Name: Een muismodel van lumbale wervelkolominstabiliteit (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-04-23T13:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 28 s
Description: Leer een chirurgische methode om lumbale wervelkolominstabiliteit te induceren bij muizen. Dit reproduceerbare model met C57BL/6 muizen faciliteert onderzoek naar tussenwervelschijfdegeneratie zonder gespecialiseerde apparatuur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd ondersteund door de National Natural Science Foundation of China (81973607) en Essential Drug Research and Development (2019ZX09201004-003-032) van het Ministerie van Wetenschap en Technologie van China.

De beschreven onderzoeken voldoen aan de richtlijnen voor de verzorging en het gebruik van proefdieren van de National Institutes of Health en zijn goedgekeurd door de Shanghai University of Traditional Chinese Medicine Animal Care and Use Committee. Alle chirurgische manipulaties werden uitgevoerd onder diepe anesthesie en de dieren ondervonden in geen enkel stadium pijn tijdens de procedure.
1. Voorbereiding vóór de operatie
<ol><li>Instrumentsterilisatie: Stoomsteriliseren van chirurgische instrumenten in een autoclaaf (121 °C gedurende 15 minuten) voorafgaand aan de operatie. Verpak instrumenten in een metalen container en onderhoud ze totdat ze tijdens de operatie worden gebruikt.</li>
	<li>Instelling operatieplatform: Wijs een bankoppervlak van ten minste 60 cm x 60 cm toe voor de operatie. Reinig het oppervlak met 75% alcohol en bedek met een wegwerp medische handdoek. Plaats een steriele chirurgische instrumentenverpakking, reagentia, chirurgische items op een wegwerp medische handdoek binnen de bovenste 1/3 van het gebied. Laat de resterende 2/3 van het gebied schoon voor chirurgische ingreep. Voeg een hotpad toe onder de chirurgische pad voor thermische ondersteuning.</li>
	<li>Dierlijke voorbereiding<ol>
<li>Plaats het dier (C57BL/6J muizen, mannetje, 8 weken oud) in de inductiekamer. Zet de vaporizer aan op een inductieniveau van 4% voor isofluraan en 4 L/min voor zuurstof. Nadat het dier volledig is verdoofd, houdt u het verdovingsmiddel met de neuskegel en de verdoving op een niveau van 1,5% voor isofluraan en 0,4 L/min voor zuurstof tijdens de operatie. Controleer het dier op ademhaling.</li>
		<li>Breng chloortetracycline hydrochloride oogzalf aan om uitdroging van het hoornvlies tijdens de operatie te voorkomen.</li>
		<li>Scheer het operatiegebied op het dorsale oppervlak van het onderste thoracale gebied naar de bovenkant van het sacrale gebied met behulp van een kleine dierentrimmer. Verwijder de geschoren vacht met tissuedoekjes.</li>
		<li>Breng ontharingscrème aan op het geschoren gebied en laat het daar niet langer dan 3 minuten staan. Verwijder de crème met gaas en spoel met 2 ml steriele zoutoplossing van 0,9%.</li>
		<li>Plaats een op maat gemaakte chirurgische cilindrische pad(figuur 2A)onder de buik van de muis om de lumbale wervelkolom op te tillen en de chirurgische operatie te vergemakkelijken.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. Blootstelling van het lumbale derde aan lumbale vijfde (L3–L5) spineuze processen
<ol><li>Gebruik de wijsvinger om de onderhuidse spineuze processen van de lumbale wervels aan te raken, die meer naar buiten zijn gericht, en vergelijk met thoracale wervels en sacrale wervels om het lumbale gebied te identificeren.</li>
	<li>Spoel de huid af met 75% alcohol. Voer een midline huidincisie van 3-4 cm uit over het lumbale gebied van het midden-thoracale gebied tot de heup met behulp van een scalpelblad om de fascia bloot te leggen.</li>
	<li>Identificeer de lumbale wervelkolom door de morfologie van de achterste fascia die op de uiteinden van de spineuze processen is ingebracht. In detail onderscheidt de derde lumbale (L3) tot de eerste sacrale (S1) fasciae zich van andere fasciae door hun "V" vormen. De laatste "V"-punt sluit aan op de eerste sacrale (S1) fascia en de eerste "V"-punt komt overeen met het spineuze proces L3 (figuur 2B).</li>
	<li>Maak de achterste paraspinous spierincisies langs de spineuze processen van L3 tot L5 aan beide zijden lateraal met een scalpelblad (Figuur 2C). Controleer de incisiediepte naar de facetten om een bloeding te verminderen.</li>
	<li>Scheid de spierlagen met behulp van twee oftalmische tangen om L3 tot L5 spineuze processen en supraspinous ligamenten bloot te stellen.</li>
</ol>3. Resectie van L3–L5 spineuze processen samen met de ligamenten
<ol><li>Afzonderlijke spineuze processen door interspinous ligamenten af te snijden met behulp van Venusscharen (Figuur 2D).</li>
	<li>Resect de L3–L5 spineuze processen samen met de interspinous ligamenten met Venus scharen (Figuur 2E).</li>
	<li>Hecht de huidincisie met steriele zijde gevlochten (hechtingsgrootte 5.0) zonder herbevestiging van de paravertebrale spieren.</li>
	<li>Breng chloortetracycline hydrochloride oogzalf aan op de chirurgische plaats.</li>
	<li>Dien Buprenorfine-SR (25 uL per gram muisgewicht) toe onmiddellijk na een LSI-operatie voor analgesie.</li>
	<li>Plaats de dieren in een warme kamer en controleer tijdens het herstel van de anesthesie. Controleer de voedsel- en waterinname voordat u de dieren terugstlaat naar de thuiskooi.</li>
	<li>Bewaak het dier eenmaal daags gedurende de eerste 3 dagen na gebruik. Het dier moet een normale eetlust kunnen hebben en moet genezen zonder tekenen van pus, bloeding of zwelling. Ze kunnen een kleine beperking hebben in de voortbeweging.</li>
	<li>Voer schijnoperaties alleen uit door de achterste paravertebrale spieren los te maken van deL 3-L5 wervels.</li>
</ol>

<ol><li>Makino, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lumbar+disc+degeneration+progression+in+young+women+in+their+20%27s%3A+a+prospective+ten-year+follow+up%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Science%3A+Official+Journal+of+the+Japanese+Orthopaedic+Association%22%5BJournal%5D)">Lumbar disc degeneration progression in young women in their 20's: a prospective ten-year follow up.</a> Journal of Orthopaedic Science: Official Journal of the Japanese Orthopaedic Association. 22 (4), 635-640 (2017).</li>
<li>Lee, Y. C., Zotti, M. G. T., Osti, O. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Operative+management+of+lumbar+degenerative+disc+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Asian+Spine+Journal%22%5BJournal%5D)">Operative management of lumbar degenerative disc disease.</a> Asian Spine Journal. 10 (4), 801-819 (2016).</li>
<li>Wei, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+experimental+intervertebral+disc+degeneration+induced+by+bleomycin+in+the+rhesus+monkey%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Musculoskeletal+Disorders%22%5BJournal%5D)">In vivo experimental intervertebral disc degeneration induced by bleomycin in the rhesus monkey.</a> BMC Musculoskeletal Disorders. 15, 340(2014).</li>
<li>Lim, K. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ovine+lumbar+intervertebral+disc+degeneration+model+utilizing+a+lateral+retroperitoneal+drill+bit+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Ovine lumbar intervertebral disc degeneration model utilizing a lateral retroperitoneal drill bit injury.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (123), e55753(2017).</li>
<li>Zhang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histological+features+of+the+degenerating+intervertebral+disc+in+a+goat+disc-injury+model%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">Histological features of the degenerating intervertebral disc in a goat disc-injury model.</a> Spine. 36 (19), 1519-1527 (2011).</li>
<li>Bergknut, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+dog+as+an+animal+model+for+intervertebral+disc+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">The dog as an animal model for intervertebral disc degeneration.</a> Spine. 37 (5), 351-358 (2012).</li>
<li>Kong, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rabbit+Model+for+in+vivo+Study+of+Intervertebral+Disc+Degeneration+and+Regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Korean+Neurosurgical+Society%22%5BJournal%5D)">Rabbit Model for in vivo Study of Intervertebral Disc Degeneration and Regeneration.</a> Journal of Korean Neurosurgical Society. 44 (5), 327-333 (2008).</li>
<li>Gullbrand, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+large+animal+model+that+recapitulates+the+spectrum+of+human+intervertebral+disc+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+and+Cartilage%22%5BJournal%5D)">A large animal model that recapitulates the spectrum of human intervertebral disc degeneration.</a> Osteoarthritis and Cartilage. 25 (1), 146-156 (2017).</li>
<li>Jin, L., Balian, G., Li, X. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+disc+degeneration-an+update%5BTitle%5D)+AND+%22Histology+and+Histopathology%22%5BJournal%5D)">Animal models for disc degeneration-an update.</a> Histology and Histopathology. 33 (6), 543-554 (2018).</li>
<li>O'Connell, G. D., Vresilovic, E. J., Elliott, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+intervertebral+disc+anatomy+across+several+animal+species%5BTitle%5D)+AND+%2252nd+Annual+Meeting+of+the+Orthopaedic+Research+Society%22%5BJournal%5D)">Comparative intervertebral disc anatomy across several animal species.</a> 52nd Annual Meeting of the Orthopaedic Research Society. , (2006).</li>
<li>Elliott, D. M., Sarver, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Young+investigator+award+winner%3A+validation+of+the+mouse+and+rat+disc+as+mechanical+models+of+the+human+lumbar+disc%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">Young investigator award winner: validation of the mouse and rat disc as mechanical models of the human lumbar disc.</a> Spine. 29 (7), 713-722 (2004).</li>
<li>Ohnishi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+mouse+intervertebral+disc+degeneration+model+based+on+a+new+histological+classification%5BTitle%5D)+AND+%22Plos+One%22%5BJournal%5D)">In vivo mouse intervertebral disc degeneration model based on a new histological classification.</a> Plos One. 11 (8), 0160486(2016).</li>
<li>Vo, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accelerated+aging+of+intervertebral+discs+in+a+mouse+model+of+progeria%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Research%22%5BJournal%5D)">Accelerated aging of intervertebral discs in a mouse model of progeria.</a> Journal of Orthopaedic Research. 28 (12), 1600-1607 (2010).</li>
<li>Oichi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+intervertebral+disc+degeneration+model+by+surgically+induced+instability%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">A mouse intervertebral disc degeneration model by surgically induced instability.</a> Spine. 43 (10), 557-564 (2018).</li>
<li>Ohnishi, T., Sudo, H., Tsujimoto, T., Iwasaki, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+spontaneous+lumbar+intervertebral+disc+degeneration+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Research%22%5BJournal%5D)">Age-related spontaneous lumbar intervertebral disc degeneration in a mouse model.</a> Journal of Orthopaedic Research. 36 (1), 224-232 (2018).</li>
<li>Stern, W. E., Coulson, W. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+collagenase+upon+the+intervertebral+disc+in+monkeys%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Effects of collagenase upon the intervertebral disc in monkeys.</a> Journal of Neurosurgery. 44 (1), 32-44 (1976).</li>
<li>Silva, M. J., Holguin, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LRP5-deficiency+in+OsxCreERT2+mice+models+intervertebral+disc+degeneration+by+aging+and+compression%5BTitle%5D)+AND+%22bioRxiv%22%5BJournal%5D)">LRP5-deficiency in OsxCreERT2 mice models intervertebral disc degeneration by aging and compression.</a> bioRxiv. , (2019).</li>
<li>Nemoto, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histological+changes+in+intervertebral+discs+after+smoking+and+cessation%3A+experimental+study+using+a+rat+passive+smoking+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Science%3A+Official+Journal+of+the+Japanese+Orthopaedic+Association%22%5BJournal%5D)">Histological changes in intervertebral discs after smoking and cessation: experimental study using a rat passive smoking model.</a> Journal of Orthopaedic Science: Official Journal of the Japanese Orthopaedic Association. 11 (2), 191-197 (2006).</li>
<li>Mulholland, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+myth+of+lumbar+instability%3A+the+importance+of+abnormal+loading+as+a+cause+of+low+back+pain%5BTitle%5D)+AND+%22European+Spine+Journal%22%5BJournal%5D)">The myth of lumbar instability: the importance of abnormal loading as a cause of low back pain.</a> European Spine Journal. 17 (5), 619-625 (2008).</li>
<li>Bian, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanosignaling+activation+of+TGF%CE%B2+maintains+intervertebral+disc+homeostasis%5BTitle%5D)+AND+%22Bone+Research%22%5BJournal%5D)">Mechanosignaling activation of TGFβ maintains intervertebral disc homeostasis.</a> Bone Research. 5, 17008(2017).</li>
<li>Bian, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Excessive+activation+of+tgf%CE%B2+by+spinal+instability+causes+vertebral+endplate+sclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Excessive activation of tgfβ by spinal instability causes vertebral endplate sclerosis.</a> Scientific Reports. 6, 27093(2016).</li>
<li>Ni, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensory+innervation+in+porous+endplates+by+Netrin-1+from+osteoclasts+mediates+PGE2-induced+spinal+hypersensitivity+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Sensory innervation in porous endplates by Netrin-1 from osteoclasts mediates PGE2-induced spinal hypersensitivity in mice.</a> Nature Communications. 10 (1), 5643(2019).</li>
<li>Liu, S., Cheng, Y., Tan, Y., Dong, J., Bian, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ligustrazine+prevents+intervertebral+disc+degeneration+via+suppression+of+aberrant+tgf%CE%B2+activation+in+nucleus+pulposus+cells%5BTitle%5D)+AND+%22BioMed+Research+International%22%5BJournal%5D)">Ligustrazine prevents intervertebral disc degeneration via suppression of aberrant tgfβ activation in nucleus pulposus cells.</a> BioMed Research International. 2019, 5601734(2019).</li>
<li>Boos, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Classification+of+age-related+changes+in+lumbar+intervertebral+discs%3A+2002+Volvo+Award+in+basic+science%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">Classification of age-related changes in lumbar intervertebral discs: 2002 Volvo Award in basic science.</a> Spine. 27 (23), 2631-2644 (2002).</li>
<li>Miyamoto, S., Yonenobu, K., Ono, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+cervical+spondylosis+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Spine%22%5BJournal%5D)">Experimental cervical spondylosis in the mouse.</a> Spine. 16, 10 Suppl 495-500 (1991).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets bekend te maken.

We ontwikkelden het lumbale wervelkolominstabiliteitsmuismodel op basis van het cervicale spondylosemuismodel waarbij de achterste paravertebrale spieren van de wervels werden losgemaakt en de spineuze processen samen met de supraspinous en interspinous ligamenten werden gereseceerd25. We voerden een vergelijkbare operatie uit op de lumbale wervelkolom, die meer prominente spineuze processen heeft. Het LSI-muismodel ontwikkelde vergelijkbare IDD in de lumbale wervelkolom.
<p class="jove_conten...

Tussenwervelschijfdegeneratie (IDD) wordt vaak gezien bij veroudering en zelfs jongeren veroorzaakt door vele factoren1. Chirurgie voor patiënten die lijden aan IDD, die lage rugpijn en verminderde beweging veroorzaken, wordt meestal in een later stadium of in ernstige gevallen uitgevoerd en heeft potentiële risico's zoals nonunion of infectie2. Ideale niet-operatieve behandeling vereist een uitgebreid begrip van het IDD-mechanisme. Het IDD-diermodel dient als een cruciaal instrument voor studies van het IDD-mechanisme en de evaluatie van IDD-behandeling.
Grotere dieren zijn gekozen voor IDD-modellen zoals primaten, schapen, geiten, honden en konijnen vanwege hun gelijkenis met de menselijke anatomische structuur in grote mate en de sterke bedienbaarheid in termen van grootte van tussenwervelschijven (IVD's)3,4,5,6,7,8. Deze diermodellen zijn echter tijdrovend en kostenintensief9. Muis IVD is een slechte weergave van de menselijke IVD op basis van geometrische metingen van de beeldverhouding, nucleus pulposus tot schijfgebiedsverhouding en genormaliseerde hoogte10. Ondanks het verschil in grootte vertoont het IVD-segment van de muis lumbale mechanische eigenschappen die vergelijkbaar zijn met menselijke IVD, zoals compressie en torsiestijfheid11. Bovendien heeft het muis-IDD-model het voordeel van lage kosten, relatief korte IDD-ontwikkeling en meer opties voor genetisch gemodificeerde dieren en antilichamen die worden gebruikt in verdere mechanistische studies12,13,14,15.
Experimenteel geïnduceerde IDD-modellen verschillen van de inductoren en toepassingen. Collageenase-geïnduceerde extracellulaire matrix (ECM) degeneratie is bijvoorbeeld geschikt voor ECM regeneratie onderzoek16. Genetisch gemodificeerd fenotype is geschikt voor het bestuderen van de genfunctie in het IDD-proces en in genetische therapieën17. Annulus fibrosus incisie- en rookmodellen bootsen trauma en niet-ontsteking geïnduceerde IDD12,18na .
Spinale instabiliteit (SI) leidt tot een onstabiele wervelkolom die zich niet in een optimale evenwichtstoestand bevindt. Het kan worden veroorzaakt door abnormale beweging van een lumbaal bewegingssegment als gevolg van de zwakte van het omliggende ondersteunende weefsel zoals ligamenten en spieren. Het wordt ook vaak gezien na spinale fusie operatie19. SI wordt beschouwd als de belangrijkste oorzaak van IDD. Daarom streven we ernaar om een SI-muizenmodel te ontwikkelen (gericht op lumbale wervelkolom) dat het menselijke IDD-procesnabootst 20,21.
In het protocol introduceerden we de procedure voor het vaststellen van lumbale spinale instabiliteit (LSI) muismodel door de resectie van lumbale derde (L3) naar lumbale vijfde (L5) spineuze processen samen met de supraspinous en interspinous ligamenten (Figuur 1A,B). Het diermodel ontwikkelt IDD al 1 week na de operatie, zoals blijkt uit hypertrofie en porositeit in eindplaten (EP's). IVD-volume begint 2 weken na de operatie te dalen tot 16 weken, samen met een verhoogde IVD-score, wat de mate van IDD aangeeft. Wij zijn van mening dat de gedetailleerde en gevisualiseerde procedure nuttig is voor onderzoekers om het LSI-muismodel in hun laboratorium vast te stellen en indien nodig toe te passen op IDD-onderzoek.

<table><tbody><tr><td>Chlortetracycline Hydrochloride Eye Ointment</td><td>Shanghai General Pharmaceutical Co., Ltd.</td><td>H31021931</td><td>Voorkom droge ogen, Voorkom wondinfectie</td></tr><tr><td>C57BL/6J mannelijke muizen</td><td>Tian-jiang Pharmaceuticals Company (Jiangsu, CN)</td><td>SCXK2018-0004</td><td>Diermodel</td></tr><tr><td>Medische wegwerphanddoek</td><td>Henan Huayu Medical Devices Co., Ltd.</td><td>20160090</td><td>Platform voor chirurgische operatie</td></tr><tr><td>Inhalatieanesthesiegereedschap</td><td>MIDMARK</td><td>Matrx 3000</td><td>Anesthesie</td></tr><tr><td>Isofluraan</td><td>Shenzhen RWD Life Technology Co., Ltd.</td><td>1903715</td><td>Anesthesie</td></tr><tr><td>Lidocaïnehydrochloride</td><td>Shandong Hualu Pharmaceutical Co., Ltd.</td><td>H37022839</td><td>Pijnverlichting</td></tr><tr><td>Medische hechtnaald</td><td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd.</td><td>20S0401J</td><td>Huid hechten</td></tr><tr><td>Oogheelkundige pincet</td><td>Shanghai Medical Devices (Group) Co., Ltd. Surgical Instruments Factory</td><td>JD1050</td><td>De huid klemmen</td></tr><tr><td>Oogheelkundige schaar(10cm)</td><td>Shanghai Medical Devices (Group) Co., Ltd. Surgical Instruments Factory</td><td>Y00030</td><td>Huidincisie</td></tr><tr><td>Zijde gevlochten</td><td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd.</td><td>11V0820</td><td>Huid hechten</td></tr><tr><td>Trimmer voor kleine dieren</td><td>Shanghai Feike Electric Co., Ltd.</td><td>FC5910</td><td>Haarverwijdering</td></tr><tr><td>Steriele chirurgische klingen(12#)</td><td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd.</td><td>35T0707</td><td>Spier incisie</td></tr><tr><td>Veet haarverwijderingscrème</td><td>RECKITT BENCKISER (India) Ltd</td><td>NA</td><td>Haarverwijdering</td></tr><tr><td>Venus-schaar</td><td>Mingren medisch apparatuur</td><td>Lengte:12,5cm</td><td>De spier en doornuitsteeksel klemmen</td></tr></tbody></table>

een muismodel van lumbale wervelkolominstabiliteit

A Mouse Model of Lumbar Spine Instability

Tussenwervelschijfdegeneratie (IDD) is een veel voorkomende pathologische verandering die leidt tot lage rugpijn. Geschikte diermodellen zijn gewenst voor het begrijpen van de pathologische processen en het evalueren van nieuwe geneesmiddelen. Hier introduceerden we een chirurgisch geïnduceerd LSI-muismodel (Lumbar Spine Instability) dat IDD ontwikkelt vanaf 1 week na de operatie. In detail werd de muis onder narcose geopereerd door lage rughuidincisie, L3-L5 spineuze processen blootstelling, loslating van paraspinous spieren, resectie van processen en ligamenten, en huidsluiting. L4–L5 IVD's werden gekozen voor de observatie. Het LSI-model ontwikkelt lumbale IDD door porositeit en hypertrofie in eindplaten in een vroeg stadium, afname van het tussenwervelschijfvolume, krimp in nucleus pulposus in een tussenstadium en botverlies in lumbale wervels (L5) in een later stadium. Het LSI-muismodel heeft de voordelen van sterke bedienbaarheid, geen behoefte aan speciale apparatuur, reproduceerbaarheid, goedkoop en relatief korte periode van IDD-ontwikkeling. LSI-operatie is echter nog steeds een trauma dat ontsteking veroorzaakt binnen de eerste week na de operatie. Dit diermodel is dus geschikt voor studie van lumbale IDD.

Het LSI-muismodel wordt toegepast in de studies van IDD-mechanisme, IDD-behandeling, endplate (EP) degeneratie zoals sclerose en sensorische innervatie in EP20,21,22,23. De LSI-muis ontwikkelt IDD- en EP-degeneratieve veranderingen, zoals geïdentificeerd, door verminderd IVD-volume en -hoogte, verhoogd EP-volume en verhoogde IVD- en EP-scores.
De ontleedde en vaste o...

We ontwikkelden een lumbaal tussenwervelschijfdegeneratiemuismodel door resectie van L3-L5 spineuze processen samen met supra- en inter-spineuze ligamenten en loslating van paraspinous spieren.

Een muismodel van lumbale wervelkolominstabiliteit

Intervertebral disc degeneration (IDD) is a common pathological change leading to low back pain. Appropriate animal models are desired for understanding ...

Dit is een operatie om het muismodel te induceren biedt een alternatief voor lumbale tussenwervelschijfdegeneratie gerelateerde studies. Deze robuuste LSI-modus vereist geen speciale apparatuur. Het is reproduceerbaar en het kan worden gebruikt om de tussenwervelschijfdegeneratie in een relatief korte tijd te induceren.Het beheersen van de incisiediepten en de bloeding en het uitvoeren voor resectie van elk interspinous proces zijn twee belangrijke kosten voor implantatie van ons succes voor experiment. Na het bevestigen van een gebrek aan reactie op pedaalreflex, plaatst u een verdoofde acht weken oude, mannelijke, C57 zwarte zes muis op een chirurgisch kussen in de liggende positie en breng zalf aan op de ogen van het dier. Gebruik een kleine dierentrimmer om het operatiegebied van het onderste thoracale gebied naar de bovenkant van het sacrale gebied te scheren en verwijder de geschoren vacht met tissuedoekjes.Breng ontharingscrème aan op het geschoren gebied met behulp van gaas om de crème na niet meer dan drie minuten te verwijderen en spoel de blootgestelde huid met twee milliliter steriele zoutoplossing van 0,9. Plaats vervolgens een op maat gemaakt chirurgisch cilindrisch kussen onder de buik om de lumbale wervelkolom op te heffen. Om de L3- en L5-wervels bloot te stellen, gebruikt u de wijsvinger om de onderhuidse spineuze processen van de lumbale wervels en palpate aan te raken om de processen te vergelijken met die van de thoracale wervels en sacrale wervels om het lumbale gebied te identificeren.Spoel de huid af met 75% alcohol en gebruik met behulp van een ontleedmicroscoop een scalpel om een drie tot vier centimeter middellijnige huidincisie over het lumbale gebied te maken van het midden thoracale gebied tot de heup. Identificeer de lumbale wervelkolom door de V-vorm van de posterieure fascia die in de punt is ingebracht, zodat de spineuze processen en gebruik de scalpel om ondiepe posterieure paraspinous spierincisies te maken langs de spineuze processen van L3 tot L5 lateraal aan beide zijden van de wervelkolom. Gebruik vervolgens twee paar oogheelkundige tangen om de spierlagen te scheiden om de L3 aan L5 spineuze processen en supraspinous ligamenten bloot te stellen.Om individuele spineuze processen te scheiden, gebruikt u veneuze sheers om interspinous ligamenten af te snijden en de L3 tot L5 spineuze processen en interspinous ligamenten te reseceren. Gebruik vervolgens steriele nummer vijf zijde gevlochten hechtingen om de huidincisie te sluiten zonder de paravertebrale spieren opnieuw te bevestigen en chloortetracycline hydrochloridezalf op de chirurgische plaats aan te brengen. 3D histomorfometrische analyse maakt intervertebrale schijfmeting mogelijk, terwijl 3D-structurele analyse kwantificering van het totale weefselvolume mogelijk maakt.Het tussenwervelschijfvolume neemt een week na de operatie aanzienlijk toe voordat het twee tot 16 weken na de ingreep afneemt, wat overeenkomt met een afname van de tussenwervelschijfhoogte gemeten over dezelfde periode. Verhoogde holtes in de craniale eindplaten worden ook waargenomen bij LSI-muizen, zoals gekwantificeerd door een verhoogd percentage trabeculaire scheidingswaarden groter of gelijk aan 0,089 en een significante toename van de eindplaatvolumes na de operatie. Modeleindplaten vertonen een vergelijkbaar fenotype, wat aangeeft dat LSI leidt tot hypertrofie van de eindplaat en een toename van het aantal holtes.L5-wervelvolumes nemen na de operatie licht toe met statistische verschillen waargenomen na 16 weken. Een significante daling van de bot-totale weefselvolumeverhouding is ook aanwezig 16 weken na de operatie, wat aangeeft dat LSI in een later stadium wervelbotverlies veroorzaakt. Een vermindering van intracellulaire vacuolen van nucleus pulposuscellen wordt ook versneld bij LSI-dieren met een verhoogd aantal osteoclasten waargenomen in LSI-eindplaten.Dit model kan worden gewijzigd door verschillende wervels te bevestigen, zoals alleen het vijfde lumbaal, of van het eerste lumbale naar het vijfde lumbale.

a-mouse-model-of-lumbar-spine-instability

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

Een longitudinaal onderzoek van botverlies in het dijbeen en de tibiae van volwassen muizen werd uitgevoerd na een dwarslaesie met behulp van sequentiële lage dosis X-ray scans. Tibia botverlies werd ontdekt gedurende de studie, terwijl het botverlies in het dijbeen werd pas ontdekt 40 dagen na letsel.

Longitudinale Evaluatie van de muis Hind Limb botverlies na ruggenmergletsel met behulp van nieuwe, In vivo Methodologie

In this video, we describe the surgical procedure to induce lumbar spine instability in a mouse model by resecting the Lumbar L3 to L5 spinous process along with supraspinous and interspinous ligaments.

Surgical Induction of Lumbar Spine Instability in Mouse Model: A Surgical Procedure for the Resection of the Lumbar Spinous Processes and Connected Ligaments in Murine Model

Source: Kumar, S., et. al. Mouse Model of Pressure Ulcers After Spinal Cord Injury. J. Vis. Exp. (2019)This video demonstrates a detailed induction of spinal cord injury in mice. The anesthetized mouse is dissected to expose T9-T10 vertebrae, and their spinous processes are removed. The exposed spinal cord is then transected to inflict the injury. The surgical area is then closed, and the mouse is allowed to recover.

Generating a Mouse Model with a Spinal Cord Injury

Een nieuwe techniek om een ​​reproduceerbare...

Gecontroleerde Cervicale Laceration Letsel in Muizen

Dit artikel beschrijft een methode voor het genereren van een reproduceerbare spinale cord compressie letsel (SCI) in de neonatale muis. Het model biedt een voordelige platform voor het bestuderen van mechanismen van adaptieve plasticiteit die ten grondslag liggen aan spontane functionele herstel.

Een Neonatale Mouse Spinal Cord Injury Compressie Model

Wij introduceren een weefselverplaatsingsgebaseerd contusief ruggenmergbeseringsmodel dat een consequente contusieve ruggengraatbesering in volwassen muizen kan veroorzaken.

Een Weefselverplaatsing-gebaseerde Contusive Spinal Cord Injury Model in Muizen

Het protocol beschrijft een nieuw in vivo muismodel van spinale implantaatinfectie waarbij een roestvrijstalen k-draadimplantaat is geïnfecteerd met bioluminescente Staphylococcus aureus Xen36. De bacteriële belasting wordt longitudinaal gemonitord met bioluminescente beeldvorming en bevestigd met kolonievormende eenheidstellingen na euthanasie.

In vivo muismodel van spinale implantaatinfectie

Het enkel-subtalair complex gewricht (ASCJ) is de kern van de voet en speelt een sleutelrol bij evenwichtscontrole bij dagelijkse activiteiten. Sportblessures leiden vaak tot instabiliteit in dit gewricht. Hier beschrijven we een muismodel van door ligamenten geïnduceerde instabiliteit van de ASCJ.

Een muismodel van enkel-subtalaire gewrichtsinstabiliteit

Minimaal invasieve technieken en een eenvoudig laboratoriumapparaat verbeteren de reproduceerbaarheid van het ruggenmergletselmodel door operatieve schade aan de proefdieren te verminderen en anatomisch morfologisch onderhoud mogelijk te maken. De methode is de moeite waard omdat de betrouwbare resultaten en reproduceerbare procedure het onderzoek naar de mechanismen van ziekteherstel vergemakkelijken.

Het opzetten van een muiskneuzingsletselmodel op basis van een minimaal invasieve techniek

In dit protocol worden twee benaderingen beschreven om uniaxiale compressietesten van lumbale wervels van muizen haalbaarder te maken. Eerst wordt de ombouw van een driepuntsbuigmachine naar een druktestmachine beschreven. Ten tweede wordt een inbeddingsmethode voor het voorbereiden van het laadoppervlak met behulp van botcement aangepast voor lendenwervels van muizen.

Muis lumbale wervel uniaxiale compressietesten met inbedding van het laadoppervlak

Hier wordt een nieuw geautomatiseerd apparaat voor kneuzing van ruggenmergletsel voor muizen gepresenteerd, dat nauwkeurig modellen voor dwarslaesie met verschillende gradaties kan produceren.

Geautomatiseerde impactor voor kneuzingsmodel voor dwarslaesie bij muizen

Leer een chirurgische methode om lumbale wervelkolominstabiliteit te induceren bij muizen. Dit reproduceerbare model met C57BL/6 muizen faciliteert onderzoek naar tussenwervelschijfdegeneratie zonder gespecialiseerde apparatuur.

Een muismodel van lumbale wervelkolominstabiliteit

Meer video's verkennen