4 juli 2021
Hier stellen we een nieuw Sprague-Dawley (SD) rattenmodel van superieure sagittale sinus (SSS) trombose vast via een draademboliemethode, en de stabiliteit en betrouwbaarheid van het model werden geverifieerd.
Door het ontbreken van een ideaal diermodel is de studie van CVST sterk beperkt. Nu werd met succes een nieuw type SD-Rat CVST-model vastgesteld door zelfgemaakte draadembolie centripetally in te voegen op de oorspronkelijke locatie van SSS, die verschillende of oncontroleerbare interferentiefactoren in klinische toestand standaardiseerde. Nadat de rat met succes is verdoofd door intra-peritoneale injectie, brengt u gel oftalmisch oogsmeermiddel aan nadat de rat op stereotaxic frame is geplaatst om de hoornvliezen te beschermen tegen uitdroging tijdens anesthesie.
Verwijder het haar op de bovenkant van het hoofd van de rat. Om dit proces effectiever uit te voeren kan de eerdere stap eerder in de voorbereidingsruimte worden uitgevoerd. Nadat de rat met succes is verdoofd door een verdovingsmachine, breng ook steriel oogsmeermiddel aan.
Steriliseer het oppervlak bovenop het hoofd van de rat met 5% povidonjodium. Wissel dit drie keer af met 75% ethanol. Maak een huidincisie van ongeveer twee centimeter lang in het midden van het hoofd.
De fascia wordt opengesneden met een scalpel. En verwijder dan voorzichtig de bovenste fascia en het periosteum om de schedel volledig bloot te leggen. Bevestig de positie van de voorste fontanelle, A en de achterste fontanelle, B.Gebruik het gebied tussen de coronale hechting en de elleboog hechtdraad, als het bloedstroomobservatiegebied.
Om te voorkomen dat de schedel de waarneming beïnvloedt tijdens laser-spikkelbloedstroombeeldvorming, verdunt u de schedel in het observatiegebied totdat de bloedvaten duidelijk zichtbaar zijn. Gebruik tijdens het slijpen van de schedel een spuit met normale temperatuur om de dura herhaaldelijk te spoelen, om een uitbarsting op hoge temperatuur naar de hersenschors te voorkomen. Deze stap en het volgende worden allemaal uitgevoerd onder een ontledende microscoop.
In deze figuur is het rood omzoomde rechthoekige gebied het bloedstroomobservatiegebied. De grootte van de uitgedunde schedel moet ongeveer een centimeter vermenigvuldigd zijn met een centimeter. En het blauw gevoerde rechthoekige gebied is het botvenster.
Ongeveer zes millimeter vermenigvuldigd met vier millimeter. Het rode cirkelvormige gebied is het pariëtale gewricht en de pijl wijst naar de SSS. Wanneer de schedel te zien is, gebruik dan een pincet om voorzichtig de resterende botstukken van het botvenster te maken.
Kies een geschikte schroefdraadsonde, gebruik het voorste punt of als stekkerpunt. Prik het voorzichtig door met een spuitnaald van 2 millimeter en steek snel een draadsonde in het voorbereidingspunt. Op dit moment moet de hoek tussen het uiteinde van het uiteinde van de schroefdraadsonde en de SSS ongeveer 30 tot 45 graden zijn.
Stel vervolgens de hoek tussen het uiteinde van de schroefdraadsonde en de SS in op nul tot 10 graden. En steek de SSS langzaam in de structuur totdat het hoofd het posteria-uiteinde van de sinusconfluentie bereikt. Snelle ademhaling kan optreden wanneer de SSS wordt doorboord.
Als het uiteinde van de draadsonde niet snel in het voorbereidingspunt kan worden gestoken, gebruik dan een klein gaasje of een wattenbolletje om het sondepunt voorzichtig in te drukken terwijl u langzaam naar beneden glijdt om het voorbereidingspunt voorzichtig bloot te leggen. Dat is gebeurd, snel invoegen aan het einde van de draad die in de SSS wordt gebracht. De blauwe pijl toont de status van het sonde-inzetstuk in de SSS vanaf het plugpunt.
Witte pijl toont het lichaam van de sonde en de rode pijl toont dat het hoofd is. Snijd daarna het overtollige deel van de staart af. Hecht de huid van de rat.
Desinfecteer de huid drie keer en verwijder de rat uit het stereotaxic frame. Gebruik de laserlichtbron om het observatiegebied van de bloedstroom gelijkmatig te verlichten. De afbeelding registreert het dynamische proces van de threadsonde in de SSS.
In deze figuur A en B toont een vergelijking van de bloedstroom voor en na draad embolisatie insertie. C toont aan dat de bloedstroom in de SSS en hersenaders aanzienlijk is afgenomen in vergelijking met zowel in de middelste cerebrale slagader als in de haarvaten. Bevestig het dier op de MRI-scantafel.
Kalibreer de hersenpositie door het scannen te positioneren en voer T2WI- en MRI-sequentiescans uit nadat de positie is bevestigd. Om de toestand van de draadsonde in de SSS duidelijker te observeren, werd de C2-kop gemonteerde methode gebruikt om het T2WI-beeld van het rattenbrein weer te geven. In deze afbeelding tonen A, B en C de draadsonde in de SSS vanuit de horizontale positie, sagittale positie en de schedelpositie.
De afbeelding laat zien dat de draadsonde op zijn plaats zit, wat de embolisatie van de SSS bevestigt. Omdat het SSS-trombosemodel van ratten gemakkelijk kan worden vastgesteld om het trauma te minimaliseren, goede stabiliteit biedt en de chemische timing en de locatie nauwkeurig kan regelen, is het een ideaal nieuw type CVST-model.
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's
Dit artikel presenteert een nieuw en betrouwbaar Sprague-Dawley (SD) ratmodel voor cerebrale veneuze sinus-trombose (CVST), waarbij specifiek de sinus sagittalis superior (SSS) wordt getarget met behulp van een draad-embolisatietechniek. Het model is ontworpen om experimentele condities te standaardiseren, trauma te minimaliseren en nauwkeurige controle over de ischemische timing en locatie mogelijk te maken, waardoor beperkingen van eerdere CVST-diermodellen worden weggenomen en de studie naar de pathofysiologie van CVST wordt gefaciliteerd.
Betrouwbare preklinische modellen zijn essentieel voor het verminderen van risico's bij vroegstadium drug discovery voor cerebrovasculaire aandoeningen en voor het verduidelijken van ziektemechanismen wanneer klinische variabiliteit translationeel inzicht beperkt. Het ratmodel voor draadembolisatie bij occlusie van de sinus sagittalis superior (SSS) maakt een gestandaardiseerde, reproduceerbare inductie van cerebrale veneuze sinustrombose (CVST) mogelijk, wat bijdraagt aan de voorspellende betrouwbaarheid van mechanistische en therapeutische studies. Dit model pakt een kritiek knelpunt in de discovery pipeline aan door gecontroleerde hypothesetests en een robuuste vergelijkbaarheid tussen studies mogelijk te maken.
Dit model integreert in het ontdekkingscontinuüm, van vroege mechanistische studies tot preklinische evaluatie van lead-verbindingen, en biedt een gestandaardiseerd platform voor hypothesetoetsing en translationeel onderzoek.