Name: Een heterotopisch muismodel voor het bestuderen van larynxtransplantatie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-01-13T12:30:00.000+00:00
Duration: 14 min 15 s
Description: Leer de microchirurgische stappen voor heterotopische larynxtransplantatie bij muizen. Dit kosteneffectieve model maakt eenvoudige immunologische studies mogelijk voor transplantatieonderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

We willen Randall Raish bedanken voor zijn uitstekende hulp bij videografie en bewerking.

Dit onderzoek is uitgevoerd in overeenstemming met de Mayo Clinic Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC). BalbC-muizen (10-12 weken oud) werden gebruikt als donoren en C57 / BL6-muizen (10-12 weken oud) werden gebruikt als ontvangers omdat hun belangrijkste histocompatibiliteitscomplexen, respectievelijk H-2Db en H-2Kb, immunologisch onverenigbaar zijn, en daarom kan de immuunrespons op het transplantaat verder worden bestudeerd. Alle instrumenten die tijdens de operatie werden gebruikt, werden gesteriliseerd (zie aanvullende figuur S1 en aanvullende figuur S2) en het chirurgische veld werd steriel gehouden gedurende het hele protocol volgens de IACUC-instructies.
1. Donorchirurgie en verkrijging van transplantaten
<ol><li>Injecteer de donor met buprenorfine met verlengde afgifte (3,25 mg/kg lichaamsgewicht subcutaan) 30 minuten voordat de procedure wordt gestart. Plaats de muis in de anesthesiedoos van knaagdieren voor anesthesie-inductie bij 3% isofluraan geleverd met 1 L/min O2-stroom . Nadat het dier volledig is verdoofd, brengt u de muis over naar het scheergebied en dient u 1,5% isofluraan toe met een 1 L/min O2-stroom voor onderhoud van de anesthesie. Bevestig de diepte van de anesthesie met een teenknijper.</li>
	<li>Scheer de borst en nek van de muis tot aan de kaaklijn en breng ontharingscrème aan. Veeg na 30 s de crème af met een steriel gaasje bevochtigd met water en breng de muis over naar het operatiegebied.</li>
	<li>Breng oogsmeermiddel aan op de ogen van de muis. Plaats de muis op een gedrapeerd extra verwarmingskussen om de juiste lichaamstemperatuur te garanderen.</li>
	<li>Immobiliseer de muis, bereid het chirurgische gebied driemaal voor met povidonjodium en alcohol en drapeer vervolgens de muis. OPMERKING: Controleer de diepte van de anesthesie door een teenknufje en handhaaf de anesthesie op 1,5% isofluraan en 1 L / min O2 stroom via een gezichtsmasker gedurende de hele procedure.</li>
	<li>Maak een kleine horizontale incisie net superieur aan de suprasternale inkeping. Gebruik een fijne schaar om de huid bilateraal via die incisie tot aan de onderkaak te verheffen. Snijd een trapeziumvormig huidsegment weg dat resulteert in blootstelling van de bilaterale speekselklieren, sternomastoïde spieren, digastrische spieren en het superieure aspect van het borstbeen (figuur 2A).</li>
	<li>Snijd de bilaterale speekselklieren weg met behulp van cauterie op het superieure deel waar een kleine ader die door de klier reist wordt gevisualiseerd (figuur 2A). OPMERKING: Als er niet voor wordt gezorgd dat het vat dichtschroeit voordat de klier wordt verwijderd, kan bij deze stap een aanzienlijke bloeding optreden.</li>
	<li>Trek de lymfoïde en vetweefsels zijdelings in om de sternomastoïde en riemspieren bloot te leggen. Ontleed de bilaterale sternomastoïde spieren uit de omliggende weefsels en trek ze zijdelings in met behulp van retractors. OPMERKING: Deze manoeuvre zal het LTE-complex volledig blootstellen met riemspieren en een comfortabele werkruimte bieden voor dissectie van de halsslagaders (figuur 2B).</li>
	<li>Maak een middenlijnincisie tussen de riemspieren en snijd ze bilateraal weg, zorg ervoor dat de onderliggende schildklier niet wordt beschadigd en laat deze op het LTE-complex achter. OPMERKING: Na deze stap moeten de bilaterale halsslagaders zichtbaar zijn (figuur 2C).</li>
	<li>Ontleed de gemeenschappelijke halsslagaders inferieur tot het niveau van het sleutelbeen en tot het niveau van de halsslagader bifurcatie superieur. Ontleed de nervus vagus en de interne halsader uit de halsslagaders. Neem ze niet op in het verkregen transplantaat. OPMERKING: De superieure schildklierslagader kan net superieur worden gezien aan de bifurcatie die mediaal reist. Laat de dunne fascia rond dit vat intact en probeer het niet omtrek te ontleden. Dit vat levert de bloedtoevoer naar het LTE-complex en zal dienen als de pedikel na transplantatie. Behoud van dit schip is van het grootste belang.</li>
	<li>Ontleed de interne en externe halsslagaders ver genoeg om te kunnen ligateeren en verdelen. Als er problemen zijn met de visualisatie van de bloedvaten, gebruik dan een apart retractor om de digastrische spieren zijdelings in te trekken. OPMERKING: Vermijd het ontleden van de externe halsslagader dichter bij de bifurcatie om schade aan de superieure schildklierslagader te voorkomen. Bij deze stap kan de occipitale slagader, die zich vertakt van de externe halsslagader en parallel aan de interne halsslagader volgt, worden aangetroffen en moet niet worden verward met de interne halsslagader, die groter is en dieper wordt gevonden (figuur 2D).</li>
	<li>8-0 gebruiken nylon hechtingen, ligate de interne halsslagaders 2 tot 3 mm superieur aan de halsslagader bifurcatie. Ligaat de externe halsslagaders ten minste 3 mm superieur aan het vertakkingspunt van de superieure schildklierslagader. OPMERKING: Na deze ligaties zal het LTE-complex via de superieure schildklierslagaders naar de bilaterale halsslagaders worden gepromoveerd.</li>
	<li>Ligaat de gemeenschappelijke halsslagaders ter hoogte van het borstbeen en snijd alle ligatievaten bilateraal door. Houd de vasculaire pedikels bovenop het LTE-complex om onbedoelde schade tijdens verdere dissectie te voorkomen. Om gaslekkage of onbedoeld verlies van anesthesie te voorkomen, moet u ervoor zorgen dat het dier is verlopen voordat u luchtwegsneden maakt.</li>
	<li>Verdeel de infrahyoïde spieren ter hoogte van het tongbeen. Creëer een anterieure faryngotomie die net inferieur is aan het tongbeen. Draag de incisie naar de voorwervel fascia om het LTE-complex superieur te bevrijden.</li>
	<li>Transect de luchtpijp onder de vijfde tracheale ring en draag de incisie door de slokdarm naar de prevertebrale fascia om het LTE-complex inferieur te bevrijden. Bevrijd de luchtpijp en slokdarm van de onderliggende prevertebrale fascia van een inferieure naar superieure richting. OPMERKING: Houd de vasculaire pedikels bovenop het LTE-complex om onbedoelde schade tijdens verdere dissectie te voorkomen.</li>
	<li>Creëer een anterieure faryngotomie die net inferieur is aan het tongbeen. Draag de incisie naar de voorwervel fascia om het LTE-complex superieur te bevrijden. Verdeel eventuele resterende lymfoïde of bindweefselaanhechtingen tussen het LTE-complex en het omliggende weefsel. Verwijder het transplantaat. OPMERKING: Het transplantaat bevat het strottenhoofd, de luchtpijp, de schildklier, de bijschildklieren, de slokdarm en de larynxspieren als een samengestelde eenheid (figuur 2E).</li>
</ol>2. Entvoorbereiding
<ol><li>Plaats het verkregen transplantaat in een steriele petrischaal en was het met een normale zoutoplossing om eventuele bloedstolsels te verwijderen. Melk met behulp van een microtang voorzichtig het bloed en de stolsels uit de bilaterale halsslagaders. Verwijd de bilaterale halsslagaders met behulp van 1 mm microdilatoren.</li>
	<li>Injecteer met behulp van een naald met een stompe punt van 30 G ongeveer 2 ml gehepariniseerde zoutoplossing in elke halsslagader om het transplantaat te spoelen. OPMERKING: Bloed en zoutoplossing kunnen worden gezien spoelen uit de contralaterale halsslagader en kleine vrije vaatuiteinden, die intacte superieure schildklierslagaders bevestigen.</li>
	<li>Snijd de adventitia weg van de arteriële uiteinden, zodat ze schone randen hebben voor anastomose. OPMERKING: Het transplantaat kan worden achtergelaten in heparinized zoutoplossing en een korte pauze kan tot 3 uur worden genomen voordat het in de ontvanger wordt getransplanteerd9.</li>
</ol>3. Operatie van de ontvanger en anastomose van de bloedvaten
<ol><li>Bereid de ontvangende muis voor op dezelfde manier als beschreven voor de donor na de inductie-, scheer- en chirurgische voorbereidingsstappen van de anesthesie. Injecteer de ontvangende muis met analgeticum met verlengde afgifte subcutaan 30 minuten voor aanvang van de operatie.</li>
	<li>Maak met behulp van een scalpel een middenlijnhalsincisie die zich uitstrekt van de kaaklijn superieur tot het borstbeen inferieur. Til de huid aan de linkerkant op en trek deze zijdelings in.</li>
	<li>Snijd de linker speekselklier weg en dichtschroei de superieure vaten zoals eerder beschreven. Snijd het vet- en lymfoïde weefsel weg door alle zichtbare vaten met cautery bij lage temperatuur te delen, waarbij ervoor wordt gezorgd dat de onderliggende externe halsader niet wordt beschadigd (figuur 3A).</li>
	<li>Ontleed de uitwendige halsader omtrek. Gebruik ten minste 5 mm vrije lengte van het vat voor anastomose. Gebruik cautery bij lage temperatuur of ligaat en verdeel relatief grote aderen die zich vertakken van de halsader.</li>
	<li>Ontleed de sternomastoïde spier en trek deze zijdelings in. Houd de ontlede ader beschermd achter de spier om direct contact met het oprolmechanisme te voorkomen.</li>
	<li>Snijd de linkerbandspieren weg om toegang te krijgen tot de ontvanger halsslagader. Ontleed de gemeenschappelijke halsslagader van het sleutelbeen inferieur tot aan de halsslagader bifurcatie superieur (figuur 3B).</li>
	<li>Plaats het achtergrondmateriaal onder de externe halsader en breng de dubbele V3-vatklemmen aan.</li>
	<li>Plaats een 10-0 nylon hechtdraad door de voorste wand van de externe halsader op de plaats van de gewenste venotomie en gebruik deze hechting om het vat anterieur te trekken en te tenten.</li>
	<li>Snijd op de hechtdraad met microscissors net diep genoeg om de juiste grootte single-spleet venotomie te creëren en ervoor te zorgen dat de snede volledig door de veneuze wand is.</li>
	<li>Spoel met een naald met een stompe punt van 30 G de binnenkant van de ader met gehepariniseerde zoutoplossing.</li>
	<li>Plaats het LTE-complex van de donor tussen de linker halsslagader van de ontvanger en de linker externe halsader. Lijn het vrije uiteinde van de linker halsslagader van de donor uit naar de linker jugulaire ader van de ontvanger en beschuin de uiteinden van de vaten met een scherpe schaar.</li>
	<li>Met behulp van vier 10-0 nylon onderbroken hechtingen, anastomose de donor verliet halsslagader en ontvanger verliet externe halsader op een end-to-side manier.</li>
	<li>Schuif het achtergrondmateriaal onder de gemeenschappelijke halsslagader van de ontvanger en plaats de dubbele benaderende A3-vatklemmen op de gemeenschappelijke halsslagader van de ontvanger. Maak een arteriotomie op dezelfde manier als de venotomie. OPMERKING: Zorg ervoor dat de arteriotomie even groot is als het lumen van de donorslagader. Als het te groot is, zal overvloedige bloeding optreden nadat de klemmen zijn verwijderd. Als het te klein is, wordt de bloedtoevoer naar het transplantaat belemmerd.</li>
	<li>Anastomoseer de rechter halsslagader van de donor naar de linker halsslagader van de ontvanger op een end-to-side manier met behulp van zes 10-0 nylon onderbroken hechtingen. OPMERKING: De juiste microvasculaire techniek moet worden gerespecteerd in de hele vaatanastomose. Het passeren van de achterwand resulteert in een aanzienlijk vernauwde bloedstroom, waardoor de overleving van het transplantaat in gevaar komt. Vanwege het kleine formaat van de vaten is het erg moeilijk om de hechtingen opnieuw te maken.</li>
	<li>Verwijder de klemmen aan de veneuze kant. Als er bloedingen optreden, oefen dan zachte druk uit met katoenen tips.</li>
	<li>Verwijder de klemmen op de slagader en oefen onmiddellijk zachte druk uit met katoenen uiteinden. OPMERKING: Er wordt enige bloeding verwacht bij deze stap, die meestal stopt na 1 minuut met zachte druk.</li>
	<li>Controleer de integriteit van de bloedstroom in de slagader en de ader. OPMERKING: Met intacte arteriële stroom wordt meestal pulsatie van de donorslagader gezien en verandert de donor schildklier van zijn gespoelde transparante kleur terug naar zijn oorspronkelijke roodachtige kleur. Rode kleuring van de kleine vaten op het LTE-complex kan ook worden waargenomen.</li>
	<li>Irrigeer het chirurgische veld met gehepariniseerde zoutoplossing en sluit de huidincisie met een 5-0 monofilament hechting op een lopende manier. Breng antibiotische zalf of een huidlijm aan op de incisie.</li>
	<li>Injecteer 1 ml warme zoutoplossing subcutaan om rekening te houden met vochtverlies tijdens de operatie.</li>
	<li>Stop de anesthesie en breng de muis over naar een herstelkooi. Observeer de muis op een verwarmingskussen totdat deze volledig wakker is om onderkoeling te voorkomen.</li>
</ol>

<ol><li>Strome, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laryngeal+transplantation+and+40-month+follow-up%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Laryngeal transplantation and 40-month follow-up.</a> The New England Journal of Medicine. 344 (22), 1676-1679 (2001).</li>
<li>Hilgers, F. J. M., Ackerstaff, A. H., Aaronson, N. K., Schouwenburg, P. F., Zandwijk, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physical+and+psychosocial+consequences+of+total+laryngectomy%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Otolaryngology%22%5BJournal%5D)">Physical and psychosocial consequences of total laryngectomy.</a> Clinical Otolaryngology. 15 (5), 421-425 (1990).</li>
<li>Heyes, R., Iarocci, A., Tchoukalova, Y., Lott, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunomodulatory+role+of+mesenchymal+stem+cell+therapy+in+vascularized+composite+allotransplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Immunomodulatory role of mesenchymal stem cell therapy in vascularized composite allotransplantation.</a> Journal of Transplantation. 2016, (2016).</li>
<li>Kluyskens, P., Ringoir, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Follow-up+of+a+human+larynx+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Laryngoscope%22%5BJournal%5D)">Follow-up of a human larynx transplantation.</a> Laryngoscope. 80 (8), 1244-1250 (1970).</li>
<li>Krishnan, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+current+status+of+human+laryngeal+transplantation+in+2017%3A+A+state+of+the+field+review%5BTitle%5D)+AND+%22Laryngoscope%22%5BJournal%5D)">The current status of human laryngeal transplantation in 2017: A state of the field review.</a> Laryngoscope. 127 (8), 1861-1868 (2017).</li>
<li>Strome, S., Sloman-Moll, E., Wu, J., Samonte, B. R., Strome, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+model+for+a+vascularized+laryngeal+allograft%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Otology%2C+Rhinology+%26+Laryngology%22%5BJournal%5D)">Rat model for a vascularized laryngeal allograft.</a> Annals of Otology, Rhinology & Laryngology. 101 (11), 950-953 (1992).</li>
<li>Lorenz, R. R., Dan, O., Nelson, M., Fritz, M. A., Strome, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+laryngeal+transplant+model%3A+technical+advancements+and+a+redefined+rejection+grading+system%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Otology%2C+Rhinology+%26+Laryngology%22%5BJournal%5D)">Rat laryngeal transplant model: technical advancements and a redefined rejection grading system.</a> Annals of Otology, Rhinology & Laryngology. 111 (12), 1120-1127 (2002).</li>
<li>Shipchandler, T. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+mouse+model+for+studying+laryngeal+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Otology%2C+Rhinology+%26+Laryngology%22%5BJournal%5D)">New mouse model for studying laryngeal transplantation.</a> Annals of Otology, Rhinology & Laryngology. 118 (6), 465-468 (2009).</li>
<li>Strome, M., Wu, J., Strome, S., Brodsky, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+preservation+techniques+in+a+vascularized+rat+laryngeal+transplant+model%5BTitle%5D)+AND+%22The+Laryngoscope%22%5BJournal%5D)">A comparison of preservation techniques in a vascularized rat laryngeal transplant model.</a> The Laryngoscope. 104 (6), 666-668 (1994).</li>
<li>Nocini, R., Molteni, G., Mattiuzzi, C., Lippi, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Updates+on+larynx+cancer+epidemiology%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Updates on larynx cancer epidemiology.</a> Chinese Journal of Cancer Research. 32 (1), 18-25 (2020).</li>
<li>Strome, S., Sloman-Moll, E., Wu, J., Samonte, B. R., Strome, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+model+for+a+vascularized+laryngeal+allograft%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Otology%2C+Rhinology+%26+Laryngology%22%5BJournal%5D)">Rat model for a vascularized laryngeal allograft.</a> Annals of Otology, Rhinology & Laryngology. 101 (11), (1992).</li>
<li>Work, W. P., Boles, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Larynx%3A+Replantation+in+the+dog%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Otolaryngology-Head+and+Neck+Surgery%22%5BJournal%5D)">Larynx: Replantation in the dog.</a> Archives of Otolaryngology-Head and Neck Surgery. 82 (4), 401-402 (1965).</li>
<li>Birchall, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Model+for+experimental+revascularized+laryngeal+allotransplantation%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Model for experimental revascularized laryngeal allotransplantation.</a> British Journal of Surgery. 89 (11), 1470-1475 (2002).</li>
<li>Nakai, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+model+of+laryngeal+transplantation+with+normal+circulation+maintained+by+combination+with+the+tongue%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Rat model of laryngeal transplantation with normal circulation maintained by combination with the tongue.</a> Microsurgery. 23 (2), 135-140 (2003).</li>
<li>Lott, D. G., Dan, O., Lu, L., Strome, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+laryngeal+allograft+survival+using+low-dose+everolimus%5BTitle%5D)+AND+%22Otolaryngology-Head+and+Neck+Surgery%22%5BJournal%5D)">Long-term laryngeal allograft survival using low-dose everolimus.</a> Otolaryngology-Head and Neck Surgery. 142 (1), 72-78 (2010).</li>
<li>Lott, D. G., Russell, J. O., Khariwala, S. S., Dan, O., Strome, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ten-month+laryngeal+allograft+survival+with+use+of+pulsed+everolimus+and+anti-%CE%B1%CE%B2+T-cell+receptor+antibody+immunosuppression%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Otology%2C+Rhinology+%26+Laryngology%22%5BJournal%5D)">Ten-month laryngeal allograft survival with use of pulsed everolimus and anti-αβ T-cell receptor antibody immunosuppression.</a> Annals of Otology, Rhinology & Laryngology. 120 (2), 131-136 (2011).</li>
<li>Lott, D. G., Dan, O., Lu, L., Strome, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decoy+NF-%CE%BAB+fortified+immature+dendritic+cells+maintain+laryngeal+allograft+integrity+and+provide+enhancement+of+regulatory+T+cells%5BTitle%5D)+AND+%22The+Laryngoscope%22%5BJournal%5D)">Decoy NF-κB fortified immature dendritic cells maintain laryngeal allograft integrity and provide enhancement of regulatory T cells.</a> The Laryngoscope. 120 (1), 44-52 (2010).</li>
</ol>

De auteurs verklaren dat ze geen concurrerende financiële belangen hebben. Egehan Salepci's reis- en levensonderhoudkosten voor onderzoek werden gefinancierd door de Scientific and Technological Research Council of Turkey (TUBITAK).

De incidentie en prevalentie van strottenhoofdkanker zijn de afgelopen drie decennia met respectievelijk 12% en 24% toegenomen en veel van deze patiënten ondergaan een laryngectomie voor behandeling10. Deze procedure verslechtert de kwaliteit van leven van een persoon aanzienlijk en daarom is een alternatieve behandeling gewenst. Gevasculariseerde composiet allotransplantatie van het strottenhoofd kan het vermogen van een patiënt om te ademen en te spreken verbeteren; er is echter nog onderzoek no...

Voor patiënten die lijden aan onherstelbare larynxschade of strottenhoofdkanker is een totale laryngectomie vaak de enige optie1. Totale laryngectomie laat patiënten achter zonder het vermogen om zelfstandig te ademen en te spreken, naast het ervaren van sociale en psychologische nood2. Patiënten met strottenhoofdkanker die een totale laryngectomie nodig hebben, zijn uitstekende potentiële kandidaten voor larynxtransplantatie. Terwijl menselijke larynxtransplantatie in de setting van onherstelbare larynxschade is uitgevoerd, wordt allotransplantatie van het strottenhoofd momenteel vermeden bij deze patiënten vanwege de angst voor tumorrecidief, de mogelijkheid van chronische afstoting en van donoren afgeleide infecties3. Immunosuppressie is de primaire oorzaak van deze zorgen. Het dramatische verlies van de eerste gedeeltelijke larynxtransplantatiepatiënt als gevolg van tumorrecidief na conventionele immunosuppressieve behandeling is het bewijs dat een geschikt immunosuppressief regime moet worden bedacht voordat verdere pogingen tot transplantatie bij larynxkankerpatiënten worden gedaan 4,5.
Om de immuunrespons van de gastheer op een getransplanteerd strottenhoofd beter te begrijpen, werd het eerste larynxtransplantatiemodel bij ratten in 1992 ontwikkeld door Strome en werden in 2002 verbeteringen aan de chirurgische techniek aangebracht 6,7. Hoewel dit model effectief is voor het bestuderen van larynxtransplantatie, leidde het gebrek aan ratspecifieke immunologische middelen en de hogere kosten in verband met rattenmodellen tot de ontwikkeling van een nieuw muismodel voor het bestuderen van larynxtransplantatie in 20098.
De belangrijkste toepassing van de beschreven techniek is het bestuderen van verschillende immunosuppressieve medicijnregimes bij larynxtransplantatie. Het verbeteren van de huidige immunosuppressieve therapieën kan de kandidatenpool verbreden en leiden tot veilige transplantatie bij kankerpatiënten. De voordelen van dit muismodel zijn de kosteneffectiviteit en de brede beschikbaarheid van immunologische gegevens en reagentia.
Teams die werken aan immunosuppressieve behandelingsregimes voor larynxtransplantatie kunnen deze methode gebruiken om een groot volume immunologische gegevens te verzamelen en verschillende medicijnregimes kunnen snel worden getest en vergeleken. Andere potentiële behandelingsmodaliteiten die de immuunrespons op de transplantatie kunnen moduleren, zoals stamcelinjecties, kunnen ook worden getest met behulp van dit model. Ten slotte kunnen experimenten worden bedacht om systemische langetermijneffecten van larynxtransplantatie te observeren door de follow-upperiode te verlengen.
De hier beschreven techniek maakt gebruik van end-to-side anastomosen om arteriële en veneuze stroom naar een heterotopisch strottenhoofdtransplantaat te bieden. Het transplantaat is een laryngotracheoesophageal (LTE) complex bestaande uit het strottenhoofd, de schildklier, de bijschildklieren, de luchtpijp en de slokdarm van de donor, met bilaterale halsslagaders en pedikels intact. Eén donorcarotisslagader wordt geanostomoseerd naar de ontvangende halsslagader en zorgt voor arteriële bloedstroom, terwijl de andere donorcarotisslagader wordt geanostomoseerd naar de ontvangende externe halsader en zorgt voor veneuze bloedstroom (figuur 1).
Verschillende wijzigingen werden aangebracht in de chirurgische techniek van het rattenmodel om succes in het muismodel te garanderen. Er werd bijvoorbeeld een geïnhaleerd anestheticum gebruikt in plaats van een injecteerbaar middel om de controle over de diepte van de anesthesie te vergroten en complicaties te verminderen. Continue hechting wordt gebruikt bij de arteriële-arteriële anastomose bij ratten; vanwege de kleinere omvang van muisvaten is dit echter technisch moeilijk en kan dit leiden tot vernauwing van het vaatlumen7. Als gevolg hiervan worden onderbroken hechtingen gebruikt in het muismodel en resulteren in een verbeterde doorgankelijkheid van het vat. Bovendien wordt in het rattenmodel de superieure schildklierslagader (STA) pedikel ontleed en gevisualiseerd. Gezien de kleinere omvang van de STA bij muizen, kan deze dissectie leiden tot schade aan en zelfs transsectie van de STA. Als gevolg hiervan wordt het niet ontleed in het muismodel. In plaats daarvan wordt de nabijgelegen fascia bewaard om ervoor te zorgen dat de STA intact blijft.
De belangrijkste potentiële valkuilen van deze techniek zijn het beschadigen van de cellulaire pedikels van het donor LTE-complex, het maken van een arteriotomie of venotomie van een verkeerde grootte, vaatocclusie op de anastomoseplaatsen of het achterlaten van gaten op de anastomoseplaatsen die bloedingen kunnen veroorzaken. Om deze misstappen te voorkomen, moet voorzichtigheid worden betracht bij het verkrijgen van het donortransplantaat door een manchet van weefsel rond de STA-pedikel achter te laten. De arteriotomie en venotomie moeten groot genoeg zijn om de bloedstroom mogelijk te maken, maar klein genoeg om lekkage te voorkomen. Een passend aantal hechtingen moet worden gebruikt voor de anastomosen om eventuele openingen te dichten, maar niet te veel om de vaten af te sluiten.
Als bekendheid met de microchirurgische technieken wordt verkregen, kan deze procedure in ongeveer 3 uur worden uitgevoerd. Dit larynxtransplantatiemodel kan betrouwbaar worden uitgevoerd bij muizen en worden gebruikt om de immuunrespons van de gastheer te bestuderen na gevasculariseerde samengestelde allotransplantatie.

<table><tbody><tr><td>#1 Paperclips</td><td>Staples</td><td>OP-7404</td><td>Clips worden handmatig gevormd om als retractors te worden gebruikt</td></tr><tr><td>1 cc Insulin Syringen&nbsp;</td><td>BD&nbsp;</td><td>329412</td><td>27 G 5/8</td></tr><tr><td>10-0 Ethilon Nylon Suture</td><td>Ethicon</td><td>2870G</td><td></td></tr><tr><td>25 G Precision Glide Needle</td><td>BD&nbsp;</td><td>305125</td><td>1 in</td></tr><tr><td>3 mL Luer-Lok Tip Syringe</td><td>BD&nbsp;</td><td>309657</td><td></td></tr><tr><td>30 G Sterile Standard Blunt Needles</td><td>Cellink</td><td>NZ5300505001</td><td></td></tr><tr><td>5-0 Monocryl Suture</td><td>Ethicon</td><td>Y822G</td><td></td></tr><tr><td>8-0 Ethilon Nylon Suture</td><td>Ethicon</td><td>2815G</td><td></td></tr><tr><td>Adson Forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>11027-12</td><td>Recht, 1 x 2 tanden</td></tr><tr><td>Adventitia scissors</td><td>S&amp;T</td><td>SAS-10</td><td>19 mm, 10 cm, recht</td></tr><tr><td>Angled Forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>00109-11</td><td>45/11 cm</td></tr><tr><td>Artifical Tears Lubricant Opthalmic Ointment</td><td>Akorn Animal Health</td><td>59399-162-35</td><td></td></tr><tr><td>Bandaid Fabric Fingertip</td><td>Cardinal Healthcare</td><td>299399</td><td></td></tr><tr><td>Betadine Solution Swabsticks</td><td>Purdue Products</td><td>67618-153-01</td><td></td></tr><tr><td>Buprenex Injection</td><td>CIII</td><td>12495-0757-1</td><td>0.3 mg/mL</td></tr><tr><td>Clamp applying forceps without lock</td><td>Accurate Surgical &amp; Scientific Instruments</td><td>ASSI.CAF5</td><td>14 cm</td></tr><tr><td>Cotton Swabs</td><td>Puritan</td><td>10806-001-PK</td><td></td></tr><tr><td>DeBakey forceps</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dermabond Mini</td><td>Cardinal Healthcare</td><td>315999</td><td></td></tr><tr><td>Dissecting Boards</td><td>Mopec</td><td>22-444-314</td><td></td></tr><tr><td>Falcon Sterile Disposable Petri Dish&nbsp;</td><td>Corning</td><td>25373-041</td><td>35 mm</td></tr><tr><td>Fine Scisssors</td><td>Fine Science Tools</td><td>14029-10</td><td>Gebogen Scherp-Blunt 10 cm</td></tr><tr><td>Golden A5 2-Speed Blade Clipper&nbsp;</td><td>Oster</td><td>008OST-78005-140</td><td>#10</td></tr><tr><td>Hair Remover Sensitive Formula</td><td>Nair</td><td>2260000033</td><td></td></tr><tr><td>Heparin&nbsp;</td><td>Meitheal Pharmaceuticals</td><td>71288-4O2-10</td><td>10.000 USP-eenheden per 10 mL</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Piramal Healthcare</td><td>66794-013-25</td><td></td></tr><tr><td>Low-Temp Micro Fine Tip Cautery</td><td>Bovie Medical</td><td>AA90</td><td></td></tr><tr><td>Mercian Visibility Background Material</td><td>Synovis Micro Companies</td><td>VB3</td><td>Groen</td></tr><tr><td>Microvascular Approximator Clamp without Frame</td><td>Accurate Surgical &amp; Scientific Instruments</td><td>ASSI.ABB11V</td><td>0,4-1 mm Vaatdiameter</td></tr><tr><td>Mouse face mask kit</td><td>Xenotec</td><td>XRK-S</td><td>Klein</td></tr><tr><td>Needle holder</td><td>S&amp;T</td><td>C-14 W</td><td>5,5", 8 mm, 0,4 mm</td></tr><tr><td>Press n' Seal</td><td>Glad</td><td>70441</td><td></td></tr><tr><td>Scalpel</td><td>Braun</td><td>BA210</td><td>10 blade</td></tr><tr><td>Single Mini Vessel Clamp</td><td>Accurate Surgical &amp; Scientific Instruments</td><td>ASSI.ABB11M</td><td>.31 (8 mm), 3 x 1 mm Rnd. Bl., Zwart Paar</td></tr><tr><td>Stereomicroscope</td><td>Olympus</td><td>SZ61</td><td></td></tr><tr><td>Sterile Alcohol Prep Pads</td><td>Fisherbrand</td><td>06-669-62</td><td></td></tr><tr><td>Sterile Disposable Drape Sheets</td><td>Dynarex</td><td>DYN4410-CASE</td><td></td></tr><tr><td>Sterile Gauze Pads</td><td>Dukal</td><td>1212</td><td></td></tr><tr><td>Sterile Saline&nbsp;</td><td>Hospira</td><td>236173</td><td>NaCl 0,9%</td></tr><tr><td>Sterile Surgical Gloves</td><td>Gammex</td><td>851_A</td><td></td></tr><tr><td>Straight Forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>00108-11</td><td>11 cm</td></tr><tr><td>Tissue forceps</td><td>Accurate Surgical &amp; Scientific Instruments</td><td>ASSI.JFLP3</td><td>13,5 cm, 8 mm, 0,3 mm</td></tr><tr><td>Vannas Pattern Scissors&nbsp;</td><td>Accurate Surgical &amp; Scientific Instruments</td><td>ASSI.SDC15RV</td><td>15 cm, 8 mm, gebogen 7mm-mes</td></tr><tr><td>Vannas Spring Scissors</td><td>Fine Science Tools</td><td>15000-10</td><td>3 mm snijrand, gebogen</td></tr><tr><td>Vessel Dilator Tip&nbsp;</td><td>Fine Science Tools</td><td>00126-11</td><td>Diameter 0,1 mm/Geboogd 10/11 cm</td></tr><tr><td>Vessel Dilator, Classic line</td><td>S&amp;T</td><td>D-5a.3 W</td><td>9 mm, 0,3 mm, gebogen 10</td></tr></tbody></table>

een heterotopisch muismodel voor het bestuderen van larynxtransplantatie

A Heterotopic Mouse Model for Studying Laryngeal Transplantation

Larynx heterotopische transplantatie, hoewel een technisch uitdagende procedure, biedt meer wetenschappelijke analyse en kostenvoordelen in vergelijking met andere diermodellen. Hoewel voor het eerst beschreven door Shipchandler et al. in 2009, wordt deze techniek niet veel gebruikt, mogelijk vanwege de moeilijkheden bij het leren van de microchirurgische techniek en de tijd die nodig is om het onder de knie te krijgen. Dit artikel beschrijft de chirurgische stappen in detail, evenals mogelijke valkuilen om te vermijden, om effectief gebruik van deze techniek aan te moedigen.
In dit model worden de bilaterale halsslagaders van het strottenhoofd van de donor geanastomoseerd naar de ontvangende halsslagader en de externe halsader, waardoor bloed door het transplantaat kan stromen. De bloedstroom kan intraoperatief worden bevestigd door de visualisatie van bloed dat de bilaterale halsslagaders van het transplantaat vult, roodheid van de schildklieren van het transplantaat en bloedingen uit microvaten in het transplantaat. De cruciale elementen voor succes omvatten delicate conservering van de transplantaatvaten, het maken van de juiste grootte arteriotomie en venotomie, en het gebruik van het juiste aantal hechtingen op de arteriële-arteriële en arteriële-veneuze anastomosen om bloedvaten te beveiligen zonder lekkage en occlusie te voorkomen. 
Iedereen kan zich met voldoende training bekwamen in dit model en de procedure in ongeveer 3 uur uitvoeren. Indien met succes uitgevoerd, maakt dit model het mogelijk om immunologische studies gemakkelijk en tegen lage kosten uit te voeren.

Bevestiging van succesvolle transplantatie Met behulp van het hierboven beschreven protocol is het mogelijk om de bloedtoevoer naar het LTE-complex te beoordelen door de pulsatie van de donorslagader te observeren na het verwijderen van de vaatklemmen. Pulsatie is meestal zichtbaar en onmiddellijke rode kleuring van de donorslagader bevestigt de actieve bloedstroom (figuur 4A). Als de anastomose niet effectief is, zal de slagader geen pulsatie hebben, er gedeeltelijk inge...

Het doel van dit manuscript is om de microchirurgische stappen te beschrijven die nodig zijn om een heterotope larynxtransplantatie bij muizen uit te voeren. De voordelen van dit muismodel ten opzichte van andere diermodellen van larynxtransplantatie zijn de kosteneffectiviteit en de beschikbaarheid van immunologische testen en gegevens.

Een heterotopisch muismodel voor het bestuderen van larynxtransplantatie

Laryngeal heterotopic transplantation, although a technically challenging procedure, offers more scientific analysis and cost benefits compared to other ...

Larynxtransplantatiemodellen werden beschreven bij muizen en ratten. Het eerdere werk van Senior alter was gericht op het bedenken van een efficiëntere methode met behulp van de donorcarotisslagaders voor anastomose, waardoor de noodzaak om de superieure schildklierslagaders te ontleden werd vermeden. In deze video beschreven we deze procedure bij muizen.Met dit larynxtransplantatiemodel voor muizen kunnen immunologische studies gemakkelijk en tegen lage kosten worden uitgevoerd. Hoewel technisch uitdagender vanwege de kleinere omvang van de vaten in vergelijking met een rattenmodel, kan deze procedure in ongeveer drie uur worden uitgevoerd als vertrouwdheid met de chirurgische stappen wordt verkregen. Nadat het dier volledig is verdoofd, brengt u de muis over naar het scheergebied waar 1,5% isofluraan met één liter per minuut zuurstofstroom wordt geleverd via een gezichtsmasker voor onderhoud van de anesthesie.Bevestig de diepte van de anesthesie met een teenknijper. Scheer de borst en nek van de muis tot aan de kaaklijn en breng ontharingscrème aan. En veeg na 30 seconden de crème af en breng de muis over naar het operatiegebied.Immobiliseer de muis en bereid het chirurgische gebied driemaal voor met povidon-jodium en alcohol en drapeer vervolgens de muis. Maak een kleine horizontale incisie net superieur aan de suprasternale inkeping. Til met een fijne schaar de huid bilateraal op via die incisie tot aan de onderkaak en snijd een trapeziumvormig huidsegment weg.Snijd de bilaterale speekselklieren weg met behulp van cautery op het superieure deel waar een kleine ader die door de klier reist wordt gevisualiseerd. Ontleed de bilaterale sternocleidomastoïde spieren uit de omliggende weefsels en trek ze lateraal in. Maak een middenlijnincisie op de riemspieren en snijd ze bilateraal weg, waarbij u ervoor zorgt dat de onderliggende schildklier niet wordt beschadigd en deze op het laryngotracheale slokdarm- of LTE-complex achterlaat.Na deze stap zijn bilaterale halsslagaders zichtbaar. Ontleed de gemeenschappelijke halsslagaders inferieur tot het niveau van het sleutelbeen en tot het niveau van de halsslagader bifurcatie superieur. De nervus vagus en de interne halsader worden ontleed vrij van de halsslagaders en niet opgenomen in het verkregen transplantaat.Ontleed de interne en externe halsslagaders ver genoeg om te kunnen ligateeren en verdelen. Gebruik een 10-0 nylon hechting om de interne halsslagaders te ligateeren die twee tot drie millimeter superieur zijn aan de halsslagadersplitsing. Ligate de externe halsslagaders die minstens drie millimeter superieur zijn aan het vertakkingspunt van de superieure schildklierslagader en ligate de gemeenschappelijke halsslagaders ter hoogte van het borstbeen.Knip alle ligaatschepen bilateraal af. Houd de vasculaire pedikels bovenop het LTE-complex om onbedoelde schade tijdens verdere dissectie te voorkomen. Om gaslekkage of onbedoeld verlies van anesthesie te voorkomen, moet u ervoor zorgen dat het dier is verlopen voordat u luchtwegsneden maakt.Transect de luchtpijp onder de vijfde tracheale ring en draag de incisie door de slokdarm naar de prevertebrale fascia om het LTE-complex inferieur te bevrijden. Bevrijd de luchtpijp en slokdarm van de onderliggende prevertebrale fascia van inferieur naar superieur. Maak een anterieure faryngectomie die net inferieur is aan het tongbeen.Draag de incisie naar de voorwervel fascia om het LTE-complex superieur te bevrijden. Verdeel eventuele resterende lymfoïde of bindweefselaanhechtingen tussen het LTE-complex en het omliggende weefsel. En tot slot, verwijder het transplantaat.Plaats het verkregen transplantaat in een steriele petrischaal en was met een normale zoutoplossing om eventuele bloedstolsels te verwijderen. Verwijd de bilaterale halsslagaders met behulp van microdilatoren van één millimeter. Injecteer met behulp van een stompe naald met een stompe punt ongeveer twee milliliter gehepariniseerde zoutoplossing in elke halsslagader om het transplantaat te spoelen.Bloed en zoutoplossing zullen worden gezien spoelen uit de contralaterale halsslagader en kleine vrije vaatuiteinden die intacte superieure schildklierslagaders bevestigen. Het transplantaat kan worden achtergelaten in heparinized zoutoplossing en een korte pauze kan tot drie uur worden genomen voordat het in de ontvanger wordt getransplanteerd. Bereid de ontvangende muis voor op exact dezelfde manier als beschreven voor de donor na inductie-, scheer- en chirurgische voorbereidingsstappen.Injecteer de ontvangende muis met analgeticum met verlengde afgifte subcutaan 30 minuten voor aanvang van de operatie. Maak met behulp van een scalpel een middenlijnhalsincisie die zich uitstrekt van de kaaklijn superieur tot het borstbeen inferieur. Til de huid aan de linkerkant op en trek deze zijdelings in.Snijd de linker speekselklier dichtschroeiende de superieure vaten zoals eerder beschreven. Snijd het vetweefsel en het lymfoïde weefsel weg door zichtbare vaten met een lage temperatuur cautery te delen. Zorg ervoor dat de onderliggende externe halsader niet wordt beschadigd.Ontleed de uitwendige halsader omtrek. Gebruik ten minste vijf millimeter heldere lengte van het vat voor anastomose. Ontleed de sternomastoïde spier en trek deze zijdelings in.Ontleed de gemeenschappelijke halsslagader van het sleutelbeen inferieur tot aan de halsslagader bifurcatie superieur. Plaats het achtergrondmateriaal onder de externe halsader en breng de dubbele benaderende B-3 vatklemmen aan. Plaats een 10-0 nylon hechtdraad door de voorste wand van de externe halsader op de locatie van de gewenste monotomie en gebruik de hechting om het vat anterieur te trekken.Snijd net diep tot aan de hechting met een microschaar om het creëren van de juiste maat enkele spleet venotomie te vergemakkelijken en om ervoor te zorgen dat de snede volledig door de veneuze wand is. Gebruik een stompe naald van 30 gauge en spoel de binnenkant van de ader met gehepariniseerde zoutoplossing. Plaats het LTE-complex van de donor tussen de linker halsslagader van de ontvanger en de linker externe halsader.Lijn het vrije uiteinde van de linker halsslagader van de donor uit naar de linker externe halsader van de ontvanger en schuin het uiteinde af met een scherpe schaar. Met behulp van vier 10-0 nylon onderbroken hechtingen, anastomose de donor verliet halsslagader en ontvanger verliet externe halsader op een end-to-side manier. Schuif het achtergrondmateriaal onder de gemeenschappelijke halsslagader van de ontvanger en breng de dubbele benaderende A-3-vatklemmen aan.Maak een arteriotomie op dezelfde manier als de venotomie. Anastomoseer de rechter halsslagader van de donor naar de linker halsslagader van de ontvanger op een end-to-side manier. Het gebruik van zes onderbroken hechtingen met 10-0 nylon is ideaal voor de arteriële anastomose.Verwijder de klemmen aan de veneuze kant. Als er bloedingen optreden, oefen dan zachte druk uit met katoenen tips. Verwijder de klemmen op de slagader en oefen onmiddellijk zachte druk uit met katoenen uiteinden.Er wordt enige bloeding verwacht bij de stap die meestal stopt na een minuut met zachte druk. Controleer de integriteit van de bloedstroom in de slagader in de ader. Bij intacte arteriële stroming wordt meestal pulsatie van de donorslagader gezien en zal de donor schildklier veranderen van zijn gespoelde transparante kleur terug naar zijn oorspronkelijke roodachtige kleur.Rode kleuring van de kleine vaten op het LTE-complex kan ook worden waargenomen. Sluit de huidincisie met 5-0 monofilament hechting op een lopende manier. Breng een huidlijm aan op de incisie.Injecteer een milliliter warme zoutoplossing subcutaan om rekening te houden met vochtverlies tijdens de operatie. Stop de anesthesie en breng de muis over naar een herstelkooi. Observeer de muis op een verwarmingskussen totdat deze volledig wakker is om onderkoeling te voorkomen.Chirurgisch succes kan onmiddellijk na het verwijderen van de vatklemmen worden beoordeeld. Figuur A is representatief voor een succesvolle operatie omdat de bloedstroom kan worden gevisualiseerd in de halsslagaders van het strottenhoofd van de donor en de schildklier rood wordt. Figuur B is representatief voor een mislukte operatie omdat de bloedstroom niet kan worden gevisualiseerd in de halsslagaders van het strottenhoofd van de donor en de schildklier bleek bleef.Na 15 dagen bij afwezigheid van immunosuppressie hebben de meeste ontvangers geen bloedtoevoer naar de transplantatie. De doorgankelijkheid van de slagader kan macroscopisch worden beoordeeld door het laryngotracheale complex vrij van het omliggende ontvangende weefsel te ontleden en de end-to-side anastomose te visualiseren. Bedankt. Na het bekijken van deze video moet u begrijpen hoe u een larynx tracheo-oesofageaal complex in ongeveer drie uur van de ene muis naar de andere kunt transplanteren.Dit haalbare en relatief goedkope model biedt een aanzienlijk potentieel bij het bestuderen van de rol van het immuunsysteem bij de afstoting van het laryngotracheale complex, waardoor het potentieel voor nieuwe therapieën bij orgaantransplantatie wordt geboden.

a-heterotopic-mouse-model-for-studying-laryngeal-transplantation

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

De muis heterotope harttransplantatie model is bewezen door vele onderzoekers een belangrijke methode voor het bestuderen van de mechanismen van de afwijzing en immuunrespons worden. Echter, de betrokken technieken zijn nog steeds uitdagend. Door het wijzigen van standaard technieken die we hebben succes gehad met meer dan 1000 transplantaties.

Heterotope harttransplantatie in Muizen

Deze video laat zien en vergelijkt twee experimentele modellen te bestuderen van de ontwikkeling van obliteratieve luchtwegaandoeningen (OAD) in muizen, de heterotope en orthotope tracheale transplantatie model.

Heterotope en orthotope Tracheale transplantatie in Muizen worden gebruikt als modellen voor de ontwikkeling van de obliterans luchtwegaandoeningen Study

Bronchiolitis obliterans is de sleutel belemmering voor de lange termijn overleving van patiënten na longtransplantatie en het ontbreken van een robuuste preklinisch model sluit de behandeling van bronchiolitis obliterans immunopathogenese. In tegenstelling tot andere vaste orgaantransplantaties, gevasculariseerd muis longtransplantatie heeft pas recent ontwikkeld. Hier laten we ons onafhankelijk van elkaar ontwikkeld Bronchiolitis obliterans model na murine orthotoop single-longtransplantatie.

Ontwikkeling van Bronchiolitis obliterans in een muizenmodel van orthotope longtransplantatie

Het murine cervicale harttransplantatie model is geschikt voor immunologische en ischemie-reperfusie schade studies. We pasten de procedure met een niet-hechtingsmanchet techniek en uitgevoerd meer dan 1000 succesvolle transplantaties met deze benadering.  Hierin geven we meer details van deze techniek om de video te vullen.

Muizen Baarmoederhalskanker harttransplantatie Model met een aangepaste manchet Techniek

Graft stenose vormt een kritische obstakel in weefsel ontworpen airway vervanging. Om te onderzoeken cellulaire mechanismen ten grondslag liggen aan stenose, gebruiken we een lymfkliertest model van weefsel ontworpen tracheale vervanging met geplaatste beenmerg mononucleaire cellen (BM-MNC). Hier, detail we onze protocol, met inbegrip van de steiger productie, BM-MNC isolatie, graft zaaien en implantatie.

Zaaien en implantatie van een Biosynthetic weefsel-engineered tracheale Graft in een muismodel

Harttransplantatiemodellen bij muizen vertegenwoordigen waardevolle onderzoeksinstrumenten voor het bestuderen van de immunologie van transplantaties. Het huidige protocol beschrijft muis heterotopische cervicale harttransplantatie waarbij manchetten op de gemeenschappelijke halsslagader van de ontvanger en de longslagaderstam van de donor worden geplaatst om laminaire bloedstroom mogelijk te maken.

Muis heterotopische cervicale harttransplantatie met behulp van vasculaire manchetten

Het muizen intrapulmonale tracheale transplantatie (IPTT) model is waardevol voor het bestuderen van obliteratieve luchtwegaandoeningen (OAD) na longtransplantatie. Het biedt inzicht in longspecifiek immunologisch en angiogeen gedrag bij luchtwegvernietiging na allotransplantatie met een hoge reproduceerbaarheid. Hier beschrijven we de IPTT-procedure en de verwachte resultaten.

Intrapulmonale tracheale transplantatie bij muizen: een model voor het onderzoeken van obliteratieve luchtwegaandoeningen na longtransplantatie

Dit protocol biedt een manchetvrije, hecht-gebaseerde cervicale heterotopische harttransplantatietechniek bij muizen, ontworpen om de betrouwbare plaatsing van een tweede heterotopische harttransplantatie mogelijk te maken voor het evalueren van donorspecifieke immuuntolerantie onder fysiologische omstandigheden met minimale interferentie door vreemd materiaal.

Manchetvrije hechtingsgebaseerde cervicale model voor secundaire heterotopische harttransplantatie om donorspecifieke immuuntolerantie bij muizen te evalueren

We presenteren een reproduceerbaar muismodel van heterotopische vascularisatie allotransplantatie van achterpoot tot hals. Dit supermicrochirurgisch protocol, waarbij 0,3-0,5 mm vatenanastomosen worden gebruikt, integreert nylonfilamentgeleiding en veneuze manchetten. Het biedt een betrouwbaar platform voor translationele studies naar tolerantie, ischemie-reperfusieschade en immunologische mechanismen bij vasculariseerde samengestelde allotransplantatie.

Heterotopische achterpoot-naar-nek transplantatie bij de muis: een supermicrochirurgisch model van vasculariseerde composietallotransplantatie

Dit protocol presenteert een vereenvoudigde, end-to-side hechtingsanastomosetechniek voor muis-cervicale harttransplantatie, en biedt een robuust en reproduceerbaar model voor het bestuderen van transplantatie-immunologie.

Cervicale heterotopische muisharttransplantatie met behulp van end-to-side anastomosetechniek om transplantatie-immunologie te bestuderen

Leer de microchirurgische stappen voor heterotopische larynxtransplantatie bij muizen. Dit kosteneffectieve model maakt eenvoudige immunologische studies mogelijk voor transplantatieonderzoek.

Een heterotopisch muismodel voor het bestuderen van larynxtransplantatie

Meer video's verkennen