Name: Echocardiografische karakterisering van linkerventrikelstructuur, functie en coronaire stroom bij pasgeboren muizen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-04-07T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 55 s
Description: Leer echocardiografische beoordeling van linkerventrikelstructuur, functie en coronairbloedstroom bij pasgeboren muizen. Deze methode ondersteunt vroegtijdige detectie van cardiovasculaire aandoeningen en longitudinaal onderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

De auteurs bedanken Chad M. Warren, MS (University of Illinois at Chicago), voor het redigeren van dit manuscript. Dit werk werd ondersteund door NIH/NHLBI K01HL155241 en AHA CDA849387 subsidies aan PCR.

Alle experimenten werden goedgekeurd door de Animal Care and Use Committee van de Universiteit van Illinois in Chicago. Voor de experimenten werden 7 dagen oude FVB/N-muizen gebruikt. Het protocol is onderverdeeld in muisvoorbereiding, echocardiografie beeldacquisitie en post-imaging dierverzorging.
1. Muisvoorbereiding
<ol><li>Haal de 7 dagen oude muizen uit de broedkooi. OPMERKING: Op deze vroege leeftijd is het moeilijk om het geslacht van het dier te bepalen door lichamelijk onderzoek.</li>
	<li>Plaats ECG-gel (zie Materiaaltabel) op de verwarmde platformelektrodepads. Plaats aluminiumfoliestrips (~ 1,5 in x 0,25 inch) bovenop de elektrodepads om het elektrodebereik uit te breiden en vast te zetten met tape (figuur 1A). Plaats vervolgens de ECG-gel bovenop de aluminiumfoliestrips. OPMERKING: Zorg ervoor dat de gel onder de aluminiumfoliestrips niet uitdroogt tijdens de procedure. Als dat gebeurt, voeg dan meer gel toe om de geleidbaarheid te behouden.</li>
	<li>Knip een vinger uit een nitrilhandschoen en plaats deze op zowel de isofluraan/zuurstofneuskegel aan de ene kant als de muizenneus aan de andere kant (figuur 1B).</li>
	<li>Plaats de muisjong in de inductiekamer van de isofluraan en start de isofluraanafgifte met een concentratie van 2,5% aangedreven door 100% zuurstof (figuur 1C).</li>
	<li>Plaats de verdoofde pup in rugligging op het beeldvormingsplatform met de poten bovenop de aluminiumfoliepads en bevestig met tape. Zorg ervoor dat het elektrische circuit is voltooid en dat het ECG wordt opgenomen.</li>
	<li>Verlaag de isofluraanafgifte tot 1,5% aangedreven door 100% zuurstof. Bevestig de uitgesneden vinger van de handschoen rond de neus van de pup met tape. Bevestig de diepte van de anesthesie door in de poten van de pup te knijpen.</li>
	<li>Leg een dikke laag voorbewarmde ultrasone gel op het bovenlichaam van de pup. Gebruik twee gaasrollen om de ultrasone gel op zijn plaats te houden (figuur 1D).</li>
	<li>Gebruik een verwarmingslamp om de normale lichaamstemperatuur van de pup op peil te houden (figuur 1E). OPMERKING: Een rectale sonde werd in het huidige onderzoek niet gebruikt om de lichaamstemperatuur te controleren vanwege de kleine omvang van de pup.</li>
</ol>2. Echocardiografische beeldacquisitie en -analyses
<ol><li>Transthoracale echocardiografie uitvoeren met behulp van een echocardiografie-instrument uitgerust met een lineaire array-transducer op 40 MHz voor B-modus en op 32 MHz voor Doppler (framesnelheid 233) (zie Tabel van materialen), volgens echocardiografieprotocollen voor volwassen muizen 7,8,9.</li>
	<li>Vermijd het plaatsen van overmatige druk op de borstholte van de pup bij het plaatsen van de echotransducer tijdens echocardiografische beeldacquisitie. OPMERKING: Vanwege het kleine formaat van de pup kan het gewicht van de transducer zelf leiden tot een veranderde hartfunctie of de dood.</li>
	<li>Leg het PLAX-beeld vast van het linkerventrikeluitstroomkanaal en het linkeratrium.<ol><li>Plaats de transducer in de houder, met het indexteken naar de rechterschouder van de pup.</li>
		<li>Laat de transducer zakken totdat deze in contact is met de gel en visualiseer het linkerventrikeluitstroomkanaal in B-modus (figuur 2A).</li>
		<li>Gebruik M-modus bij de aortablaadjes om de maximale diameter van het linkeratrium (LA) bij end-systole te meten (figuur 2B, tabel 1). Druk op de Cine Store-knop om de gegevens vast te leggen.</li>
	</ol></li>
	<li>Leg de PSAX-weergave van de linker ventrikel vast om de kamerafmetingen, wanddikte, aortastroom en longstroom te meten.<ol><li>Draai de transducer ~90° met de klok mee van de PLAX om de PSAX-weergave te verkrijgen.</li>
		<li>Plaats de sonde op het niveau van de papillaire spieren en gebruik de M-modus om de linkerventrikelinterne diameters (LVID), interventriculaire septumdikte (IVS) en PW te meten tijdens systole en diastole (figuur 3A, tabel 1). Druk op de Cine Store-knop om de gegevens vast te leggen.</li>
		<li>Bereken de RWT, een index van hypertrofie, met behulp van diastolische kamerafmetingen als volgt 3,10: (PW + IVS bij einddiastole) / (LVID bij einddiastole)</li>
		<li>Beweeg de transducer naar de basis van het hart en gebruik de kleur Doppler om de longslagader te visualiseren. Druk op PW Doppler om de pulmonale piekstroomsnelheid, pulmonale stroomprofielen, pulmonale ejectietijd (PET) en pulmonale versnellingstijd (PAT)11,12 (figuur 3B) te kwantificeren. Druk op de Cine Store-knop om de gegevens vast te leggen.</li>
		<li>Beweeg de transducer verder naar de basis en gebruik de kleurendoppler om de aortastroom te visualiseren (figuur 3C). Gebruik PW Doppler om de bloedstroom te visualiseren en de aorta-ejectietijd (AET) te meten. Druk op de Cine Store-knop om de gegevens vast te leggen.</li>
		<li>Bereken de Vcf (circ/sec)13,14, een indicator van de myocardiale prestaties, met behulp van LVID-einddiastole (LVIDd), LVID-eindsysteem (LVIDs) en AET als volgt (tabel 1): (LVIDd - LVIDs) / (LVIDd x AET)</li>
	</ol></li>
	<li>Leg het apicale uitzicht met vier kamers vast.<ol><li>Plaats het platform in de Trendelenburg-positie, kantel het naar links en pas de sonde aan om de vier kamers te visualiseren (figuur 4A).</li>
		<li>Gebruik kleur Doppler om de bloedstroom te visualiseren en PW Doppler aan de punt van de mitralisklepblaadjes in het midden van de mitralisklepopening om de mitralisstroom te registreren. Druk op de Cine Store om de gegevens vast te leggen.</li>
		<li>Bereken in deze weergave de volgende parameters 2,3,10 (figuur 4B en tabel 1):<ol><li>Bereken de E /A-ratio, wat de maximale snelheid van de bloedstroom in de vroege fase van diastole (E) is over de maximale snelheid van de bloedstroom in de late fase van diastole (A).</li>
			<li>Bepaal de E-golfvertragingstijd (DT), de tijd van piek E tot het einde van de vroege diastole.</li>
			<li>Bereken LV isovolumic relaxation time (IVRT), de tijd van aortaklepsluiting tot mitralisklepopening.</li>
			<li>Bereken LV isovolumic contractietijd (IVCT), dat is de tijd van mitralisklepsluiting tot aortaklepopening.</li>
		</ol></li>
		<li>Gebruik Tissue Doppler aan de septale kant van de mitralisklep annulus in een vierkamerweergave om de piek myocardiale ontspanningssnelheid in de vroege diastolische vulling (e') en late diastolische vulling (a) te meten, evenals de piek systolische myocardiale contractiesnelheid (s') (figuur 4C en tabel 1). Druk op de Cine Store-knop om de gegevens vast te leggen.</li>
	</ol></li>
	<li>Leg de gewijzigde PLAX-weergave vast om de linker voorste dalende kransslagader te onderzoeken.<ol><li>Gebruik een aangepaste PLAX-weergave15, waarbij u de transducer zijdelings beweegt en de straal naar de voorste kant kantelt (figuur 5A).</li>
		<li>Verplaats de sonde en gebruik de kleur Doppler om de oorsprong van de linker hoofdkransslagader (LCA) te visualiseren die uit de aorta wordt gegenereerd. Identificeer de LAD-slagader die uit de LCA wordt gegenereerd en loopt tussen de linkerventrikel-voorste wand en het rechterventrikeluitstroomkanaal16,17. Breng in deze positie PW Doppler aan om de LAD-stroom te meten (figuur 5B). Druk op de Cine Store-knop om de gegevens vast te leggen.</li>
		<li>Bereken de volgende LAD-kransslagaderstroomparameters (figuur 5C en tabel 2): piek coronaire stroomsnelheid (CFV), gemiddelde CFV en snelheid-tijdintegraal (VTI). OPMERKING: Al deze parameters worden gemeten bij een basale isofluraanconcentratie van 1,5% (baseline).</li>
		<li>Verhoog de isofluraanconcentratie tot 2,5% en wacht 5 minuten om een maximale stroom te bereiken (figuur 5C). Druk op de Cine Store-knop om de gegevens vast te leggen. Bereken CFR als de verhouding tussen diastolische piek-CFV bij maximale stroom en diastolische piek-CFV bij baseline 18,19,20 (tabel 2): CFR = diastolische piek CFV (2,5%) / diastolische piek CFV (1,5%)</li>
	</ol></li>
</ol>3. Monitoring en verzorging van dieren na beeldvorming
<ol><li>Na het voltooien van de echocardiografische beeldvorming, reinigt u de pup zorgvuldig en laat u hem ongeveer 2 minuten herstellen van de anesthesie.</li>
	<li>Voordat u de pup terugbrengt naar zijn kooi, smeert u de pup in met het beddengoed van de kooimoeder om afstoting of kannibalisatie te voorkomen.</li>
	<li>Observeer het gedrag van de moeder gedurende ongeveer 30 minuten na de procedure. Als agressief gedrag wordt waargenomen, euthanaseer de pup volgens de richtlijnen voor de dierprocedure.</li>
</ol>

<ol><li>Le, V. P., Wagenseil, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiographic+Characterization+of+Postnatal+Development+in+Mice+with+Reduced+Arterial+Elasticity%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Engineering+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Echocardiographic Characterization of Postnatal Development in Mice with Reduced Arterial Elasticity.</a> Cardiovascular Engineering and Technology. 3 (4), 424-438 (2012).</li>
<li>Nagueh, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+for+the+Evaluation+of+Left+Ventricular+Diastolic+Function+by+Echocardiography%3A+An+Update+from+the+American+Society+of+Echocardiography+and+the+European+Association+of+Cardiovascular+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%3A+Cardiovascular+Imaging%22%5BJournal%5D)">Recommendations for the Evaluation of Left Ventricular Diastolic Function by Echocardiography: An Update from the American Society of Echocardiography and the European Association of Cardiovascular Imaging.</a> European Heart Journal: Cardiovascular Imaging. 17 (12), 1321-1360 (2016).</li>
<li>Lang, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+for+cardiac+chamber+quantification+by+echocardiography+in+adults%3A+an+update+from+the+American+Society+of+Echocardiography+and+the+European+Association+of+Cardiovascular+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%3A+Cardiovascular+Imaging%22%5BJournal%5D)">Recommendations for cardiac chamber quantification by echocardiography in adults: an update from the American Society of Echocardiography and the European Association of Cardiovascular Imaging.</a> European Heart Journal: Cardiovascular Imaging. 16 (3), 233-270 (2015).</li>
<li>Chrysant, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+paradigm+in+the+treatment+of+the+cardiovascular+disease+continuum%3A+focus+on+prevention%5BTitle%5D)+AND+%22Hippokratia%22%5BJournal%5D)">A new paradigm in the treatment of the cardiovascular disease continuum: focus on prevention.</a> Hippokratia. 15 (1), 7-11 (2011).</li>
<li>Blom, J. N., Lu, X., Arnold, P., Feng, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+infarction+in+neonatal+mice%2C+a+model+of+cardiac+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Myocardial infarction in neonatal mice, a model of cardiac regeneration.</a> Journal of Visualized Experiments. (111), e54100(2016).</li>
<li>Mahmoud, A. I., Porrello, E. R., Kimura, W., Olson, E. N., Sadek, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+models+for+cardiac+regeneration+in+neonatal+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocol%22%5BJournal%5D)">Surgical models for cardiac regeneration in neonatal mice.</a> Nature Protocol. 9 (2), 305-311 (2014).</li>
<li>Chowdhury, S. A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modifications+of+sarcoplasmic+reticulum+function+prevent+progression+of+sarcomere-linked+hypertrophic+cardiomyopathy+despite+a+persistent+increase+in+myofilament+calcium+response%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Physiology%22%5BJournal%5D)">Modifications of sarcoplasmic reticulum function prevent progression of sarcomere-linked hypertrophic cardiomyopathy despite a persistent increase in myofilament calcium response.</a> Frontiers in Physiology. 11, 107(2020).</li>
<li>Batra, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deletion+of+P21-activated+kinase-1+induces+age-dependent+increased+visceral+adiposity+and+cardiac+dysfunction+in+female+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+and+Cellular+Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Deletion of P21-activated kinase-1 induces age-dependent increased visceral adiposity and cardiac dysfunction in female mice.</a> Molecular and Cellular Biochemistry. 476 (3), 1337-1349 (2021).</li>
<li>Capote, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((B-arrestin-2+signaling+is+important+to+preserve+cardiac+function+during+aging%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Physiology%22%5BJournal%5D)">B-arrestin-2 signaling is important to preserve cardiac function during aging.</a> Frontiers in Physiology. 12, 1302(2021).</li>
<li>Armstrong, W. F., Ryan, T., Feigenbaum, H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aArmstrong%2C+WF+%22Feigenbaum%27s+Echocardiography.+7th+ed%22">Feigenbaum's Echocardiography. 7th ed</a>. , Wolters Kluwer Health/Lippincott Williams & Wilkins. (2010).</li>
<li>Su, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+chronic+hypoxia+on+proximal+pulmonary+artery+wave+propagation+and+mechanical+properties+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology%3A+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Impact of chronic hypoxia on proximal pulmonary artery wave propagation and mechanical properties in rats.</a> American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 314 (6), 1264-1278 (2018).</li>
<li>Rudski, L. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+the+echocardiographic+assessment+of+the+right+heart+in+adults%3A+a+report+from+the+American+Society+of+Echocardiography+endorsed+by+the+European+Association+of+Echocardiography%2C+a+registered+branch+of+the+European+Society+of+Cardiology%2C+and+the+Canadian+Society+of+Echocardiography%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Society+of+Echocardiography%22%5BJournal%5D)">Guidelines for the echocardiographic assessment of the right heart in adults: a report from the American Society of Echocardiography endorsed by the European Association of Echocardiography, a registered branch of the European Society of Cardiology, and the Canadian Society of Echocardiography.</a> Journal of the American Society of Echocardiography. 23 (7), 685-713 (2010).</li>
<li>Wilson, J. R., Reichek, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiographic+indices+of+left+ventricular+function.+A+comparison%5BTitle%5D)+AND+%22Chest%22%5BJournal%5D)">Echocardiographic indices of left ventricular function. A comparison.</a> Chest. 76 (4), 441-447 (1979).</li>
<li>Stypmann, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiographic+assessment+of+global+left+ventricular+function+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Echocardiographic assessment of global left ventricular function in mice.</a> Lab Animal. 43 (2), 127-137 (2009).</li>
<li>Wikstrom, J., Gronros, J., Bergstrom, G., Gan, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+and+morphologic+imaging+of+coronary+atherosclerosis+in+living+mice+using+high-resolution+color+Doppler+echocardiography+and+ultrasound+biomicroscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Functional and morphologic imaging of coronary atherosclerosis in living mice using high-resolution color Doppler echocardiography and ultrasound biomicroscopy.</a> Journal of the American College of Cardiology. 46 (4), 720-727 (2005).</li>
<li>Douglas, P. S., Fiolkoski, J., Berko, B., Reichek, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiographic+visualization+of+coronary+artery+anatomy+in+the+adult%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Echocardiographic visualization of coronary artery anatomy in the adult.</a> Journal of the American College of Cardiology. 11 (3), 565-571 (1988).</li>
<li>Lambertz, H., Lethen, H., Tries, H. P., Kersting, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+assessment+of+coronary+flow+reserve+-+valuable+functional+information+in+cardiac+workflow%5BTitle%5D)+AND+%22Ultraschall+in+der+Medizin%22%5BJournal%5D)">Non-invasive assessment of coronary flow reserve - valuable functional information in cardiac workflow.</a> Ultraschall in der Medizin. 25 (1), 25-33 (2004).</li>
<li>Lenzarini, F., Di Lascio, N., Stea, F., Kusmic, C., Faita, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time+course+of+isoflurane-induced+vasodilation%3A+A+Doppler+ultrasound+study+of+the+left+coronary+artery+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Time course of isoflurane-induced vasodilation: A Doppler ultrasound study of the left coronary artery in mice.</a> Ultrasound in Medicine and Biology. 42 (4), 999-1009 (2016).</li>
<li>Gan, L. M., Wikstrom, J., Bergstrom, G., Wandt, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+imaging+of+coronary+arteries+in+living+mice+using+high-resolution+echocardiography%5BTitle%5D)+AND+%22Scandinavian+Cardiovascular+Journal%22%5BJournal%5D)">Non-invasive imaging of coronary arteries in living mice using high-resolution echocardiography.</a> Scandinavian Cardiovascular Journal. 38 (2), 121-126 (2004).</li>
<li>Gan, L. M., Wikstrom, J., Fritsche-Danielson, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+flow+reserve+from+mouse+to+man--from+mechanistic+understanding+to+future+interventions%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiovascular+Translational+Research%22%5BJournal%5D)">Coronary flow reserve from mouse to man--from mechanistic understanding to future interventions.</a> Journal of Cardiovascular Translational Research. 6 (5), 715-728 (2013).</li>
<li>Krzanowski, M., Bodzon, W., Dimitrow, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+of+all+three+coronary+arteries+by+transthoracic+echocardiography.+An+illustrated+guide%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Ultrasound%22%5BJournal%5D)">Imaging of all three coronary arteries by transthoracic echocardiography. An illustrated guide.</a> Cardiovascular Ultrasound. 1, 16(2003).</li>
<li>Constantinides, C., Mean, R., Janssen, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+isoflurane+anesthesia+on+the+cardiovascular+function+of+the+C57BL%2F6+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22ILAR+Journal%22%5BJournal%5D)">Effects of isoflurane anesthesia on the cardiovascular function of the C57BL/6 mouse.</a> ILAR Journal. 52 (3), 21-31 (2011).</li>
<li>Ha, T. W., Oh, B., Kang, J. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electrocardiogram+recordings+in+anesthetized+mice+using+lead+II%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Electrocardiogram recordings in anesthetized mice using lead II.</a> Journal of Visualized Experiments. (160), e61583(2020).</li>
<li>Chu, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+for+non-invasively+recording+electrocardiograms+in+conscious+mice%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Physiology%22%5BJournal%5D)">Method for non-invasively recording electrocardiograms in conscious mice.</a> BMC Physiology. 1, 6(2001).</li>
<li>Hartley, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+isoflurane+on+coronary+blood+flow+velocity+in+young%2C+old+and+ApoE%28-%2F-%29+mice+measured+by+Doppler+ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22Ultrasound+in+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Effects of isoflurane on coronary blood flow velocity in young, old and ApoE(-/-) mice measured by Doppler ultrasound.</a> Ultrasound in Medicine and Biology. 33 (4), 512-521 (2007).</li>
<li>You, J., Wu, J., Ge, J., Zou, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+between+adenosine+and+isoflurane+for+assessing+the+coronary+flow+reserve+in+mouse+models+of+left+ventricular+pressure+and+volume+overload%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology%3A+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Comparison between adenosine and isoflurane for assessing the coronary flow reserve in mouse models of left ventricular pressure and volume overload.</a> American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 303 (10), 1199-1207 (2012).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

In het tijdperk van de preventieve geneeskunde is een vroege beoordeling van veranderingen in de cardiovasculaire functie vereist om het begin van de ziekte vast te stellen en geschikte interventionele therapieën te ontwerpen. Muizen worden steeds vaker gebruikt als preklinische modellen in hartonderzoek en echocardiografische studies worden meestal uitgevoerd met jongvolwassen muizen. Om de rol van genetische veranderingen of farmacologische interventies in de vroege stadia van hartaandoeningen te bestuderen, moet echoc...

Het algemene doel van dit protocol is om cardiale morfologie, functie en kransslagaderstroom bij 7 dagen oude neonatale muispups te onderzoeken met behulp van echocardiografie. De redenering achter de ontwikkeling van deze techniek is het bepalen van vroege veranderingen in coronaire stroming en hartfunctie in muismodellen vanhartaandoeningen 1. De niet-invasieve aard van echocardiografie is voordelig omdat het onderzoekers in staat stelt om de cardiovasculaire functie onder fysiologische omstandigheden te beoordelen en onderzoekers een screeningsinstrument biedt voor de studie van gerichte therapieën voor de behandeling van hart- en vaatziekten 2,3. Traditioneel worden echocardiografische studies uitgevoerd met jongvolwassen muizen (4-6 weken); sommige muizenmodellen (d.w.z. genetisch gemodificeerde modellen) vertonen echter al pathologische veranderingen en hartdisfunctie op deze leeftijd. Daarom heeft cardiaal onderzoek met behulp van diermodellen zich voornamelijk gericht op therapeutische middelen die hartdisfunctie verbeteren of behandelen. Meer recent zijn de onderzoeksinspanningen daarentegen heroriënteerd om zich te concentreren op preventieve maatregelen en vroege interventies bij hartaandoeningen4.
Eerdere studies hebben het gebruik van echocardiografie beschreven om de hartfunctie te meten in modellen van myocardinfarct bij neonatale muizen 5,6; deze studies slaagden er echter niet in om de coronaire stroom te meten en, belangrijker nog, het niet registreren van een elektrocardiogram (ECG) en hartslag (HR) gegevens tijdens de procedure, hoogstwaarschijnlijk vanwege de kleine omvang van de ledematen van de pups, die de elektrodepads niet konden bereiken. We overwinnen dit probleem in dit protocol door aluminiumfolie aan de ledematen te bevestigen om ze in staat te stellen de elektrodepads te bereiken en een ECG-circuit te creëren. Bovendien beschrijft en karakteriseert dit protocol de kransslagaderstroom bij neonatale muizen.
Deze studie verkreeg B-mode en M-mode beelden in parasternale lange en korte asweergaven om structurele en functionele parameters te meten 2,3. De morfologische parameters omvatten linker atriale dimensies, linkerventrikel (LV) afmetingen, LV wanddikte, LV massa en relatieve wanddikte (RWT). De functionele parameters omvatten ejectiefractie (EF), fractionele verkorting (FS), cardiale output (CO) en snelheid van circumferentiële vezelverkorting (Vcf). Pulse wave (PW) Doppler werd gebruikt om de aortastroom in de parasternale korte-as (PSAX) weergave te meten en om mitralisbloedstroom te meten in de apicale vierkamerweergave. De apicale vierkamerweergave werd ook gebruikt om Tissue Doppler uit te voeren op het septumgedeelte van de mitralisklep annulus. Coronaire stroming bij de linker anterieur dalende (LAD) kransslagader werd ook onderzocht met behulp van een gemodificeerde parasternale lange-as (PLAX) weergave. Coronaire stroomreserve (CFR) werd berekend na een stressuitdaging geïnduceerd door verhoogde isofluraanconcentratie.
Het huidige protocol toont aan dat echocardiografische studies op zeer jonge leeftijd kunnen worden uitgevoerd bij neonatale muizen, waardoor vroege herkenning van cardiale pathologieën en longitudinale follow-upstudies van LV-hemodynamiek en coronaire flowparameters in verschillende muizenmodellen mogelijk zijn. Deze techniek kan worden gebruikt om de rol van genetische veranderingen of farmacologische interventies in de hartfunctie op vroege postnatale leeftijden te bestuderen. Bovendien biedt het protocol een waardevol hulpmiddel voor het bepalen van het begin van hartaandoeningen vroeg in het leven, waardoor onderzoekers de moleculaire mechanismen kunnen ontgrendelen die ten grondslag liggen aan de beginstadia van hartaandoeningen in verschillende muismodellen.

<table><tbody><tr><td>Depilating agent</td><td>Nair Hair Remover</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Electrode gel</td><td>Parker Laboratories</td><td>15-60</td><td></td></tr><tr><td>High Frequency Ultrasound</td><td>FUJIFILM VisualSonics, Inc.</td><td>Vevo 2100</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>MedVet</td><td>RXISO-250</td><td></td></tr><tr><td>Linear array high frequency transducer</td><td>FUJIFILM VisualSonics, Inc.</td><td>MS550D</td><td></td></tr><tr><td>Mice breeding pair</td><td>Charles River Laboratories</td><td>FVB/N</td><td>Strain Code 207</td></tr><tr><td>Ultrasound Gel</td><td>Parker Laboratories</td><td>11-08</td><td></td></tr><tr><td>Vevo Lab Software</td><td>FUJIFILM VisualSonics, Inc.</td><td></td><td>Verison 5.5.1</td></tr></tbody></table>

echocardiografische karakterisering van linkerventrikelstructuur, functie en coronaire stroom bij pasgeboren muizen

Echocardiographic Characterization of Left Ventricular Structure, Function, and Coronary Flow in Neonate Mice

Echocardiografie is een niet-invasieve procedure die de evaluatie van structurele en functionele parameters in diermodellen van hart- en vaatziekten mogelijk maakt en wordt gebruikt om de impact van mogelijke behandelingen in preklinische studies te beoordelen. Echocardiografische studies worden meestal uitgevoerd bij jongvolwassen muizen (d.w.z. 4-6 weken oud). De evaluatie van de vroege neonatale cardiovasculaire functie wordt meestal niet uitgevoerd vanwege de kleine omvang van de muispups en de bijbehorende technische problemen. Een van de belangrijkste uitdagingen is dat de korte lengte van de ledematen van de pups voorkomt dat ze de elektroden in het echocardiografieplatform bereiken. Lichaamstemperatuur is de andere uitdaging, omdat pups erg gevoelig zijn voor temperatuurveranderingen. Daarom is het belangrijk om een praktische gids op te stellen voor het uitvoeren van echocardiografische studies bij kleine muispups om onderzoekers te helpen vroege pathologische veranderingen te detecteren en de progressie van hart- en vaatziekten in de loop van de tijd te bestuderen. Het huidige werk beschrijft een protocol voor het uitvoeren van echocardiografie bij muizenpups op de vroege leeftijd van 7 dagen oud. De echocardiografische karakterisering van cardiale morfologie, functie en coronaire stroom bij neonatale muizen wordt ook beschreven.

Deze studie gebruikte 7-dagen oude muispups om cardiale morfologie, functie en kransslagaderstroom te karakteriseren. Het hanteren van de muis moet met zorg gebeuren en het muisplatform moet worden aangepast aan de kleine omvang van de pups, zoals beschreven in figuur 1. Een representatieve afbeelding van de PLAX-weergave wordt weergegeven in figuur 2A en aanvullende video 1. In deze weergave werd de M-modus gebruikt om de diameter van het linke...

Het huidige protocol beschrijft de echocardiografische beoordeling van de morfologie, functie en coronaire bloedstroom van de linkerventrikel bij 7-dagen oude pasgeboren muizen.

Echocardiografische karakterisering van linkerventrikelstructuur, functie en coronaire stroom bij pasgeboren muizen

Echocardiography is a non-invasive procedure that enables the evaluation of structural and functional parameters in animal models of cardiovascular ...

Dit protocol kan worden gebruikt om de rol van genetische veranderingen of farmacologische interventies in de hartfunctie en coronaire stroming op vroege postnatale leeftijden te bestuderen. Het belangrijkste voordeel van deze techniek is de vroege herkenning van cardiopathologieën en longitudinale follow-upstudies in linkerventrikelhemodynamiek en coronaire flowparameters in verschillende muizenmodellen. Echocardiografische studies bij neonatale muizen zijn technisch uitdagend.Dit protocol is ontworpen om het vroege begin van hart- en vaatziekten bij neonatale muizen te bestuderen, waardoor onderzoekers de juiste therapeutische maatregelen kunnen ontwerpen. Begin met het plaatsen van de ECG-gel op de verwarmde platformelektrodepads. Plaats aluminiumfoliestrips bovenop de elektrodepads om het elektrodebereik uit te breiden en bevestig ze met tape.Plaats vervolgens de ECG-gel bovenop de aluminium strips. Zorg ervoor dat de gel onder de aluminiumfolie strips niet uitdroogt tijdens de procedure. Als dat gebeurt, voeg dan meer gel toe om de geleidbaarheid te behouden.Plaats de verdoofde pup in rugligging op het beeldvormingsplatform en bevestig de uitgesneden handschoenvinger rond de neus van de pup. Plaats de poten bovenop de aluminiumfoliepads en zet ze vast met tape. Zorg ervoor dat het elektrische circuit is voltooid en dat het ECG wordt opgenomen.Gebruik twee gaasrollen om de ultrasone gel op zijn plaats te houden. Leg een dikke laag voorverwarmde ultrasone gel op het bovenlichaam van de pup. Gebruik een verwarmingslamp om de normale lichaamstemperatuur van de pup op peil te houden.Voer transthoracale echocardiografie uit met behulp van een echocardiografie-instrument uitgerust met een lineaire array-transducer op 40 megahertz voor B-Mode en op 32 megahertz voor Doppler volgens echocardiografieprotocollen voor volwassen muizen. Plaats de transducer in de houder met het indexteken in de richting van de rechterschouder van de pup. Laat de transducer zakken totdat deze in contact is met de gel en visualiseer het linkerventrikeluitstroomkanaal in B-Mode.Vermijd het plaatsen van overmatige druk op de borstholte van de pup bij het plaatsen van de echotransducer tijdens echocardiografische beeldacquisitie. Leg het parasternale lange asbeeld van de linker ventrikel, het linker ventrikeluitstroomkanaal en het linkeratrium vast. Gebruik M-Mode bij de aortablaadjes om de maximale diameter van het linker atrium bij N-systole te meten.Leg de gegevens vast door op de knop Cine Store te drukken. Draai de transducer ongeveer 90 graden met de klok mee van de parasternale lange as om de parasternale korte asweergave te verkrijgen. Leg het parasternale korte asbeeld van de linker ventrikel vast om de kamerafmetingen, wanddikte, aortastroom en longstroom te meten.Plaats de sonde ter hoogte van de papillaire spieren en gebruik M-Mode om de linkerventrikelinterne diameters en wanddikte te meten tijdens systole en diastole. Leg de gegevens vast door op de knop Cine Store te drukken. Beweeg de transducer naar de basis van het hart en gebruik de Color Doppler om de longslagader te visualiseren.Druk op Pulse Wave Doppler om de pulmonale piekstroomsnelheid, pulmonale stroomprofielen, pulmonale ejectietijd en pulmonale versnellingstijd te kwantificeren. Leg de gegevens vast door op de knop Cine Store te drukken. Verplaats de transducer verder naar de basis en gebruik Color Doppler om de aortastroom te visualiseren.Gebruik Pulse Wave Doppler om de bloedstroom te visualiseren en de aorta-uitwerptijd te meten. Leg de gegevens vast door op de knop Cine Store te drukken. Om het apicale uitzicht met vier kamers vast te leggen, plaatst u het platform in de Trendelenburg-positie, kantelt u het naar links en past u de sonde aan om de vier kamers te visualiseren.Gebruik Color Doppler om de bloedstroom te visualiseren en Pulse Wave Doppler aan de punt van de mitralisklepblaadjes in het midden van de mitralisklepopening om de mitralisstroom te registreren. Leg de gegevens vast door op de knop Cine Store te drukken. Gebruik Tissue Doppler aan de septumzijde van de mitralisklep annulus in een weergave met vier kamers om de piek myocardiale ontspanningssnelheid in de vroege diastolische vulling en late diastolische vulling te meten, evenals de piek systolische myocardiale contractiesnelheid.Leg de gegevens vast door op de knop Cine Store te drukken. Leg de gewijzigde parasternale lange asweergave vast om de linker voorste dalende kransslagader te onderzoeken. Gebruik een aangepaste parasternale lange asweergave en verplaats de transducer zijdelings.Verplaats de sonde en gebruik Color Doppler om de oorsprong van de linker hoofdkransslagader te visualiseren die uit de aorta ontstaat. Identificeer de linker anterieure dalende slagader die ontstaat uit de linker hoofdkransslagader en loopt tussen de linker ventriculaire anterieure wand en het rechter ventriculaire uitstroomkanaal. Meet in deze positie de linker voorste dalende kransslagaderstroom door op Pulse Wave Doppler te drukken.Leg de gegevens vast door op de knop Cine Store te drukken. Verhoog de isofluraanconcentratie tot 2,5% en wacht vijf minuten om een maximale stroom te bereiken. Leg de gegevens vast door op de knop Cine Store te drukken.In de parasternale lange asweergave werd M-Mode gebruikt om de diameter van het linker atrium te meten. De parasternale korte asweergave werd gebruikt om de afmetingen van de linkerventrikelkamer en wanddikte, pulmonale stroom en aortastroom te meten. De apicale vierkamerweergave werd gebruikt om de bloedstroomsnelheden over de mitralisklep te onderzoeken, evenals de myocardiale ontspannings- en contractiesnelheden bij de mitralisklep annulus.De gemodificeerde parasternale lange asweergave werd gebruikt om de linker anterieur dalende coronaire stromingsparameters te onderzoeken. De verhoogde waarden van piek coronaire stroomsnelheid, gemiddelde coronaire stroomsnelheid en snelheid / tijdintegraal vijf minuten na isofluraantoename bevestigden de verwachte respons op hyperemie bij de neonatale muizen. Vanwege het kleine formaat van de pups is het belangrijk om hun normale lichaamstemperatuur te handhaven en aluminiumfoliestrips aan hun ledematen te bevestigen om de elektropads te bereiken en een ECG-circuit te creëren.

echocardiographic-characterization-left-ventricular-structure

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Het meten van linker ventrikel druk (LV) in embryonale en neonatale muizen wordt beschreven. De druk wordt gemeten door het inbrengen van een naald is aangesloten op een met vloeistof gevulde transducer in de LV onder echografische begeleiding. Er moet worden normaal hartfunctie handhaven tijdens de experimentele protocol.

Het meten van linker ventrikel druk in de late embryonale en neonatale muizen

This video describes a protocol to perform echocardiography on a laboratory mouse.

Mouse Echocardiography: A Non-invasive Technique to Assess Cardiac Morphology

Dit artikel geeft een protocol voor de echocardiografische evaluatie van rechter ventriculaire omvang en pulmonale hypertensie bij muizen. Toepassingen zijn onder andere fenotype vastberadenheid en seriële beoordeling in transgene en toxine-geïnduceerde muismodellen van cardiomyopathie en pulmonale vasculaire ziekte.

Echocardiografische Beoordeling van de rechter hart in Muizen

Rechterventrikel (RV) disfunctie is cruciaal voor het ontstaan ​​van hart-en vaatziekten, maar beperkt voorhanden zijn voor de evaluatie ervan. Recente ontwikkelingen in de echografie zorgen voor een niet-invasieve en accurate optie voor longitudinale RV studie. Hierin hebben we een stap-voor-stap echocardiografische onder toepassing van een muizenmodel van drukoverbelasting detail.

Beoordeling van de rechter ventrikel structuur en functie in een muismodel van longslagader Vernauwing door Transthoracale Echocardiografie

Dit protocol geeft een gedetailleerde beschrijving van de echocardiografische benadering voor uitgebreide fenotypering van de hart- en hartklepfunctie bij muizen.

Echocardiografische benaderingen en protocollen voor Comprehensive Fenotypische karakterisering van Valvular hart-en vaatziekten in Muizen

Het volgende protocol beschrijft de methodiek voor de verwerving en analyse van echocardiografische beelden worden gebruikt om de linker atrium Volume (LAV), Aorta (Ao) diameter, en longslagader (PA) diameter bij muizen te verkrijgen. Deze techniek is een niet-invasieve, niet-eindstandige procedure dat de beoordeling van de cardiopulmonaire functie kan.

Murine echocardiografie van de linkerboezem, Aorta, en longslagader

Echocardiographic onderzoek wordt vaak gebruikt in muizen. Dure high-resolution echografie apparaten zijn ontwikkeld voor dit doel. Dit protocol beschrijft een betaalbare echocardiographic procedure gecombineerd met histologische Morfometrische analyses om te bepalen van cardiale morfologie.

Echocardiographic en histologisch onderzoek van cardiale morfologie in de muis

Hoge-frequentie echografie beeldvorming van de foetale muis kan imaging resolutie is verbeterd en nauwkeurige niet-invasieve karakterisering van cardiale ontwikkeling en structurele gebreken. Het protocol hierin geschetst is ontworpen om uit te voeren real-time foetale muizen echocardiografie in vivo.

Foetale muis cardiovasculaire Imaging met behulp van een systeem van hoge-frequentie echografie (30 / 45MHZ)

Hier beschrijven en vergelijken we twee posities voor het verkrijgen van de apicale vier kamer weergave in muizen. Deze posities maken de kwantificering van de rechter ventriculaire functie mogelijk, bieden vergelijkbare resultaten en kunnen door elkaar worden gebruikt.

ECHO cardiografische meting van rechter ventriculaire diastolische parameters in muis

Dit artikel beschrijft de diagnostische methoden voor congenitale hartziekten (CHD) met behulp van foetale echocardiografie, obductie en episcopische fluorescentiebeeldopname (EFIC) met behulp van episcopische confocale microscopie (ECM) gevolgd door driedimensionale (3D) reconstructie.

Een pijplijn om structurele hartafwijkingen in de foetale muis te karakteriseren

Leer echocardiografische beoordeling van linkerventrikelstructuur, functie en coronairbloedstroom bij pasgeboren muizen. Deze methode ondersteunt vroegtijdige detectie van cardiovasculaire aandoeningen en longitudinaal onderzoek.

Echocardiografische karakterisering van linkerventrikelstructuur, functie en coronaire stroom bij pasgeboren muizen

Meer video's verkennen