gefuseerd met een fluorescerende verslaggever. Dit model maakt een snelle in vivo genetische analyse van proteostase mogelijk.

Kwantificering van weefselspecifieke proteostatische achteruitgang van Caenorhabditis elegans

Deze studie presenteert protocollen voor twee semi-geautomatiseerde locomotorische activiteitsanalysebenaderingen in C. elegans complex I ziekte gas-1(fc21) wormen, namelijk ZebraLab (een medium-throughput assay) en WormScan (een high-throughput assay) en biedt vergelijkende analyse tussen een breed scala aan onderzoeksmethoden om het gedrag van nematoden en de geïntegreerde neuromusculaire functie te kwantificeren.

Vergelijkende analyse van experimentele methoden om dierlijke activiteit in Caenorhabditis elegans-modellen van mitochondriale ziekte te kwantificeren

Darmmicroben kunnen de gezondheid van hun gastheer positief of negatief beïnvloeden via specifieke of geconserveerde mechanismen. Caenorhabditis elegans is een handig platform om te screenen op dergelijke microben. Het huidige protocol beschrijft high-throughput screening van 48 bacteriële isolaten op impact op nematodenstressresistentie, gebruikt als proxy voor de gezondheid van wormen.

High-Throughput screening van microbiële isolaten met impact op caenorhabditis elegans gezondheid

Caenorhabditis elegans dienen als een uitstekend modelsysteem met robuuste en goedkope methoden voor het onderzoeken van de gezondheid, levensduur en veerkracht tegen stress.

Onderzoek naar goedkope methoden om levensduur en gezondheid te meten in Caenorhabditis elegans

Leer fysiologische stressreacties meten in C. elegans met behulp van fluorescerende transcriptiereporters en high-throughput assays. Deze methode onderzoekt genetische en farmacologische effecten op beschermende cellulaire paden.

Metingen van fysiologische stressreacties in C. Elegans

Meer video's verkennen