Waarom is temperatuurbeheersing belangrijk voor de reproduceerbaarheid van hydrogels?

Temperatuurbeheersing zorgt voor consistente gelatiekinetiek en materiaalviscositeit tijdens geautomatiseerd pipetteren, wat een directe invloed heeft op de structurele integriteit en reproduceerbaarheid van hydrogel-gebaseerde 3D-modellen. De studie toonde een significant verminderde standaarddeviatie aan bij het gebruik van temperatuurhouders, wat wijst op een verbeterde consistentie tussen batches.

Hoe verbetert de tip-touch functie de betrouwbaarheid van de assay?

De tip-touch-functie verwijdert overtollig materiaal van de pipetpunt na het dispenseren, waardoor contaminatie wordt voorkomen en een nauwkeurige volumetoediening van viskeuze hydrogels wordt gegarandeerd. Dit vermindert de variabiliteit in absorbantiemetingen en ondersteunt de reproduceerbare formulering van dubbelnetwerk-hydrogels.

Welke spectrofotometrische meting valideert de consistentie van het hydrogelmengsel?

De absorbantie wordt gemeten bij 450 nanometer met Orange G als tracer om de homogeniteit van het mengsel en de nauwkeurigheid van de concentratie te valideren. Gemiddelde waarden, standaarddeviatie en variatiecoëfficiënt worden berekend om de uniformiteit over 96-wells platen te beoordelen.

Waarom is geautomatiseerd mengen essentieel voor viskeuze biomaterialen in discovery?

Handmatig mengen van viskeuze materialen zoals hydrogels is tijdrovend en introduceert menselijke fouten, wat leidt tot irreproduceerbare resultaten die targetvalidatie en assayontwikkeling belemmeren. Automatisering standaardiseert het proces, verhoogt de doorvoer en maakt een betrouwbare generatie van door de gebruiker gedefinieerde concentraties mogelijk.

Welke statistische resultaten bevestigen een succesvolle uitvoering van het protocol?

Het analyse-spreadsheet berekent automatisch de gemiddelde absorbentie, de standaardafwijking en de variatiecoëfficiënt voor de rijen en kolommen van de 96-well plaat, waardoor de ruimtelijke uniformiteit en reproduceerbaarheid kunnen worden beoordeeld. Lage waarden voor de variatiecoëfficiënt duiden op een succesvolle uitvoering van het protocol met minimale variabiliteit.

Een open source technologieplatform om op Hydrogel gebaseerde 3D-cultuurmodellen op een geautomatiseerde en gestandaardiseerde manier te produceren

5.5K weergaven

Geciteerd door 7

08:29 min

31 maart 2022

10.3791/61261-v

31 maart 2022

5.5K weergaven

Sebastian Eggert¹^,² , Melanie Kahl¹^,³ , Ross Kent¹ , Lukas Gaats¹ , Nathalie Bock¹^,³^,⁴^,⁵ , Christoph Meinert¹^,² , Dietmar W. Hutmacher¹^,²^,³^,⁴^,⁶

¹Centre in Regenerative Medicine, Institute of Health and Biomedical Innovation, Queensland University of Technology, ²School of Mechanical, Medical and Process Engineering, Science and Engineering Faculty, Queensland University of Technology, ³School of Biomedical Sciences, Faculty of Health, Queensland University of Technology, ⁴Australian Prostate Cancer Research Centre, Institute of Health and Biomedical Innovation, Queensland University of Technology, ⁵Translational Research Institute, Queensland University of Technology, ⁶ARC ITTC in Additive Biomanufacturing, Institute of Health and Biomedical Innovation, Queensland University of Technology

Dit protocol dient als een uitgebreide tutorial voor gestandaardiseerde en reproduceerbare menging van viskeuze materialen met een nieuwe open source automatiseringstechnologie. Gedetailleerde instructies worden gegeven over de werking van een nieuw ontwikkeld open source werkstation, het gebruik van een open source protocol designer, en de validatie en verificatie om reproduceerbare mengsels te identificeren.