Name: Overgang van boerderijvarkens naar onderzoeksvarkens met behulp van een aangewezen checklist, gevolgd door het starten van clickertraining - een verfijningsinitiatief (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-08-21T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 59 s
Description: Leer hoe varkens met positieve bekrachtiging en socialisatie naar een onderzoeksomgeving worden overgebracht. Deze methode verbetert het dierenwelzijn en maakt dieren kalmer voor wetenschappelijk onderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Beatrice Tscherning Olesen, Karoline Jakobsen, Tine Bjørnholt Gustafsen, Helena Céline Kjær Byriel en Kira Sonnichsen Graahede worden erkend voor hun grote inspanningen, feedback en hulp bij het ontwerpen en gebruiken van de checklist in hun dagelijkse werk. Medisch illustrator Ken Kragsfeldt wordt erkend voor zijn professionele hulp bij het illustreren van figuur 3.

De varkens die werden gebruikt om het protocol te valideren, maakten deel uit van studies die waren goedgekeurd door The Animal Experimental Council - een nationale overheidsinstelling die alle dierproeven in Denemarken evalueert en goedkeurt. De Raad doet de ethische toetsing vergelijkbaar met een IACUC.
1. Aankomst in de onderzoeksfaciliteit
<ol><li>Was eerst de varkens in een aangewezen gebied om een grondige visuele inspectie mogelijk te maken. Gebruik een uitsluitingslijst om varkens met wonden, oorbeten, abcessen, kreupelheid enz. uit te sluiten, zodat alleen dieren die klinisch gezond lijken, de faciliteit mogen betrekken.</li>
	<li>Sorteer de varkens na het wassen in groepen op basis van kleurmarkeringen. De kleurmarkeringen geven aan welke varkens penmaatjes zijn geweest bij de leverancier. Dit is belangrijk omdat varkens zullen vechten om een hiërarchie op te zetten wanneer ze worden geïntroduceerd aan nieuwe pengenoten. Door ze gesorteerd te houden in groepen samen met varkens zijn ze al bekend met beperkingen dit vechten aanzienlijk.</li>
	<li>Laat de varkens ongestoord (behalve wanneer ze 's middags worden gevoerd) voor de rest van de aankomstdag, omdat ze na transport behoorlijk gestrest kunnen zijn.</li>
</ol>2. Deel één: De overgangsfase (geschatte tijd 4-6 dagen)
OPMERKING: De varkens blijven in hun thuishok tijdens de activiteiten die in de overgangsfase worden uitgevoerd. We gebruiken een halve appel voor elke traktatiesessie. De voortgang van elk individueel varken wordt gescoord in de Transition Phase Progression Checklist (Figuur 1 en Aanvullend Dossier 1).
<ol><li>Introduceer de lekkernijen op de twee opeenvolgende dagen na aankomst.<ol>
<li>Toss behandelt er twee keer per dag een paar tegelijk (half appeltotaal) in de pen om de varkens in staat te stellen zelfstandig naar de lekkernijen te zoeken en rustig net buiten de pen te staan. Afgezien van het vertrouwd raken met traktaties, is het doel dat het dier de traktatie positief associeert met de aanwezigheid van een verzorger.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Op dag drie en opeenvolgende dagen introduceren het vertrouwd maken van het varken met "behandeling door een verzorger". Voer de pen in tijdens het voeren.<ol>
<li>Ga op armlengte van het varken zitten terwijl het aan het eten is (figuur 3). Steek rustig een hand uit naar het varken om zijn rug aan te raken. De aanraking moet meer dan twee seconden duren om als succesvol te tellen. Als het varken zich terugtrekt van het voedsel, trek dan de hand langzaam terug.</li>
		<li>Wacht tot het dier begint te eten en voer de actie opnieuw uit. Als het dier zich weer terugtrekt van het voedsel, stop dan met proberen het aan te raken, maar blijf in de pen naast de trog (in totaal 2-3 minuten voor de sessie).</li>
	</ol>
</li>
	<li>Ga verder in de behandelingsprocedure wanneer het varken accepteert dat het op de rug wordt aangeraakt terwijl het eet. Beweeg nu de hand op de rug in beide richtingen van het hoofd en de staart.<ol>
<li>Raak het hoofd en de oren aan als het varken het accepteert. Als het varken op enig moment afstand houdt van een actie, stop dan de actie, maar blijf de resterende tijd in de pen (in totaal 2-3 minuten voor de sessie). Het oor is belangrijk omdat het bloedafname van een intraveneuze katheter in het oor mogelijk maakt.</li>
		<li>Sta langzaam op om het staartgebied te kunnen aanraken, het tweede belangrijke gebied. Staan en bewegen is beangstigender voor het varken, daarom wordt deze stap onafhankelijk gescoord. Wanneer het varken accepteert dat het gebied wordt aangeraakt en de staart wordt gemanipuleerd, kan een rectale temperatuur worden genomen om de meeste onderzoeksprotocollen te ondersteunen.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Om de band tussen verzorger en dier verder te versterken, komt u de pen binnen tijdens twee sessies, afgezien van de voedertijden. Bied de varkenstraktaties (één plak per keer) aan tijdens twee sessies (elk 2-3 minuten), terwijl je in een hoek in de pen zit. Geef eerst de traktaties van een uitgestrekte arm, maar verklein de afstand geleidelijk, zodat het varken dichterbij moet komen om zijn beloning te krijgen.</li>
	<li>De laatste fase van de overgangsfase is het kunnen aanraken van het varken in de specifieke delen van het lichaam en het gebruik van slechts een paar traktaties om dit te doen. Betreed de pen terwijl een tweede verzorger buiten de pen staat en een traktatie of twee aan het varken biedt. Beloon het varken voor kalm zijn en aanraken zoals beschreven en tegelijkertijd in staat zijn om alle vier de hoeven op de grond te houden (niet op het hek van de pen springen).</li>
</ol>3. Deel twee: Beginnende clickertraining
OPMERKING: Na de overgangsfase zijn de dieren klaar om de clickertraining te starten. Het wordt aanbevolen dat de training wordt uitgevoerd in een aangewezen gebied, omdat het het varken helpt te herkennen dat een trainingssessie op het punt staat te beginnen. Meerdere korte sessies over de dag zijn beter dan één langere sessie.
<ol><li>Neem één varken tegelijk mee buiten de thuisstal en naar de daarvoor bestemde trainingsruimte. Als het gebruikte gebied nieuw is voor het varken, moeten de eerste sessies zonder training en strikt verkennend zijn met een paar traktaties gedurende ongeveer 5-7 minuten verkenning per varken.</li>
	<li>Introduceer de clicker zittend of staand met de lekkernijen buiten het bereik van het varken. Klik wanneer het varken interesse toont en geef onmiddellijk een traktatie. Doe dit snel achter elkaar terwijl het varken interesse behoudt. Als het varken zijn interesse verliest, pauzeer dan de klik-en-traktatie totdat het varken weer contact maakt. Deze sessie mag niet langer zijn dan 10 minuten.</li>
	<li>Het varken zal de klik snel begrijpen, maar het is belangrijk om de associatie tussen klik en behandeling erg sterk te maken. Herhaal de stap een paar sessies achter elkaar om de koppeling tussen klikken en behandelen sterk te maken. Test of het varken de klik associeert met een traktatie door eenmaal te klikken en dit niet te volgen met een traktatie en het gedrag van het varken nauwlettend te volgen. Als het varken gretig rondkijkt en de traktatie verwacht, is de training voltooid, zo niet voer dan een paar extra sessies uit.</li>
	<li>Zodra de klik bekend is bij het varken, introduceert u de doelstick. Een doelstick is een stok met een gemarkeerd gebied aan de ene kant. Houd het doeleinde in de hoogte van de snuit. Op een gegeven moment zal het varken het uit nieuwsgierigheid aanraken. Klik in de seconde dat het varken het doel raakt en een traktatie geeft.</li>
	<li>Presenteer het doel onmiddellijk opnieuw en klik nogmaals als u het aanraakt en geef een traktatie. Ga door met de doeltraining totdat het varken begrijpt dat het wordt beloond voor het aanraken van het doel. Verplaats het doel geleidelijk verder weg, zodat het varken verder moet bewegen om bij het doel te komen.</li>
	<li>Wanneer het varken het doel volgt wanneer het wordt verplaatst, voegt u extra uitdagingen toe door objecten in het trainingsgebied te plaatsen, zodat het varken zich harder moet concentreren op de doelstoktaak om zijn beloningen te krijgen.</li>
</ol>

<ol><li>Burch, R. L., Russell, W. M. S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBurch%2C+RL+%22The+principles+of+humane+experimental+technique%22">The principles of humane experimental technique</a>. , (1959).</li>
<li>The 3Rs. National Centre for the Replacement. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.nc3rs.org.uk/the-3rs">https://www.nc3rs.org.uk/the-3rs</a> (2021).</li>
<li>Gouveia, K., Hurst, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimising+reliability+of+mouse+performance+in+behavioural+testing%3A+the+major+role+of+non-aversive+handling%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Optimising reliability of mouse performance in behavioural testing: the major role of non-aversive handling.</a> Scientific Reports. 7, (2017).</li>
<li>Laule, G. E., Thurston, R. H., Alford, P. L., Bloomsmith, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Training+to+reliably+obtain+blood+and+urine+samples+from+a+diabetic+chimpanzee+%28Pan+troglodytes%29%5BTitle%5D)+AND+%22Zoo+Biology%22%5BJournal%5D)">Training to reliably obtain blood and urine samples from a diabetic chimpanzee (Pan troglodytes).</a> Zoo Biology. 15 (6), 587-591 (1996).</li>
<li>Mills, D., Ledger, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+oral+selegiline+hydrochloride+on+learning+and+training+in+the+dog%3A+A+psychobiological+interpretation%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Neuro-Psychopharmacology+%26+Biological+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">The effects of oral selegiline hydrochloride on learning and training in the dog: A psychobiological interpretation.</a> Progress in Neuro-Psychopharmacology & Biological Psychiatry. 25 (8), 1597-1613 (2001).</li>
<li>Arluke, A., Sanders, C. R. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aArluke%2C+A+%22Regarding+Animals%22">Regarding Animals</a>. , Temple University Press. (1996).</li>
<li>Leidinger, C., Herrmann, F., Thone-Reineke, C., Baumgart, N., Baumgart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Introducing+Clicker+Training+as+a+Cognitive+Enrichment+for+Laboratory+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Introducing Clicker Training as a Cognitive Enrichment for Laboratory Mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (121), e55415(2017).</li>
<li>Leidinger, C. S., Kaiser, N., Baumgart, N., Baumgart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+Clicker+Training+and+Social+Observation+to+Teach+Rats+to+Voluntarily+Change+Cages%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Using Clicker Training and Social Observation to Teach Rats to Voluntarily Change Cages.</a> Journal of Visualized Experiments. (140), e58511(2018).</li>
<li>Sorensen, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Never+wrestle+with+a+pig%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Never wrestle with a pig.</a> Lab Animal. 44 (2), 159-161 (2010).</li>
<li>2019 report on the statistics on the use of animals for scientific purposes in the Member States of the European Union in 2015-2017. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://eur-lex.europa.eu/legal-content/EN/TXT/PDF/?uri=CELEX:52020DC0016&from=EN">https://eur-lex.europa.eu/legal-content/EN/TXT/PDF/?uri=CELEX:52020DC0016&from=EN</a> (2020).</li>
<li>Louise, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Target+training+pigs+within+an+isolation+unit+%28a+pilot+study%5BTitle%5D)+AND+%22Animal+Technology+and+Welfare%22%5BJournal%5D)">Target training pigs within an isolation unit (a pilot study.</a> Animal Technology and Welfare. 17 (1), 46-47 (2018).</li>
<li>Ryden, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nursing+and+training+of+pigs+used+in+renal+transplantation+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">Nursing and training of pigs used in renal transplantation studies.</a> Laboratory Animals. , (2019).</li>
<li>Smith, A. C., Swindle, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+swine+for+the+laboratory%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+Journal%22%5BJournal%5D)">Preparation of swine for the laboratory.</a> ILAR Journal. 47 (4), 358-363 (2006).</li>
<li>Swindle, M. M., Smith, A. C. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSwindle%2C+MM+%22Swine+in+the+Laboratory%3A+Surgery%2C+Anesthesia%2C+Imaging%2C+and+Experimental+Techniques%2C+Third+Edition%22">Swine in the Laboratory: Surgery, Anesthesia, Imaging, and Experimental Techniques, Third Edition</a>. , CRC Press. Ch. 1 (2016).</li>
<li>Obernier, J. A., Baldwin, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishing+an+appropriate+period+of+acclimatization+following+transportation+of+laboratory+animals%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+Journal%22%5BJournal%5D)">Establishing an appropriate period of acclimatization following transportation of laboratory animals.</a> ILAR Journal. 47 (4), 364-369 (2006).</li>
<li>Kaiser, A. R., Johnson, A. K., Ross, J. W., Selsby, J. T., Stalder, K. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Independent+Study+490A%3A+Positive+Reinforcement+Training+Piglets+to+Stand+in+a+Container+and+Follow+a+Human%5BTitle%5D)+AND+%22Iowa+State+University+Animal+Industry+Report%22%5BJournal%5D)">Independent Study 490A: Positive Reinforcement Training Piglets to Stand in a Container and Follow a Human.</a> Iowa State University Animal Industry Report. 11 (1), (2014).</li>
<li>Sørensen, D. B., Dragsted, N., Glerup, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Positive+reinforcement+training+in+large+experimental+animals%5BTitle%5D)+AND+%22Altex%22%5BJournal%5D)">Positive reinforcement training in large experimental animals.</a> Altex. 28, 250(2011).</li>
<li>Lawrence, A. B., Vigors, B., Sandoe, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+Is+so+Positive+about+Positive+Animal+Welfare%3F-A+Critical+Review+of+the+Literature%5BTitle%5D)+AND+%22Animals%22%5BJournal%5D)">What Is so Positive about Positive Animal Welfare?-A Critical Review of the Literature.</a> Animals. 9 (10), (2019).</li>
<li>Jirkof, P., Rudeck, J., Lewejohann, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+Affective+State+in+Laboratory+Rodents+to+Promote+Animal+Welfare-What+Is+the+Progress+in+Applied+Refinement+Research%5BTitle%5D)+AND+%22Animals%22%5BJournal%5D)">Assessing Affective State in Laboratory Rodents to Promote Animal Welfare-What Is the Progress in Applied Refinement Research.</a> Animals. 9 (12), Basel. (2019).</li>
<li>Herskin, M. S., Bundgaard, C. J., Ottesen, J. L., Sørensen, D. B., Marchant-Forde, J. N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHerskin%2C+MS+%22Animal-centric+care+and+management%22">Animal-centric care and management</a>. Sørensen, D. B., Cloutier, S., Gaskill, B. N. , CRC Press. Ch. 13 173-186 (2020).</li>
<li>Network, T.T.C.o.C. What is a Culture of Care. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://norecopa.no/more-resources/culture-of-care">https://norecopa.no/more-resources/culture-of-care</a> (2020).</li>
<li>Bertelsen, T. H. in . eds Dorte Bratbo Sørensen. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBertelsen%2C+TH+%22Animal-centric+care+and+management%22">Animal-centric care and management</a>. Sørensen, D. B., Cloutier, S., Gaskill, B. N. , CRC Press. Ch. 2 15-29 (2020).</li>
<li>Weichbrod, R. H., Thompson, G. A., Norton, J. N. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWeichbrod%2C+RH+%22Management+of+Animal+Care+and+Use+Programs+in+Research%2C+Education%2C+and+Testing.+2+edn%22">Management of Animal Care and Use Programs in Research, Education, and Testing. 2 edn</a>. , CRC Press. (2017).</li>
<li>SPF-DANARK. SPF status designations. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22SPF-DANARK%22">SPF-DANARK</a>. , (2021).</li>
<li>Berset Convenor, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Federation+of+European+Laboratory+Animal+Science+Associations+recommendations+of+best+practices+for+the+health+management+of+ruminants+and+pigs+used+for+scientific+and+educational+purposes%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Federation of European Laboratory Animal Science Associations recommendations of best practices for the health management of ruminants and pigs used for scientific and educational purposes.</a> Lab Animal. , (2020).</li>
<li>Rehbinder, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FELASA+recommendations+for+the+health+monitoring+of+breeding+colonies+and+experimental+units+of+cats%2C+dogs+and+pigs.+Report+of+the+Federation+of+European+Laboratory+Animal+Science+Associations+%28FELASA%29+Working+Group+on+Animal+Health%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">FELASA recommendations for the health monitoring of breeding colonies and experimental units of cats, dogs and pigs. Report of the Federation of European Laboratory Animal Science Associations (FELASA) Working Group on Animal Health.</a> Lab Animal. 32 (1), 1-17 (1998).</li>
</ol>

De auteurs hebben geen onthullingen.

De implementatie van een protocol dat deel één, een checklist voor de overgangsfase en deel twee omvat, een opeenvolgende clickertrainingsprogramma is een bevestigd succes. De invoering en het gebruik van een gedetailleerde checklist hebben een manier geboden om de introductie van varkens in de onderzoeksfaciliteit te verfijnen. De gestructureerde transitiefase creëert bovendien een betere basis om de varkens te trainen voordat ze worden opgenomen in onderzoeksprojecten. Het was een positieve verrassing om te merken dat ...

De principes van de 3Rs (Replacement, Reduction and Refinement) die Russell en Burch in 1959 bespraken, vormen de basis van vandaag voor hoge ethische normen met betrekking tot het gebruik van dieren voor experimentele doeleinden. In biomedische onderzoeksfaciliteiten die zich bezighouden met preklinische proefdierstudies, moet het verfijningsbeginsel van groot belang zijn. "Verfijning: elke afname van de incidentie of ernst van onmenselijke procedures die worden toegepast op dieren die nog moeten worden gebruikt"1.
Een hedendaagse definitie stelt bovendien dat verfijning "het onderzoek naar dierenwelzijn bevordert door gebruik te maken van de nieuwste in vivo technologieën en door het begrip van de impact van welzijn op wetenschappelijke resultaten te verbeteren"2. Dit houdt in dat de huidige verfijningsinitiatieven niet alleen belangrijk zijn voor het welzijn van het dier op zich, maar dat ze ook belangrijk zijn voor de kwaliteit van het onderzoek, aangezien wetenschappelijke resultaten van deze initiatieven zullen profiteren 3.
Een verfijningsinitiatief om te overwegen is het socialiseren en trainen van proefdieren. Ze kunnen worden opgeleid om een bepaalde taak uit te voeren, bijvoorbeeld op een weegschaal stappen of zich rustig gedragen terwijl bloedmonsters worden genomen. Sommige soorten kunnen van nature meer geneigd zijn tot training dan andere en dit heeft invloed op de traditie voor het trainen van proefdiersoorten. Traditioneel wordt de training van honden al eeuwenlang uitgevoerd, bijvoorbeeld om de hond in de jacht te gebruiken. Deze historische tradities hebben de opleiding van honden in de biomedische onderzoeksomgeving zeker eenvoudiger gemaakt. Samen met niet-menselijke primaten is de opleiding van laboratoriumhonden al geruime tijd besproken en uitgevoerd4,5.
Gemeenschappelijk voor beide soorten is dat ze hoog scoren op de "socio-zoölogische schaal". Deze schaal rangschikt dieren op basis van hun plaats en gebruik in de menselijke samenleving 6. Hoog scoren brengt ook een grote publieke vraag met zich mee om de dieren zo humaan mogelijk te behandelen en hun stress- en angstniveau te beperken. Knaagdieren worden, in tegenstelling tot honden en niet-menselijke primaten, in de onderkant van de socio-zoölogische schaal geplaatst. Ze hebben geen gelijkwaardige publieke aandacht en zorg gekregen. Historisch gezien zijn ze minder goed behandeld - vermoedelijk ook vanwege hun vermogen om levensbedreigende ziekten te verspreiden. In de afgelopen jaren is de training van knaagdieren echter geïmplementeerd in preklinische onderzoeksinstellingen en hiervan zijn gerelateerde wetenschappelijke voordelen niet onmerkbaar gebleven. Zowel ratten als muizen zijn interessant gemakkelijk te trainen en de training beperkt ook hun stressrespons en versterkt zo de wetenschappelijke resultaten7,8.
Rapportage over het socialiseren en trainen van varkens in een proefdieromgeving is voor zover wij weten schaars9. Op de socio-zoölogische schaal worden varkens tussen honden en knaagdieren geplaatst. We herkennen de soort vooral als voedselbron, maar toch worden er ook een behoorlijk groot aantal varkens gebruikt in biomedisch onderzoek. Alleen al in de EU werden in 2015-2017 jaarlijks ongeveer 75.000 varkens voor wetenschappelijke doeleinden gebruikt 10. Dit aantal omvat zowel landbouwvarkens als miniatuurvarkens. Er is een toenemende focus op het verfijnen van het leven van deze dieren door training als een maatregel om te voldoen aan de 3Rs. Zowel boerderijvarkens als miniatuurvarkens kunnen inderdaad worden opgeleid 11,12, maar hun uitgangspunt in termen van socialisatie varieert. Miniatuurvarkens worden gefokt voor onderzoek en gesocialiseerd tijdens hun vroege levensduur. Ze zijn gefokt om een kalm humeur te hebben. Boerderijvarkens worden gefokt voor consumptie en vaak helemaal niet gesocialiseerd. Finishervarkens voor vleesproductie in Denemarken zijn meestal gehuisvest in groepen met een hoge dichtheid van 15-25 varkens waar ze moeten concurreren om een positie in de hiërarchie van de kudde te verdienen. Hun humeur weerspiegelt dat vermogen. Vaak zijn ze gehuisvest in stabiele faciliteiten met een gedeeltelijk gepland vloer om de werklast van het uitmesten te beperken. Om gewichtstoename te optimaliseren, worden ze ad libitum gevoed via geautomatiseerde voedsel- en waterleveringssystemen. Daarom is hun contact met landarbeiders beperkt en zullen ze gestrest raken wanneer ze worden behandeld. Dit stelt bepaalde uitdagingen wanneer de dieren worden overgebracht naar een onderzoeksfaciliteit. Hier spelen het dierenwelzijn, de veeteelt en de 3Rs een sleutelrol13,14. Vanuit een onderzoeksperspectief is elk individueel dier belangrijk om de best mogelijke onderzoeksresultaten te verkrijgen. Het welzijn van de dieren is ook belangrijk om te zorgen voor een lage variatie tussen dieren met betrekking tot stress, angst en angst. Om deze redenen is het belangrijk om aandacht te besteden aan de overgang van een "kuddedier" naar een "individu". Bij aankomst betreden de varkens een nieuwe omgeving met nieuwe geuren, nieuw voedsel, dagelijks contact met dierenverzorgers en vaak ook nieuwe penmaten. Voor een varken kan de verschuiving erg stressvol zijn en het belang van een acclimatisatieperiode van meerdere dagen wordt erkend in de laboratoriumdierwetenschap15.
Door de acclimatisatieperiode te structureren, hebben we een zogenaamde "transitiefase" gecreëerd met behulp van een gestructureerde stap-voor-stap checklist. De checklist zorgt ervoor dat elk varken voldoende contact krijgt met de verzorger en leert om basisafhandeling mogelijk te maken voor onderzoek en monsterverzameling zonder gestrest te zijn. Vervolgens kunnen voortdurende werkzaamheden worden uitgevoerd om de varkens te trainen met behulp van positieve versterkingstraining gericht op elk specifiek onderzoeksproject16,17. Een clicker wordt gebruikt om een voedselbeloning te signaleren wanneer de gewenste actie wordt uitgevoerd. Het combineren van de stappen uit de overgangsfase met extra clickertraining van de varkens geeft de dieren een soepele bezinking in de onderzoeksfaciliteit. Ze worden rustig en gemakkelijk te hanteren en kunnen met weinig moeite worden geleerd om stil te staan voor bijvoorbeeld het afnemen van bloedmonsters. Door het gebruik van dit type hanteringsprotocol worden ouderwetse technieken zoals sedatie van de dieren of strikken vervangen. Om ervoor te zorgen dat alle varkens voldoende worden behandeld, wordt een checklist ingevuld.
Het wordt algemeen aanvaard dat dieren inderdaad positieve emoties voelen en dus moeten de focus bij het werken met de dieren niet alleen liggen op het verwijderen van negatieve emoties 18. De training met de verzorger is een voorbeeld van een positieve emotionele ervaring. Het is heel plezierig voor het varken omdat het traktaties en aandacht krijgt. Naast het voordeel van het verminderen van handling-stress en angst gerelateerd gedrag in de faciliteit, biedt het trainen van de dieren de mogelijkheid om de dieren positieve emotionele ervaringen te geven. Het toevoegen van positieve ervaringen kan een aantal negatieve ervaringen die proefdieren tegenkomen met betrekking tot uitgevoerde experimenten tegengaan en zal zo het dierenwelzijn verder verhogen 19,20.
Terwijl de varkens blijkbaar genieten van de trainingssessies, bieden de sessies tegelijkertijd de verzorger de mogelijkheid om de band met elk individueel varken te versterken. Het zijn van een dierenverzorger, het uitvoeren van pijnlijke acties, zoals injecties van de dieren, is onderdeel van het werk. Het is echter op zichzelf al lonend om de dieren te trainen en deze acties om te zetten in positieve ervaringen. Het vergroot de betrokkenheid van de verzorgers en speelt een sleutelrol bij het versterken van de zorgcultuur van de afdeling21,22,23.
De varkens werden gehuisvest volgens het dierenwelzijnsbeleid van de instelling, dat verwijst naar de nationale wetgeving inzake dierproeven, huisvesting en veeteelt. Het protocol kan worden toegepast op gespeende varkens van elke leeftijd. Voor de ontwikkeling van de overgangschecklist (figuur 1) werden in totaal 40 vrouwelijke kruisingsvarkens (Deense Landrace-Yorkshire-Duroc) met een gewicht van 35-80 kg gebruikt (tabel 1). De varkens werden toegewezen aan een groep die afhankelijk was van hun aankomsttijd. De varkens werden in de periode januari - september 2020 ondergebracht in de onderzoeksstal. Alle boerderijvarkens worden gefokt op een traditioneel zeugenbedrijf en verplaatst naar een samenwerkend bedrijf met een gewicht van ongeveer 15 kg. Ten minste twee weken voor opname in overlevingsstudies worden de varkens naar de onderzoeksstal van de universiteit vervoerd. Gedurende de eerste twee weken vindt de overgang van boerderijvarken naar proefdier plaats. Het protocol bestaat uit niet-schadelijke en positieve acties en kan daarom onmiddellijk worden gestart als onderdeel van de acclimatisatieperiode.
De varkens werden één voor één ondergebracht in hokken van 3,4 - 6,8 m2 op massieve betonnen vloeren en hebben toegang tot water via een automatische watervoorziening. Er is een voederbak voor elk varken en ten minste één deel van de scheiding naar de naburige hokken maakt snuitcontact mogelijk. Wanneer varkens chirurgische ingrepen moeten ondergaan of apparatuur moeten laten implanteren, worden ze alleen gehuisvest om te voorkomen dat penmaten likken en bijten in wonden en implantaten eruit trekken. Het strooiselmateriaal is stro en de dieren worden verder verrijkt met hooi en ander activiteitenspeelgoed, zoals touw, ballen, emmers, kauwsticks van plastic (figuur 2).
De dieren zijn afkomstig van een kudde die is opgenomen in het nationale gezondheidsmonitoringsprogramma voor landbouwhuisvarkens, wat betekent dat ze worden gescreend op zeven pathogenen24 die varkens in een productieomgeving kunnen beïnvloeden. Tweejaarlijkse steekproefsgewijze controles worden uitgevoerd voor de onderzoeksstapel op basis van FELASA-aanbevelingen25,26, naast monsters van varkens die diagnostiek rechtvaardigen vanwege onverwachte onderzoeksresultaten. Sommige van de varkens die voor dit project werden gebruikt, waren seropositief voor het voortplantings- en ademhalingssyndroom van varkens; geen van de varkens vertoonde echter klinische symptomen die overeenkomen met infectie. Alle monsters die werden geëvalueerd met behulp van polymerasekettingreactie waren negatief, wat bevestigt dat de varkens in een gezonde conditie verkeerden.

<table><tbody><tr><td>Wrap, e-power, bl&aring;, 7,5cm</td><td>E-vet A/S, Ole R&oslash;mers Vej 26 A, DK-6100 Haderslev</td><td>203165B</td><td>Zelfklevende wrap die gebruikt wordt om het uiteinde van een stok te omwikkelen om een doelstok te maken. Het is een voordeel dat het kan worden verwisseld omdat het vrij snel vies wordt.</td></tr><tr><td>Apples</td><td>Varius</td><td>Onbekend</td><td>Gebruikt als traktaties</td></tr><tr><td>Klikker (Clicker)</td><td>E-vet A/S, Ole R&oslash;mers Vej 26 A, DK-6100 Haderslev</td><td>TX2289</td><td>Klikker gebruikt bij het trainen</td></tr></tbody></table>

overgang van boerderijvarkens naar onderzoeksvarkens met behulp van een aangewezen checklist, gevolgd door het starten van clickertraining - een verfijningsinitiatief

Transition of Farm Pigs to Research Pigs using a Designated Checklist followed by Initiation of Clicker Training - a Refinement Initiative

De uitvoering van 3R-initiatieven is belangrijk. Om het leven van proefvarkens te verfijnen, hebben we ons gericht op de periode voorafgaand aan het opnemen van dieren in experimenten. We hebben de checklist tijdens de ontwikkeling verbeterd. Met behulp van de checklist werd de voortgang van elk individueel varken gedocumenteerd. Dit helpt de verzorgers zodat ze gefocust blijven op de acties die nodig zijn om de dieren te socialiseren en het stress- en angstniveau van het dier te beperken. Tijdens deze fase worden de varkens kalm en klaar om te beginnen met extra clickertraining om stress tijdens de experimentele periode verder te beperken. De varkens zullen gemakkelijk toestaan dat basisuitkomstmetingen worden verzameld zonder sedatie of fixatie.
Het protocol is in tweeën gedeeld. Eerst de overgangsfase die begint als de varkens bij de onderzoeksfaciliteit aankomen. Het introduceren van traktaties en geleidelijk nauwer contact met de verzorgers zijn de eerste stappen. Vervolgens introduceert de verzorger acties om het hoofd en de achterhand te kunnen aanraken, om bijvoorbeeld het oor na te bootsen om een bloedmonster te nemen of de hinde om een rectale temperatuur te verkrijgen. Een sterke basis wordt gelegd in de dierverzorgerrelatie en dit minimaliseert snel de stress die de varkens na aankomst uitdrukken. Ten tweede begint de positieve versterkingstraining om het dier te leren hoe hij complexere taken moet uitvoeren zonder gestrest te raken. Een clicker wordt geïntroduceerd als secundaire versteviger.
Tijd, structuur, opleiding en gedegen communicatie lijken de belangrijkste criteria om te slagen in de toepassing van dit protocol. Naast het hebben van kalme en conforme varkens, melden de verzorgers dat ze genieten van de focus die ze elk individueel varken mogen geven, wat bijdraagt aan hun algehele werkplezier. Het hebben van verzorgers met een sterke betrokkenheid en een focus op de transitievoortgang en het welzijn van elk varken, versterkt bovendien de zorgcultuur van de afdeling.

Het toepassen van de overgangsfase zoals beschreven in deel één van het protocol maakt een soepele introductie van landbouwvarkens in de onderzoeksfaciliteit mogelijk. Het hebben van kalme varkens om met te werken vergemakkelijkt dagelijkse taken en maakt het mogelijk om kleine procedures en monsternemingen uit te voeren zonder anesthesie of fixatie.
Om de voortgang van varkens tijdens de overgangsfase te volgen, is een checklist (Checklist 1) ontwikkeld om aan te geven wanneer individuele var...

Verfijning van varkensstudies wordt bereikt door het introduceren van een gestandaardiseerde checklist en positieve versterkingstraining met behulp van een clicker. Dit werk ondersteunt het verzamelen van monsters en het uitvoeren van dagelijkse taken met betrekking tot de dieren.

Overgang van boerderijvarkens naar onderzoeksvarkens met behulp van een aangewezen checklist, gevolgd door het starten van clickertraining - een verfijningsinitiatief

Implementation of 3R initiatives is important. To refine the life of laboratory pigs, we focused on the time period prior to inclusion of animals in ...

Deze video introduceert het protocol dat wordt gebruikt om varkens over te schakelen van voornamelijk conventionele landbouw naar onderzoeksvarkens, met behulp van de combinatie van traktaties, socialisatie en positieve versterkingstraining. Als de varkens aankomen, worden ze gewassen en gesorteerd in groepen volgens de projecten waarin ze moeten worden ingeschreven. Op de aankomstdag worden de varkens achtergelaten om zich te vestigen en beperkt het personeel zich in de nietjes.Op de dag na aankomst begint het protocol. Het varken bevindt zich in zijn thuishok tijdens de overgangsfase, omdat dit is waar het varken bekend mee is, en geeft daarom de beste basis van progressie wanneer het doel is om het varken kalm te maken in aanwezigheid van de verzorger. De eerste stap is het introduceren van traktaties.Gekweekte varkens hebben nog nooit andere voedselsoorten gehad dan hun varkensvoer, dus ze moeten worden geleerd wat een traktatie is. We gebruiken appelstukjes als standaard traktatie. De eerste stap is om gewoon stukjes appel in de pen te gooi en het varken het te laten vinden.In het begin betalen de varkens misschien geen aandacht aan de appels, maar meestal begrijpen ze binnen een dag of twee dat een stuk appel leuk is en iets om naar uit te kijken. In het protocol wordt een plus gegeven wanneer het varken binnen twee minuten stukjes appel eet, en een min wordt gegeven als het varken de appels niet heeft gevonden of het tijdens die twee minuten niet wil eten. De verzorger staat net buiten de pen om het varken in de gaten te houden, en ook om het varken te laten wennen aan de nauwe aanwezigheid van de verzorger.Vanaf dag drie komt de verzorger tijdens het voeren in de pen. Het idee hierachter is om te profiteren van de sterke motivatie van het varken om te eten en dat te combineren met de nauwe aanwezigheid van de verzorger. De verzorger onderschept de pen, giet het voer in de trog en gaat dan naast het varken zitten.Als het varken het voer komt eten, blijft de verzorger. Als het varken weigert te eten terwijl de verzorger naast de trog zit, blijft de verzorger twee minuten en verlaat vervolgens de pen. Wanneer het varken de nauwe aanwezigheid van de verzorger accepteert tijdens het voeren, strekt de verzorger langzaam een arm uit om de varkens terug te raken.Als het varken zich terugtrekt van de aanraking, wordt een minpuntje opgenomen in het protocol. Als het varken de aanraking accepteert, wordt een plus geregistreerd. Zodra aanraken wordt geaccepteerd, wordt het langzaam verhoogd.Zowel in het aangeraakte gebied als de snelheid van de bewegingen. Het aanraken van het hoofd, en oren, en achter, en staart, is nuttig voor de meeste projecten, dus ze worden gescoord in het protocol. Vanuit de zitpositie wordt de hand van de rug naar de kop van het varken verplaatst en vervolgens verplaatst om ook de oren aan te raken.Wanneer dit wordt getolereerd, is meer manipulatie van de oren de volgende stap. Wanneer het varken accepteert dat het op het hoofd wordt aangeraakt en zijn oren worden aangeraakt en gemanipuleerd, wordt een plus in het protocol genoteerd totdat een min wordt geregistreerd. Het aanraken van de achter- en staart wordt uitgevoerd door de hand naar achteren op het varken te bewegen.In deze stap stijgt de verzorger ook langzaam op om zich rond het varken te kunnen bewegen voor een betere positionering. Opstaan en buigen naar het varken is angstaanjagender voor het varken, dus alle bewegingen moeten langzaam worden uitgevoerd. Wanneer het varken accepteert dat het op de achterhand wordt aangeraakt en de staart wordt aangeraakt en gemanipuleerd tijdens een sessie van twee minuten, wordt een plus opgenomen in het protocol.Als het varken gedurende twee minuten dit niet accepteert, wordt een minpunt geregistreerd. Naast het tweemaal daags betreden van de pen tijdens het voeren, komt de verzorger ook overdag in de pen om het hechtingsproces tussen verzorger en varken verder te versnellen. Tijdens deze sessies krijgen de varkens met de hand traktaties aangeboden.De verzorger zit net in de pen en biedt het varken een stuk appel aan met een uitgestrekte arm. Als het varken de appel eet gedurende het tijdsbestek van twee minuten, wordt een plus geregistreerd in de checklist. Als het de appel niet uit de hand eet, wordt een minpuntje geregistreerd.De laatste stap in de overgangsfase is dat het varken accepteert dat het door één verzorger wordt aangeraakt, terwijl een tweede verzorger het varken traktaties geeft. Dit is moeilijker te accepteren voor het varken omdat het zich meer bewust is van zijn omgeving en twee mensen nu in de buurt zijn. Na voltooiing van de overgangsfase zullen de varkens het verzamelen van basisuitkomstmetingen mogelijk maken, zoals het nemen van een temperatuur, het manipuleren van de oren om een bloedmonster te verzamelen of het bevestigen van een zak om een urinemonster te verzamelen.Na het voltooien van de overgangsfase zijn de varkens klaar om te beginnen met positieve versterkingstraining. Een clicker wordt gebruikt om de komende beloning aan te geven. Het gebruik van een clicker in vergelijking met een spraaksignaal stelt verschillende verzorgers in staat om dezelfde dieren te trainen.Wanneer de clickertraining wordt gestart, worden de varkens buiten hun thuishok gebracht omdat er meer ruimte nodig is om het varken vrij te laten bewegen. De vrije ruimte tussen rijen pennen of aangewezen ruimte kan worden gebruikt. Kort na de introductie van de clicker wordt een target stick geïntroduceerd.Een doelstick is gewoon een stok met een markeringsgebied aan het ene uiteinde. We hebben er zelf een gemaakt met behulp van een bamboestok en plakband. Dat maakt het gemakkelijk om de tape te vervangen als deze vuil wordt van contact met de snuiten van de varkens.Het varken mag rondzwerven, maar uiteindelijk zal het contact maken met de verzorger en de verzorger klikt en geeft het varken in één beweging een beloning. Meerdere klikken zijn snel achter elkaar. Elke klik wordt gevolgd door een beloning.Het varken moet begrijpen dat wanneer het een klik hoort, er onmiddellijk een beloning volgt. Een paar sessies moeten worden gebruikt om ervoor te zorgen dat het varken begrijpt dat een klik een traktatie betekent, omdat het belangrijk is om het signaal snel aan het varken te kunnen geven om een specifiek gedrag te kunnen belonen. Wanneer de link tussen de klik en de beloning goed wordt begrepen door het varken, kan de doelstick worden geïntroduceerd.Het doeleinde wordt voor het varken gehouden en op een gegeven moment zal het varken het uit nieuwsgierigheid aanraken. Op het moment dat de snuit de doelklik en beloning raakt. Het doel wordt opnieuw geplaatst en de taak wordt een aantal keren herhaald.Vervolgens wordt het doel geleidelijk verder van het varken verwijderd om het varken te laten bewegen om het aan te raken. Binnen een paar sessies zal het varken hebben geleerd om zich te verplaatsen na de doelstick. In het begin zal het varken het contact van het doel verbreken als het wordt afgeleid door nieuwe objecten, andere varkens of geluiden.Maar met consistente training kan het varken de doelstok nauwlettend volgen, zelfs wanneer er verstoringen optreden. Wanneer het varken de doelstok kan volgen, kan de stok worden gebruikt om het varken door de faciliteit te verplaatsen. Op onze afdeling wordt het gebruikt om de varkens in transportkisten te begeleiden, of om de varkens naar onze vloerschaal te verplaatsen en terug naar hun thuishok.Concluderend heeft de implementatie van een gestructureerde overgangsfase aangetoond hoe snel en soepel de varkens zich kunnen aanpassen aan de onderzoeksfaciliteit en dat ze aanzienlijk minder gestrest zijn wanneer ze experimenten aangaan. Vermindering van het stressniveau van varkens is een belangrijk onderdeel van onze 3R-strategie om dierenwelzijn en wetenschap te verbeteren. De toewijding van onze verzorgers is ook toegenomen, en dit draagt bij aan de zorgcultuur van de afdeling en de samenwerking tussen wetenschappers en verzorgers.

transition-farm-pigs-to-research-pigs-using-designated-checklist

Research

JoVE Journal

Behavior

Gedrag

De ontwikkeling van nieuwe verfijningstrategieën voor laboratoriummuizen is een uitdagende taak die bijdraagt aan het vervullen van het 3R-principe. Dit protocol introduceert clickertraining als een cognitieve verrijkingsprogramma voor laboratoriummuizen.

Introductie van Clicker Training als een Cognitive Verrijking voor Laboratory Mice

Dit protocol voert een methode van verandering van de kooi voor ratten via clickertraining. Ratten leren het gewenste gedrag niet alleen door directe opleiding, maar ook door observationele leren. De uitvoering van dit protocol snel en gemakkelijk kan helpen om welzijn en hygiëne in knaagdier faciliteiten te verbeteren.

Met behulp van Clicker Training en sociale waarneming te leren ratten vrijwillig overstappen kooien

Dit protocol beschrijft een nieuwe gedrags test — de menselijke aanpak test in de thuis pen van de varkens — om functionele tekorten bij laboratorium varkens te detecteren na subconcussief traumatisch hersenletsel.

Niet-invasieve, in-pen benaderings test voor varkens die in het laboratorium zijn ondergebracht

Dit protocol laat zien hoe praktische zinvolle milieu verrijking voor varkens die in de verschillende stadia van hun leven op een lattenbodem zijn ondergebracht, en het verzamelen van speeksel monsters op een niet-invasieve manier voor de meting van cortisol concentraties, als biomarker voor acute stress.

Het verstrekken van zinvolle milieu verrijking en het meten van speeksel cortisol bij varkens ondergebracht op een roostervloer

Het huidige protocol beschrijft beknopte experimentele details over de evaluatie en interpretatie van in vivo koppelgegevens verkregen via elektrische stimulatie van de gemeenschappelijke peroneuszenuw bij verdoofde varkens.

In vivo Meting van Hindlimb Dorsiflexor Isometrisch koppel van varken

Het gebruik van varkens in onderzoek is de afgelopen jaren toegenomen. Niettemin worden varkens gekenmerkt door een moeilijke anatomie van de luchtwegen. Door aan te tonen hoe endoscopisch geleide endotracheale intubatie moet worden uitgevoerd, beoogt dit protocol de veiligheid van proefdieren verder te verhogen om dierenleed en onnodige dood te voorkomen.

Endotracheale intubatie met behulp van een flexibele intubatie-endoscoop als een gestandaardiseerd model voor veilig luchtwegbeheer bij varkens

Trainingsprotocollen met positieve bekrachtiging voor routinematige houderijprocedures bij konijnen werden ontwikkeld en bleken succesvol te zijn, aangezien de konijnen op betrouwbare wijze het getrainde gedrag vertoonden tijdens het wekelijkse algemene onderzoek. Het oppakken van de konijnen met de transportbox was minder aversief dan de conventionele hanteringstechniek.

Laboratoriumkonijnen trainen om routinematige houderijprocedures te verfijnen

Dit artikel beschrijft het gebruik van een virtuele winkel op het bureaublad om virtuele winkelomgevingen te creëren om consumentengedrag in de winkel te onderzoeken. Een beschrijving van het protocol voor het bouwen en uitvoeren van experimenten, bijvoorbeeld uit een experiment met betrekking tot winkelopmaak en belangrijke overwegingen bij het uitvoeren van virtuele winkel experimenten.

Een virtuele winkel gebruiken als onderzoeksinstrument om consumentengedrag in de winkel te onderzoeken

Cellen weergeven van verschillende morphologies en stellen een verscheidenheid van interacties met hun buren. Dit protocol wordt beschreven hoe te onthullen van de morfologie van afzonderlijke cellen en cel-cel interactie onderzoeken met behulp van de gevestigde Gal4/UAS expressie systeem.

Toepassing van MultiColor FlpOut techniek om hoge resolutie eencellige Morphologies en cel interacties van Glia in Drosophila te studeren

Dit manuscript beschrijft de prioritering van het onderzoek door getroffen gemeenschappen (RPAC) protocol en bevindingen van het gebruik ervan met vrouwen in gevaar voor vroeggeboorte. Met behulp van het protocol, vrouwen geïdentificeerd en geprioriteerd hun onbeantwoorde vragen over zwangerschap, geboorte en neonatale zorg gericht op het vaststellen van de prioriteiten van onderzoek te beïnvloeden door financiers en onderzoekers.

Een nieuwe methode om de vrouwen van kleur bij hoog risico op vroeggeboorte in onderzoek prioritering te betrekken

Leer hoe varkens met positieve bekrachtiging en socialisatie naar een onderzoeksomgeving worden overgebracht. Deze methode verbetert het dierenwelzijn en maakt dieren kalmer voor wetenschappelijk onderzoek.

Overgang van boerderijvarkens naar onderzoeksvarkens met behulp van een aangewezen checklist, gevolgd door het starten van clickertraining - een verfijningsinitiatief (Video) | JoVE Journal

Overgang van boerderijvarkens naar onderzoeksvarkens met behulp van een aangewezen checklist, gevolgd door het starten van clickertraining - een verfijningsinitiatief

Meer video's verkennen