Een aangepaste manchettechniek voor muis cervicaal heterotopisch harttransplantatiemodel

Een harttransplantatiemodel van muizen helpt bij het onderzoeken van cardiale allografts immunologische en de parasagittale afstotingsmechanismen. Dit inzicht zou helpen bij het ontwikkelen van een unieke aanpak om de overleving van de patiënt op lange termijn te verbeteren. Deze cervicale transplantatie operatie wordt uitgevoerd zonder hechtingen met behulp van een manchetmethode.

Daarom vermindert het de complexiteit van vaatanastomose en vermijdt het de interferentie met de bloedtoevoer en veneuze reflux van het onderlichaam. De procedure wordt gedemonstreerd door Dr.Xin Mao, een chirurg uit ons laboratorium. Plaats om te beginnen de ontvangende muis op een verwarmingskussen op de operatietafel en scheer het haar over het operatiegebied.

Maak na het desinfecteren van het operatiegebied een incisie van 1,5 tot 2 centimeter parallel aan de cervicale middellijn van de rechter onderkaakhoek tot het staarteinde. Ontleed ongeveer een centimeter van de rechter externe halsader met behulp van een elektrocoagulator en een microtang. Knip de ader aan het proximale uiteinde met een atruamatische microvasculaire klem en ligate deze aan het distale uiteinde.

Passeer het distale uiteinde van de ader door een 22 gauge polyurethaan prikkeldraadmanchet met een schuine kant en oppervlakkige groeven. Bevestig de ader met het handvat van de manchet met behulp van een microvasculaire klem. Verwijder de 8-0 ligatiehechting aan het distale uiteinde, draai het lumen over de manchet die door de oppervlakkige weerhaak binnenstebuiten is gehaakt en bevestig het met een 10-0 chirurgische hechting in de groeven van het oppervlak.

Reseceer de rechter sublinguale klier om een fossa te vormen voor het implanteren van het harttransplantaat en reserveer de rechterkwab van de submaxillaire klier en de rechter sternocleidomastoïde. Ontleed de rechter gemeenschappelijke halsslagader gedurende ongeveer een centimeter met behulp van een microtang en knip de slagader met een atraumatische microvasculaire klem aan het proximale uiteinde. Ligate en snijd de slagader af.

Passeer het distale uiteinde van de slagader door een 26 gauge polyurethaan prikkeldraadmanchet met een schuine kant en groeven op het oppervlak. Bevestig de slagader met het handvat van de manchet met behulp van een microvasculaire klem. Verwijder de ligatiehechting aan het distale uiteinde, draai het lumen binnenstebuiten over de manchet en fixeer met een oppervlakkige weerhaak en groeven met een chirurgische hechting van 10-0.

Na het voorbereiden van de vaten van de ontvanger, laat 100 internationale eenheden per milliliter heparinezoutoplossing op de vaten vallen om trombose te voorkomen. Bedek de cervicale incisie met nat zoutoplossinggaas voor latere implantatie. Scheer het buikhaar met een elektrisch scheermes.

Na het desinfecteren van het chirurgische gebied, snijdt u de buik in langs de middellijn van de symphysis pubis naar de subxiphoid en breidt u het ingesneden gebied uit met een retractor. Ontleed een centimeter van de abdominale aorta en inferieure vena cava met behulp van een elektrocoagulator en een microtang en voer heparinisatie uit door één milliliter fysiologische zoutoplossing aangevuld met 250 internationale eenheden per milliliter heparine door de inferieure vena cava te injecteren. Snijd de abdominale aorta en inferieure vena cava weg.

Snijd de thorax langs de voorste oksellijn aan beide zijden met behulp van een chirurgische schaar om de borstwand te scheiden en ligate vervolgens de superieure vena cava met een 8-0 chirurgische hechting. Steek een hoofdhuidnaald in op de suprahepatische inferieure vena cava. Injecteer vervolgens ijskoude fysiologische zoutoplossing aangevuld met 100 eenheden per milliliter heparine door de hoofdhuidnaald van suprahepatische inferieure vena cava om het donorhart te overgieten totdat de bloedkleur vervaagt.

Reperfuse het donorhart met twee tot drie milliliter ijskoude histidine-tryptofaan-ketoglutarate-oplossing uit de aortaboog om het donormyocard te beschermen. Ligate de superieure en inferieure venae cavae en de longader met een 5-0 chirurgische hechting. Ontleed en snijd de donoraorta en longslagader af voordat u zich vertakt.

Verdeel vervolgens de superieure en inferieure venae cavae en de longader om het hart van de donor te verwijderen. Implanteer het donorhart in de cervicale zak van de ontvangende muis in een omgekeerde positie. Trek de manchet met een everted ontvanger halsader in het lumen van de donor longslagader om end-to-end anastomose uit te voeren.

Ligate de manchet met behulp van de groeven op het oppervlak door een 10-0 chirurgische hechting om de anastomose te fixeren. Gebruik een vergelijkbare procedure voor end-to-end anastomose van de donoraorta naar de ontvangende halsslagader. Laat de atraumatische microvasculaire klem van de halsader los, gevolgd door de halsslagader om het hart van de donor te reperfuseren.

Bevestig het harttransplantaat en hecht het goed om verdraaiing van het transplantaat te voorkomen. Sluit de cervicale incisie met continue hechtingen met behulp van een 5-0 polyamide monofilament hechtdraad. Met behulp van dit cervicale heterotope harttransplantatiemodel bij muizen was de overlevingskans van ontvangende muizen ongeveer 95,2%Alle cardiale allografts gingen binnen acht dagen na transplantatie verloren.

Daarentegen overleefden alle isogene harttransplantaties langer dan vier weken. groeven en manchet voor een betere fixatie van everted vaten, het vermijden van herhaalde werking van vaten. De aangepaste manchetmethode voor vaatanastomose in deze operatie is ook toepasbaar voor een andere anastomose in verschillende orgaantransplantatie diermodellen.