Name: Activiteit van Posterior Lateral Line Afferent Neurons tijdens het zwemmen in Zebrafish (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-02-10T15:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 34 s
Description: Leer patch-elektrofysiologie voor het monitoren van sensorische neuronactiviteit tijdens motorische commando's in zebrafish. Deze methode biedt inzicht in haarcelcircuits relevant voor menselijke gehoorstoornissen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

We erkennen dankbaar de steun van het National Institute of Health (DC010809), National Science Foundation (IOS1257150, 1856237) en het Whitney Laboratory for Marine Biosciences aan J.C.L. We willen voormalige en huidige leden van het Liao Lab bedanken voor het stimuleren van discussies.

<ol><li>Trapani, J. G., Nicolson, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanism+of+spontaneous+activity+in+afferent+neurons+of+the+zebrafish+lateral-line+organ%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Mechanism of spontaneous activity in afferent neurons of the zebrafish lateral-line organ.</a> The Journal of Neuroscience. 31 (5), 1614-1623 (2011).</li>
<li>Haehnel-Taguchi, M., Akanyeti, O., Liao, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Afferent+and+motorneuron+activity+in+response+to+single+neuromast+stimulation+in+the+posterior+lateral+line+of+larval+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Afferent and motorneuron activity in response to single neuromast stimulation in the posterior lateral line of larval zebrafish.</a> Journal of Neurophysiology. 112 (6), 1329-1339 (2014).</li>
<li>Levi, R., Akanyeti, O., Ballo, A., Liao, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Frequency+response+properties+of+primary+afferent+neurons+in+the+posterior+lateral+line+system+of+larval+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Frequency response properties of primary afferent neurons in the posterior lateral line system of larval zebrafish.</a> Journal of Neurophysiology. 113 (2), 657-668 (2015).</li>
<li>Harris, G. G., Fishkopf, L. S., Flock, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Receptor+potentials+from+hair+cells+of+the+lateral+line%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Receptor potentials from hair cells of the lateral line.</a> Science. 167 (3914), 76-79 (1970).</li>
<li>Dow, E., Jacobo, A., Hossain, S., Siletti, K., Hudspeth, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Connectomics+of+the+zebrafish%27s+lateral+line+neuromast+reveals+wiring+and+miswiring+in+a+simple+microcircuit%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Connectomics of the zebrafish's lateral line neuromast reveals wiring and miswiring in a simple microcircuit.</a> eLife. 7, 33988(2018).</li>
<li>Obholzer, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vesicular+glutamate+transporter+3+is+required+for+synaptic+transmission+in+zebrafish+hair+cells%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Vesicular glutamate transporter 3 is required for synaptic transmission in zebrafish hair cells.</a> The Journal of Neuroscience. 28 (9), 2110-2118 (2008).</li>
<li>Keen, E. C., Hudspeth, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transfer+characteristics+of+the+hair+cell%27s+afferent+synapse%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Transfer characteristics of the hair cell's afferent synapse.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 103 (14), 5537-5542 (2006).</li>
<li>Li, G., Keen, E., Andor-Ardó, D., Hudspeth, A. J., von Gersdorff, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+unitary+event+underlying+multiquantal+EPSCs+at+a+hair+cell%27s+ribbon+synapse%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">The unitary event underlying multiquantal EPSCs at a hair cell's ribbon synapse.</a> The Journal of Neuroscience. 29 (23), 7558-7568 (2009).</li>
<li>Manley, G. A., Robertson, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+spontaneous+activity+of+auditory+neurons+in+the+spiral+ganglion+of+the+guinea-pig+cochlea%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Analysis of spontaneous activity of auditory neurons in the spiral ganglion of the guinea-pig cochlea.</a> The Journal of Physiology. 258 (2), 323-336 (1976).</li>
<li>Kiang, N. Y. S., Watanabe, T., Thomas, E., Clark, L. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKiang%2C+NYS+%22Discharge+patterns+of+single+fibers+in+the+cat%27s+auditory+nerve%22">Discharge patterns of single fibers in the cat's auditory nerve</a>. , MIT Press. Cambridge MA. (1965).</li>
<li>Corey, D. P., Hudspeth, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ionic+basis+of+the+receptor+potential+in+a+vertebrate+hair+cell%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Ionic basis of the receptor potential in a vertebrate hair cell.</a> Nature. 281 (5733), 675-677 (1979).</li>
<li>Trapani, J. G., Nicolson, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiological+recordings+from+zebrafish+lateral-line+hair+cells+and+afferent+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Physiological recordings from zebrafish lateral-line hair cells and afferent neurons.</a> Methods in Cell Biology. 100, 219-231 (2010).</li>
<li>Reinig, S., Driever, W., Arrenberg, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+descending+diencephalic+dopamine+system+is+tuned+to+sensory+stimuli%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biology%22%5BJournal%5D)">The descending diencephalic dopamine system is tuned to sensory stimuli.</a> Current Biology. 27 (3), 318-333 (2017).</li>
<li>Zhang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synaptically+silent+sensory+hair+cells+in+zebrafish+are+recruited+after+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Synaptically silent sensory hair cells in zebrafish are recruited after damage.</a> Nature Communications. 9 (1), 1388(2018).</li>
<li>Pichler, P., Lagnado, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Motor+behavior+selectively+inhibits+hair+cells+activated+forward+motion+in+the+lateral+line+of+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biology%22%5BJournal%5D)">Motor behavior selectively inhibits hair cells activated forward motion in the lateral line of zebrafish.</a> Current Biology. 30 (1), 150-157 (2020).</li>
<li>Olszewski, J., Haehnel, M., Taguchi, M., Liao, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+larvae+exhibit+rheotaxis+and+can+escape+a+continuous+suction+source+using+their+lateral+line%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Zebrafish larvae exhibit rheotaxis and can escape a continuous suction source using their lateral line.</a> PloS One. 7 (5), 36661(2012).</li>
<li>Suli, A., Watson, G. M., Rubel, E. W., Raible, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rheotaxis+in+larval+zebrafish+is+mediated+by+lateral+line+mechanosensory+hair+cells%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Rheotaxis in larval zebrafish is mediated by lateral line mechanosensory hair cells.</a> PLoS One. 7 (2), 29727(2012).</li>
<li>Oteiza, P., Odstcil, I., Lauder, G., Portugues, R., Engert, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+mechanism+for+mechanosensory-based+rheotaxis+in+larval+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A novel mechanism for mechanosensory-based rheotaxis in larval zebrafish.</a> Nature. 547 (7664), 445-448 (2017).</li>
<li>McHenry, M. J., Feitl, K. E., Strother, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Larval+zebrafish+rapidly+sense+the+water+flow+of+a+predator%27s+strike%5BTitle%5D)+AND+%22Biology+Letters%22%5BJournal%5D)">Larval zebrafish rapidly sense the water flow of a predator's strike.</a> Biology Letters. 5 (4), 477-479 (2009).</li>
<li>Stewart, W. J., Cardenas, G. S., McHenry, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+larvae+evade+predators+by+sensing+water+flow%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Zebrafish larvae evade predators by sensing water flow.</a> The Journal of Experimental Biology. 216, Pt 3 388-398 (2013).</li>
<li>Mekdara, P. J., Schwalbe, M. A. B., Coughlin, L. L., Tytell, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+lateral+line+ablation+and+regeneration+in+schooling+giant+danios%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">The effects of lateral line ablation and regeneration in schooling giant danios.</a> The Journal of Experimental Biology. 221, Pt 8 175166(2018).</li>
<li>Palmer, L. M., Giuffrida, B. A., Mensinger, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+recordings+from+the+lateral+line+in+free-swimming+toadfish%2C+Opsanus+tau%5BTitle%5D)+AND+%22The+Biological+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Neural recordings from the lateral line in free-swimming toadfish, Opsanus tau.</a> The Biological Bulletin. 205 (2), 216-218 (2003).</li>
<li>Ayali, A., Gelman, S., Tytell, E. D., Cohen, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lateral+line+activity+during+undulatory+body+motions+suggests+a+feedback+link+in+closed-loop+control+of+sea+lamprey+swimming%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+Journal+of+Zoology%22%5BJournal%5D)">Lateral line activity during undulatory body motions suggests a feedback link in closed-loop control of sea lamprey swimming.</a> Canadian Journal of Zoology. 87 (8), 671-683 (2009).</li>
<li>Mensinger, A. F., Van Wert, J. C., Rogers, L. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lateral+line+sensitivity+in+free-swimming+toad+fish+Opsanus+tau%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Lateral line sensitivity in free-swimming toad fish Opsanus tau.</a> The Journal of Experimental Biology. 222, Pt 2 190587(2019).</li>
<li>Montgomery, J., Bodznick, D., Halstead, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hindbrain+signal+processing+in+the+lateral+line+system+of+the+dwarf+scorpionfish+Scopeana+papillosus%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Hindbrain signal processing in the lateral line system of the dwarf scorpionfish Scopeana papillosus.</a> The Journal of Experimental Biology. 199, Pt 4 893-899 (1996).</li>
<li>Montgomery, J. C., Bodznick, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+adaptive+filter+that+cancels+self-induced+noise+in+the+electrosensory+and+lateral+line+mechanosensory+systems+of+fish%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">An adaptive filter that cancels self-induced noise in the electrosensory and lateral line mechanosensory systems of fish.</a> Neuroscience Letters. 174 (2), 145-148 (1994).</li>
<li>Palmer, L. M., Deffenbaugh, M., Mensinger, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensitivity+of+the+anterior+lateral+line+to+natural+stimuli+in+the+oyster+toadfish%2C+Opsanus+tau+%28Linnaeus%29%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Sensitivity of the anterior lateral line to natural stimuli in the oyster toadfish, Opsanus tau (Linnaeus).</a> The Journal of Experimental Biology. 208, Pt 18 3441-3450 (2005).</li>
<li>Russell, I. J., Roberts, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+spontaneous+lateral-line+activity+of+efferent+nerve+stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Inhibition of spontaneous lateral-line activity of efferent nerve stimulation.</a> The Journal of Experimental Biology. 57, 77-82 (1972).</li>
<li>Lunsford, E. T., Skandalis, D. A., Liao, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efferent+modulation+of+spontaneous+lateral+line+activity+during+and+after+zebrafish+motor+commands%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Efferent modulation of spontaneous lateral line activity during and after zebrafish motor commands.</a> Journal of Neurophysiology. 122 (6), 2438-2448 (2019).</li>
<li>Russell, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pharmacology+of+efferent+synapses+in+the+lateral-line+system+of+Xenopus+laevis%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">The pharmacology of efferent synapses in the lateral-line system of Xenopus laevis.</a> The Journal of Experimental Biology. 54 (3), 643-659 (1971).</li>
<li>Roberts, B. L., Russell, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+activity+of+lateral-line+efferent+neurons+in+stationary+and+swimming+dogfish%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">The activity of lateral-line efferent neurons in stationary and swimming dogfish.</a> The Journal of Experimental Biology. 57 (2), 435-448 (1972).</li>
<li>Flock, A., Russell, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+post-synaptic+action+of+efferent+fibres+in+the+lateral+line+organ+of+the+burbot+Lota+lota%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">The post-synaptic action of efferent fibres in the lateral line organ of the burbot Lota lota.</a> The Journal of Physiology. 235 (3), 591-605 (1973).</li>
<li>Montgomery, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noise+cancellation+in+the+electrosensory+system+of+the+thornback+ray%3B+common+mode+rejection+of+input+produced+by+the+animal%27s+own+ventilatory+movement%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Physiology%22%5BJournal%5D)">Noise cancellation in the electrosensory system of the thornback ray; common mode rejection of input produced by the animal's own ventilatory movement.</a> Journal of Comparative Physiology. 155, 103-111 (1984).</li>
<li>Tricas, T. C., Highstein, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Action+of+the+octavolateralis+efferent+system+upon+the+lateral+line+of+free-swimming+toadfish%2C+Opsanus+tau%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Physiology%22%5BJournal%5D)">Action of the octavolateralis efferent system upon the lateral line of free-swimming toadfish, Opsanus tau.</a> Journal of Comparative Physiology. 169 (1), 25-37 (1991).</li>
<li>Weeg, M. S., Land, B. R., Bass, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vocal+pathways+modulate+efferent+neurons+to+the+inner+ear+and+lateral+line%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Vocal pathways modulate efferent neurons to the inner ear and lateral line.</a> The Journal of Neuroscience. 25 (25), 5967-5974 (2005).</li>
<li>Elgoyhen, A. B., Johnson, D. S., Boulter, J., Vetter, D. E., Heinemann, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B19%3A+an+acetylcholine+receptor+with+novel+pharmacological+properties+expressed+in+rat+cochlear+hair+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">α9: an acetylcholine receptor with novel pharmacological properties expressed in rat cochlear hair cells.</a> Cell. 79 (4), 705-715 (1994).</li>
<li>Masino, M. A., Fetcho, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fictive+swimming+motor+patterns+in+wild+type+and+mutant+larval+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Fictive swimming motor patterns in wild type and mutant larval zebrafish.</a> Journal of Neurophysiology. 93 (6), 3177-3188 (2005).</li>
<li>Hentschke, H. abfload. 1.4.0.0. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHentschke%2C+H+%22MATLAB+Central+File+Exchange%22">MATLAB Central File Exchange</a>. , (2020).</li>
<li>Harris, G. G., Milne, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Input-output+characteristics+of+the+lateral-line+sense+organs+of+Xenopus+laevis%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+the+Acoustical+Society+of+America%22%5BJournal%5D)">Input-output characteristics of the lateral-line sense organs of Xenopus laevis.</a> The Journal of the Acoustical Society of America. 40 (1), 32-42 (1966).</li>
<li>Liao, J. C., Haehnel, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiology+of+afferent+neurons+in+larval+zebrafish+provides+a+functional+framework+for+lateral+line+somatotopy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Physiology of afferent neurons in larval zebrafish provides a functional framework for lateral line somatotopy.</a> Journal of Neurophysiology. 107 (10), 2615-2623 (2012).</li>
<li>Song, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mathematical+modeling+and+analyses+of+interspike-intervals+of+spontaneous+activity+in+afferent+neurons+of+the+zebrafish+lateral+line%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Science+Reports%22%5BJournal%5D)">Mathematical modeling and analyses of interspike-intervals of spontaneous activity in afferent neurons of the zebrafish lateral line.</a> Nature Science Reports. 8, 14851(2018).</li>
<li>Liao, J. C., Fetcho, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shared+versus+specialized+glycinergic+spinal+interneurons+in+axial+motor+circuits+of+larval+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Shared versus specialized glycinergic spinal interneurons in axial motor circuits of larval zebrafish.</a> The Journal of Neuroscience. 28 (48), 12982-12992 (2008).</li>
<li>von Holst, E., Mittelstaedt, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+principle+of+reafference%3A+interactions+between+the+central+nervous+system+and+the+peripheral+organs%5BTitle%5D)+AND+%22Die+Naturwissenschften%22%5BJournal%5D)">The principle of reafference: interactions between the central nervous system and the peripheral organs.</a> Die Naturwissenschften. 37, 463(1950).</li>
<li>Crapse, T. B., Sommer, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corollary+discharge+across+the+animal+kingdom%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews.+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Corollary discharge across the animal kingdom.</a> Nature Reviews. Neuroscience. 9 (8), 587-600 (2008).</li>
<li>Brichta, A. M., Goldberg, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Responses+to+efferent+activation+and+excitatory+response-intensity+relations+of+turtle+posterior-crista+afferents%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Responses to efferent activation and excitatory response-intensity relations of turtle posterior-crista afferents.</a> Journal of Neurophysiology. 83 (3), 1224-1242 (2000).</li>
</ol>

De auteurs verklaren geen concurrerende financiële belangen.

Het beschreven experimentele protocol biedt het potentieel om endogene veranderingen in sensorische input over motorisch gedrag te monitoren in een intact, gewerveld gewerveld gedrag. In het bijzonder beschrijft het een in vivo benadering van het uitvoeren van gelijktijdige extracellulaire opnames van laterale lijnafferente neuronen en ventrale motorwortels bij larvale zebravissen. Spontane afferente activiteit werd eerder gekarakteriseerd bij zebravissen zonder rekening te houden met potentiële gelijktijdige motorische ...

Afferent neuronen van mechanosensorische systemen verzenden informatie van haarcellen naar de hersenen tijdens het gehoor en evenwicht. Elektrofysiologie kan de gevoeligheid van afferente neuronen onthullen door middel van directe opnames. Hoewel hele celpatches van haarcellen een uitdaging kunnen zijn, is het opnemen van downstream afferente neuronen gemakkelijker en maakt het mogelijk om actiepotentiaal te beoordelen als reactie op gecontroleerde stimulaties1,2,3. Stimulerende haarcellen leiden tot hun afbuiging, die mechanosensorische structuren wijzigt, waardoor een toename van actiepotentiaal (spikes) in afferente neuronen4,5,6wordt geactiveerd . Bij afwezigheid van externe stimuli pieken afferente neuronen ook spontaan als gevolg van glutamaatlek uit de haarcellen op afferent post-synaptische terminals7,8, en is aangetoond dat ze bijdragen aan het handhaven van gevoeligheid9,10. Patchklemregistratie van afferente activiteit maakt observatie van haarcelgevoeligheid en signaaldynamiek mogelijk die niet mogelijk zijn met behulp van technieken met een lagere temporele resolutie, zoals in microfonica11,12 of functionele calciumbeeldvorming13,14,15. Het volgende protocol zal het mogelijk maken om afferente activiteit gelijktijdig met motorische commando's te registreren om onmiddellijke veranderingen in de gevoeligheid van haarcellen te onthullen.
Zebravissen (Danio rerio) gebruiken haarcellen in neuromasten die het laterale lijnsysteem samenstellen om waterbeweging ten opzichte van hun lichaam te detecteren, wat wordt vertaald in neurale signalen die essentieel zijn voor navigatie16,17,18,roofdiervermijding, prooivangst19,20en scholing21. De waterstroom kan ook zelf worden gegenereerd door de bewegingen van zwemmen22,23,24,ademhaling22,25,26en voeding27. Dit gedrag bestaat uit repetitieve bewegingen die haarcellen kunnen vermoeien en de gevoeligheid kunnen aantasten. Daarom is het van cruciaal belang dat het laterale lijnsysteem onderscheid maakt tussen externe (exafferent) en zelfgegenereerde (reafferent) stroomprikkels. Een uitvloeiing dempt zelfgegenereerde stroomsignalen tijdens voortbeweging bij zebravissen. Dit remmende voorspellende motorsignaal wordt via dalende neuronen doorgegeven aan de sensorische receptoren om de input te wijzigen of de verwerking van de reafferent feedback28,29te onderbreken . Baanbrekend werk dat bijdroeg aan ons vroege begrip van dit feedforward-systeem was gebaseerd op in vitro preparaten waarbij de connectiviteit en endogene activiteit van het neurale circuit niet werden gehandhaafd28,30,31,32,33,34,35. Dit protocol beschrijft een benadering van het behoud van een intact neuraal circuit waar endogene feedbackdynamiek wordt gehandhaafd, waardoor een beter begrip van de uitvloeiing in vivo mogelijk wordt.
Het hier geschetste protocol beschrijft hoe posterieure laterale lijn afferent neuron en motorneuron activiteit tegelijkertijd in larvale zebravissen te controleren. Het karakteriseren van afferente signaaldynamiek voor, tijdens en na motorische commando's geeft inzicht in real-time, endogene feedback van het centrale zenuwstelsel die de gevoeligheid van haarcellen tijdens de voortbeweging moduleert. Dit protocol beschrijft welke materialen voorafgaand aan experimenten moeten worden voorbereid en beschrijft vervolgens hoe zebravislarven kunnen worden verlamd en voorbereid. Het protocol zal beschrijven hoe een stabiele losse patchopname van afferent neuronen en extracellulaire ventrale wortel (VR) opnames van motorneuronen tot stand kan worden brengen. Representatieve gegevens die met behulp van dit protocol kunnen worden verkregen, worden gepresenteerd door een voorbeeldig individu en de analyse is uitgevoerd op meerdere replica's van het experimentele protocol. Voorverwerking van gegevens wordt uitgevoerd met behulp van aangepaste geschreven scripts in MATLAB. Over het algemeen is dit in vivo experimentele paradigma klaar om een beter begrip te geven van sensorische feedback tijdens voortbeweging in een model gewerveld haarcelsysteem.

<table><tbody><tr><td>100 mL beker</td><td>PYREX</td><td>1000</td><td>receptakel voor etser</td></tr><tr><td>10x waterimmersie objectief</td><td>Olympus</td><td>UMPLFLN10xW</td><td>lage vergroting voor het positioneren van larven en het opnemen van elektrode</td></tr><tr><td>40x waterimmersie objectief</td><td>Olympus</td><td>LUMPLFLN40XW</td><td>hogere vergroting voor het positioneren van de elektrodetip en het vaststellen van patch-clamp</td></tr><tr><td>abfload.m</td><td></td><td>aanvullend coderingsbestand</td><td>op maat geschreven MATLAB-script voor het converteren van ruwe elektrofysiologische opnames naar.mat-bestanden</td></tr><tr><td>AffVR_preprocess.m</td><td></td><td>aanvullend coderingsbestand</td><td>op maat geschreven MATLAB-script voor het voorverwerken van opnamegegevens</td></tr><tr><td>BNC-coaxiale kabels</td><td>ThorLabs</td><td>2249-C-12</td><td>verbindt versterker- en digitalisatorkanalen; vereist 4</td></tr><tr><td>borosilicaatglazen capillairen met filament</td><td>Warner Instruments</td><td>G150F-3</td><td>binnendiameter: 0,86, buitendiameter: 1,50; capillair glas wordt gebruikt om opname-elektroden te vormen</td></tr><tr><td>burst_detect</td><td></td><td>aanvullend coderingsbestand</td><td>op maat geschreven MATLAB-functie die nodig is om AffVR_preprocess.m uit te voeren</td></tr><tr><td>computer</td><td>N/A</td><td>N/A</td><td>elke computer zou moeten werken</td></tr><tr><td>DC-voeding</td><td>Tenma</td><td>72-420</td><td>gebruikt voor het elektrisch etsen van dissectienelden</td></tr><tr><td>elektrofysiologie-digitalisator</td><td>Axon Instruments, Molecular Devices</td><td>Axon DigiData 1440A</td><td>maakt het verzamelen van patch-clamp-gegevens mogelijk</td></tr><tr><td>filament</td><td>Sutter Instrument Company</td><td>FB255B</td><td>2,5 mm box filament gebruikt in micropipet-puller</td></tr><tr><td>fijne pincet</td><td>Fine Science Tools</td><td>Dumont #5 (0,05 x 0,02 mm) Artikelnr. 11295-10</td><td>gebruikt om larven te manipuleren en pinnen te plaatsen</td></tr><tr><td>vaste stage DIC-microscoop</td><td>Olympus</td><td>BX51WI</td><td>microscoop die wordt gebruikt om patch-clamp-opnames te visualiseren en vast te stellen</td></tr><tr><td>flexibele, versmallende pipettip</td><td>Fisher Scientific</td><td>02-707-169</td><td>flexibele tips maken inbrenging in opname-elektrode mogelijk om extracellulaire oplossing aan de punt af te geven</td></tr><tr><td>FluoroDish</td><td>World Precision Instruments Inc.</td><td>FD3510-100</td><td>dekglas met glazen bodem opnamebakje</td></tr><tr><td>KimWipe</td><td>KimTech</td><td>34155</td><td>takendoekje gebruikt voor het wegwiken van overtollig vocht van larven</td></tr><tr><td>Kwik-Gard</td><td>World Precision Instruments Inc.</td><td>710172</td><td>zelfmengende sylgard-elastomeer</td></tr><tr><td>MATLAB</td><td>MathWorks</td><td>R2020b</td><td>opdrachtregelsoftware voor het voorverwerken van gegevens</td></tr><tr><td>micro-elektrode versterker</td><td>Axon Instruments, Molecular Devices</td><td>MultiClamp 700B</td><td>patch clamp versterker voor dual kanaal opnames</td></tr><tr><td>microsmeltoven</td><td>Narishige</td><td>MF-830 microsmeltoven</td><td>om opname-elektrode te polijsten</td></tr><tr><td>micromanipulator besturingseenheid</td><td>Siskiyou</td><td>MC1000-eR/T</td><td>4-assige draaiknopcoördinator voor het besturen van micromanipulator</td></tr><tr><td>micropipet-puller</td><td>Sutter Instrument Company</td><td>Flaming/Brown P-97</td><td>voor het trekken van capillair glas in opname-elektroden</td></tr><tr><td>microscoop besturingseenheid</td><td>Siskiyou</td><td>MC1000e</td><td>plaatst de microscoop rond de vaste stage en voorbereiding</td></tr><tr><td>gemotoriseerde micromanipulator</td><td>Siskiyou</td><td>MX7600</td><td>plaatst de headstage en bevestigde opname-elektrode voor patch-clamp-opname</td></tr><tr><td>MultiClamp Commander</td><td>Molecular Devices</td><td>2.2.2</td><td>te downloaden vanaf de Axon MultiClamp 700B Commander downloadpagina</td></tr><tr><td>optische luchttafel</td><td>Newport Corporation</td><td>VH3036W-OPT</td><td>breadboardisolatietafel om microscoop te laten zweven en trillingen tijdens opnames te minimaliseren</td></tr><tr><td>pCLAMP</td><td>Molecular Devices</td><td>10.7.0</td><td>te downloaden vanaf de Axon pCLAMP 10 Electrophysiology Data Acquisition &amp; Analysis Software Download pagina</td></tr><tr><td>permanente inktmarker</td><td>Sharpie</td><td>bestel bij amazon.com</td><td>voor het markeren van de voorkant van de VR-elektrode om de juiste oriëntatie te garanderen bij het plaatsen in de pipethouder</td></tr><tr><td>petrischaal</td><td>Falcon</td><td>35-3001</td><td>gebruikt om larven in verlammend middel te dompelen</td></tr><tr><td>pipethouder</td><td>Molecular Devices</td><td>1-HL-U</td><td>houdt opname-elektrode vast en verbindt met de headstage</td></tr><tr><td>pneumatische transducer</td><td>Fluke Biomedical Instruments</td><td>DPM1B</td><td>voor het regelen van de interne druk van de opname-elektrode</td></tr><tr><td>kaliumhydroxide</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>221473-25G</td><td>etser voor het etsen van dissectienelden</td></tr><tr><td>siliconenbuis</td><td>Tygon</td><td>14-169-1A</td><td>slang om pneumatische transducer met pipethouder te verbinden</td></tr><tr><td>spike_detect</td><td></td><td>aanvullend coderingsbestand</td><td>op maat geschreven MATLAB-functie die nodig is om AffVR_preprocess.m uit te voeren</td></tr><tr><td>stereomicroscoop</td><td>Carl Zeiss</td><td>Stemi 2000-C</td><td>gebruikt om punten van pinnen te visualiseren en tijdens de voorbereiding van larven</td></tr><tr><td>rechte randmesje</td><td>Canopus</td><td>bestel bij amazon.com</td><td>snijdt het wolfraamdraad terwijl dissectienelden worden gemaakt</td></tr><tr><td>swimbout_detect</td><td></td><td>aanvullend coderingsbestand</td><td>op maat geschreven MATLAB-functie die nodig is om AffVR_preprocess.m uit te voeren</td></tr><tr><td>spuit</td><td>Becton Dickinson Compoany</td><td>309602</td><td>gevuld met extracellulaire oplossing om in opname-elektroden te injecteren</td></tr><tr><td>transferpipet</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z135003-500EA</td><td>eenmalig, niet-steriele pipet voor het overbrengen van larven</td></tr><tr><td>tricaine methaansulfonaat</td><td>Syndel</td><td>12854</td><td>farmaceutisch anesthetisch middel dat wordt gebruikt om larven met een hoge dosis te euthanasiëren.</td></tr><tr><td>wolfraamdraad</td><td>World Precision Instruments Inc.</td><td>715500</td><td>0,002 inch, 50,8 μm diameter; gebruikt om dissectienelden te maken</td></tr><tr><td>vacuümfiltratie-eenheid</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>SCGVU11RE</td><td>eenmalig, steriele, vacuümfiltratie-eenheden die worden gebruikt om extracellulaire oplossing te

activiteit van posterior lateral line afferent neurons tijdens het zwemmen in zebrafish

Activity of Posterior Lateral Line Afferent Neurons during Swimming in Zebrafish

Sensorische systemen verzamelen signalen die essentieel zijn voor het sturen van gedrag, maar dieren moeten ontcijferen welke informatie biologisch relevant is. Voortbeweging genereert reafferent signalen die dieren moeten ontwarren van relevante zintuiglijke signalen van de omgeving. Wanneer een vis bijvoorbeeld zwemt, wordt de stroom die wordt gegenereerd door lichaamsgolvingen gedetecteerd door de mechanoreceptieve neuromasten, bestaande uit haarcellen, die het laterale lijnsysteem vormen. De haarcellen sturen vervolgens vloeibare bewegingsinformatie van de sensor naar de hersenen via de sensorische afferente neuronen. Tegelijkertijd wordt de uitvloeiing van het motorcommando doorgegeven aan haarcellen om sensorische overbelasting te voorkomen. Het remmende effect van voorspellende motorische signalen tijdens de voortbeweging is daarom van cruciaal belang bij het evalueren van de gevoeligheid van het laterale lijnsysteem. We hebben een in vivo elektrofysiologische benadering ontwikkeld om tegelijkertijd posterieure laterale lijnafferente neuron en ventrale motorische wortelactiviteit bij zebravislarven (4-7 dagen na bevruchting) te monitoren die enkele uren kan duren. Extracellulaire opnames van afferent neuronen worden bereikt met behulp van de losse patch clamp techniek, die activiteit van enkele of meerdere neuronen kan detecteren. Ventrale wortelopnamen worden uitgevoerd door de huid met glazen elektroden om motorneuronactiviteit te detecteren. Ons experimentele protocol biedt het potentieel om endogene of opgeroepen veranderingen in sensorische input over motorisch gedrag te volgen in een intact, gewerveld gewerveld gedrag.

Nadat zebravislarven goed zijn geïmmobiliseerd en de achterste laterale lijn afferent ganglion en VR-opname is bereikt, kan activiteit in zowel afferent- als motorneuronen tegelijkertijd worden gemeten. Opnamekanalen worden weergegeven met behulp van gap-free opnameprotocollen (stap 1.4) voor continue monitoring van afferent- en VR-activiteit. In real-time kan een afname van de spontane afferente spikesnelheid gelijktijdig met VR-activiteit worden waargenomen die wijst op fictieve zwemperioden (Figuu...

We beschrijven een protocol om veranderingen in de activiteit van het afferente neuron te volgen tijdens motorische commando's in een model gewerveld haarcelsysteem.

Activiteit van Posterior Lateral Line Afferent Neurons tijdens het zwemmen in Zebrafish

Sensory systems gather cues essential for directing behavior, but animals must decipher what information is biologically relevant. Locomotion generates ...

Dit protocol stelt de onderzoeker in staat om de activiteit en reactie van enkele sensorische neuronen op een gecontroleerde stimulatie in een intacte gedraagteerde wervels te volgen. Deze patch elektrofysiologie is een snelle en directe manier om op te nemen van de spiking activiteit van individuele neuronen in real time. En dat zorgt voor een betere tijdresolutie en gevoeligheid tegen lagere kosten dan de meeste optische beeldvormingstechnieken.De laterale lijn haarcellen zijn homoloog aan die van het menselijk binnenoor. Dus deze techniek is klaar om de eigenschappen van haarcelcircuits te onthullen die van toepassing zijn op menselijke doofheid en gehoorstoornissen. Elektrofysiologie is een ambacht met behulp van fijne motoriek die moet worden gezien en fysiek geïmiteerd.Alleen tekstinstructies laten te veel ruimte voor verkeerde interpretatie. Om te beginnen, doseer een dunne laag zelfmengende siliconen elastomeer zoals Sylgard in een afdekvorm van weefselkweekschaal met glazen bodem om een siliconen elastomeer bodemopnameschaal te maken. Om dissectiepennen te maken, geeft u een negatieve lading van vijf volt aan een bekerglas van 100 milliliter etchant met behulp van een DC-voeding en sluit u een wolfraamdraad aan op de positief geladen uitgang.Dompel de punt van de draad herhaaldelijk in het Etchant-bad totdat de punt tot een scherp punt vernauwt. Snijd onder een stereomicroscoop de draad ongeveer een millimeter van de punt af met een scheermesje met rechte rand. Herhaal dit drie keer en steek vervolgens pinnen in de uitgeharde opnameschaal met behulp van een fijne tang.Om opnameelektroden voor te bereiden, trekt u borosilicaatglas capillaire buizen met behulp van een micropipettrekker met doosfilament. De elektrode moet een tip met een diameter van 30 micrometer hebben met een taps toelopend die zal worden gebruikt om afferente neuronen van de achterste laterale lijn op te nemen. Trek een extra borosilicaat glazen capillaire buis in een paar elektroden met kleinere tipdiameters van één tot vijf micrometer.Houd één elektrode in elke hand en laat de uiteinden voorzichtig over elkaar lopen om de uiteinden te breken. Polijst met behulp van een microsmederij de afgeschuinde punt glad. De uiteindelijke tipdiameter moet tussen de 30 en 50 micrometer zijn.Immobiliseer zebravislarven en breng ze over in een petrischaal van 35 millimeter met behulp van een grote tip om pipet over te brengen. Verwijder zoveel mogelijk van de omringende oplossing. Dompel larven gedurende ongeveer vijf minuten onder in 10 microliter alfa-Bungarotoxine van 0,1%.Was de verlamde larve gedurende 10 minuten met extracellulaire oplossing. Gebruik vervolgens een transferpipet om de larve van het extracellulaire oplossingsbad naar de opnameschaal met siliconenbodem te verplaatsen. Plaats onder een stereomicroscoop de larven voorzichtig met een fijne tang boven het midden van deze siliconenmat, zijdelings met de voorste en achterste uiteinden van het lichaam van links naar rechts.Plaats met behulp van een fijn getipte tang de randpen orthogonaal in de siliconen via de dorsale notochord van de larven direct dorsaal naar de anus. Steek de tweede pen door de notochord aan het einde van de staart en steek de derde pin door de notochord dorsale van de gasblaas. Steek de vierde pen door het blaasje terwijl u een lichte rotatie biedt terwijl de pen in het inkapselingsmiddel wordt geplaatst.Als een lichte rotatie wordt toegepast, kijk uit voor het weefsel tussen het cleithrum en het otic blaasje om de cluster van afferent somata te onthullen. Plaats de penlarve onder het 10-voudige doel op een vast stadium van de DIC-microscoop en oriënteer de mioceptale kloven van de spierblokken parallel aan de linker hoofdstadiumvector. Plaats de aardingsdraad in de badoplossing en zorg ervoor dat deze is aangesloten op het linkerkopstadium.Vul de VR-opname-elektrode met 30 microliters extracellulaire oplossing met behulp van een flexibele gel-ladende pipettip en plaats deze in de pipethouder van het linkerkopstadium. Verhoog de vergroting tot 40 keer en laat de opnamepipet in de schoteloplossing zakken terwijl u positieve druk uitoefent die wordt geproduceerd door een pneumatische transducer. Breng de elektrodepunt over een myoseptum tussen de twee myomeren ventrale naar de laterale lijn totdat de spleet is gecentreerd in de VR-elektrode tip opening Laat de pipet zakken totdat de achterblijvende rand van de tipopening zachtjes contact maakt met het epitheel.Manoeuvreer de pipet na het eerste contact diagonaal om ervoor te zorgen dat de voorrand contact maakt en een afdichting kan genereren. Oefen negatieve druk uit met de pneumatische transducer en houd deze vast. Klik in de patch clamp-software op de Play-knop op de werkbalk om het VR-signaal te bewaken.Zorg ervoor dat de VR-opname wordt bereikt zodra motorneuronactiviteit met Wells stereotiepe burst-signaaldynamiek wordt waargenomen. Vul de afferent opname-elektrode met 30 microliters extracellulaire oplossing en plaats deze in de rechter pipethouder. Laat het vervolgens in de schoteloplossing zakken terwijl u positieve druk uitoefent die wordt geproduceerd door een pneumatische transducer.Zoek de elektrode en breng de elektrodepunt over het monster. Laat met behulp van een micromanipulator de tip van de afferente elektrode zakken totdat deze boven het hakbeen staat. Verhoog de vergroting tot 40 keer onderdompeling en lokaliseer het snijpunt van de achterste laterale lijnzenuw en het cleithrum.Breng de elektrodepunt over het afferente ganglion en laat de pipet zakken totdat de punt in contact komt met het epitheel. Manoeuvreer de elektrode voorzichtig zodat de hele tipomtrek in contact komt met het afferent ganglion. Oefen negatieve druk uit met de pneumatische transducer en houd deze vast.Nadat u op Afspelen in de patchklemsoftware hebt geklikt, moet u ervoor zorgen dat de hele cel losse patchopname van afferent neuronen wordt bereikt wanneer spikes spontaan optreden, ongeveer elke 100 tot 200 milliseconden. Zodra afferent neuron en motor neuron activiteit zijn beide gedetecteerd, klik op de record knop op de werkbalk in piek klem 10 om gelijktijdige gap vrije opnames in beide kanalen vast te leggen. Voer gegevensvoorverwerking uit zoals beschreven in het teksthandschrift.Met behulp van dit gap-free opnameprotocol kan de real-time activiteit van afferent- en VR-neuronen tegelijkertijd worden gemeten. Aangepaste geschreven, voorbewerkingsscripts genereren plots om te helpen bij het visualiseren van piekdetectie met behulp van parameters zoals drempel, minimale duur en minimaal interspike-interval. Geïsoleerde signalen werden verkregen door de detectievariabelen onder- en bovengrens in het voorbewerkingsscript aan te passen.Ventrale wortels spike detectie volgt identieke parameters met extra ingangen. Bursts binnen een motorische opdracht worden gedefinieerd door een minimum van twee pieken binnen 0,1 milliseconden die ten minste vijf milliseconden duren en worden afgebakend door minimaal drie bursts met tussenpozen van minder dan 200 milliseconden Pre-processing scripts zullen secties van afferent activiteit die zijn ingevoerd op een goed gedefinieerde periode van belang overlappen. In dit geval vertoont de gemiddelde spontane activiteit dramatische veranderingen als reactie op het begin van de motorische activiteit die op de X-as wordt weergegeven als tijd gelijk aan nul.Significante verschillen werden ontdekt in afferent spike rates tussen pre-swim spike rates en spike rates van zowel swim als post-swim periodes. Afferent spike tarieven waren negatief gecorreleerd met de zwemduur. Er is geen correlatie gedetecteerd tussen relatieve pieksnelheid en zwemfrequentie.Diergezondheid is het belangrijkste bij het proberen van deze procedure. Het is cruciaal om een snelle bloedstroom te controleren om niet alleen dierenwelzijn te garanderen, maar ook de kans op succes van neurale opname te vergroten. Door gebruik te maken van genetische hulpmiddelen die beschikbaar zijn in Zebrafish, kan dit elektrofysiologieprotocol worden aangevuld met transgene lijnen om anatomische en functionele circuitconnectiviteit in haarcelsystemen en daarbuiten krachtig te onderzoeken.Deze vereenvoudigde modificatie van de patchklemtechniek stelt ons in staat om te monitoren hoe sensorische systemen in vivo functioneren.

activity-posterior-lateral-line-afferent-neurons-during-swimming

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowetenschap

Deze video beschrijft de rheotaxis-test bij zebravissen. De methode omvat het meten van oriëntatiegedrag van zebravissen als reactie op verschillende waterdebieten onder invloed van verschillende magnetische velden.

Zebrafish Rheotaxis Assay: een methode voor het meten van oriëntatiegedrag in reactie op verschillende waterstroomsnelheden

Deze video beschrijft optogenetische technieken door genetisch gemodificeerde somatosensorische neuronen te activeren en een opgewekte gedragsrespons op te nemen met een high-speed videocamera.

Zebravis optogenetica: het activeren van genetisch gemodificeerd somatosensorisch neuron om larvale gedragsreacties te bestuderen

This video demonstrates the recording of electrical signals from the afferent neurons in a paralyzed zebrafish larva by positioning a micropipette near the lateral line ganglion and forming a loose seal for signal capture. The extracellular solution maintains neuronal viability during this process.

Monitoring Electrical Signals from the Afferent Neurons in an Immobilized Zebrafish Larva

Omdat veel zebravismodellen van neurologische en niet-neurologische ziekten worden bestudeerd in de volwassen vissen dan het embryo / larven ontwikkelden we een kwantitatieve dwarslijn regeneratieve test die kan worden toegepast bij de zebravis ziektemodellen volwassene. De test betrokken resolutie bij de 1) neuromast en 2) individuele haar cel niveaus.

Een test voor laterale lijn Regeneration in Adult zebravis

Zebravissen zijn een uitstekend model om spierfunctie en ziekte te bestuderen. Tijdens de vroege embryogenese beginnen zebravissen met regelmatige spiercontracties die een ritmisch zwemgedrag produceren, dat verandert wanneer de spier wordt verstoord. Hier beschrijven we een door aanraking veroorzaakte reactie en een locatiemeting om zwemprestaties te onderzoeken als maatstaf voor spierfunctie.

Met behulp van Touch-opgeroepen Response en Locomotion Testen om Muscle Prestaties en functie in zebravis Assess

Dit manuscript beschrijft werkwijzen voor elektrofysiologische opnames van spinale neuronen van zebravis embryo's en larven. Het preparaat handhaaft neuronen in situ en vaak gaat om minimale dissectie. Deze werkwijzen maken het elektrofysiologisch onderzoek van verschillende spinale neuronen van de initiële elektrische prikkelbaarheid overname door de vroege larvale stadia.

zebravis<em&gt; In Situ</em&gt; Spinal Cord Voorbereiding voor elektrofysiologische registraties van Spinal sensorische en motorische neuronen

De zebravis is een modelsysteem dat heeft veel waardevolle eigenschappen met inbegrip van optische helderheid, snelle externe ontwikkeling, en, met name van belang op het gebied van gehoor en evenwicht extern gelegen zintuiglijke haarcellen. Dit artikel schetst hoe transgene zebrafish kan worden gebruikt voor de gehaltebepaling van zowel de Haarcel mechanosensation en de presynaptische functie in toto.

In Vivo Calcium beeldvorming van dwarslijn haarcellen in larvale zebravis

Laserablatie is een breed toepasbare technologie voor het bestuderen van regeneratie in biologische systemen. Het gepresenteerde protocol beschrijft het gebruik van een standaard laserscanning confocale microscoop voor laserablatie en de daaropvolgende time-lapse beeldvorming van het regenereren van interneuromastcellen in de zebravis laterale lijn.

Confocale Microscoop-gebaseerde Laser Ablatie en Regeneratie Test in Zebrafish Interneuromast Cellen

Volwassen zebravis is in staat tot functioneel herstel na een dwarslaesie en is een vooraanstaand modelsysteem om aangeboren mechanismen van neurale regeneratie op te helderen. Hier beschrijven we zwemuithoudingsvermogen en zwemgedragstests als functionele uitlezingen van regeneratie van het ruggenmerg.

Beoordeling van zwemuithoudingsvermogen en zwemgedrag bij volwassen zebravissen

Hier presenteren we een protocol om twee-foton calciumbeeldvorming uit te voeren in de dorsale voorhersenen van volwassen zebravissen.

Calciumbeeldvorming met twee fotonen van de activiteit van de voorhersenen bij zich gedragende volwassen zebravissen

De neuromusculaire overgang van de zebravislarve is een aantrekkelijk model voor het bestuderen van synaptische fysiologie. Het is vatbaar voor vele experimentele technieken, waaronder elektrofysiologie en optische beeldvorming. Hier beschrijven we een protocol voor het in beeld brengen van synaptische transmissie met behulp van een op pHluorin gebaseerde sonde onder een rechtopstaande epifluorescentiemicroscoop.

Live beeldvorming van het recyclen van synaptische blaasjes in de neuromusculaire overgang van ontlede larvale zebravissen

Leer patch-elektrofysiologie voor het monitoren van sensorische neuronactiviteit tijdens motorische commando's in zebrafish. Deze methode biedt inzicht in haarcelcircuits relevant voor menselijke gehoorstoornissen.

Activiteit van Posterior Lateral Line Afferent Neurons tijdens het zwemmen in Zebrafish

Meer video's verkennen