Name: Modelleren van de effecten van hemodynamische stress op circulerende tumorcellen met behulp van een spuit en naald (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-04-27T14:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 49 s
Description: Leer hoe je kankercellen blootstelt aan korte pulsen van vloeistofschuifspanning met een spuit en naald. Deze methode bootst hemodynamische stress na die circulerende tumorcellen in het bloed ervaren.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De ontwikkeling van het hier gedemonstreerde model werd ondersteund door DOD-subsidie W81XWH-12-1-0163, NIH-subsidies R21 CA179981 en R21 CA196202 en het Sato Metastasis Research Fund.

1. Celvoorbereiding
<ol><li>Laat cellen vrij uit weefselkweekschaal wanneer 70-90% samenvloeit door de aanbevolen richtlijnen voor de gebruikte cellijn te volgen.<ol>
<li>Aspireer bijvoorbeeld het groeimedium voor PC-3-cellen en was de schaal van 10 cm cellen met 5 ml calcium- en magnesiumvrije fosfaatgebufferde zoutoplossing (PBS).</li>
		<li>Aspireer de PBS voordat u 1 ml 0,25% trypsine toevoegt volgens het protocol van de fabrikant.</li>
		<li>Voeg na het observeren van de loslating van de cellen onder een omgekeerde microscoop 5 ml DMEM:F12-medium toe dat 10% foetale runderserum bevat om de trypsine te remmen.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Plaats de celsuspensie in een conische buis.</li>
	<li>Bepaal de celconcentratie en het totale celnummer.</li>
	<li>Pelletcellen door centrifugeren (300 × g gedurende 3 min), aspireren het supernatant en resuspend cellen in serumvrij weefselkweekmedium tot 5 × 105 cellen/ml. OPMERKING: Het is van cruciaal belang dat het testmedium ten minste 1,17 mM Ca++ bevat, aangezien is aangetoond dat extracellulaire Ca++ vereist is voor cellulaire resistentie tegen FSS15.</li>
</ol>2. Blootstelling aan vloeistofschaarspanning
<ol><li>Voordat u cellen aan FSS blootstelt, snijdt u een polystyreenbuis met ronde bodem van 14 ml op de 7 ml-lijn. Meng de celsuspensie, plaats 5 ml van de suspensie in de snijbuis en verzamel statische controlemonsters. OPMERKING: Het volume dat nodig is om het statische monster te verzamelen, is afhankelijk van de gebruikte levensvatbaarheidstest (zie stap 3).</li>
	<li>Trek de celsuspensie in een spuit van 5 ml en bevestig een naald van 30 G 1/2". Maak de naald los, plaats de spuit op een spuitpomp, zet de spuit vast en stel het debiet in om het gewenste FSS-niveau te bereiken. OPMERKING: Tabel 1 toont de maximale wandschuivingsspanning voor verschillende naalden en debieten, evenals het minimumniveau van FSS afhankelijk van de celgrootte (10, 15 en 20 μm). Inspecteer de naald voor gebruik om er zeker van te zijn dat deze niet gebogen is; indien onzeker, vervang de naald door een nieuwe. Naaldintegriteit kan een aanzienlijke impact hebben op het toegepaste FSS-niveau.</li>
	<li>Laat de spuitpomp draaien en verzamel het geschoren monster in de snijbuis onder een hoek van ongeveer 45°, om schuimvorming te verminderen. Verzamel een monster afhankelijk van het type levensvatbaarheidstest of downstream-testbehoeften.<ol>
<li>Verwijder voorzichtig de spuit en naald uit de spuitpomp en gebruik een tang om de naald uit de spuit te verwijderen, waarbij u ervoor zorgt dat u de naald niet aanraakt. OPMERKING: Niet-afgeschuinde naalden kunnen door elkaar worden gebruikt met afgeschuinde naalden als extra veiligheidsmaatregel.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Trek de geschoren suspensie terug in de spuit, bevestig de naald voorzichtig opnieuw met een tang en plaats deze terug in de spuitpomp.</li>
	<li>Herhaal stap 2.3 en 2.4 totdat de celsuspensie is blootgesteld aan het gewenste aantal pulsen FSS. OPMERKING: Om het vermogen van cellen te beoordelen om mechanische vernietiging door FSS-blootstelling te weerstaan, wordt de celsuspensie meestal onderworpen aan 10 pulsen FSS. Het is echter aangetoond dat cellen biologische aanpassingen beginnen te ondergaan als reactie op FSS na 2 pulsen24.</li>
</ol>3. Levensvatbaarheidsmeting
OPMERKING: De levensvatbaarheid kan worden beoordeeld met behulp van enzymatische assays (luciferase, resazurin en WST-1), het tellen van intacte cellen, flowcytometrie of door clonogene assays.
<ol><li>Verzamel voor alle levensvatbaarheidsmetingen een monster voordat u cellen aan FSS blootstelt.<ol>
<li>Neem voor enzymatische assays dubbele 100 μL aliquots en plaats ze in een 96-well plaat.</li>
		<li>Neem voor flowcytometrie één 500 μL aliquot en plaats deze in een buis van 1,5 ml.</li>
		<li>Verzamel voor clonogene assay een aliquot van 100 μL.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Enzymatische test<ol>
<li>Verzamel 100 μL monsters na 1, 2, 4, 6, 8 en 10 pulsen fss-blootstelling en plaats ze in een 96-put plaat.</li>
		<li>Voeg het gewenste substraat toe en volg het protocol voor de gebruikte test:<ol>
<li>Voeg voor resazurin 20 μL van een 0,15 mg/ml oplossing toe aan elke put. Voeg 20 μL resazurin-oplossing van 0,15 mg/ml toe aan putten die alleen al 100 μL medium bevatten. Incubeer gedurende 2 uur in een weefselkweek-incubator van 37 °C. Meet de absorptie met behulp van een plaatlezer die fluorescentie kan lezen (579 excitatie/ 584 emissie).</li>
			<li>Voeg voor luciferase-uitdrukkende cellen 100 μL van 15 mg/ml D-luciferine toe aan 5 ml medium. Voeg 100 μL van die oplossing toe aan elke put die cellen bevat. Wacht 5 minuten en lees de plaat vervolgens met een lezer die compatibel is met luminescentie.</li>
			<li>Voeg voor WST-1 10 μL WST-1 toe aan elke put, inclusief putten die alleen medium bevatten. Incubeer gedurende 4 uur en lees vervolgens de absorptie tussen 420 en 480 nm met behulp van een plaatlezer.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Vergelijk het gemiddelde signaal van elk van de fss-blootgestelde monsters met het gemiddelde statische controlemonster om het percentage levensvatbare cellen te verkrijgen.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Flow cytometrie24<ol>
<li>Verzamel 500 μL monsters en plaats ze in 1,5 ml centrifugebuizen na 1, 2, 5 en 10 pulsen FSS.</li>
		<li>Centrifugeer monsters (500 × g gedurende 3 min) en gooi de supernatanten weg.</li>
		<li>Resuspendeer de pellets met 1 ml calcium- en magnesiumvrije PBS en centrifugeer de monsters (300 × g gedurende 3 min).</li>
		<li>Schors de pellets met 500 μL fluorescentie-geactiveerde celsorteerbuffer (FACS) (PBS met 0,5% runderserumalbumine en 0,1% natriumaziide) met telparels en membraanondoorlatende of levensvatbaarheidskleurstoffen zoals propidiumjodide (1,75 μg/ml).</li>
		<li>Bepaal de levensvatbaarheid door de verhouding van levensvatbare cellen, genormaliseerd tot het tellen van kralen, in geschoren monsters te vergelijken met die van het statische monster.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Clonogene assay<ol>
<li>Neem 100 μL van het statische monster en voeg 900 μL groeimedium toe om een verdunning van 1:10 te maken.</li>
		<li>Neem 100 μL van het verdunde monster van 1:10 en voeg 900 μL groeimedium toe om een laatste verdunning van 1:100 te maken.</li>
		<li>Voeg 100 μL van het verdunningsmonster van 1:100 toe aan elk van de 3 putten van een 6-wells schaal met 2 ml groeimedium.</li>
		<li>Herhaal stap 3.4.1-3.4.3 met monsters die zijn onderworpen aan 10 pulsen FSS.</li>
		<li>Laat de cellen 7-10 dagen groeien zonder het medium te veranderen en controleer op kolonievorming. Zodra kolonies van ≥50 cellen zijn gevormd, aspireren het groeimedium, spoel elk goed af met 1 ml PBS, aspireer de PBS en fix gedurende 5 minuten met 1 ml ijskoude 70% ethanol (EtOH). Belangrijk is dat u zowel geschoren als statische monsters tegelijkertijd repareert</li>
		<li>Na het bevestigen van de monsters, aspireer de EtOH en voeg 1 tot 2 ml kristalvioletoplossing (0,1% kristalviolet in 90% H2O, 10% EtOH) toe gedurende 5 minuten.</li>
		<li>Spoel af met een teveel aan water en laat de plaat drogen</li>
		<li>Tel de kolonies (clusters van ≥50 cellen) voor zowel de statische als de geschoren monsters. Vergelijk de verhouding tussen het gemiddelde aantal kolonies van het geschoren monster en het gemiddelde aantal kolonies uit het statische monster om de levensvatbaarheid te bepalen.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Dillekås, H., Rogers, M. S., Straume, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Are+90%25+of+deaths+from+cancer+caused+by+metastases%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+medicine%22%5BJournal%5D)">Are 90% of deaths from cancer caused by metastases.</a> Cancer medicine. 8 (12), 5574-5576 (2019).</li>
<li>Hanahan, D., Weinberg, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hallmarks+of+cancer%3A+the+next+generation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Hallmarks of cancer: the next generation.</a> Cell. 144 (5), 646-674 (2011).</li>
<li>Strilic, B., Offermanns, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravascular+survival+and+extravasation+of+tumor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Intravascular survival and extravasation of tumor cells.</a> Cancer Cell. 32 (3), 282-293 (2017).</li>
<li>Labelle, M., Hynes, R. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+initial+hours+of+metastasis%3A+the+importance+of+cooperative+host-tumor+cell+interactions+during+hematogenous+dissemination%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discovery%22%5BJournal%5D)">The initial hours of metastasis: the importance of cooperative host-tumor cell interactions during hematogenous dissemination.</a> Cancer Discovery. 2 (12), 1091-1099 (2012).</li>
<li>Krog, B. L., Henry, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biomechanics+of+the+circulating+tumor+cell+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Experimental+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Biomechanics of the circulating tumor cell microenvironment.</a> Advances in Experimental Medicine and Biology. 1092, 209-233 (2018).</li>
<li>Weiss, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metastatic+inefficiency%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Metastatic inefficiency.</a> Advances in Cancer Research. 54, 159-211 (1990).</li>
<li>Zeidman, I., Mc, C. M., Coman, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Factors+affecting+the+number+of+tumor+metastases%3B+experiments+with+a+transplantable+mouse+tumor%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Factors affecting the number of tumor metastases; experiments with a transplantable mouse tumor.</a> Cancer Research. 10 (6), 357-359 (1950).</li>
<li>Fidler, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metastasis%3A+quantitative+analysis+of+distribution+and+fate+of+tumor+embolilabeled+with+125+I-5-iodo-2%27-deoxyuridine%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+National+Cancer+Institute%22%5BJournal%5D)">Metastasis: quantitative analysis of distribution and fate of tumor embolilabeled with 125 I-5-iodo-2'-deoxyuridine.</a> Journal of the National Cancer Institute. 45 (4), 773-782 (1970).</li>
<li>Cameron, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+progression+of+metastasis+in+lung%3A+cell+survival%2C+dormancy%2C+and+location+dependence+of+metastatic+inefficiency%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Temporal progression of metastasis in lung: cell survival, dormancy, and location dependence of metastatic inefficiency.</a> Cancer Research. 60 (9), 2541-2546 (2000).</li>
<li>Luzzi, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multistep+nature+of+metastatic+inefficiency%3A+dormancy+of+solitary+cells+after+successful+extravasation+and+limited+survival+of+early+micrometastases%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">Multistep nature of metastatic inefficiency: dormancy of solitary cells after successful extravasation and limited survival of early micrometastases.</a> American Journal of Pathology. 153 (3), 865-873 (1998).</li>
<li>Kienast, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+imaging+reveals+the+single+steps+of+brain+metastasis+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">Real-time imaging reveals the single steps of brain metastasis formation.</a> Nature Medicine. 16 (1), 116-122 (2010).</li>
<li>Takagi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+the+circulating+tumor+cell+capture+ability+of+a+slit+filter-based+method+in+comparison+to+a+selection-free+method+in+multiple+cancer+types%5BTitle%5D)+AND+%22International+journal+of+molecular+sciences%22%5BJournal%5D)">Analysis of the circulating tumor cell capture ability of a slit filter-based method in comparison to a selection-free method in multiple cancer types.</a> International journal of molecular sciences. 21 (23), 9031(2020).</li>
<li>Scott, J., Kuhn, P., Anderson, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unifying+metastasis--integrating+intravasation%2C+circulation+and+end-organ+colonization%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Cancer%22%5BJournal%5D)">Unifying metastasis--integrating intravasation, circulation and end-organ colonization.</a> Nature Reviews Cancer. 12 (7), 445-446 (2012).</li>
<li>Wirtz, D., Konstantopoulos, K., Searson, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+physics+of+cancer%3A+the+role+of+physical+interactions+and+mechanical+forces+in+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Cancer%22%5BJournal%5D)">The physics of cancer: the role of physical interactions and mechanical forces in metastasis.</a> Nature Reviews Cancer. 11 (7), 512-522 (2011).</li>
<li>Barnes, J. M., Nauseef, J. T., Henry, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resistance+to+fluid+shear+stress+is+a+conserved+biophysical+property+of+malignant+cells%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Resistance to fluid shear stress is a conserved biophysical property of malignant cells.</a> PLoS One. 7 (12), 50973(2012).</li>
<li>Malek, A. M., Alper, S. L., Izumo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemodynamic+shear+stress+and+its+role+in+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">Hemodynamic shear stress and its role in atherosclerosis.</a> JAMA. 282 (21), 2035-2042 (1999).</li>
<li>Brass, L. F., Diamond, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transport+physics+and+biorheology+in+the+setting+of+hemostasis+and+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thrombosis+and+Haemostasis%22%5BJournal%5D)">Transport physics and biorheology in the setting of hemostasis and thrombosis.</a> Journal of Thrombosis and Haemostasis. 14 (5), 906-917 (2016).</li>
<li>Stein, P. D., Sabbah, H. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Turbulent+blood+flow+in+the+ascending+aorta+of+humans+with+normal+and+diseased+aortic+valves%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Turbulent blood flow in the ascending aorta of humans with normal and diseased aortic valves.</a> Circulation Research. 39 (1), 58-65 (1976).</li>
<li>Strony, J., Beaudoin, A., Brands, D., Adelman, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+shear+stress+and+hemodynamic+factors+in+a+model+of+coronary+artery+stenosis+and+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Analysis of shear stress and hemodynamic factors in a model of coronary artery stenosis and thrombosis.</a> The American Journal of Physiology. 265 (5), Pt 2 1787-1796 (1993).</li>
<li>Chalmers, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mixing%2C+aeration+and+cell+damage%2C+30%2B+years+later%3A+what+we+learned%2C+how+it+affected+the+cell+culture+industry+and+what+we+would+like+to+know+more+about%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Chemical+Engineering%22%5BJournal%5D)">Mixing, aeration and cell damage, 30+ years later: what we learned, how it affected the cell culture industry and what we would like to know more about.</a> Current Opinion in Chemical Engineering. 10, 94-102 (2015).</li>
<li>Vennin, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trsient+tissue+priming+via+ROCK+inhibition+uncouples+pancreatic+cancer+progression%2C+sensitivity+to+chemotherapy%2C+and+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Trsient tissue priming via ROCK inhibition uncouples pancreatic cancer progression, sensitivity to chemotherapy, and metastasis.</a> Science Translational Medicine. 9 (384), 126(2017).</li>
<li>Mitchell, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lamin+A%2FC+deficiency+reduces+circulating+tumor+cell+resistance+to+fluid+shear+stress%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology%3A+Cell+Physiology%22%5BJournal%5D)">Lamin A/C deficiency reduces circulating tumor cell resistance to fluid shear stress.</a> American Journal of Physiology: Cell Physiology. 309 (11), 736-746 (2015).</li>
<li>Ortiz-Otero, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+associated+fibroblasts+confer+shear+resistance+to+circulating+tumor+cells+during+prostate+cancer+metastatic+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Oncotarget%22%5BJournal%5D)">Cancer associated fibroblasts confer shear resistance to circulating tumor cells during prostate cancer metastatic progression.</a> Oncotarget. 11 (12), 1037-1050 (2020).</li>
<li>Moose, D. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancer+cells+resist+mechanical+destruction+in+circulation+via+RhoA%2Factomyosin-dependent+mechano-adaptation%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Cancer cells resist mechanical destruction in circulation via RhoA/actomyosin-dependent mechano-adaptation.</a> Cell Reports. 30 (11), 3864-3874 (2020).</li>
<li>Miller, B. E., Miller, F. R., Wilburn, D. J., Heppner, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+tumour+cell+composition+in+tumours+composed+of+paired+mixtures+of+mammary+tumour+cell+lines%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Cancer%22%5BJournal%5D)">Analysis of tumour cell composition in tumours composed of paired mixtures of mammary tumour cell lines.</a> British Journal of Cancer. 56 (5), 561-569 (1987).</li>
<li>Aslakson, C. J., Miller, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+events+in+the+metastatic+process+defined+by+analysis+of+the+sequential+dissemination+of+subpopulations+of+a+mouse+mammary+tumor%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Selective events in the metastatic process defined by analysis of the sequential dissemination of subpopulations of a mouse mammary tumor.</a> Cancer Research. 52 (6), 1399(1992).</li>
<li>Chivukula, V. K., Krog, B. L., Nauseef, J. T., Henry, M. D., Vigmostad, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alterations+in+cancer+cell+mechanical+properties+after+fluid+shear+stress+exposure%3A+a+micropipette+aspiration+study%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Health+Cytoskeleton%22%5BJournal%5D)">Alterations in cancer cell mechanical properties after fluid shear stress exposure: a micropipette aspiration study.</a> Cell Health Cytoskeleton. 7, 25-35 (2015).</li>
<li>Gensbittel, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+adaptability+of+tumor+cells+in+metastasis%5BTitle%5D)+AND+%22Developmental+Cell%22%5BJournal%5D)">Mechanical adaptability of tumor cells in metastasis.</a> Developmental Cell. 56 (2), 164-179 (2021).</li>
<li>O'Leary, B. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacological+ascorbate+inhibits+pancreatic+cancer+metastases+via+a+peroxide-mediated+mechanism%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Pharmacological ascorbate inhibits pancreatic cancer metastases via a peroxide-mediated mechanism.</a> Scientific Reports. 10 (1), 17649(2020).</li>
<li>Williams, A. R., Hughes, D. E., Nyborg, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemolysis+near+a+transversely+oscillating+wire%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Hemolysis near a transversely oscillating wire.</a> Science. 169 (3948), 871-873 (1970).</li>
<li>Rooney, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemolysis+near+an+ultrasonically+pulsating+gas+bubble%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Hemolysis near an ultrasonically pulsating gas bubble.</a> Science. 169 (3948), 869-871 (1970).</li>
<li>Connolly, S., McGourty, K., Newport, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+in+vitro+inertial+positions+and+viability+of+cells+in+suspension+under+different+in+vivo+flow+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">The in vitro inertial positions and viability of cells in suspension under different in vivo flow conditions.</a> Scientific Reports. 10 (1), 1711(2020).</li>
<li>Brooks, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+biorheology+of+tumor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Biorheology%22%5BJournal%5D)">The biorheology of tumor cells.</a> Biorheology. 21 (1-2), 85-91 (1984).</li>
<li>Triantafillu, U. L., Park, S., Klaassen, N. L., Raddatz, A. D., Kim, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluid+shear+stress+induces+cancer+stem+cell-like+phenotype+in+MCF7+breast+cancer+cell+line+without+inducing+epithelial+to+mesenchymal+transition%5BTitle%5D)+AND+%22Internation+Journal+of+Oncology%22%5BJournal%5D)">Fluid shear stress induces cancer stem cell-like phenotype in MCF7 breast cancer cell line without inducing epithelial to mesenchymal transition.</a> Internation Journal of Oncology. 50 (3), 993-1001 (2017).</li>
<li>Fan, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circulatory+shear+flow+alters+the+viability+and+proliferation+of+circulating+colon+cancer+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Circulatory shear flow alters the viability and proliferation of circulating colon cancer cells.</a> Scientific Reports. 6, 27073(2016).</li>
<li>Fu, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+expression+of+MnSOD+promotes+survival+of+circulating+breast+cancer+cells+and+increases+their+resistance+to+doxorubicin%5BTitle%5D)+AND+%22Oncotarget%22%5BJournal%5D)">High expression of MnSOD promotes survival of circulating breast cancer cells and increases their resistance to doxorubicin.</a> Oncotarget. 7 (31), 50239-50257 (2016).</li>
<li>Li, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shear+stress+promotes+anoikis+resistance+of+cancer+cells+via+caveolin-1-dependent+extrinsic+and+intrinsic+apoptotic+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cellular+Physiology%22%5BJournal%5D)">Shear stress promotes anoikis resistance of cancer cells via caveolin-1-dependent extrinsic and intrinsic apoptotic pathways.</a> Journal of Cellular Physiology. 234 (4), 3730-3743 (2019).</li>
<li>Xin, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanics+and+actomyosin-dependent+survival%2Fchemoresistance+of+suspended+tumor+cells+in+shear+flow%5BTitle%5D)+AND+%22Biophysical+Journal%22%5BJournal%5D)">Mechanics and actomyosin-dependent survival/chemoresistance of suspended tumor cells in shear flow.</a> Biophysical Journal. 116 (10), 1803-1814 (2019).</li>
</ol>

MDH is medeoprichter, president en aandeelhouder van SynderBio, Inc. DLM is consultant voor SynderBio, Inc.

Dit artikel demonstreert de toepassing van FSS op kankercellen in suspensie met behulp van een spuit en naald. Met behulp van dit model is aangetoond dat kankercellen beter bestand zijn tegen korte pulsen van fss op hoog niveau ten opzichte van niet-getransformeerde epitheelcellen15,22,24. Bovendien resulteert blootstelling aan FSS met behulp van dit model in een snelle toename van celstijfheid, activering van RhoA en verhoogde ...

Metastase, of de verspreiding van kanker buiten de oorspronkelijke tumorplaats, is een belangrijke factor die ten grondslag ligt aan kankersterfte1. Tijdens uitzaaiingen gebruiken kankercellen de bloedsomloop als een snelweg om zich te verspreiden naar verre locaties in het hele lichaam2,3. Terwijl op weg naar deze plaatsen, circulerende tumorcellen (CTC's) bestaan binnen een dynamische vloeibare micro-omgeving in tegenstelling tot die van hun oorspronkelijke primaire tumor3,4,5. Er is voorgesteld dat deze vloeibare micromilieu een van de vele barrières voor metastaseis 4. Er bestaat brede overeenstemming in het concept van gemetastaseerde inefficiëntie, d.w.z. dat de meeste CTC 's die in omloop komen, ofwel vergaan of geen productieve gemetastaseerde kolonies vormen6,7,8. Waarom metastase echter inefficiënt is vanuit het perspectief van een individuele CTC is minder zeker en blijft een actief onderzoeksgebied. CTC's worden losgemaakt van de extracellulaire matrix, beroofd van oplosbare groei- en overlevingsfactoren die aanwezig kunnen zijn in de primaire tumor, en op een veel andere manier blootgesteld aan het immuunsysteem en de hemodynamische krachten dan in de primaire tumor4. Elk van deze factoren kan bijdragen tot de slechte overleving van CTC's, maar hun relatieve bijdragen zijn onduidelijk. Dit artikel gaat in op de vraag hoe hemodynamische krachten CTC's beïnvloeden.
Het bestuderen van de effecten van hemodynamische krachten op CTC's is behoorlijk uitdagend. Momenteel zijn er geen in vitro systemen die de volledige spatiotemporale dynamiek (hart tot haarvaten) en reologische eigenschappen van het menselijk vasculaire systeem kunnen repliceren. Bovendien is niet helemaal duidelijk hoe CTC's de bloedsomloop ervaren. Experimenteel bewijs geeft aan dat de meeste kankercellen niet continu circuleren zoals bloedcellen. Vanwege hun relatief grote omvang (10-20 μm in diameter) raken de meeste CTC's eerder in capillaire bedden (6-8 μm in diameter) voor variabele tijdslengten (s tot dagen) waar ze kunnen sterven, extravaseren of worden verplaatst naar het volgende capillaire bed8,9,10,11. Er is echter enig bewijs dat de CTC-grootte in vivo heterogeener kan zijn en dat kleinere CTC's detecteerbaar zijn12. Daarom, op basis van afstand en bloedstroomsnelheid, kunnen CTC's slechts enkele seconden vrij circuleren tussen deze perioden van beknelling, hoewel een kwantitatieve beschrijving van dit gedragontbreekt 13.
Bovendien kunnen ze, afhankelijk van waar CTC's in de bloedsomloop terechtkomen, door meerdere capillaire bedden in de longen en andere perifere plaatsen en door zowel het rechter- als linkerhart gaan voordat ze hun eindbestemming bereiken. Onderweg worden CTC's blootgesteld aan verschillende hemodynamische spanningen, waaronder vloeistofschaarspanning (FSS), drukkrachten tijdens hun beknelling in de microcirculatie en mogelijk tractiekrachten onder omstandigheden waarin ze leukocytenachtig langs de wanden van bloedvaten kunnen rollen14. Zo is zowel het vermogen om de circulatie te modelleren als het begrip van het te modelleren CTC-gedrag beperkt. Vanwege deze onzekerheid moeten alle bevindingen van in vitro modelsystemen worden gevalideerd in een experimenteel gewerveld organisme en uiteindelijk bij kankerpatiënten.
Met de bovengenoemde kanttekeningen toont dit document een relatief eenvoudig model om FSS toe te passen op cellen in suspensie om de effecten van FSS op CTC's te onderzoeken die voor het eerst werden beschreven in 201215. FSS is het gevolg van wrijving van de bloedstroom tegen de vaatwand, die een parabolische snelheidsgradiënt produceert onder omstandigheden van laminaire stroming in grotere vaten. Cellen ervaren hogere niveaus van FSS in de buurt van vaatwanden en lagere niveaus in de buurt van het centrum van het bloedvat. Vloeibare viscositeit, debiet en afmetingen van de leiding waardoor de stroom optreedt, beïnvloeden FSS, zoals beschreven door de Hagen-Poiseuille-vergelijking. Dit geldt voor bloedstromen die zich gedragen als Newtoniaanse vloeistoffen, maar houdt geen stand voor de microcirculatie. Fysiologische FSS varieert over verschillende ordes van grootte met de laagste niveaus in de lymfeklieren (<1 dyn/cm2) en de hoogste in regio's rond hartkleppen en atherosclerotische plaques (>500 dyn/cm2)5. Gemiddelde wandschaar stress in slagaders is 10-70 dyn/cm2 en 1-6 dyn/cm2 in aderen16,17.
In het hart kunnen cellen worden blootgesteld aan turbulente stromen rond klepbijsluiters waar fss op zeer hoog niveau, maar zeer korte duur kan worden ervaren18,19. Hoewel het bioprocessingveld de effecten van FSS op zoogdiercellen in suspensie lang heeft bestudeerd, kan deze informatie van beperkte waarde zijn voor het begrijpen van de effecten van FSS op CTC's, omdat het zich over het algemeen richt op veel lagere fss-niveaus die gedurende een lange duur worden toegepast20. Zoals hieronder beschreven, kan men met behulp van een spuit en naald relatief hoge (tientallen tot duizenden dyn/cm2)FSS gedurende een relatief korte (milliseconden) duur toepassen op een celsuspensie. Sinds de eerste beschrijving van dit model15hebben anderen het gebruikt om de effecten van FSS op kankercellen21 , 22,23te bestuderen . Meerdere "pulsen" van FSS kunnen in korte tijd op celsuspensingen worden toegepast om downstream experimentele analyses te vergemakkelijken. Dit model kan bijvoorbeeld worden gebruikt om het vermogen van cellen te meten om mechanische vernietiging door FSS te weerstaan door de levensvatbaarheid van cellen te meten als functie van het aantal toegepaste pulsen. Als alternatief kunnen de effecten van FSS-blootstelling op de biologie van kankercellen worden onderzocht door cellen te verzamelen voor een verscheidenheid aan downstream-analyses. Belangrijk is dat een deel van de celophanging is gereserveerd als een statische regeling om de effecten van FSS te vergelijken met die welke kunnen worden geassocieerd met celloslating en de tijd die in de suspensie wordt vastgehouden.

<table><tbody><tr><td>0.25% Trypsin</td><td>Gibco</td><td>25200-056</td><td></td></tr><tr><td>14 mL round bottom tubes</td><td>Falcon - Corning</td><td>352059</td><td></td></tr><tr><td>30 G 1/2" Needle</td><td>BD</td><td>305106</td><td></td></tr><tr><td>5 mL syringe</td><td>BD</td><td>309646</td><td></td></tr><tr><td>96-well black bottom plate</td><td>Costar - Corning</td><td>3915</td><td></td></tr><tr><td>Bioluminescence detector</td><td>AMI</td><td>AMI HTX</td><td></td></tr><tr><td>BSA, Fraction V</td><td>Sigma</td><td>10735086001</td><td></td></tr><tr><td>Cell Titer Blue</td><td>Promega</td><td>G8081</td><td></td></tr><tr><td>crystal violet</td><td>Sigma</td><td>C0775</td><td></td></tr><tr><td>D-luciferin</td><td>GoldBio</td><td>D-LUCK</td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Gibco</td><td>11965-092</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>Atlanta Biologicals</td><td>S11150</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Gibco</td><td>10010023</td><td></td></tr><tr><td>Plate Reader</td><td>BioTek</td><td>Synergy HT</td><td></td></tr><tr><td>Sodium Azide (NaN3)</td><td>Sigma</td><td>S2002</td><td></td></tr><tr><td>Syringe Pump</td><td>Harvard Apparatus</td><td>70-3005</td><td></td></tr></tbody></table>

modelleren van de effecten van hemodynamische stress op circulerende tumorcellen met behulp van een spuit en naald

Modeling the Effects of Hemodynamic Stress on Circulating Tumor Cells using a Syringe and Needle

Tijdens uitzaaiingen krijgen kankercellen uit vaste weefsels, waaronder epithelia, toegang tot de lymfe- en hematogene circulatie waar ze worden blootgesteld aan mechanische stress als gevolg van hemodynamische stroming. Een van deze spanningen die circulerende tumorcellen (CTC's) ervaren, is fluid shear stress (FSS). Terwijl kankercellen lage niveaus van FSS in de tumor kunnen ervaren als gevolg van interstitiële stroom, worden CTC's, zonder extracellulaire matrixaanhechting, blootgesteld aan veel grotere niveaus van FSS. Fysiologisch varieert FSS over 3-4 ordes van grootte, met lage niveaus aanwezig in lymfeklieren (<1 dyne/cm2) en de hoogste niveaus die kort aanwezig zijn als cellen door het hart en rond hartkleppen gaan (>500 dynes/cm2). Er zijn een paar in vitro modellen ontworpen om verschillende reeksen fysiologische schuifspanning over verschillende tijdsbestekken te modelleren. Dit artikel beschrijft een model om de gevolgen van korte (milliseconde) pulsen van fss op hoog niveau op kankercelbiologie te onderzoeken met behulp van een eenvoudig spuit- en naaldsysteem.

Eerder is aangetoond dat verhoogde resistentie tegen fss-geïnduceerde mechanische vernietiging een geconserveerd fenotype is over meerdere kankercellijnen en kankercellen die vers geïsoleerd zijn van tumoren ten opzichte van niet-getransformeerde epitheelcelvergelijkers15,24. Hier werden aanvullende kankercellijnen van verschillende weefseloorsprongen (tabel 2) getest om aan te tonen dat de meerderheid van deze cellen levensvatbaarheid ≥ 20% vert...

Hier demonstreren we een methode om vochtscheringsspanning toe te passen op kankercellen in suspensie om de effecten van hemodynamische stress op circulerende tumorcellen te modelleren.

Modelleren van de effecten van hemodynamische stress op circulerende tumorcellen met behulp van een spuit en naald

During metastasis, cancer cells from solid tissues, including epithelia, gain access to the lymphatic and hematogenous circulation where they are exposed ...

Dit protocol stelt kankercellen in een suspensie bloot aan korte pulsen van vloeistofschaarspanning om bepaalde aspecten na te bootsen van hoe gemetastaseerde kankercellen worden blootgesteld aan hemodynamische krachten terwijl ze zich in de bloedsomloop bevinden. Het is een relatief eenvoudige techniek om korte pulsen van hoge vloeistofschaarspanning toe te passen. Let bij het proberen van dit protocol op ongeappte naalden en buig ze niet, omdat dit de toegepaste krachtschaarspanning zal veranderen.Deze procedure kan aërosolen produceren, dus gebruik passende veiligheidsmaatregelen. Laat om te beginnen 70 tot 90% samenvloeiende PC3-cellen uit de weefselkweekschaal vrij door het groeimedium aan te spireren en de schaal van 10 centimeter te wassen met vijf milliliter calcium- en magnesiumvrije PBS. Aspireer vervolgens de PBS en voeg een milliliter van 0,25% trypsine toe.Observeer na de trypsinisatie de loslating van de cellen onder een omgekeerde microscoop. Om de trypsine te remmen, voegt u vijf milliliter DMEM/F12-medium toe dat 10% FBS bevat. Plaats vervolgens de celsuspensie in een conische buis en bepaal de celconcentratie en het totale celnummer.Centrifugeer de celsuspensie gedurende drie minuten op 300 x g, aspireer vervolgens het supernatant en resuspendeer de pellet in een serumvrij weefselkweekmedium. Snijd rond de bodem van 14 milliliter polystyreen buis op de zeven milliliter lijn en plaats de gemengde cel suspensie in de snijbuis. Verzamel afzonderlijk statische controlemonsters van cellen voordat de vloeistofschaarspanning wordt blootgesteld aan gebruik voor het uitvoeren van assays.Om het resterende celsuspensiemonster bloot te stellen aan vloeistofschuivingsspanning, trekt u de celsuspensie in een spuit van vijf milliliter en bevestigt u een 30 gauge halve inch naald. Plaats en bevestig de spuit met een ongeappte naald op een spuitpomp en stel het debiet in om het gewenste niveau van vloeistofschaarspanning te bereiken. Laat de spuitpomp draaien en verzamel het geschoren monster in de snijbuis onder een hoek van ongeveer 45 graden om schuimvorming te verminderen.Verwijder de spuit voorzichtig uit de spuitpomp en gebruik een tang om de naald te verwijderen, zorg ervoor dat u deze niet aanraakt. Herhaal de procedure totdat de celsuspensie is blootgesteld aan het gewenste aantal pulsen van vloeistofschaarspanning. Voer levensvatbaarheidstesten uit met de statische monsters voordat u de cellen blootstelt aan vloeistofschaarspanning.Breng voor enzymatische assays 100 microliter aliquots uit de statische monsters in tweevoud over in een 96-putplaat. Verzamel vervolgens 100 microliters monsters na blootstelling aan vloeistofschaarspanning en plaats ze in een plaat met 96 putten. Voeg 20 microliter van een resazurin-oplossing van 0,15 milligram per milliliter toe aan elk monsterput en aan putten die alleen al 100 microliter medium bevatten.Incubeer de putplaten in de weefselkweek-incubator van 37 graden Celsius gedurende twee uur, meet vervolgens de fluorescentie en absorptie met behulp van een plaatlezer en verkrijg het percentage levensvatbare cellen door het gemiddelde signaal van elk van de blootgestelde monsters van de vloeistofschaarspanning te vergelijken met het gemiddelde tot het statische controlemonster. Verzamel ook aliquots uit statische monsters om flowcytometrie en clonogene assays uit te voeren zoals beschreven in het teksthandschrift. In de representatieve analyse werd de levensvatbaarheid van syngenetische biopsie borstepitheelkankercellen beoordeeld met behulp van resazurineconversie na het blootstellen van cellen aan een aantal fluid shear stress pulsen.Hoewel elke cellijn verschillende weerstandsprofielen vertoonde, was er geen significant verschil in levensvatbaarheid na 10 pulsen van blootstelling aan vloeistofschaarspanning. Extra kankercellijnen van verschillende weefseloorsprongen toonden de levensvatbaarheid van meer dan 20% aan na 10 pulsen van vloeistofschaarspanning, met uitzondering van MIA PaCa-2-cellen, die een levensvatbaarheid van minder dan 10% vertoonden als gevolg van gevoeligheid voor mechanische vernietiging door vloeistofschaarspanning. Let er bij het verzamelen van het statische monster voorafgaand aan het aanbrengen van afschuifspanning voor vloeistoffen op dat de celsuspensie homogeen wordt gemengd.Verwijder de naald voorzichtig met een tang en buig of raak de naald niet aan. Naast het meten van de levensvatbaarheid van cellen, kan men veranderingen in genexpressie, celsignalering, proliferatie en migratie evalueren. Met behulp van dit als een model van blootstelling aan vloeistofschaar stress, kan men zowel bestuderen hoe kankercellen weerstaan vernietiging door vloeistofschaar stress en evalueren van de effecten van vloeistofschaar stress op de biologie van kankercellen.Deze techniek is gebruikt door ons laboratorium en anderen om de effecten van vloeistofschaarspanning op circulerende tumorcellen te onderzoeken. Deze studies hebben aangetoond dat vloeistofschaarstress snel de mechanische eigenschappen van kankercellen verandert en dat dit bijdraagt aan het vermogen van kankercellen om vernietiging door vloeistofschaarstress te weerstaan.

modeling-effects-hemodynamic-stress-on-circulating-tumor-cells-using

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Kankeronderzoek

We presenteren de procedure voor de productie en exploitatie van een microfluïdische apparaat dat heterogene tumor micro-omgevingen...

Microfluïdische apparaat voor het herstellen van een tumor micro-omgeving<em&gt; In vitro</em

Source: Lim, M., et al. Modeling Brain Metastasis by Internal Carotid Artery Injection of Cancer Cells. J. Vis. Exp. (2022)In this video, an anesthetized mouse undergoes a surgical procedure in which cancer cells are injected into the common carotid artery (CCA) to facilitate targeted delivery to the brain. The procedure involves precise suturing and manipulation of the carotid arteries to direct the injected cells toward the internal carotid artery (ICA), promoting tumor formation in the brain...

Modeling Brain Tumor Metastasis via Internal Carotid Artery Injection of Cancer Cells

We beschrijven een matrigel-plugtest om het angiogeen potentieel van een pool van factoren te illustreren die worden afgescheiden door kankercellen, met behulp van twee complementaire beeldvormingsmodaliteiten, echografie en endomicroscopie. De matrigel, een buitencelmatrix (ECM)-nabootsende gel, wordt gebruikt om de gastheer (muis) te introduceren met angiogeen factoren die worden afgescheiden naar het geconditioneerde medium...

Monitoring Functionaliteit en morfologie van vaatstelsel aangeworven door gesekreteerd door Snelgroeiende Tumor genererende cellen

Dit manuscript beschrijft de ontwikkeling van een diermodel dat directe testen van de effecten van tumorhypoxie op metastase en het ontcijferen van de werkingsmechanismen mogelijk maakt. Hoewel de hier beschreven experimenten zich richten op Ewing-sarcoom, kan een vergelijkbare aanpak worden toegepast op andere tumortypen.

In vivo model voor het testen Effect van hypoxie op tumormetastase

Er werd een chirurgische procedure ontwikkeld om mamma-tumorcellen via injectie in de poortader in de muizenlever af te leveren. Dit model maakt onderzoek naar late stadia van levermetastase mogelijk bij een volledig immuuncompetente gastheer, inclusief extravasatie van tumorcellen, zaaien, overleven en metastatische uitgroei in de lever.

Een poortader Injection Model op de studie van de lever metastase van borstkanker

We beschrijven de oprichting van orthotopische colorectale tumoren via injectie van tumorcellen of organoïden in de cecum van muizen en de daaropvolgende isolatie van circulerende tumorcellen (CTC's) uit dit model.

Isolatie van circulerende tumorcellen in een orthotopische muismodel van colorectale kanker

In het tijdperk van immunotherapie en eencellige genomische profilering vereist kankerbiologie nieuwe in vitro en computationele hulpmiddelen voor het onderzoeken van de tumor-immuuninterface in een juiste spatiotemporale context. We beschrijven protocollen om tumor-immuun microfluïdische co-culturen te exploiteren in 2D- en 3D-instellingen, compatibel met dynamische, multiparametrische monitoring van cellulaire functies.

Microfluïdische co-cultuurmodellen voor het ontleden van de immuunrespons in in vitro tumormicro-omgevingen

Hersenmetastase is een oorzaak van ernstige morbiditeit en mortaliteit bij kankerpatiënten. De meeste muismodellen voor hersenmetastasen worden gecompliceerd door systemische metastasen die de analyse van mortaliteit en therapeutische interventie-uitkomsten verstoren. Hier gepresenteerd is een protocol voor interne carotisinjectie van kankercellen dat consistente intracraniale tumoren produceert met minimale systemische tumoren.

Modellering van hersenmetastase door interne halsslagaderinjectie van kankercellen

Dit protocol presenteert een fysiologisch relevant tumor-on-a-chip-model om basis- en translationeel kankeronderzoek bij mensen met een hoge doorvoer uit te voeren, het screenen van geneesmiddelen, ziektemodellering en gepersonaliseerde geneeskundebenaderingen te bevorderen met een beschrijving van laad-, onderhouds- en evaluatieprocedures.

Opzetten van een fysiologisch menselijk gevasculariseerd microtumormodel voor kankeronderzoek

Het artikel beschrijft een protocol om de voorbijgaande temperatuurprofielen en de gekoppelde spatiotemporele variatie van de interstitiële vloeistofdruk te simuleren na de verwarming die wordt geleverd door een dipolair radiofrequente hyperthermiesysteem. Het protocol kan worden gebruikt om de respons te beoordelen van biofysische parameters die de micro-omgeving van de tumor kenmerken op interventionele hyperthermietechnieken.

Een computationele modelleringsbenadering om de invloed van hyperthermie op de micro-omgeving van de tumor te onderzoeken

Leer hoe je kankercellen blootstelt aan korte pulsen van vloeistofschuifspanning met een spuit en naald. Deze methode bootst hemodynamische stress na die circulerende tumorcellen in het bloed ervaren.

Modelleren van de effecten van hemodynamische stress op circulerende tumorcellen met behulp van een spuit en naald

Meer video's verkennen