Name: Behandelingstechnieken om stress bij muizen te verminderen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-09-25T14:45:00.000+00:00
Duration: 9 min 3 s
Description: Leer de 3D-hanteertechniek om stress en angstgedrag bij muizen te verminderen tijdens routinehandelingen. Deze methode verbetert het dierenwelzijn en de reproduceerbaarheid van onderzoeksgegevens.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De auteurs danken de Animal Care Committee van CAMH voor hun steun aan dit werk, evenals de dierenverzorgers van CAMH die uitgebreide feedback gaven over het nut van de procedure, het motiveren van de uitvoering van de beschreven experimenten en het indienen van het gedetailleerde protocol voor andere gebruikers. Dit werk werd gedeeltelijk gefinancierd door CAMH BreakThrough Challenge, toegekend aan TP, en door interne fondsen van CAMH.

<ol><li>Deacon, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Housing%2C+husbandry+and+handling+of+rodents+for+behavioral+experiments%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Housing, husbandry and handling of rodents for behavioral experiments.</a> Nature Protocols. 1 (2), 936(2006).</li>
<li>Bryda, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Mighty+Mouse%3A+the+impact+of+rodents+on+advances+in+biomedical+research%5BTitle%5D)+AND+%22Missouri+Medicine%22%5BJournal%5D)">The Mighty Mouse: the impact of rodents on advances in biomedical research.</a> Missouri Medicine. 110 (3), 207-211 (2013).</li>
<li>Martic-Kehl, M., Ametamey, S., Alf, M., Schubiger, P., Honer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+inherent+variability+and+experimental+parameters+on+the+reliability+of+small+animal+PET+data%5BTitle%5D)+AND+%22EJNMMI+Research%22%5BJournal%5D)">Impact of inherent variability and experimental parameters on the reliability of small animal PET data.</a> EJNMMI Research. 2 (1), 26(2012).</li>
<li>Howard, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+of+Variability%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+Journal%22%5BJournal%5D)">Control of Variability.</a> ILAR Journal. 43 (4), 194-201 (2002).</li>
<li>Toth, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+the+cage+environment+on+rodent+physiology+and+behavior%3A+Implications+for+reproducibility+of+pre-clinical+rodent+research%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">The influence of the cage environment on rodent physiology and behavior: Implications for reproducibility of pre-clinical rodent research.</a> Experimental Neurology. 270, 72-77 (2015).</li>
<li>Golini, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Non-invasive+Digital+Biomarker+for+the+Detection+of+Rest+Disturbances+in+the+SOD1G93A+Mouse+Model+of+ALS%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">A Non-invasive Digital Biomarker for the Detection of Rest Disturbances in the SOD1G93A Mouse Model of ALS.</a> Frontiers in Neuroscience. 14 (896), (2020).</li>
<li>Singh, S., Bermudez-Contreras, E., Nazari, M., Sutherland, R. J., Mohajerani, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-cost+solution+for+rodent+home-cage+behaviour+monitoring%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Low-cost solution for rodent home-cage behaviour monitoring.</a> PLoS One. 14 (8), 0220751(2019).</li>
<li>Stewart, K., Schroeder, V. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+Handling+and+Restraint+Techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Rodent Handling and Restraint Techniques.</a> Journal of Visualized Experiments. , (2021).</li>
<li>Hurst, J. L., West, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Taming+anxiety+in+laboratory+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Taming anxiety in laboratory mice.</a> Nature Methods. 7 (10), 825-826 (2010).</li>
<li>Gouveia, K., Hurst, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+the+practicality+of+using+non-aversive+handling+methods+to+reduce+background+stress+and+anxiety+in+laboratory+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Improving the practicality of using non-aversive handling methods to reduce background stress and anxiety in laboratory mice.</a> Scientific Reports. 9 (1), 20305(2019).</li>
<li>Gouveia, K., Hurst, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimising+reliability+of+mouse+performance+in+behavioural+testing%3A+the+major+role+of+non-aversive+handling%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Optimising reliability of mouse performance in behavioural testing: the major role of non-aversive handling.</a> Scientific Reports. 7, 44999(2017).</li>
<li>Ghosal, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+handling+limits+the+impact+of+stress+on+metabolic+endpoints%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+%26+Behavior%22%5BJournal%5D)">Mouse handling limits the impact of stress on metabolic endpoints.</a> Physiology & Behavior. 150, 31-37 (2015).</li>
<li>Wahlsten, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Different+data+from+different+labs%3A+lessons+from+studies+of+gene-environment+interaction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">Different data from different labs: lessons from studies of gene-environment interaction.</a> Journal of Neurobiology. 54 (1), 283-311 (2003).</li>
<li>Nature Neuroscience. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Troublesome+variability+in+mouse+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Troublesome variability in mouse studies.</a> Nature Neuroscience. 12 (9), 1075(2009).</li>
<li>Sensini, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+impact+of+handling+technique+and+handling+frequency+on+laboratory+mouse+welfare+is+sex-specific%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">The impact of handling technique and handling frequency on laboratory mouse welfare is sex-specific.</a> Scientific Reports. 10 (1), 17281(2020).</li>
<li>Ghosal, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+handling+limits+the+impact+of+stress+on+metabolic+endpoints%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology+%26+Behavior%22%5BJournal%5D)">Mouse handling limits the impact of stress on metabolic endpoints.</a> Physiology & Behavior. 150, 31-37 (2015).</li>
<li>Novak, J., Bailoo, J. D., Melotti, L., Rommen, J., Würbel, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+Exploration+Based+Cognitive+Bias+Test+for+Mice%3A+Effects+of+Handling+Method+and+Stereotypic+Behaviour%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">An Exploration Based Cognitive Bias Test for Mice: Effects of Handling Method and Stereotypic Behaviour.</a> PLoS One. 10 (7), 0130718(2015).</li>
<li>Gouveia, K., Waters, J., Hurst, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+Handling+Tutorial%5BTitle%5D)+AND+%22NC3Rs%22%5BJournal%5D)">Mouse Handling Tutorial.</a> NC3Rs. , (2016).</li>
<li>Gouveia, K., Hurst, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reducing+Mouse+Anxiety+during+Handling%3A+Effect+of+Experience+with+Handling+Tunnels%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Reducing Mouse Anxiety during Handling: Effect of Experience with Handling Tunnels.</a> PLoS One. 8 (6), 66401(2013).</li>
<li>Henderson, L. J., Smulders, T. V., Roughan, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identifying+obstacles+preventing+the+uptake+of+tunnel+handling+methods+for+laboratory+mice%3A+An+international+thematic+survey%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Identifying obstacles preventing the uptake of tunnel handling methods for laboratory mice: An international thematic survey.</a> PLoS One. 15 (4), 0231454(2020).</li>
<li>Percie Du Sert, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+ARRIVE+guidelines+2.0%3A+Updated+guidelines+for+reporting+animal+research%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+Biology%22%5BJournal%5D)">The ARRIVE guidelines 2.0: Updated guidelines for reporting animal research.</a> PLOS Biology. 18 (7), 3000410(2020).</li>
<li>Golde, W. T., Gollobin, P., Rodriguez, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+rapid%2C+simple%2C+and+humane+method+for+submandibular+bleeding+of+mice+using+a+lancet%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">A rapid, simple, and humane method for submandibular bleeding of mice using a lancet.</a> Lab Animal. 34 (9), 39-43 (2005).</li>
<li>Guilloux, J. P., Seney, M., Edgar, N., Sibille, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrated+behavioral+z-scoring+increases+the+sensitivity+and+reliability+of+behavioral+phenotyping+in+mice%3A+relevance+to+emotionality+and+sex%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Integrated behavioral z-scoring increases the sensitivity and reliability of behavioral phenotyping in mice: relevance to emotionality and sex.</a> Journal of Neuroscience Methods. 197 (1), 21-31 (2011).</li>
<li>LaFollette, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laboratory+Animal+Welfare+Meets+Human+Welfare%3A+A+Cross-Sectional+Study+of+Professional+Quality+of+Life%2C+Including+Compassion+Fatigue+in+Laboratory+Animal+Personnel%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Veterinary+Science%22%5BJournal%5D)">Laboratory Animal Welfare Meets Human Welfare: A Cross-Sectional Study of Professional Quality of Life, Including Compassion Fatigue in Laboratory Animal Personnel.</a> Frontiers in Veterinary Science. 7 (114), (2020).</li>
<li>Sorge, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Olfactory+exposure+to+males%2C+including+men%2C+causes+stress+and+related+analgesia+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">Olfactory exposure to males, including men, causes stress and related analgesia in rodents.</a> Nature Methods. 11 (6), 629-632 (2014).</li>
<li>Bailoo, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+Cage+Enrichment+on+Behavior%2C+Welfare+and+Outcome+Variability+in+Female+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Behavioral+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Effects of Cage Enrichment on Behavior, Welfare and Outcome Variability in Female Mice.</a> Frontiers in Behavioral Neuroscience. 12, (2018).</li>
<li>Spangenberg, E. M., Keeling, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+the+welfare+of+laboratory+mice+in+their+home+environment+using+animal-based+measures+-+a+benchmarking+tool%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals%22%5BJournal%5D)">Assessing the welfare of laboratory mice in their home environment using animal-based measures - a benchmarking tool.</a> Laboratory Animals. 50 (1), 30-38 (2016).</li>
<li>Theil, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+epidemiology+of+fighting+in+group-housed+laboratory+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">The epidemiology of fighting in group-housed laboratory mice.</a> Scientific Reports. 10 (1), 16649(2020).</li>
<li>Weber, E. M., Dallaire, J. A., Gaskill, B. N., Pritchett-Corning, K. R., Garner, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aggression+in+group-housed+laboratory+mice%3A+why+can%27t+we+solve+the+problem%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Aggression in group-housed laboratory mice: why can't we solve the problem.</a> Lab Animal. 46 (4), 157-161 (2017).</li>
<li>Cloutier, S., Baker, C., Wahl, K., Panksepp, J., Newberry, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Playful+handling+as+social+enrichment+for+individually-+and+group-housed+laboratory+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+Animal+Behaviour+Science%22%5BJournal%5D)">Playful handling as social enrichment for individually- and group-housed laboratory rats.</a> Applied Animal Behaviour Science. 143 (2), 85-95 (2013).</li>
<li>Panksepp, J., Burgdorf, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((50-kHz+chirping+%28laughter%3F%29+in+response+to+conditioned+and+unconditioned+tickle-induced+reward+in+rats%3A+effects+of+social+housing+and+genetic+variables%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">50-kHz chirping (laughter?) in response to conditioned and unconditioned tickle-induced reward in rats: effects of social housing and genetic variables.</a> Behavioural Brain Research. 115 (1), 25-38 (2000).</li>
</ol>

De auteurs hebben geen belangenverstrengeling te onthullen.

Deze studie en methodeontwikkeling zijn gebaseerd op de observatie dat behandelingstechnieken bij muizen nog steeds over het hoofd worden gezien door de wetenschappelijke gemeenschap, en dat sommige laboratoria nog steeds terughoudend zijn om gewennijt- of hanteringstechnieken te implementeren om stress en reactiviteit van hun dieren voorafgaand aan experimenten te verminderen. Hoewel het een tijdsbesteding vertegenwoordigt, biedt de behandeling van dieren gunstige effecten voor de dieren die kunnen bijdragen aan het suc...

Muizen en ratten zijn essentiële troeven voor preklinische studies1,2 voor meerdere doeleinden, waaronder endocriene, fysiologische, farmacologische of gedragsstudies2. Uit het toenemende aantal studies met dieren is gestegen dat ongecontroleerde omgevingsvariabelen , waaronder menselijke interactie , verschillende uitkomsten in biomedisch onderzoek beïnvloeden3,4,5. Dit is verantwoordelijk voor significante variabiliteit waargenomen in experimenten en onderzoekslaboratoria4,5, wat een belangrijk voorbehoud vormt in dieronderzoek.
Er zijn verschillende benaderingen geïmplementeerd met als doel de impact van omgevingsstressoren te beperken en de reactiviteit op menselijke interactie te verminderen. Om bijvoorbeeld de impact van milieustressoren te beperken, zijn standaardisatie van huisvestingsomstandigheden en geautomatiseerde huisvestingssystemen6,7 geïmplementeerd in laboratoria. Wat de interactie met mensen betreft, hadden veelgebruikte benaderingen voor het hanteren en vervoeren van dieren weinig rekening met ongemak en stress bij dieren. Het oppakken van dieren bij hun staart of het gebruik van tang8 verhoogt bijvoorbeeld de angst bij aanvang9,10,11, vermindert exploratie9,12 en draagt sterk bij tot interpersoonlijkheidsvariabiliteit binnen en tussen studies13,14. Als gevolg hiervan werden andere benaderingen ontwikkeld, zoals de cup handling-techniek, die van toepassing is op muizen en ratten. In deze aanpak worden de dieren uit hun kooi "gecupt" en door de experimenteerders vastgehouden met hun handen die een kopje9,10,11vormen. Een ander nuttig alternatief voor staartbehandeling is het gebruik van een polycarbonaattunnel om muizen over te brengen9,10,15. Deze aanpak elimineert directe interactie tussen de muis en de experimenteerder. Zowel de cup- als tunnelbenaderingen toonden werkzaamheid bij het verminderen van angstachtig gedrag en angst voor de experimenteerder die kan worden overdreven door aversieve behandelingstechnieken, zoals staartoppakken / staartbehandeling9,10.
Daarom toont toenemend bewijs het nut aan van een goede muisbehandeling voor het verminderen van variabiliteit tussen individuen9,11en het verbeteren van dierenwelzijn10. De hierboven genoemde technieken worden echter nog steeds geconfronteerd met beperkingen. De cup handling techniek is geïmplementeerd met schema's variërend van 10 dagen (10 sessies over 2 weken16) tot 15 weken17, wat een aanzienlijke hoeveelheid tijd is voor facilitair personeel en experimenteerders. Bovendien varieert de effectiviteit van cup handling per stam9 en conventionele cup handling in open handen kan leiden tot naïeve muizen of bijzonder springerige stammen om uit de hand te springen9,18. Tunnelbehandeling resulteert in consistentere en over het algemeen snellere resultaten in gentling19. Tunnels worden ook gebruikt als verrijking van de thuiskooi. Ze helpen dieren om snel te kunnen omgaan en bieden de extra voordelen van verrijking. Tunnelbehandeling heeft echter beperkingen bij het overbrengen van dieren tussen apparaten. Interessant is dat Hurst en West9, en Henderson et al.20 hebben aangetoond dat het gebruik van zachte en korte handmatige behandeling om dieren van de tunnel naar het apparaat over te brengen geen invloed heeft op hun fenotype.
Om een alternatief te bieden voor bestaande methoden, met haalbare gewenging in een korte periode, beschrijft dit artikel een nieuwe techniek die zich uitbreidt op de cup handling-techniek, waardoor er geen specifieke apparatuur nodig is. Deze aanpak maakt gebruik van mijlpalen om het niveau van comfort te meten dat muizen hebben met het behandelingsproces. Het toont werkzaamheid bij het verminderen van de reactiviteit en stress van de muis (op het gedrags- en hormonale niveau), vergemakkelijkt routinematige behandeling en draagt bij aan het verminderen van variabiliteit tussen dieren. Details van deze techniek worden hier verstrekt, en de werkzaamheid ervan bij het verminderen van angstachtig gedrag, het verbeteren van de interactie met experimenteerders en het beperken van de afgifte van perifere stresshormoon (corticosteron) worden aangetoond in twee afzonderlijke studies (mannelijke en vrouwelijke muizen), in vergelijking met tunnelbehandeling (positieve controle) en staartbehandelingstechnieken (negatieve controle).

<table><tbody><tr><td>23 G x 1 in. BD PrecisionGlide algemeen gebruik steriele hypodermische naald. Reguliere wandtype en reguliere bevel.</td><td>BD</td><td>2546-CABD305145</td><td>Naalden voor bloedopname</td></tr><tr><td>BD Vacutainer&reg; Veneuze Bloedopname EDTA Buizen met Lavendel BD Hemogard&trade; sluiting, 2,0 ml (13x75 mm), 100/pk</td><td>BD</td><td>367841</td><td>EDTA gecoate buizen voor bloedopname</td></tr><tr><td>Bed&rsquo;o maïskolbessen &frac14;&rdquo; Maïskolbessen laboratoriumdierbedekking</td><td>Bed-O-Cobs</td><td>BEDO1/4</td><td>Nieuwe bedekking voor onderdrukt voeren</td></tr><tr><td>Centrifuge</td><td>Eppendorf</td><td>Centrifuge 5424 R</td><td>Voor centrifugatie van bloed.</td></tr><tr><td>Corticosterone ELISA Kit</td><td>Arbor Assays</td><td>K003-H1W</td><td></td></tr><tr><td>Digitale Camera</td><td>Panasonic</td><td>HC-V770</td><td>Camera om EPM/Experimentator interacties vast te leggen</td></tr><tr><td>Elevated Plus Maze</td><td>Home Made</td><td>n/a</td><td>Aangepaste Maze gemaakt van vier zwarte Plexiglas armen (twee open armen (29 cm lang door 7 cm breed) en twee gesloten armen (29 cm lang x7 cm breed met 16 cm hoge muren)) die een kruisvorm vormen met de twee open armen tegenover elkaar gehouden 55 cm boven de vloer</td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>Medstore House Brand</td><td>39753-P016-EA95</td><td>Verdunnen tot 70% met Gedistilleerd water, voor reiniging</td></tr><tr><td>Ethovision XT 15</td><td>Noldus</td><td>n/a</td><td>Geautomatiseerde diertrackingsoftware</td></tr><tr><td>Laboratorium knaagdieet</td><td>LabDiet</td><td>Knaagdieet 5001</td><td>Standaard knaagdieet</td></tr><tr><td>Geheugenkaart</td><td>Kingstone Technology</td><td>SDA3/64GB</td><td>Voor video-opnames en bestandsoverdracht</td></tr><tr><td>Novelty Suppressed Feeding Chamber</td><td>Home Made</td><td>n/a</td><td>Aangepaste test plexiglas testkamer met heldere vloeren en muren 62 cm lang, 31 cm breed door 40 cm hoog.</td></tr><tr><td>Parlycarbonate buizen</td><td>Home Made</td><td>n/a</td><td>13 cm lang en 5 cm in diameter</td></tr><tr><td>Purina Gisteren's nieuws gerecyclede krantenbedekking</td><td>Purina</td><td>n/a</td><td>Standaard bedekking</td></tr><tr><td>Spectrofotometer</td><td>Biotek</td><td>Epoch Microplate Reader</td><td></td></tr></tbody></table>

behandelingstechnieken om stress bij muizen te verminderen

Handling Techniques to Reduce Stress in Mice

Proefdieren worden onderworpen aan meerdere manipulaties door wetenschappers of dierenverzorgers. De stress die dit veroorzaakt kan diepgaande effecten hebben op het welzijn van dieren en kan ook een verwarrende factor zijn voor experimentele variabelen zoals angstmaatregelen. In de loop der jaren zijn behandelingstechnieken ontwikkeld die handling-gerelateerde stress minimaliseren met een bijzondere focus op ratten en weinig aandacht voor muizen. Het is echter aangetoond dat muizen kunnen worden gewend aan manipulaties met behulp van behandelingstechnieken. Het gewennen van muizen aan het hanteren vermindert stress, vergemakkelijkt routinematige behandeling, verbetert het welzijn van dieren, vermindert de gegevensvariabiliteit en verbetert de experimentele betrouwbaarheid. Ondanks de gunstige effecten van de hantering, wordt de tail-pick-up-aanpak, die bijzonder stressvol is, nog steeds veel gebruikt. Dit artikel geeft een gedetailleerde beschrijving en demonstratie van een nieuw ontwikkelde muisbehandelingstechniek die bedoeld is om de stress die het dier tijdens menselijke interactie 2018 2018 2000 heeft ondervonden, tot een minimum te beperken. Deze handmatige techniek wordt gedurende 3 dagen uitgevoerd (3D-handling techniek) en richt zich op het vermogen van het dier om te habitueren aan de experimenteerder. Deze studie toont ook het effect aan van eerder vastgestelde tunnelbehandelingstechnieken (met behulp van een polycarbonaattunnel) en de tail-pick-up techniek. Specifiek bestudeerd zijn hun effecten op angstachtig gedrag, met behulp van gedragstests (Elevated-Plus Maze en Novelty Suppressed Feeding), vrijwillige interactie met experimenteerders en fysiologische meting (corticosteronniveaus). De 3D-handling techniek en de tunnel handling techniek verminderden angst-achtige fenotypes. In het eerste experiment, met behulp van 6 maanden oude mannelijke muizen, verbeterde de 3D-handling-techniek de interactie tussen experimenten aanzienlijk. In het tweede experiment, met behulp van 2,5 maanden oude vrouw, het verlaagde corticosteron niveaus. Als zodanig is de 3D-handling een nuttige aanpak in scenario's waarin interactie met de experimenteerder vereist of de voorkeur heeft, of waar tunnelafhandeling mogelijk niet mogelijk is tijdens het experiment.

Er werden twee afzonderlijke studies uitgevoerd met C57BL/6 muizen. Studie #1 omvatte 6 maanden oude mannen en studie #2 2,5 maanden oude vrouwtjes (N = 36 / studie) van Jackson Laboratories (Cat #000664) omvatte. Muizen arriveerden in de faciliteit op de leeftijd van 2 maanden. Terwijl studie #2 vrouwtjes twee weken na aankomst werden behandeld en getest, werden studie #1 mannetjes pas behandeld en getest op de leeftijd van 6 maanden (vertraging als gevolg van wereldwijde pandemie-shutdown). Gedurende deze tijd stierf e...

Dit artikel beschrijft een hanteringstechniek bij muizen, de 3D-handlingtechniek, die routinematige behandeling vergemakkelijkt door angstachtig gedrag te verminderen en details presenteert over twee bestaande gerelateerde technieken (tunnel- en staartbehandeling).

Behandelingstechnieken om stress bij muizen te verminderen

Laboratory animals are subjected to multiple manipulations by scientists or animal care providers. The stress this causes can have profound effects ...

Mijn naam is Dr.Thomas Prevot. Ik ben wetenschapper in het Center for Addiction and Mental Health, of CAMH, en een universitair docent aan de Universiteit van Toronto in het departement Psychiatrie. Mijn fractie heeft een bijzondere interesse in het verminderen van angst en reactiviteit bij muizen bij de uitgangssituatie om de gegevensvariabiliteit te verminderen en het dierenwelzijn te verbeteren.Muizen hebben bewezen van onschatbare waarde te zijn in basiswetenschap en preklinisch onderzoek, maar zeer weinig laboratoria over de hele wereld controleren op angst bij aanvang en de reactiviteit van hun proefdieren, waardoor de reproduceerbaarheid van gegevens tussen laboratoria wordt bemoeilijkt. Een belangrijke factor die bijdraagt aan angst bij aanvang zijn ongecontroleerde omgevingsvariabelen, zoals huisvestingsomstandigheden, milieuverrijking en blootstelling aan stress. Hoewel standaardisatie van huisvestingsomstandigheden en verrijking dit probleem heeft verbeterd, is blootstelling aan stress tijdens interactie met experimenteerders nog steeds grotendeels ongeadresseerd bij muizen.Staartbehandeling, het proces van het tillen van de muis bij de staart, is nog steeds de muis veel gebruikte muisbehandelingstechniek, ondanks dat het bijzonder stressvol is. Hoewel er alternatieven voor staartafhandeling zijn ontstaan, waaronder tunnelafhandeling en cup handling. De toepassing van deze technieken is traag verlopen.Hier beschrijven we een nieuwe techniek, vergelijkbaar met cup handling, die kan worden geïmplementeerd met slechts drie dagen gewennerij, of 3D-handling. Door de mate en complexiteit van interactie geleidelijk te verhogen en te evolueren als reactie op de reactiviteit van de muis op bepaalde verwerkingsmijlpalen, kunnen we stress verminderen en routinematige behandeling vergemakkelijken. We beoordelen de werkzaamheid van 3D-behandeling bij muizen in gedragstests, beoordelen angstachtig gedrag, interactie met experimenteerders en perifeer stresshormoon, corticosteron, niveaus en bieden een vergelijking met tunnelbehandelings- en staartbehandelingstechnieken.Open voorzichtig de kooi en plaats het deksel op de zijkant. Introduceer je gehandschoende hand in de thuiskooi voordat je probeert de muis op te pakken. Laat de muis ongeveer 30 seconden gewennen aan de aanwezigheid van de hand.Probeer dan de muis in gecupte handen op te pakken. Als de muis niet gemakkelijk kan worden opgepikt, kop dan beide handen samen en gebruik ze om de muis naar de hoek van de kooi te leiden. Gebruik vervolgens beide handen om de muis op te pakken.Zodra de muis uit de kooi is verwijderd, houdt u uw handen zo plat en open mogelijk. Laat de muis vrij verkennen. Dit biedt een plat platform voor de muis om op te stappen en beperkt het risico op bijten.Houd de hand open en plat, met de handpalm omhoog. Plaats uw andere hand naast de muis en laat de muis vrij van hand tot hand bewegen, zonder enige terughoudendheid. Na een minuut hanteren met platte handen, ontspan de palm van uw hand en cup de muis lichtjes in uw hoofd, voordat u de muis voorzichtig tussen de handen rolt.Ga vier minuten door, afwisselend tussen zacht rollen tussen handen en vrije verkenning van je open handen. Voer de laatste twee minuten een beschuttingstest uit. Laat de muis naar de rand van uw hand bewegen en breng de twee handen samen.Heel langzaam, cup je handen zodat de muis past in een schuilplaats gevormd door de handen. Zorg ervoor dat u een opening achterlaat, zodat de muis indien nodig kan ontsnappen. Probeer de muis vijf tot 10 seconden in de schuilplaats te houden zonder enige terughoudendheid.Herhaal de sheltertest drie tot vier keer in de afgelopen twee minuten. Overhaast het proces niet. Als de muis gestrest lijkt door in de hand te worden opgesloten, gaat u door met rollen tussen de handen en vrije verkenning gedurende 30 seconden en probeert u de shelter-test opnieuw uit te voeren.Laat vrije verkenning in handen gedurende 30 seconden en vervang vervolgens voorzichtig de muis in zijn kooi. Reinig de bovenkant van de tafel van eventuele uitwerpselen en urine met 70% ethanol of een geschikte reinigingsoplossing. Reinig de handschoenen van uitwerpselen en urine indien nodig en spoel bij het overschakelen naar een nieuwe kooi handschoenen af met 70% ethanol of verwissel handschoenen.Tegen dag twee zou het al haalbaar moeten zijn om de muis in gecupte handen uit de kooi te verwijderen. Als de muis reactief lijkt, voert u de platte hand en vrije verkenning van open hoofden gedurende 30 seconden tot een minuut uit. Ga anders verder met de rol tussen handen en de schuilplaatstest.Voer de rol uit tussen handen en beschuttingsstappen vanaf dag één gedurende twee tot drie minuten. Voer elke stap meerdere keren uit. Als de muis op zijn gemak lijkt in de asieltest, probeer dan de muis op de rug en het hoofd te aaien.Als de muis niet probeert contact te ontvluchten, ga dan verder met de neusplooi. Raak de muis voorzichtig aan op de punt van de snuit. Als het niet bijt of probeert zijn hoofd te draaien, is dit een goed teken van gewent.Voor de aaien en neus por test, haast het proces niet. Als de muis gestrest lijkt door in de handen te worden opgesloten of niet wil worden aangeraakt, gaat u een paar minuten door met het rollen tussen de handen en probeert u het vervolgens opnieuw. Stop deze sessie na ongeveer drie minuten hanteren, als het dier goed reageert op het asiel, hoofd aaien en neus porren.En als het dier bereid lijkt te zijn om je handen te verkennen zonder tekenen van stress, zoals pogingen om te ontsnappen, uit de handen springen of contact met de handen vermijden. Als de muis tekenen van stress blijft vertonen of niet goed reageert op de sheltertest of neusplooitest, gaat u door met de sessie tot het bereiken van vijf minuten, zoals op dag één. Plaats de muis in de kooi en maak het tafelblad en de handschoenen schoon.Op de derde dag doorloopt u dezelfde stappen die dag twee. Pak de muis in de palm van de hand. Breng de muis tussen de handen.Beperk de muis voorzichtig in gecupte handen. Als de muis goed reageert op deze stappen, probeer dan de muis te aaien en de neusplooitest te proberen. Op de derde dag moet de muis ontspannen genoeg zijn om in de palm van zijn hand te zitten zonder af te gaan, en je moet deze stappen gedurende ongeveer twee tot drie minuten kunnen doorlopen.Vervang de muis in de kooi en maak het tafelblad en de handschoenen schoon. Op de derde dag. als het dier wordt vastgehouden voor experimentele doeleinden, zoals orale gavage of intra-peritoneale injectie, kunnen de muizen worden onderworpen aan de nekknijptest.Pak de muis bij de nek van de nek, tussen duim en wijsvinger en til de muis twee tot drie seconden vijf centimeter boven je hand. Dit is normaal gesproken een ongemakkelijke positie voor volwassen muizen, en als de muizen in de buurt van immobile blijven, zijn ze goed gewend aan hantering en zullen ze gemakkelijk te beperken zijn voor injecties. Plaats de muis terug op uw platte hand en laat hem een minuut vrij verkennen.Dieren werden getest op hun bereidheid om vrijwillig met de experimenteerder te communiceren en het gemak van omgaan in een experimentele context. In studie één hadden muizen die werden behandeld door buisbehandeling of 3D-behandeling minder kans om te vluchten wanneer een experimenteerder een muis probeert op te pikken. Bovendien bracht studie één muis die met behulp van de 3D-techniek werd behandeld meer tijd door in hetzelfde kwadrant als de hand van de experimenteerder, wat wijst op een verhoogde bereidheid om met de experimenteerder te communiceren.In studie twee hadden muizen die werden behandeld door buisbehandeling of 3D-behandeling minder kans om te vluchten wanneer een experimenteerder de muis probeert op te pikken in vergelijking met muizen met staartbehandeling. In studie twee had de hanteringstechniek echter geen significante invloed op de tijd die in hetzelfde kwadrant als de hand van de experimenteerder werd doorgebracht. Het effect van 3D- en tunnelbehandeling werd vergeleken met staartbehandeling in twee tests van angstachtig gedrag, de nieuwigheid onderdrukte voedingstest en het verhoogde plusdoolhof.In studie één, in de nieuwigheid onderdrukte voedingstest, was er een trend om angst te verminderen in tunnel behandelde en 3D behandelde muizen. In het verhoogde plusdoolhof was er geen algemeen effect van de hantering. Wanneer samengevat als een Z-score, was er een significante vermindering van de algehele angst in tunnel behandelde en 3D behandelde muizen in vergelijking met staart behandelde muizen.In studie twee was er geen algemeen effect van behandeling op angstmaatregelen in de nieuwigheid onderdrukte voedingstest of het verhoogde plusdoolhof. Samengevat als een Z-score, had de handlingtechniek geen algemeen effect op angst. Als fysiologische maat voor stress verzamelden we serum van behandelde staart, 3D-behandelde en tunnel behandelde muizen 15 minuten na een korte behandelingssessie en testten we corticosteronniveaus.Er was geen algemeen effect van behandeling in studie één. In studie twee verminderde 3D-handling de corticosteronspiegels aanzienlijk in vergelijking met staartbehandeling. Op basis van observaties dat hanteringstechnieken bij muizen niet algemeen worden erkend door de wetenschappelijke gemeenschap, beschreven we het gebruik van een nieuwe hanteringstechniek.In beide gepresenteerde studies verminderde tunnel- en 3D-behandeling de pogingen van muizen om te vluchten wanneer ze werden opgepikt, wat mogelijk routinematige behandeling vergemakkelijkt. Bovendien verminderde deze techniek bij oudere mannelijke muizen angstachtig gedrag en verhoogde interactie met de experimenteerder. Bij jonge vrouwtjes.deze techniek verlaagde de corticosteronspiegels die werden waargenomen als reactie op de behandeling. Het implementeren van deze techniek kan de gegevensvariabiliteit verminderen, het dierenwelzijn verbeteren en routinematige hantering vergemakkelijken.

handling-techniques-to-reduce-stress-in-mice

Research

JoVE Journal

Behavior

Gedrag

This video demonstrates the method of inducing chronic stress in a mouse through repeated immobilization, leading to corticosterone release and reduced glutamate receptor activity in neurons, which results in depression-like behavior.

Inducing Depression-like Behavior in a Mouse via Immobilization Stress

Het onvoorspelbare chronische milde stress (UCMS) protocol is een gevalideerde methode voor het bestuderen van gedrags- en fysiologische veranderingen geassocieerd met chronische stress en depressieve symptomen. Acht weken van het opleggen van het UCMS-protocol induceert gedragsveranderingen en slechte gezondheidsuitkomsten bij knaagdieren van beide geslachten.

Een onvoorspelbare chronische milde stress protocol voor Aansporen depressieve symptomen, gedragsveranderingen en Negatieve Health Outcomes in Knaagdieren

Hier presenteren we het onvoorspelbare chronische milde stress-protocol in muizen. Dit protocol induceert een langdurig depressieve-achtige fenotype en kan beoordelen van de werkzaamheid van vermeende antidepressiva in het omkeren van de gedrags- en neuromolecular depressieve-achtige tekorten.

Het Protocol van de onvoorspelbare chronische milde Stress voor inducerende Anhedonie in muizen

Dit artikel biedt een vereenvoudigd en gestandaardiseerd protocol voor inductie van depressief-achtig gedrag in chronisch geïmmobiliseerde muizen met behulp van een fixator. Bovendien, gedrag en fysiologische technieken om te controleren of de inductie van depressie worden uitgelegd.

Een chronisch immobilisatie stress protocol voor het induceren van depressie-achtig gedrag bij muizen

De Y-doolhof barrière taak is een gedragstest die motivatie onderzoekt om inspanning te besteden voor beloning. Hier bespreken we het testen van meerdere goed gevalideerde chronische stressoren, waaronder chronische corticosteron en sociale nederlaag stress met dit gedrag, evenals de nieuwe chronische niet-discriminerende sociale nederlaag stress (CNSDS), die effectief is bij vrouwen.

Chronische stress verschuivingen inspanning-gerelateerde keuze gedrag in een Y-Maze Barrier Taak in muizen

We ontwikkelden een versneld social defeat stress-model voor adolescente C57BL/6-muizen, dat werkt bij zowel mannetjes als vrouwtjes en blootstelling mogelijk maakt tijdens discrete adolescente periodes. Blootstelling aan dit model leidt tot sociale vermijding, maar alleen bij een subset van verslagen mannelijke en vrouwelijke muizen.

Social Defeat Stress-model voor adolescente C57BL/6 mannelijke en vrouwelijke muizen

De meeste gedragsexperimenten voor knaagdieren zijn oorspronkelijk bedacht voor ratten. Vanwege de gedragsverschillen tussen ratten en muizen zijn soms aanpassingen nodig voor muizen. We presenteren een methode om het ruimtelijk werkgeheugen bij muizen te testen, waardoor de stress tijdens de werkgeheugentaak wordt geminimaliseerd.

Een appetijtieve ruimtelijke werkgeheugentaak voor muizen in een semi-geautomatiseerd 8-armig radiaal doolhof, waardoor angstige geheugenassociatie in het doolhof wordt verminderd

Door vier dagelijkse sociale stressoren te integreren, beschrijft de huidige studie een meervoudig geïntegreerd sociaal stressmodel (MISS) voor psychiatrische stoornissen bij vrouwelijke C57BL/6J-muizen. Na tien dagen van herhaalde blootstelling aan MISS ontwikkelden de muizen depressieve en angstachtige fenotypes, waardoor een natuurlijk, op etiologie gebaseerd diermodel werd geboden voor het bestuderen van psychiatrische stoornissen bij vrouwelijke proefpersonen.

Een meervoudig geïntegreerd sociaal stressmodel voor psychiatrische stoornissen bij vrouwelijke C57BL/6J-muizen

Dit artikel behandelt de procedures om stressreacties op te wekken met behulp van fysieke fixatiestress bij muizen en ratten. Aanvullende overwegingen die in acht moeten worden genomen bij het selecteren en gebruiken van fixatiestress in knaagdiermodellen worden besproken.

Terughoudendheid om stress op te wekken bij muizen en ratten

Dit artikel beschrijft het gebruik van chronische inwoner indringer sociale spanning als een ethologically relevante paradigma naar model postpartum depressie en angst bij lacterende knaagdieren.

Met behulp van Chronische Sociale Stress om model postnatale depressie bij zogende Knaagdieren

Leer de 3D-hanteertechniek om stress en angstgedrag bij muizen te verminderen tijdens routinehandelingen. Deze methode verbetert het dierenwelzijn en de reproduceerbaarheid van onderzoeksgegevens.

Behandelingstechnieken om stress bij muizen te verminderen

Meer video's verkennen