Name: Arteriële Pouch Microchirurgische Bifurcatie Aneurysma Model in het Konijn (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-05-14T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 11 s
Description: Leer een gestandaardiseerde microchirurgische techniek voor het creëren van arteriële pouch bifurcatie aneurysma's bij konijnen. Dit model ondersteunt preklinische evaluatie van endovasculaire apparaten.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De auteurs bedanken Olgica Beslac en Kay Nettelbeck voor hun uitstekende ondersteuning en technische assistentie tijdens de peri-operatieve fase en Alessandra Bergadano, DVM, PhD, voor het toegewijde toezicht op de diergezondheid op lange termijn.

Alle veterinaire zorg werd uitgevoerd in overeenstemming met de institutionele richtlijnen (alle experimenten werden goedgekeurd door het Lokaal Comité voor Dierverzorging van het kanton Bern, Zwitserland (BE 108/16)) en uitgevoerd onder toezicht van een door de raad gecertificeerde dierenarts-anesthesist. De ARRIVE-richtlijnen en de 3R-principes werden strikt gevolgd17,18.
OPMERKING: Huis alle dieren bij een kamertemperatuur van 22 \u201224 Celsius (°C) en handhaaf een 12 uur (h) licht/donker cyclus. Zorg elke keer voor gratis toegang tot water, pellets en ad libitum hooidieet. Statistische analyses werden uitgevoerd met behulp van de niet-parametrische Wilcoxon-Mann-Whitney-U-test. Een waarschijnlijkheidswaarde (p) van ≤ 0,05 werd als significant beschouwd.
1. Prechirurgische fase
<ol><li>Voer een gedetailleerd preoperatief klinisch onderzoek uit van alle konijnen die zijn gepland voor een operatie onmiddellijk naast een rustige, aseptische operatiekamer met een temperatuur van 23 ± 3 °C.<ol>
<li>Noteer het gewicht van elk dier, evalueer macroscopisch de slijmvliezen, capillaire navultijd en polskwaliteit.</li>
		<li>Verderop voert u hartauscultatie uit met een stethoscoop en abdominale palpatie.</li>
		<li>Op basis van de klinische bevindingen, schrijf een classificatie van de American Society of Anesthesiologists (ASA) toe aan elk konijn19. Neem alleen dieren met een ASA I-score op in het onderzoek.</li>
		<li>Scheer beide buitenste oren met een elektrisch scheerapparaat en breng prilocaïne-lidocaïnecrème aan op zowel auriculaire slagaders als aderen.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Verdoof het konijn met een combinatie van 20 milligram (mg)/killogram (kg) ketamine, 100 mg/kg dexmedetomidine en 0,3 mg/kg subcutaan geïnjecteerd methadon (SC) via een spuit.</li>
	<li>Laat elk dier minstens 15 min ongemoeid.</li>
	<li>Daarna, onder aanvullende oxygenatie met 3 liter (l) / minuut (min) door een los gezichtsmasker en constante monitoring door een pulsoximeter, plaatst u een canule van 22 G in de linker auriculaire centrale slagader en nog eens 22 G canule in de auriculaire ader van het contralaterale oor.</li>
	<li>Scheer het chirurgische veld (nek) en injecteer 0,75% peri-incisie ropivacaïne intradermaal. Scheer vervolgens het voorhoofd en bereid je voor op het plaatsen van pediatrische elektro-encefalografische (EEG) sensoren.</li>
	<li>Induceer algemene anesthesie met propofol 1-2 mg / kg intraveneus (IV) om effect te hebben. Intubeer vervolgens onmiddellijk de luchtpijp van alle konijnen met een siliconen buis (3 millimeter (mm) inwendige diameter) onder capnografische controle. Vervoer daarna alle konijnen naar de operatiekamer, plaats ze in dorsale lighouding en sluit de buis aan op een pediatrisch cirkelsysteem.</li>
	<li>Bereik anesthesieverdieping en -onderhoud door isofluraan in zuurstof, gericht op een maximale eindgetijdenisofluraanconcentratie van 1,3%.</li>
	<li>Zorg voor klinische en instrumentele monitoring (pulsoximetrie, doppler en invasieve bloeddruk, 3-lead elektrocardiogram, EEG, rectale temperatuurbewaking en ingeademde en uitgeademde gassen) tot tracheale extubatie.</li>
	<li>Om de hydratatie te behouden, dient u Ringer's lactaat toe met een continue infusiesnelheid (CRI) van 5 ml/kg/h via de veneuze toegang. Bevestig altijd de juiste anesthesie met behulp van teenknijpers met een interval van 10 minuten.</li>
	<li>Desinfecteer het chirurgische veld met povidonjodium van het manubrium sterni naar beide kaakhoeken. Voer nu steriele drapering van het chirurgische veld uit.</li>
	<li>Geef tijdens de operatie analgesie met lidocaïne bij een CRI van 50 microgram (μg)/kg/min en fentanyl bij 3\u201210 μg/kg/h. Pas spontane of geassisteerde ventilatie toe, evenals permissieve hypercapnie. Voer arteriële bloedgasanalyse ten minste één keer uit tijdens de operatie.</li>
	<li>Behandel relevante hypotensie (gemiddelde arteriële druk < 60 mmHg) met noradrenaline. Voorkom onderkoeling (rectale temperatuur ≤ 38 °C) met behulp van een verwarmingskussen of een verwarmingssysteem voor geforceerde lucht.</li>
</ol>2. Chirurgische fase – Stap I
<ol><li>Start de operatie met een mediane huidincisie van het manubrium sterni tot het niveau van de kaakhoeken / strottenhoofd. Ontleed de huid en het zachte weefsel scherp met een scalpel, chirurgische schaar en tang. Scheid de subcutis en het vetkussen mediaal door stompe dissectie.</li>
	<li>Voer de voorste bovenkam van de sternocleidomastoïde spier mediaal aan de linkerkant in door stompe dissectie, met behulp van microtangen en chirurgische scharen.</li>
	<li>Voer macroscopisch een stompe voorbereiding uit en scheid de linker CCA zorgvuldig distaal van de nervus vagus om larynxparese te voorkomen door verder gebruik te maken van een microtang en een chirurgische schaar (figuur 2). Merk op dat de bifurcatie van het linker CCA dient als intraoperatief oriëntatiepunt (figuur 3 en figuur 4A). Gebruik voor alle volgende stappen een weke delenverspreider om de chirurgische visualisatie te verbeteren.</li>
	<li>Na succesvolle bereiding en bevrijding van de linker distale CCA van de nervus vagus, dient u papaverine (40 mg/ml, 1:1 verdund in 0,9% isotone natriumchlorideoplossing) lokaal toe. Bescherm alle vaatsegmenten continu met micro-wattenstaafjes, gevolgd door verdere papaverine-toediening extern. Plaats de met papaverine doordrenkte linker CCA onder het autologe spierweefsel om het vat te beschermen tegen uitdroging onder het licht van de operatiemicroscoop.</li>
	<li>Wissel van kant terwijl u het comfort van de chirurg tijdens de operatieve procedure maximaliseert. Herhaal dezelfde chirurgische procedure aan de rechterkant. Dissecteer het CCA distaal en proximaal tot aan de vooraf gedefinieerde oriëntatiepunten (halsslagadersplitsing ter hoogte van de kaakhoeken/strottenhoofd en de interne halsader; Figuur 4A,B). Plaats opnieuw een strooier en dien micro-swabs en papaverine toe zoals eerder beschreven.</li>
	<li>Vóór de ligatie van de rechter proximale CCA, injecteert u heparine (500 internationale eenheden (IE)/kg) systemisch via een veneuze oorkatheter.</li>
	<li>Gebruik voortaan een chirurgische microscoop. Eerst ligaat u het rechter proximale CCA met een 4-0 niet-absorbeerbare hechting direct aan het einde van het macroscopisch zichtbare proximale oriëntatiepunt om spanning op het arteriële vat te voorkomen.<ol>
<li>Ten tweede, breng een 6-0 niet-absorbeerbare ligatuur precies 4 \ u20125 mm distaal aan met behulp van een vatclip voor meting, aangezien na het snijden distaal van de eerste 4-0 ligatuur, de resulterende arteriële buidel bij elk dier een gestandaardiseerde lengte van ongeveer 3 \ u20124 mm zal hebben (figuur 5A, C).</li>
	</ol>
</li>
	<li>Na het aanspannen van de 6-0 ligatuur, klemt u de rechter CCA zo ver mogelijk los met een tijdelijke vaatclip (zoals normaal gebruikt bij cerebrale aneurysmachirurgie) om endotheelschade te voorkomen en een lang vaatsegment voor irrigatie te creëren om trombogenese te voorkomen (figuur 5B).</li>
	<li>Voer nu een snede distaal uit naar de 4-0 niet-absorbeerbare ligatuur. Om de arteriële buidel te oogsten (figuur 5C), voert u een tweede snede distaal uit naar de 6-0 niet-absorbeerbare ligatuur.</li>
	<li>Reinig het arteriële zakje zorgvuldig van al het zachte weefsel en meet de lengte, breedte en diepte (figuur 5C) met een vaatclip. Als er geen verdere wijziging nodig is, bewaar het autologe arteriële transplantaat in een gehepariniseerde oplossing (500 IE/100 ml in 0,9% isotoon natriumchloride) bij kamertemperatuur tot verder gebruik.</li>
</ol>3. Arteriële zakjesdegradatie
<ol><li>Als een arteriële zakjesdegradatie nodig is, reinig het dan zorgvuldig van zacht weefsel en preïncubeerde het met 100 IE varkenselastase opgelost in 5 ml Tris-buffer bij kamertemperatuur op de dag van het experiment gedurende 20 minuten. Gebruik geen penseeltechniek. Incubeer het arteriële zakje intra- en extra-luminaal met behulp van een shaker.</li>
	<li>Voordat u het zakje in een gehepariniseerde oplossing van 0,9% isotoon natriumchloride plaatst, veegt u het gedurende 3 minuten voorzichtig drie keer met een anatomische tang in 0,9% isotone natriumchlorideoplossing om het resterende varkenselasase uit te spoelen.</li>
	<li>Houd indien nodig het lumen van het arteriële zakje geopend met een microbuisje gemaakt van siliconen; bescherm de linker en rechter CCA zorgvuldig tijdens de hele chirurgische ingreep met natte microvullingen.</li>
</ol>4. Chirurgische fase – Stap II
<ol><li>Voor verdere bereiding van de CCA, plaats twee ronde micro swabs direct eronder om de slagader oppervlakkiger te bewegen. Plaats nu een micro-wattenstaafje met een paarse vulling onder de linker CCA op het distale derde voor een betere visualisatie van de slagader.</li>
	<li>Spoel de rechter proximale CCA met een oplossing van 0,9% isotoon natriumchloride in combinatie met 500 IE heparine opgelost in 100 ml isotone natriumchloride. Om een spanningsvrije anastomose te creëren, plaatst u de rechter CCA onder de fat pad / peritracheale musculatuur door een chirurgische schaar te gebruiken om deze naar de linkerkant te tunnelen. Verwijder het zachte weefsel van de slagader.<ol>
<li>Voer nu een 2 mm vismondincisie uit aan de proximale kant van de rechter CCA met behulp van een microschaar en tang.</li>
	</ol></li>
	<li>Wijzig de zijkant op de operatietafel. Klem de linker distale CCA met een andere tijdelijke vaatclip gevolgd door de proximale linker CCA met twee tijdelijke vaatclips. Bescherm alle blootgestelde vaatsegmenten tegen uitdroging onder het chirurgische licht met behulp van natte microdoekjes.</li>
	<li>Bevrijd het distale derde deel van het linker CCA volledig uit zacht weefsel en voer een arteriotomie uit. Gebruik een chirurgische microtang en pak voorzichtig wat zacht weefsel. Til nu de slagader op en snijd de linker distale CCA langzaam in met een chirurgische microschaar. Spoel de vatsegmenten met heparine (500 IE opgelost in 100 ml 0,9% isotone natriumchlorideoplossing).</li>
	<li>Na het uitvoeren van de arteriotomie met gebogen microtang en microschaar, vergroot u de arteriotomie op het distale derde deel van het linker CCA distaal, met een afmeting van ongeveer 2-voudige van de diameter van de rechter stomp van de halsslagader en het autologe transplantaat. Hierdoor kan er voldoende bloed in de arteriële buidel stromen.</li>
	<li>Haal het arteriële zakje uit de gehepariniseerde zoutoplossing. Plaats het zakje in het chirurgische veld, waar de bifurcatie is gepland. Begin met het hechten van de achterkant van de rechter halsslagader stomp caudaal gelegen met een niet-absorbeerbare 9-0 hechting, gevolgd door een hechting aan de schedel-aan de achterkant ter hoogte van de incisie van de vismond. Naai de achterkant van distale naar proximale door enkele steken.</li>
	<li>Houd tijdens het hechten alle voorgeïncubeerde elastasezakjes vochtig met continue irrigatie. Gebruik tijdens het hechten van de vaatwand van het zakje een gebogen chirurgische microtang om het lumen voorzichtig te openen met de punt. Gebruik bij het hechten van delen van de linker- of proximale rechter CCA een rechte chirurgische microtang. Hecht daarna de horizontale achterkant.</li>
	<li>Hecht vervolgens de horizontale voorkant, beginnend bij de koepel van het aneurysma die naar de basis beweegt. Begin daarna met enkele steken distaal aan de voorkant die caudaal bewegen.<ol>
<li>Let bij alle stappen 4.5\u20124.8 tijdens het hechten van de anastomose op om het deel van het vat dicht bij de arteriotomie te grijpen om iatrogene stenose te voorkomen. Bevochtig ook continu alle vatsegmenten tijdens de hele chirurgische procedure extraluminaal met een spuit gevuld met heparinized natriumchlorideoplossing (500 IE opgelost in 100 ml 0,9% isotoon natriumchloride) en bescherm ze met natte micro-swabs.</li>
		<li>Voordat u de anastomose voltooit, irrigeert u het hele complex met heparinized 0,9% isotone natriumchlorideoplossing intraluminaal (500 IE opgelost in 100 ml 0,9% isotoon natriumchloride). Pas op dat elastase gemodificeerde arteriële zakjes zo snel mogelijk moeten worden genaaid vanwege hun sterke neiging om uit te drogen en te trombose. Vanwege het agressieve gedrag van de resterende elastaseconcentratie in de buidel met betrekking tot het verteren van omtrekvaten, gaat u snel verder met de operatie om het vatcomplex snel opnieuw te perfuseren.</li>
	</ol></li>
	<li>Verwijder alle tijdelijke vaatklemmen stapsgewijs.<ol>
<li>Verwijder de distale klem van de linker CCA. Accepteer kleine bloedingen en stel het vast door voorzichtig micro-wattenstaafjes op de anastomose te drukken. Verwijder daarna de klem van de rechter CCA, druk zachtjes met micro swab en tang om trombusvorming te voorkomen.</li>
		<li>Vervang indien nodig de tijdelijke vasculaire clips om voldoende stolling te bieden. Verwijder daarna beide vaatklemmen van de linkerkant proximaal. Vervang indien nodig in een stap clips om coagulatie mogelijk te maken of om opnieuw te naaien.</li>
	</ol></li>
	<li>Voer in dit stadium fluorescentieangiografie van het vaatcomplex uit (figuur 6 en figuur 7). OPMERKING: Fluorescentieangiografie wordt uitgevoerd door 1 ml fluoresceïne IV toe te dienen, met behulp van 2 bandpassfilters, een smartphone met videocamera en een fietsspot. Deze procedure is elders al beschreven 20,21,22.</li>
	<li>Sluit ten slotte de operatieve situs. Herlaapt en hecht het vetkussen voorzichtig met een 3-0 resorbeerbare hechting met enkele knopen om de anastomose te beschermen. Sluit subcutis en huid op dezelfde manier.</li>
</ol>5. Postoperatieve fase
<ol><li>Stop de toediening van isofluraan en systemische analgesie aan het einde van de operatie en zorg voor tracheale extubatie zodra de slikreflex is teruggekeerd.</li>
	<li>Dien 0,5 mg/kg meloxicam IV, 10 mg/kg aspirine (ASS) IV, 100 μg vitamine B12 SC en 20 mg/kg clamoxyl IV toe.</li>
	<li>Zorg voor aanvullende oxygenatie en actieve opwarming totdat de konijnen spontaan de sternale lighouding hebben herwonnen.</li>
	<li>Voer postoperatieve follow-up en dierverzorging vier keer per dag uit gedurende de eerste drie dagen, in overeenstemming met de richtlijnen voor de beoordeling en het beheer van pijn bij knaagdieren en konijnen23,24.</li>
	<li>Dien postoperatieve analgesie toe via een fentanylpleister (12 μg / h) aangebracht op het buitenoor, meloxicam eenmaal daags SC gedurende drie dagen en methadon als reddingstherapie SC, volgens het scoreblad voor pijnevaluatie. Dien 250 IE/kg laagmoleculaire heparine (LMH) subcutaan toe gedurende drie dagen bij alle konijnen.</li>
</ol>

Dit werk werd ondersteund door de onderzoeksfondsen van de Onderzoeksraad, Kantonsspital Aarau, Aarau, Zwitserland en de Zwitserse nationale wetenschappelijke stichting SNF (310030_182450). De auteurs zijn als enige verantwoordelijk voor het ontwerp en de uitvoering van de gepresenteerde studie en verklaren geen concurrerende belangen te hebben.

Onze studie toont de haalbaarheid aan van het creëren van een echt bifurcatie-aneurysmamodel met verschillende wandomstandigheden bij konijnen. In totaal werden 14 vrouwelijke Nieuw-Zeelandse witte konijnen met een gemiddeld gewicht van 3,7 ± 0,09 kg en een gemiddelde leeftijd van 112 ± 3 dagen in de studie opgenomen. 85,72% van alle aneurysmata bleef patent tijdens een follow-up na 28 dagen. Twee dieren stierven vroegtijdig (12,5% sterfte).
Eerdere studies suggereerden een verscheidenheid aan...

Subarachnoïdale bloeding als gevolg van intracranieel aneurysma (IA)ruptuur kan effectief worden gecontroleerd door endovasculaire of microchirurgische occlusietechnieken 1,2,3,4. Verschillende endovasculaire therapieën, om de belangrijkste beperking van IA-recidief na coiling te overwinnen, wonnen de afgelopen decennia aan belang, waardoor een verhoogde behoefte aan het testen van endovasculaire apparaten ontstond. Om deze nieuwe behandelingsbenaderingen te testen, zijn geschikte diermodellen die reologische eigenschappen, hemodynamiek en aneurysmawandaandoeningen respecteren, zeer gerechtvaardigd 5,6,7. In deze context hebben klinische en preklinische studies al de belangrijke rol van aneurysmawandaandoeningen met betrekking tot aneurysmaruptuur en recidief na occlusie aangetoond, met name gericht op het verlies van muurschilderingcellen 7,8,9.
Tot nu toe zijn experimentele aneurysmata bij konijnen meestal gecreëerd door elastase geïncubeerde gewone halsslagader (CCA) stronken of veneuze zakjes gehecht in een kunstmatige CCA-bifurcatie. 10,11,12,13,14,15,16 Een echt arteriële pouch bifurcatiemodel is dus nooit beschreven.
Het doel van deze studie was om een veilige, snelle en gestandaardiseerde techniek te ontwerpen voor microchirurgische creatie van bifurcatie-aneurysmata met verschillende wandomstandigheden in een konijnenmodel (figuur 1). Dit werd bereikt door niet-gemodificeerde en gemodificeerde arteriële zakjes te hechten in een kunstmatig gecreëerde bifurcatie van beide CCA's.

<table><tbody><tr><td>3-0 resorbeerbare hechtdraad</td><td>Ethicon Inc., USA</td><td>VCP428G</td><td></td></tr><tr><td>4-0 niet-resorbeerbare hechtdraad</td><td>B. Braun, Germany</td><td>G0762563</td><td></td></tr><tr><td>6-0 niet-resorbeerbare hechtdraad</td><td>B. Braun, Germany</td><td>C0766070</td><td></td></tr><tr><td>9-0 niet-resorbeerbare hechtdraad</td><td>B. Braun, Germany</td><td>G1111140</td><td></td></tr><tr><td>Adrenaline</td><td>Amino AG</td><td>1445419</td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Amiodarone</td><td>Helvepharm AG</td><td>5078567</td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Anesthesie-apparaat</td><td>Dr&auml;ger</td><td></td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Aspirin</td><td>Sanofi-Aventis (Suisse) SA</td><td>622693</td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Atropine</td><td>Labatec Pharma SA</td><td>6577083</td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Bandpass filter blauw</td><td>Thorlabs</td><td>FD1B</td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Bandpass filter groen</td><td>Thorlabs</td><td>FGV9</td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Bipolare tang</td><td></td><td></td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Fietsschijnwerper</td><td></td><td></td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Biemer vaatclip (2 x)</td><td>B. Braun Medical AG, Aesculap, Switzerland</td><td>FD560R</td><td>tijdelijk</td></tr><tr><td>Bispectral index (neonataal)</td><td></td><td></td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Bloeddrukmanchet (neonataal)</td><td></td><td></td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Clamoxyl</td><td>GlaxoSmithKline AG</td><td>758808</td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Dexmedetomidine</td><td>Ever Pharma</td><td>136740-1</td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Elektrokardiogram elektroden</td><td></td><td></td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Elastase</td><td>Sigma Aldrich</td><td>45125</td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Ephedrin</td><td>Amino AG</td><td>1435734</td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Esmolol</td><td>OrPha Swiss GmbH</td><td>3284044</td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Fentanyl (intraveneuze toediening)</td><td>Janssen-Cilag AG</td><td>98683</td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Fentanyl (transdermaal)</td><td>Mepha Pharma AG</td><td>4008286</td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Fluoresceïne</td><td>Curatis AG</td><td>5030376</td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Fragmin</td><td>Pfizer PFE Switzerland GmbH</td><td>1906725</td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Glyco</td><td></td><td></td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Verwarmingskussen</td><td></td><td></td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Isotone natriumchloride oplossing (0,9%)</td><td>Fresenius KABI</td><td>336769</td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Ketamine</td><td>Pfizer</td><td>342261</td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Laboratoriumschudler</td><td>Stuart</td><td>SRT6</td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Lidocaine</td><td>Streuli Pharma AG</td><td>747466</td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Longuettes</td><td></td><td></td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Metacam</td><td>Boehringer Ingelheim</td><td>P7626406</td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Methadone</td><td>Streuli Pharma AG</td><td>1084546</td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Microbuisjes</td><td></td><td></td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Micro naaldhouder</td><td></td><td></td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Midazolam</td><td>Accord Healthcare AG</td><td>7752484</td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Naaldhouder</td><td></td><td></td><td>elke ander</td></tr><tr><td>O2-Gesichtsmaske</td><td></td><td></td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Operatiemicroscoop</td><td>Wild Heerbrugg</td><td></td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Papaverine</td><td>Bichsel</td><td></td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Prilocaine-lidocaine crème</td><td>Emla</td><td></td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Propofol</td><td>B. Braun Medical AG, Switzerland</td><td></td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Pulsoxymeter</td><td></td><td></td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Rectale temperatuur sonde (neonataal)</td><td></td><td></td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Ropivacaine</td><td>Aspen Pharma Schweiz GmbH</td><td>1882249</td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Scalpell</td><td>Swann-Morton</td><td>210</td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Kleine dieren scheerapparaat</td><td></td><td></td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Smartphone</td><td></td><td></td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Zachte weefseltang</td><td></td><td></td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Zachte weefsel spreider</td><td></td><td></td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Roestvrijstalen sponskommen</td><td></td><td></td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Steriele micro-doekjes</td><td></td><td></td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Stethoscoop</td><td></td><td></td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Rechte en gebogen micro-tang</td><td></td><td></td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Rechte en gebogen micro-schaar</td><td></td><td></td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Rechte en gebogen tang</td><td></td><td></td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Chirurgische doek</td><td></td><td></td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Chirurgische schaar</td><td></td><td></td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Spuiten 1 ml, 2ml en 5 ml</td><td></td><td></td><td>elke ander</td></tr><tr><td>Tris-Buffer</td><td>Sigma Aldrich</td><td>93302</td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Vasculair clip applicator</td><td>B. Braun, Germany</td><td>FT495T</td><td></td></tr><tr><td>Venen en arteriële katheter 22 G</td><td></td><td></td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Vitarubin</td><td>Streuli Pharma AG</td><td>6847559</td><td>elke generiek</td></tr><tr><td>Yasargil titan standaard clip (2 x)</td><td>B. Braun Medical AG, Aesculap, Switzerland</td><td>FT242T</td><td>tijdelijk</td></tr></tbody></table>

arteriële pouch microchirurgische bifurcatie aneurysma model in het konijn

Arterial Pouch Microsurgical Bifurcation Aneurysm Model in the Rabbit

Endovasculaire behandeling voor intracraniële aneurysmata is de afgelopen decennia aan belang gewonnen, waardoor er een verhoogde behoefte is aan het testen van endovasculaire apparaten. Diermodellen die reologische, hemodynamische en aneurysmawandomstandigheden respecteren, zijn zeer gerechtvaardigd. Daarom was het doel van deze studie om een nieuwe gestandaardiseerde en reproduceerbare chirurgische techniek te ontwerpen om autologe arteriële buidelbifurcatie-aneurysmata te creëren met niet-gemodificeerde en gemodificeerde wandomstandigheden bij konijnen.
Bifurcatie-aneurysmata werden gecreëerd door end-to-side anastomose van de rechterkant op de linker gemeenschappelijke halsslagader, beide dienend als ouderslagaders voor de arteriële buidel, die microchirurgisch werd genaaid. Grafts werden genomen uit de proximale rechter gemeenschappelijke halsslagader, hetzij voor de controle (n = 7, onmiddellijke autologe re-implantatie) of gemodificeerde (n = 7, geïncubeerd met 100 internationale eenheden elastase gedurende 20 minuten vóór autologe herimplantatie) groep. De doorgankelijkheid van de pouch en de ouderslagader werden onmiddellijk na de creatie gecontroleerd door fluorescentieangiografie. Bij follow-up (28 dagen) ondergingen alle konijnen contrastversterkte magnetische resonantieangiografie en fluorescentieangiografie gevolgd door aneurysma oogsten, macroscopische en histologische evaluatie.
In totaal werden 16 vrouwelijke Nieuw-Zeelandse witte konijnen geopereerd. Twee dieren stierven vroegtijdig. Bij de follow-up bleef 85,72% van alle aneurysmata patent. Beide groepen onthulden een toename van de aneurysmagrootte in de loop van de tijd; dit was meer uitgesproken in de controlegroep (6,48 ± 1,81 mm3 op het moment van creatie vs. 19,85 ± 6,40 mm3 bij follow-up, p = 0,037) dan in de gemodificeerde groep (8,03 ± 1,08 mm3 op het moment van creatie vs. 20,29 ± 6,16 mm3 bij follow-up, p = 0,054).
Onze bevindingen tonen de adequaatheid aan van dit nieuwe konijnenmodel dat het mogelijk maakt om bifurcatie-aneurysmata met verschillende wandomstandigheden te creëren in een microchirurgische benadering. Gezien de uitstekende doorgankelijkheid op lange termijn en de eigenschap van aneurysmagroei in de loop van de tijd, kan dit model dienen als een belangrijk hulpmiddel voor preklinische evaluatie van nieuwe endovasculaire therapieën.

Na een pilotserie van zeven dieren werden in totaal 16 dieren opgenomen in het experimentele protocol. Twee dieren stierven vroegtijdig en werden daarom uitgesloten van de eindanalyse (12,5% sterfte). Berekend op 14 dieren was de onmiddellijke doorgankelijkheid van aneurysma tijdens fluorescentieangiografie 71,43% in zowel de controle- als de gemodificeerde groep. Vier aneurysmata moesten worden heropend met opeenvolgende trombusevacuatie en na een herhaalde fluorescentieangiografie was er in alle gevallen een gedocument...

Het ontwikkelen en testen van endovasculaire apparaten voor intracraniale aneurysmabehandeling is nog steeds van groot belang. De meeste aneurysmamodellen die tegenwoordig worden gebruikt, missen de belangrijke kenmerken van een arteriële gedegenereerde wand of de hemodynamiek van een echte bifurcatie. Daarom wilden we een nieuw arteriële buidelbifurcatiemodel bij konijnen ontwerpen.

Arteriële Pouch Microchirurgische Bifurcatie Aneurysma Model in het Konijn

Endovascular treatment for intracranial aneurysms gained importance over the past decades, consequently there is an increased need of testing endovascular ...

Aangezien de ontwikkeling en het testen van endovasculaire apparaten bij de behandeling van intracranieel aneurysma nog steeds sterk gevraagd is. We hebben een nieuwe arteriële pouch bifurcatie model bij konijnen ontworpen. Dit model maakt gebruik van een enkele, hoog gestandaardiseerde en gemakkelijk reproduceerbare microchirurgische techniek om een autoloog materiaal pouch bifurcatie aneurysma te creëren met gemodificeerde en niet-gemodificeerde wandcondities bij konijnen.Na bevestiging van een gebrek aan respons op de pedale reflex bij een geanesthetiseerd volwassen konijn, maak een mediane huidsnede van het manubrium sterni tot het niveau van de larynx, en gebruik een scalpel, chirurgische schaar en forceps om de huid en het zachte weefsel scherp te dissecteren. Gebruik micro forceps en chirurgische schaar om de voorste bovenste rand van de sternocleidomastoïdeus spier onmiddellijk aan de linkerkant te betreden door middel van een blunt dissectie. En voer macroscopisch een blunt voorbereiding uit om de linkergemeenschappelijke halsslagader voorzichtig distaal te scheiden van de nervus vagus om larynx parese te voorkomen.Toedienen van 40 milligram per milliliter papaverine lokaal in de slagader en positioneer de met papaverine doordrenkte slagader onder het autologe spierweefsel om het vat te beschermen tegen uitdroging onder het licht van de chirurgische microscoop. Wissel van kant en voer dezelfde dissectie uit aan de rechterkant van het dier zoals zojuist is gedemonstreerd. Wanneer de rechtergemeenschappelijke halsslagader is geïsoleerd, injecteer 500 internationale eenheden per kilogram heparine systemisch via een veneuze oordruppelaar.Na het aanhalen van de zes nul ligatuur, gebruik een tijdelijke vaatclip om de rechtergemeenschappelijke halsslagader zo distaal mogelijk af te klemmen om endotheelschade te voorkomen, om een lang vaatsegment te creëren voor irrigatie om trombogenese te voorkomen. Om de pouch te verzamelen, snijd het distale vat tot de vier nul niet-absorbeerbare ligatuur. Snijd vervolgens het vat distaal van de 6-0 niet-absorbeerbare ligatuur.Reinig de arteriële pouch zorgvuldig van alle zacht weefsel en gebruik een vaatclip om de lengte, breedte en diepte van de pouch te meten. Als een pouch degradatie nodig is, pre-incubeer de gereinigde pouch met 100 eenheden porcine elastase opgelost in vijf milliliter Tris buffer op kamertemperatuur gedurende 20 minuten. Voor verdere voorbereiding van de gemeenschappelijke halsslagader, plaats twee micro watten direct onder de gemeenschappelijke halsslagader om het vat oppervlakkig te laten bewegen en plaats een extra micro watten met een blauwe padding onder de linkerslagader in het distale derde deel voor een betere visualisatie van het vat.Wissel van kant om toegang te krijgen tot de linkerkant van het dier en gebruik micro schaar en forceps om een twee millimeter vissnuit insnijding te maken op de proximale kant van de rechtergemeenschappelijke halsslagader. Gebruik de tweede tijdelijke vaatclip om de linker distale gemeenschappelijke halsslagader af te klemmen en klem de proximale linkergemeenschappelijke halsslagader met twee extra tijdelijke vaatclips. Wanneer alle klemmen zijn geplaatst, bevrijd de distale derde van de linkergemeenschappelijke halsslagader volledig van het zachte weefsel en voer een arteriotomie uit.Spoel nu het recipiëntvat met heparine gevulde zoutoplossing en bevrijd het complex van een adventitia, naai vervolgens de rechtergemeenschappelijke halsslagader aan de linkergemeenschappelijke halsslagader. Breng de arteriële pouch van de heparine gevulde zoutoplossing over naar het chirurgische veld waar de bifurcatie gepland is. Terwijl alle aspecten van het vaatcomplex gehydrateerd worden gehouden met een continue zoutoplossing irrigatie, naai de pouch aan het vat en verwijder vervolgens alle tijdelijke vasculaire klemmen in stapsgewijze wijze.Wanneer alle klemmen zijn verwijderd, toedienen van een milliliter fluoresceïne intraveneus om fluoresceine angiografie van het vaatcomplex uit te voeren. Sluit vervolgens de operatieve situs volgens standaard protocollen. In deze experimentele analyse vertoonden dieren met aneurysma's geïnduceerd door de vitale of elastase pouch methoden een toename in aneurysmagrootte in de loop van de tijd.De gemiddelde duur van de chirurgische procedure voor de controlegroep was 164 plus minuus 10 minuten vergeleken met 201 plus minuus 13 minuten voor de gemodificeerde groep. Een gemiddelde van 24 plus minuus een onderbroken hechting was nodig om aneurysma's te creëren in de gecontroleerde groep, terwijl 25 plus minuus twee steken vereist waren in de elastase groep. Metingen kunnen vervolgens worden uitgevoerd door gebruik te maken van driedimensionale reconstructies van de MR beeldvorming en gedetailleerde histologische analyse.Een zorgvuldige scheiding van de gemeenschappelijke halsslagader van de nervus vagus is essentieel om postoperatieve complicaties te voorkomen. Om trombogenese te voorkomen, houd het vat en arteriële pouch complex gehydrateerd. Gezien de uitstekende patititie bereikt met aneurysmagroei in de loop van de tijd, kan dit model dienen als een belangrijk hulpmiddel voor de preklinische evaluatie van nieuwe endovasculaire apparaten.

arterial-pouch-microsurgical-bifurcation-aneurysm-model-in-the-rabbit

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowetenschap

Een geoptimaliseerde techniek voor de microchirurgische creatie van arteriële bifurcatie aneurysma's na te bootsen bifurcatie menselijke cerebrale aneurysma's is beschreven. Een veneuze zakje wordt gehecht in een kunstmatig gecreëerde echte splitsing van beide gemeenschappelijke halsslagaders. Vergemakkelijkte microchirurgische technieken en agressief postoperatieve antistolling en analgesie leiden tot een minimale morbiditeit en hoge aneurysma doorgankelijkheid tarieven.

Microchirurgische Veneuze Pouch Arteriële-splitsing Aneurysma&#39;s in het Rabbit Model: technische aspecten

Source: Wanderer, S., et al. Arterial Pouch Microsurgical Bifurcation Aneurysm Model in the Rabbit. J. Vis. Exp. (2020)This video demonstrates the creation of an experimental aneurysm model in a rabbit using an elastase-treated vessel pouch. After excising a segment of the right CCA, the pouch is treated with elastase, then sutured to the left CCA to restore blood flow. The resulting stress on the weakened pouch walls induces aneurysm formation.

Developing an Experimental Aneurysm Model in a Rabbit Using an Elastase-Treated Vessel Pouch

Histologische en biochemische veranderingen na aneurysma endograft uitsluiting zijn nog onduidelijk. We beschrijven een nieuw model van endograft implantatie op een muizen aneurysma. Door trombus analyse met en zonder hardnekkig circulerende bloed-interface en nieuwe endovasculaire biomaterialen evaluatie, zal dit model helpen om beter te begrijpen endovasculaire aneurysma uitsluiting pathobiology.

Een nieuw muizenmodel van endovasculaire aortaaneurismareparatie

Microchirurgische zijwand-aneurysmata bij ratten worden gecreëerd door end-to-side anastomose van een aorta-transplantaat naar de abdominale aorta. We presenteren stapsgewijze instructies en bespreken anatomische en chirurgische details voor het succesvol creëren van experimentele zakvormige aneurysmata.

De Helsinki Rat Microchirurgische Sidewall Aneurysma Model

Dit protocol beschrijft de stappen voor het maken van een konijnenmodel met twee elastase-verteerde aneurysmata met verschillende hemodynamiek (stomp en bifurcatie constellatie). Dit maakt het testen van nieuwe endovasculaire apparaten in aneurysmata met verschillende angioarchitectuur en hemodynamische omstandigheden binnen één dier mogelijk.

Creatie van twee sacculaire elastase-verteerde aneurysmata met verschillende hemodynamiek in één konijn

Hier beschrijven we de techniek voor het microchirurgisch maken van gigantische bifurcatie-aneurysma's bij konijnen voor de evaluatie van endovasculaire apparaten.

Microchirurgische creatie van gigantische bifurcatie-aneurysma's bij konijnen voor de evaluatie van endovasculaire apparaten

Een geschikt diermodel is nodig om de pathologische mechanismen die ten grondslag liggen aan aortaklepstenose (AVS) te begrijpen en om de werkzaamheid van therapeutische interventies te evalueren. Dit protocol beschrijft een nieuwe procedure voor de ontwikkeling van het AVS-konijnenmodel via een directe ballonverwonding in vivo.

Een konijnen aortaklepstenosemodel geïnduceerd door direct ballonletsel

Een van de pathologische kenmerken van AD is de vorming van amyloïde eiwit β positief neuritische plaques. In dit protocol beschrijven we twee methoden om seniele plaques op te sporen in transgene muizen die model AD: immunohistochemische detectie met behulp van de ABC-en DAB-methode en fluorescerende detectie met behulp van thioflavin S kleuringsmethode.

Detectie van neuritische plaques in de ziekte van Alzheimer Mouse Model

Een methode om immunostain en chordotonal organen te visualiseren in de larven en poppen...

Visualisatie van proprioceptoren in<em&gt; Drosophila</em&gt; Larven en poppen

Trace eyeblink klassieke conditionering (ECC) werd gebruikt om te beoordelen hippocampal-afhankelijke associative leren bij volwassen ratten die waren toegediend een hoge concentratie (11,9% v/v) van alcohol tijdens de vroege ontwikkeling van de neonatale hersenen. In het algemeen, zijn ECC procedures diagnostische hulpmiddelen voor het opsporen van hersenen dysfunctie over vele psychologische en biomedische instellingen voor geluid.

Het gebruik van Trace Eyeblink klassieke conditionering te beoordelen Hippocampal dysfunctie in een Rat Model van Fetal Alcohol Spectrum Disorders

Leer een gestandaardiseerde microchirurgische techniek voor het creëren van arteriële pouch bifurcatie aneurysma's bij konijnen. Dit model ondersteunt preklinische evaluatie van endovasculaire apparaten.

Arteriële Pouch Microchirurgische Bifurcatie Aneurysma Model in het Konijn

Meer video's verkennen