Name: Een kwantitatieve detectiemethode voor microRNAs in de nier van een ischemisch nierletsel muismodel (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-09-11T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 1 s
Description: Leer een kwantitatieve detectiemethode voor microRNA's in nierweefsel van een ischemisch nierletsel muismodel. Dit protocol gebruikt real-time PCR om biomarkers voor acute nierbeschadiging te identificeren.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Kelly, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+renal+failure%3A+much+more+than+a+kidney+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Seminas+in+Nephrology%22%5BJournal%5D)">Acute renal failure: much more than a kidney disease.</a> Seminas in Nephrology. 26 (2), 105-113 (2006).</li>
<li>Saikumar, J., Ramachandran, K., Vaidya, V. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+micromarkers%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Noninvasive micromarkers.</a> Clinical Chemistry. 60 (9), 1158-1173 (2014).</li>
<li>Beermann, J., Piccoli, M. T., Viereck, J., Thum, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-coding+RNAs+in+Development+and+Disease%3A+Background%2C+Mechanisms%2C+and+Therapeutic+Approaches%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Reviews%22%5BJournal%5D)">Non-coding RNAs in Development and Disease: Background, Mechanisms, and Therapeutic Approaches.</a> Physiological Reviews. 96 (4), 1297-1325 (2016).</li>
<li>Yang, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Discovery+and+validation+of+extracellular%2Fcirculating+microRNAs+during+idiopathic+pulmonary+fibrosis+disease+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Gene%22%5BJournal%5D)">Discovery and validation of extracellular/circulating microRNAs during idiopathic pulmonary fibrosis disease progression.</a> Gene. 562 (1), 138-144 (2015).</li>
<li>Zhang, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circulating+miR-126+is+a+potential+biomarker+to+predict+the+onset+of+type+2+diabetes+mellitus+in+susceptible+individuals%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemical+and+Biophysical+Research+Communications%22%5BJournal%5D)">Circulating miR-126 is a potential biomarker to predict the onset of type 2 diabetes mellitus in susceptible individuals.</a> Biochemical and Biophysical Research Communications. 463 (1-2), 60-63 (2015).</li>
<li>Zhong, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((miR-21+is+a+key+therapeutic+target+for+renal+injury+in+a+mouse+model+of+type+2+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">miR-21 is a key therapeutic target for renal injury in a mouse model of type 2 diabetes.</a> Diabetologia. 56 (3), 663-674 (2013).</li>
<li>Wang, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Downregulation+of+urinary+cell-free+microRNA-214+as+a+diagnostic+and+prognostic+biomarker+in+bladder+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Downregulation of urinary cell-free microRNA-214 as a diagnostic and prognostic biomarker in bladder cancer.</a> Journal of Surgical Oncology. 111 (8), 992-999 (2015).</li>
<li>Morishita, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroRNA+expression+profiling+in+peritoneal+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Research%3A+The+Journal+of+Laboratory+and+Clinial+Medicine%22%5BJournal%5D)">MicroRNA expression profiling in peritoneal fibrosis.</a> Translational Research: The Journal of Laboratory and Clinial Medicine. 169, 47-66 (2016).</li>
<li>Morse, S. M., Shaw, G., Larner, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Concurrent+mRNA+and+protein+extraction+from+the+same+experimental+sample+using+a+commercially+available+column-based+RNA+preparation+kit%5BTitle%5D)+AND+%22BioTechniques%22%5BJournal%5D)">Concurrent mRNA and protein extraction from the same experimental sample using a commercially available column-based RNA preparation kit.</a> BioTechniques. 40 (1), 54-58 (2006).</li>
<li>Mestdagh, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+quantitative+miRNA+expression+platforms+in+the+microRNA+quality+control+%28miRQC%29+study%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Evaluation of quantitative miRNA expression platforms in the microRNA quality control (miRQC) study.</a> Nature Methods. 11 (8), 809-815 (2014).</li>
<li>Bustin, S. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+MIQE+guidelines%3A+minimum+information+for+publication+of+quantitative+real-time+PCR+experiments%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">The MIQE guidelines: minimum information for publication of quantitative real-time PCR experiments.</a> Clinical Chemistry. 55 (4), 611-622 (2009).</li>
<li>Jonas, S., Izaurralde, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Towards+a+molecular+understanding+of+microRNA-mediated+gene+silencing%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews.+Genetics%22%5BJournal%5D)">Towards a molecular understanding of microRNA-mediated gene silencing.</a> Nature Reviews. Genetics. 16 (7), 421-433 (2015).</li>
<li>Ichii, O., Horino, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroRNAs+associated+with+the+development+of+kidney+diseases+in+humans+and+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Toxicologic+Pathology%22%5BJournal%5D)">MicroRNAs associated with the development of kidney diseases in humans and animals.</a> Journal of Toxicologic Pathology. 31 (1), 23-34 (2018).</li>
<li>Ma, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+of+miRNA-17-5p%2C+miRNA-21+and+miRNA-106a+level+during+rat+kidney+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Zhonghua+Yi+Xue+Za+Zhi%22%5BJournal%5D)">Changes of miRNA-17-5p, miRNA-21 and miRNA-106a level during rat kidney ischemia-reperfusion injury.</a> Zhonghua Yi Xue Za Zhi. 95 (19), 1488-1492 (2015).</li>
<li>Saikumar, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression%2C+circulation%2C+and+excretion+profile+of+microRNA-21%2C+-155%2C+and+-18a+following+acute+kidney+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicological+Sciences%3A+an+Official+Journal+of+the+Society+of+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Expression, circulation, and excretion profile of microRNA-21, -155, and -18a following acute kidney injury.</a> Toxicological Sciences: an Official Journal of the Society of Toxicology. 129 (2), 256-267 (2012).</li>
<li>Li, Y. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroRNA-21+in+the+pathogenesis+of+acute+kidney+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Protein+%26+Cell%22%5BJournal%5D)">MicroRNA-21 in the pathogenesis of acute kidney injury.</a> Protein & Cell. 4 (11), 813-819 (2013).</li>
<li>Zhou, J., Chen, H., Fan, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Systematic+analysis+of+the+expression+profile+of+non-coding+RNAs+involved+in+ischemia%2Freperfusion-induced+acute+kidney+injury+in+mice+using+RNA+sequencing%5BTitle%5D)+AND+%22Oncotarget%22%5BJournal%5D)">Systematic analysis of the expression profile of non-coding RNAs involved in ischemia/reperfusion-induced acute kidney injury in mice using RNA sequencing.</a> Oncotarget. 8 (59), 100196-100215 (2017).</li>
<li>Liu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroRNA+expression+profile+by+next-generation+sequencing+in+a+novel+rat+model+of+contrast-induced+acute+kidney+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">MicroRNA expression profile by next-generation sequencing in a novel rat model of contrast-induced acute kidney injury.</a> Annals of Translational Medicine. 7 (8), 178(2019).</li>
<li>Colbert, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+model-specific+role+of+microRNA-223+as+a+mediator+of+kidney+injury+during+experimental+sepsis%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">A model-specific role of microRNA-223 as a mediator of kidney injury during experimental sepsis.</a> American Journal of Physiology. Renal Physiology. 313 (2), 553-559 (2017).</li>
<li>Delbridge, M. S., Shrestha, B. M., Raftery, A. T., El Nahas, A. M., Haylor, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+body+temperature+in+a+rat+model+of+renal+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Transplantation+Proceedings%22%5BJournal%5D)">The effect of body temperature in a rat model of renal ischemia-reperfusion injury.</a> Transplantation Proceedings. 39 (10), 2983-2985 (2007).</li>
<li>Dallas, P. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+expression+levels+assessed+by+oligonucleotide+microarray+analysis+and+quantitative+real-time+RT-PCR+--+how+well+do+they+correlate%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Genomics%22%5BJournal%5D)">Gene expression levels assessed by oligonucleotide microarray analysis and quantitative real-time RT-PCR -- how well do they correlate.</a> BMC Genomics. 6, 59(2005).</li>
<li>Rockett, J. C., Hellmann, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Confirming+microarray+data--is+it+really+necessary%5BTitle%5D)+AND+%22Genomics%22%5BJournal%5D)">Confirming microarray data--is it really necessary.</a> Genomics. 83 (4), 541-549 (2004).</li>
</ol>

<table><tbody><tr><td>Bent Tip Tapered Tweezers without Hook</td><td>Natsume Seisakusho</td><td>MA-47</td><td></td></tr><tr><td>Buffer RLT</td><td>Qiagen</td><td>79216</td><td>wash buffer 1</td></tr><tr><td>Buffer RWT</td><td>Qiagen</td><td>1067933</td><td>wash buffer 2</td></tr><tr><td>C57B6 muizen</td><td>SLC</td><td>not assign</td><td></td></tr><tr><td>tang met tanden</td><td>Natsume Seisakusho</td><td>MA-49</td><td></td></tr><tr><td>tang zonder tanden</td><td>Natsume Seisakusho</td><td>MA-48-1</td><td></td></tr><tr><td>Hemostatische clips</td><td>Natsume Seisakusho</td><td>KN&minus;353</td><td></td></tr><tr><td>MicroAmp Optical 96-well reactieplaat voor qRT-PCR</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4316813</td><td>96-well reactieplaat</td></tr><tr><td>MicroAmp Optical kleeffilm</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4311971</td><td>kleeffilm voor 96-well reactieplaat</td></tr><tr><td>miRNA-132-3p primer</td><td>Qiagen</td><td>MS00003458</td><td>5'UAACAGUCUACAGCCAUGGUCG</td></tr><tr><td>miRNA-17-5p primer</td><td>Qiagen</td><td>MS00029274</td><td>5'CAAAGUGCUUACAGUGCAGGUAG</td></tr><tr><td>miRNA-18a-5p primer</td><td>Qiagen</td><td>MS00031514</td><td>5'UAAGGUGCAUCUAGUGCAGAUAG</td></tr><tr><td>miRNA-212-3p primer</td><td>Qiagen</td><td>MS00003815</td><td>5'UAACAGUCUCCAGUCACGGCC</td></tr><tr><td>miRNA-21a-5p primer</td><td>Qiagen</td><td>MS00009079</td><td>5'UAGCUUAUCAGACUGAUGUUGA</td></tr><tr><td>miRNA-223-3p primer</td><td>Qiagen</td><td>MS00003871</td><td>5'UGUCAGUUUGUCAAAUACCCCA</td></tr><tr><td>miRNA-574-5p primer</td><td>Qiagen</td><td>MS00043617</td><td>5'UGAGUGUGUGUGUGUGAGUGUGU</td></tr><tr><td>miRNeasy Mini kit</td><td>Qiagen</td><td>217004</td><td>op silica-membraan gebaseerde spinkolom</td></tr><tr><td>miScript II RT kit</td><td>Qiagen</td><td>218161</td><td></td></tr><tr><td>miScript SYBR Green PCR kit</td><td>Qiagen</td><td>218073</td><td></td></tr><tr><td>QIA shredder</td><td>Qiagen</td><td>79654</td><td>biopolymeer-snippersysteem in een microcentrifuge-spinkolom</td></tr><tr><td>QIAzol Lysis Reagent</td><td>Qiagen</td><td>79306</td><td>op fenol/guanidine gebaseerd lysisreagens</td></tr><tr><td>QuantStudio 12K Flex Flex Real-Time PCR systeem</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4472380</td><td>real-time PCR instrument</td></tr><tr><td>QuantStudio 12K Flex Software versie 1.2.1.</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>4472380</td><td>real-time PCR instrument software</td></tr><tr><td>RNU6-2 primer</td><td>Qiagen</td><td>MS00033740</td><td>niet bekend gemaakt</td></tr><tr><td>chirurgische schaar</td><td>Natsume Seisakusho</td><td>B-2</td><td></td></tr><tr><td>Vascular clip applier</td><td>VITALITEC</td><td>1621420</td><td></td></tr></tbody></table>

een kwantitatieve detectiemethode voor microrna's in de nier van een ischemisch nierletsel muismodel

A Quantitative Detection Method for MicroRNAs in the Kidney of an Ischemic Kidney Injury Mouse Model

Een kwantitatieve detectiemethode voor microRNA's in de nier van een ischemisch nierletsel muismodel

MicroRNAs (miRNAs) are involved in various disease states and are effective biomarkers for the early diagnosis of diseases and treatment in mice. However, ...

Veranderde expressie van microRNA bij AKI kan nuttig zijn voor biomarkers en therapie. Dit protocol is eenvoudig en bereikt constante resultaten tussen laboratoria. IRI van de nier vertegenwoordigt een van de belangrijkste risicofactoren voor AKI. Het kwantificeren van microRNA's die veranderd zijn door IRI leidt tot een diagnose. MicroRNA's gezuiverd uit niermonster worden toegepast op een ander systeem. Zorgvuldig monitoren voor hypothermie, darmbevochtiging en diepte van anesthesie gedurende de hele procedure. Dit komt omdat er veel handmatige technieken zijn om aan te wennen.[Verteller] Na bevestiging van gebrek aan reactie op teenknijpen, plaats de verdoofde muis op een verwarmd chirurgisch kussen in de liggende positie. Na het maken van een midline abdominale incisie, gebruik een wattenstaafje bevochtigd met PBS om voorzichtig de darm naar de linkerkant van de extra abdominale holte te duwen om de rechter nier en ureter bloot te leggen en gebruik hoekige forceps om de rechter ureter op te tillen. Liga de ureter op twee plaatsen met 4-0 zijde gevlochten hechtdraad, laat langere knopen achter voor de hechting die dichter bij de nier zit, en snijd tussen de hechtingen. Houd voorzichtig de resterende hechting vast, dissecteer het bindweefsel en vet langs de nier en identificeer een bloedvat dat niet de renale slagaders of aderen zijn die bloed naar de rechter nier leveren. Liga het bloedvat en, wanneer de rechter nier voldoende is losgemaakt, liga de nierslagader en -ader. Met behulp van een wattenstaafje bevochtigd met PBS, duw voorzichtig de darm naar de rechterkant van de extra abdominale holte om de linker nier bloot te leggen en dek het darmkanaal af met een bevochtigd doek. Nadat de linker nier is voorbereid zoals gedemonstreerd, klemmen de renale slagader en -ader een centimeter van de nier om linkernierischemie te induceren. Een succesvolle ischemie kan visueel worden bevestigd door een geleidelijke uniforme donkerder wording van het nierweefsel. Wanneer ischemie is bevestigd, breng het darmweefsel terug in de buikholte, zorg ervoor darmen niet draaien, en sluit en drapeer tijdelijk de buikhuid. Na 25 tot 45 minuten, verwijder de klem en bevestig dat de doorbloeding van het bloed en de kleur van de nier verbeteren. Na bevestiging dat de darm niet gedraaid is, instilleer intraperitoneaal PBS en sluit de buikspier en huid in twee lagen met behulp van 4-0 nylon hechtingen. 24 uur na inductie van ischemische schade, open de midline incisie opnieuw en gebruik een 27-gauge naald om het bloed uit de inferieure vena cava te verzamelen. Maak een midline incisie in de borstwand en steek een 23-gauge naald in het linker ventrikel. Na bevestiging van terugstroming in de naald, maak een incisie in de rechter lob van de lever en injecteer 20 milliliter PBS. De lever zal rood naar roze veranderen, wat bevestigt dat voldoende bloed is afgevoerd. Gebruik forceps en schaar om de linker nier te verwijderen en was het verwijderde weefsel in een schaal met PBS. Gebruik vervolgens de forceps om de nierfascie te verwijderen zonder de nier uit te drogen en snijd de nier in tweeën langs de verticale middenlijn. Voor microRNA-zuivering, plaats 30 milligram van het bevroren niermonster in een glazen homogenisator met 700 microliters fenylguanidine-gebaseerde lysisreagens op ijs en draai langzaam en herhaaldelijk de stamper om het monster volledig te homogeniseren. Wanneer het weefsel volledig is gedissocieerd, breng de gehomogeniseerde lysate over naar het biopolymeer-vergruizingssysteem in een microcentrifuge spinkolom in een tweeduizend milliliter opvangbuis en verzamel het monster op de bodem van de buis door centrifugatie. Breng de lysate over naar een nieuwe microcentrifugebuis met 140 microliters chloroform en meng de buis door omkering gedurende 15 seconden met de dop stevig vastgedraaid. Na een incubatie van twee tot drie minuten bij kamertemperatuur, sedimenteer het monster door centrifugatie en breng de supernatant over naar een nieuwe microcentrifugebuis met 1,5 keer het volume van 100% ethanol zonder het pellet te verstoren. Meng het monster gedurende vijf seconden door middel van vortexen voordat u 700 microliters van het monster overbrengt naar een silica-membraangebaseerde spinkolom in een tweeduizendmilliliter opvangbuis. Na een korte centrifugatie, gooi de doorstroming weg en was het monster twee keer met 500 microliters wasbuffer 2 in een nieuwe silica-membraangebaseerde spinkolom per was om eventuele sporen van zout te verwijderen. Na de tweede was, centrifugeer de silica-membraangebaseerde spinkolom opnieuw en, na het weggooien van de doorstroming, breng de kolom over naar een nieuwe 1,5 milliliter opvangbuis. Voeg 25 microliter RNase-vrij water toe aan de kolom en incubeer het monster gedurende vijf minuten bij kamertemperatuur voordat het monster opnieuw wordt gecentrifugeerd. Breng vervolgens de 25 microliter microRNA-bevattende eluaat over naar een nieuwe microcentrifugebuis. In deze studie werden zeven microRNA's onderzocht die in mensen tot expressie worden gebracht en die in de nieren van muizen met acute nierbeschadiging waren opgereguleerd. De niveaus van zes van de microRNA's bleken significant verhoogd in de nieren van ischemie-reperfusie-verwonding muizen in vergelijking met die in mock-muizen met behulp van kwantitatieve real-time PCR zoals gedemonstreerd. Serum bloed ureum stikstof en creatinine niveaus en acute tubulaire necrose waren ook significant opgereguleerd.De biomarkers voor IRI-diagnose en specifieke behandeling van AKI blijven onduidelijk. Ik hoop dat microRNA-onderzoek zal vorderen en bijdragen aan de diagnose en behandeling van AKI.

a-quantitative-detection-method-for-micrornas-kidney-an-ischemic

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Dit artikel beschrijft een in situ hybridisatie protocol geoptimaliseerd voor colorimetrische detectie van microRNA expressie in formaline gefixeerde niersecties.

MicroRNA<em&gt; In situ</em&gt; Hybridisatie voor formaline gefixeerde nierweefsel

Het muismodel voor nier-ischemie-reperfusie-letsel dat hier wordt beschreven, bestaat uit een rechter nierectomie die controleweefsel biedt en het klemmen van de linker niersteel om ischemie te induceren, wat resulteert in acute nierbeschadiging. Dit model maakt gebruik van een midline laparotomie-aanpak met alle stappen die via één incisie worden uitgevoerd.

Renale ischemie reperfusie schade: een muismodel van letsel en Regeneratie

Dit protocol beschrijft een volledige nier werk-up die moet worden uitgevoerd in muismodellen van glomerulaire ziekte. De methoden toestaan voor gedetailleerde mechanistisch, functionele en structurele analyse van glomerulaire functie, die kan worden toegepast op alle Muismodellen van glomerulaire ziekte.

Beoordeling van de nierfunctie in muismodellen van glomerulaire ziekte

We beschrijven een methode voor het evalueren van de microRNA-expressie in de nieren van muizen met eenzijdige ureterale obstructie (UUO) door kwantitatieve reverse-transcriptie polymerase kettingreactie. Dit protocol is geschikt voor het bestuderen van niermicroRNA expressieprofielen bij muizen met UUO en in de context van andere pathologische aandoeningen.

Kwantitatieve real-time PCR-evaluatie van microRNA-expressies in muisnier met eenzijdige ureterale obstructie

microRNA's zijn betrokken bij de pathogenese van IgA-nefropathie. We hebben een betrouwbare methode ontwikkeld voor het detecteren van microRNA-expressieniveaus in de nieren van een IgA-nefropathiemuismodel (HIGA-muizen). Deze nieuwe methode zal het gemakkelijker maken om te controleren op betrokkenheid van miRNA's bij IgA-nefropathie.

Detectie van microRNA-expressie in de nieren van immunoglobuline A nefropathische muizen

We presenteren een methode voor het evalueren van microRNA-expressie in de nieren en het serum van muizen met leeftijdsafhankelijke nierinsufficiëntie door kwantitatieve reverse-transcriptie polymerasekettingreactie.

Kwantitatieve real-time polymerasekettingreactie evaluatie van microRNA-expressie in nier en serum van muizen met leeftijdsafhankelijke nierinsufficiëntie

Hier leveren we exogene kunstmatig gesynthetiseerde miRNA-nabootsingen aan de nier via staartaderinjectie van een niet-virale vector en polyethylenimine nanodeeltjes in verschillende nierziektemuismodellen. Dit leidde tot significante overexpressie van doelmiRNA in de nier, wat resulteerde in geremde progressie van nierziekte in verschillende muismodellen.

Levering van exogene kunstmatig gesynthetiseerde miRNA-nabootsing aan de nier met behulp van polyethylenimine nanodeeltjes in verschillende nierziektemuismodellen

Dit artikel presenteert een ischemisch CKD-model met behulp van unilaterale nier-IRI met contralaterale nefrectomie die één dag voor het monster wordt genomen; dit protocol maakt serumgebaseerde functionele beoordeling, hoge overleving en reproduceerbare CKD-pathologie na 28 en 42 dagen mogelijk, wat een veelzijdig platform biedt voor mechanistische en interventionele studies.

Muizenmodel van de overgang van acute naar chronische nierziekte veroorzaakt door nierischemie/reperfusieschade

Een laser-speckle contrast beeldvormingssysteem werd gebruikt om de veranderingen in de microvasculaire bloedstroom van de nier te monitoren tijdens unilaterale nierischemie-reperfusie na de resectie van de rechternier bij muizen.

Microvasculaire perfusie gemonitord met laserspeckle contrastbeeldvorming tijdens nierischemie - reperfusieschade bij muizen

Transplantatie van geïsoleerde eilandjes is voorgesteld om een ​​potentiële behandeling voor diabetes type 1 zijn. Hier beschrijven we een methode om de eilandjes van de muis pancreata isoleren en transplantatie ze aan de subcapsulaire ruimte van de nier.

Een methode voor Murine Islet Isolatie en subcapsulaire Niertransplantatie

Leer een kwantitatieve detectiemethode voor microRNA's in nierweefsel van een ischemisch nierletsel muismodel. Dit protocol gebruikt real-time PCR om biomarkers voor acute nierbeschadiging te identificeren.

Een kwantitatieve detectiemethode voor microRNA's in de nier van een ischemisch nierletsel muismodel

Meer video's verkennen