Name: Ecotoxicologische effecten van microplastics op de ontwikkeling van vogelembryos door uit te broeden zonder eierschaal (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-08-14T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 11 s
Description: Leer een innovatieve methode om kwarteleieren zonder eierschaal uit te broeden voor toxicologisch onderzoek naar microplastics. Deze aanpak verbetert de betrouwbaarheid van experimentele resultaten in milieuwetenschappelijke studies.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd ondersteund door belangrijke onderzoeks- en ontwikkelingsprojecten in de autonome regio Xinjiang Uygur (2017B03014, 2017B03014-1, 2017B03014-2, 2017B03014-3).

1. Voorbereiding vóór blootstelling
<ol><li>Selecteer bevruchte kwarteleitjes die op dezelfde dag zijn geboren voor de blootstellingstest.</li>
	<li>Selecteer kwarteleitjes met vergelijkbare gewichten. Elk bevrucht kwartelei is ongeveer 10-12 g.</li>
	<li>Reinig alle bevruchte kwarteleitjes volledig van externe uitwerpselen en ander vuil.</li>
	<li>Steriliseer elk voorgekomen bevrucht kwartelei en de te gebruiken eieren (Kies eieren met een vergelijkbare schaalvorm, vooral de punt van het ei) met een antibioticumoplossing (penicilline en streptomycine, 1:1000, kamertemperatuur). Steriliseer de incubator met 75% ethanol.</li>
	<li>Open de eieren met het stompe uiteinde van een tandboor, laat de eierschaal aan de punt voor verder gebruik. Voordat de bevruchte eieren worden overgedragen, wordt de inhoud van de eieren uitgestort. Dit is om het vocht van de eierschaal te houden. De openingsdiameter van het ei was ongeveer 3 cm. OPMERKING: Om de schade aan het kwarteleiembryo te verminderen, gebruikt u een tandboor om het stompe uiteinde van het ei te openen en de scheur zo glad mogelijk te maken.</li>
	<li>Plaats na sterilisatie de bevruchte kwarteleitjes gedurende 24-48 uur in een incubator van 38 °C met een luchtvochtigheid van 60%. Zorg ervoor dat het stompe uiteinde van het kwartelei naar boven is.</li>
	<li>Steriliseer tijdens de incubatie van bevruchte kwarteleitjes de gereedschappen die nodig zijn in de daaropvolgende experimenten in een sterilisatiepot. Deze gereedschappen omvatten plasticfolie, een bekerglas, steriel water, pipettips, chirurgische rechte schaar, pincet en een lepel. OPMERKING: Gebruik een film met een temperatuurtolerantie die hoog genoeg is om problemen met de sterilisatie op hoge temperatuur te voorkomen.</li>
</ol>2. Het kwartelei uitbroeden zonder schaal
<ol><li>Breng de voorgekomen bevruchte kwarteleitjes van de broedmachine naar een schone bank en leg ze plat op de container om ze ongeveer 1-2 minuten te stabiliseren.</li>
	<li>Gebruik een schaar (12,5 cm chirurgische rechte schaar) om een klein gaatje (diameter 3 mm) in de centrale as van de voorgekomen bevruchte kwarteleitjes te prikken en om 1-2 cm kleine opening te snijden. Breng het eiwit en de dooier van de bevruchte kwarteleitjes voorzichtig over op de gesneden eierschaal. OPMERKING: Wanneer u een kleine opening met een schaar snijdt, vermijd dan het aanraken van de dooier van kwarteleitjes.</li>
	<li>Voeg de regeloplossing (zonder parlementsleden) en de blootgestelde oplossing van verschillende massa's (0,1, 0,2 en 0,3 mg) microplastics met drie deeltjesgrootten (100, 200 en 500 nm) per pipet toe aan de eiinhoud. Voeg tegelijkertijd 1 druppel penicilline en 1 druppel streptomycine toe met een spuit van 1 ml.</li>
	<li>Bedek de opening van de eierschaal met de gesteriliseerde film (stap 1.6).</li>
	<li>Volgens stap 2.1-2.4, behandel alle bevruchte kwarteleitjes.</li>
	<li>Plaats de overgedragen kwarteleibryo's gedurende de noodzakelijke periode in de incubator van 38 °C met een luchtvochtigheid van 60%. Gebruik in dit experiment een eirotatiehoek van ±30°. Draai de eieren eens per uur. OPMERKING: De overdracht moet zo snel mogelijk zijn, wat in een vroeg stadium meer oefening vereist.</li>
</ol>3. Monsterverzameling
<ol><li>Verwijder na zeven dagen kweek goed ontwikkelde embryo's die met het blote oog zijn waargenomen uit de dooier en was met fosfaatbufferoplossing (PBS).</li>
	<li>Droog de overtollige oplossing buiten het gereinigde embryo met absorberend papier en weeg in een schone petrischaal.</li>
	<li>Open de hele borstholte, scheid de lever en het hart van de ingewanden met een naald-neustang en plaats deze onmiddellijk na het opruimen in centrifugebuizen van 1,5 ml.</li>
	<li>Noteer snel het gewicht op een elektronische balans en bereken de hepatosomatische index (HIS = levergewicht / lichaamsgewicht x 100). Meet de lengte van het borstbeen en lichaam.</li>
	<li>Evalueer op basis van de bovenstaande indicatoren het effect van parlementsleden op de embryonale ontwikkeling. OPMERKING: Embryokwaliteit verwijst hier naar de kwaliteit van dooierverwijdering.</li>
</ol>4. Gegevensanalyse
<ol><li>Rapporteer de experimentele gegevens in de vorm van gemiddelde ± standaardfout (SEM).</li>
	<li>Gebruik een enkele-factor analyse van variantie om de middelen van meerdere groepen monsters te vergelijken. De significante verschilwaarde was α = 0,05.</li>
</ol>

<ol><li>Geyer, R., Jambeck, J. R., Law, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Production%2C+use%2C+and+fate+of+all+plastics+ever+made%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Advances%22%5BJournal%5D)">Production, use, and fate of all plastics ever made.</a> Science Advances. 3 (7), 5(2017).</li>
<li>Thompson, R. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lost+at+sea%3A+Where+is+all+the+plastic%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Lost at sea: Where is all the plastic.</a> Science. 304 (5672), 838-838 (2004).</li>
<li>Barletta, M., Lima, A. R. A., Costa, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distribution%2C+sources+and+consequences+of+nutrients%2C+persistent+organic+pollutants%2C+metals+and+microplastics+in+South+American+estuaries%5BTitle%5D)+AND+%22Science+of+the+Total+Environment%22%5BJournal%5D)">Distribution, sources and consequences of nutrients, persistent organic pollutants, metals and microplastics in South American estuaries.</a> Science of the Total Environment. 651, 1199-1218 (2019).</li>
<li>Eriksson, C., Burton, H., Fitch, S., Schulz, M., vanden Hoff, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Daily+accumulation+rates+of+marine+debris+on+sub-Antarctic+island+beaches%5BTitle%5D)+AND+%22Marine+Pollution+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Daily accumulation rates of marine debris on sub-Antarctic island beaches.</a> Marine Pollution Bulletin. 66 (1-2), 199-208 (2013).</li>
<li>Zhang, C. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microplastics+in+offshore+sediment+in+the+Yellow+Sea+and+East+China+Sea%2C+China%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Pollution%22%5BJournal%5D)">Microplastics in offshore sediment in the Yellow Sea and East China Sea, China.</a> Environmental Pollution. 244, 827-833 (2019).</li>
<li>Obbard, R. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+warming+releases+microplastic+legacy+frozen+in+Arctic+Sea+ice%5BTitle%5D)+AND+%22Earths+Future%22%5BJournal%5D)">Global warming releases microplastic legacy frozen in Arctic Sea ice.</a> Earths Future. 2 (6), 315-320 (2014).</li>
<li>Van Cauwenberghe, L., Vanreusel, A., Mees, J., Janssen, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microplastic+pollution+in+deep-sea+sediments%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Pollution%22%5BJournal%5D)">Microplastic pollution in deep-sea sediments.</a> Environmental Pollution. 182, 495-499 (2013).</li>
<li>Wilcox, C., Van Sebille, E., Hardesty, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Threat+of+plastic+pollution+to+seabirds+is+global%2C+pervasive%2C+and+increasing%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Threat of plastic pollution to seabirds is global, pervasive, and increasing.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 112 (38), 11899-11904 (2015).</li>
<li>Wright, S. L., Thompson, R. C., Galloway, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+physical+impacts+of+microplastics+on+marine+organisms%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Pollution%22%5BJournal%5D)">The physical impacts of microplastics on marine organisms: A review.</a> Environmental Pollution. 178, 483-492 (2013).</li>
<li>Ferreira, G. V. B., Barletta, M., Lima, A. R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+estuarine+resources+by+top+predator+fishes.+How+do+ecological+patterns+affect+rates+of+contamination+by+microplastics%5BTitle%5D)+AND+%22Science+of+the+Total+Environment%22%5BJournal%5D)">Use of estuarine resources by top predator fishes. How do ecological patterns affect rates of contamination by microplastics.</a> Science of the Total Environment. 655, 292-304 (2019).</li>
<li>Provencher, J. F., Vermaire, J. C., Avery-Gomm, S., Braune, B. M., Mallory, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Garbage+in+guano%3F+Microplastic+debris+found+in+faecal+precursors+of+seabirds+known+to+ingest+plastics%5BTitle%5D)+AND+%22Science+of+the+Total+Environment%22%5BJournal%5D)">Garbage in guano? Microplastic debris found in faecal precursors of seabirds known to ingest plastics.</a> Science of the Total Environment. 644, 1477-1484 (2018).</li>
<li>Baulch, S., Perry, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluating+the+impacts+of+marine+debris+on+cetaceans%5BTitle%5D)+AND+%22Marine+Pollution+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Evaluating the impacts of marine debris on cetaceans.</a> Marine Pollution Bulletin. 80 (1-2), 210-221 (2014).</li>
<li>Rochman, C. M., Kurobe, T., Flores, I., Teh, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+warning+signs+of+endocrine+disruption+in+adult+fish+from+the+ingestion+of+polyethylene+with+and+without+sorbed+chemical+pollutants+from+the+marine+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Science+of+the+Total+Environment%22%5BJournal%5D)">Early warning signs of endocrine disruption in adult fish from the ingestion of polyethylene with and without sorbed chemical pollutants from the marine environment.</a> Science of the Total Environment. 493, 656-661 (2014).</li>
<li>Mattsson, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+damage+and+behavioural+disorders+in+fish+induced+by+plastic+nanoparticles+delivered+through+the+food+chain%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Brain damage and behavioural disorders in fish induced by plastic nanoparticles delivered through the food chain.</a> Scientific Reports. 7, 7(2017).</li>
<li>Brown, D. M., Wilson, M. R., MacNee, W., Stone, V., Donaldson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Size-dependent+proinflammatory+effects+of+ultrafine+polystyrene+particles%3A+A+role+for+surface+area+and+oxidative+stress+in+the+enhanced+activity+of+ultrafines%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicology+and+Applied+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Size-dependent proinflammatory effects of ultrafine polystyrene particles: A role for surface area and oxidative stress in the enhanced activity of ultrafines.</a> Toxicology and Applied Pharmacology. 175 (3), 191-199 (2001).</li>
<li>Salvati, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+and+theoretical+comparison+of+intracellular+import+of+polymeric+nanoparticles+and+small+molecules%3A+toward+models+of+uptake+kinetics%5BTitle%5D)+AND+%22Nanomedicine-Nanotechnology+Biology+and+Medicine%22%5BJournal%5D)">Experimental and theoretical comparison of intracellular import of polymeric nanoparticles and small molecules: toward models of uptake kinetics.</a> Nanomedicine-Nanotechnology Biology and Medicine. 7 (6), 818-826 (2011).</li>
<li>Frohlich, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Action+of+polystyrene+nanoparticles+of+different+sizes+on+lysosomal+function+and+integrity%5BTitle%5D)+AND+%22Particle+and+Fibre+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Action of polystyrene nanoparticles of different sizes on lysosomal function and integrity.</a> Particle and Fibre Toxicology. 9, 13(2012).</li>
<li>Bexiga, M. G., Kelly, C., Dawson, K. A., Simpson, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RNAi-mediated+inhibition+of+apoptosis+fails+to+prevent+cationic+nanoparticle-induced+cell+death+in+cultured+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nanomedicine%22%5BJournal%5D)">RNAi-mediated inhibition of apoptosis fails to prevent cationic nanoparticle-induced cell death in cultured cells.</a> Nanomedicine. 9 (11), 1651-1664 (2014).</li>
<li>Lehner, R., Weder, C., Petri-Fink, A., Rothen-Rutishauser, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emergence+of+Nanoplastic+in+the+Environment+and+Possible+Impact+on+Human+Health%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Science%2C+Technology%22%5BJournal%5D)">Emergence of Nanoplastic in the Environment and Possible Impact on Human Health.</a> Environmental Science, Technology. 53 (4), 1748-1765 (2019).</li>
<li>Pinsino, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amino-modified+polystyrene+nanoparticles+affect+signalling+pathways+of+the+sea+urchin+%28Paracentrotus+lividus%29+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Nanotoxicology%22%5BJournal%5D)">Amino-modified polystyrene nanoparticles affect signalling pathways of the sea urchin (Paracentrotus lividus) embryos.</a> Nanotoxicology. 11 (2), 201-209 (2017).</li>
<li>El-Ghali, N., Rabadi, M., Ezin, A. M., De Bellard, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+Methods+for+Chicken+Embryo+Manipulations%5BTitle%5D)+AND+%22Microscopy+Research+and+Technique%22%5BJournal%5D)">New Methods for Chicken Embryo Manipulations.</a> Microscopy Research and Technique. 73 (1), 58-66 (2010).</li>
<li>Rashidi, H., Sottile, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+chick+embryo%3A+hatching+a+model+for+contemporary+biomedical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Bioessays%22%5BJournal%5D)">The chick embryo: hatching a model for contemporary biomedical research.</a> Bioessays. 31 (4), 459-465 (2009).</li>
<li>Faez, T., Skachkov, I., Versluis, M., Kooiman, K., de Jong, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+characterization+of+ultrasound+contrast+agents%3A+microbubble+spectroscopy+in+a+chicken+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">In vivo characterization of ultrasound contrast agents: microbubble spectroscopy in a chicken embryo.</a> Ultrasound in Medicine and Biology. 38 (9), 1608-1617 (2012).</li>
<li>Yamamoto, F. Y., Neto, F. F., Freitas, P. F., Ribeiro, C. A. O., Ortolani-Machado, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cadmium+effects+on+early+development+of+chick+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Toxicology+and+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Cadmium effects on early development of chick embryos.</a> Environmental Toxicology and Pharmacology. 34 (2), 548-555 (2012).</li>
<li>Li, X. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Caffeine+interferes+embryonic+development+through+over-stimulating+serotonergic+system+in+chicken+embryo%5BTitle%5D)+AND+%22Food+and+Chemical+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Caffeine interferes embryonic development through over-stimulating serotonergic system in chicken embryo.</a> Food and Chemical Toxicology. 50 (6), 1848-1853 (2012).</li>
<li>Lokman, N. A., Elder, A. S. F., Ricciardelli, C., Oehler, M. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chick+Chorioallantoic+Membrane+%28CAM%29+Assay+as+an+In+Vivo+Model+to+Study+the+Effect+of+Newly+Identified+Molecules+on+Ovarian+Cancer+Invasion+and+Metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Chick Chorioallantoic Membrane (CAM) Assay as an In Vivo Model to Study the Effect of Newly Identified Molecules on Ovarian Cancer Invasion and Metastasis.</a> International Journal of Molecular Sciences. 13 (8), 9959-9970 (2012).</li>
<li>Burns, E. E., Boxall, A. B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microplastics+in+the+aquatic+environment%3A+Evidence+for+or+against+adverse+impacts+and+major+knowledge+gaps%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Toxicology+and+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Microplastics in the aquatic environment: Evidence for or against adverse impacts and major knowledge gaps.</a> Environmental Toxicology and Chemistry. 37 (11), 2776-2796 (2018).</li>
<li>Alejo-Plata, M. D., Herrera-Galindo, E., Cruz-Gonzalez, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Description+of+buoyant+fibers+adhering+to+Argonauta+nouryi+%28Cephalopoda%3A+Argonautidae%29+collected+from+the+stomach+contents+of+three+top+predators+in+the+Mexican+South+Pacific%5BTitle%5D)+AND+%22Marine+Pollution+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Description of buoyant fibers adhering to Argonauta nouryi (Cephalopoda: Argonautidae) collected from the stomach contents of three top predators in the Mexican South Pacific.</a> Marine Pollution Bulletin. 142, 504-509 (2019).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets bekend te maken. Alle auteurs verklaren dat ze geen bekende concurrerende financiële belangen of persoonlijke relaties hebben die het werk van dit artikel hadden kunnen beïnvloeden.

Dit document biedt een effectief experimenteel schema om de ontwikkeling van kwartelembryo's te evalueren door de basisontwikkelingsindexen te detecteren. Er zijn echter nog enkele beperkingen aan dit experiment. 
Ten eerste is de mortaliteit van kwarteleibryo's in het latere stadium van het uitkomen hoger vanwege het schelploze uitkomen. Er zijn kunstmatig oncontroleerbare factoren zoals de vernietiging van de normale eiwitverhouding in het experimentele proces. We hebben de blootstellingstij...

De productie van plastic afval was ongeveer 6300 Mt in 2015, waarvan een tiende werd gerecycled, en de rest werd ondergronds verbrand of begraven. Naar schatting zou tegen 2050 ongeveer 12.000 mt plastic afval ondergronds worden begraven1. Met de aandacht van de internationale gemeenschap voor plastic afval stelde Thompson in 2004 voor het eerst het concept van microplasticsvoor 2. Microplastics (Parlementsleden) verwijzen naar kleine deeltjesplastics met een deeltjesdiameter van minder dan 5 mm. Op dit moment hebben onderzoekers de alomtegenwoordige aanwezigheid van parlementsleden ontdekt in de kustlijn van verschillende continenten, de Atlantische eilanden, binnenmeren, het Noordpoolgebied en diepzeehabitats3,4,5,6,7. Daarom zijn meer onderzoekers begonnen met het bestuderen van de milieurisico's van parlementsleden.
Organismen kunnen parlementsleden in het milieu opnemen. Parlementsleden werden gevonden in het spijsverteringskanaal van 233 mariene organismen wereldwijd (waaronder 100% schildpadsoorten, 36% zeehondensoorten, 59% walvissoorten, 59% zeevogelsoorten, 92 soorten zeevissen en 6 soorten ongewervelden)8. Bovendien kunnen parlementsleden het spijsverteringsstelsel van de organismen blokkeren, zich ophopen en migreren in hun bobies9. Het is gebleken dat parlementsleden via de voedselketen kunnen worden overgedragen en hun inname verschilt met de veranderingen van habitat, groeifase, voedingsgewoonten en voedselbronnen10. Sommige onderzoekers meldden het bestaan van parlementsleden in de uitwerpselen van zeevogels11, wat betekent dat zeevogels fungeren als drager van parlementsleden. Bovendien kan de inname van parlementsleden de gezondheid van sommige organismen beïnvloeden. Parlementsleden kunnen bijvoorbeeld verstrikt raken in het maagdarmkanaal, waardoor de mortaliteit van walvisachtigentoeneemt 12.
Parlementsleden alleen hebben toxische effecten op organismen en gezamenlijke toxische effecten op organismen met andere verontreinigende stoffen. Inname van milieugerelateerde concentraties van plastic afval kan de endocriene systeemfunctie van volwassen vissen verstoren13. De grootte van microplastics is een van de belangrijke factoren die van invloed zijn op hun opname en accumulatie door organismen14,15. De kleine kunststoffen, met name de nanosize kunststoffen, zijn gevoelig voor interactie met cellen en organismen met hoge toxiciteit16,17,18,19. Hoewel de schadelijke effecten van microplastics met nanodeeltjesgrootte op organismen het huidige onderzoeksniveau overschrijden, is de detectie en kwantificering van microplastics met een grootte van minder dan enkele micrometers, met name de submicron/nanoplastics in het milieu, nog steeds een grote uitdaging. Daarnaast hebben nanoplastics ook enkele effecten op embryo's. Polystyreen kan de ontwikkeling van zee-egelsembryo's beschadigen door eiwit- en genprofielen te reguleren20.
Om de mogelijke impact van parlementsleden op organismen te onderzoeken, hebben we deze studie uitgevoerd. Vanwege de gelijkenis tussen vogelembryo's en menselijke embryo's worden ze meestal gebruikt in ontwikkelingsbiologieonderzoek21, waaronder angiogenese en antiangiogenese, weefseltechnologie, biomateriaalimplantaat en hersentumoren22,23,24. De embryo's van de vogel hebben de voordelen van lage kosten, een korte cultuurcyclus en gemakkelijke verrichting25,26. Daarom kozen we kwarteleibryo's met een korte groeicyclus als proefdier in deze studie. Tegelijkertijd kunnen we de morfologische veranderingen van kwartelpembryo's die tijdens de embryonale ontwikkelingsfase aan parlementsleden zijn blootgesteld, direct waarnemen met behulp van een eierschaalvrije broedtechnologie. De gebruikte experimentele materialen waren polypropyleen (PP) en polystyreen (PS). Omdat PP en PS27 het grootste deel van de polymeertypen vertegenwoordigen die wereldwijd in sedimenten en waterlichamen worden verkregen, zijn de meest voorkomende polymeertypen die worden gewonnen uit gevangen mariene organismen ethyleen en propyleen28. Dit experimentele protocol beschrijft het hele proces voor visuele evaluatie van toxicologische effecten van parlementsleden op kwartelembryo's die aan parlementsleden zijn blootgesteld. We kunnen deze methode gemakkelijk uitbreiden om de toxiciteit van andere verontreinigende stoffen voor de embryoontwikkeling van andereovipareuze dieren te onderzoeken.

<table><tbody><tr><td>&nbsp;Multi sample tissue grinder</td><td>Shanghai Jingxin Industrial Development Co., Ltd.</td><td>Tissuelyser-24</td><td>Vermalen van grote plastic materialen tot kleine stukjes bij lage temperatuur</td></tr><tr><td>Elektronische weegschaal</td><td>OHAUS corporation</td><td>PR Series Precision</td><td>Gebaat voor wegen</td></tr><tr><td>Bevruchte kwarteleitjes</td><td>Guangzhou Cangmu Agricultural Development Co., Ltd.</td><td></td><td>Kwarteleitjes voor het uitbroeden zonder schaal</td></tr><tr><td>Fluorescente polypropyleen deeltjes</td><td>Foshan Juliang Optical Material Co., Ltd.</td><td></td><td>Typen kunststoffen geselecteerd voor het experiment</td></tr><tr><td>Incubator</td><td>Shandong, Bangda Incubation Equipment Co., Ltd.</td><td>264 stuks</td><td>Biedt een plek voor embryonale groei en ontwikkeling</td></tr><tr><td>Nanometer-schaal polystyreen microsferen</td><td>Xi&rsquo;an Ruixi Biological Technology Co., Ltd.</td><td>100 nm, 200 nm, 500 nm</td><td>Typen kunststoffen geselecteerd voor het experiment</td></tr><tr><td>Stalen liniaal</td><td>Deli Group</td><td>20 cm</td><td>Gebaat voor het meten van lengte</td></tr><tr><td>Verticaal verwarmde druksterilisator</td><td>Shanghai Shenan Medical Instrument Factory</td><td>LDZM-80KCS-II</td><td>De experimentele artikelen steriliseren</td></tr></tbody></table>

ecotoxicologische effecten van microplastics op de ontwikkeling van vogelembryo's door uit te broeden zonder eierschaal

Ecotoxicological Effects of Microplastics on Bird Embryo Development by Hatching without Eggshell

Microplastics zijn een opkomende wereldwijde verontreinigende stof die een grote bedreiging vormt voor de gezondheid van dieren als gevolg van hun opname en translocatie in dierlijke weefsels en organen. Ecotoxicologische effecten van microplastics op de ontwikkeling van vogelembryo's zijn niet bekend. Het vogelei is een compleet ontwikkelings- en voedingssysteem en de hele embryo-ontwikkeling vindt plaats in de eierschaal. Daarom wordt een direct verslag van de ontwikkeling van vogelembryo's onder de stress van verontreinigende stoffen zoals microplastics sterk beperkt door de ondoorzichtige eierschaal in traditionele arcering. In deze studie werden de effecten van microplastics op de ontwikkeling van kwartelembryo's visueel gemonitord door uit te broeden zonder eierschaal. De belangrijkste stappen omvatten het reinigen en desinfecteren van bevruchte eieren, de incubatie vóór blootstelling, de incubatie op korte termijn na blootstelling en de monsterextractie. De resultaten tonen aan dat in vergelijking met de controlegroep het natte gewicht en de lichaamslengte van de aan microplastics blootgestelde groep een statistisch verschil vertoonden en het leveraandeel van de hele blootgestelde groep aanzienlijk steeg. Daarnaast evalueerden we externe factoren die de incubatie beïnvloeden: temperatuur, vochtigheid, eirotatiehoek en andere omstandigheden. Deze experimentele methode biedt waardevolle informatie over de ecotoxicologie van microplastics en een nieuwe manier om de nadelige effecten van verontreinigende stoffen op de ontwikkeling van embryo's te bestuderen.

Voor de analyse van experimentele gegevens vergeleken we nat gewicht, lichaamslengte, borstbeenlengte en de verandering van hepatosomatische index tussen de controlegroep en de 6 experimentele groepen, waarbij we de groei en ontwikkeling van de kwartelembryo's vanuit een macroperspectief meten en weerspiegelen. We ontdekten zes normale kwarteleibryo's in elke groep. Elk embryo bereikte het vereiste Hamburger en Hamilton (HH) stadium.
In figuur 1hebben we de voorge...

Dit artikel introduceert een methode om uit te broeden zonder een eierschaal te gebruiken voor toxicologisch onderzoek van deeltjesverontreinigende stoffen zoals microplastics.

Ecotoxicologische effecten van microplastics op de ontwikkeling van vogelembryo's door uit te broeden zonder eierschaal

Microplastics are an emerging global pollutant type that poses a great health threat to animals due to their uptake and translocation in animal tissues ...

Dit experiment zal vier delen omsluiten. Voorbereiding voor blootstelling, uitkomen kwartelei zonder schaal, incubatieproces en een monsterverzameling, en representatieve resultaten. Bekijk de volgende video voor het specifieke experimentele proces. In de blootstellingstest werd dezelfde partij kwartelbevruchte eieren geselecteerd voor het experiment. De eieren met een vergelijkbare grootte werden geselecteerd om de experimentele fout te verminderen. Tegelijkertijd moeten alle kwartels de eieren bevruchten en moeten eieren volledig worden schoongemaakt, omdat er uitwerpselen en andere stoffen op hun schelpen zullen zitten. Daarna werden de voorgekomen, de bevruchte kwarteleitjes en de te gebruiken eieren gedesinfecteerd met penicilline en een mycine Bij het plaatsen moet je aandacht besteden aan de bovenkant naar beneden en vervolgens het stompe uiteinde naar boven. Het reinigingsproces van het ei wordt niet weergegeven in de video. De volgende stap is het proces van het aarden van de eierschaal. Het is de belangrijkste stap in de voorbereiding. De gezongen eierschaal is een snee in de middelste eigrootte met een tandboor, maar kan niet worden gebroken. In een poging om het breukoppervlak van de incisie glad genoeg te maken, werd de incubator gedesinfecteerd met 75% Acinol-oplossing. Kwartel bevrucht ei in de broedmachine met een luchtvochtigheid van 60% en 38

ecotoxicological-effects-microplastics-on-bird-embryo-development

Research

JoVE Journal

Environment

Milieu

Het gemak van bereikbaarheid van het embryo heeft het mogelijk gemaakt voor experimenten naar cel lot met behulp van verschillende methoden, waaronder chick kwartel hersenschimmen en focale kleurstof etikettering kaart. In dit artikel tonen we een ei voorbereiding methode die is geoptimaliseerd voor een lange overlevingsduur.

Windowing Kip Eieren voor Ontwikkelingsbiologie Studies

In dit artikel presenteren we een eenvoudige methode om op lange termijn in staat...

Een Ex-ovo Chicken Embryo Cultuur systeem geschikt voor Imaging en microchirurgie toepassingen

De zebravink (Taeniopygiaguttata) is een waardevol modelorganisme; de vroege stadia van de ontwikkeling van de zebravink zijn echter niet uitgebreid bestudeerd. Het protocol beschrijft hoe vroege embryo's te disseceren voor ontwikkelings- en moleculaire toepassingen.

Dissectie en Downstream Analyse van Zebravinken embryo&#39;s in een vroeg stadium van ontwikkeling

Blootstelling aan milieu-toxines kan acuut ontwikkelende embryo's beïnvloeden. Hormoonontregelende chemische stoffen zoals Bisfenol is bekend dat een nadelige invloed op het zenuwstelsel. Hier beschrijven we een protocol met behulp van een in vitro gewerveld dier (chick embryo) neuronale netwerkmodel te bestuderen van de functionele gevolgen van toxine blootstelling op vroege embryo's.

Beoordeling van de effecten van hormoonontregelende stoffen op de ontwikkeling van de gewervelde neuraal netwerkfunctie met behulp van meerdere elektrode Arrays

Blootstelling aan toxische stoffen in het milieu kan acuut ontwikkeling met effecten op lange termijn beïnvloeden. Gedetailleerde protocollen worden geleverd om te illustreren een strategie met behulp van een effectieve lab-model om te bestuderen van het effect van vroege embryonale blootstelling aan Bisfenol A. Wij bieden vruchtbaarheid en gedrags tests om de doelmatigheid van onze toxische blootstelling bio-tests.

Gedrags- en reproductieve gevolgen van embryonale blootstelling aan toxische stoffen in lage dosis op lange termijn

Dit protocol beschrijft drie methoden voor het verkrijgen en gebruiken van 5 tot 8 dagen oude kippenembryo's en hun chorioallantoic membrane (CAM) als een in vivo model om contrastverbeterde ultrasone beeldvorming en microbubbel-gemedieerde medicijnafgifte te bestuderen.

De voorbereiding van Chicken Ex Ovo Embryo's en Chorioallantoic Membrane Vessels als In Vivo Model voor Contrast-Enhanced Ultrasound Imaging en Microbubble-Gemedieerde Drug Delivery Studies

Dit is een effectieve methode om te screenen op suppressors of drivers van kankermetastase. Cellen, getransduceerd met een expressiebibliotheek, worden geïnjecteerd in het kippen chorioallantoïsche membraan vasculatuur om gemetastaseerde kolonies te vormen. Kolonies met verminderde of verhoogde invasiviteit worden verwijderd, uitgebreid, opnieuw geïnjecteerd om hun fenotype te bevestigen en ten slotte geanalyseerd met behulp van sequencing met hoge doorvoer.

Ontdekking van gemetastaseerde regulatoren met behulp van een snel en kwantitatief intravital chick chorioallantoic membraanmodel

Zebravisembryo's/larven ontwikkelen zich extern en zijn optisch transparant. De bioaccumulatie van microplastics in vissen in vroege levensfasen wordt gemakkelijk beoordeeld met fluorescerend gelabelde microbeads.

Accumulatie en distributie van fluorescerende microplastics in de vroege levensfasen van zebravissen

Kippenembryo's, als klassiek ontwikkelingsmodel, worden in ons lab gebruikt om ontwikkelingscarditoxiciteiten te beoordelen na blootstelling aan verschillende milieuverontreinigingen. Blootstellingsmethoden en vastgestelde morfologische/functionele beoordelingsmethoden worden in dit manuscript beschreven.

Kipembryo gebruiken als een krachtig hulpmiddel bij de beoordeling van ontwikkelingscarditoxiciteiten

De geweekte kraaltest omvat gerichte toediening van testreagens op elk ontwikkelingstijdpunt om de regulatie van celdifferentiatie en morfogenese te bestuderen. Een gedetailleerd protocol, toepasbaar op elk proefdiermodel, voor het bereiden van drie verschillende soorten geweekte kralen en het implanteren hiervan in de interdigit van een kippenembryo wordt gepresenteerd.

Analyse van celdifferentiatie, morfogenese en patronen tijdens kippenembrogenese met behulp van de soaked-bead assay

Leer een innovatieve methode om kwarteleieren zonder eierschaal uit te broeden voor toxicologisch onderzoek naar microplastics. Deze aanpak verbetert de betrouwbaarheid van experimentele resultaten in milieuwetenschappelijke studies.

Ecotoxicologische effecten van microplastics op de ontwikkeling van vogelembryo's door uit te broeden zonder eierschaal

Meer video's verkennen