Name: Maximale isometrische tetanische krachtmeting van de Tibialis-voorste spier in de rat (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-06-26T13:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 39 s
Description: Leer de isometrische tetanische krachtmeting van de Tibialis-voorste spier bij ratten. Deze gevalideerde methode beoordeelt motorisch herstel na ischiaszenuwletsel en standaardiseert functionele uitkomsten voor perifere zenuwreparatie.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Onderzoek dat in deze publicatie werd gerapporteerd, werd ondersteund door het National Institute of Neurological Disorders and Stroke van de National Institutes of Health onder awardnummer RO1 NS 102360. De inhoud valt uitsluitend onder de verantwoordelijkheid van de auteurs en vertegenwoordigt niet noodzakelijkerwijs de officiële opvattingen van de National Institutes of Health.

Alle dierprocedures werden uitgevoerd met goedkeuring van het Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC A334818).
1. Kalibratie van de krachtomvormer
<ol><li>Zorg ervoor dat de computer correct is aangesloten op het multifunctionele I/O-apparaat (DAQ) van de USB-6009, dat op zijn beurt moet worden aangesloten op de krachtomvormer. OPMERKING: Andere rattenstammen en soorten kunnen een andere load-cell force transducer nodig hebben, omdat hogere krachten te verwachten zijn 44.</li>
	<li>Bevestig een aangepaste klem van een gemodificeerde chirurgische hemostase aan de krachtomvormer die is gemonteerd op een vacuümvoet verstelbare hendelarm. OPMERKING: De op maat gemaakte klem bestaat uit een chirurgische hemostase die is aangepast met een aanhaalschroef die het mogelijk maakt de spanning aan te passen (figuur 1).</li>
	<li>Plaats het op maat gemaakte acrylglas testplatform, dat twee houten blokken bevat voor fixatie van de achterpoot van de rat, op de tafel. OPMERKING: Andere materialen zoals urethaan kunnen ook worden gebruikt in plaats van hout, zolang de K-draden kunnen doordringen en fixeren.</li>
	<li>Bevestig de klem, krachtomvormer en verstelbare hendelarmcombinatie verticaal aan het testplatform met behulp van de vacuümbasis.</li>
	<li>Bevestig een klittenband aan de klem voor de kalibratiegewichten.</li>
	<li>Schakel de computer in en open de software (bijv. LabVIEW).</li>
	<li>Zodra de software is geopend, start u het op maat gemaakte virtuele instrument (VI) voor ITF-meting (figuur 2). OPMERKING: Figuur 2 bevat de LabVIEW-code in een VI-fragment. Dit VI-fragment kan naar het blokdiagram in LabVIEW worden gesleept. Het wordt automatisch omgezet in een grafische code. Voor dit experiment werd de bemonsteringsfrequentie vastgesteld op 2000 Hz met 25 monsters die voor elke iteratie moesten worden afgelezen.</li>
	<li>Voer de VI uit door op de witte pijl in de linker bovenhoek te drukken en selecteer Nieuwe kalibratie. Er gaat een nieuw venster open.</li>
	<li>Start het kalibratieproces met nul gewicht (alleen de klem met een aangesloten klittenband) en druk op OK.</li>
	<li>Voeg achtereenvolgens 10, 20, 30 en 50 gram gewicht toe en druk op OK tussen elke gewichtsmeting.</li>
	<li>Zodra alle vijf de metingen zijn verzameld, klikt u op Verwerken.</li>
	<li>Accepteer de waarden alleen als de grafiek op de VI een positieve lineaire curve weergeeft (figuur 3).</li>
	<li>Plaats de klem, krachtomvormer en verstelbare hendelarmcombinatie horizontaal op het testplatform. Dit is de positie die wordt gebruikt voor het meten van de ITF.</li>
	<li>Klik op Nul en het venster wordt automatisch gesloten.</li>
</ol>2. Onderwerpen van dieren
<ol><li>Gebruik mannelijke Lewis ratten met een gewicht tussen 300-500 g. OPMERKING: Voor de vergelijking van zenuwregeneratie is het noodzakelijk om dezelfde rattenstam te gebruiken in zowel de controle- als experimentele groepen, omdat het gewicht en de incidentie van autotomie stamafhankelijk zijn en de resultaten van de ITF10,32,45,46,47enorm kunnen beïnvloeden .</li>
</ol>3. Chirurgische voorbereiding
<ol><li>Bereid alle vereiste chirurgische instrumenten voor voorafgaand aan de operatie (Tabel van materialen).</li>
	<li>Weeg de dieren om de vereiste hoeveelheid anesthesie te bepalen.</li>
	<li>Induceer anesthesie door de rat in een kamer te plaatsen die is vergast met 3% isofluraan in zuurstof.</li>
	<li>Verdoof de rat diep met behulp van een cocktail van tiendelig ketamine (100 mg/ml) en eendelig xylazine (100 mg/ml) in een dosering van 1 ml/kg lichaamsgewicht via een intraperitoneale injectie. Bewaak de diepte van de anesthesie op basis van de reactie op een teenknijp en door de ademhalingsfrequentie te observeren.</li>
	<li>Ongeveer 30 minuten na de initiële dosering van de ketamine/xylazinecocktail, een aanvullende dosis van 0,3-0,6 ml/kg lichaamsgewicht van alleen ketamine (100 mg/ml) intraperitoneaal toedienen om gedurende de hele procedure voldoende anesthesie te behouden, wat wordt gedefinieerd als een lage ademhalingsfrequentie en een afwezige reactie op een teensnuifje. LET OP: Het is belangrijk om de vereiste anesthesie zorgvuldig toe te dienen, omdat een overdosis niet kan worden tegengegaan.</li>
	<li>Scheer de achterpoten van de rat voorzichtig met behulp van elektrische tondeuses.</li>
	<li>Plaats de rat in een gevoelige positie op een verwarmingskussen om de lichaamstemperatuur op 37 °C te houden. Optioneel kan de lichaamstemperatuur worden gecontroleerd met behulp van een rectale thermometer.</li>
	<li>Injecteer 5 ml 0,9% natriumchloride (NaCl) subcutaan in de losse huid over de nek van de rat om een adequate hydratatiestatus gedurende de hele procedure te behouden.</li>
	<li>Vanwege het niet-overlevingskarakter van deze procedure hoeven het chirurgische veld en de instrumenten niet steriel te zijn. De chirurg moet persoonlijke beschermingsmiddelen (PBM) gebruiken en chirurgische loepen worden geadviseerd voor een goede visualisatie van de anatomische structuren.</li>
</ol>4. Chirurgische benadering van de gemeenschappelijke peroneale zenuw
<ol><li>Plaats de rat in de rechter- of linker laterale ligfietspositie, afhankelijk van welke kant als eerste wordt gemeten.</li>
	<li>Maak een incisie van 2-3 cm in de huid van de posterolaterale dij evenwijdig aan het dijbeen, beginnend bij de grotere trochanter met behulp van een chirurgisch nr. 15-mes.</li>
	<li>Identificeer het vlak tussen de biceps femoris spier en de gluteus maximus en vastus lateralis spieren en voer een stompe dissectie uit met behulp van een tenotomie schaar om deze spieren te scheiden en de onderliggende ischiaszenuw bloot te leggen.</li>
	<li>Lokaliseer de trifurcatie van de heupzenuw en plaats een oprolmechanisme om betere toegang te krijgen. De drie takken van de heupzenuw omvatten de gemeenschappelijke peroneale zenuw, de tibialiszenuw en de surale zenuw.</li>
	<li>Isoleer de gemeenschappelijke peroneale zenuwtak (meestal de meest ventrale tak) van de heupzenuw met behulp van een gebogen microchirurgische tang. OPMERKING: In geval van onzekerheid, stimuleer de geïsoleerde zenuw voorzichtig met een chirurgische zenuwstimulator en observeer de motorische reactie. Stimulatie van de gemeenschappelijke peroneale zenuw resulteert in dorsiflexie van de poot.</li>
</ol>5. Dissectie van de distale tibialis voorste spierpees
<ol><li>Om de TA-spier en het inbrengen ervan bloot te leggen, ingesneden de huid bij het voorste aspect van het onderbeen, beginnend bij het kniegewricht en afdalend naar de middelmatige kant van de achterpoot.</li>
	<li>Ontleed de distale TA spierpees uit het omliggende weefsel met behulp van een scalpel met een chirurgisch mes nr. 15.</li>
	<li>Ontleed met behulp van een muggendop de TA-spierpees botweg naar het inbrengen en snijd de pees zo distaal mogelijk. Laat de proximale TA-spier ongestoord, met behoud van de neurovasculaire pedikel. OPMERKING: Bevochtig regelmatig (ongeveer om de 5 minuten) de TA-spier met verwarmde 0,9% NaCl (37 °C) om koeling en uitdroging te voorkomen.</li>
</ol>6. Isometrische tetanische krachtmeting
<ol><li>Sluit de bipolaire elektrodekabels en de aardingskabel volgens hun kleur aan op een bipolair stimulatorapparaat.</li>
	<li>Bevestig het andere uiteinde van de bipolaire elektrodekabels aan een subminiatuurelektrode. OPMERKING: De referentie-elektrode (rood, anode) moet distaal worden geplaatst en de actieve elektrode (zwart, kathode) proximaal.</li>
	<li>Breng het dier samen met het verwarmingskussen over naar het testplatform.</li>
	<li>Fixeer de achterpoot van de rat aan het houten blok met behulp van twee 1 mm Kirschner-draden door de enkel en de laterale condyle van het distale dijbeen en vermijd het achterste aspect van de knie. LET OP: Vermijd vasculaire schade aan de popliteale slagader en ader die zich dorsaal op de dijbeencondyle bevinden.</li>
	<li>Bevestig een houder met een aangepaste klem aan het testplatform met behulp van de vacuümbasis.</li>
	<li>Bevestig de distale TA-spierpees aan de klem die aan de krachttransducer is bevestigd. OPMERKING: De klem en de krachttransducer moeten evenwijdig aan de loop van de TA-spier worden geplaatst.</li>
	<li>Plaats het oprolmechanisme op de posterolaterale dij van de rat om toegang te krijgen tot de gemeenschappelijke peroneale zenuw. OPMERKING: De heupzenuw en de takken moeten vochtig worden gehouden met verwarmde 0,9% NaCl (37 °C) om koeling en uitdroging te voorkomen.</li>
	<li>Steek de aardingskabel in de omliggende spieren (bijv. de vastus lateralis spier). OPMERKING: De Grass SD9 stimulator vereist een aardingskabel om elektrische artefacten te verminderen. Nieuwere stimulatoren hebben mogelijk geen extra aardingskabel nodig.</li>
	<li>Haak de gewone peroneale zenuw aan de subminiatuurelektrode en bevestig de positie met behulp van de houder op het platform (Afbeelding 4). OPMERKING: Zorg ervoor dat alleen de gewone peroneale zenuw is aangesloten op de subminiatuurelektrode.</li>
	<li>Optimalisatie van de spierlengte<ol>
<li>Schakel het bipolaire stimulatorapparaat in en pas de instellingen als volgt aan: vierkante monofasische puls, vertraging 2 ms, stimuluspulsduur 0,4 ms, stimulusintensiteit 2 V. OPMERKING: De vertraging bepaalt de tijd tussen de synchronisatiepuls en de levering van de voorrand van de puls.</li>
		<li>Selecteer Parametertest en schakel Triggerverzameling in de VI in.</li>
		<li>Verhoog de spierlengte (voorbelasting) door de hendelarm aan te passen die aan de krachtomvormer is bevestigd.</li>
		<li>Begin bij 10 g voorbelasting en gebruik stappen van 10 g totdat de maximale actieve spierkracht is bepaald.</li>
		<li>Breng voor elke voorbelasting twee enkele twitches direct na elkaar aan met behulp van de knop op het bipolaire stimulatorapparaat. De uitgang zal zichtbaar zijn op het scherm en de rat moet dorsiflexie van de poot laten zien. OPMERKING: Verwijder voor het stimuleren van de zenuw altijd overtollige 0,9% NaCl rond de zenuw met behulp van applicators met katoenen punt om ervoor te zorgen dat het signaal niet naar het omliggende weefsel wordt geleid.</li>
		<li>Om de meting te stoppen, klikt u nogmaals op Trigger collection in de VI.</li>
		<li>Als het programma automatisch de twee piekuitgangskrachten detecteert, klikt u op Accepteren. Als deze uitvoerkrachten niet automatisch worden geselecteerd, drukt u op Weigeren en selecteert u de pieken handmatig. De twee piekoutputkrachten worden gemiddeld tot een gemiddelde piekoutputkracht (figuur 5).</li>
		<li>Bereken de actieve spierkracht door de voorbelasting af te trekken van de gemiddelde piekoutputkracht.</li>
		<li>Noteer de actieve kracht voor elke voorbelasting om de trend te visualiseren en de maximale actieve kracht te herkennen (Figuur 6). Er kan ook een spreadsheet worden gebruikt.</li>
	</ol></li>
	<li>Meting van isometrische tetanische kracht<ol>
<li>Na het bepalen van de ideale spierlengte, laat de spier rusten op nul preload gedurende 5 minuten voorafgaand aan het starten van de tetanische spiersamentrekkingen.</li>
		<li>Schakel ondertussen over van parametertest naar frequentietest op de VI en pas de stimulusintensiteit aan op 10 V op het bipolaire stimulatorapparaat.</li>
		<li>Houd de duur van de vertraging en stimuluspuls op respectievelijk 2 ms en 0,4 ms.</li>
		<li>Meet de isometrische tetanische spierkracht met behulp van toenemende stimulusfrequenties vanaf 30 Hz met stappen van 30 Hz totdat het maximale krachtplateau wordt waargenomen.</li>
		<li>Klik op Trigger collection en stel in op de vooraf bepaalde optimale spierlengte.</li>
		<li>Druk op de herhaalknop op het bipolaire stimulatorapparaat om maximaal 5 seconden een tetanische stimulatie te induceren of totdat een krachtpiek duidelijk wordt waargenomen. OPMERKING: Verwijder voor het stimuleren van de zenuw altijd overtollige 0,9% NaCl rond de zenuw met behulp van applicators met katoenen punt om ervoor te zorgen dat het signaal niet naar het omliggende weefsel wordt geleid.</li>
		<li>Als u de gegevens wilt verzamelen, drukt u nogmaals op Triggerverzameling en documenteert u de maximale uitvoerkracht. Als het programma niet automatisch de maximale uitvoerkracht van de piek detecteert, drukt u op Weigeren en selecteert u de piek handmatig.</li>
		<li>Laat de spier weer rusten op nul preload gedurende 5 minuten voordat u begint met de volgende tetanische spiersamentrekkingen. OPMERKING: Bevochtig regelmatig (ongeveer elke 5 min) de TA-spier met verwarmde 0,9% NaCl (37 °C) om koeling en uitdroging te voorkomen.</li>
		<li>Blijf de stimulusfrequentie verhogen totdat het maximale krachtplateau is bereikt. Het krachtplateau wordt gedefinieerd als de maximale isometrische tetanische kracht. OPMERKING: Verwijder na deze stap de K-draden, niet of hecht de huid en herhaal de hele procedure naar de contralaterale achterpoot, te beginnen bij stap 4.</li>
	</ol></li>
</ol>

De auteurs hebben niets bekend te maken.

Dit protocol beschrijft een eerder gevalideerde methode voor het verkrijgen van nauwkeurige maximale ITF-metingen van de TA-spier in het rattenmodel32. Het herstel van maximale kracht na experimentele zenuwreconstructiebehandelingen is van primair belang in de klinische setting, omdat het bewijst dat de zenuw niet alleen regenereerde, maar ook werkverbindingen maakte met de doelspier. De ITF kan worden gebruikt in een klein zenuwspleetmodel, zoals het rat ischiaszenuwmodel32</sup...

Verlies van motorische functie na traumatisch perifere zenuwletsel heeft een aanzienlijke invloed op de kwaliteit van leven en de sociaaleconomische status van patiënten1,2,3. De prognose van deze patiëntenpopulatie blijft slecht als gevolg van minimale verbeteringen in chirurgische technieken in de loop der jaren4. Directe end-to-end spanningsvrije epineurale reparatie vormt de gouden standaard chirurgische reconstructie. Echter, in gevallen met uitgebreide zenuwspleten interpositie van een autologe zenuwtransplantaat is gebleken superieur te zijn5,6. De daarmee gepaard gaande morbiditeit van de donorplaats en de beperkte beschikbaarheid van autologe zenuwtransplantaten hebben de noodzaak van alternatieve techniekenopgelegd 7,8.
Experimentele diermodellen zijn gebruikt om het mechanisme van perifere zenuwregeneratie te verduidelijken en om de resultaten van een verscheidenheid aan reconstructieve en farmacologische behandelingsopties te evalueren8,9. Het rat ischiaszenuwmodel is het meest gebruikte diermodel10. Hun kleine formaat maakt ze gemakkelijk te hanteren en huis. Vanwege hun superlatieve neuroregeneratieve potentieel kan de verminderde tijd tussen interventie en evaluatie van uitkomsten leiden tot relatief lagere kosten11,12. Andere voordelen van het gebruik ervan zijn morfologische overeenkomsten met menselijke zenuwvezels en het hoge aantal vergelijkende/ historische studies13. Hoewel dit laatste voorzichtig moet worden benaderd , omdat een grote verscheidenheid aan verschillende uitkomstmaten tussen studies het moeilijk maakt om de resultaten14,15,16,17,18te vergelijken .
Uitkomstmaten om zenuwregeneratie te beoordelen variëren van elektrofysiologie tot histomorfometrie, maar deze methoden impliceren een correlatie, maar meten niet noodzakelijkerwijs direct de terugkeer van motorische functie14,15. Het regenereren van zenuwvezels kan geen geschikte verbindingen maken die een overschatting van het aantal functionele verbindingen14,15,19,20kunnen veroorzaken . De beste en klinisch meest relevante meting om de juiste renervatie van eindorganen aan te tonen , blijft de beoordeling van spierfunctie21,22,23. Het maken van motorische functiebeoordelingstools voor diermodellen is echter een uitdaging. Medinaceli et al. beschreven voor het eerst de wandelrouteanalyse, die sindsdien de meest gebruikte methode is om functioneel herstel te evalueren in experimentele perifere zenuwstudies21,24,25,26,27,28. De wandelpadanalyse kwantificeert de ischias functionele index (SFI) op basis van metingen van pootafdrukken van wandelende ratten21,29. Grote beperkingen van de analyse van het wandelpad, zoals teencontracturen, automutilatie, uitstrijkjes van de afdruk en slechte correlatie met andere metingen van renervatie, hebben het gebruik van andere parameters voor kwantificering van functioneel herstel30,31noodzakelijk gemaakt .
In eerdere studies bij Lewis ratten32 en Nieuw-Zeelandse konijnen33, hebben we de isometrische tetanische kracht (ITF) meting voor de tibialis anterior (TA) spier gevalideerd en de effectiviteit ervan aangetoond bij de evaluatie van spierherstel na verschillende soorten zenuwherstel34,35,36,37,38,39. De TA-spier is zeer geschikt vanwege zijn relatief grote omvang, innervatie door de peroneale tak van de heupzenuw en goed opgehelderde biochemische eigenschappen40,41,42,43. Wanneer spierlengte (voorspanningskracht) en elektrische parameters zijn geoptimaliseerd, biedt de ITF een zij-aan-zij variabiliteit van respectievelijk 4,4% en 7,5% bij ratten32 en konijnen33.
Dit artikel biedt een gedetailleerd protocol van de ITF-meting in het ischiaszenuwmodel van de rat, inclusief een grondige beschrijving van de noodzakelijke prechirurgische planning, chirurgische aanpak en dissectie van de gemeenschappelijke peroneale zenuw en de distale TA-spierpees. Met behulp van vooraf bepaalde waarden voor de stimulusintensiteit en -duur worden de optimale spierlengte en stimuluspulsfrequentie gedefinieerd. Met deze vier parameters kan de ITF vervolgens consistent en nauwkeurig worden gemeten.

<table><tbody><tr><td>0.9% natriumchloride</td><td>Baxter Healthcare Corporation, Deerfield, IL, USA</td><td>G130203</td><td></td></tr><tr><td>1 mm Kirshner-draden</td><td>Pfizer Howmedica, Rutherford, NJ</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Adson-weefseltang</td><td>ASSI, Westbury, NY, USA</td><td>MTK-6801226</td><td></td></tr><tr><td>Bipolare elektrodenkabels</td><td>Grass Instrument, Quincy, MA</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Bipolare stimulator</td><td>Grass SD9, Grass Instrument, Quincy, MA</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Wattenstaafjes met katoen</td><td>Cardinal Health, Waukegan, IL, USA</td><td>C15055-006</td><td></td></tr><tr><td>Gebogen mosquitotang</td><td>ASSI, Westbury, NY, USA</td><td>MTK-1201112</td><td></td></tr><tr><td>Krachttransducer MDB-2.5</td><td>Transducer Techniques, Temecula, CA</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Gaasjes 4x4</td><td>Covidien, Mansfield, MA, USA</td><td>2733</td><td></td></tr><tr><td>Aardkabel</td><td>Grass Instrument, Quincy, MA</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Isoflureenkamer</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Op maat gemaakt</td></tr><tr><td>Ketamine</td><td>Ketalar, Par Pharmaceutical, Chestnut, NJ</td><td>42023-115-10</td><td></td></tr><tr><td>LabView-software</td><td>National Instruments, Austin, TX</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Lus</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Op maat gemaakt</td></tr><tr><td>Microchirurgische gebogen tang</td><td>ASSI, Westbury, NY, USA</td><td>JFA-5B</td><td></td></tr><tr><td>Microchirurgische schaar</td><td>ASSI, Westbury, NY, USA</td><td>SAS-15R-8-18</td><td></td></tr><tr><td>Microchirurgische rechte tang</td><td>ASSI, Westbury, NY, USA</td><td>JF-3</td><td></td></tr><tr><td>Retractor</td><td>ASSI, Westbury, NY, USA</td><td>AG-124426</td><td></td></tr><tr><td>Mesje No. 15</td><td>Bard-Parker, Aspen Surgical, Caledonia, MI, USA</td><td>371115</td><td></td></tr><tr><td>Slim Body Skin Stapler</td><td>Covidien, Mansfield, MA, USA</td><td>8886803512</td><td></td></tr><tr><td>Subminiatuur elektrode</td><td>Harvard Apparatus, Holliston, MA</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Chirurgische zenuwstimulator</td><td>Checkpoint Surgical LCC, Cleveland, OH, USA</td><td>9094</td><td></td></tr><tr><td>Terrell Isoflureen</td><td>Piramal Critical Care Inc., Bethlehem, PA, USA</td><td>H961J19A</td><td></td></tr><tr><td>Testplatform</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>Op maat gemaakt</td></tr><tr><td>Tetontomy-schaar</td><td>ASSI, Westbury, NY, USA</td><td>ASIM-187</td><td></td></tr><tr><td>Traceable Big-Digit Timer/Stopwatch</td><td>Fisher Scientific, Waltham, MA, USA</td><td>S407992</td><td></td></tr><tr><td>USB-6009 multifunctioneel I/O-gegevensverzameling (DAQ)-apparaat</td><td>National Instruments, Austin, TX</td><td>779026-01</td><td></td></tr><tr><td>Vacuumbasishouder</td><td>Noga Engineering &amp; Technology Ltd., Shlomi, Isreal</td><td>N/A</td><td>De bijgevoegde klem is op maat gemaakt</td></tr><tr><td>Gewicht (10 g)</td><td>Denver Instruments, Denver, CO, USA</td><td>820010.4</td><td></td></tr><tr><td>Gewicht (20 g)</td><td>Denver Instruments, Denver, CO, USA</td><td>820020.4</td><td></td></tr><tr><td>Gewicht (50 g)</td><td>Denver Instruments, Denver, CO, USA</td><td>820050.4</td><td></td></tr><tr><td>Xylazin</td><td>Xylamed, Bimeda MTC Animal Health, Cambridge, Canada</td><td>1XYL002</td><td></td></tr></tbody></table>

maximale isometrische tetanische krachtmeting van de tibialis-voorste spier in de rat

Maximum Isometric Tetanic Force Measurement of the Tibialis Anterior Muscle in the Rat

Traumatische zenuwletsels resulteren in aanzienlijk functioneel verlies en segmentale zenuwdefecten vereisen vaak het gebruik van autologe interpositiezenuwtransplantaten. Vanwege hun beperkte beschikbaarheid en bijbehorende morbiditeit aan de donorzijde, richten veel studies op het gebied van zenuwregeneratie zich op alternatieve technieken om een segmentale zenuwkloof te overbruggen. Om de resultaten van chirurgische of farmacologische experimentele behandelingsopties te onderzoeken, wordt het ischiaszenuwmodel van ratten vaak gebruikt als een bioassay. Er zijn verschillende uitkomstmetingen die worden gebruikt in rattenmodellen om de mate van zenuwregeneratie te bepalen. De maximale uitgangskracht van de doelspier blijft de meest relevante uitkomst voor klinische vertaling van experimentele therapieën. Isometrische krachtmeting van tetanische spiercontractie is eerder beschreven als een reproduceerbare en geldige techniek voor het evalueren van motorisch herstel na zenuwletsel of herstel in zowel ratten- als konijnenmodellen. In deze video geven we een stapsgewijze instructie van deze onschatbare procedure voor de beoordeling van functioneel herstel van de tibialis voorste spier in een model van een ischiaszenuwdefect van een rat met behulp van geoptimaliseerde parameters. We zullen de noodzakelijke prechirurgische preparaten beschrijven naast de chirurgische aanpak en dissectie van de gemeenschappelijke peroneale zenuw en tibialis voorste spierpees. De isometrische tetanische krachtmetingstechniek wordt gedetailleerd beschreven. Het bepalen van de optimale spierlengte en stimuluspulsfrequentie wordt uitgelegd en het meten van de maximale tetanische spiercontractie wordt aangetoond.

Vijf parameters worden gebruikt om de ITF-meting te meten. Deze omvatten spierspanning (preloadkracht), stimulusintensiteit (spanning), stimuluspulsfrequentie, stimulusduur van 0,4 ms en een vertraging van 2 ms. Voorafgaand aan het meten van de ITF moet de optimale spierspanning worden bepaald met behulp van twee enkelvoudige twitch spiersamentrekkingen bij een intensiteit van 2 V tijdens de parametertest. Deze stimuli veroorzaken dorsiflexie van de poot en produceren een uitgangssignaal op de grafiek in de VI (<strong c...

Evaluatie van motorisch herstel blijft de benchmark uitkomstmaat in experimentele perifere zenuwstudies. De isometrische tetanische krachtmeting van de tibialis voorste spier in de rat is een onschatbaar hulpmiddel om functionele resultaten na reconstructie van ischiaszenuwdefecten te beoordelen. De methoden en nuances worden in dit artikel beschreven.

Maximale isometrische tetanische krachtmeting van de Tibialis-voorste spier in de rat

Traumatic nerve injuries result in substantial functional loss and segmental nerve defects often necessitate the use of autologous interposition nerve ...

Het algemene doel van deze video is om een stapsgewijze instructie te geven over het meten van de isometrische tetanische kracht van de tibialis voorste spier in de rat, een reproduceerbare en gevalideerde methode om functioneel herstel na ischiaszenuwletsel of reconstructie te beoordelen. Het model van de rattensciatische zenuwdefect wordt vaak gebruikt om experimentele behandelingsopties voor perifere zenuwbeschadiging te evalueren. Om de gouden standaardbehandeling voor segmentale zenuwdefecten bij ratten te repliceren, wordt meestal een segment van 10 millimeter van de heupzenuw omgekeerd op zijn plaats verwijderd als een interpositieautograft.Bij experimentele behandelingen kan de zenuwspleet worden gereconstrueerd met behulp van andere technieken, zoals een zenuw allograft of conduit. Voor klinische vertaling van deze experimentele technieken is het belangrijk om de mate van motorisch functieherstel in de doelspier te meten. In deze video beschrijven we hoe je dat doet voor de tibialis voorste spier door de gemeenschappelijke peroneale zenuw te stimuleren.Start de procedure door de krachtomvormer te kalibreren. Plaats het testplatform, dat twee houten blokken op de proceduret

maximum-isometric-tetanic-force-measurement-tibialis-anterior-muscle

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowetenschap

Beschrijven we een minimaal-invasieve en pijnloze methode om honden achterbeen spierkracht en spier reactie op de herhaalde excentrische contracties te meten.

In vivo Canine spierfunctie Assay

Een In vivo Knaagdieren Model van krimp veroorzaakte letsel en niet-invasieve monitoring van de Recovery

Deze video toont de chirurgische voorbereiding en procedures die nodig zijn om de contractiele responsen van de rat mediale gastrocnemius spier voorbereiding...

Procedures voor Rat<em&gt; In situ</em&gt; Skeletspier contractiele eigenschappen

Veranderingen in de ledematen spieren contractiele en passieve mechanische eigenschappen zijn belangrijk biomarkers voor spierziekten. Dit manuscript beschrijft fysiologische tests om deze eigenschappen te meten in het muizen extensor digitorum longus en m. tibialis anterior.

Evaluatie van de spierfunctie van de m. extensor digitorum longus<em&gt; Ex vivo</em&gt; En Voorste scheenbeenspier Spier<em&gt; In situ</em&gt; In Muizen

Analyse van de contractiele eigenschappen van chemisch huid of doorlaatbaar gemaakt, skeletspier vezels een krachtig middel om spierfunctie beoordeeld op het niveau van de interne spiercel. In dit artikel schetsen we een valide en betrouwbare techniek bereid en getest doorlaatbaar skeletspier vezels in vitro.

Meting van de maximale isometrische kracht die door gepermeabiliseerd Skeletal Muscle Vezels

We beschrijven een in vivo protocol om dorsiflexie van de voet te meten na stimulatie van de peroneale zenuw en contractie van het anterieure crurale compartiment van de achterpoot van de rat. Dergelijke metingen zijn een onmisbaar translationeel hulpmiddel voor het evalueren van skeletspierpathologie en weefselengineeringbenaderingen voor spierreparatie en -regeneratie.

toepassingen van<em&gt; In Vivo</em&gt; Functioneel testen van de Rat tibialis anterior voor de evaluatie van Tissue Engineered Skeletal Muscle Repair

Meting van knaagdier skeletspieren contractiele functie is een nuttig instrument dat kan worden gebruikt voor het bijhouden van de progressie van de ziekte, alsmede de werkzaamheid van de therapeutische interventie. Hier beschrijven we de niet-invasieve, in vivo beoordelingvan de releveurs spieren die na verloop van tijd in de dezelfde muis kan worden herhaald.

Niet-invasieve beoordelingvan releveurs spier functie in muizen

Kwantificering van de maximale kracht van de knie-extensor is noodzakelijk om functionele aanpassingen aan veroudering, ziekte, letsel en revalidatie te begrijpen. We presenteren een nieuwe methode om herhaaldelijk in vivo knie-extensie isometrisch piek tetanisch koppel te meten.

In vivo meting van de spierfunctie van de knie-extensor bij muizen

Het huidige protocol beschrijft beknopte experimentele details over de evaluatie en interpretatie van in vivo koppelgegevens verkregen via elektrische stimulatie van de gemeenschappelijke peroneuszenuw bij verdoofde varkens.

In vivo Meting van Hindlimb Dorsiflexor Isometrisch koppel van varken

Dit protocol presenteert een testsysteem dat wordt gebruikt om kwantificeerbare en gecontroleerde vermoeidheidsblessures in een achillespees van een rat te induceren voor een in-vivo model van door overbelasting geïnduceerde tendinopathie. De procedure bestaat uit het vastzetten van de enkel van de rat aan een gewrichtsactuator die passieve enkeldorsaalflexie uitvoert met een op maat geschreven MATLAB-script.

Een passief testsysteem voor dorsaalflexie van de enkel voor een in vivo model van door overbelasting geïnduceerde tendinopathie

Hier presenteren we een nieuw protocol om de koppel-hoeksnelheid-krachtrelatie in vivo in de plantaire flexoren van ratten niet-invasief te meten met behulp van transcutane spierstimulatie. Deze opstelling maakt het mogelijk om eenvoudig isotone spiercontracties te testen op een krachttransducer/lengtecontrollersysteem om de constante belasting van dagelijkse bewegingen beter weer te geven.

Constructie van constante-belasting (isotoon) en constante-snelheid (isokinetisch) koppel-snelheid-vermogen profielen In vivo voor de ratten plantaire flexoren

Leer de isometrische tetanische krachtmeting van de Tibialis-voorste spier bij ratten. Deze gevalideerde methode beoordeelt motorisch herstel na ischiaszenuwletsel en standaardiseert functionele uitkomsten voor perifere zenuwreparatie.

Maximale isometrische tetanische krachtmeting van de Tibialis-voorste spier in de rat

Meer video's verkennen