Een aangepaste eenvoudige methode voor het opwekken van een hartinfarct bij muizen

Dit rapport presenteert een unieke aanpak voor de inductie van een hartinfarct bij muizen. De huidige methode is eenvoudig, tijdbesparend en maakt gebruik van de chirurgische buizen en apparatuur die in de meeste laboratoria te vinden zijn. Het opstellen van myocardinfarctenmodellen biedt een uitgangspunt voor het onderzoeken van de mechanismen uit het verleden van post-MI-remodellering en variatie van nieuwe therapieën.

Breng de ontharingscrème aan op de borst van de muis en wacht een minuut. Veeg vervolgens de ontharingscrème en het haar voorzichtig af met nat gaasje. Zet de muis vast op een operatieplatform in rugligging.

Desinfecteer het operatiegebied zoals beschreven in de tekst. Plaats vervolgens een steriel laken rond het gedesinfecteerde gebied. Maak een huidsnede van 0,5 centimeter langs de lijn die de xiphoid en de oksel verbindt, en scheid de grote en kleine borstspieren botweg met een pincet.

Open de vierde intercostale ruimte met behulp van een Micro-Mosquito hemostaat. Externaliseer het hart door het met de wijsvinger van de linkerhand naar de vierde intercostale ruimte te duwen. Zet het hart vast met de linkerhand en bind de linker voorste dalende tak vast met een 6/0 hechting op drie millimeter van de oorsprong.

Plaats het hart snel terug in de borstholte. Evacueer de lucht uit de borstholte door zachtjes op de borstholte te drukken. Voor postoperatieve pijnbestrijding, injecteer buprenorfine subcutaan om de vier tot zes uur gedurende maximaal tweeënzeventig uur na de operatie.

Plaats de muis op een verwarmingskussen om te herstellen van de anesthesie. Zet de geëuthanaseerde muis vast op het operatieplatform in rugligging. Maak een ventrale incisie van ongeveer drie tot vier centimeter in de bovenbuik.

Snijd de ribben aan beide zijden van de thoraxholte af en verwijder vervolgens het middenrif. Doordrenk het hart met 10 milliliter koude vier graden Celsius 1X PBS door middel van intraventriculaire injectie. Verzamel vervolgens het hart door de aortawortel af te snijden en deze onmiddellijk op te slaan bij min 80 graden Celsius.

Snijd het bevroren hart met scheermesjes in stukken van een millimeter dik op ijs. Incubeer de voorbereide hartschijfjes in 1%TTC-oplossing opgelost in één 1X PBS bij 37 graden Celsius gedurende 10 tot 15 minuten. Fotografeer vervolgens de plakjes met een digitale camera.

Na het afbinden van de kransslagader duidde TTC-kleuringsanalyse op een succesvolle inductie van een myocardinfarct en temporele veranderingen van de littekengrootte na MI. De resultaten van de overlevingsanalyse toonden openlijke sterfte binnen zeven dagen na MI bij mannelijke en vrouwelijke C57BL/6J-muizen. Ventriculaire ruptuur was een veel voorkomende reden voor overlijden na MI.

Post-MI echocardiografische beoordeling toonde een succesvolle inductie van contractiele disfunctie en ventriculaire remodellering. Wanneer u probeert het hart naar buiten te brengen, druk dan niet eerst op de borstholte, en als u onze weerstand volgt, geeft dit aan dat het nodig is om de richting aan te passen tegen de gewogen lofprijzing. Na deze procedure kan intramyocardiale injectie van virale vectoren of cellen worden uitgevoerd om de werkzaamheid van gentherapieën of celtherapieën bij hartaandoeningen te testen.