Name: Snel testen van de weerstand van hout tegen biologische afbraak door mariene houtborende schaaldieren (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-01-29T13:00:00.000+00:00
Duration: 14 min 6 s
Description: Leer een snelle methode om houtduurzaamheid te testen tegen biologische afbraak door het houtborende schaaldier Limnoria. Deze protocol meet uitscheidingsproductie om voedingsgedrag te kwantificeren.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dank aan de Onderzoeksraad van Noorwegen (Oslo Regional Fund, Alcofur rffofjor 269707) en de Universiteit van Portsmouth (Faculty of Science PhD research bursary) voor het verstrekken van financiering voor de studies van Lucy Martin. Ook aan Gervais S. Sawyer die het hout leverde dat werd gebruikt om de representatieve resultaten te genereren. Terpentijn werd geleverd door Prof. Philip Evans van de Universiteit van British Columbia.

1. Teststicks voorbereiden
<ol><li>Nadat alle behandelingsprocessen zijn voltooid, snijdt u droog hout in teststokken tot de grootte 2 mm x 4 mm x 20 mm (figuur 1). Luchtdrogen blijft aan een constant gewicht, onder laboratoriumomstandigheden. Gebruik ten minste 5 replica's van elk hout dat wordt getest.</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62776/62776fig01.jpg"> Figuur 1: Teststicks die worden gebruikt in kortdurende laboratoriumtests om de voersnelheid van gribbels te beoordelen.  Testhouten sticks van 2 mm x 4 mm x 20 mm. Van links naar rechts: ekki, terpentijn, tamme kastanje en beukenhout en grove dennen spinthout. Schaalbalk 4 mm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62776/62776fig01large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
<ol start="2"><li>Vacuüm impregneren<ol>
<li>Plaats na de houtbereiding (d.w.z. snijden en behandelen, indien van toepassing), de sticks onder een gaas in een voedselveilige plastic container, in de vacuümsiccator en vervang het deksel zodat er een strakke afdichting is, vergemakkelijkt door een coating van vacuümvet (figuur 2).</li>
		<li>Bevestig een driewegklep tussen de buis die de exsiccator en de pomp verbindt, met een derde buis die naar open lucht leidt (figuur 2). Zorg ervoor dat de driewegklep is afgesloten voor de lucht en laat de pomp draaien om een vacuüm van -0,75 tot -1,0 bar in de vacuümsiccator te bereiken en houd dit vacuüm 45 minuten - 1 uur vast.</li>
		<li>Dompel het open uiteinde van de derde buis onder in een container met zeewater. Schakel de pomp uit en sluit de klep die naar de pomp leidt en open vervolgens langzaam de klep totdat zeewater door het vacuüm in de exsiccator wordt getrokken. Laat het water stromen totdat het de plastic container vult, boven het niveau van het gaas.</li>
		<li>Trek vervolgens de buis terug uit het zeewater in de container en laat lucht binnen, totdat de exsiccator terugkeert naar de atmosferische druk. Houd de stokjes onder het gaas totdat ze naar de bodem van de plastic container zinken.</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62776/62776fig02.jpg"> Figuur 2: Apparatuur die wordt gebruikt om houtstokken met zeewater te zuigen, ter voorbereiding op het voeren aan gribbles tijdens een laboratoriumvoedingstest.  A) Vacuüm exsiccator; B) Pomp; C) Manometer voor de vacuümsiccator; D) De driewegklep die leidt naar de vacuümsiccator, pomp en naar open lucht of zeewater (oranje buis). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62776/62776fig02large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
<ol start="3"><li>Uitlogend hout<ol>
<li>Dompel met zeewater verzadigde teststicks onder in zeewater in buizen van 50 ml (figuur 3). Vervang water regelmatig gedurende een periode van 20 dagen. OPMERKING: Het uitlogingsproces is van toepassing op elk experimenteel hout dat wordt getest, inclusief behandeld of natuurlijk hout.</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62776/62776fig03.jpg"> Figuur 3: Percolaat uit houten stokken voor bereiding voor het voeren aan gribbles tijdens een laboratoriumvoedingstest.  Hout dat volledig werd ondergedompeld in zeewater in een Falcon-buis van 50 ml, met regelmatige waterverversing (1-3 dagen), produceerde duidelijk gekleurd percolaat. Van links naar rechts percolaat uit kernhout van; tamme kastanje, terpentijn, ekki en beuken en grove dennen spinthout. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62776/62776fig03large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
2. Gribble extraheren
<ol><li>Haal individuele exemplaren van gribble uit een aangetast houtblok. Gebruik een fijne tang en een dunne (maat 000/0,4 mm of kleiner) kwast. Pel voorzichtig al het hout dat het gribblehol bedekt met de tang OPMERKING: Holen bevinden zich op het oppervlak van hout en zijn te herkennen aan kleine gaatjes (figuur 4).</li>
	<li>Zodra gribble is blootgesteld, gebruik je een penseel om voorzichtig individuen van onderaf op te pakken en af te zetten in een petrischaal gevuld met zeewater. Controleer gribble onder een microscoop om soorten te identificeren en om er zeker van te zijn dat er geen schade is veroorzaakt tijdens het extraheren. OPMERKING: Het verslaan van pleopoden is een teken van vitaliteit.<ol>
<li>Gooi alle vrouwtjes die eieren broeden weg, omdat gravid vrouwtjes een verminderde voedingscapaciteit hebben.</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62776/62776fig04.jpg"> Figuur 4: Afbeelding van een gribblehol met twee typische ventilatiegaten. L. quadripunctata hol op een stok van Radiata dennenhout, afmeting 2 mm x 4 mm x 20 mm. Naast de ingang van het hol zijn twee kleinere ventilatiegaten te zien. Schaalbalk 2 mm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62776/62776fig04large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>  
<ol start="3"><li>Limnoria quadripunctata identificeren
	<ol>
<li>Identificeer Limnoria quadripunctata onder een stereomicroscoop door de vier verschillende knobbeltjes, gerangschikt in een vierkant patroon, op het pleotelson van het dier, naast een X-vormige carina op het vijfde pleoniet19 (figuur 5).</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62776/62776fig05.jpg"> Figuur 5: Limnoria quadripunctata identificerende kenmerken.  Afbeelding van dorsaal oppervlak Limnoria quadripunctata, genomen op een stereomicroscoop bij x20 vergroting. Identificerende kenmerken weergegeven door rode pijl - geeft de X-vormige carina en blauwe pijl aan - duidt op vier knobbeltjes op pleotelson. Schaalbalk 1 mm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62776/62776fig05large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
3. Putplaten bereiden
<ol><li>Plaats in meerputplaten met putten met een diameter van 20 mm één teststick en 5 ml ongefilterd zeewater, tussen 32-35 PSU, per put (figuur 6).</li>
	<li>Plaats behandelingen/houtsoorten systematisch door de putplaat, zodat elke houtsoort minstens één keer per plaat wordt weergegeven. Voeg één gribbel per put toe. OPMERKING: De temperatuur moet in een incubator stabiel worden gehouden bij 20 °C ± 2 °C voor de soort L. quadripunctata, andere soorten Limnoria kunnen worden gebruikt met aanpassingen aan de temperatuur die zijn aangepast aan de specifieke soort.</li>
	<li>Houd platen in constante donkere omstandigheden, omdat de fotoperiode geen effect heeft op de voersnelheid van de gribble15.</li>
</ol><img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62776/62776fig06.jpg"> Figuur 6: Experimentele opstelling voor gribble feeding assay.  Een voorbeeld van een 12 multi-well plaat die wordt gebruikt in het laboratorium testen van de voersnelheid van gribble. Elke put bevat 5 ml zeewater en één teststick (20 mm x 4 mm x 2 mm) van verschillende houtsoorten; Grove dennen spinthout en ekki, beuk, tamme kastanje en terpentijn kernhout. Schaalbalk 20 mm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62776/62776fig06large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
4. Fecale pellets verzamelen en tellen en vitaliteit beoordelen.
<ol><li>Verwijder tweemaal per week de teststick en elke gribble (één per put) van de putplaat en plaats deze in een vers voorbereide putplaat (met 5 ml zeewater per put [32-35 PSU, 18-22 °C]).</li>
	<li>Gebruik een verfkwast om eventuele fecale pellets voorzichtig van de stok af te borstelen voordat u ze overbrengt en bewaar de fecale pellets in de oorspronkelijke put. OPMERKING: Voordat de gribble naar een verse putplaat wordt overgebracht, kan de vitaliteit worden beoordeeld op een schaal van 1-5; 1= dood, 2 = passief, niet op het hout, 3 = actief zwemmen of pleopoden slaan, niet op het hout, 4 = kruipen op het oppervlak van het hout, 5 = ingegraven in het hout.</li>
	<li>Beeldverwerking<ol>
<li>Gebruik een fijne verfkwast om eventuele klonten te scheiden, zodat individuele pellets zichtbaar zijn en borstel pellets weg van de randen van de put. Maak een gedetailleerde foto onder een stereomicroscoop, bij vergroting x4 en upload naar een computer (figuur 7). OPMERKING: Zorg ervoor dat de pellets scherp zijn en dat de achtergrond uniform is, zonder schaduwen of lichtreflecties op het wateroppervlak.</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62776/62776fig07.jpg"> Figuur 7: Afbeelding van gribble fecale pellets. L. quadripunctata fecale pellets (kleine, cilindrische, bruine pellets) van het voeden met Radiata dennenhout in één put van een multi-well plaat. Genomen bij x4 vergroting. Beelden voorafgaand aan manipulatie voor beeldanalyse (zie figuur 7). A) Voorbeeld van een geschikte afbeelding die kan worden gebruikt voor geautomatiseerd tellen in ImageJ. Pellets zijn voldoende verspreid en weg van de randen van de put. De put is gecentreerd en er zijn geen obstakels of reflecties. B) Een voorbeeld van een afbeelding die niet geschikt is voor beeldanalyse. De put is uit het midden en snijdt de onderste helft af. Blauwe (gestippelde) cirkel toont lichtreflectie van het wateroppervlak. Oranje (vaste) cirkel toont pellets die te dicht op elkaar en te dicht bij de rand van de put zijn samengeklonterd. Rode (onderbroken) cirkel toont een houtsnipper die niet is verwijderd. Schaalbalk 10 mm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62776/62776fig07large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>  
<ol start="2" style="margin-left: 40px;"><li>Proces om fecale pellettelling te genereren met behulp van ImageJ.<ol>
<li>Download ImageJ (nieuwste versie vanaf 03/08/21, 1.8.0_172) van https://imagej.nih.gov/ij/download.html of voer uit vanuit de browser van de computer.</li>
		<li>Upload een stapel afbeeldingen door te slepen en neer te zetten of door Bestand | | importeren | van de afbeeldingsreeks Bladeren. Wijzig geen parameters en selecteer oke.</li>
		<li>Gebruik vervolgens het cirkelgereedschap om het onderste gedeelte van de put met de fecale pellets te selecteren. Verwijder de randen van het putje en selecteer Bewerken | Helder buiten. Maak de afbeelding binair, selecteer Proces | Binair maken.</li>
		<li>Kalibreren door Analyse | te selecteren Stel schaal in en kies het aantal pixels per millimeter voor de afbeelding (bijvoorbeeld 10 pixels = 1 mm). Tel de pellets, selecteer Analyse | Analyseer deeltjes.</li>
		<li>Selecteer in het vak naast Grootte (eenheid2) een lagere drempel die gelijk is aan de kleinste maat pellet, met behulp van de eenheidsschaal die eerder is ingesteld (bijvoorbeeld als 10 pixels = 1 mm en de kleinste pellet 0,5 mm is, kiest u 5-oneindig).</li>
		<li>Selecteer in de vervolgkeuzelijst Weergeven de optie Contouren en schakel vervolgens Samenvatten in en druk op OK (figuur 8). OPMERKING: Meer informatie is te vinden op https://imagej.nih.gov/ij/docs/guide/index.html</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62776/62776fig8.1v2.jpg">
<img alt="Figure 8.1" src="/files/ftp_upload/62776/62776fig8.2v2.jpg"> Figuur 8: Een stroomdiagram van het proces dat in ImageJ wordt gebruikt om fecale pellets te tellen.  A) Een afbeeldingsreeks importeren op het tabblad Bestand van AfbeeldingJ. B) De bladerknop in het dialoogvenster 'Afbeeldingsreeks importeren' om een reeks afbeeldingen van een lokaal apparaat te importeren. C) Gebruik het cirkelgereedschap om een gebied met fecale pellets te selecteren D) Wis de knop Buitenkant in het tabblad Bewerken om buiten het geselecteerde gebied te verwijderen. E) Binaire knop maken op het procestabblad. F) Schaalknop instellen op het tabblad Analyseren. Afstand in pixels is gelijk aan het aantal pixels tot één maateenheid (mm). G) Knop Deeltjes analyseren op het tabblad Analyseren. Grootte (eenheid^2) ingesteld op de onderste drempel van fecale pelletgrootte, in pixels, tot oneindig. Toon 'contouren' en 'samenvatting' zijn geselecteerd. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62776/62276fig8v2large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
<ol start="4"><li>
Data-analyse 
	<ol>
<li>Zet pellettellingen om in pellets per dag, wat een indirecte meting van de voedingssnelheid geeft. Gooi gegevens weg van ruiende personen op dagen dat de rui plaatsvond (figuur 9). OPMERKING: Rui vindt plaats gedurende 1-3 dagen en kan worden geïdentificeerd wanneer een volledige rui van het exoskelet kan worden gezien.</li>
	</ol>
 
</li>
</ol><img alt="Figure 9" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/62776/62776fig09.jpg"> Figuur 9: Voorbeeld van een gribble rui.  Rui van gribble (L. quadripunctata), op een Radiata dennenhouten teststok van 20 mm x 4 mm x 2 mm. Ruien worden aangegeven door rode cirkels. Schaalbalk 2 mm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/62776/62776fig09large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>

<ol><li>Morrell, J. J. Protection of wood-based materials. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMorrell%2C+JJ+%22Handbook+of+environmental+degradation+of+materials%2C+3rd+ed%22">Handbook of environmental degradation of materials, 3rd ed</a>. Kutz, M. , Elsevier Science and Technology Books. Oxford. 343-368 (2018).</li>
<li>Distel, D. L. The biology of marine wood boring bivalves and their bacterial endosymbionts. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDistel%2C+DL+%22Wood+deterioration+and+preservation%22">Wood deterioration and preservation</a>. Goodell, B., Nicholas, D., Schultz, T. , American Chemical Society. Washington, D.C. 253-271 (2003).</li>
<li>Buslov, V., Scola, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inspection+and+structural+evaluation+of+timber+pier%3A+case+study%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Structural+Engineering%22%5BJournal%5D)">Inspection and structural evaluation of timber pier: case study.</a> Journal of Structural Engineering. 117 (9), 2725-2741 (1991).</li>
<li>US EPA. Registration Eligibility Decision for Chromated Arsenicals. List A, Case No. 0132. US EPA - Office of prevention, pesticides and toxic substances. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://swap.stanford.edu/20110202084/http://www.epa.gov/oppsrrd1/reregistration/REDs/cca_red.pdf">https://swap.stanford.edu/20110202084/http://www.epa.gov/oppsrrd1/reregistration/REDs/cca_red.pdf</a> 800-807 (2008).</li>
<li>Arsenic timber treatments (CCA and arsenic trioxide) review scope document, Review series 03.1. ISSN number 1443. Australian pesticides and veterinary medicines authority. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://apvma.gov.au/sites/default/files/publication/14296-arsenic-timber-review-scope.pdf">https://apvma.gov.au/sites/default/files/publication/14296-arsenic-timber-review-scope.pdf</a> (2003).</li>
<li>Commission directive 2003/2/EC of 6 January 2003 relating to restrictions on the marketing and use of arsenic (tenth adaptation to technical progress to Council Deretive 76/769/EEC). Official Journal of the European Communities. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.legislation.gov.uk/eudr/2003/2/adopted">https://www.legislation.gov.uk/eudr/2003/2/adopted</a> (2003).</li>
<li>The Hazardous Waste (England and Wales) Regulations 2005 No.894. Environmental Protection England and Wales. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.legislation.gov.uk/uksi/2005/894/contents/made">https://www.legislation.gov.uk/uksi/2005/894/contents/made</a> (2005).</li>
<li>Palanti, S., Cragg, S. M., Plarre, R. Resistance against marine borers: About the revision of EN 275 and the attempt for a new laboratory standard for Limnoria. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPalanti%2C+S+%22International+Research+Group+on+Wood+Preservation%2C+Document+No.+IRG%2FWP+20-20669%22">International Research Group on Wood Preservation, Document No. IRG/WP 20-20669</a>. , (2020).</li>
<li>The European Commission for Standardization. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((EN+275%3A1992.+Wood+preservatives-+Determination+of+the+protective+effectiveness+against+marine+wood+borers%5BTitle%5D)+AND+%22The+European+Commission+for+Standardization+%28CEN%29%22%5BJournal%5D)">EN 275:1992. Wood preservatives- Determination of the protective effectiveness against marine wood borers.</a> The European Commission for Standardization (CEN). , (1992).</li>
<li>European Commission. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Directive+98%2F8%2FEC+concerning+the+placing+of+biocidal+products+on+the+market%5BTitle%5D)+AND+%22Communication+and+Information+Resource+Centre+for+Administrations%2C+Businesses+and+Citizens%22%5BJournal%5D)">Directive 98/8/EC concerning the placing of biocidal products on the market.</a> Communication and Information Resource Centre for Administrations, Businesses and Citizens. , (2010).</li>
<li>Mantanis, G. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemical+modification+of+wood+by+acetylation+or+furfurylation%3A+A+review+of+the+present+scaled-up+technologies%5BTitle%5D)+AND+%22BioResources%22%5BJournal%5D)">Chemical modification of wood by acetylation or furfurylation: A review of the present scaled-up technologies.</a> BioResources. 12 (2), 4478-4489 (2017).</li>
<li>Borges, L. M. S., Cragg, S. M., Bergot, J., Williams, J. R., Shayler, B., Sawyer, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laboratory+screening+of+tropical+hardwoods+for+natural+resistance+to+the+marine+borer+Limnoria+quadripunctata%3A+The+role+of+leachable+and+non-leachable+factors%5BTitle%5D)+AND+%22Holzforschung%22%5BJournal%5D)">Laboratory screening of tropical hardwoods for natural resistance to the marine borer Limnoria quadripunctata: The role of leachable and non-leachable factors.</a> Holzforschung. 62 (1), 99-111 (2008).</li>
<li>Cragg, S. M., Pitman, A., Henderson, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developments+in+the+understanding+of+the+biology+of+marine+wood+boring+crustaceans+and+in+methods+of+controlling+them%5BTitle%5D)+AND+%22International+Biodeterioration+%26+Biodegradation%22%5BJournal%5D)">Developments in the understanding of the biology of marine wood boring crustaceans and in methods of controlling them.</a> International Biodeterioration & Biodegradation. 43 (4), 197-205 (1999).</li>
<li>Cookson, L. J., Vic, M. D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Additions+to+the+taxonomy+of+the+Limnoriidae%5BTitle%5D)+AND+%22Memoirs+of+the+Museum+of+Victoria%22%5BJournal%5D)">Additions to the taxonomy of the Limnoriidae.</a> Memoirs of the Museum of Victoria. 56 (1), 129-143 (1997).</li>
<li>Cookson, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Australasian+species+of+Limnoriidae+%28Crustacea%3A+Isopoda%29%5BTitle%5D)+AND+%22Memoirs+of+the+Museum+of+Victoria%22%5BJournal%5D)">Australasian species of Limnoriidae (Crustacea: Isopoda).</a> Memoirs of the Museum of Victoria. 52 (2), 137(1991).</li>
<li>Jones, L. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+geographical+and+vertical+distribution+of+British+Limnoria+%5BCrustacea%3A+Isopoda%5D%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+Marine+Biological+Association+of+the+United+Kingdom%22%5BJournal%5D)">The geographical and vertical distribution of British Limnoria [Crustacea: Isopoda].</a> Journal of the Marine Biological Association of the United Kingdom. 43 (3), 589-603 (1963).</li>
<li>Borges, L. M. S., Cragg, S. M., Busch, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+laboratory+assay+for+measuring+feeding+and+mortality+of+the+marine+wood+borer+Limnoria+under+forced+feeding+conditions%3A+A+basis+for+a+standard+test+method%5BTitle%5D)+AND+%22International+Biodeterioration+%26+Biodegradation%22%5BJournal%5D)">A laboratory assay for measuring feeding and mortality of the marine wood borer Limnoria under forced feeding conditions: A basis for a standard test method.</a> International Biodeterioration & Biodegradation. 63 (3), 289-296 (2009).</li>
<li>BSI Standards Publication. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((BS+EN+350%3A2016.+Durability+of+wood+and+wood-based+products+-+Testing+and+classification+of+the+durability+to+biological+agents+of+wood+and+wood-based+materials%5BTitle%5D)+AND+%22BSI+Standards+Publication%22%5BJournal%5D)">BS EN 350:2016. Durability of wood and wood-based products - Testing and classification of the durability to biological agents of wood and wood-based materials.</a> BSI Standards Publication. , (2016).</li>
<li>Menzies, R. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22The+phylogeny%2C+systematics%2C+distribution%2C+and+natural+history+of+limnoria%22">The phylogeny, systematics, distribution, and natural history of limnoria</a>. , University of Southern California. Dosctoal dissertation 196-208 (1951).</li>
<li>Palanti, S., Feci, E., Anichini, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+between+four+tropical+wood+species+for+their+resistance+to+marine+borers+%28Teredo+spp+and+Limnoria+spp%29+in+the+Strait+of+Messina%5BTitle%5D)+AND+%22International+Biodeterioration+%26+Biodegradation%22%5BJournal%5D)">Comparison between four tropical wood species for their resistance to marine borers (Teredo spp and Limnoria spp) in the Strait of Messina.</a> International Biodeterioration & Biodegradation. 104, 472-476 (2015).</li>
<li>Delgery, C. C., Cragg, S. M., Busch, S., Morgan, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+the+epibiotic+heterotrich+ciliate+Mirofolliculina+limnoriae+and+moulting+on+the+faecal+pellet+production+by+the+wood-boring+isopods+Limnoria+tripunctata+and+Limnoria+quadripunctata%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Marine+Biology+and+Ecology%22%5BJournal%5D)">Effects of the epibiotic heterotrich ciliate Mirofolliculina limnoriae and moulting on the faecal pellet production by the wood-boring isopods Limnoria tripunctata and Limnoria quadripunctata.</a> Journal of Experimental Marine Biology and Ecology. 334 (2), 165-173 (2006).</li>
<li>Morrell, J. J., Helsing, G. G., Graham, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Marine+wood+maintenance+manual%3A+a+guide+for+proper+use+of+Douglas-fir+in+marine+exposures%5BTitle%5D)+AND+%22Forest+Research+Laboratory%22%5BJournal%5D)">Marine wood maintenance manual: a guide for proper use of Douglas-fir in marine exposures.</a> Forest Research Laboratory. , Oregon State University. Corvallis. Research Bulletin 48 (1984).</li>
<li>Slevin, C. R., Westin, M., Lande, S., Cragg, S. Laboratory and marine trials of resistance of furfurylated wood to marine borers. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSlevin%2C+CR+%22Eighth+European+Conference+on+Wood+Modification%22">Eighth European Conference on Wood Modification</a>. , Aalto University. 464-471 (2015).</li>
<li>Westin, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Marine+borer+resistance+of+acetylated+and+furfurylated+wood+-+results+from+up+to+16+years+of+field+exposure%5BTitle%5D)+AND+%22International+Research+Group+on+Wood+Preservation%22%5BJournal%5D)">Marine borer resistance of acetylated and furfurylated wood - results from up to 16 years of field exposure.</a> International Research Group on Wood Preservation. , Document No. IRG/WP 16-40756 (2016).</li>
<li>Westin, M., Rapp, A., Field Nilsson, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Field+test+of+resistance+of+modified+wood+to+marine+borers%5BTitle%5D)+AND+%22Wood+Material+Science+and+Engineering%22%5BJournal%5D)">Field test of resistance of modified wood to marine borers.</a> Wood Material Science and Engineering. 1 (1), 34-38 (2006).</li>
<li>Borges, L. M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biodegradation+of+wood+exposed+in+the+marine+environment%3A+Evaluation+of+the+hazard+posed+by+marine+wood-borers+in+fifteen+European+sites%5BTitle%5D)+AND+%22International+Biodeterioration+%26+Biodegradation%22%5BJournal%5D)">Biodegradation of wood exposed in the marine environment: Evaluation of the hazard posed by marine wood-borers in fifteen European sites.</a> International Biodeterioration & Biodegradation. 96 (1), 97-104 (2014).</li>
<li>Treu, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Durability+and+protection+of+timber+structures+in+marine+environments+in+Europe%3A+An+overview%5BTitle%5D)+AND+%22BioResources%22%5BJournal%5D)">Durability and protection of timber structures in marine environments in Europe: An overview.</a> BioResources. 14 (4), 10161-10184 (2019).</li>
<li>Williams, J. R., Sawyer, G. S., Cragg, S. M., Simm, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+questionnaire+survey+to+establish+the+perceptions+of+UK+specifiers+concerning+the+key+material+attributes+of+timber+for+use+in+marine+and+freshwater+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+Institute+of+Wood+Science%22%5BJournal%5D)">A questionnaire survey to establish the perceptions of UK specifiers concerning the key material attributes of timber for use in marine and freshwater engineering.</a> Journal of the Institute of Wood Science. 17 (1), 41-50 (2005).</li>
<li>Purnell, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+carbon+footprint+of+reinforced+concrete%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Cement+Research%22%5BJournal%5D)">The carbon footprint of reinforced concrete.</a> Advances in Cement Research. 25 (6), 362-368 (2013).</li>
<li>Hill, C. A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+environmental+consequences+concerning+the+use+of+timber+in+the+built+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Built+Environment%22%5BJournal%5D)">The environmental consequences concerning the use of timber in the built environment.</a> Frontiers in Built Environment. 5, 129(2019).</li>
<li>Mercer, T. G., Frostick, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leaching+characteristics+of+CCA-treated+wood+waste%3A+a+UK+study%5BTitle%5D)+AND+%22Science+of+the+Total+Environment%22%5BJournal%5D)">Leaching characteristics of CCA-treated wood waste: a UK study.</a> Science of the Total Environment. 427, 165-174 (2012).</li>
<li>Brown, C. J., Eaton, R. A., Thorp, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+chromated+copper+arsenate+%28CCA%29+wood+preservative+on+early+fouling+community+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Marine+Pollution+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Effects of chromated copper arsenate (CCA) wood preservative on early fouling community formation.</a> Marine Pollution Bulletin. 42 (11), 1103-1113 (2001).</li>
<li>Brown, C. J., Eaton, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxicity+of+chromated+copper+arsenate+%28CCA%29-treated+wood+to+non-target+marine+fouling+communities+in+Langstone+Harbour%2C+Portsmouth%2C+UK%5BTitle%5D)+AND+%22Marine+Pollution+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Toxicity of chromated copper arsenate (CCA)-treated wood to non-target marine fouling communities in Langstone Harbour, Portsmouth, UK.</a> Marine Pollution Bulletin. 42 (4), 310-318 (2001).</li>
<li>Brown, C. J., Albuquerque, R. M., Cragg, S. M., Eaton, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+CCA+%28copper-chrome-arsenic%29+preservative+treatment+of+wood+on+the+settlement+and+recruitment+of+wood+of+barnacles+and+tube+building+polychaete+worms%5BTitle%5D)+AND+%22Biofouling%22%5BJournal%5D)">Effects of CCA (copper-chrome-arsenic) preservative treatment of wood on the settlement and recruitment of wood of barnacles and tube building polychaete worms.</a> Biofouling. 15 (1-3), 151-164 (2000).</li>
<li>Lebow, S. T., Foster, D. O., Lebow, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Release+of+copper%2C+chromium+and+arsenic+from+treated+southern+pine+exposed+in+seawater+and+freshwater%5BTitle%5D)+AND+%22Forest+Products+Journal%22%5BJournal%5D)">Release of copper, chromium and arsenic from treated southern pine exposed in seawater and freshwater.</a> Forest Products Journal. 49 (7), 80-89 (1999).</li>
<li>Smith, P. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Risk+to+human+health+and+estuarine+posed+by+pulling+out+creosote-treated+timber+on+oyster+farms%5BTitle%5D)+AND+%22Aquatic+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Risk to human health and estuarine posed by pulling out creosote-treated timber on oyster farms.</a> Aquatic Toxicology. 86 (2), 287-298 (2008).</li>
<li>Brown, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+Effects+of+Chromated+Copper+Arsenate+%28CCA%29-Treated+Timber+on+Nontarget+Epibiota+by+Investigation+of+Fouling+Community+Development+at+Seven+European+Sites%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Environmental+Contamination+and+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Assessment of Effects of Chromated Copper Arsenate (CCA)-Treated Timber on Nontarget Epibiota by Investigation of Fouling Community Development at Seven European Sites.</a> Archives of Environmental Contamination and Toxicology. 45 (1), 0037-0047 (2003).</li>
</ol>

De auteurs hebben geen belangenconflicten met betrekking tot deze studie.

Voordat gribblespecimens worden geselecteerd voor gebruik in het voedingsexperiment, moeten individuen worden gescreend om hun geschiktheid te beoordelen. Er kan enige variatie in voedingssnelheid tussen individuen zijn als gevolg van verschillen in grootte, dus alleen volgroeide volwassen exemplaren moeten worden geselecteerd. Borges et al., 200917, hebben geen significant verschil tussen de voedingssnelheid van individuen tussen 1,5 mm en 3 mm gedetecteerd. Vrouwelijke Limnoria broeden ...

Houtboorders kunnen uitgebreide schade toebrengen aan mariene houten structuren, zoals zeewering, pieren en aquacultuurstructuren; waarvan de vervanging of restauratie wereldwijd miljarden dollars per jaar kost1,2,3. Om deze structuren te beschermen, wordt hout vaak behandeld om de biologische afbraak te verminderen. Vanwege de beperking van het gebruik van breedspectrum biociden in Australië, de EU, het VK en de VS, in het mariene milieu, zijn echter nieuwe modificatietechnieken en houtsoorten die van nature duurzaam zijn voor boren gewild4,5,6,7. Nieuwe technieken voor het behoud van hout in het mariene milieu vereisen grondige tests om te voldoen aan wettelijke normen en de milieueffecten van gevaren zoals uitloging van chemische conserveermiddelen te beperken. Zo wordt de Europese norm EN 275, de huidige Europese norm uit 1992, gebruikt om houtconserveringsbehandelingen te evalueren tegen schade aan houtboorders in zee8,9. Deze norm, samen met andere wetgevingen tegen het gebruik van biocideverbindingen, zoals CCA4,5,6,7 en creosoot10, vereist duurzame, niet-toxische methoden voor houtbescherming en het gebruik van van nature duurzame houtsoorten ter vervanging van biocidebehandelingen11,12 . Mariene proeven, zoals die gespecificeerd in EN 275, vereisen lange blootstellingsperioden en zijn dus duur en traag om zinvolle resultaten op te leveren. Laboratoriumtests bieden echter een veel sneller alternatief voor testmethoden voor het conserveren van houtproducten tegen aanvallen van houtboorders in zee, waardoor snelle evaluatie van aanpassingen in behandelingsschema's mogelijk is13. De resultaten van dit snelle laboratoriumexperiment zijn ontworpen om nieuwe modificatieprocessen van hout te informeren en om houtsoorten te identificeren met natuurlijke duurzaamheid voor boorschade. Een lage voedingssnelheid en vitaliteit kunnen wijzen op een verhoogde weerstand in potentiële producten en deze informatie kan vervolgens worden teruggekoppeld naar industriële partners om hen in staat te stellen ontwerpen te verbeteren. Onze methode maakt een wendbare en snelle reactie mogelijk, die wenselijk is in de industrie, en zodra veelbelovende producten zijn geïdentificeerd, kunnen de resultaten worden aangevuld met die van mariene proeven.
Gribbles (Limnoria) is een geslacht van kreeftachtigen uit de familie Limnoriidae. Er zijn wereldwijd meer dan 60 soorten Limnoria13,14,15, met drie veel voorkomende soorten in het Verenigd Koninkrijk, Limnoria lignorum, Limnoria tripunctata en Limnoria quadripunctata16.  Ze boren tunnels op het oppervlak van hout dat wordt ondergedompeld in zeewater, vaak met economisch aanzienlijke schade tot gevolg. Gribbles zijn zeer overvloedig aanwezig in de britse kustwateren en zijn gemakkelijk te onderhouden onder laboratoriumomstandigheden, waardoor ze ideale organismen zijn voor de studie van de biologische afbraak van hout door ongewervelde zeedieren. Het evalueren van de voedingssnelheden en vitaliteit van gribbles op verschillende houtsoorten en houtconserveringsmethoden kan de effectiviteit van hun weerstand tegen biologische afbraak bepalen. Het volgende protocol beschrijft een standaardmethode voor het meten van gribblevoedingssnelheden, ontwikkeld op basis van de door Borges en collega's beschreven 12,17, naast het stroomlijnen van de introductie van beeldanalyse om het proces bedienbaar te maken in niet-gespecialiseerde laboratoria. Beeldanalyse wordt ook gebruikt om de praktische beperkingen van het handmatig tellen van een groot aantal monsters te verminderen. Duurzaamheid bij langdurige mariene tests, volgens de Britse norm EN350-1:1994, worden beoordeeld in verwijzing naar Pinus sylvestris spinthout18. In de hier gepresenteerde laboratoriumtests op korte termijn gebruiken we grove den (Pinus sylvestris L) spinthout als controle voor het testen van kernhout van de soorten ekki (Lophira alata Banks ex C.F Gaertn), beuk (Fagus sylvatica L), tamme kastanje (Castanea sativa Mill) en terpentijn (Syncarpia glomulifera (Sm.) Nied). De gemiddelde productie en vitaliteit van fecale pellets tussen acht replicaties per houtsoort werd gebruikt als indicator voor duurzaamheid. We bieden illustratieve gegevens verzameld uit een typische evaluatie, met behulp van de gribble-soort Limnoria quadripunctata en een reeks natuurlijk duurzame houtsoorten. Limnoria quadripunctata, geïdentificeerd door de sleutels van Menzies (1951), werd geselecteerd als de optimale soort voor biologische afbraakproeven vanwege het feit dat het het meest bestudeerde lid van de familie is en goed ingeburgerd is als een modelsoort voor gebruik in biologische afbraakproeven. Dit protocol is ook van toepassing op het testen van bossen met verschillende behandelingen, hoewel de gebruikte controle onbehandelde replicaties van dezelfde soort moet zijn.

<table><tbody><tr><td>12-well cell culture plates</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>150200</td><td></td></tr><tr><td>50ml Falcon tubes</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-432-22</td><td></td></tr><tr><td>Adjustable volume pipette</td><td>Fisher Scientific</td><td>FBE10000</td><td>1-10 ml</td></tr><tr><td>Beech</td><td>G. Sawyer (consultant in timber technology)</td><td>Fagus sylvatica</td><td>Taxonomische autoriteit: L</td></tr><tr><td>Ekki</td><td>G. Sawyer (consultant in timber technology)</td><td>Lophira alata</td><td>Taxonomische autoriteit: Banks ex C. F. Gaertn.</td></tr><tr><td>Forceps</td><td>Fisher Scientific</td><td>10098140</td><td></td></tr><tr><td>Incubator</td><td>LMS LTD</td><td>INC5009</td><td></td></tr><tr><td>Microporous specimen capsules</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>70187-20</td><td></td></tr><tr><td>Petri dish</td><td>Fisher Scientific</td><td>FB0875713</td><td></td></tr><tr><td>Scots Pine</td><td>G. Sawyer (consultant in timber technology)</td><td>Pinus sylvestris</td><td>Taxonomische autoriteit: L.</td></tr><tr><td>Size 00000 paintbrush</td><td>Hobby Craft</td><td>5674331001</td><td>Size 000 of 0000 ook acceptabel</td></tr><tr><td>Sweet Chestnut</td><td>G. Sawyer (consultant in timber technology)</td><td>Castanea sativa</td><td>Taxonomische autoriteit: Mill</td></tr><tr><td>Turpentine</td><td>P. Evans (Professor, Dept. Wood Science, University of British Columbia)</td><td>Syncarpia glomulifera</td><td>Taxonomische autoriteit: (Sm.) Nied.</td></tr><tr><td>Vacuum desiccator</td><td>Fisher Scientific</td><td>15544635</td><td></td></tr></tbody></table>

snel testen van de weerstand van hout tegen biologische afbraak door mariene houtborende schaaldieren

Rapid Testing of Resistance of Timber to Biodegradation by Marine Wood-Boring Crustaceans

Houtborende ongewervelde dieren vernietigen snel zeehout en houten kustinfrastructuur en veroorzaken elk jaar miljarden dollars aan schade over de hele wereld. Aangezien behandelingen van hout met breedspectrum biociden, zoals creosoot en gechromateerd koperarsenaat (CCA), nu door wetgeving worden beperkt in gebruik in de zee, zijn natuurlijk duurzame houtsoorten en nieuwe conserveringsmethoden van hout vereist. Deze methoden worden getest om te voldoen aan wettelijke normen, zoals de Europese norm voor het testen van houtconserveringsmiddelen tegen scheepsboorders, EN 275. Het eerste onderzoek naar duurzame houtsoorten of houtconserveringsbehandelingen kan snel en goedkoop worden bereikt door middel van laboratoriumtests, wat veel voordelen biedt ten opzichte van mariene veldproeven die doorgaans kostbare, langdurige inspanningen zijn. Veel soorten Limnoria (gribble) zijn mariene houtborende schaaldieren. Limnoria zijn ideaal voor gebruik in laboratoriumtests van de biologische afbraak van hout door mariene houtboorders, vanwege de praktische bruikbaarheid van het fokken in aquaria en het gemak van het meten van hun voedingssnelheden op hout. Hierin schetsen we een standaardiseerbare laboratoriumtest voor het beoordelen van de biologische afbraak van hout met behulp van gribble.

Een voedingsexperiment van L. quadripunctata werd gedurende 20 dagen uitgevoerd, met behulp van vijf verschillende houtsoorten (grove den (Pinus sylvestris L) spinthout en kernhout van beuken (Fagus sylvatica L), ekki (Lophira alata Banks ex C. F Gaertn), tamme kastanje (Castanea sativa Mil) en terpentijn (Syncarpia glomulifera (Sm.) Neid)) (zie materiaaltabel), in november 2020. Per houtsoort werden acht replicatiestokjes gebruikt en per st...

Dit protocol presenteert een methode voor het beoordelen van de voedingssnelheid van het houtborende schaaldier Limnoria door de productie van fecale pellets te meten. Deze methode is ontworpen voor gebruik in niet-gespecialiseerde laboratoria en heeft potentieel voor opname in standaard testprotocollen, om verbeterde houtduurzaamheid onder maritieme omstandigheden te evalueren.

Snel testen van de weerstand van hout tegen biologische afbraak door mariene houtborende schaaldieren

Wood-boring invertebrates rapidly destroy marine timbers and wooden coastal infrastructure, causing billions of dollars of damage around the globe every ...

Hout is een uitstekend materiaal voor de bouw, veel gebruikt voor maritieme structuren, zoals pieren, steigers, werven en kustverdedigingen, zoals kribben. Dus echt uitstekend voor deze structuren vanwege de sterkte, de slagvastheid, het vermogen van mensen om structuren te vormen, te repareren en aan te passen, al die dingen zijn goed. Er is echter een groot probleem dat resulteert in schade die in de miljarden dollars per jaar moet lopen in termen van schade aan mariene structuren.Deze schade wordt veroorzaakt door scheepswormen, die door het woord tunnelen en vrij grote tunnels creëren en zoals we in deze specifieke presentatie zullen zien, een klein schaaldier. Hier is een buis met een aantal van hen erin die bijna zichtbaar zijn, ter grootte van een kleine mier, maar ze komen in grote aantallen voor. Ze eroderen het oppervlak van hout weg en veroorzaken uiteindelijk instorting.Wat gaan we aan dat probleem doen? Welnu, de traditionele aanpak is effectief. Het maakt gebruik van breedspectrum biociden, maar zoals hun naam al aangeeft, zijn deze biociden chemicaliën die geen onderscheid maken tussen de verschillende soorten organismen.Een mariene structuur kan dus chemicaliën uitstoten die schadelijk zijn voor het bredere milieu. Met deze zorgen in het achterhoofd heeft de wetgeving verschoven wat is toegestaan voor gebruik op zee in Noord-Amerika, in de Europese wateren en in de Australische wateren. Er is een grote verschuiving die innovatie vereist, waarbij de methoden om het hout te beschermen specifiek op de grenzen zijn gericht en geen dingen zijn die problemen in de bredere omgeving zullen veroorzaken.Dus we gaan in deze presentatie demonstreren hoe we houtbeschermingsmethoden testen tegen de gribble, het kleine schaaldier, en wat we presenteren is een snelle responstest. De traditionele methoden voor het testen van houtmaterialen voor gebruik in zee vereisen een testperiode van vijf jaar en bedrijven moeten veel wendbaarder zijn dan dat hen toestaat. We zijn dus op zoek naar en hebben een snelle methode ontwikkeld om conserveringsmethoden te evalueren.Dit stelt ons in staat om te communiceren met de ingenieurs die de nieuwe methoden produceren, stelt hen in staat om aan te passen en ons in staat om opnieuw te testen. Dus hier in deze presentatie zullen we kijken naar een snelle testmethode voor het evalueren van manieren om houten structuren te beschermen tegen het houtborende schaaldier, de gribble. Dit is een laboratoriumbeoordeling van emmers om te testen op bestendigheid van hout tegen biologische afbraak door mariene houtboorders.We gebruiken de standaardmethode om de voedingssnelheid van een houtborend schaaldier, de gribble, te beoordelen door de fecale pelletproductie te meten en de vitaliteit en mortaliteit te beoordelen. Nadat alle behandelingsprocessen zijn voltooid, snijdt u droog hout in teststicks op maat van twee millimeter bij vier millimeter bij 20 millimeter. Voeg droge sticks toe aan een constant gewicht onder laboratoriumomstandigheden.Van elk te testen hout moet ten minste vijf reps worden gebruikt. Post houtbereiding. Plaats de sticks onder het gaas in een voedselveilige plastic container in de vacuümsiccator en vervang het deksel, zodat er een strakke afdichting is die wordt vergemakkelijkt door een coating van vacuümvet.Bevestig een driewegklep tussen de slang die de exsiccator en pomp verbindt met de derde buis die naar open lucht leidt. Zorg ervoor dat de driewegklep is afgesloten voor lucht en laat de pomp draaien om een vacuüm van 0,75 tot min één bar in de vacuümsiccator te bereiken en houd dit vacuüm 45 minuten tot één uur vast. Dompel het open uiteinde van de derde buis onder in een container met zeewater.Schakel de pomp uit en sluit de klep die naar de pomp leidt en open de klep langzaam totdat zeewater door het vacuüm in de exsiccator wordt getrokken. Laat het water stromen totdat het de plastic container boven het niveau van het gaas vult. Trek vervolgens de buis terug uit het zeewater in de container, waardoor lucht kan binnendringen totdat de exsiccator de atmosferische druk verzorgt.Houd de stokjes onder het gaas totdat ze naar de bodem van de plastic container zinken. Dompel zeewater verzadigde teststicks onder in zeewater in Falcon-buizen van 50 millimeter. Vervang water regelmatig gedurende een periode van 20 dagen.Haal individuele exemplaren van gribble uit een besmet houtblok. Gebruik een fijne tang en een dunne kwast. Pel voorzichtig al het hout dat het gribblehol bedekt met de tang.Zodra de gribble is blootgesteld, gebruik je een penseel om voorzichtig individuen van onderaf uit te pikken en ze in een petrischaal gevuld met zeewater te deponeren. Controleer de gribble onder een microscoop om de soort te identificeren en zorg ervoor dat er geen schade is veroorzaakt tijdens het extraheren. Alle vrouwtjes die eieren broeden, moeten worden weggegooid omdat gravid vrouwtjes een verminderde voedingscapaciteit hebben.Limnoria quadripunctata kan onder een stereomicroscoop worden geïdentificeerd door de vier verschillende tubercules gerangschikt in een vierkant patroon op het pleotelson van het dier, naast een op de vijfde In putplaten met putten met een diameter van 20 millimeter, plaats één teststick in vijf millimeter ongefilterd zeewater tussen 32 en 35 PSU per put. Plaats behandelingen of houtsoorten willekeurig door de putplaat. Voeg één Gribble per put toe.Verwijder twee keer per week de teststick en elke gribble, één per put van de plaat en plaats in een vers bereide putplaat met vijf millimeter zeewater per put. Gebruik een verfkwast om eventuele fecale pellets voorzichtig van de stok af te borstelen voordat u de fecale pallets in de oorspronkelijke put overbrengt en vasthoudt. Platen kunnen in constante donkere omstandigheden worden bewaard, omdat de fotoperiode geen effect heeft op de voersnelheid van gribbels.Voor het vervangen van de putplaat en het verzamelen van de fecale pellets, moet de vitaliteit van individuele gribble worden beoordeeld. Als een gribbel is gestorven, veroorzaakt dit een vitaliteit van een. Een score van twee wordt gegeven aan gribble die niet meer op het hout en lethargisch of langzaam bewegend zijn.Drie wordt gegeven om te gribbelen die actief zwemmen of bewegen, maar niet op het hout. Gribble die over het houtoppervlak kruipen, krijgen een vitaliteitsscore van vier. Ten slotte wordt de hoogste score van vijf gegeven aan gribble die holen in het hout hebben gemaakt.Gebruik een fijne verfkwast om eventuele klonten te scheiden, zodat de afzonderlijke pellets zichtbaar zijn en borstel eventuele pellets weg van de randen van de put. Maak een gedetailleerde foto onder een stereomicroscoop op een bepaald moment vergroting en upload naar een computer. Zorg ervoor dat de pellets op de achtergrond zo uniform mogelijk scherp zijn zonder schaduwen of lichtreflectie op het wateroppervlak, omdat dit de beeldvorming kan verstoren.Upload een stapel afbeeldingen door te slepen en neer te zetten of door Bestand, Importeren, Afbeeldingenreeks en Bladeren te selecteren. Wijzig geen parameters en selecteer vervolgens OK. Gebruik vervolgens het cirkelgereedschap om het onderste gedeelte van een put met de fecale pellets te selecteren. Verwijder de randen van het putje en selecteer Bewerken, Buitenkant wissen.Maak de afbeelding binair door Process, Make Binary te selecteren. Kalibreer door Analyseren, Schaal instellen en het aantal pixels per millimeter voor uw afbeelding te selecteren. Tel de pellets en selecteer Analyseren, Deeltje analyseren in het vak naast de maateenheid in het kwadraat.Selecteer vervolgens een lagere drempel die gelijk is aan de kleinste maat van een pellet met behulp van de eerder ingestelde eenheidsschaal. Schakel de vervolgkeuzelijst show om, selecteer Contouren en schakel vervolgens Samenvatten in en druk op OK. Converteer pellettellingen naar pellets per dag, die een indirecte meting van de voedingssnelheid geven. Gooi gegevens weg van ruiende personen op dagen dat rui plaatsvond.Onze representatieve resultaten kijken naar de soorten beuk, grove den, terpentijn, Ekki en tamme kastanje op de voedingssnelheid en vitaliteit van gribbles. De dagelijkse fecale pelletproductie werd berekend en gemiddeld over acht replicaties. Tellingen van personen die aan het ruien waren of eerder waren overleden, werden niet meegenomen in de gemiddelden.De twee controlesoorten beuk en grove den zagen de hoogste fecale pelletproductie terwijl de hardhouten Ekki's eronder zaten. De hoogste vitaliteit van vijf, weergegeven in donkerblauw, is alleen te zien op beuken- en grove dennenbossen. De sterfte vertegenwoordigd door zwart, een vitaliteit van één, was het hoogst op tamme kastanje.De meerderheid van de overgebleven levende individuen bleef een vitaliteit van vier in tamme kastanje, Ekki en terpentijn. De voordelen van laboratoriumproeven zijn dat we echt veelbelovende gemodificeerde houtsoorten snel kunnen beoordelen op hun duurzaamheid tegen mariene houtboor organismen en biologische afbraak in de oceaan. Ik heb hier een aantal bossen die echt zwaar zijn aangetast door deze houtboororganismen.Als je je voorstelt, dit was een behoorlijk groot stuk hout en het is echt, echt opgegeten en gekauwd. We kunnen zien hoe schadelijk deze organismen zijn. Door hout in ons laboratorium te testen, is het goedkoper, sneller en efficiënter dan door gewoon rechtstreeks naar proeven in de oceaan te gaan en we kunnen echt heel snel resultaten krijgen.We kunnen beginnen te zien of de organismen het hout kunnen vernietigen en eten en overleven en dan kunnen we echt, echt veelbelovend, gemodificeerd hout gaan plukken dat vervolgens kan doorgaan naar duurdere mariene proeven.

rapid-testing-resistance-timber-to-biodegradation-marine-wood-boring

Research

JoVE Journal

Environment

Milieu

Deze video toont een gecontroleerde omgeving benadering van de afbraak van lignocellulose plantenweefsels studie door aërobe schimmels. De mogelijkheid om bronnen van nutriënten en vocht controle is een belangrijk voordeel van agar-block microkosmos, maar de aanpak levert vaak gemengd succes. Wij richten kritische valkuilen aan reproduceerbare, lage variabiliteit resultaten opleveren.

Agar-Block microkosmos voor de gecontroleerde Plant Tissue Ontleding door Aerobic Fungi

Dit onderzoek betreft de ontwikkeling en standaardisatie van een waardevolle methodologische protocol op lange termijn (14 dagen) dodelijke toxiciteit die wordt uitgeoefend door chemische stoffen, industrieel afvalwater of in de riolering en vloeibare milieu monsters op de zoutwater schaaldieren te...

Lange-termijn Lethal toxiciteit Test met de Schaal- Artemia franciscana</em

Plastic folies label "biologisch afbreekbaar" zijn commercieel beschikbaar voor gebruik in de landbouw als mulch. Grondbewerking vertegenwoordigt een aantrekkelijke verwijdering methode, maar degradatie onder veldomstandigheden wordt slecht begrepen. Het doel van deze studie was werkwijzen voor het isoleren van natieve bodemschimmels en bacteriën die plastic mulch films koloniseren na grafveld ontwikkelen.

Isolatie van de Native Soil Micro-organismen met Potentieel voor Breaking Down Biologisch afbreekbaar plastic mulch films gebruikt in de landbouw

Hier presenteren we een protocol voor het screenen van bodembiodiversiteit om te zoeken naar schimmelstammen die betrokken zijn bij de afbraak van recalcitrante materialen. Ten eerste worden schimmelstammen die kunnen groeien op humuszuren of lignocellulose geïsoleerd. Hun activiteit wordt vervolgens getest, zowel in enzymatische assays als op verontreinigende stoffen zoals koolwaterstoffen en kunststoffen.

Isolatie en screening van bodembiodiversiteit voor schimmels die betrokken zijn bij de afbraak van recalcitrante materialen

Hier presenteren we een protocol voor het verkrijgen van entomopathogene schimmels van een boshoutboorder en een vervangende manier om hun entomopathogene activiteiten te evalueren met behulp van een Coleoptera-modelinsect. Deze methode is efficiënt en handig voor het verkennen van entomopathogene schimmelbronnen van houtborende insectenplagen in natuurlijke bossen.

Isolatie, gedragsidentificatie en pathogeniteitsbeoordeling van entomopathogene schimmels van een boshoutboorder

Hier presenteren we een geoptimaliseerde methodologie voor het produceren van op mycelium gebaseerde composieten (MBC's) uit petrochemicaliën en vervuilende materialen voor thermische isolatietoepassingen. Om koolstofneutraal en duurzaam te worden, kunnen biobased en composteerbare materialen zoals mycelium bio-composiet de oplossing zijn. Om te bepalen of ze aan de bouwnormen voldoen, zijn verschillende experimenten uitgevoerd.

Productie en testen van vochtgedrag en thermische eigenschappen van koolzaadstro en Ganoderma resinaceum mycelium bio-composieten

Het protocol beschrijft de standaardprocedure voor het testen van potentieel biologisch afbreekbare materialen, zowel synthetisch als natuurlijk, onder aërobe omstandigheden met behulp van een natuurlijk zeewaterinoculum en een geautomatiseerd respirometriesysteem met gesloten lus.

Aëroob testen van biologische afbraak van materialen met behulp van een natuurlijk marien zeewaterinoculum en een respirometer met gesloten lus

Industriële afvalstoffen kunnen worden verzameld en gemodificeerd om microbiële groei te analyseren. Technieken voor de extractie van lignocellulose leveren componenten om specifieke biologische afbraakcapaciteit te analyseren. Gaschromatografie-massaspectrometrie identificeert fermentatieproducten van micro-organismen die zijn gekweekt op pulpafval. Deze methoden bepalen het metabolische vermogen van micro-organismen om pulpafval af te breken.

Methoden voor het vergemakkelijken van microbieel groei op afvalstromen van pulpmolens en karakterisering van het biodegradatiepotentieel van gekweekte microben

Dit bioassay maakt gebruik van een model roofvissen aan de aanwezigheid van het voeden-afschrikmiddel metabolieten van organische extracten van de weefsels van mariene organismen in de natuurlijke concentraties met behulp van een qua voedingswaarde vergelijkbaar voedsel matrix beoordelen.

Een vis van borstvoeding Laboratory Bioassay de Antipredatory activiteit van secundaire metabolieten te beoordelen vanuit de weefsels van mariene organismen

Accuraatheid en precisie van de technieken die worden gebruikt om methaanemissies van herkauwende dieren te meten, zijn van cruciaal belang voor het succes van inspanningen om broeikasgasemissies te verminderen. Dit manuscript beschrijft de principes en werking van een geautomatiseerd systeem om methaan- en kooldioxidemassastroom uit de adem van herkauwende dieren te bewaken.

Het gebruik van een Automated System (GreenFeed) naar Enterisch methaan en kooldioxide emissies van herkauwers Monitor

Leer een snelle methode om houtduurzaamheid te testen tegen biologische afbraak door het houtborende schaaldier Limnoria. Deze protocol meet uitscheidingsproductie om voedingsgedrag te kwantificeren.

Snel testen van de weerstand van hout tegen biologische afbraak door mariene houtborende schaaldieren

Meer video's verkennen