Name: Acupunctuur in een Rattenmodel van Astma (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-08-25T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 14 s
Description: Leer acupunctuur toepassen bij een rattenmodel van astma met een hoog platform voor toegang tot dorsale acupunctuurpunten. Deze methode maakt niet-invasieve meting van ademhalingsfunctie mogelijk.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd ondersteund door de National Natural Science Foundation of China (nr. 81922076, 81973951, 81873373), Bouwproject van collaboratieve innovatie van Shanghai (nr. ZYJKFW201811010, ZYJKFW201701005).

Alle dierproeven werden beoordeeld en goedgekeurd door de Commissie ethiek van dierproeven van de Shanghai University of Traditional Chinese Medicine (ethisch klaringsnummer PZSHUTCM190308020).
1. Fabricage van het hoge platform
<ol><li>Stel de lengte en breedte van het steunapparaat in op 86 cm x 17 cm (afbeelding 1).</li>
	<li>Bevestig het verbindingsapparaat verticaal aan het ondersteuningsapparaat. Het verbindingsapparaat moet ongeveer 30 cm lang zijn om te voorkomen dat de rat naar het bovenoppervlak van het hoge platform loopt en een breedte van 14 cm heeft.</li>
	<li>Bevestig het horizontale pedaal (5 cm x 5 cm) aan het aansluitapparaat. De hangende hoogte aan de onderkant van het horizontale pedaal moet groter zijn dan of gelijk zijn aan 50 cm. OPMERKING: Afhankelijk van het aantal experimentele ratten kunnen meerdere horizontale pedalen worden gebruikt, waarbij één rat op elk pedaal wordt geplaatst.</li>
</ol>2. Vaststelling van een rattenmodel van astma
<ol><li>Sensibiliseren van de ratten met OVA<ol>
<li>Bereid de sensibilisatieoplossing voor op dag 0. Bereid elke 1 ml van de sensibilisatieoplossing met 1 mg OVA en 10 mg aluminiumhydroxide, met normale zoutoplossing als oplosmiddel.</li>
		<li>Injecteer elke rat intraperitonaal met 1 ml van de sensibilisatieoplossing op dag 0. Trek de sensibiliserende oplossing met een geschikte spuit voor later gebruik.</li>
		<li>Pak de staart en til de rat op, plaats hem op een ruw oppervlak en trek de staart voorzichtig naar achteren. Pak de huid van zowel oren als nek vast met de linkerduim en wijsvinger terwijl u de achterhuid stevig vasthoudt met de resterende drie vingers en handpalmen (wees voorzichtig om geen overtollige kracht toe te passen die de rat zal stikken).</li>
		<li>Voer met de rechterhand een intraperitoneale injectie bij de rat uit met de voorbereide spuit met 1 ml van de sensibilisatieoplossing.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Ratten uitdagen met OVA<ol>
<li>Selecteer een doos met een deksel (de lengte, breedte en hoogte zijn 39 cm x 28 cm x 23 cm) en boor een klein gaatje in de zijkant. Sluit de verzegelde doos, de vernevelbeker en de compressievernevelaar aan met een rubberen buis(aanvullende figuur 1). OPMERKING: De deeltjesgrootte van de samengeperste vernevelaar is 1 - 5 μm, de vernevelingssnelheid is groter dan 0,2 ml/min en de uiteindelijke druk is 205 kPa.</li>
		<li>Open op de 14e dag na sensibilisatie het deksel van de zelfgemaakte verzegelde doos en plaats de rat in de doos (de doos is geschikt voor 5 ratten) en plaats de verzegelde doos vervolgens in een bioveiligheidskast.</li>
		<li>Bereid de uitdagingsoplossing voor. Meng 300 mg OVA grondig met 30 ml normale zoutoplossing.</li>
		<li>Schakel de ultrasone vernevelaar in en voeg 30 ml van de uitdagingsoplossing toe aan de vernevelbeker. Pas de dosering van de uitdagingsoplossing en het aantal ratten aan op basis van het volume van de zelfgemaakte verzegelde doos.</li>
		<li>Herhaal verneveling meerdere keren (eenmaal per dag) of pas de procedure aan op basis van de ernst van astmasymptomen.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. Acupunctuur behandeling
<ol><li>Selecteer acupunten, waaronder GV14, bilaterale BL12 en bilaterale BL13, volgens de theorie van de traditionele Chinese geneeskunde voor de behandeling van astma (Aanvullend figuur 2). Beheer manuele acupunctuur op dag 2 en voer eens op de andere dag uit gedurende in totaal 7 sessies (Figuur 2).
	<ol>
<li>Acupunctuur de GV14 gelegen tussen de zevende halswervel en de eerste borstwervel (de holte van het schouderblad), op de middellijn van de rug (Figuur 3).</li>
		<li>Acupunctuur de BL13 bevindt zich onder de derde thoracale wervel, aan beide zijden van de intercostale ruimtes (onderrand van het schouderblad).</li>
		<li>Acupunctuur de BL12 gelegen onder de tweede thoracale wervel, aan beide zijden van de intercostale ruimten (onder het schouderblad, positie geïdentificeerd volgens BL13).</li>
	</ol>
</li>
	<li>Pak de ratten vast en plaats ze op het hoge platform.</li>
	<li>Houd de wegwerpnaald van roestvrij staal (0,3 mm x 13,0 mm, aanvullend figuur 3) vast met de duim en wijsvinger van de rechterhand en druk met de rechterhand op de achterkant van de rat. OPMERKING: Wegwerpnaalden mogen slechts eenmalig worden gebruikt. Omdat herhaald gebruik de naald zal stompen, wat leidt tot verhoogde pijn bij ratten.</li>
	<li>Raak de depressie aan in het midden van de bovenrand (GV14) of de onderrand van het schouderblad (BL12 en BL13) en prik vervolgens voorzichtig de huid van de rat met de naaldpunt om de acupunten te lokaliseren.</li>
	<li>Plaats de naald snel na het bepalen van de specifieke locatie van het acupunt en verwijder snel de rechterhand.</li>
	<li>Draai de naalden ongeveer 360° gelijkmatig met een snelheid van 60 keer / min gedurende 10 - 20 s, manipuleer ze elke 5 minuten en trek ze vervolgens na 20 - 30 minuten terug (Aanvullende figuur 4).</li>
</ol>4. De Penh-meting
<ol><li>Bereid methacholine voor: Doe 100 mg methacholine in een centrifugebuis van 5 ml en voeg PBS toe aan een volume van 2 ml (50 mg/ml methacholine). Verdun vervolgens de 50 mg/ml methacholineoplossing tot 25 mg/ml, 12,5 mg/ml, 6,25 mg/ml en 3,125 mg/ml.</li>
	<li>Instrumentinspectie<ol>
<li>Schakel de signaalversterker in (het aerosoldistributiesysteem en het knaagdier bias flow supply system zijn allemaal uitgeschakeld en de vernevelingsconnector is gesloten).</li>
		<li>Controleer de kanalen: Klik op Kalibreren,zet de grove instelbasislijn terug op 0 en schakel over naar de gelijkstroomstand (DC). Stem de uitgangswaarde af op 0 en injecteer 5 ml gas met een spuit. Schakel vervolgens over naar de wisselstroomstand (AC).</li>
		<li>Controleer na het controleren van de kanalen of de foutwaarde minder dan 0,5% is.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Parameters instellen<ol>
<li>Schakel het aerosoldistributiesysteem en het knaagdier bias flow supply system in. Stel het debiet in op 4,5 ml volgens het vloeistofniveau op de kwikbol.</li>
		<li>Klik op Studieopties maken en selecteer Dosisresponsstudie, selecteer Rat van soort en klik op Volgende.</li>
		<li>Selecteer Lijst met eenvoudige doses, stel het aantal doses in op 6 en klik op Volgende.</li>
		<li>Selecteer de penh- en gebiedsparameters: Stel de aanpassingstijd van het dier in op 5 minuten, de vernevelingstijd op 2 minuten, de responstijd op 3 minuten en de hersteltijd op 2 minuten.</li>
		<li>Voeg achtereenvolgens de volgende oplossingen toe aan de vernevelaar (200 μL per rat): methacholine (0 mg/ml, 3,125 mg/ml, 6,25 mg/ml, 12,5 mg/ml, 25 mg/ml en 50 mg/ml). Real-time veranderingen in Penh kunnen worden waargenomen (Figuur 4).</li>
		<li>Nadat alle 6 oplossingen met verschillende concentraties zijn gereageerd, klikt u op Bestand en Eindsessie om het experiment te voltooien.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Papi, A., Brightling, C., Pedersen, S. E., Reddel, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Asthma.</a> Lancet. 391 (10122), 783-800 (2018).</li>
<li>Global Initiative for Asthma, 2019. Global strategy for asthma management and prevention. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://ginasthma.org/gina-reports/">https://ginasthma.org/gina-reports/</a> (2019).</li>
<li>Enilari, O., Sinha, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Global+Impact+of+Asthma+in+Adult+Populations%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Global+Health%22%5BJournal%5D)">The Global Impact of Asthma in Adult Populations.</a> Annals of Global Health. 85 (1), (2019).</li>
<li>Global Initiative for Asthma, 2020. Global strategy for asthma management and prevention. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://ginasthma.org/gina-reports/">https://ginasthma.org/gina-reports/</a> (2020).</li>
<li>Zhuang, Y., Xing, J. J., Li, J., Zeng, B. Y., Liang, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((History+of+acupuncture+research%5BTitle%5D)+AND+%22International+Review+of+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">History of acupuncture research.</a> International Review of Neurobiology. 111, 1-23 (2013).</li>
<li>Yang, Y. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Considerations+for+use+of+acupuncture+as+supplemental+therapy+for+patients+with+allergic+asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Reviews+in+Allergy+%26+Immunology%22%5BJournal%5D)">Considerations for use of acupuncture as supplemental therapy for patients with allergic asthma.</a> Clinical Reviews in Allergy & Immunology. 44 (3), 254-261 (2013).</li>
<li>Nurwati, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduction+of+interleukin-17+level+by+acupuncture+at+Feishu+%28BL13%29+is+strengthened+by+acupuncture+at+Zusanli+%28ST36%29+in+a+mouse+model+of+chronic+asthma%3A+An+experimental+study%5BTitle%5D)+AND+%22Medical+Acupuncture%22%5BJournal%5D)">Reduction of interleukin-17 level by acupuncture at Feishu (BL13) is strengthened by acupuncture at Zusanli (ST36) in a mouse model of chronic asthma: An experimental study.</a> Medical Acupuncture. 27 (4), 278-282 (2015).</li>
<li>Nurwati, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improvement+in+inflammation+and+airway+remodelling+after+acupuncture+at+BL13+and+ST36+in+a+mouse+model+of+chronic+asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Acupuncture+in+Medicine%22%5BJournal%5D)">Improvement in inflammation and airway remodelling after acupuncture at BL13 and ST36 in a mouse model of chronic asthma.</a> Acupuncture in Medicine. 37 (4), 228-236 (2019).</li>
<li>Reddy, A. T., Lakshmi, S. P., Reddy, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+model+of+allergen+induced+asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Murine model of allergen induced asthma.</a> Journal of Visualized Experiments. (63), e3771(2012).</li>
<li>Zhou, D. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metallothionein-2+is+associated+with+the+amelioration+of+asthmatic+pulmonary+function+by+acupuncture+through+protein+phosphorylation%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedicine+%26+Pharmacotherapy%22%5BJournal%5D)">Metallothionein-2 is associated with the amelioration of asthmatic pulmonary function by acupuncture through protein phosphorylation.</a> Biomedicine & Pharmacotherapy. 123, 109785(2020).</li>
<li>Yin, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transgelin-2+as+a+therapeutic+target+for+asthmatic+pulmonary+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Transgelin-2 as a therapeutic target for asthmatic pulmonary resistance.</a> Science Translational Medicine. 10 (427), (2018).</li>
<li>Shin, Y. S., Takeda, K., Gelfand, E. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Understanding+asthma+using+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Allergy+Asthma+%26+Immunology+Research%22%5BJournal%5D)">Understanding asthma using animal models.</a> Allergy Asthma & Immunology Research. 1 (1), 10-18 (2009).</li>
<li>Cui, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electro-acupuncture+relieves+chronic+visceral+hyperalgesia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">Electro-acupuncture relieves chronic visceral hyperalgesia in rats.</a> Neuroscience Letters. 376 (1), 20-23 (2005).</li>
<li>Tobin, J. R., Martin, L. D., Breslow, M. J., Traystman, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+anesthetic+inhibition+of+brain+nitric+oxide+synthase%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Selective anesthetic inhibition of brain nitric oxide synthase.</a> Anesthesiology. 81 (5), 1264-1269 (1994).</li>
<li>Dimitrov, N., Sivrev, D., Atanasova, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+of+rat+immobilization+during+experimental+acupuncture%5BTitle%5D)+AND+%22Scripta+Scientifica+Medica%22%5BJournal%5D)">Method of rat immobilization during experimental acupuncture.</a> Scripta Scientifica Medica. 45, 105-108 (2013).</li>
<li>Aguilar, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((emotional+reactivity+and+fear+of+heights%3A+a+factor+analytic+map+from+a+large+F%282%29+intercross+of+Roman+rat+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Bulletin%22%5BJournal%5D)">emotional reactivity and fear of heights: a factor analytic map from a large F(2) intercross of Roman rat strains.</a> Brain Research Bulletin. 57 (2), 17-26 (2002).</li>
<li>Lai, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proteomic+response+to+acupuncture+treatment+in+spontaneously+hypertensive+rats%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Proteomic response to acupuncture treatment in spontaneously hypertensive rats.</a> PloS One. 7 (9), 44216(2012).</li>
<li>Niu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+uni-acupoint+electroacupuncture+stimulation+method+for+pain+relief%5BTitle%5D)+AND+%22Evidence-Based+Complementary+and+Alternative+Medicine%22%5BJournal%5D)">A novel uni-acupoint electroacupuncture stimulation method for pain relief.</a> Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2011, 209879(2011).</li>
<li>McFadden, E. R., Luparello, T., Lyons, H. A., Bleecker, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mechanism+of+action+of+suggestion+in+the+induction+of+acute+asthma+attacks%5BTitle%5D)+AND+%22Psychosomatic+Medicine%22%5BJournal%5D)">The mechanism of action of suggestion in the induction of acute asthma attacks.</a> Psychosomatic Medicine. 31 (2), 134-143 (1969).</li>
<li>Savov, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ozone-induced+acute+pulmonary+injury+in+inbred+mouse+strains%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Respiratory+Cell+and+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Ozone-induced acute pulmonary injury in inbred mouse strains.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 31 (1), 69-77 (2004).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets bekend te maken.

De GV14, bilaterale BL12 en bilaterale BL13 acupoints die in deze studie worden gebruikt, bevinden zich aan de achterkant, en dus is het hoge platform geschikt voor het fixeren van ratten. In andere studies moet een adequate fixatiemethode worden gekozen op basis van de positie van de acupunten15. Voor acupunten op de buik kan de rat naar beneden worden geplaatst in een zwarte kegel (vergelijkbaar met een gebakzak die door bakkers wordt gebruikt)17. Een ketting is bevestigd...

Astma is een chronische ziekte die wordt gekenmerkt door bronchoconstrictie en hyperresponsiviteit van de luchtwegen1. Wereldwijd worden ongeveer 339,4 miljoen mensen gediagnosticeerd met astma2. De prevalentie van astma neemt wereldwijd toe, met 100 miljoen nieuwe gevallen verwacht in het komende decennium3. Inhalatiecorticosteroïden en langwerkende β2-agonisten beheersen de symptomen van alle patiënten niet effectief4. Daarom heeft het gebruik van alternatieve therapieën zoals acupunctuur voor de behandeling van astma meer aandachtgekregen 5. Een effectieve methode voor de behandeling van astma is naald GV14 (Dazhui), bilaterale BL12 (Fengmen) en bilaterale BL13 (Feishu)6. Acupunctuur vermindert aanzienlijk de niveaus van secretoire immunoglobuline A (SIgA) in het speeksel en neusafscheidingen van patiënten met allergisch astma en vermindert het aantal eosinofielen in het perifere bloed met een totale effectieve snelheid van 85%6. Acupunctuur bij BL13 en ST36 (Zusanli) bij muizen met chronisch astma verlaagt het niveau van IL-17 met 40% en vermindert de gladde spierdikte met 33% in vergelijking met die van de ovalbumine (OVA) groep, waardoor ontstekingsverschijnselen7,8worden verlicht . Het mechanisme van acupunctuurbehandeling voor astma is echter niet helemaal duidelijk.
Diermodellen zijn een belangrijk hulpmiddel voor astmaonderzoek9 omdat het diermodel kan worden gebruikt voor de continue meting van de ademhalingsfunctie om de effectiviteit van de astmabehandeling te beoordelen10. Ondertussen vereisen studies van de pathofysiologie van astma testmonsters, waaronder monsters van de luchtpijp, long en bronchoalveolaire lavage om veranderingen in de niveaus van belangrijke factoren te verifiëren11. Rattenmodellen van astma worden vaak gebruikt om astmapathofysiologie te beoordelen omdat ze langdurige luchtwegreacties produceren en onmiddellijke en late luchtwegreacties vertonen12. Door herhaalde experimentele stimulatie worden de ratten echter vaak prikkelbaar. Daarom is een geschikte methode nodig om ratten te repareren. Veelgebruikte methoden voor rattenfixatie zijn anesthesie en binding13. Hoewel de anesthesiemethode zorgt voor een betere blootstelling van de acupunten, kan het de zenuwgeleiding beïnvloeden en uiteindelijk de experimentele resultaten beïnvloeden14. De bindmethode induceert niet dezelfde fysiologische effecten als anesthesie, maar ingehouden ratten zullen skeletspierspanning ervaren. Ook kan de naald niet gemakkelijk de aangegeven positie bereiken15. Hier introduceren we een hoog platform dat kan worden gebruikt om ratten te repareren zonder ze te beperken en de acupunten op de rug volledig bloot te leggen. De ratten kunnen tijdens de toediening van acupunctuur op het hoge platform worden geplaatst. Het hoge platform is alleen geschikt voor de rat terwijl hij staat, en omdat hij op een bepaalde afstand van de grond wordt geplaatst, zullen de ratten niet bewegen vanwege hoogtevrees16.
Dit artikel beschrijft in detail de fabricage van het hoge platform, de vaststelling van een rattenmodel van astma, de werking van het needling van een rat op het hoge platform en de meting van de ademhalingsfunctie met behulp van een whole-body plethysmography (WBP) systeem.

<table><tbody><tr><td>0.3 mm x 13.0 mm acupuncturnaald</td><td>China Suzhou Medical Device Factory</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Al(OH)3</td><td>American Thermo</td><td>77161</td><td></td></tr><tr><td>Compressie-nevelmachine</td><td>Jiangsu Lude Medical Electronics Co., Ltd.</td><td>NB-212C</td><td></td></tr><tr><td>Fine Pointe V2.0</td><td>American Buxco</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Laboratoriumgasdroogunit</td><td>American Drierite</td><td>26800</td><td></td></tr><tr><td>Methacholine</td><td>American Sigma</td><td>MKCF6054</td><td></td></tr><tr><td>Ovalbumine</td><td>American Sigma</td><td>A5503-25G</td><td></td></tr><tr><td>Fosfaatbufferoplossing (1x)</td><td>Gelifesciences</td><td>SH30256.01</td><td></td></tr><tr><td>Seal box</td><td>IRIS Corporation of Japan</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Geheel lichaamsplethysmografie ademhalingsfunctie meetsysteem</td><td>American Buxco</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

acupunctuur in een rattenmodel van astma

Acupuncture in a Rat Model of Asthma

Een hoog platform kan ratten zonder beperking repareren en de acupunten op de rug volledig blootleggen tijdens acupunctuurmanipulatie. Dit artikel beschrijft methoden voor de fabricage van het hoge platform, stelt een rattenmodel van astma vast en meet veranderingen in de ademhalingsfunctie met behulp van een niet-invasief en real-time plethysmografiesysteem voor het hele lichaam (WBP).

Met acupunctuur op de GV14, bilaterale BL12 en bilaterale BL13 punten behoudt de rat een gevoelige positie. De rat kan zijn kop alleen naar buiten draaien en niet naar binnen omdat één richting is geblokkeerd met een houten plank (figuur 5).
Naarmate de methacholineconcentratie toenam, vertoont Penh een stijgende trend en neemt de groei geleidelijk toe. Bij concentraties van 3,125 mg/ml, 6,25 mg/ml, 12,5 mg/ml, 25 mg/ml en 50 mg/ml, Penh steeg met 18,40% ± 10,70%,...

Acupunctuur in een Rattenmodel van Astma

A high platform can fix rats without restriction and completely expose the acupoints on the back during acupuncture manipulation. This article describes ...

Acupunctuur is een effectieve methode voor de behandeling van astma. Hoewel de onderliggende mechanismen niet duidelijk zijn. Dit protocol bootst acupunctuur in de kliniek na om deze mechanica in een diermodel te bestuderen.Het grote voordeel van deze techniek is dat de hoge platform kan worden gebruikt om de ratten te fixeren zonder beperkingen, waardoor de dorsale acupunctuurpunten volledig kunnen worden blootgesteld. Beginners moeten basisvaardigheden hebben in het hanteren van ratten en moeten oefenen met het inbrengen van de acupunctuurnaalden in een stuk karton voordat ze proberen de dieren te behandelen. Visualisatie van de techniek zal beginners helpen om vertrouwd te raken met de vaardigheden die nodig zijn om het experiment met succes uit te voeren.De lengte en breedte van het ondersteunende apparaat moeten 86 bij 17 centimeter zijn. Bevestig verticaal een 30 centimeter lang en 14 centimeter breed verbindingsapparaat aan het ondersteunende apparaat en bevestig een vijf bij vijf centimeter horizontaal pedaal aan het verbindingsapparaat. De ophanghoogte aan de onderkant van het horizontale pedaal moet groter zijn of gelijk zijn aan 50 centimeter.Voor OVA-sensibilisatie, pak en til de staart van een volwassen rat op en plaats het dier op een ruw oppervlak terwijl je voorzichtig aan de staart trekt. Pak de huid van beide oren en nek stevig maar voorzichtig met de linkerduim en wijsvinger vast, houd de huid van de rug stevig vast met de overige drie vingers en de palm en gebruik de rechterhand om een milliliter vers bereide sensibilisatie-oplossing intraperitoneaal in de buik van de rat te injecteren. Op de 14e dag na sensibilisatie, boor een klein gaatje in de zijkant van een doos van 39 bij 28 bij 23 centimeter en gebruik een rubberen buis om de doos aan te sluiten op een vernevelaarbeker en compressievernevelaar.Plaats de rat in de doos en plaats de doos in een bioveiligheidskast. Schakel de ultrasone vernevelaar in en laad 30 milliliter vers bereide 300 milligram OVA in zoutoplossing voor uitdaging in de vernevelaarbeker. De vernevelaar kan meerdere keren op één dag worden herhaald of volgens de ernst van de te induceren astmasymptomen.Voor acupunctuurbehandeling van het astmatische dier, selecteer acupunctuurpunten, waaronder GV 14, bilaterale BL 12 en bilaterale BL 13, volgens de theorie van de traditionele Chinese geneeskunde voor de behandeling van astma, en voer handmatige acupunctuur uit op de tweede dag en elke andere dag voor een totaal van zeven sessies na het vaststellen van astma. Voor het plaatsen van de naald, breng de rat over naar het hoge platform en grijpt het handvat van een wegwerpnaald van roestvrij staal met de duim en wijsvinger van de dominante hand vast, druk stevig met de handpalm van de hand op de rug van de rat. Voor het plaatsen van de GV 14-naald, raak de kuil in het midden van de bovenrand van het schouderblad tussen de zevende halswervel en de eerste borstwervel op de middellijn van de rug aan en prik de huid voorzichtig met het naaldpunt om het acupunctuurpunt te lokaliseren.Steek vervolgens snel de naald in en verwijder snel de rechterhand ter plaatse. Plaats de BL 13-naalden onder de derde borstwervel aan beide zijden van de intercostale ruimtes en plaats de BL 12-naalden onder de tweede borstwervel aan beide zijden van de intercostale ruimtes zoals gedemonstreerd. Wanneer alle naalden zijn geplaatst, draai elke naald 360 graden, 60 keer gedurende een periode van 10 tot 20 seconden, elke vijf minuten gedurende 20 tot 30 minuten voordat de naalden worden verwijderd.Om Penh te meten bij de met acupunctuur behandelde dieren. Schakel eerst de signaalversterker in en klik op kalibreren om de grove aanpassingsbasislijn naar nul terug te brengen. Schakel over naar de gelijkstroompositie en stel de basislijn fijn af op nul.Gebruik een spuit om vijf milliliter lucht te injecteren voordat je overschakelt naar de wisselstroompositie. Na het controleren van de kanalen, zorg ervoor dat de foutwaarde minder dan 0,5% is. Schakel vervolgens de aerosolverdeling en de toevoersystemen voor de voorkeur van knaagdieren in en stel de stroomsnelheid in op 4,5 milliliter volgens het vloeistofniveau op de kwikbal. Onder "Studieopties maken" voer de test voor de studie in en selecteer rat voor de soort.Bevestig dat de eenvoudige dosislijst is geselecteerd en stel het aantal doses in op zes. Om de Penh en gebiedparameters te selecteren, klikt u op volgende en stelt u de aanpassingstijd van het dier in op vijf minuten. De vernevelaartijd tot twee minuten, de responstijd tot drie minuten en de hersteltijd tot twee minuten.Voeg vervolgens 200 microliter van elke vers bereide concentratie methacholine in PBS achtereenvolgens toe aan de vernevelaar zoals aangegeven. Realtime veranderingen in Penh moeten worden waargenomen. Wanneer alle zes oplossingen met verschillende concentraties zijn afgeleverd en beoordeeld, klikt u op bestand en eindigt sessie.Met acupunctuur op de GV 14, bilaterale BL 12 en bilaterale BL 13 punten, houdt de rat een buikligging en kan het hoofd alleen naar buiten draaien, omdat één richting is geblokkeerd met een houten bord. Zoals geïllustreerd in de grafiek, neemt na inductie van astma, naarmate de methacholineconcentratie toeneemt, de Penh-concentratie toe, wat een geleidelijke toename van de groeisnelheid bevordert. Western blot en de realtime PCR kunnen ook worden gebruikt om een specifiek eiwit en een verandering na acupunctuurbehandeling te starten.Deze techniek kan onderzoekers helpen om specifieke veranderingen in sleutelfactoren en een signaalroute te onderzoeken na acupunctuurbehandeling van astma.

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Experimentele muismodellen van allergische astma bieden nieuwe mogelijkheden voor het bestuderen van de ziekte van pathogenese en het ontwikkelen van nieuwe therapeutica. Deze modellen zijn zeer geschikt voor het meten factoren die de allergische immuunrespons, ontsteking van de luchtwegen en longen pathofysiologie.

Muizenmodel van Allergen Induced Astma

Dit protocol presenteert een curatieve procedure van moxibustie bij de behandeling van patiënten met bronchiale astma.

Een kenmerkende therapie uit de traditionele Chinese geneeskunde voor bronchiale astma: moxibustie

Hier presenteren we een protocol voor efficiënte en snelle elektro-acupunctuur (EA) bij muizen of jonge ratten met behulp van een driedimensionale (3D) geprinte houder. Deze techniek maakt gelijktijdige bediening op meerdere dieren mogelijk, waardoor tijd wordt bespaard en de efficiëntie van de experimenten wordt verhoogd.

Bulk elektro-acupunctuuroperatie voor muizen of jonge ratten

Hier presenteren we een verbeterde fixatiemethode voor suspensie met behulp van een rattenjas om ratten effectief te immobiliseren tijdens acupunctuurexperimenten. Verder wordt de structuur en toepassing van dit fixatieapparaat, evenals instructies en evaluatie voor het gebruik ervan in elektro-acupunctuurtherapie, toegelicht.

Verbeterde fixatie van de suspensie met behulp van rattenjas in acupunctuurexperimenten bij ratten

Hier beschrijven we een protocol voor het implementeren van milde anesthesie- en acupunctuurbehandeling op een muismodel met chronische hypoxie en het uitvoeren van gedragstests om de cognitieve veranderingen na de behandeling te beoordelen.

Acupunctuurbehandeling in een muismodel van chronische hypoxie-geïnduceerde cognitieve disfunctie

Dit protocol beschrijft de procedure voor acupuntgraven en toont de effectiviteit ervan aan bij de behandeling van allergische rhinitis.

Acupoint Catgut-inbeddingstherapie in de traditionele Chinese geneeskunde voor de behandeling van allergische rhinitis

Bronchiale thermoplasty is een niet-drug procedure voor ernstig persistent astma dat de thermische energie naar de luchtwegen muur levert in een nauwkeurig gecontroleerde manier te verminderen overmatige luchtweg-gladde spier. Het verminderen van luchtweg-gladde spier vermindert het vermogen van de luchtwegen samentrekken, waardoor de frequentie van astma-aanvallen.

Bronchiale Thermoplasty: een nieuwe therapeutische aanpak van ernstige astma

De long is doorbloed door zowel de systemische bronchiale arterie en longslagaders. In de meeste long ziekten is de kleinere systemische vasculatuur die robuust neovascularisatie toont. Beëindiging van pulmonale bloedstroom bevordert stevige bronchiale angiogenese. Wij bieden chirurgische details van het induceren van linker longslagader ischemie dat bronchiale neovascularisatie bevordert.

Angiogenese in het ischemische Rat Lung

Een protocol voor chronische infusie van glucose en Intralipid bij ratten beschreven. Dit model kan worden gebruikt om het effect van nutriënten overmaat van orgaanfunctie en fysiologische parameters bestuderen.

Een model van Chronisch Nutrient Infusion in het Rat

Dit manuscript beschrijft een chirurgisch model bij ratten van pyelonefritis door directe intra-renale infectie met Escherichia coli in de nierbekken. De experimentele procedure kan worden gebruikt om de pathogenese van pyelonefritis te bestuderen, evenals de geassocieerde ontsteking en fibrose.

Intrarenale injectie van Escherichia coli In een Rat Model van Pyelonefritis

Leer acupunctuur toepassen bij een rattenmodel van astma met een hoog platform voor toegang tot dorsale acupunctuurpunten. Deze methode maakt niet-invasieve meting van ademhalingsfunctie mogelijk.

Acupunctuur in een Rattenmodel van Astma

Meer video's verkennen