Name: Anterieur segment orgaancultuurplatform voor het volgen van open globe verwondingen en therapeutische prestaties (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-08-25T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 27 s
Description: Leer een voorste segment orgaancultuurmethode voor het volgen van open globe verwondingen en het evalueren van therapeutische interventies zonder dierproeven. Dit platform biedt waardevolle inzichten voor oogheelkundig onderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit materiaal is gebaseerd op werk dat wordt ondersteund door het Amerikaanse ministerie van Defensie via een interagency-overeenkomst (# 19-1006-IM) met het tijdelijke corneareparatie-acquisitieprogramma (United States Army Medical Materiel Development Agency).

<ol><li>Hilber, D., Mitchener, T. A., Stout, J., Hatch, B., Canham-Chervak, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Eye+injury+surveillance+in+the+US+Department+of+Defense%2C+1996-2005%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Preventive+Medicine%22%5BJournal%5D)">Eye injury surveillance in the US Department of Defense, 1996-2005.</a> American Journal of Preventive Medicine. 38, 1 Suppl 78-85 (2010).</li>
<li>Linde, A. S., McGinnis, L. J., Thompson, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multi-Battle+domain-perspective+in+military+medical+simulation+trauma+training%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Trauma+%26+Treatment%22%5BJournal%5D)">Multi-Battle domain-perspective in military medical simulation trauma training.</a> Journal of Trauma & Treatment. 06 (04), (2017).</li>
<li>Riesberg, J., Powell, D., Loos, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+loss+of+the+golden+hour%5BTitle%5D)+AND+%22Special+Warfare%22%5BJournal%5D)">The loss of the golden hour.</a> Special Warfare. , 49-51 (2017).</li>
<li>Townsend, S., Lasher, W. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aTownsend%2C+S+%22The+US+Army+in+Multi-Domain+Operations+2028%22">The US Army in Multi-Domain Operations 2028</a>. (525-3-1), US Army. (2018).</li>
<li>Blanch, R. J., Bishop, J., Javidi, H., Murray, P. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+time+to+primary+repair+on+final+visual+outcome+after+open+globe+injury%5BTitle%5D)+AND+%22The+British+Journal+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Effect of time to primary repair on final visual outcome after open globe injury.</a> The British Journal of Ophthalmology. 103 (10), 1491-1494 (2019).</li>
<li>Lesniak, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characteristics+and+outcomes+of+delayed+open+globe+repair%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Characteristics and outcomes of delayed open globe repair.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 53 (14), 4954(2012).</li>
<li>Loporchio, D., Mukkamala, L., Gorukanti, K., Zarbin, M., Langer, P., Bhagat, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraocular+foreign+bodies%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Survey+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Intraocular foreign bodies: A review.</a> Survey of Ophthalmology. 61 (5), 582-596 (2016).</li>
<li>Jonas, J. B., Budde, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+versus+late+removal+of+retained+intraocular+foreign+bodies%5BTitle%5D)+AND+%22Retina%22%5BJournal%5D)">Early versus late removal of retained intraocular foreign bodies.</a> Retina. 19 (3), Philadelphia, Pa. 193-197 (1999).</li>
<li>Watson, P. G., Jovanovik-Pandova, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prolonged+ocular+hypotension%3A+would+ciliary+tissue+transplantation+help%5BTitle%5D)+AND+%22Eye%22%5BJournal%5D)">Prolonged ocular hypotension: would ciliary tissue transplantation help.</a> Eye. 23 (10), 1916-1925 (2009).</li>
<li>Snider, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+characterization+of+a+benchtop+corneal+puncture+injury+model%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Development and characterization of a benchtop corneal puncture injury model.</a> Scientific Reports. 10 (1), 4218(2020).</li>
<li>Snider, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+open-globe+porcine+injury+platform+for+assessing+therapeutics+and+characterizing+biological+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Protocols+in+Toxicology%22%5BJournal%5D)">An open-globe porcine injury platform for assessing therapeutics and characterizing biological effects.</a> Current Protocols in Toxicology. 86 (1), 98(2020).</li>
<li>Snider, E. J., Cornell, L. E., Gross, B., Zamora, D. O., Boice, E. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+commercial+off-the-shelf+tissue+adhesives+for+sealing+military+relevant+corneal+perforation+injuries%5BTitle%5D)+AND+%22Military+Medicine%22%5BJournal%5D)">Assessment of commercial off-the-shelf tissue adhesives for sealing military relevant corneal perforation injuries.</a> Military Medicine. , (2021).</li>
<li>Snider, E. J., Boice, E. N., Butler, J. J., Gross, B., Zamora, D. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+an+anterior+segment+organ+culture+model+for+open+globe+injuries%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Characterization of an anterior segment organ culture model for open globe injuries.</a> Scientific Reports. 11 (1), 8546(2021).</li>
<li>Erickson-Lamy, K., Rohen, J. W., Grant, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Outflow+facility+studies+in+the+perfused+human+ocular+anterior+segment%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Outflow facility studies in the perfused human ocular anterior segment.</a> Experimental Eye Research. 52 (6), 723-731 (1991).</li>
<li>Johnson, D. H., Tschumper, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+organ+culture+on+human+trabecular+meshwork%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">The effect of organ culture on human trabecular meshwork.</a> Experimental Eye Research. 49 (1), 113-127 (1989).</li>
<li>Johnson, D. H., Tschumper, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+trabecular+meshwork+organ+culture.+A+new+method%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Human trabecular meshwork organ culture. A new method.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 28 (6), 945-953 (1987).</li>
<li>Snider, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+stem+cell+delivery+to+the+trabecular+meshwork+using+magnetic+nanoparticles%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Improving stem cell delivery to the trabecular meshwork using magnetic nanoparticles.</a> Scientific Reports. 8 (1), 12251(2018).</li>
<li>Llobet, A., Gasull, X., Gual, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Understanding+trabecular+meshwork+physiology%3A+a+key+to+the+control+of+intraocular+pressure%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology%22%5BJournal%5D)">Understanding trabecular meshwork physiology: a key to the control of intraocular pressure.</a> Physiology. 18 (5), 205-209 (2003).</li>
<li>Goel, M., Picciani, R. G., Lee, R. K., Bhattacharya, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aqueous+humor+dynamics%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22The+Open+Ophthalmology+Journal%22%5BJournal%5D)">Aqueous humor dynamics: A review.</a> The Open Ophthalmology Journal. 4, 52-59 (2010).</li>
<li>Snider, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+porcine+organ-culture+glaucoma+model+mimicking+trabecular+meshwork+damage%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Development of a porcine organ-culture glaucoma model mimicking trabecular meshwork damage.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 62 (3), 18(2021).</li>
<li>Ren, H., Wilson, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Apoptosis+in+the+corneal+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Apoptosis in the corneal epithelium.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 37 (6), 1017-1025 (1996).</li>
<li>Komuro, A., Hodge, D. O., Gores, G. J., Bourne, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cell+death+during+corneal+storage+at+4%C2%B0C%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Cell death during corneal storage at 4°C.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 40 (12), 2827-2832 (1999).</li>
<li>Crespo-Moral, M., García-Posadas, L., López-García, A., Diebold, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histological+and+immunohistochemical+characterization+of+the+porcine+ocular+surface%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+One%22%5BJournal%5D)">Histological and immunohistochemical characterization of the porcine ocular surface.</a> PLOS One. 15 (1), e0227732(2020).</li>
<li>Wilson, S. E., Medeiros, C. S., Santhiago, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiology+of+corneal+scarring+in+persistent+epithelial+defects+after+prk+and+other+corneal+injuries%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Refractive+Surgery%22%5BJournal%5D)">Pathophysiology of corneal scarring in persistent epithelial defects after prk and other corneal injuries.</a> Journal of Refractive Surgery. 34 (1), Thorofare, NJ. 59-64 (2018).</li>
<li>Auw-Haedrich, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunohistochemical+expression+of+epithelial+cell+markers+in+corneas+with+congenital+aniridia+and+ocular+cicatrizing+pemphigoid%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Ophthalmologica%22%5BJournal%5D)">Immunohistochemical expression of epithelial cell markers in corneas with congenital aniridia and ocular cicatrizing pemphigoid.</a> Acta Ophthalmologica. 89 (1), 47-53 (2011).</li>
<li>Lyngholm, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunohistochemical+markers+for+corneal+stem+cells+in+the+early+developing+human+eye%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Immunohistochemical markers for corneal stem cells in the early developing human eye.</a> Experimental Eye Research. 87 (2), 115-121 (2008).</li>
<li>Bandamwar, K. L., Papas, E. B., Garrett, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluorescein+staining+and+physiological+state+of+corneal+epithelial+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Contact+Lens+%26+Anterior+Eye%3A+The+Journal+of+the+British+Contact+Lens+Association%22%5BJournal%5D)">Fluorescein staining and physiological state of corneal epithelial cells.</a> Contact Lens & Anterior Eye: The Journal of the British Contact Lens Association. 37 (3), 213-223 (2014).</li>
<li>Bandamwar, K. L., Garrett, Q., Papas, E. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sodium+fluorescein+staining+of+the+corneal+epithelium%3A+What+does+it+mean+at+a+cellular+level%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Sodium fluorescein staining of the corneal epithelium: What does it mean at a cellular level.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 52 (14), 6496(2011).</li>
<li>Sherwood, J. M., Reina-Torres, E., Bertrand, J. A., Rowe, B., Overby, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+of+outflow+facility+using+iPerfusion%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Measurement of outflow facility using iPerfusion.</a> PLoS One. 11 (3), (2016).</li>
<li>Weichel, E. D., Colyer, M. H., Ludlow, S. E., Bower, K. S., Eiseman, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combat+ocular+trauma+visual+outcomes+during+operations+iraqi+and+enduring+freedom%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Combat ocular trauma visual outcomes during operations iraqi and enduring freedom.</a> Ophthalmology. 115 (12), 2235-2245 (2008).</li>
<li>Colyer, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delayed+intraocular+foreign+body+removal+without+endophthalmitis+during+Operations+Iraqi+Freedom+and+Enduring+Freedom%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Delayed intraocular foreign body removal without endophthalmitis during Operations Iraqi Freedom and Enduring Freedom.</a> Ophthalmology. 114 (8), 1439-1447 (2007).</li>
<li>Geggel, H. S., Maza, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anterior+stromal+puncture+with+the+Nd%3AYAG+laser%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Anterior stromal puncture with the Nd:YAG laser.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 31 (8), 1555-1559 (1990).</li>
<li>Matthews, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Indentation+and+needle+insertion+properties+of+the+human+eye%5BTitle%5D)+AND+%22Eye%22%5BJournal%5D)">Indentation and needle insertion properties of the human eye.</a> Eye. 28 (7), 880-887 (2014).</li>
<li>Rau, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mechanics+of+corneal+deformation+and+rupture+for+penetrating+injury+in+the+human+eye%5BTitle%5D)+AND+%22Injury%22%5BJournal%5D)">The mechanics of corneal deformation and rupture for penetrating injury in the human eye.</a> Injury. 49 (2), 230-235 (2018).</li>
<li>Agrawal, R., Ho, S. W., Teoh, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pre-operative+variables+affecting+final+vision+outcome+with+a+critical+review+of+ocular+trauma+classification+for+posterior+open+globe+%28zone+III%29+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Indian+Journal+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Pre-operative variables affecting final vision outcome with a critical review of ocular trauma classification for posterior open globe (zone III) injury.</a> Indian Journal of Ophthalmology. 61 (10), 541(2013).</li>
<li>Knyazer, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prognostic+factors+in+posterior+open+globe+injuries+%28zone-III+injuries%29%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+%26+Experimental+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Prognostic factors in posterior open globe injuries (zone-III injuries).</a> Clinical & Experimental Ophthalmology. 36 (9), 836-841 (2008).</li>
<li>Tan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((C3+Transferase-Expressing+scAAV2+Transduces+Ocular+Anterior+Segment+Tissues+and+Lowers+Intraocular+Pressure+in+Mouse+and+Monkey%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Therapy+-+Methods+%26+Clinical+Development%22%5BJournal%5D)">C3 Transferase-Expressing scAAV2 Transduces Ocular Anterior Segment Tissues and Lowers Intraocular Pressure in Mouse and Monkey.</a> Molecular Therapy - Methods & Clinical Development. 17, 143-155 (2020).</li>
<li>Bhattacharya, S. K., Gabelt, B. T., Ruiz, J., Picciani, R., Kaufman, P. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cochlin+Expression+in+Anterior+Segment+Organ+Culture+Models+after+TGF%CE%B22+Treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Cochlin Expression in Anterior Segment Organ Culture Models after TGFβ2 Treatment.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 50 (2), 551-559 (2009).</li>
<li>Zhu, W., Godwin, C. R., Cheng, L., Scheetz, T. E., Kuehn, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transplantation+of+iPSC-TM+stimulates+division+of+trabecular+meshwork+cells+in+human+eyes%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Transplantation of iPSC-TM stimulates division of trabecular meshwork cells in human eyes.</a> Scientific Reports. 10 (1), 2905(2020).</li>
</ol>

De auteurs verklaren geen tegenstrijdige belangen te hebben. De meningen in dit artikel zijn die van de auteur(s) en weerspiegelen niet het officiële beleid of standpunt van het US Army Medical Department, Department of the Army, Department of Defense of de Amerikaanse overheid.

Er zijn kritieke stappen met het ASOC OG-letselplatform die moeten worden benadrukt om de kans op succes bij het gebruik van de methodologie te verbeteren. Ten eerste is tijdens de voorste segmentdissectie het behoud van het trabeculaire maaswerk essentieel, maar een uitdaging om correct te doen. Als de TM wordt verstoord, zal het oog de fysiologische druk niet handhaven en niet voldoen aan de criteria om in aanmerking te komen voor experimenteel gebruik. Het wordt aanbevolen om het dissectieproces eerst onder normale om...

Open globe (OG) letsels kunnen leiden tot permanent verlies van gezichtsvermogen wanneer ze niet worden behandeld of op zijn minst gestabiliseerd na letsel1. Vertragingen komen echter veel voor in afgelegen gebieden waar toegang tot oogheelkundige interventie niet direct beschikbaar is, zoals in landelijke gebieden of op het slagveld in militaire scenario's. Wanneer behandeling niet direct beschikbaar is, is de huidige zorgstandaard om het oog te beschermen met een stijf schild totdat medische interventie mogelijk is. In de militaire geneeskunde is deze vertraging momenteel tot 24 uur, maar er wordt verwacht dat deze zal toenemen tot 72 uur in toekomstige gevechtsoperaties in stedelijke omgevingen waar luchtevacuatie niet mogelijk is2,3,4. Deze vertragingen kunnen nog langer zijn in landelijke, afgelegen civiele toepassingen waar de toegang tot oogheelkundige interventie beperkt is5,6. Een onbehandeld OG-letsel is zeer gevoelig voor infectie en verlies van intraoculaire druk (IOP) als gevolg van de waterdichte afdichting van het oog die wordt aangetast7,8. Verlies van IOP kan de levensvatbaarheid van het weefsel beïnvloeden, waardoor het onwaarschijnlijk is dat een medische interventie het gezichtsvermogen herstelt als de vertraging tussen letsel en therapeutisch te lang is9.
Om de ontwikkeling van eenvoudig toe te passen therapieën voor het afdichten van OG-verwondingen mogelijk te maken totdat een oogheelkundige specialist kan worden bereikt, is eerder een benchtop OG-letselmodel ontwikkeld10,11. Met dit model werden snelle verwondingen gecreëerd in hele varkensogen, terwijl IOP werd opgevangen door druktransducers. Therapeutica kunnen vervolgens worden toegepast om hun vermogen te beoordelen om de OG-verwondingsplaats af te sluiten12. Omdat dit model echter hele varkensogen gebruikt, kan het alleen de onmiddellijke therapeutische prestaties beoordelen zonder een manier om de prestaties op langere termijn te volgen in het mogelijke 72-uursvenster waarin het therapeutisch de verwondingsplaats moet stabiliseren totdat de patiënt gespecialiseerde zorg bereikt. Als gevolg hiervan werd een anterieure segment orgaancultuur (ASOC) OG-letselmodel ontwikkeld en gedetailleerd in dit protocol als een platform voor het volgen van therapeutische prestaties op lange termijn13.
ASOC is een veel gebruikte techniek voor het onderhouden van avasculair weefsel van het voorste segment, zoals het hoornvlies, gedurende meerdere weken na enucleatie14,15,16,17. Het voorste segment wordt onder fysiologische IOP gehouden door vloeistof met fysiologische stroomsnelheden te perfuseren en het trabeculaire meshwork-uitstroomgebied, het weefsel dat verantwoordelijk is voor het reguleren van IOP, te behouden tijdens ASOC-opstelling18,19. Het ASOC-platform kan weefsel fysiologisch onderhouden, een OG-letsel induceren met behulp van een pneumatisch aangedreven apparaat, een therapeutisch apparaat toepassen en letselstabilisatie volgen gedurende ten minste 72 uur na het letsel13.
Hier biedt het protocol een stapsgewijze methodologie voor het gebruik van het ASOC-platform. Eerst wordt beschreven hoe het ASOC-platform moet worden opgezet en gefabriceerd. Vervolgens beschrijft het protocol hoe het voorste segment aseptisch kan worden ontleed en het trabeculaire netwerk kan worden onderhouden, gevolgd door het opzetten van voorste segmentweefsel in op maat gemaakte orgaankweekschalen. Vervolgens wordt beschreven hoe u open globe-verwondingen kunt creëren en onmiddellijk na het letsel therapeutisch kunt toepassen. Ten slotte biedt het protocol een overzicht van karakteriseringsparameters die mogelijk zijn voor gebruik met deze methode die functionele, mechanische en biologische eigenschappen van het oog beoordeelt en hoe goed het letsel werd gestabiliseerd. Over het algemeen biedt dit model een broodnodig platform om de productontwikkeling voor het stabiliseren en behandelen van openbolletsels te versnellen en de slechte prognose van het gezichtsvermogen na letsel te verbeteren.

<table><tbody><tr><td>10-32 Polycarbonate straight plug, male threaded pipe connector</td><td>McMaster-Carr</td><td>51525K431</td><td></td></tr><tr><td>10-32 Socket cap screw, &frac12;"</td><td>McMaster-Carr</td><td>92196A269</td><td></td></tr><tr><td>10 mL-spuit</td><td>BD</td><td>302995</td><td></td></tr><tr><td>20 mL-spuit</td><td>BD</td><td>302830</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Anti</td><td>Gibco</td><td>15240-096</td><td></td></tr><tr><td>L-sleutel met bolle kop</td><td>McMaster-Carr</td><td>5020A25</td><td></td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Fisher Scientific</td><td>NC1696484</td><td></td></tr><tr><td>BD&nbsp;Intramedic&nbsp;PE 160-buis</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-170-12E</td><td></td></tr><tr><td>Wattenstaafjes</td><td>Puritan</td><td>25-8061WC</td><td></td></tr><tr><td>DMEM-medium</td><td>ATCC</td><td>30-2002</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>ATCC</td><td>30-2020</td><td></td></tr><tr><td>Fijne pincetten</td><td>World Precision Instruments</td><td>15914</td><td></td></tr><tr><td>Gaas</td><td>Covidien</td><td>8044</td><td></td></tr><tr><td>Gentamicine</td><td>Gibco</td><td>15710-064</td><td></td></tr><tr><td>Glutamax</td><td>Gibco</td><td>35050-061</td><td></td></tr><tr><td>Hoge temperatuur siliconen O-ring, 2 mm breed, 4 mm ID</td><td>McMaster-Carr</td><td>5233T47</td><td></td></tr><tr><td>Grote pincetten</td><td>World Precision Instruments</td><td>500365</td><td></td></tr><tr><td>Grote chirurgische schaar</td><td>World Precision Instruments</td><td>503261</td><td></td></tr><tr><td>Pincetten met middelgrote tanden</td><td>World Precision Instruments</td><td>501217</td><td></td></tr><tr><td>Nagel (punctievoorwerp)</td><td>McMaster-Carr</td><td>97808A503</td><td></td></tr><tr><td>Nylon spuitfilters</td><td>Fisher</td><td>09-719C</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>Gibco</td><td>10010-023</td><td></td></tr><tr><td>Petrischaal (100 mm)</td><td>Fisher</td><td>FB0875713</td><td></td></tr><tr><td>Polycarbonaat, drieweg, stopkraan met mannelijke&nbsp;luer&nbsp;lock</td><td>Fisher</td><td>NC9593742</td><td></td></tr><tr><td>Veiligheidsmesje</td><td>Fisher</td><td>12-640</td><td></td></tr><tr><td>Roestvrijstalen 18 G&nbsp;90 graden&nbsp;hoekverdeelnaald</td><td>McMaster-Carr</td><td>75165A81</td><td></td></tr><tr><td>Roestvrijstalen 18 G rechte &frac12;'&rsquo; verdeelnaald</td><td>McMaster-Carr</td><td>75165A675</td><td></td></tr><tr><td>Steriele 100 mL bekers met deksels</td><td>VWR</td><td>15704-092</td><td></td></tr><tr><td>Vannas&nbsp;schaar</td><td>World Precision Instruments</td><td>WP5070</td><td></td></tr></tbody></table>

anterieur segment orgaancultuurplatform voor het volgen van open globe verwondingen en therapeutische prestaties

Anterior Segment Organ Culture Platform for Tracking Open Globe Injuries and Therapeutic Performance

Open globe verwondingen hebben slechte visuele resultaten, vaak resulterend in permanent verlies van het gezichtsvermogen. Dit is deels te wijten aan een langdurige vertraging tussen letsel en medische interventie in landelijke omgevingen en militaire medische toepassingen waar oogheelkundige zorg niet direct beschikbaar is. Onbehandelde verwondingen zijn vatbaar voor infectie nadat het oog zijn waterdichte afdichting heeft verloren, evenals verlies van levensvatbaarheid van weefsel als gevolg van intraoculaire hypotensie. Therapieën om open globe-verwondingen tijdelijk te verzegelen, indien goed ontwikkeld, kunnen mogelijk de intraoculaire druk herstellen en infectie voorkomen totdat de juiste oogheelkundige zorg mogelijk is. Om de productontwikkeling te vergemakkelijken, wordt hier het gebruik van een open globe-letselplatform voor anterieure segmentorgaankweek beschreven voor het volgen van therapeutische prestaties gedurende ten minste 72 uur na het letsel. Varkens anterieur segmentweefsel kan worden gehandhaafd in op maat ontworpen orgaankweekschalen en worden gehouden op fysiologische intraoculaire druk. Prikletsels kunnen worden gecreëerd met een pneumatisch aangedreven systeem dat letselgroottes tot 4,5 mm in diameter kan genereren, vergelijkbaar met militair relevante letselmaten. Verlies van intraoculaire druk kan worden waargenomen gedurende 72 uur na het letsel, wat de juiste verwondingsinductie en verlies van de waterdichte afdichting van het oog bevestigt. Therapeutische prestaties kunnen worden gevolgd door toepassing op het oog na letselinductie en vervolgens het volgen van de intraoculaire druk gedurende meerdere dagen. Verder is het anterieure segmentletselmodel van toepassing op veelgebruikte methoden voor het functioneel en biologisch volgen van de fysiologie van het voorste segment, zoals het beoordelen van transparantie, oculaire mechanica, gezondheid van het hoornvliesepitheel en levensvatbaarheid van weefsel. Over het algemeen is de hier beschreven methode een noodzakelijke volgende stap in de richting van het ontwikkelen van biomateriaaltherapieën voor het tijdelijk afdichten van open globe-verwondingen wanneer oogheelkundige zorg niet direct beschikbaar is.

Beelden gemaakt via Optical Coherence Tomography (OCT) worden getoond voor OG-gewonde ogen om te illustreren hoe een succesvolle blessure-inductie eruit ziet. Figuur 3 toont beelden voor controle en OG gewond AS-weefsel onmiddellijk na verwonding en 72 uur later. Er worden twee weergaven getoond: dwarsdoorsnedebeelden door de verwondingsplaats en top-down maximale intensiteitsprojectie (MIP's) om het oppervlak van het beeld te visualiseren. Controleogen vertonen geen merkbare verstoring in h...

Open globe oogletsel kan onbehandeld blijven voor meerdere dagen in landelijke of militair-relevante scenario's, wat resulteert in blindheid. Therapeutica zijn nodig om verlies van gezichtsvermogen te minimaliseren. Hier beschrijven we een orgaancultuur open globe letselmodel. Met dit model kunnen potentiële therapieën voor het stabiliseren van deze verwondingen goed worden geëvalueerd.

Anterieur segment orgaancultuurplatform voor het volgen van open globe verwondingen en therapeutische prestaties

Open globe injuries have poor visual outcomes, often resulting in permanent loss of vision. This is partly due to an extended delay between injury and ...

Open globe verwondingen kunnen leiden tot permanent verlies van het gezichtsvermogen als onbehandeld. Dit anterieure segment orgaankweekmodel maakt het mogelijk om deze verwondingen te beoordelen binnen de behoefte aan dierproeven. Dit protocol maakt het mogelijk om open globe verwondingen en therapeutica te volgen om de verwonding gedurende drie of meer dagen te stabiliseren met een orgaankweekplatform.De procedure wordt gedemonstreerd door Trent Pearson, een onderzoekstechnicus van het Laboratorium van Dr. Boice. Leg om te beginnen het chirurgische gordijn en de instrumenten die nodig zijn voor de grove dissectie. Stel de bioveiligheidskast in voor het visualiseren van de ogen op de ontleedmicroscoop.Stel de bioveiligheidskast in voor schotelmontage. Plaats de open globe letselinductiewerkplek in de bioveiligheidskast. Plaats de cross tracking vice op de lab jack, voor het prikplatform.Na het verwijderen van de extra orbitale weefsels en het wassen van de ogen met antibiotisch antimycotisch PBS, om het oog te hemisect, plaatst u het oog op het antibioticum antimycotische PBS geweekte gaas. Gebruik een steriel scheermesje of scalpel om een incisie te maken in de buurt van de evenaar van het oog. Zoomiseer vervolgens het oog met behulp van een gebogen chirurgische schaar om het voorste oog te isoleren.Gebruik een microschaar als schop om de glasvochthumor uit het voorste segment te scheppen en verwijder de lens uit het voorste segment met een microschaar. Snijd de iris geleidelijk radiaal naar de iriswortel totdat het trabeculaire maaswerk zichtbaar is. Verleng de snede 360 graden rond de iris om het hele trabeculaire maaswerkgebied bloot te leggen en ruim indien nodig de resterende resterende iris op die het trabeculaire gaaswerk bedekt.Trim de ciliaire lichaamsresten achter het trabeculaire meshwork-gebied en laat slechts een millimeter dunne band van het weefsel achter. Na het plaatsen van het voorste segment in de petrischaal. Maak een wattenstaafje nat in de media en dep voorzichtig in het midden van het hoornvlies om pigment te verwijderen.Houd de ogen vast met een tang en verwijder extra pigment rond de sclera door af te vegen. Plaats het omgekeerde voorste segment over het verhoogde gebied van de onderste schaal en zorg ervoor dat het hoornvlies in het midden van het verhoogde gebied blijft. Plaats de klemring bovenop het nieuw geplaatste voorste segment en draai de schroeven voorzichtig vast met de L-toets.Bevestig beide fluidic connectoren met O-ringen aan schroefdraadpoorten aan de onderkant van de schotel. Bevestig aan de eerste fluidic connector 18 gauge 90 graden gebogen naaldnaaf, een lengte van de slang, een 18 gauge naaldnaaf, een nylon spuitfilter, een driewegklep en een 20 millimeter spuit gevuld met media. Bevestig aan de tweede vloeistofconnector 18 gauge 90 graden gebogen naaldnaaf, een lengte van de slang, een 18 gauge naaldnaaf, een driewegklep zoals gedemonstreerd voor de eerste vloeistofconnector en bevestig vervolgens het vatgedeelte van een steriele 10 milliliter spuit, die zal fungeren als een reservoir om de vloeistof en bellen op te vangen.Houd de driewegkleppen goed open voor de spuiten en duw de media voorzichtig door het systeem met behulp van de eerste fluidics-connectorpoort. Om het voorste segment op te blazen, vult u de buis met media en vult u uiteindelijk het reservoir. Verwijder de bubbels door de media voorzichtig in de schaal te duwen en keer de schaal om om de bubbels eruit te duwen.Plaats de voorste segment orgaankweekschaal in de celkweekincubator. Leid de slanglijnen door de onderkant van de couveusedeur om interferentie met het openen en sluiten van de deur te voorkomen. Plaats de buisleidingen met het reservoir bij het drukomvormerinstrument.Sluit de driewegklep aan de zijkant aan op de drukomvormer die is ingesteld terwijl PBS door de lijn stroomt om te voorkomen dat de luchtbellen de buisleidingen binnendringen. In de voorbereide bioveiligheidskast voor de open letselinductie stelt u de drukregelaar op het lekplatform in op 50 pond kracht per vierkante inch voor het genereren van voldoende punctiekracht op de objecten met een diameter tot 4,5 millimeter. Plaats de cross tracking vice op de lab jack voor het prikplatform.Strek de zuigerarm uit tot de maximale afstand en plaats de hoornvliestop binnen het gebied van één millimeter van het prikkende object, trek de zuigerarm in en breng het voorste segment een centimeter dichter bij het doorborende object. Om het prikapparaat te openen, schakelt u het apparaat in en opent u de magneetklep met de tweede schakelaar op het apparaat. Om het apparaat uit het oog te trekken, drukt u op de tweede schakelaar, controleert u de juiste letselinductie door visuele inspectie en media die uit de verwondingsplaats lekken.Na de operatie werd de integriteit van het hoornvliesepitheel beoordeeld via beeldvorming met behulp van optische coherentietomografie. Het gewonde voorste segmentweefsel werd onmiddellijk na het letsel en 72 uur na het letsel in beeld brengen. De gecontroleerde ogen vertonen geen merkbare verstoring in het hoornvlies, terwijl duidelijke verwondingen zich na het letsel door het hoornvlies bevonden.Uit de top-down maximale intensiteitsprojectie was het duidelijk dat blessures onregelmatig van vorm en grootte waren, maar de blessuregrootte was in 72 uur afgenomen. Interoculaire druk werd waargenomen gedurende de eerste drie dagen vóór de operatie om de drukstabiliteit in het aanvaardbare bereik te bepalen. In de representatieve resultaten vallen drie van de vijf ogen binnen het aanvaardbare interoculaire drukbereik.De interoculaire druk verandert als gevolg van de open globe letsel en therapeutische interventie. Na de inductie van de open globe-verwonding nam de druk aanzienlijk af en bleef laag totdat het experiment was voltooid. Behandeling van de gewonde weefsels met dermabond-lijm resulteerde in een verhoogde interoculaire druk in vergelijking met onbehandeld weefsel, wat aangeeft dat deze methode kan worden gebruikt om de werkzaamheid van de therapieën voor het herstellen van de intraoculaire druk te meten.De initiële opzet van het segment in orgaankweek is van cruciaal belang voor de stabiliteit van het weefsel op lange termijn. Het te strak aanspannen van de ring kan stress op het weefsel veroorzaken en de naleving verminderen.

anterior-segment-organ-culture-platform-for-tracking-open-globe

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bio-engineering

De paper beschrijft een vereenvoudigde techniek om accijnzen hoornvlies en het netvlies weefsels uithalen van de oculaire bol van de menselijke postmortale donoren. De techniek die hier beschreven zal helpen om accijnzen goede kwaliteit weefsels worden gebruikt voor transplantatie, chirurgisch of wetenschappelijke doeleinden zonder deze te beschadigen andere weefsels van het oculair wereld.

Een vereenvoudigde methode voor<em&gt; In situ</em&gt; Excisie van het hoornvlies en het verwijderen van de ingewanden van retinaal weefsel van Human Ocular Globe

In this video, we demonstrate the dissection of the cornea-bearing anterior segment of the porcine eye. The isolated segment can be used for organ culturing to study the pathophysiology of eye disorders.

Anterior Eye Segment Dissection: A Method to Isolate Cornea Bearing Anterior Segment from Porcine Eye

In this video, we demonstrate the culturing method of a cornea-bearing anterior eye segment from a porcine eye. This culture system serves as an experimental model to study eye injuries.

Anterior Eye Segment Culturing: A Method to Culture Cornea Bearing Anterior Segment of Porcine Eye

Een protocol voor een ex vivo hoornvlies orgel cultuur model nuttig voor wond genezing studies wordt beschreven. Dit modelsysteem kan worden gebruikt om te beoordelen van de effecten van de drug toxiciteit in een georganiseerde 3D meercellige omgeving of agenten om regeneratieve genezing te bevorderen.

Ex Vivo wondgenezing hoornvlies orgel cultuur Model voor Studies

Augmented reality-technologie werd toegepast op kerndecompressie voor osteonecrose van de heupkop om real-time visualisatie van deze chirurgische procedure te realiseren. Deze methode kan de veiligheid en precisie van kerndecompressie effectief verbeteren.

Augmented Reality Navigatie-geleide Kerndecompressie voor Osteonecrose van Heupkop

Het huidige werk beschrijft een nieuw experimenteel protocol dat een 3D-geprinte houder gebruikt om live cell imaging met hoge resolutie van enucleated globes mogelijk te maken. Via dit protocol kan de cellulaire calciumsignaleringsactiviteit in gewond hoornvliesepitheel van ex vivo globes in realtime worden waargenomen.

Live-cell beeldvorming van intacte Ex Vivo Globes met behulp van een nieuwe 3D-geprinte houder

VisualEyes2020 (VE2020) is een aangepaste scripttaal die visuele oogbewegingsstimuli presenteert, registreert en synchroniseert. VE2020 biedt stimuli voor geconjugeerde oogbewegingen (saccades en soepele achtervolging), disconjugate oogbewegingen (vergence), accommodatie en combinaties van elk. Twee analyseprogramma's verenigen de gegevensverwerking van de eye tracking- en accommodatieregistratiesystemen.

Kwantificering van oculomotorische responsen en accommodatie door middel van instrumentatie- en analysetoolboxen

Optische coherentietomografie met hoge resolutie van het voorste segment (HR-OCT) is een veelbelovende niet-invasieve modaliteit voor de diagnose en therapeutische evaluatie van plaveiselcelneoplasie op het oogoppervlak (OSSN). Hier worden de systeeminstellingen, scantechniek en representatieve diagnostische resultaten gepresenteerd.

Anterieure optische coherentietomografie met hoge resolutie bij de diagnose en therapeutische monitoring van plaveiselcelneoplasie op het oogoppervlak

Grondige grossing en gestandaardiseerde doorsnede van niet-neoplastische bollen zijn belangrijk voor het verkrijgen van reproduceerbare histopathologische doorsneden van hoge kwaliteit. Richtlijnen voor een gestandaardiseerde grossisatie van volwassen en foetale niet-neoplastische bollen worden hierin gegeven. Verschillende opties voor het doorsnijden van wereldbollen worden gedemonstreerd en besproken, inclusief criteria voor case-based besluitvorming.

Grossing van niet-neoplastische bollen, inclusief foetale ogen

Hier bieden we een gedetailleerde methodologie voor het isoleren van het netvlies van het oog van de muis voor uitgebreide ex vivo experimenten. Dit protocol benadrukt het toegankelijk maken van deze technisch veeleisende benadering voor onderzoekers die willen profiteren van de onderzoeksmogelijkheden die worden geboden door retinale glia in situ te houden in levend weefsel.

Een ex vivo explantatiemodel voor het bestuderen van gliale interacties in het netvlies van de muis

Leer een voorste segment orgaancultuurmethode voor het volgen van open globe verwondingen en het evalueren van therapeutische interventies zonder dierproeven. Dit platform biedt waardevolle inzichten voor oogheelkundig onderzoek.

Anterieur segment orgaancultuurplatform voor het volgen van open globe verwondingen en therapeutische prestaties

Meer video's verkennen