Name: In vivo structurele beoordelingen van oogziekten in knaagdiermodellen met behulp van optische coherentietomografie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-07-24T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 44 s
Description: Leer hoe u SD-OCT gebruikt voor in vivo beeldvorming van oogstructuren in knaagdiermodellen. Deze techniek meet retinadikte en axiale lengte bij retinale degeneratie, glaucoom en myopie.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd ondersteund door de Department of Veterans Affairs Rehab R&D Service Career Development Awards (CDA-1, RX002111; CDA-2; RX002928) naar RSA, Merit Award (RX002615) en Research Career Scientist Award (RX003134) naar MTP, Career Development Award (CDA-2, RX002342) naar AJF, EY028859 naar MTP, NEI Core Grant P30EY006360, Research to Prevent Blindness en Foundation Fighting Blindness.

Alle beschreven procedures zijn goedgekeurd door de Atlanta Veterans Affairs Institutional Animal Care and Use Committee en voldoen aan de National Institutes of Health-gids voor de verzorging en het gebruik van proefdieren (NIH Publications,8e editie, bijgewerkt in 2011).
OPMERKING: Het SD-OCT-systeem dat wordt gebruikt om het onderstaande protocol te ontwikkelen, wordt beschreven in de materiaaltabel. Hoewel sommige procedures specifiek zijn voor dit specifieke systeem, kan de algemene aanpak worden aangepast voor andere LGO-hulpmiddelen en diermodellen. Verder worden deze protocollen in ons laboratorium vaak gebruikt bij muizen en ratten; de algemene aanpak kan echter worden toegepast op verschillende diermodellen en SD-OCT-apparaten, op voorwaarde dat een persoon de juiste lens en mogelijkheden op zijn apparaat heeft.
1. De optische coherentietomografieapparatuur instellen
<ol><li>Open de SD-OCT-software (Materiaaltabel).</li>
	<li>Definieer wie de OCT, het onderzoek en de behandelingsarm (indien relevant) gebruikt. Geef deze categorieën een naam op een manier die onderzoekers helpt om later tijdens de gegevensanalyse naar de gewenste scans te zoeken.<ol><li>Klik op het tabblad Patiënt/onderzoek op Test examinator. Selecteer de naam van de examinator. Gebruik de knop Examinatoren instellen en artsen om nieuwe examinatoren toe te voegen.</li>
		<li>Klik op Studienaam om het onderzoek te definiëren. Klik op het tabblad Studie om een nieuw onderzoek toe te voegen of behandelingen in een bestaand onderzoek aan te passen. Klik rechts van Select Treatment Arm om een behandelarm te selecteren.</li>
	</ol></li>
	<li>Klik op de knop Patiënt toevoegen , die wordt gebruikt om een nieuw tijdstip voor een hele groep toe te voegen. Wanneer het venster verschijnt, voert u ID-nummer, Voornaam en Achternaam in. Selecteer Man of Vrouw. Voer de geboortedatum in.</li>
	<li>Klik op de knop Examen toevoegen om de afzonderlijke ratten toe te voegen. Om de ratten te identificeren, klikt u op een examen. Klik op Examen bewerken. Voer het ID-nummer in het vak Notities invoeren in . Klik op de knop Wijzigingen opslaan .</li>
	<li>Bevestig de juiste lens op het apparaat (figuur 1B), selecteer de bijbehorende configuratie in de software en kies de bijbehorende referentiearmpositie. OPMERKING: Het beschreven SD-OCT-systeem heeft aangepaste lenzen, vooraf ingestelde scanpatronen en referentiearminstellingen die specifiek zijn voor de diersoort en het gebied van het oog dat wordt afgebeeld (netvlies of hoornvlies, muis of rat). Sommige van deze details zijn specifiek voor het beschreven SD-OCT-systeem (zie materiaaltabel). Niet alle apparaten bieden bijvoorbeeld handmatige aanpassing van de padlengte van de referentiearm .</li>
	<li>Dubbelklik op het tabblad Patiënt/onderzoek op het gemarkeerde onderzoek om door te gaan naar het tabblad Beeldvorming en begin met beeldvorming of klik gewoon op het tabblad Beeldvorming . Als er een standaardscan is, klikt u met de rechtermuisknop om deze te verwijderen.</li>
	<li>Laad een vooraf ingesteld scanprotocol door te klikken op de knop Selecteer een protocol in de lijst . U kunt ook afzonderlijke scans toevoegen.</li>
	<li>Kies voor rattenmodellen van glaucoom en diabetische retinopathie en muismodellen van retinale degeneratie een pre-set die bestaat uit vier afbeeldingen: 2 OD- en 2 OS-scans. Kies voor muizenbijziendheid een vooraf ingestelde set die bestaat uit 8 afbeeldingen: 4 OD- en 4 OS-scans. OPMERKING: Vooraf ingestelde beeldvorming wordt in meer detail uitgelegd in sectie 3. Dit is iets dat elk laboratorium voor zichzelf of met de fabrikant maakt tijdens de installatie op locatie.</li>
</ol>2. Verdoof het dier
<ol><li>Dien verdoving toe.<ol><li>Verdoof ratten met ketamine (60 mg/kg) en xylazine (7,5 mg/kg) via intraperitoneale injectie.</li>
		<li>Verdoof muizen met ketamine (80 mg/kg) en xylazine (16 mg/kg) via intraperitoneale injectie.</li>
		<li>Wacht tot de dieren volledig verdoofd zijn en reageer niet op teenknijpen.</li>
	</ol></li>
	<li>Dien pupilverwijdingsdruppels toe (1% tropicamide). Wacht tot de pupillen verwijden voordat ze zich in beeld brengen. OPMERKING: Verwijding van pupillen vergroot het gezichtsveld, maar is geen vereiste. Lokale (cornea) anesthetische druppels (0,5% tetracaïne) om het oog te verdoven, moeten ook worden gebruikt als iets het oog raakt (bijvoorbeeld bij het aanbrengen van contactlenzen of het gebruik van een gids). Een gids is een apparaat dat over de scankop wordt geplaatst en beginners helpt het oog en de scankop op een rij te zetten.</li>
	<li>Na het verdoven van het knaagdier, plaatst u het knaagdier in een knaagdieruitlijningssysteem dat het dier in de 3-dimensionale ruimte kan roteren (figuur1 A, 1C, &1D). Zorg voor thermische ondersteuning. OPMERKING: Momenteel gebruiken we knaagdieruitlijningssystemen voor muizen en ratten die zijn ontworpen en verkocht met het SD-OCT-apparaat.</li>
	<li>Breng vloeistof aan (bijv. zoutoplossing of kunstmatige tranen) om de ogen gesmeerd te houden. Zorg ervoor dat het oog niet uitdroogt tijdens beeldvorming, zodat de optische eigenschappen van het oog tussen scans worden gehandhaafd (wanneer het hoornvlies nat is, is het netvlies duidelijk te zien).<ol><li>Zorg ervoor dat u vocht in het tegenovergestelde oog houdt bij het scannen van het eerste oog, zodat het niet uitdroogt.</li>
	</ol></li>
	<li>Gebruik een delicate taakveeg om overtollige zoutoplossing vlak voor de beeldvorming af te voeren, omdat te veel of te weinig glijmiddel op het oog de beeldkwaliteit zal beïnvloeden. OPMERKING: Het gebruik van steriele smeermiddelgel wordt niet aanbevolen tijdens OCT, omdat dit de beeldvorming kan verstoren. Indien nodig kan steriele smeermiddelgel na de procedure worden gebruikt. Een contactlens kan ook worden aangebracht om te zorgen voor voldoende vocht op het oog tijdens de test. In onze ervaring zorgde een contactlens niet voor een duidelijke verbetering van de beeldkwaliteit, maar contactlenzen helpen wel het risico op uitdroging van het hoornvlies tijdens de beeldvormingssessie te verminderen.</li>
</ol>3. Knaagdier OCT beeldvorming
<ol><li>Begin met één oog (OS of OD) en beeld het contralaterale oog daarna af.<ol><li>Plaats het dier met behulp van de twee rotatiebewegingen van het knaagdieruitlijningssysteem, zodat de blik horizontaal is en langs de as van de OCT-lens kijkt (figuur 1D).</li>
		<li>Gebruik de OCT in de Free Run-modus om het netvlies te oriënteren voor gegevensverzameling. Gebruik de Aim-modus (door op de Aim-knop te klikken) in eerste instantie voor een continue weergave van zowel horizontale als verticale B-scans in realtime.</li>
		<li>Beweeg de scankop dichter bij het oog totdat het netvlies zichtbaar is (omdat retinalenzen van muizen en ratten een vaste focus hebben, waardoor de lens naar het oog gericht is, richt zich dieper in het netvlies). Gebruik vervolgens het uitlijningssysteem voor knaagdieren om de positie van het dier omhoog / omlaag aan te passen en te draaien / draaien om de oogzenuwkop in het midden te positioneren, de horizontale scan horizontaal en de verticale scan verticaal te maken (figuur 1A).</li>
		<li>Pas de werkafstand zo aan dat het retinale beeld vlak en niet gebogen is.</li>
		<li>Pas de positie van de referentiearm aan om de afbeelding boven aan het etalagevenster te houden. Pas op dat je niet te ver naar binnen duwt, anders zal het oogbeeld op zichzelf terugdraaien.</li>
	</ol></li>
	<li>Retinale beeldvorming<ol><li>Voor glaucoom, retinale degeneratie en diabetische retinopathiemodellen: definieer een volumescan die bestaat uit 1000 x 100 x 1 (A-scans x B-scans x herhaalde B-scans) voor gemiddelden. Maak bij ratten een volumescan van 3 x 3 mm. Voer bij muizen een volumescan van 1,5 x 1,5 mm uit.</li>
		<li>Centreer de oogzenuw in de horizontale en verticale toegang, zodat de volumescan zich in het midden bevindt. Neem de tijd om ervoor te zorgen dat de oogzenuwkop zich in het midden van de scan bevindt en recht langs de neus-temporale en superieur-inferieure assen (figuur 2). Scan en centreer opnieuw om er zeker van te zijn dat het precies in het midden is, indien nodig. Herhaal deze scan indien nodig totdat de oogzenuwkop gecentreerd en uitgelijnd is langs beide assen. Klik op de knop Momentopname om een foto te maken. OPMERKING: Sommige SD-OCT-apparaten hebben de mogelijkheid om de kromming van het oog optisch te manipuleren (het beeld is bijvoorbeeld afgeplat) door de afstand van het oog tot de lichtbron met de referentiearm aan te passen. We raden aan om de beelden af te vlakken en te centreren bij het uitvoeren van directe diktemetingen door de retinale lagen om de nauwkeurigheid langs de voorste-achterste richting te verbeteren.</li>
		<li>Klik op de knop Opslaan om de afbeelding op te slaan.</li>
		<li>Maak een radiale scan gecentreerd op de oogzenuwkop die 1000 x 4 x 20 is (A-scan x B-scan x herhaalde B-scans). Gebruik herhaalde B-scans om de helderheid van het oog of het netvlies te verbeteren, wat zal helpen bij het interpreteren van gebieden van het oog of lagen van het netvlies tijdens gegevensanalyse. OPMERKING: Nogmaals, bij ratten is deze radiale scan 3 mm, terwijl bij muizen de radiale scan 1, 5 mm is.</li>
		<li>Sla de afbeelding op.</li>
		<li>Herhaal stap 3.1 tot en met 3.2.5 in het contralaterale oog.</li>
	</ol></li>
	<li>Axiale lengtemetingen<ol><li>Voor projecten waarbij het hele oog in beeld wordt gebracht, zoals bijziendheid bij muizen, neemt u drie scans van het hele oog en één netvliesscan voor elk oog. Kies een vooraf ingestelde die bestaat uit een radiale scan van 500 x 20 x 1 en de volledige diameter van het oog omvat. OPMERKING: Deze instelling geeft een afbeelding van de gehele lengte van het muizenoog van het hoornvlies tot het vaatvlies.</li>
		<li>Centreer het midden van het oog en het netvlies in het gezichtsveld. Neem drie radiale scans (whole eye scans): een lineaire B scan van 1000 x 5 x 2 en twee extra lineaire B scans van 1000 x 5 x 2 op dezelfde locatie. Sla de afbeeldingen op.</li>
		<li>Zoom daarna, indien gewenst, in en maak een volume- of rechthoekige scan (retinascan) vergelijkbaar met de beschrijving in 3.2 die bestaat uit 1000 x 20 A-scans x B-scans. Sla de volumescan op.</li>
		<li>Herhaal stap 3.3 tot en met 3.3.3 in het contralaterale oog. OPMERKING: Axiale lengtemetingen zijn alleen mogelijk op kleine ogen (muis of kleiner) omdat het beeldvenster van huidige systemen niet groot genoeg is om een groter oog vast te leggen.</li>
	</ol></li>
</ol>4. Stappen na de beeldvorming
<ol><li>Sla opgeslagen gegevens op in een cloud, wat een goede praktijk is voor gegevensbeheer en gemakkelijke toegang biedt voor latere analyse. Voer gegevensanalyse uit met aangepaste software die is ontwikkeld in een wiskundig modelleringsprogramma (Materiaaltabel).</li>
	<li>Verwijder het knaagdier uit het uitlijnsysteem van knaagdieren en geef een intraperitoneale injectie van atipamezole (1 mg / kg voor ratten en muizen) om de effecten van het xylazine om te keren, zodat het knaagdier sneller wakker wordt.</li>
	<li>Laat knaagdieren herstellen op een verwarmingskussen op lage hitte. Geef indien nodig extra zoutoplossing druppels. Breng knaagdieren terug naar hun thuiskooi wanneer ze de volledige ambulatie hebben herwonnen.</li>
	<li>Sluit het programma en schakel de OCT uit.</li>
</ol>5. Nabewerking van OCT-beelden
<ol><li>Verwerk de afbeeldingen met behulp van aangepaste software die is ontwikkeld in een wiskundig modelleringsprogramma om aan specifieke OCT-behoeften te voldoen (meet bijvoorbeeld de dikte van interessegebieden door de afbeeldingen handmatig te markeren).</li>
	<li>Afhankelijk van het doel van het beeld (netvlies van de muis, netvlies van ratten of bijziendheid /axiale lengte), gebruikt u een van de drie verschillende programma's:<ol><li>Voor het verwerken van het netvlies selecteert u de OCT-scans die u wilt laden. Definieer eerst het midden van de oogzenuwkop met een eenvoudige klik.</li>
		<li>Kijk hoe het programma verticale lijnen genereert die afstanden aan weerszijden van de oogzenuwkop definiëren. Merk op dat in het netvlies van de rat deze lijnen zich op 0,5 mm en 1,2 mm afstand van het midden van de oogzenuwkop bevinden, voor een totaal van 4 verticale lijnen die de nasale-temporale en inferieure-superieure assen van het oog vertegenwoordigen, afhankelijk van de radiale B-scan die momenteel wordt geanalyseerd. OPMERKING: In het netvlies van de muis bevinden deze verticale lijnen zich op 0,25 mm en 0,5 mm van het hoofdcentrum van de oogzenuw.</li>
		<li>Baken de volgende lagen langs elke regel af: De retinale zenuwvezellaag (RNFL), de binnenste plexiforme laag (IPL), de binnenste nucleaire laag (INL), de buitenste plexiforme laag (OPL), de buitenste nucleaire laag (ONL), het externe beperkende membraan (ELM), de binnenste segmenten / buitenste segmenten (IS / OS), retinaal pigmentepitheel (RPE) en de totale retinale dikte. OPMERKING: De radiale scan heeft meestal geen nasale / temporale en superieure / inferieure labels wanneer deze wordt geopend. Scans kunnen zo worden gemaakt dat ze een n/t- en s/I-oriëntatie hebben, en met name die scans worden later geanalyseerd.</li>
		<li>Nadat een afbeelding is afgebakend en het programma is gesloten, exporteert u deze metingen naar een spreadsheetsoftware voor gegevensanalyse.</li>
	</ol></li>
	<li>Gebruik deze lengte- en diktewaarden uit stap 5 om vergelijkingen tussen groepen te maken, bijvoorbeeld om te bepalen of er regionale verschillen (n/t/s/i) of longitudinale veranderingen zijn.</li>
	<li>Bepaal voor retinale metingen eerst of er verschillen zijn in de nasaal-temporale en inferieure-superieure as op de afstanden van 0,5 mm en 1,2 mm. OPMERKING: Als er geen verschillen in kwadranten worden waargenomen, kunnen de metingen van 0,5 mm en 1,2 mm samen worden gemiddeld. Dit is een vergelijkbare aanpak voor de retinale scans van de muis alleen bij 0,25 mm en 0,5 mm.</li>
	<li>Voor bijziendheidsstudies, gebruik dit programma om de oculaire parameters langs de optische as van het oog te beoordelen. Open het wiskundige modelleringsprogramma. Selecteer eerst een afbeelding die u wilt laden.<ol><li>Nadat u de afbeelding hebt geladen, markeert u handmatig elke scan (radiale en B-scans). Markeer de voorste en achterste randen van het hoornvlies, de lens, de glasvochtkamer en het netvlies, zodat het programma de dikte van het hoornvlies, de dikte van de lens, de diepte van de voorste en glasvochtkamer, de totale retinale dikte, de totale axiale lengte berekent.</li>
		<li>Sluit na het markeren het programma af dat een opslagmenu vraagt. Sla de afgebakende waarden op in een spreadsheetsoftware en gemiddelde van de drie afzonderlijke scans samen.</li>
	</ol></li>
</ol>

<ol><li>Wojtkowski, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrahigh-resolution%2C+high-speed%2C+Fourier+domain+optical+coherence+tomography+and+methods+for+dispersion+compensation%5BTitle%5D)+AND+%22Optics+Express%22%5BJournal%5D)">Ultrahigh-resolution, high-speed, Fourier domain optical coherence tomography and methods for dispersion compensation.</a> Optics Express. 12 (11), 2404-2422 (2004).</li>
<li>Nassif, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+high-resolution+video-rate+spectral-domain+optical+coherence+tomography+of+the+human+retina+and+optic+nerve%5BTitle%5D)+AND+%22Optics+Express%22%5BJournal%5D)">In vivo high-resolution video-rate spectral-domain optical coherence tomography of the human retina and optic nerve.</a> Optics Express. 12 (3), 367-376 (2004).</li>
<li>Theelen, T., Teussink, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inspection+of+the+Human+Retina+by+Optical+Coherence+Tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Inspection of the Human Retina by Optical Coherence Tomography.</a> Methods in Molecular Biology. 1715, 351-358 (2018).</li>
<li>Nakazawa, M., Hara, A., Ishiguro, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+Coherence+Tomography+of+Animal+Models+of+Retinitis+Pigmentosa%3A+From+Animal+Studies+to+Clinical+Applications%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Research+International%22%5BJournal%5D)">Optical Coherence Tomography of Animal Models of Retinitis Pigmentosa: From Animal Studies to Clinical Applications.</a> Biomed Research International. 2019, 8276140(2019).</li>
<li>Drexler, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrahigh-resolution+ophthalmic+optical+coherence+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">Ultrahigh-resolution ophthalmic optical coherence tomography.</a> Nature Medicine. 7 (4), 502-507 (2001).</li>
<li>VanLeeuwen, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Altered+AMPA+receptor+expression+with+treadmill+exercise+in+the+1-methyl-4-phenyl-1%2C2%2C3%2C6-tetrahydropyridine-lesioned+mouse+model+of+basal+ganglia+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Research%22%5BJournal%5D)">Altered AMPA receptor expression with treadmill exercise in the 1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine-lesioned mouse model of basal ganglia injury.</a> Journal of Neuroscience Research. 88 (3), 650-668 (2010).</li>
<li>Tian, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performance+evaluation+of+automated+segmentation+software+on+optical+coherence+tomography+volume+data%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biophotonics%22%5BJournal%5D)">Performance evaluation of automated segmentation software on optical coherence tomography volume data.</a> Journal of Biophotonics. 9 (5), 478-489 (2016).</li>
<li>Kraus, M. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motion+correction+in+optical+coherence+tomography+volumes+on+a+per+A-scan+basis+using+orthogonal+scan+patterns%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedical+Optics+Express%22%5BJournal%5D)">Motion correction in optical coherence tomography volumes on a per A-scan basis using orthogonal scan patterns.</a> Biomedical Optics Express. 3 (6), 1182-1199 (2012).</li>
<li>Boatright, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tool+from+ancient+pharmacopoeia+prevents+vision+loss%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Vision%22%5BJournal%5D)">Tool from ancient pharmacopoeia prevents vision loss.</a> Molecular Vision. 12, 1706-1714 (2006).</li>
<li>Morrison, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rat+model+of+chronic+pressure-induced+optic+nerve+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">A rat model of chronic pressure-induced optic nerve damage.</a> Experimental Eye Research. 64 (1), 85-96 (1997).</li>
<li>Feola, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Menopause+exacerbates+visual+dysfunction+in+experimental+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Menopause exacerbates visual dysfunction in experimental glaucoma.</a> Experimental Eye Research. 186, 107706(2019).</li>
<li>Goto, Y., Kakizaki, M., Masaki, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production+of+spontaneous+diabetic+rats+by+repetition+of+selective+breeding%5BTitle%5D)+AND+%22The+Tohoku+Journal+of+Experimental+Medicine%22%5BJournal%5D)">Production of spontaneous diabetic rats by repetition of selective breeding.</a> The Tohoku Journal of Experimental Medicine. 119 (1), 85-90 (1976).</li>
<li>Allen, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+Deficits+Precede+Cognitive+and+Motor+Deficits+in+a+Rat+Model+of+Type+II+Diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmolology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Retinal Deficits Precede Cognitive and Motor Deficits in a Rat Model of Type II Diabetes.</a> Investigative Ophthalmolology & Visual Science. 60 (1), 123-133 (2019).</li>
<li>Stone, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Altered+ocular+parameters+from+circadian+clock+gene+disruptions%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Altered ocular parameters from circadian clock gene disruptions.</a> PLoS One. 14 (6), 0217111(2019).</li>
<li>Chakraborty, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circadian+rhythms%2C+refractive+development%2C+and+myopia%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmic+%26+Physiological+Optics%22%5BJournal%5D)">Circadian rhythms, refractive development, and myopia.</a> Ophthalmic & Physiological Optics. 38 (3), 217-245 (2018).</li>
<li>Davies, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+ganglion+cell+layer+volumetric+assessment+by+spectral-domain+optical+coherence+tomography+in+multiple+sclerosis%3A+application+of+a+high-precision+manual+estimation+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuro-ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Retinal ganglion cell layer volumetric assessment by spectral-domain optical coherence tomography in multiple sclerosis: application of a high-precision manual estimation technique.</a> Journal of Neuro-ophthalmology. 31 (3), 260-264 (2011).</li>
<li>Carnevali, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+coherence+tomography+angiography+analysis+of+retinal+vascular+plexuses+and+choriocapillaris+in+patients+with+type+1+diabetes+without+diabetic+retinopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Diabetologica%22%5BJournal%5D)">Optical coherence tomography angiography analysis of retinal vascular plexuses and choriocapillaris in patients with type 1 diabetes without diabetic retinopathy.</a> Acta Diabetologica. 54 (7), 695-702 (2017).</li>
<li>Springelkamp, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Population-based+evaluation+of+retinal+nerve+fiber+layer%2C+retinal+ganglion+cell+layer%2C+and+inner+plexiform+layer+as+a+diagnostic+tool+for+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Population-based evaluation of retinal nerve fiber layer, retinal ganglion cell layer, and inner plexiform layer as a diagnostic tool for glaucoma.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 55 (12), 8428-8438 (2014).</li>
<li>Allen, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-Term+Functional+and+Structural+Consequences+of+Primary+Blast+Overpressure+to+the+Eye%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Long-Term Functional and Structural Consequences of Primary Blast Overpressure to the Eye.</a> Journal of Neurotrauma. 35 (17), 2104-2116 (2018).</li>
<li>Zhao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+changes+in+the+response+of+retinal+structure%2C+function+and+blood+flow+to+pressure+modification+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Age-related changes in the response of retinal structure, function and blood flow to pressure modification in rats.</a> Scientific Reports. 8 (1), 2947(2018).</li>
<li>Schmucker, C., Schaeffel, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+paraxial+schematic+eye+model+for+the+growing+C57BL%2F6+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Vision+Research%22%5BJournal%5D)">A paraxial schematic eye model for the growing C57BL/6 mouse.</a> Vision Research. 44 (16), 1857-1867 (2004).</li>
<li>Aung, M. H., Kim, M. K., Olson, D. E., Thule, P. M., Pardue, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+visual+deficits+in+streptozotocin-induced+diabetic+long+evans+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Early visual deficits in streptozotocin-induced diabetic long evans rats.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 54 (2), 1370-1377 (2013).</li>
<li>Puzyeyeva, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-Resolution+Optical+Coherence+Tomography+Retinal+Imaging%3A+A+Case+Series+Illustrating+Potential+and+Limitations%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">High-Resolution Optical Coherence Tomography Retinal Imaging: A Case Series Illustrating Potential and Limitations.</a> Journal of Ophthalmology. 2011, 764183(2011).</li>
<li>Liu, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topography+and+pachymetry+maps+for+mouse+corneas+using+optical+coherence+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Topography and pachymetry maps for mouse corneas using optical coherence tomography.</a> Experimental Eye Research. 190, 107868(2020).</li>
<li>Mohan, K., Kecova, H., Hernandez-Merino, E., Kardon, R. H., Harper, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+ganglion+cell+damage+in+an+experimental+rodent+model+of+blast-mediated+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Retinal ganglion cell damage in an experimental rodent model of blast-mediated traumatic brain injury.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 54 (5), 3440-3450 (2013).</li>
<li>Harper, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blast-Mediated+Traumatic+Brain+Injury+Exacerbates+Retinal+Damage+and+Amyloidosis+in+the+APPswePSENd19e+Mouse+Model+of+Alzheimer%27s+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Blast-Mediated Traumatic Brain Injury Exacerbates Retinal Damage and Amyloidosis in the APPswePSENd19e Mouse Model of Alzheimer's Disease.</a> Investigative Ophthalmology Visual Science. 60 (7), 2716-2725 (2019).</li>
<li>Zhang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advanced+image+processing+for+optical+coherence+tomographic+angiography+of+macular+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedical+Optics+Express%22%5BJournal%5D)">Advanced image processing for optical coherence tomographic angiography of macular diseases.</a> Biomedical Optics Express. 6 (12), 4661-4675 (2015).</li>
<li>Muhlfriedel, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimized+Subretinal+Injection+Technique+for+Gene+Therapy+Approaches%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Optimized Subretinal Injection Technique for Gene Therapy Approaches.</a> Methods in Molecular Biology. 1834, 405-412 (2019).</li>
<li>Adekunle, A. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integration+of+Perforated+Subretinal+Prostheses+With+Retinal+Tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Vision+Science+%26+Technology%22%5BJournal%5D)">Integration of Perforated Subretinal Prostheses With Retinal Tissue.</a> Translational Vision Science & Technology. 4 (4), 5(2015).</li>
<li>Sajdak, B. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+imaging+of+the+tree+shrew+eye%3A+Wavefront+analysis+and+retinal+imaging+with+correlative+histology%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Noninvasive imaging of the tree shrew eye: Wavefront analysis and retinal imaging with correlative histology.</a> Experimental Eye Research. 185, 107683(2019).</li>
<li>Dominik Fischer, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detailed+functional+and+structural+characterization+of+a+macular+lesion+in+a+rhesus+macaque%5BTitle%5D)+AND+%22Documenta+Ophthalmologica%22%5BJournal%5D)">Detailed functional and structural characterization of a macular lesion in a rhesus macaque.</a> Documenta Ophthalmologica. 125 (3), 179-194 (2012).</li>
<li>Hagag, A. M., Gao, S. S., Jia, Y., Huang, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+coherence+tomography+angiography%3A+Technical+principles+and+clinical+applications+in+ophthalmology%5BTitle%5D)+AND+%22Taiwan+Journal+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Optical coherence tomography angiography: Technical principles and clinical applications in ophthalmology.</a> Taiwan Journal of Ophthalmology. 7 (3), 115-129 (2017).</li>
<li>Treister, A. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+Subclinical+CNV+and+Choriocapillaris+Nonperfusion+in+Fellow+Eyes+of+Unilateral+Exudative+AMD+on+OCT+Angiography%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Vision+Science+%26+Technology%22%5BJournal%5D)">Prevalence of Subclinical CNV and Choriocapillaris Nonperfusion in Fellow Eyes of Unilateral Exudative AMD on OCT Angiography.</a> Translational Vision Science & Technology. 7 (5), 19(2018).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Hoge resolutie beeldvorming van oculaire structuren in vivo maakt de beoordeling van retinale en oculaire veranderingen in de loop van de tijd mogelijk. In dit protocol werd aangetoond dat SD-OCT verschillen in oculaire structuren in vivo vastlegt in modellen van retinale degeneratie, glaucoom, diabetische retinopathie en bijziendheid.
Het meest kritieke aspect bij het uitvoeren van SD-OCT is het verkrijgen van een duidelijk beeld van het netvlies of een andere oculaire structuur van belang. H...

Spectral-domein optische coherentie tomografie (SD-OCT) is een nauwkeurige beeldvormingsmodaliteit met hoge resolutie waarmee clinici en onderzoekers oculaire structuren niet-invasief kunnen onderzoeken. Deze beeldvormingstechniek is gebaseerd op interferometrie om driedimensionale retinale beelden in vivo vast te leggen op een micrometerschaal 1,2. Het is uitgegroeid tot een van de meest gebruikte beeldvormingsmodaliteiten in het visieonderzoek en in de kliniek vanwege de eenvoudige detectie en nauwkeurigheid van pathologische kenmerken zoals structurele defecten en / of verdunning van retinale lagen en subretinale vloeistof3. In onderzoek met diermodellen van zichtgerelateerde aandoeningen heeft SD-OCT essentiële niet-invasieve analyses gegeven van relaties tussen structuur en functie en hun histopathologische oorsprong4. Vanwege de resolutie (tot 2-3 micron, afhankelijk van de diepte in het oog5), heeft SD-OCT de mogelijkheid om zelfs kleine veranderingen in de dikte van de retinale laag te detecteren. Dit type analyse kan essentiële informatie verschaffen voor ziekteprogressie en de werkzaamheid van neuroprotectieve methoden en behandelingen voor visusgerelateerde aandoeningen beoordelen.
SD-OCT is een niet-invasief alternatief voor het histologisch onderzoeken van de structuur, en van de twee is aangetoond dat ze gecorreleerd zijn6. Hoewel SD-OCT geen cellulaire resolutie bereikt, maakt het wel longitudinale studies bij dieren mogelijk. Dit is voordelig omdat de progressie van de ziekte in individuele dieren in de loop van de tijd kan worden gevolgd in plaats van dieren op specifieke tijdstippen te moeten euthanaseren. Naarmate beeldvormingstechnieken blijven verbeteren, zal ook de SD-OCT-technologie vooruitgang boeken, waardoor de beeldkwaliteit wordt verbeterd en de mogelijkheid om biologische processen zoals de retinale bloedvatfunctie in detail te beoordelen. Zelfs sinds de komst in 1991 heeft sd-oct-technologie enorme vooruitgang geboekt in resolutie, snelheid en gevoeligheid7.
De huidige studie maakt gebruik van een SD-OCT-systeem om veranderingen in retinale lagen te kwantificeren in knaagdiermodellen van retinale degeneratie, glaucoom en diabetische retinopathie. Het SD-OCT-systeem dat hier wordt gebruikt, is een OCT-systeem met fourierdomein dat gebruik maakt van energiezuinig, nabij-infrarood licht om in realtime diepte-opgeloste beelden te verkrijgen, te verwerken en op te slaan. Het SD-OCT-systeem heeft uitgebreide dieptebeeldvormingsmogelijkheden in de golflengteband van 800 nm, met een diepte van 8 mm en een resolutie van 4 μm. In Fourier-domeindetectie is het interferentiesignaal tussen verstrooid licht van het weefsel en een referentiepad Fourier getransformeerd om axiale scans en / of axiale diepteprofielen van verstrooide intensiteit te construeren8. Voor de studies hier wordt de OCT-bundel gescand over de gewenste retinale structuur terwijl seriële axiale scans worden verkregen. Doorgaans verkrijgt een scanpatroon het tweedimensionale raster (B-scans) als een verzameling lineaire eendimensionale scanlijnen (A-scans), die overeenkomen met 2D-dwarsdoorsnedeafbeeldingen met behulp van een rasterscanpatroon. Voor studies gericht op bijziendheid bij muizen, wordt dit systeem ook gebruikt om afmetingen van oculaire structuren te meten (bijv. Hoornvliesdikte, lensdikte, glasvochtkamerdiepte en axiale lengte).
Het huidige systeem stelt gebruikers in staat om hun eigen protocollen te ontwerpen en scans te maken die kunnen worden aangepast en geselecteerd op basis van de oculaire structuren van belang. De belangrijkste scans in deze door de gebruiker gedefinieerde protocollen maken deze beeldvormingstechniek gebruiksvriendelijk. Voor beeldanalyses hebben we op maat gemaakte programmering ontwikkeld in een wiskundig modelleringsprogramma. SD-OCT is een krachtig hulpmiddel om pathomorfologische veranderingen in oculaire structuren niet-invasief te identificeren en te kwantificeren en de progressie van de ziekte te monitoren.

<table><tbody><tr><td>1% tropicamide</td><td>Sandoz</td><td>Sandoz #6131403550; NDC- 24208-585-59</td><td></td></tr><tr><td>0.5% tetracaïne</td><td>Alcon</td><td>NDC 0065-0741-12</td><td></td></tr><tr><td>AIM-RAS G3 120 V</td><td>Leica Bioptigen</td><td>90-AIMRAS-G3-120</td><td>Gespecialiseerd platform om het OCT Scanner Head voor muizen vast te houden</td></tr><tr><td>Celluvisc gel</td><td>REFRESH CELLUVISC</td><td>#4554; NDC-0023-4554-30</td><td></td></tr><tr><td>G3 18 mm Telecentrische Lens</td><td>Leica Bioptigen</td><td>90-BORE-G3-18</td><td></td></tr><tr><td>G3 Muislens</td><td>Leica Bioptigen</td><td>90-BORE-G3-M</td><td></td></tr><tr><td>G3 Ratlens</td><td>Leica Bioptigen</td><td>90-BORE-G3-R</td><td></td></tr><tr><td>verwarmingskussen</td><td>Fabrication</td><td>11-1130</td><td></td></tr><tr><td>InVivoVue software</td><td>Leica Bioptigen</td><td></td><td>Gespecialiseerde software die compatibel is met het Leica Bioptigen SD-OCT systeem</td></tr><tr><td>MATLAB</td><td>Mathworks</td><td></td><td>wiskundig modelleringsprogramma</td></tr><tr><td>Muis/Rat Kit</td><td>Leica Bioptigen</td><td>90-KIT-M/R</td><td>Uitlijningssysteem voor muizen/ratten</td></tr><tr><td>zoutoplossing</td><td>ADDIPAK</td><td>200-39</td><td></td></tr><tr><td>System Envisu R4300 VHR 120 V</td><td>Leica Bioptigen</td><td>90-R4300-V1-120</td><td>SD-OCT systeem</td></tr></tbody></table>

in vivo structurele beoordelingen van oogziekten in knaagdiermodellen met behulp van optische coherentietomografie

In vivo Structural Assessments of Ocular Disease in Rodent Models using Optical Coherence Tomography

Spectrale domein optische coherentie tomografie (SD-OCT) is nuttig voor het visualiseren van retinale en oculaire structuren in vivo. In onderzoek is SD-OCT een waardevol hulpmiddel om veranderingen in een verscheidenheid aan retinale en oculaire ziekte- en letselmodellen te evalueren en te karakteriseren. In door licht geïnduceerde retinale degeneratiemodellen kan SD-OCT worden gebruikt om het dunner worden van de fotoreceptorlaag in de loop van de tijd te volgen. In glaucoommodellen kan SD-OCT worden gebruikt om de verminderde retinale zenuwvezellaag en de totale retinale dikte te controleren en om oogzenuw cupping te observeren na het induceren van oculaire hypertensie. Bij diabetische knaagdieren heeft SD-OCT onderzoekers geholpen bij het waarnemen van een verminderde totale retinale dikte en een verminderde dikte van specifieke retinale lagen, met name de retinale zenuwvezellaag met ziekteprogressie. In muismodellen van bijziendheid kan SD-OCT worden gebruikt om axiale parameters te evalueren, zoals axiale lengteveranderingen. Voordelen van SD-OCT zijn onder meer in vivo beeldvorming van oculaire structuren, de mogelijkheid om veranderingen in oculaire dimensies in de loop van de tijd kwantitatief te volgen en de snelle scansnelheid en hoge resolutie. Hier beschrijven we de methoden van SD-OCT en tonen we voorbeelden van het gebruik ervan in ons laboratorium in modellen van retinale degeneratie, glaucoom, diabetische retinopathie en bijziendheid. Methoden omvatten anesthesie, SD-OCT-beeldvorming en verwerking van de beelden voor diktemetingen.

SD-OCT wordt als succesvol beschouwd als beelden van hoge kwaliteit zodanig worden verkregen dat oculaire afmetingen betrouwbaar kunnen worden gemeten. Hier worden verschillende toepassingen van SD-OCT geïllustreerd met behulp van modellen van retinale degeneratie, glaucoom, diabetische retinopathie en bijziendheid.
In een lichtgeïnduceerd retinale degeneratie (LIRD) model induceert blootstelling aan fel licht (10.000 lux) degeneratie van fotoreceptorcellen in het netvlies9</...

Hier beschrijven we het gebruik van spectrale optische coherentietomografie (SD-OCT) om retinale en oculaire structuren in vivo te visualiseren in modellen van retinale degeneratie, glaucoom, diabetische retinopathie en bijziendheid.

In vivo structurele beoordelingen van oogziekten in knaagdiermodellen met behulp van optische coherentietomografie

Spectral-domain optical coherence tomography (SD-OCT) is useful for visualizing retinal and ocular structures in vivo. In research, SD-OCT is a valuable ...

Spectral domain optical coherence tomography is een waardevol hulpmiddel voor het beeldvormen van oculaire structuren in vivo, en voor het volgen van veranderingen in oculaire afmetingen in de loop van de tijd in verschillende oogziektemodellen. We gebruiken SDOCT om de retinale dikte te meten in modellen van retinale degeneratie bij diabetische retinopathie, retinale dikte en cupping in een glaucoommodel, en axiale lengte in een myopiemodel. De SDOCT-techniek is eenvoudig, maar oefening is cruciaal om goede beelden te verkrijgen.En experimenteren met verschillende protocollen is belangrijk om te bepalen welk protocol het beste past bij elke onderzoeksbehoefte. Het demonstreren van de procedure zal Andrew Feola zijn, een hoofdonderzoeker van het Center for Visual and Neurocognitive Rehabilitation. Begin door de spectral domain optical coherence tomography-software te openen en de informatie over de acquisitiestudie en behandelingsarm in te voeren.Onder het tabblad Patient Exam, klik op test examiner en selecteer de naam van de onderzoeker. Klik op Study Name om de studie te definiëren en open het tabblad Study om een nieuwe studie toe te voegen of de behandelingen in een bestaande studie te wijzigen. Klik rechts van Select Treatment Arm om een behandelingsarm te selecteren.Om een nieuw tijdstip toe te voegen voor een hele groep, klik op Patient Toevoegen. In het venster voert u het ID-nummer, voor- en achternaam in. Selecteer het geslacht van de patiënt en de geboortedatum.Om de individuele ratten toe te voegen, klikt u op Exam Toevoegen. Om de ratten te identificeren, klikt u op een examen en klikt u op Exam bewerken. Voer het ID-nummer in in het vakje Notities invoeren en klik op Wijzigingen opslaan.Bevestig vervolgens de juiste lens aan het apparaat. Selecteer de overeenkomstige configuratie in de software en draai de bijbehorende referentiearmpositie. Onder het tabblad Patient Exam dubbelklikt u op het gemarkeerde examen om door te gaan naar het tabblad Imaging en te beginnen met beeldvorming.Om een voorinstelling van het scanprotocol te laden, klikt u op Selecteer een protocol uit de lijst. Voor ratmodellen van glaucoom en diabetische retinopathie, selecteert u een voorinstelling die bestaat uit twee OD en twee OS, respectievelijk voor de rechter- en linkeroogscans. Nadat u de verdovingsrat in een knaagdieruitlijnsysteem heeft geplaatst, brengt u smering aan op de ogen van het dier.Net voor het beeldvormen, gebruikt u een delicaat klusdoekje om eventueel overtollig zoutoplossing weg te vegen en gebruikt u twee rotatiebewegingen van het knaagdieruitlijnsysteem om de rat zo te positioneren dat de blik horizontaal is en naar de as van de optische coherentietomografielens kijkt. Gebruik de Free Run-modus om de retina te oriënteren voor gegevensverzameling. Gebruik vervolgens de Aim-modus voor een continue weergave van zowel de horizontale als verticale B-scans in real time.Beweeg de scankop dichter naar het oog tot de retina zichtbaar is en gebruik het knaagdieruitlijnsysteem om de positie van het dier aan te passen totdat de oogzenuwkop in het midden zichtbaar is. Maak de horizontale scan horizontaal en de verticale scan verticaal. Pas de werkafstand aan zodat het retinale beeld vlak en niet gebogen is en pas de referentiearmpositie aan om het beeld nabij de bovenkant van het weergavevenster te houden.Voor retinale beeldvorming van glaucoom, retinale degeneratie en diabetische retinopathie modellen, definieer een volumescan van drie bij drie millimeter die bestaat uit 1.000 A-scans door 100 B-scans door 1 herhaalde B-scan voor gemiddelde berekening. Centreer de oogzenuw in de horizontale en de verticale as zodat de volumescan zich in het midden bevindt, recht langs de nasale, temporale en superieure, inferieure assen. Klik op Snapshot om een foto te maken en klik op Opslaan om de afbeelding op te slaan.Verkrijg een radiaal scan gecentreerd op de oogzenuwkop die bestaat uit 1.000 A-scans door 4 B-scans door 20 herhaalde B-scans. En gebruik de herhaalde B-scans om de beeldhelderheid van het oog of de retina te verbeteren om de interpretatie van de ooggebieden of retinale lagen tijdens de gegevensanalyse te vergemakkelijken. Sla vervolgens de afbeelding op en herhaal de scan voor het contralaterale oog.Voor post-processing van de afbeeldingen, opent u het juiste wiskundige modelleringssoftwareprogramma. Voor het verwerken van de retina, selecteert u de optische coherentietomografiescans om te laden en klikt u om het centrum van de oogzenuwkop te definiëren. Het programma genereert verticale lijnen die de afstanden aan weerszijden van de oogzenuwkop definiëren.In de rattenretina bevinden deze lijnen zich op 0,5 en 1,2 millimeter van het centrum van de oogzenuwkop, met een totaal van vier verticale lijnen die de nasale, temporale en inferieure, superieure assen van het oog vertegenwoordigen, afhankelijk van de radiaal B-scan die momenteel wordt geanalyseerd. Langs elke lijn delineeert u de retinale zenuwvezellaag, de innerlijke plexiforme laag, de innerlijke nucleaire laag, de uiterlijke plexiforme laag, de uiterlijke nucleaire laag de externe begrenzingsmembraan, de innerlijke en uiterlijke segmenten, het retinale pigmentepitheel en de totale retinale dikte. Wanneer alle lagen zijn gedelineeerd, exporteert u de metingen naar een spreadsheet voor gegevensanalyse.Representatieve spectral domain optische coherentietomografie-afbeeldingen onthullen een dunnere uiterlijke nucleaire laag, die de fotoreceptorcellichamen bevat in retinas van licht-geïnduceerde retinale degeneratie BALB/c muizen vergeleken met onbeschadigde controle muizen. Na kwantificering van de retinale laagdikte, wordt een significant verschil waargenomen tussen onbeschadigde en licht-geïnduceerde retinale degeneratie muizen voor de totale retinale dikte, de dikte van de uiterlijke nucleaire laag en de innerlijke en uiterlijke segmentdikte. In het oculaire hypertensiemodel wordt een duidelijke hermodellering bij de oogzenuwkop waargenomen, inclusief oogzenuw cupping na acht weken.Kwantificering van de dikte van de retinale zenuwvezellaag na acht weken van oculaire hypertensie toont een significante verdunning in vergelijking met baselinemetingen. Beeldvorming van retinas van een diabetisch ratmodel en Wistar controledieren toont aan

in-vivo-structural-assessments-ocular-disease-rodent-models-using

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bio-engineering

This video demonstrates an in vivo imaging technique for detecting and quantifying eye inflammation in a mouse model of post-infectious uveitis. The technique, known as optical coherence tomography (OCT), generates high-resolution cross-sectional images of the eye for assessing disease progression.

Optical Coherence Tomography Imaging for Assessing Uveitis in a Mouse Model

Source: Jagodzinska, J., et. al.,  Optical Coherence Tomography: Imaging Mouse Retinal Ganglion Cells In Vivo. J. Vis. Exp. (2017)  In this video, we demonstrate the use of spectral-domain optical coherence tomography (SD-OCT) to image retinal layers and assess structural changes in a genetically modified mouse model with optic neuropathy.

In Vivo Imaging of the Mouse Retina Using Optical Coherence Tomography

Dit manuscript wordt een protocol voor de beeldvorming in vivo van het netvlies van de muis met hoge resolutie spectrale domein optische coherentie tomografie (SD-OCT) beschreven. Het richt zich op netvlies peesknoopcellen (regering van Cambodja) in de peripapillary regio, met verschillende scannen en kwantificeren van de aanpak beschreven.

Optische coherentie tomografie: Beeldvorming muis retinale Ganglion cellen In Vivo

Dit protocol beschrijft hoe hoge resolutie beeldvormende technieken zoals spectrale domein optische coherentie tomografie en scannen van laser ophthalmoscopy kan worden gebruikt in kleine knaagdieren, met behulp van een oogheelkundige imaging platform systeem, om informatie te verkrijgen over netvlies dikte en microglial cel distributie, respectievelijk.

In Vivo Beeldvorming van Cx3cr1gfp/gfp Reporter muizen met spectrale domein optische coherentie tomografie en scannen Laser Ophthalmoscopy

Een gedetailleerd protocol voor de beoordeling van structurele en visuele uitlezingen bij knaagdieren door optische coherentie tomografie en optokinetic reactie wordt gepresenteerd. De resultaten bieden waardevolle inzichten voor oogcontrole, alsmede neurologische onderzoek.

Met behulp van optische coherentie tomografie en Optokinetic reactie als structurele en functionele visuele systeem uitlezingen in muizen en ratten

Hier beschrijven we een geoptimaliseerd protocol voor retinale ader occlusie met behulp van rose bengal en een lasergeleid retinaal beeldvormingscoopsysteem met aanbevelingen om de reproduceerbaarheid ervan in genetisch gemodificeerde stammen te maximaliseren.

Optimalisatie van het Retinal Vein Occlusion Mouse Model om variabiliteit te beperken

Hier beschrijven we een in vivo beeldvormingstechniek met behulp van optische coherentietomografie om de diagnose en kwantitatieve meting van retinopathie bij muizen te vergemakkelijken.

Toepassing van optische coherentietomografie op een muismodel van retinopathie

Het huidige protocol schetst de stappen voor het in vivo uitlijnen van optische coherentietomografie-vezelgrafiebeelden (vis-OCTF) in vivo met ex vivo confocale beelden van hetzelfde netvlies van muizen met het oog op het verifiëren van de waargenomen morfologie van de axonbundel van retinale ganglioncellen in de in vivo beelden.

Uitlijning van optische coherentietomografievezelgrammen in zichtbaar licht met confocale beelden van hetzelfde netvlies van de muis

Optische resolutie fotoakoestische microscopie (OR-PAM) is een opkomende technologie die in staat van beeldvorming optische absorptie...

Drie-dimensionale Optische resolutie Fotoakoestisch Microscopie

Dit artikel beschrijft de basisprocedures voor het uitvoeren van optische in kaart brengen van experimenten in de Langendorff-geperfuseerde konijn hart met behulp van het panoramische imaging systeem, en de dubbele (spanning en calcium) beeldvormende modaliteit.

Multiparametrische Optische kaart brengen van de Langendorff-geperfuseerde Rabbit Heart

Leer hoe u SD-OCT gebruikt voor in vivo beeldvorming van oogstructuren in knaagdiermodellen. Deze techniek meet retinadikte en axiale lengte bij retinale degeneratie, glaucoom en myopie.

In vivo structurele beoordelingen van oogziekten in knaagdiermodellen met behulp van optische coherentietomografie

Meer video's verkennen