Name: Multifactoriële beoordeling van motorisch gedrag bij ratten na unilaterale ischias zenuw crush letsel (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-07-31T14:30:00.000+00:00
Duration: 14 min 50 s
Description: Leer een multifactoriële beoordeling van motorisch gedrag bij ratten na ischiaszenuwcrushletsel met open field-test, CatWalk-analyse, balklopen en ladderloop. Dit protocol helpt onderzoekers motorische deficienties kwantitatief te evalueren.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd ondersteund door het Duitse federale ministerie van Onderwijs en Onderzoek (BMBF DysTract tot C.W.I.) en door het Interdisciplinair Centrum voor Klinisch Onderzoek (IZKF) van de Universiteit van Würzburg (N-362 tot C.W.I.; Z2-CSP3 naar L.R.). Daarnaast heeft dit project financiering ontvangen van het horizon 2020-onderzoek- en innovatieprogramma van de Europese Unie in het kader van het EJP RD COFUND-EJP N° 825575 (EurDyscover aan J.V.) en van de VERUM Foundation. Bovendien wordt C.W.I. gefinancierd door de Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG, German Reseach Foundation) Project-ID 424778381-TRR 295, door het Deutsche Stiftung Neurologie and ParkinsonFonds. L.R. wordt daarnaast ondersteund door de Dystonia Medical Reseach Foundation.
De auteurs danken Keali Röhm, Veronika Senger, Heike Menzel en Louisa Frieß voor hun technische bijstand en Helga Brünner voor de verzorging van dieren.

<ol><li>Iannaccone, P. M., Jacob, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rats%5BTitle%5D)+AND+%22Disease+Models+%26+Mechanisms%22%5BJournal%5D)">Rats.</a> Disease Models & Mechanisms. 2 (5-6), 206-210 (2009).</li>
<li>Phifer-Rixey, M., Nachman, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insights+into+mammalian+biology+from+the+wild+house+mouse+Mus+musculus%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Insights into mammalian biology from the wild house mouse Mus musculus.</a> Elife. 4, (2015).</li>
<li>Musacchio, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subthalamic+nucleus+deep+brain+stimulation+is+neuroprotective+in+the+A53T+alpha-synuclein+Parkinson%27s+disease+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Neurology%22%5BJournal%5D)">Subthalamic nucleus deep brain stimulation is neuroprotective in the A53T alpha-synuclein Parkinson's disease rat model.</a> Annals of Neurology. 81 (6), 825-836 (2017).</li>
<li>Ip, C. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tor1a%2B%2F-+mice+develop+dystonia-like+movements+via+a+striatal+dopaminergic+dysregulation+triggered+by+peripheral+nerve+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neuropathologica+Communications%22%5BJournal%5D)">Tor1a+/- mice develop dystonia-like movements via a striatal dopaminergic dysregulation triggered by peripheral nerve injury.</a> Acta Neuropathologica Communications. 4 (1), 108(2016).</li>
<li>Rauschenberger, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Striatal+dopaminergic+dysregulation+and+dystonia-like+movements+induced+by+sensorimotor+stress+in+a+pharmacological+mouse+model+of+rapid-onset+dystonia-parkinsonism%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">Striatal dopaminergic dysregulation and dystonia-like movements induced by sensorimotor stress in a pharmacological mouse model of rapid-onset dystonia-parkinsonism.</a> Experimental Neurology. 323, 113109(2020).</li>
<li>Klein, A., Wessolleck, J., Papazoglou, A., Metz, G. A., Nikkhah, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Walking+pattern+analysis+after+unilateral+6-OHDA+lesion+and+transplantation+of+foetal+dopaminergic+progenitor+cells+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Walking pattern analysis after unilateral 6-OHDA lesion and transplantation of foetal dopaminergic progenitor cells in rats.</a> Behavioural Brain Research. 199 (2), 317-325 (2009).</li>
<li>Kim, D. H., Murovic, J. A., Tiel, R., Kline, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Management+and+outcomes+in+353+surgically+treated+sciatic+nerve+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Management and outcomes in 353 surgically treated sciatic nerve lesions.</a> Journal of Neurosurgery. 101 (1), 8-17 (2004).</li>
<li>Kline, D. G., Kim, D., Midha, R., Harsh, C., Tiel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Management+and+results+of+sciatic+nerve+injuries%3A+a+24-year+experience%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Management and results of sciatic nerve injuries: a 24-year experience.</a> Journal of Neurosurgery. 89 (1), 13-23 (1998).</li>
<li>Kaplan, H. M., Mishra, P., Kohn, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+overwhelming+use+of+rat+models+in+nerve+regeneration+research+may+compromise+designs+of+nerve+guidance+conduits+for+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Materials+Science%3A+Materials+in+Medicine%22%5BJournal%5D)">The overwhelming use of rat models in nerve regeneration research may compromise designs of nerve guidance conduits for humans.</a> Journal of Materials Science: Materials in Medicine. 26 (8), 226(2015).</li>
<li>Bauder, A. R., Ferguson, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reproducible+mouse+sciatic+nerve+crush+and+subsequent+assessment+of+regeneration+by+whole+mount+muscle+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Reproducible mouse sciatic nerve crush and subsequent assessment of regeneration by whole mount muscle analysis.</a> Journal of Visualized Experiments. (60), e3606(2012).</li>
<li>Savastano, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sciatic+nerve+injury%3A+a+simple+and+subtle+model+for+investigating+many+aspects+of+nervous+system+damage+and+recovery%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Sciatic nerve injury: a simple and subtle model for investigating many aspects of nervous system damage and recovery.</a> Journal of Neuroscience Methods. 227, 166-180 (2014).</li>
<li>Menorca, R. M., Fussell, T. S., Elfar, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nerve+physiology%3A+mechanisms+of+injury+and+recovery%5BTitle%5D)+AND+%22Hand+Clinics%22%5BJournal%5D)">Nerve physiology: mechanisms of injury and recovery.</a> Hand Clinics. 29 (3), 317-330 (2013).</li>
<li>Luis, A. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+cell+transplantation+effects+on+sciatic+nerve+regeneration+after+a+standardized+crush+injury+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Neural cell transplantation effects on sciatic nerve regeneration after a standardized crush injury in the rat.</a> Microsurgery. 28 (6), 458-470 (2008).</li>
<li>Knorr, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+evolution+of+dystonia-like+movements+in+TOR1A+rats+after+transient+nerve+injury+is+accompanied+by+dopaminergic+dysregulation+and+abnormal+oscillatory+activity+of+a+central+motor+network%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiology+of+Disease%22%5BJournal%5D)">The evolution of dystonia-like movements in TOR1A rats after transient nerve injury is accompanied by dopaminergic dysregulation and abnormal oscillatory activity of a central motor network.</a> Neurobiology of Disease. , 105337(2021).</li>
<li>Quartarone, A., Hallett, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emerging+concepts+in+the+physiological+basis+of+dystonia%5BTitle%5D)+AND+%22Movement+Disorders%22%5BJournal%5D)">Emerging concepts in the physiological basis of dystonia.</a> Movement Disorders. 28 (7), 958-967 (2013).</li>
<li>Metz, G. A., Whishaw, I. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+ladder+rung+walking+task%3A+a+scoring+system+and+its+practical+application%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">The ladder rung walking task: a scoring system and its practical application.</a> Journal of Visualized Experiments. (28), e1204(2009).</li>
<li>Metz, G. A., Whishaw, I. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cortical+and+subcortical+lesions+impair+skilled+walking+in+the+ladder+rung+walking+test%3A+a+new+task+to+evaluate+fore-+and+hindlimb+stepping%2C+placing%2C+and+co-ordination%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Cortical and subcortical lesions impair skilled walking in the ladder rung walking test: a new task to evaluate fore- and hindlimb stepping, placing, and co-ordination.</a> Journal of Neuroscience Methods. 115 (2), 169-179 (2002).</li>
<li>Johansson, B. B., Ohlsson, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environment%2C+social+interaction%2C+and+physical+activity+as+determinants+of+functional+outcome+after+cerebral+infarction+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">Environment, social interaction, and physical activity as determinants of functional outcome after cerebral infarction in the rat.</a> Experimental Neurology. 139 (2), 322-327 (1996).</li>
<li>Ohwatashi, A., Ikeda, S., Harada, K., Kamikawa, Y., Yoshida, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exercise+enhanced+functional+recovery+and+expression+of+GDNF+after+photochemically+induced+cerebral+infarction+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22EXCLI+Journal%22%5BJournal%5D)">Exercise enhanced functional recovery and expression of GDNF after photochemically induced cerebral infarction in the rat.</a> EXCLI Journal. 12, 693-700 (2013).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets bekend te maken.

Dit gedragsbeoordelingsprotocol biedt een overzicht van voor- en nadelen en mogelijke uitlezingen van de geselecteerde gedragstestbatterij in een knaagdiermodel na ischiaszenuwverpletteringsletsel. 
Om een vergelijkende uitkomst van de ischias zenuwverpletteringsblessure te verkrijgen, is een consistente verbrijzelingstechniek verplicht. Het gebruik van een niet-gekartelde klem (Ultra Fine Hemostat) in plaats van een tang kan de consistentie van de crush verbeteren. Gebruik dezelfde klem en dezelfde verbrijzelingspositie om gelijke zenuwcompressie te garanderen. Het exclusieve gebruik van de klem voor het verbrijzelen en voorzichtig hanteren van de klem verbetert de consistentie. Voer ook de procedure van het verbrijzelingsletsel met zorg uit. Extra schade aan de zenuw tijdens de operatie, zoals ongewenste tractie van de zenuw, kan leiden tot ongewenste bijwerkingen zoals automutilatie. Daarom wordt een zorgvuldig zenuwpreparaat en een toediening van een pijnstiller gedurende minimaal twee dagen aanbevolen. 
Multifactoriële beoordeling van motorisch gedrag kan het fenotype karakteriseren na zenuwverpletteringsletsel bij ratten op verschillende niveaus. We gebruikten de OFT, CatWalk XT ganganalyse, beam walking task en ladder rung walking task. Een geblindeerde experimentele procedure en data-analyse voor experimentele groepen is essentieel voor deze experimenten. Vóór de gedragsbeoordeling werden dieren gedurende ten minste 30 minuten onder testomstandigheden in de testruimte geacclimatiseren. Alle gedragstests die hierin worden toegepast, hebben het voordeel dat voedsel- of watertekort niet vereist is. Dezelfde groep dieren werd gebruikt in alle beschreven gedragstests. Per dier werden maximaal twee verschillende gedragstests per dag uitgevoerd. Als gedragstests met regelmatige tussenpozen worden uitgevoerd, let dan op een vergelijkbare procedure, zoals het uitvoeren van de test in dezelfde dierorde en op hetzelfde tijdstip van de dag. Een ander belangrijk aspect voor gedragsanalyse is de dag-nachtcyclus van ratten. Overweeg een omgekeerde dag-nachtcyclus om meer natuurlijke en hogere niveaus van activiteit op de dagcyclus (donkere cyclus) te verkrijgen. Dit moet vooral worden overwogen voor het meten van spontaan gedrag, zoals de OFT. In dit experiment kon een omgekeerde dag-nachtcyclus niet worden geïmplementeerd, maar werd gezorgd voor een adequate acclimatisatie aan de testomstandigheden. Een perfecte verlichting is essentieel voor video's met hoge resolutie voor de beam walking-taak en de ladder rung walking-taak. Deze hoge videokwaliteit kan niet worden bereikt bij het uitvoeren van experimenten in het donker. 
De beoordeling van de gang vereist een continue taakprestatie. Het eerste belangrijke aspect van een continue taakprestatie is om de dieren te overtuigen om de opstelling over te steken. Om de motivatie te verhogen, plaatst u kleine voedselkorrels (45 mg) aan het einde van de opstelling. Om ervoor te zorgen dat dieren vertrouwd raken met de voedselkorrels, moeten de pellets vóór het testen aan hen worden gevoerd. Ook kan een doelvak aan het einde van de installatie nuttig zijn. De opzet van de CatWalk bevat al een doelbox, maar ratten aarzelen soms om de doelbox in te gaan. Als alternatief kunt u een kleine kooi in de doeldoos toevoegen, maar de thuiskooi van ratten past niet in de doelbox. Laat de rat een paar minuten in de kooi gewennen voordat hij wordt aanwinst. Bovendien kan een andere rat uit dezelfde thuiskooi in de doelbox of in de kooi in de doelbox worden geplaatst. Zorg ervoor dat de tweede rat in de doos blijft en de ingang van de doelbox niet blokkeert. Bovendien is het ook mogelijk om de doelbox uit het CatWalk-systeem te verwijderen en de rattenhuiskooi aan het einde van de loopbrug te plaatsen, waardoor de rat na elke run zijn "thuisgebied" kan betreden. Voor de installatie van de balklooptaak en de ladderlooptaak raden we aan om aan het einde van de opstelling een doelbox of de thuiskooi toe te voegen. Om consistentie te garanderen, moeten de CatWalk, de balkwandeltaak en de ladderlooptaak minstens één keer per week worden uitgevoerd met zes tot tien runs.
Hoewel niet elke analyse significante verschillen in deze studie opleverde, is u van mening dat een opname van genetisch gemodificeerde dieren of behandelingsgroepen waardevolle gegevens kan opleveren die onderscheid kunnen maken tussen groepen van dezelfde gedragstests. 
De zenuwverpletteringsblessure had geen effect op de motorische activiteit van de rat, die in vijf minuten OFT werd gemeten. Catwalk XT ganganalyse is een objectiever en gevoeliger hulpmiddel om gang-, poot- en teenplaatsing te analyseren. Na een intensieve training leren de ratten de loopbrug van het CatWalk XT-apparaat over te steken naar de standaardinstellingen. De zenuwbeschadiging vermindert het vermogen van de ratten om de loopbrug over te steken niet. De automatische berekening van verschillende parameters presenteert de gegevens objectief. Aanvullende informatie kan worden verkregen met behulp van de module "Interactieve voetafdrukmetingen" en inderdaad, deze analyses leverden aanzienlijke verschillen op in verschillende parameters van teenspreiding, afdruklengte en poothoek tot lichaamsas die ratten met en zonder zenuwletsel vergelijken.
Ratten kunnen gemakkelijk worden getraind voor de balkwandeling. Verschillen in de latentietijd om de balk over te steken en in het aantal voetslips per stap van de zenuwgewonde hindlimb werden gedetecteerd door naïef te vergelijken met verbrijzelde ratten. Een nadeel van het analyseren van zenuwgewonde ratten met de balkwandeltaak is de grootte van de balk. Binnen de eerste twee weken na de ischias zenuwverpletteringsblessure hebben de ratten hulp nodig om de balk over te steken omdat hun evenwicht is aangetast. Hoewel sommige ratten in staat kunnen zijn om de balk over te steken, is het risico op verwondingen veroorzaakt door een val groot. Zenuwgemalen dieren moeten daarom worden geholpen om de balk over te steken gedurende de eerste twee weken na ischias zenuwverpletteringsletsel of langer, indien nodig. Het is echter moeilijk om runs met en zonder hulp te vergelijken. Ook is de motorbalans een belangrijke parameter die wordt beoordeeld door de balklooptaak. We vonden deze parameter niet relevant voor ons zenuwverpletterende rattenmodel. Daarom konden scores beschreven door Ohwatashi et al. en Johansson & Ohlsson niet worden gebruikt en werden runs met een onvolledige balkdoorvoer uitgesloten voor gegevensanalyse18,19.
De schaal van 7 categorieën van Metz et al. kan zowel voor- als achterpoten analyseren en onderscheid maken tussen verschillende ernstniveaus van fouten van alle ledematen tijdens de ladderlooptaak16,17. Door de meest prominente fouten te analyseren, waaronder de categorieën van 0 tot 2, konden geen verschillen in fouten per stap worden gedetecteerd in de hindlimb bij het vergelijken van zenuwgewonde wt-ratten met naïeve wt-ratten. Bovendien verschilde de latentietijd van het doorkruisen van het ladderloopapparaat niet tussen zenuwgewonde wt-ratten en wt-naïeve ratten. Deep learning-modellen kunnen de gegevensanalyse van de ladderlooptaak verbeteren en versnellen door middel van een geautomatiseerde aanpak. 
Het is belangrijk om te vermelden dat de zenuwverpletteringsblessure en alle beschreven gedragstests gemakkelijk kunnen worden vertaald naar muizen, door de instellingen en maten van de opstellingen aan te passen. Het gebruik van muizen als modelorganisme heeft het gunstige effect dat transgene modellen voor veel menselijke ziekten bestaan.

Knaagdieren zijn uitstekende modelorganismen om het begrip van menselijke ziekten te verdiepen1,2 door hypothesen op meerdere biologische niveaus te testen. Een fundamenteel biologisch niveau voor de karakterisering van knaagdiermodellen is het fenotypeniveau, gemeten aan de hand van gedragsbeoordelingen. Afhankelijk van het diermodel en de wetenschappelijke onderzoeksvraag is de selectie van een krachtige en betrouwbare gedragstestbatterij essentieel om een breed scala aan gedragsaspecten te behandelen, zoals voor diermodellen van de ziekte van Parkinson en dystonie3,4,5,6.
De heupzenuw is de grootste zenuw in het menselijk lichaam met motorische en zintuiglijke vezels. Verwondingen van de heupzenuw kunnen gemakkelijk het gevolg zijn van een verscheidenheid aan gebeurtenissen, zoals verkeersongevallen en operaties7,8. Daarom zijn onderzoeksactiviteiten met knaagdiermodellen met ischiaszenuwletsels van translationele relevante waarde. Hoewel het translationele aspect van zenuwregeneratie van rat naar mens kritisch moet worden beschouwd9, is de ischiaszenuwverpletteringsletsel (axonotmesis) in knaagdiermodellen een veelgebruikte methode om degeneratie - en regeneratieprocessen van perifere zenuwen te analyseren10,11. In geval van een verbrijzelingsletsel is de zenuw niet volledig doorgetranseceerd. Het beschadigt het axon, wat resulteert in geleidingsblok direct na verbrijzelingsletsel gevolgd door regeneratieve processen 4,12,13.
Bovendien is in dystonieonderzoek de unilaterale ischiaszenuwverpletteringsletsel een gevestigde methode om dystonie-achtige bewegingen (DLM) te activeren in genetisch gepredisponeerde dystonie knaagdiermodellen, die geen DLM per se4,14vertonen . Aangenomen wordt dat het perifere zenuwtrauma de sensorimotorische integratie verstoort door de ischiaszenuwvezels aan te tasten, die verantwoordelijk zijn voor motorische en sensorische functies15.
We geven hier een gedetailleerde beschrijving voor een gestandaardiseerde verbrijzelingsblessure van de heupzenuw en een batterij motorische gedragsbeoordelingen die bestaat uit de open veldtest (OFT), CatWalk XT-ganganalyse, balkwandeltaak en ladderlooptaak bij naïeve wilde type (wt) ratten (n = 8-9) en wt ratten vijf weken na unilaterale ischiaszenuwverpletteringsletsel (n = 10). De OFT geeft informatie over de algemene motorische activiteit, terwijl een gedetailleerde ganganalyse wordt bereikt door het geautomatiseerde ganganalysesysteem CatWalk XT. De balklooptaak wordt gebruikt om de motorcoördinatie te beoordelen door de tijd te evalueren om de balk over te steken en het aantal voetplaatsingsfouten. Voor loopprestatiesanalyse geeft de ladderlooptaak informatie over voet- of pootplaatsing en fouten op een horizontaal ladderloopapparaat met een constant maar onregelmatig looppatroon.

<table><tbody><tr><td>Azijnzuur, &ge;99,8%</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>33209-1L</td><td></td></tr><tr><td>Appose ULC huidstapler 35W</td><td>Covidien</td><td>8886803712</td><td></td></tr><tr><td>Balken</td><td>zelf gemaakt</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bepanthen oogcrème</td><td>Bayer Vital GmbH</td><td>81552983</td><td></td></tr><tr><td>Doos voor OFT</td><td>zelf gemaakt</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Camcorder GC-PX100</td><td>JVC</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Catwalk XT</td><td>Noldus</td><td></td><td>&nbsp;installatie en software</td></tr><tr><td>Kamer voor isofluran</td><td>GT-Labortechnik</td><td></td><td>op maat gemaakt</td></tr><tr><td>Wegwerpscalpel Nr. 11</td><td>Feather</td><td>20.001.30.011</td><td></td></tr><tr><td>Dr&auml;ger Vapor 19.3 isofluran systeem</td><td>Dr. Wilfried M&uuml;ller GmbH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dumont #2 - laminectomie forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>11223-20</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5 forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>11251-30</td><td>super-fijn</td></tr><tr><td>Stofvrije precisiepellets 45 mg</td><td>Bio-Serv</td><td>F0021</td><td></td></tr><tr><td>EthoVision XT</td><td>Noldus</td><td></td><td>&nbsp;installatie en software</td></tr><tr><td>Forceps 160 mm</td><td>Hartenstein</td><td>PZ09</td><td></td></tr><tr><td>Gasanesthesiemasker, rat</td><td>Dr. Wilfried M&uuml;ller GmbH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Doelvak voor ladderlooptakenapparaat</td><td>zelf gemaakt</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Haartrimmer Magnum 5000</td><td>Wahl GmbH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Verharde fijne schaar</td><td>Fine Science Tools</td><td>14090-11</td><td></td></tr><tr><td>Verwarmingstafel</td><td>MEDAX</td><td>13801</td><td></td></tr><tr><td>Isofluran CP 1ml/ml, 250 ml</td><td>cp-pharma</td><td>1214</td><td>recept vereist</td></tr><tr><td>Kinovea</td><td>www.kinovea.org</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ladderlooptakenapparaat</td><td>zelf gemaakt</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Naaldhouder</td><td>KLS Martin</td><td>20-526-14-07</td><td></td></tr><tr><td>Octeniderm</td><td>Sch&uuml;lke</td><td>118211</td><td></td></tr><tr><td>Rimadyl 50 mg/ml, injecteerbaar</td><td>Zoetis</td><td></td><td>Carprofen, recept vereist</td></tr><tr><td>Rubberen bandretractoren</td><td>zelf gemaakt</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Spacer voor balk</td><td>zelf gemaakt</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Spacer voor ladderlooptakenapparaat</td><td>zelf gemaakt</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sutuur Silkam 4/0 DS 19</td><td>B. Braun</td><td>C0762202</td><td></td></tr><tr><td>Ultrafijne hemostatische klemmen (niet-gekartelde klem)</td><td>Fine Science Tools</td><td>13020-12</td><td></td></tr></tbody></table>

multifactoriële beoordeling van motorisch gedrag bij ratten na unilaterale ischias zenuw crush letsel

Multifactorial Assessment of Motor Behavior in Rats after Unilateral Sciatic Nerve Crush Injury

De inductie van een perifere zenuwbeschadiging is een veel gebruikte methode in de neurowetenschappen voor de beoordeling van onder andere reparatie- en pijnmechanismen. Bovendien is op het gebied van bewegingsstoornissen is ischiasverpletteringsletsel gebruikt om een dystonie-achtig fenotype te activeren in genetisch gepredisponeerde DYT-TOR1A knaagdiermodellen van dystonie. Om consistente, reproduceerbare en vergelijkbare resultaten te bereiken na een ischias zenuwverpletteringsletsel, is een gestandaardiseerde methode voor het induceren van de zenuwverplettering essentieel, naast een gestandaardiseerde fenotypische karakterisering. Er moet niet alleen aandacht worden besteed aan het specifieke assortiment gedragstests, maar ook aan de technische vereisten, de juiste uitvoering en opeenvolgende gegevensanalyse. Dit protocol beschrijft in detail hoe een heupzenuwverpletteringsletsel moet worden uitgevoerd en biedt een gedragstestbatterij voor de beoordeling van motorische tekorten bij ratten, waaronder de open veldtest, de CatWalk XT-ganganalyse, de balkwandeltaak en de ladderlooptaak.

De representatieve resultaten van de vijf minuten OFT laten zien dat de zenuw verbrijzelingsblessure vijf weken na de operatie geen effect heeft op de motorische activiteit (figuur 1).
Ganganalyse met het CatWalk XT-systeem (figuur 2) genereert veel verschillende parameters. Selectieve parameters werden statistisch geanalyseerd door wt naïeve ratten te vergelijken met zenuwgewonde wt ratten vijf weken na de zenuwverplettering (Figuur 2D). Significante veranderingen konden worden gedetecteerd voor de gemiddelde loopsnelheid, de paslengte en het afdrukgebied van de zenuwgewonde (rechter) achterpoot. Een meer gedetailleerde analyse van de zenuwgewonde achterpoot werd uitgevoerd met de module "Interactieve voetafdrukmetingen". Een significante vermindering van de parameters teenspreiding, tussenteenspreiding en afdruklengte werden waargenomen bij zenuwgewonde wt-ratten in vergelijking met wt-naïeve ratten. Bovendien verschillen de poothoek lichaamsas en de poothoekbewegingsvector aanzienlijk bij het vergelijken van zenuwgewonde wt-ratten met wt-naïeve ratten (figuur 2E).
Figuur 3 bevat gegevens over de motorische coördinatie die zijn verkregen door middel van een taakbeoordeling van het lopen van de straal. Zenuwgewonde wt-ratten vertoonden een aanzienlijk verhoogde latentietijd om de straal over te steken in vergelijking met wt-naïeve ratten vijf weken na letsel (figuur 3B). Als een extra uitlezing van de balklooptaak werden volledige slips en halve slips van de zenuwgewonde hindlimb geteld en beschouwd als een fout voor statistische analyse. Het percentage fouten per stap van de zenuwgewonde (rechter) hindlimb was significant verhoogd bij zenuwgewonde wt-ratten in vergelijking met wt-naïeve ratten.
Representatieve gegevens over de looptaak van de ladderloop (figuur 4) tonen geen significante veranderingen in de latentietijd om de loopbrug van het ladderloopapparaat over te steken (figuur 4C) of in het percentage fouten per trede van de zenuwgewonde (rechter) achterhand (figuur 4D). De analyse van het foutpercentage per stap van de zenuwgewonde hindlimb beschouwde alleen de score van 0 tot 2 van de schaal van 7 categorieën van Metz et al. De verdeling van alle scorecategorieën per stap uit de schaal van 7 categorieën van de zenuwgewonde hindlimb en de niet-zenuwgewonde (linker) hindlimb wordt geïllustreerd in figuur 4E.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62606/62606fig01.jpg"> Figuur 1: Beoordeling van de motorische activiteit tijdens de open veldtest. (A) Afbeelding van de open veldtestopstelling. Geselecteerde afbeelding afgetrokken van een opgenomen video tijdens een open veldtest met een rat in de open veldarena zonder (B) en met (C) tracking. (D) De snelheid tijdens een testopname van vijf minuten open veld werd vijf weken na zenuwverplettering onderzocht bij naïeve ratten en wt-ratten. Gegevens worden weergegeven als gemiddelde ± SEM. Statistische analyse werd uitgevoerd met behulp van de ongepaarde t-test van de normaal verspreide gegevens. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62606/62606fig01large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze afbeelding te bekijken.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62606/62606fig02.jpg"> Figuur 2: Ganganalyse met het CatWalk XT-systeem. (A) Afbeelding van het CatWalk XT-apparaat. (B) Voorbeelden van de afdrukweergave met de gelabelde pootafdrukken in valse kleurmodus en voorbeelden van de timingweergave met een op tijd gebaseerd gangdiagram van wt-naïeve ratten en wt-ratten vijf weken na zenuwverpletteringsletsel. (C) Voorbeelden van de teenclassificatie met de teenspreiding (TS), de tussenteenspreiding (ITS) en de afdruklengte (PL), alsmede voorbeelden van de lichaamsasweergave met de lichaamsas (witte lijn) en de bewegingsvector (rode lijn) van wt-naïeve ratten en wt-ratten vijf weken na zenuwverpletteringsletsel. (D) Gegevens van geselecteerde parameters uit de "standaard" classificatie waarin wt naïeve ratten en wt ratten vijf weken na zenuwverplettering letsel worden vergeleken. (E) Gegevens van geselecteerde parameters uit de module "Interactieve voetafdrukmetingen" waarin naïeve ratten en wt-ratten vijf weken na zenuwverpletteringsletsel worden vergeleken. De gegevens worden weergegeven als gemiddelde ± SEM. Statistische analyse werd uitgevoerd met behulp van de ongepaarde t-test van de normaal gedistribueerde gegevens, de ongepaarde t-test met Welch's correctie van normaal gedistribueerde gegevens met ongelijke variantie en de Mann-Whitney U-test van de niet-normale gedistribueerde gegevens. P-waarde < 0,05 werd gedefinieerd als statistisch significant gelabeld als *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62606/62606fig02large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze afbeelding te bekijken.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62606/62606fig03.jpg"> Figuur 3: Ganganalyse met de balklooptaak. (A) Beeld- en schematische tekeningen van de opstelling van de balkwandelingstaak. De latentietijd om de balk (B) over te steken en het percentage voetslipfouten per stap van de zenuwgewonde hindlimb tijdens de balkwandeltaak (C) werd vijf weken na zenuwverpletteringsletsel geanalyseerd bij wt-naïeve ratten en wt-ratten. Representatief beeld voor de begintijdpositie (D) en de eindtijdpositie (E) van de balklooptaak. Representatieve beeldvolgorde van een volledige slipfout (F) en een halve slipfout (G) van de straallooptaak. Gegevens worden weergegeven als gemiddelde ± SEM. Statistische analyse werd uitgevoerd met behulp van de Mann-Whitney U-test van de niet-normale gedistribueerde gegevens. P-waarde < 0,05 werd gedefinieerd als statistisch significant gelabeld als *p < 0,05, **p < 0,01. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62606/62606fig03large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze afbeelding te bekijken.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62606/62606fig04.jpg"> Figuur 4: Ganganalyse met behulp van de ladderlooptaak. Afbeelding (A) en schematische tekeningen (B) van de ladderlooptaakopstelling. De latentietijd van het doorkruisen van het ladderloopapparaat (C) en het percentage voetslipfouten per trede van de zenuwgewonde achterpoot tijdens de ladderlooptaak (D) werd vijf weken na zenuwverpletteringsletsel beoordeeld bij wt-naïeve ratten en wt-ratten. (E) De procentuele verdeling van de scorecategorie per stap volgens de schaal van 7 categorieën van Metz et al. voor de linker en rechter hindlimb van wt naïeve ratten en wt ratten vijf weken na zenuwverplettering letsel. De gegevens worden weergegeven als gemiddelde ± SEM. Statistische analyse werd uitgevoerd met behulp van de ongepaarde t-test van de normaal gedistribueerde gegevens en de Mann-Whitney U-test van de niet-normale gedistribueerde gegevens. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62606/62606fig04large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze afbeelding te bekijken.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62606/62606fig05.jpg"> Figuur 5: Voorbeeldige weergave van elke categorie volgens de schaal van 7 categorieën van Metz et al. tijdens de ladder rung lopen taak. Representatieve beeldvolgorde van de rechterachterhand van categorie 0 - totale misser, categorie 1 - diepe slip, categorie 2 - lichte slip, categorie 3 - vervanging, categorie 4 - correctie, tijdens de ladderlooptaak. Representatieve foto's voor categorie 5 - gedeeltelijke plaatsing en categorie 6 - juiste plaatsing. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62606/62606fig05large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze afbeelding te bekijken.</a>

We bieden een protocol voor de beoordeling van motorisch gedrag via een gedragstestbatterij bij ratten na ischias zenuwverpletteringsletsel.

Multifactoriële beoordeling van motorisch gedrag bij ratten na unilaterale ischias zenuw crush letsel

The induction of a peripheral nerve injury is a widely used method in neuroscience for the assessment of repair and pain mechanisms among others. In ...

Het algemene doel van dit protocol is om de procedures te beschrijven die betrokken zijn bij het uitvoeren van onherproduceerbare ischiaszenuwverplettering en om een protocol te bieden voor de beoordeling van motorisch gedrag na perifeer trauma. De selectie van een krachtige en betrouwbare gedragstestbatterij is essentieel om een breed scala aan gedragsaspecten te dekken en hangt af van het gebruikte diermodel en de vraag naar wetenschappelijk onderzoek. Dit protocol beschrijft in detail hoe een heupzenuwverpletteringsletsel moet worden uitgevoerd en biedt een gedragstestbatterij voor de beoordeling van motorische tekorten bij ratten, waaronder de open veldtest, de CatWalk-ganganalyse, de balklooptaak en de ladderlooptaak.Dierproeven werden uitgevoerd in overeenstemming met de toepasselijke nationale en institutionele richtlijnen voor de verzorging en het gebruik van dieren. Zorg voor een steriele omgeving tijdens de hele chirurgische ingreep. Stel de operatietafel in met de benodigde apparatuur.Verdoof de rat diep in een gesloten kast met isofluraan en scheer een uitgebreid deel van de rechter achterpoot. Plaats vervolgens de rat in het anesthesiemasker en ga door met diepe anesthesie met isofluraan. Bevestig de romp en beide achterpoten van de rat met tape.Plaats beide achterpoten in een symmetrische en uitgestrekte positie en draai elke poot plat op de operatietafel. Desinfecteer de huid van het geschoren gebied met een geschikt antisepticum. Zoek naar de ischias inkeping van het ileum.Maak een huidincisie van de ischias in de richting van de poot met een scalpel. Als de achterpoten zijn bevestigd en de huidincisie correct wordt uitgevoerd, is een holte in het fasciale vlak tussen de gluteus maximusspier en biceps femoris-spier te zien die lijkt op een witte lijn. Steek gesloten superfijne hemostatische tang in de holte en spreid de tang uit.Het fasciale vlak moet zich openen zonder spierweefsel te verwonden. Plaats de rubberen band oprolmechanismen onder de spieren om de huidincisie open te houden. Verwijder voorzichtig omliggend weefsel en bloedvaten van de heupzenuw totdat de zenuw volledig is blootgesteld.Het is belangrijk om de zenuw niet uit te rekken of te trekken tijdens de hele procedure. Verpletter de heupzenuw met een niet-gekartelde klem met constante en snelle bruikbare druk. Open hiervoor de klem, plaats de zenuw op de onderkaak van de klem en sluit de klem door deze 3 x 10 seconden in de eerste positie te vergrendelen.Na het verbrijzelingsletsel moet u de klem voorzichtig opnieuw openen. de verbrijzelingsplaats van de heupzenuw lijkt doorschijnend. Verwijder de oprolmechanismen van de elastiek.Sluit de fasciale vlakincisie met een resorbeerbare hechtdraad. Sluit de huidincisie met nietjes van de lichaamshuid. De motorische activiteit, evenals de gedragsactiviteit van ratten kunnen worden geanalyseerd door een open veldtest.De opstelling van het open veld, dat zich in een donkere en rustige omgeving moet bevinden, bestaat uit het geautomatiseerde videovolgsysteem EthoVision XT en een arena met een krasbestendig, reinigbaar zwart oppervlak. Plaats de arena en de camera in de juiste positie en stel de EthoVision XT-software in. Plaats de rat voorzichtig in het midden van de testarena.Tijdens de opname moet de experimenteerder uit de buurt blijven van het open veld dat is opgezet, om te voorkomen dat de rat wordt afgeleid. Ga voor de gegevensanalyse van de open veldtest naar de analysesectie in de linker zijbalk en kies Visualisatie bijhouden"onder het tabblad Resultaten". Exporteer vervolgens de benodigde parameters naar XL.Kies in de software een aantal variabelen uit verschillende categorieën voor gegevensanalyse.Een ganganalyse door het CatWalk XT-systeem kan helpen om veel verschillende parameters te beoordelen met betrekking tot de voetafdrukken, houding en gang van diermodellen. Een glazen loopbrug wordt verlicht met groen licht en het licht dat wordt verspreid door de voetafdrukken van de dieren wordt vastgelegd met een high speed videocamera, die zich onder de loopbrug bevindt. De signalen kunnen worden geanalyseerd met de CatWalk XT-software.Het experiment moet onder donkere omstandigheden worden uitgevoerd. Begin met het instellen van het CatWalk XT-systeem. Kies de experimentele instellingen.Plaats de camera in positie en stel de scherpstelling in. Stel de detectie-instellingen in. Stel de gangwanden van het CatWalk-systeem in en zorg ervoor dat de wanden parallel aan de loopbrug blijven.Definieer de lengte van de loopbrug en kalibreer de loopbrug. Maak vervolgens een achtergrondafbeelding. Voor de achtergrondafbeelding is een schone en lege loopbrug nodig.De rat moet de loopbrug zonder onderbreking oversteken. Volgens de gedefinieerde run-criteria zijn drie conforme runs per rat nodig voor gegevensanalyse. Train dieren minstens acht dagen voordat je begint met het eigenlijke experiment.De CatWalk moet minstens één keer per week worden uitgevoerd, met 6 tot 10 runs om een continue taakprestatie te garanderen. Evalueer voor gegevens analyse alleen de compatibele uitvoeringen. Classificeer pootafdrukken automatisch met de CatWalk XT-software.Controleer de etiketten van de pootafdruk handmatig. Corrigeer verkeerde pootafdruklabels, voeg labels van niet-gedetecteerde pootafdrukken toe en verwijder eventuele ruis en verkeerde labels. De numerieke resultaten worden weergegeven in een XL-blad met een aantal basisparameters.Voor meer gedetailleerde informatie over elke voetafdruk, classificeer de tenen van de achterpoten. Voor deze analyse is de interactieve module voetafdrukmetingen vereist. Stel de markeringen voor de voetafdrukanalyse handmatig in.Analyseer elke achterpootafdruk in alle drie de conforme runs. Teken een lijn van het midden van de eerste teen naar het midden van de vijfde teen om de teenspreiding te meten. Teken een lijn van het midden van de tweede teen naar het midden van de vierde teen om de tussenliggende teenspreiding te meten.Teken een lijn van het midden van de derde teen naar de hiel van de achterpoot om de handmatige afdruklengte te meten. Bekijk de numerieke resultaten van de interactieve voetafdrukmetingen die in een afzonderlijk blad worden weergegeven. Gangtekorten kunnen worden bepaald door de balkwandeling.De focus van de balkwandeltaak in dit specifieke onderzoeksonderwerp zal liggen op de analyse van motorische coördinatie en niet op de beoordeling van de motorische balans. Voor de balkwandeling zijn een balk, afstandsbalk, tafel, uniforme achtergrond en een camcorder nodig. Gebruik een houten balk van 90 centimeter lang, 1,7 centimeter breed en 2 centimeter hoog.Train de dieren zeven dagen. Plaats de rat op het startplatform van de balk. De rat moet de balk drie keer zonder onderbreking oversteken.Zelfs als de rat binnen de eerste drie runs drie conforme runs bereikt, moeten er minimaal 6 tot 10 runs worden uitgevoerd voor continue taakprestaties. Selecteer de videosequenties van drie compatibele uitvoeringen van de opname. Definieer het begin-tijd punt en het eind tijd punt van de geselecteerde drie compatibele uitvoeringen.Hier wordt het begintijdpunt gelabeld door een zwarte lijn op de balk en wordt de plaatsing van de eerste achterpoot achter de zwarte lijn gedefinieerd als het begintijdpunt van de run. De plaatsing van de eerste achterpoot op het platform aan het einde van de balk bepaalt het eindpunt. Bereken vervolgens de tijd die nodig is om de rat te dwarsliggeren.Scoor het aantal stappen en fouten van drie compatibele runs voor beide achterpoten afzonderlijk, met behulp van de zoom- en slow motion-functie van de software. Fouten zijn onder meer totale voetslips en halve voetslips. Een totale voetslip wordt gedefinieerd als een voetplaatsing die wordt gevolgd door een diepe slip, waardoor het contact van de aangetaste poot met de balk verloren gaat.Een halve slip wordt gedefinieerd als de poot die van de zijwand van de balk glijdt zonder volledig contact te verliezen. Bereken het percentage voetslips in verhouding tot het aantal stappen dat de balk moet oversteken. De ladderlooptaak kan de motorische functie, de plaatsing van zowel de voorste ledematen als de achterpoten en de coördinatie tussen de ledematen beoordelen.Een ladder rung apparaat, spacer, tafel, uniforme achtergrond, en camcorder zijn nodig voor deze gedragstest. Het horizontale letter rung apparaat bestaat uit metalen sporten en heldere polycarbonaat zijwanden. Train de dieren acht dagen.Plaats de rat op de startzone van de ladderloopoperators. De rat moet de 100 centimeter loopbrug van het ladderloopapparaat drie keer zonder onderbreking oversteken, om als een conforme run te kwalificeren. Selecteer de videosequenties van drie compatibele uitvoeringen van de opname.Definieer het begin-tijd punt en het eind tijd punt van de geselecteerde drie compatibele uitvoeringen. De plaatsing van de achterpoot achter de eerste zwarte lijn op de zijwand van het apparaat bepaalt het begintijdpunt van de run. De plaatsing van de eerste voorste ledemaat achter de tweede zwarte lijn op de zijwand van het apparaat bepaalt het eindtijdpunt van de run.Bereken vervolgens de duur van de run over de loopbrug. Scoor de drie compatibele runs met de schaal van 7 categorieën van Mets en collega's met behulp van de slow motion of de frame-by-frame-functie van de software. Bepaal het aantal stappen en het aantal fouten in overeenstemming met de categorieën van de schaal voor elk ledemaat afzonderlijk.De schaal maakt onderscheid tussen de volgende categorieën. Totale misser. Diepe slip.Lichte uitglijder. Replacement.Correction. Gedeeltelijke plaatsing. En juiste plaatsing.Bereken vervolgens de fouten per stap. De representatieve resultaten van de vijf minuten durende open veldtest tonen aan dat de zenuwverpletteringsblessure, vijf weken na de operatie, geen effect heeft op de motorische activiteit. Ganganalyse met het CatWalk XT-systeem genereert veel verschillende parameters.Significante veranderingen konden worden gedetecteerd voor de gemiddelde loopsnelheid, de paslengte en het afdrukgebied van de zenuwgewonde rechterachterpoot. Zenuwgewonde wilde type ratten vertoonden een aanzienlijk verhoogde latentietijd om de straal over te steken, vergeleken met wilde type naïeve ratten vijf weken na de verwonding. Als een extra uitlezing van de balkwandeltaak werden volledige uitglijders en halve slips van de zenuwgewonde achterpoot geteld en beschouwd als een fout voor statistische analyse.Het percentage fouten per stap van de zenuwgewonde rechterachterpoot was aanzienlijk verhoogd bij zenuwgewonde wilde type ratten, vergeleken met wilde type naïeve ratten. Representatieve gegevens van de ladderlooptaak tonen geen significante veranderingen in de latentietijd om de loopbrug van het ladderloopapparaat over te steken, of in het percentage fouten per stap van de zenuwgewonde rechterachterpoot. De analyse van het foutpercentage per stap van de zenuwgewonde achterpoot beschouwde alleen de score van 0 tot 2 van de schaal van 7 categorieën van Mets en collega's.Na het bekijken van deze video moet u een goed begrip hebben van hoe u een ischiaszenuwverpletteringsletsel kunt uitvoeren en hoe u een multifactoriële beoordeling van motorisch gedrag bij ratten na eenzijdige ischiaszenuwverplettering kunt implementeren. Om consistente, reproduceerbare en vergelijkbare resultaten te bereiken na een ischias zenuwverpletteringsletsel, is een gestandaardiseerde methode voor het induceren van de zenuwverplettering essentieel, evenals een gestandaardiseerde fenotypische karakterisering. Een goede training voor specifieke gedragstest biedt de voordelen van tijdsbesparing tijdens de experimentbeoordeling en het behalen van betere resultaten.

multifactorial-assessment-motor-behavior-rats-after-unilateral

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowetenschap

In dit rapport beschrijven we een methode om de muis heupzenuw te verpletteren. Deze methode maakt gebruik van direct beschikbaar hemostatische tang en gemakkelijk en reproduceerbaar maakt complete heupzenuw crush. Daarnaast beschrijven we een methode om de spieren hele mounts geschikt voor analyse van de zenuw regeneratie na heupzenuw verliefd te bereiden.

Reproduceerbare Mouse heupzenuw Crush en de daaropvolgende beoordeling van Regeneratie door Whole Mount Muscle Analyse

Source: Li, Q., et al. Investigating Mammalian Axon Regeneration: In Vivo Electroporation of Adult Mouse Dorsal Root Ganglion. J. Vis. Exp. (2018)This video demonstrates the process of axonal regeneration in a mouse sciatic nerve following a crush injury. The isolated nerve is fixed and prepared for imaging, with fluorescent proteins expressed in neurons to visualize axon growth. Using an epifluorescence microscope, axon regeneration is traced from the injury site to assess the extent of...

Axonal Regeneration in the Sciatic Nerve of a Mouse Following a Crush Injury

Drie nieuwe gedragstesten (voorpoot stap-afwisseling, houdingsinstabiliteit test, pasta handling test) voor de evaluatie van voorpoot functie na cervicale dwarslaesie bij knaagdieren zijn beschreven.

Het beoordelen voorpoot Functie na Eenzijdige Baarmoederhalskanker SCI behulp Novel Taken: Limb Step-afwisseling, houdingsinstabiliteit en Pasta Handling

Het corticospinale kanaal, een van de belangrijkste sensorimotorische stukken kunnen eenzijdig worden laesie bij knaagdieren hersenstam om neuroplasticiteits inducerende therapieën testen het centrale zenuwstelsel. Deze chirurgische procedure ("pyramidotomy") en postoperatieve evaluaties worden beschreven in dit protocol.

Eenzijdige Pyramidotomy van de corticospinale Tract bij ratten voor de Beoordeling van neuroplasticiteits inducerende therapieën

Hier beschrijven we chirurgische ingrepen om een betrouwbare ruggenmerglaterale hemisectie (HX) te produceren op het9e thoracale niveau bij volwassen ratten en neurogedragsbeoordelingen die zijn ontworpen voor het opsporen van asymmetrische tekorten na zo'n eenzijdige verwonding.

Ruggenmerg laterale hemisectie en asymmetrische gedragsbeoordelingen bij volwassen ratten

De thoracale spinale hemisectie van de rat is een waardevol en reproduceerbaar model van eenzijdige ruggenmergletsel om de neurale mechanismen van het motorische herstel en de werkzaamheid van de behandeling te onderzoeken. Dit artikel bevat een gedetailleerde stapsgewijze handleiding om de hemisectie-procedure uit te voeren en om de prestaties van het bewegings vermogen in een open-veld Arena te beoordelen.

Thoracale ruggenmerg hemisection chirurgie en open veld motorische beoordeling bij de rat

We introduceren een kinematische analysemethode die gebruik maakt van een driedimensionaal bewegingsopnameapparaat met vier camera's en gegevensverwerkingssoftware voor het uitvoeren van functionele evaluaties tijdens fundamenteel onderzoek met knaagdiermodellen.

3D Kinematic Analyse voor de functionele evaluatie in het Rattenmodel van Sciatische Zenuwbrekerletsel

Geautomatiseerde loopanalyse is een haalbaar hulpmiddel om functioneel herstel te evalueren in knaagdiermodellen van perifere zenuwletsel en dwarslaesie. Hoewel het slechts één opstelling vereist om de motorische functie in verschillende experimentele modellen te beoordelen, is nauwgezette hard- en soft-ware aanpassing en training van de dieren zeer belangrijk.

Geautomatiseerde ganganalyse om functioneel herstel bij knaagdieren met perifere zenuw- of ruggenmergkvochtletsel te beoordelen

Evaluatie van motorisch herstel blijft de benchmark uitkomstmaat in experimentele perifere zenuwstudies. De isometrische tetanische krachtmeting van de tibialis voorste spier in de rat is een onschatbaar hulpmiddel om functionele resultaten na reconstructie van ischiaszenuwdefecten te beoordelen. De methoden en nuances worden in dit artikel beschreven.

Maximale isometrische tetanische krachtmeting van de Tibialis-voorste spier in de rat

Een experimentele pijplijn om het bewegingspatroon van vrij lopende muizen kwantitatief te beschrijven met behulp van de MouseWalker (MW) toolbox wordt geleverd, variërend van initiële video-opnames en tracking tot post-kwantificeringsanalyse. Een dwarslaesiemodel bij muizen wordt gebruikt om het nut van het MW-systeem aan te tonen.

De MouseWalker gebruiken om locomotorische disfunctie te kwantificeren in een muismodel van dwarslaesie

Leer een multifactoriële beoordeling van motorisch gedrag bij ratten na ischiaszenuwcrushletsel met open field-test, CatWalk-analyse, balklopen en ladderloop. Dit protocol helpt onderzoekers motorische deficienties kwantitatief te evalueren.

Multifactoriële beoordeling van motorisch gedrag bij ratten na unilaterale ischias zenuw crush letsel

Meer video's verkennen