Name: Laparoscopische oöcyten ophalen en cryopreservatie tijdens vaginoplastiek voor de behandeling van mayer-rokitansky-kuster-hauser syndroom (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-05-10T15:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 53 s
Description: Leer een gecombineerde laparoscopische vaginoplastiek met oöcytenopvang en cryopreservatie voor MRKH-patiënten. Deze methode vermindert invasieve ingrepen en behoudt toekomstige vruchtbaarheidsopties met slechts één anesthesie.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Voor dit werk is geen specifieke financiering ontvangen.

De lokale ethische commissie van het tertiaire verwijzingscentrum voor MRKHS (IRCCS San Raffaele Universitair Ziekenhuis, Milaan, Italië) werd op de hoogte gebracht en keurde het protocol goed voordat het in juli 2017 werd geïmplementeerd. Alle patiënten of voogden gaven ondertekende geïnformeerde toestemming voor het ophalen van laparoscopische eicellen en cryopreservatie tijdens vaginoplastiek en voor het gebruik van geanonimiseerde klinische / laboratoriumgegevens voor wetenschappelijke doeleinden.
1. Teamsamenstelling
<ol><li>Wijs een toegewijd team aan, bestaande uit een ervaren laparoscopisch chirurg, een ervaren vaginale chirurg, een onvruchtbaarheidsexpert, een toegewijde psycholoog en een toegewijde verpleegkundige.</li>
	<li>Assisteer de patiënt als een team tijdens de hele installatie en uitvoering van de procedure.</li>
</ol>2. Diagnostische work-up en counseling
<ol><li>Voer transabdominale bekken- en abdominale echografie uit op de patiënt voor visualisatie van de eierstokken en schatting van de antrale follikeltelling (AFC). Beoordeel de bloedspiegels van anti-Mülleriaans hormoon (AMH) om de startdosis gonadotrofine te optimaliseren voor gecontroleerde ovariële stimulatie. Serologische tests uitvoeren voor infectieziekten (HIV-Ab, HCV-Ab, HBV-Ab, RPR-TPHA) volgens nationale / lokale protocollen voor cryopreservatie van weefsels / gameten.</li>
	<li>Adviseer de patiënt over zowel de seksuele als reproductieve aspecten van MRKHS, waaronder niet-chirurgische en chirurgische vaginoplastiek, de kosten en wetgeving met betrekking tot draagmoederschap, het perspectief van baarmoedertransplantatie in de context van een experimenteel programma, de verschillende benaderingen die beschikbaar zijn voor het ophalen van eicellen en de uitvoering van cryopreservatie van eicellen in termen van levendgeborene.</li>
	<li>Bied de patiënt psychologische evaluatie aan om haar tijdens de procedure te ondersteunen en emotionele stabiliteit en toewijding en verlangen naar toekomstig moederschap te beoordelen. Verkrijg ondertekende, geïnformeerde toestemming voor gelijktijdige laparoscopische oöcytenophaling, gameatcrypreservatie en laparoscopische vaginoplastiek. In het geval van een minderjarige patiënt, voer de klinische beoordelingen uit in aanwezigheid van de ouders die ook de relatieve geïnformeerde toestemming ondertekenen.</li>
</ol>3. Planning van de chirurgische ingreep en van gecontroleerde ovariële stimulatie
<ol><li>Plan de procedure van gelijktijdige laparoscopische oöcyten ophalen, gameatcrypreservatie en laparoscopische vaginoplastiek, rekening houdend met de beschikbaarheid van het klinische team (zie hierboven) en dat van het laboratoriumpersoneel dat eicelverglazing uitvoert.</li>
	<li>Start gecontroleerde ovariële stimulatie (COS) op dag -14 vanaf de dag van de operatie, rekening houdend met een geplande duur van COS van n = 12 dagen en de 36 uur die nodig is tussen ovulatie-triggering en oöcyt ophalen en vitrificatie.</li>
	<li>In het geval dat COS een andere duur vereist dan verwacht, moet u de operatie dienovereenkomstig opnieuw plannen.</li>
</ol>4. Gecontroleerde ovariële stimulatie: startdosis, dosisaanpassingen en monitoring, uiteindelijke rijping van de eicel
<ol><li>Start COS in elke fase van de ovariële cyclus, zoals vaak gedaan in de context van "random start" -protocollen voor vruchtbaarheidsbehoud.</li>
	<li>Kies de startdosis van follikelstimulerend hormoon (FSH) / humaan menopauzale gonadotrofine (hMG) op basis van de AFC en AMH van de patiënt en instrueer de patiënt om dagelijks zelf toegediende subcutane injecties voort te zetten. Voer vervolgens geïndividualiseerde dosisaanpassingen uit op basis van de ovariële respons.</li>
	<li>Monitor de ovariële respons door seriële transabdominale echografie en gelijktijdige metingen van E2 en P (dag 1, dag 6, dag 8, dag 10 en dag 12).</li>
	<li>Trigger uiteindelijke rijping van de eicel door subcutane toediening van 0,2 ml van een Gn-RH-analoog (Triptoreline).</li>
</ol>5. Klinische procedure (laparoscopie): ophalen van eicellen
<ol><li>Plaats de patiënt in een gemodificeerde dorsale lithotomiepositie, die uitstekende gelijktijdige toegang tot de buik en het perineum mogelijk maakt. Induceer algemene anesthesie en dien 2 g Cefazolin intraveneus toe volgens routinematige intraoperatieve antibiotische profylaxe. Plaats een intravesicale Foley-katheter.</li>
	<li>Stel pneumoperitoneum vast met een peri-umbilical Veress naald, plaats een 10 mm navelstreng trocar voor het inbrengen van de laparoscoop en twee 5 mm trocars in de rechter en linker bovenste kwadranten. Gebruik bij laparoscopisch zicht een naald van 17 G met één lumen die is aangesloten op een aspiratiepomp, zoals gewoonlijk wordt gebruikt voor transvaginaal ophalen, via de rechter- en linkertrombons voor het doorboren van respectievelijk de rechter- en linker eierstok.</li>
	<li>Til de eierstokken op en houd ze vast met een laparoscopische tang om de blootstelling van de follikels te vergemakkelijken. Bij het aspirateren van meerdere follikels die dicht bij elkaar liggen, moet u de naaldpunt in de eierstok behouden om het aantal keren dat de ovariële cortex is gefixeerd en het inherente risico op bloedingen te verminderen.</li>
</ol>6. Klinische procedure (laparoscopie): vaginoplastiek
OPMERKING: De stappen van de Vaginoplastie blijven ongewijzigd in vergelijking met de laparoscopisch gemodificeerde techniek12 van davydov.
<ol><li>Ontleed het peritoneum door de peritoneale streng transversaal tussen de twee rudimentaire baarmoederhoorns op te tillen en in te snijden en vervolgens de incisie anterieur, lateraal en posterieur uit te breiden.</li>
	<li>Begin een purse-string hechting in polydioxanone synthetisch absorbeerbaar (PDS) 2-0 monofilament in elk hemipelvis, van het gemobiliseerde peritoneum boven de blaas, met opeenvolgende transfixie van het ronde ligament, de tubale landengte, het uteroovarian ligament en het laterale peritoneale blad. Neem vervolgens in de twee hechtingen het laterale aspect van het mesorectum en het voorste aspect van de rectale serosa op, direct onder de rectosigmoïde junctie.</li>
	<li>Stel het vaginale kuiltje bloot op de perineale benadering en voer een H-vormige incisie uit en creëer een neovaginale ruimte door scherpe en stompe dissectie van de vesicorectale ruimte. Trek vervolgens de ontlede peritoneale randen naar beneden naar de rand van het vaginale vestibulum. Positie onderbroken hechtingen in PDS 3-0 voor de peritoneaal-vestibulaire anastomose. Plaats ten slotte een met paraffine bedekt gaas in het peritoneum-gecoate neovagina.</li>
</ol>7. IVF-laboratorium: de dag voor het ophalen van de eicel
<ol><li>Bereid 2 tot 5 buisjes met ronde bodem met 9 ml Quinn's Advantage Medium met HEPES (aangevuld met 5% humaan serumalbumine [HSA]) volgens het aantal verwachte follikels en incubeer ze 's nachts bij 37 °C.</li>
	<li>Bereid een of twee 4-well gerechten met 0,5 ml / put bevruchtingsmedium (aangevuld met 5% HSA), bedekt met 0,5 ml minerale olie voor embryocultuur en incubeer het een nacht bij 37 ° C in een gecontroleerde atmosfeer (6% CO2, 5% O2).</li>
	<li>Bereid een gerecht met 9 (30 μL) druppels Continuous Single Culture (CSCM) medium (aangevuld met 10% serumvervangend supplement [SSS]) bedekt met 6 ml minerale olie. Incubeer het een nacht bij 37 °C in een gecontroleerde atmosfeer (6% CO2, 5% O2).</li>
</ol>8. IVF-laboratorium: procedure voor het ophalen van eicellen
<ol><li>Bereid een oplossing van Quinn's Advantage Medium met HEPES (aangevuld met 5% HSA) met heparine in een uiteindelijke concentratie van 10 IE/ml waarin folliculaire aspiraten zullen worden verzameld.</li>
	<li>Vergelijkbaar met routinematige transvaginale oöcytophaling13, verzamel de folliculaire aspiraten in 10 ml buizen met ronde bodem, warm gehouden (37 ° C) in een draagbare incubator en onmiddellijk getransporteerd naar het embryologielaboratorium, met een transporttijd van ongeveer 10 minuten.</li>
	<li>Onderzoek de folliculaire vloeistof in een voorbewarmde steriele petrischaal van 90 mm om cumulus-eicelcomplexen (COC) te identificeren. Zodra een COC is gedetecteerd, spoelt u deze af in een centrale putschaal gevuld met 1 ml voorbewarmd Quinn's Advantage Medium met HEPES (aangevuld met 5% HSA).</li>
	<li>Terwijl alle COC's zijn verzameld, plaatst u ze in de 4-wells schaal met het bevruchtingsmedium en labelt u het deksel en de bodem met gegevens met betrekking tot de identiteit van de patiënt.</li>
	<li>Incubeer ze bij 37 °C in een gecontroleerde atmosfeer (6% CO2, 5% O2).</li>
	<li>Zorg ervoor dat een dubbele controle van de procedure wordt uitgevoerd door een tweede lid van het laboratoriumpersoneel.</li>
</ol>9. Oöcyten denudatie
<ol><li>Voer cumulus / coronacellen verwijdering uit binnen 38 uur na de ovulatietrigger.</li>
	<li>Bereid een oplossing van Quinn's Advantage Medium met HEPES (aangevuld met 5% HSA) met Hyaluronidase in een eindconcentratie van 10 IE/ml.</li>
	<li>Bereid een centrale putschotel met 1 ml voorbewarmd Quinn's Advantage Medium met HEPES (aangevuld met 5% HSA) met Hyaluronidase en een andere met 1 ml voorbewarmd HEPES-gebufferd medium (aangevuld met 5% HSA).</li>
	<li>Label de eiceldenudatieschalen met patiëntidentificatiegegevens.</li>
	<li>Plaats COC's in de centrale put met het enzym om de cumuluscellen te dispergeren met een glazen Pasteur-pipet, waarbij de oplossing met COC's voorzichtig op en neer wordt gepipetteerd gedurende maximaal 30 s.</li>
	<li>Verplaats de eicellen naar de tweede centrale putschaal die alleen HEPES-gebufferd medium bevat, zorg ervoor dat een minimale hoeveelheid van het enzym wordt verplaatst.</li>
	<li>Verwijder de resterende coronacellen met behulp van denuding pipetten met afnemende binnendiameters (170-140 μm).</li>
	<li>Beoordeel het stadium van oöcytenrijping, waarbij metafase II (MII) -eicellen, gekenmerkt door de extrusie van het eerste polaire lichaam, worden gescheiden van metafase I-eicellen (MI) en germinale blaasjes (GV).</li>
	<li>Breng de MII-eicellen over in een IVF-kweek 60 mm petrischaal met negen (30 μL) druppels Continuous Single Culture (CSCM) medium (aangevuld met 10% serumvervangend supplement [SSS]) bedekt met 6 ml minerale olie.</li>
	<li>Incubeer ze bij 37 °C in een gecontroleerde atmosfeer (6% CO2, 5% O2).</li>
</ol>10. Verglazing van eicellen
<ol><li>Voer vitrificatie van MII-eicellen uit onmiddellijk na denudatie van de eicel, volgens het protocol van de fabrikant van de vitrificatiekit.</li>
	<li>Breng op kamertemperatuur (25-27 °C): de equilibratieoplossing (ES), de vitrificatieoplossing (VS) en de wasoplossing (WS), bijna 30 minuten voor de procedure. OPMERKING: Zoals gerapporteerd door de fabrikanten, bevat ES 7,5% DMSO, 7,5% ethyleenglycol, 20% dextran serumsupplement (DSS), Gentamicine in M-199 HEPES-gebufferd medium; VS bevat 15% DMSO, 15% ethyleenglycol, 0,5 M sucrose, 20% DSS, Gentamicine in een M-199 HEPES-gebufferd medium en WS bevat 20% DSS, Gentamicine in een M-199 HEPES-gebufferd medium.</li>
	<li>Gebruik voor een cryodevice Cryotop bestaande uit een fijne strook transparante film bevestigd aan een plastic handvat.</li>
	<li>Label de cryodevices met de naam van de patiënt, geboortedatum, ID, datum van cryopreservatie en het aantal eicellen dat op een enkel apparaat is geladen.</li>
	<li>Label de vitrificatieschaal met de naam en ID van de patiënt.</li>
	<li>Zorg ervoor dat een getuige-operator de juiste patiëntgegevens op de cryodevices en schotel controleert.</li>
	<li>Vul een koelbox tot aan de bovenkant met verse vloeibare stikstof en dek af tot gebruik om dispersie en verdamping te minimaliseren.</li>
	<li>Gebruik een stripperpipet met een binnendiameter van 170 μm om beschadiging van eicellen tijdens manipulatie te voorkomen.</li>
	<li>Schud voorzichtig elke injectieflacon met ES, VS en WS om de inhoud voor gebruik te mengen.</li>
	<li>Bereid het deksel van een petrischaaltje van 60 mm met één druppel van 50 μL WS1 (figuur 1A).</li>
	<li>Plaats druppels vlak voor gebruik om mediumverdamping te beperken.</li>
	<li>Neem de eicelschaal uit de couveuse en breng de MII-eicellen (maximaal 3 tegelijk) met minimaal volume medium uit de kweekschaal over in de 50 μL WS.</li>
	<li>Doseer 50 μL druppels WS2, ES1 en ES2 in de nabijheid en breng eicellen over van druppel WS1 naar druppel WS2 (figuur 1B).</li>
	<li>Voeg de druppel van ES1 samen met WS2 en wacht 2 minuten op de spontane vermenging van beide oplossingen.</li>
	<li>Voeg vervolgens de druppel van ES2 samen met de eerder samengevoegde druppels en laat het nog 2 minuten staan.</li>
	<li>Voeg ten slotte een nieuwe 100 μL-druppel ES3 samen met de eerder samengevoegde druppels en laat 1 extra minuut staan.</li>
	<li>Plaats de eicellen gedurende 10 minuten in een druppel van 100 μL ES4 (figuur 1C).</li>
	<li>Doseer twee druppels van 50 μL VS en één 100 μL VS (figuur 1D).</li>
	<li>Verplaats de eicellen sequentieel in de drie druppels VS gedurende 60 s, zodat de eicellen gedurende ~ 20 s in elke druppel blijven.</li>
	<li>Wanneer er nog ongeveer 10 s over zijn voor het einde van de 60 s incubatie, plaatst u het cryodevice onder de microscoop.</li>
	<li>Draag de eicellen aan de punt van de pipet en plaats ze op het cryodevice met de minimale hoeveelheid VS.</li>
	<li>Aspirateer het teveel aan VS, waardoor de eicellen bedekt blijven met een dunne laag VS.</li>
	<li>Dompel het cryodevice direct in vloeibare stikstof en verplaats het snel. Bewaar het apparaat in vloeibare stikstof en bedek het met het beschermende deksel.</li>
	<li>Bewaar het cryodevice in een opslagsysteem (bijv. VisioTube) en plaats het in de cryogene tank. Noteer cryopreservatiegegevens in de laboratoriumdatabase en -blad.</li>
</ol>11. Intramurale postoperatieve zorg
<ol><li>Verwijder de urinekatheter en het vaginale met paraffine gecoate gaas 48 uur na de operatie.</li>
	<li>Verken digitaal de neovagina van de patiënt na de verwijdering en instrueer de patiënt over hoe de digitale verkenning moet worden uitgevoerd. Bedek vervolgens een vaginale mal (9 cm lang en 2 cm in diameter) met oestrogeengel (om epithelisatie te bevorderen) en instrueer de patiënt over het inbrengen en onderhouden van de schimmel.</li>
	<li>Vanaf dag 3 na de operatie en op elke volgende dag, instrueer de patiënt over hoe de schimmel te positioneren en op zijn plaats te houden gedurende ten minste 2 uur per dag.</li>
	<li>Als er geen complicaties optreden, ontsla de patiënt dan op dag 5-6 na de operatie.</li>
</ol>12. Poliklinische postoperatieve zorg
<ol><li>Instrueer de patiënt over hoe neovaginale verwijding gedurende 2 maanden moet worden uitgevoerd met dezelfde mal (9 cm lang en 2 cm in diameter) die tijdens het ziekenhuisverblijf wordt gebruikt, en vervolgens een grotere (11 cm lang en 2,5 cm in diameter).</li>
	<li>Laat de patiënt na het bezoek van 3 maanden beginnen met seksuele activiteit en informeer haar om de mallen te blijven gebruiken op de dagen dat er geen geslachtsgemeenschap is.</li>
</ol>13. Follow-up
<ol><li>Plan follow-upbezoeken op 1, 3, 6 en 12 maanden na de procedure.</li>
	<li>Beoordeel bij elk vervolgbezoek de naleving van verwijdingsoefeningen en vraag de patiënt of ze enige beperking van haar dagelijkse levensactiviteiten, pijn, urinewegsymptomen of seksuele disfunctie heeft ervaren (vanaf het bezoek na de derde maand na de operatie). Voer gynaecologisch onderzoek uit bij elk vervolgbezoek om de vaginale breedte, lengte, suspensie en mobiliteit van de adnexa te meten.</li>
</ol>

<ol><li>Committee on Adolescent Health Care. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ACOG+Committee+Opinion+No.+728%3A+M%C3%BCllerian+Agenesis%3A+Diagnosis%2C+Management%2C+And+Treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Obstetrics+and+Gynecology%22%5BJournal%5D)">ACOG Committee Opinion No. 728: Müllerian Agenesis: Diagnosis, Management, And Treatment.</a> Obstetrics and Gynecology. 131 (1), 35-42 (2018).</li>
<li>Reichman, D. E., Laufer, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mayer-Rokitansky-K%C3%BCster-Hauser+syndrome%3A+Fertility+counseling+and+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Fertility+and+Sterility%22%5BJournal%5D)">Mayer-Rokitansky-Küster-Hauser syndrome: Fertility counseling and treatment.</a> Fertility and Sterility. 94 (5), 1941-1943 (2010).</li>
<li>Ben-Rafael, Z., Bar-Hava, I., Levy, T., Orvieto, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simplifying+ovulation+induction+for+surrogacy+in+women+with+Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction%22%5BJournal%5D)">Simplifying ovulation induction for surrogacy in women with Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser syndrome.</a> Human Reproduction. 13 (6), 1470-1471 (1998).</li>
<li>Beski, S., Gorgy, A., Venkat, G., Craft, I. L., Edmonds, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gestational+surrogacy%3A+a+feasible+option+for+patients+with+Rokitansky+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction%22%5BJournal%5D)">Gestational surrogacy: a feasible option for patients with Rokitansky syndrome.</a> Human Reproduction. 15 (11), 2326-2328 (2000).</li>
<li>Brännström, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Livebirth+after+uterus+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Livebirth after uterus transplantation.</a> Lancet. 385 (9968), 607-616 (2015).</li>
<li>Sreenivas, K., Campo-Engelstein, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Domestic+and+international+surrogacy+laws%3A+implications+for+cancer+survivors%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Treatment+and+Research%22%5BJournal%5D)">Domestic and international surrogacy laws: implications for cancer survivors.</a> Cancer Treatment and Research. 156, 135-152 (2010).</li>
<li>Soderstrom-Anttila, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surrogacy%3A+outcomes+for+surrogate+mothers%2C+children+and+the+resulting+families-a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproductive+Update%22%5BJournal%5D)">Surrogacy: outcomes for surrogate mothers, children and the resulting families-a systematic review.</a> Human Reproductive Update. 22 (2), 260-276 (2016).</li>
<li>Wood, E. G., Batzer, F. R., Corson, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ovarian+response+to+gonadotrophins%2C+optimal+method+for+oocyte+retrieval+and+pregnancy+outcome+in+patients+with+vaginal+agenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction%22%5BJournal%5D)">Ovarian response to gonadotrophins, optimal method for oocyte retrieval and pregnancy outcome in patients with vaginal agenesis.</a> Human Reproduction. 14 (5), 1178-1181 (1999).</li>
<li>Raziel, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surrogate+in+vitro+fertilization+outcome+in+typical+and+atypical+forms+of+Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction%22%5BJournal%5D)">Surrogate in vitro fertilization outcome in typical and atypical forms of Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser syndrome.</a> Human Reproduction. 27 (1), 126-130 (2012).</li>
<li>Egarter, C., Huber, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Successful+stimulation+and+retrieval+of+oocytes+in+patient+with+Mayer-Rokitansky-K%C3%BCster+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Successful stimulation and retrieval of oocytes in patient with Mayer-Rokitansky-Küster syndrome.</a> Lancet. 1 (8597), 1283(1988).</li>
<li>Candiani, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oocyte+retrieval+during+laparoscopic+vaginoplasty+to+reduce+invasiveness+in+the+treatment+of+Mayer-Rokitansky-K%C3%BCster-Hauser+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Minimally+Invasive+Gynecology%22%5BJournal%5D)">Oocyte retrieval during laparoscopic vaginoplasty to reduce invasiveness in the treatment of Mayer-Rokitansky-Küster-Hauser syndrome.</a> Journal of Minimally Invasive Gynecology. 27 (1), 74-79 (2020).</li>
<li>Fedele, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Creation+of+a+neovagina+by+Davydov%27s+laparoscopic+modified+technique+in+patients+with+Rokitansky+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Obstetrics+and+Gynecology%22%5BJournal%5D)">Creation of a neovagina by Davydov's laparoscopic modified technique in patients with Rokitansky syndrome.</a> American Journal of Obstetrics and Gynecology. 202 (1), 1-6 (2010).</li>
<li>ESHRE Working Group on Ultrasound in ART et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+for+good+practice+in+ultrasound%3A+oocyte+pick+up%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction+Open%22%5BJournal%5D)">Recommendations for good practice in ultrasound: oocyte pick up.</a> Human Reproduction Open. 2019 (4), (2019).</li>
<li>Callens, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+update+on+surgical+and+non-surgical+treatments+for+vaginal+hypoplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproductive+Update%22%5BJournal%5D)">An update on surgical and non-surgical treatments for vaginal hypoplasia.</a> Human Reproductive Update. 20 (5), 775-801 (2014).</li>
<li>Sönmezer, M., Gülümser, Ç, Sönmezer, M., Sükür, Y. E., Atabekoğlu, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transabdominal+ultrasound+guided+oocyte+retrieval+using+vaginal+ultrasound+probe%3A+Definition+of+the+technique%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Obstetrics+and+Gynaecology+Research%22%5BJournal%5D)">Transabdominal ultrasound guided oocyte retrieval using vaginal ultrasound probe: Definition of the technique.</a> The Journal of Obstetrics and Gynaecology Research. 47 (2), 800-806 (2021).</li>
<li>Raju, G. A., Haranath, G. B., Krishna, K. M., Prakash, G. J., Madan, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Successful+pregnancy+with+laparoscopic+oocyte+retrieval+and+in+vitro+fertilization+in+Mullerian+agenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Singapore+Medicine+Journal%22%5BJournal%5D)">Successful pregnancy with laparoscopic oocyte retrieval and in vitro fertilization in Mullerian agenesis.</a> Singapore Medicine Journal. 47 (4), 329-331 (2006).</li>
<li>Liszewska-Kapłon, M., Strózik, M., Kotarski, Ł, Bagłaj, M., Hirnle, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mayer-Rokitansky-K%C3%BCster-Hauser+syndrome+as+an+interdisciplinary+problem%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Clinical+and+Experimental+Medicine%22%5BJournal%5D)">Mayer-Rokitansky-Küster-Hauser syndrome as an interdisciplinary problem.</a> Advances in Clinical and Experimental Medicine. 29 (4), 505-511 (2020).</li>
<li>Wagner, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+management+during+the+adolescent+transition+period+of+girls+and+young+women+with+Mayer-Rokitansky-K%C3%BCster-Hauser+syndrome+%28MRKHS%29%3A+A+systematic+literature+review%5BTitle%5D)+AND+%22Orphanet+Journal+of+Rare+Diseases%22%5BJournal%5D)">Treatment management during the adolescent transition period of girls and young women with Mayer-Rokitansky-Küster-Hauser syndrome (MRKHS): A systematic literature review.</a> Orphanet Journal of Rare Diseases. 11 (1), 152(2016).</li>
<li>Bean, E. J., Mazur, T., Robinson, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mayer-Rokitansky-K%C3%BCster-Hauser+syndrome%3A+sexuality%2C+psychological+effects%2C+and+quality+of+life%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pediatric+and+Adolescent+Gynecology%22%5BJournal%5D)">Mayer-Rokitansky-Küster-Hauser syndrome: sexuality, psychological effects, and quality of life.</a> Journal of Pediatric and Adolescent Gynecology. 22 (6), 339-346 (2009).</li>
</ol>

De auteurs hebben geen belangenconflicten om bekend te maken.

Dit protocol vermindert de invasiviteit bij de behandeling van MRKHS door de procedures van vaginoplastiek en het ophalen van eicellen te combineren. Daartoe is het van cruciaal belang dat een speciaal team wordt aangewezen om ervoor te zorgen dat de timing van COS, de chirurgische procedure en de vitrificatie van eicellen efficiënt worden gepland.
MRKHS-patiënten voor wie deze gecombineerde laparoscopische methode naar verwachting het meest gunstig zal zijn, zijn degenen bij wie een transvagi...

Met een incidentie van ongeveer 1 op de 4-10.000 vrouwen is MRKHS de oorzaak van 15% van de gevallen van primaire amenorroe. MRKHS wordt gekenmerkt door de aangeboren afwezigheid van het bovenste segment van de vagina en de baarmoeder, terwijl urineweg- en skeletafwijkingen variabel geassocieerd zijn. Meer specifiek is meestal een vaginaal gewelf met een diepte van 1-2 cm aanwezig en kunnen twee rudimentaire baarmoederhoorns worden gevonden1.
In het verleden was het primaire medische belang in MRKHS om normale geslachtsgemeenschap mogelijk te maken, wat over het algemeen de constructie van een neovagina vereist door niet-chirurgische of chirurgische benaderingen2. De vooruitgang in de reproductieve geneeskunde maakt momenteel echter genetisch moederschap mogelijk bij MRKHS-patiënten, door draagmoederschap 3,4 of - meer recent - baarmoedertransplantatie5. Hoewel baarmoedertransplantatie nog steeds een experimentele procedure is, is draagmoederschap beschikbaar in veel landen wereldwijd6, en gerapporteerde verloskundige en psychosociale uitkomsten zijn vergelijkbaar met die van standaard in-vitrofertilisatie en eiceldonatie7.
Zowel draagmoederschap als baarmoedertransplantatie vereisen het ophalen van eicellen en in-vitrofertilisatie, maar er bestaat geen consensus over hoe het verzamelen van eieren bij patiënten met MRKHS moet worden uitgevoerd. Een transvaginale benadering kan onhaalbaar zijn vanwege onvoldoende vaginale elasticiteit8, zelfs na vaginoplastiek, atypische locatie van de eierstokken9, of overmatige afstand tussen de eierstokken en de vaginale manchet 4,10. In deze gevallen vertegenwoordigt laparoscopische oöcyten ophalen de optimale aanpak in termen van chirurgische toegang. Aangezien de meeste MRKHS-patiënten momenteel laparoscopische neovaginoplastiek ondergaan, raden we echter aan om een laparoscopische eicelrecuperatie uit te voeren op het moment van de operatie voor vaginoplastiek11, gevolgd door cryopreservatie van eicellen voor toekomstig gebruik, waardoor invasiviteit wordt geminimaliseerd terwijl de behandeling van de seksuele en reproductieve functie van MRKHS-patiënten wordt gecombineerd.
Demografische gegevens van patiënten Drieëntwintig MRKH-patiënten ondergingen tot nu toe een behandeling met dit protocol. Anamnestische, instrumentele en laboratoriumbevindingen van patiënten zijn samengevat in tabel 1. Tenzij gespecificeerd in tabel 1, werden geen geassocieerde aangeboren afwijkingen gevonden.

<table><tbody><tr><td>Oocyte retrieval procedure</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Equipment</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>CO2 O2 Incubator</td><td>Sanyo</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Incubator</td><td>Thermo Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Laminar Flow Hood</td><td>Cooper Surgical</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Portable incubator</td><td>Cooper Surgical</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stereomicroscope</td><td>Nikon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Consumables</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>14 mL Polystyrene Round-Bottom Tube</td><td>Falcon</td><td>352057</td><td></td></tr><tr><td>4-well dish</td><td>Nunc</td><td>144444</td><td></td></tr><tr><td>60 mm Petri dish</td><td>Nunc</td><td>FA9150270</td><td></td></tr><tr><td>90 mm Petri dish</td><td>Nunc</td><td>FA9150360</td><td></td></tr><tr><td>Human Serum Albumin 100 mg/ml in Normal Saline (5%)</td><td>Origio</td><td>3001</td><td></td></tr><tr><td>Mineral oil for embryo culture</td><td>Origio</td><td>4008</td><td></td></tr><tr><td>One Well Dish</td><td>Oosafe</td><td>OOPW-CW05</td><td></td></tr><tr><td>Quinn&rsquo;s Advantage Fertilization medium SAGE</td><td>Origio</td><td>1020</td><td></td></tr><tr><td>Quinn&rsquo;s Advantage medium with HEPES</td><td>Origio</td><td>1024</td><td></td></tr><tr><td>Sterile glass pasteur pipettes</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Oocyte denudation</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Equipment</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>CO2 O2 Incubator</td><td>Sanyo</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Flexipet adjustable handle set</td><td>Cook</td><td>G18674</td><td></td></tr><tr><td>Incubator</td><td>Thermo Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Laminar Flow Hood</td><td>Cooper Surgical</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stereomicroscope</td><td>Nikon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Consumables</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>4-well dish</td><td>Nunc</td><td>144444</td><td></td></tr><tr><td>CSCM (Continuos single culture) medium</td><td>Fujifilm irvine Scientific</td><td>90165</td><td></td></tr><tr><td>Human Albumin 100 mg/mL in Normal Saline (5%)</td><td>Origio</td><td>3001</td><td></td></tr><tr><td>Hyaluronidase</td><td>Fujifilm Irvine Scientific</td><td>90101</td><td></td></tr><tr><td>IVF culture 60 mm petri dish</td><td>Nunc</td><td>FA9150270</td><td></td></tr><tr><td>Mineral oil for embryo culture</td><td>Origio</td><td>4008</td><td></td></tr><tr><td>One Well Dish</td><td>Oosafe</td><td>OOPW-CW05</td><td></td></tr><tr><td>Quinn&rsquo;s Advantage medium with HEPES</td><td>Origio</td><td>1024</td><td></td></tr><tr><td>Serum Substitute Supplement</td><td>Fujifilm irvine Scientific</td><td>99193</td><td></td></tr><tr><td>Sterile glass pasteur pipettes</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stripping pipette tips (140 &mu;m)</td><td>Cook</td><td>K-FPIP-1140-10BS-5</td><td></td></tr><tr><td>Stripping pipette tips (170 &mu;m)</td><td>Cook</td><td>K-FPIP-1170-10BS-5</td><td></td></tr><tr><td>Oocyte vitrification</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>35 mm Petri dish</td><td>NUNC</td><td>150255</td><td></td></tr><tr><td>60 mm Petri dish</td><td>NUNC</td><td>150270</td><td></td></tr><tr><td>90 mm Petri dish</td><td>NUNC</td><td>150360</td><td></td></tr><tr><td>Container for Cooling rack</td><td>Kitazato</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cryodevice/cryotop</td><td>Kitazato</td><td>81111</td><td></td></tr><tr><td>Electronic timer</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Flexipet</td><td>COOK</td><td>K- 1000</td><td></td></tr><tr><td>Gilson Pipetman</td><td>Gilson</td><td>F123601</td><td></td></tr><tr><td>Lab Printer LabXpert</td><td>Brady</td><td>XSL-86-461</td><td></td></tr><tr><td>Tips 20-200 &micro;L</td><td>Thermo Scientific</td><td>2160G</td><td></td></tr><tr><td>Tips 2-20 &micro;L</td><td>Thermo Scientific</td><td>2139-HR</td><td></td></tr><tr><td>Visotubes</td><td>Cryo Bio System</td><td>20</td><td></td></tr><tr><td>Vitrification Freeze Kit</td><td>Fujifilm Irvine Scientific</td><td>90133-SO</td><td></td></tr><tr><td>Vitrification Thaw kit</td><td>Fujifilm Irvine Scientific</td><td>90137-SO</td><td></td></tr></tbody></table>

laparoscopische oöcyten ophalen en cryopreservatie tijdens vaginoplastiek voor de behandeling van mayer-rokitansky-kuster-hauser syndroom

Laparoscopic Oocyte Retrieval and Cryopreservation during Vaginoplasty for Treatment of Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser Syndrome

Bij patiënten met het Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser-syndroom (MRKHS) die zijn gepland voor laparoscopische vaginoplastiek en een verlangen hebben naar biologisch moederschap, stellen we voor dat een gelijktijdige laparoscopische eicelrecuperatie voor cryopreservatie wordt uitgevoerd. Het ophalen van eicellen wordt nagestreefd aan het begin van de laparoscopie. Rechts en links 5 mm trocars zijn gepositioneerd, waardoor een 17 G eicelaspiratienaald wordt gebruikt voor het doorprikken van respectievelijk de rechter- en linker eierstokken. Om de blootstelling van de follikels te vergemakkelijken, worden de eierstokken gemobiliseerd en vastgehouden met laparoscopische tangen.
Bij het aspirateren van meerdere follikels in de buurt van elkaar, wordt de naaldpunt in de eierstok vastgehouden om het aantal keren dat de ovariële cortex is gefixeerd te verminderen en vanwege het inherente risico op bloedingen. De volgende stappen zijn ongewijzigd ten opzichte van de Davydov laparoscopisch gemodificeerde techniek voor vaginoplastiek. Voorafgaand aan de operatie wordt gecontroleerde ovariële stimulatie uitgevoerd met een gonadotrofinehormoon-releasing hormoon (Gn-RH) antagonistprotocol, en de gelijktijdige procedure van het ophalen van eicellen en vaginoplastiek is gepland 36 uur na de laatste folliculaire rijpingstrigger. Folliculaire vloeistof wordt verzameld in dezelfde steriele buizen van 10 ml die worden gebruikt tijdens het ophalen van transvaginale eicellen en overgebracht in een opwarmingsblok (37 °C) naar het laboratorium voor geassisteerde voortplanting, waar volwassen (metafase II) eicellen worden verglaasd.
In dit geval werd een reeks van 23 vrouwen met MRKH, eicellen met succes opgehaald en gecryopreserveerd bij alle patiënten; vaginoplastiek werd vervolgens zonder wijzigingen uitgevoerd en de intramurale en poliklinische postoperatieve zorg (dag van verwijdering van de urinekatheter, dag van ontslag uit het ziekenhuis, gebruik van de dilatator en comfort bij follow-up) bleef onaangetast. Eén postoperatieve complicatie trad op bij één patiënt (koorts die zich ontwikkelde op dag 5 na de operatie en intraperitoneale vloeistofdetectie op transabdominale echografie) en verdween na conservatieve behandeling. In plaats van chirurgische vaginoplastiek uit te voeren en het ophalen van eicellen bij MRKH-patiënten uit te stellen, combineert deze aanpak beide procedures in één laparoscopie, waardoor chirurgische invasiviteit en anesthesiologische risico's worden geminimaliseerd.

Tabel 2 bevat ovariële stimulatiegegevens van de patiënten, terwijl de belangrijkste chirurgische en functionele uitkomsten worden beschreven in tabel 3. De gelijktijdige laparoscopische procedures van het ophalen van eicellen en vaginoplastiek werden bij alle patiënten met succes gecombineerd. Gemiddeld werden 11,4 ± 5,4 (gemiddeld ± SD) eicellen opgehaald en 9,6 ± 4,3 MII-eicellen werden gecryopreserveerd (tabel 3). In onze ervaring met cryopreservatie van eicellen bij...

Een toegewijd team kan Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser-patiënten de mogelijkheid bieden om gecontroleerde ovariële stimulatie en cryopreservatie van eicellen uit te voeren op het moment van laparoscopische vaginoplastiek.

Laparoscopische oöcyten ophalen en cryopreservatie tijdens vaginoplastiek voor de behandeling van mayer-rokitansky-kuster-hauser syndroom

In Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser Syndrome (MRKHS) patients who are scheduled for laparoscopic vaginoplasty and have a desire for biological motherhood, ...

Onze aanpak maakt het mogelijk om invasieve ziekte bij de behandeling van het Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser-syndroom te minimaliseren door laparoscopische vaginoplastiek en het ophalen van eicellen te combineren voor toekomstige vruchtbaarheidsbehandelingen. De belangrijkste voordelen van onze aanpak zijn de vereiste voor een enkele anesthesie en het overwinnen van de onhaalbaarheid van een transvaginale oöcyt-retrieval bij jongere Rokitansky-patiënten. De procedure zal worden gedemonstreerd door Diana Delprato, een senior gynaecoloog van onze onvruchtbaarheidseenheid en door Alessandra Alteri en Greta Cermisoni, twee senior klinische embryologen van ons laboratorium voor geassisteerde voortplanting.Start gecontroleerde ovariële stimulatie op dag 14 vanaf de dag van de operatie. Monitor de ovariële respons door seriële transabdominale echografie en gelijktijdige metingen van oestradiol en progesteron. Stel pneumoperitoneum vast met een open techniek.Plaats één 10 millimeter navelstreng voor het inbrengen van de laparoscoop en drie vijf millimeter trocars in het centrale, rechter en linker onderste kwadrant. Gebruik bij laparoscopisch zicht een 17-gauge enkele lumen naald aangesloten op een aspiratiepomp, zoals vaak gebruikt voor transvaginale retrieval door de centrale en linker trocars voor het doorboren van respectievelijk de rechter en linker eierstok. Til de eierstokken op en houd ze vast met een laparoscopische tang om de blootstelling van de follikels te vergemakkelijken.Bij het aspirateren van meerdere follikels die dicht bij elkaar liggen, moet u de naaldpunt in de eierstok behouden om het aantal keren dat de ovariële cortex is gefixeerd en het inherente risico op bloedingen te verminderen. Ontleed het peritoneum door de peritoneale streng dwars tussen de twee rudimentaire baarmoederhoorns op te tillen en in te snijden en vervolgens de incisie lateraal, vooraan en achteraan uit te breiden. Stel het vaginale kuiltje bloot op de perineale benadering en voer een H-vormige incisie uit en creëer een neo-vaginale ruimte door scherpe en stompe dissectie van de vesicorectale ruimte.Trek vervolgens de ontlede peritoneale randen naar beneden naar de rand van het vaginale vestibulum. Positie onderbroken hechtingen in polydioxanone synthetisch absorbeerbaar 3-0 voor de peritoneale vestibulaire anastomose. Begin een tassnaar hechting in polydioxanone synthetisch absorbeerbaar 2-0 monofilament in elk hemipelvis van het gemobiliseerde peritoneum boven de blaas met verbindende transfixie van het ronde ligament, de tubale landengte, het baarmoeder-ovariële ligament en het laterale peritoneale blad.Neem vervolgens in de twee hechtingen het laterale aspect van het mesorectum en het voorste aspect van de rectale serosa direct onder de rectosigmoïde junctie op. Plaats ten slotte een met paraffine gecoat gaas in het peritoneum gecoate neovagina. Verzamel de folliculaire aspiraten in 10 millimeter buizen met ronde bodem die warm worden gehouden in een draagbare incubator en transporteer ze onmiddellijk naar het embryologielaboratorium met een transporttijd van ongeveer 10 minuten.Terwijl alle cumulus-eicelcomplexen worden verzameld, plaatst u ze in de schotel met vier putten met het bevruchtingsmedium en labelt u het deksel en de bodem met gegevens met betrekking tot de identiteit van de patiënt. Incubeer ze bij 37 graden Celsius in een gecontroleerde atmosfeer met 6% koolstofdioxide en 5% zuurstof. Zorg ervoor dat een dubbele controle van de procedure wordt uitgevoerd door een tweede lid van het laboratoriumpersoneel.Voer cumulus-coronacellen te verwijderen binnen 38 uur na de ovulatietrigger. Plaats cumulus-eicelcomplexen in de centrale put die het enzym bevat om de cumuluscellen te dispergeren met een glazen Pasteur-pipet, waarbij de oplossing met cumulus-eicelcomplexen voorzichtig op en neer wordt gepipetteerd gedurende maximaal 30 seconden. Verplaats de eicellen naar de tweede centrale putschaal met alleen HEPES gebufferd medium, zorg ervoor dat een minimale hoeveelheid van het enzym wordt verplaatst.Verwijder de resterende coronacellen met behulp van ontnuding pipetten met afnemende binnendiameters. Beoordeel het stadium van de rijping van de eicel, waarbij metafase II-eicellen worden gescheiden. Breng de metafase II-eicellen over in een IVF-kweek petrischaal van 60 millimeter met negen druppels continu enkelkweekmedium bedekt met zes millimeter minerale olie.Incubeer ze bij 37 graden Celsius in een gecontroleerde atmosfeer met 6% koolstofdioxide en 5% zuurstof. Vul een koelbox tot aan de bovenkant met verse vloeibare stikstof en dek af totdat het wordt gebruikt om dispersie en verdamping te minimaliseren. Gebruik een stripperpipet met een binnendiameter van 170 micrometer om beschadiging van eicellen tijdens manipulatie te voorkomen.Schud voorzichtig elke injectieflacon met equilibratieoplossing, vitrificatieoplossing en wasoplossing om de inhoud voor gebruik te mengen. Bereid het deksel van een petrischaaltje van 60 milliliter met één druppel van 50 microliter wasoplossing één. Plaats druppels vlak voor gebruik om mediumverdamping te beperken.Neem de eicelschaal uit de incubator en breng de metafase II-eicellen met een minimaal volume medium van de kweekschaal over in de 50 microliter wasoplossing. Doseer 50-microliter druppels wasoplossing twee, equilibratieoplossing één en equilibratieoplossing twee in de nabijheid en breng eicellen over van druppelwasoplossing één naar druppelwasoplossing twee. Voeg de druppel equilibratieoplossing één samen met wasoplossing twee en wacht twee minuten op de spontane menging van beide oplossingen.Voeg vervolgens de druppel van equilibratieoplossing twee samen met de eerder samengevoegde druppels en laat nog eens twee minuten staan. Voeg ten slotte een nieuwe 100-microliter druppel van equilibratieoplossing drie samen met de eerder samengevoegde druppels en laat een extra minuut staan. Plaats de eicellen gedurende 10 minuten in een druppel van 100 microliter equilibratieoplossing vier.Doseer twee druppels vitrificatieoplossing van 50 microliter en één druppels vitrificatieoplossing van 100 microliter. Verplaats de eicellen sequentieel in de drie druppels vitrificatieoplossing gedurende 60 seconden, zodat de eicellen ongeveer 20 seconden in elke druppel blijven. Wanneer er nog ongeveer 10 seconden over zijn voor het einde van de 60 seconden incubatie, plaatst u het cryodevice onder de microscoop.Draag de eicellen aan de punt van de pipet en plaats ze op het cryodevice met de minimale hoeveelheid vitrificatieoplossing. Aspirateer de overtollige vitrificatieoplossing, waardoor de eicellen bedekt blijven met een dunne laag vitrificatieoplossing. Dompel het cryodevice direct in vloeibare stikstof en verplaats het snel.Bewaar het apparaat in vloeibare stikstof en bedek het met een beschermend deksel. De gelijktijdige laparoscopische procedures van het ophalen van eicellen en vaginoplastiek werden bij alle patiënten met succes gecombineerd. Gemiddeld werden 11,4 5,4 eicellen opgehaald en 9,6 4,3 M2 eicellen werden cryo-geconserveerd.De totale gemiddelde operatietijd was 114 17 minuten. Intraoperatief bloedverlies was onbeduidend bij alle patiënten en er werden geen intraoperatieve bijwerkingen waargenomen. Op dag drie na de operatie begonnen de patiënten dagelijks met het gebruik van de dilatator en werden ze ontslagen op dag 6.0 1.0.Een voorzichtige aspiratie van follikels in de eierstok wordt aanbevolen, met de nodige aandacht voor de automatische mobilisatie van de eierstokken om optimale toegang en ophalen te garanderen.

laparoscopic-oocyte-retrieval-cryopreservation-during-vaginoplasty

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

In vitro rijping (IVM) vóór gynaecologische operatie (OP-IVM) combineert IVM na het ophalen van eicellen met routinematige gynaecologische chirurgie en dient als een uitbreiding van conventionele IVM-toepassingen voor vruchtbaarheidsbehoud.

OP-IVM: In vitro rijping combineren na oöcyten ophalen met gynaecologische chirurgie

Oöcyt cryopreservatie wordt erkend door verschillende internationale wetenschappelijke verenigingen als de gouden standaard voor vruchtbaarheidsbehoud bij postpubertale vrouwen. De aangewezen klinische en laboratoriumstrategieën verzekeren maximumeffectiviteit, efficiency, en veiligheid van vruchtbaarheidsbehoudsbehandelingen.

Vruchtbaarheidsbehoud door oöcyt vitrificatie: klinische en laboratoriumperspectieven

We presenteren details over laboratoriumprocedures voor geneesmiddelvrije in-vitroactivatie (IVA) van ovariële follikels voor patiënten met ernstige ovariële disfunctie. Deze methode zou het aantal opvraagbare oöcyten per ovariële hyperstimulatie kunnen verhogen en het vruchtbaarheidsbehoud voor die patiënten ten goede komen.

Vruchtbaarheidsbehoud bij patiënten met ernstige ovariële disfunctie

Het huidige protocol beschrijft een methode voor het beoordelen van de ovariële reserve bij patiënten jonger dan 25 jaar die vruchtbaarheidsbehoud nodig hebben door cryopreservatie van eierstokweefsel. Deze methode omvat: (1) histologische beoordeling van de ovariële reserve in corticale monsters, (2) vergelijking met een referentiedataset en (3) berekening van Z-scores.

Z-scores voor het beoordelen van de ovariële reserve bij jonge patiënten die vruchtbaarheidsbehoud ondergaan

Een protocol voor de vitrificatie van eierstokweefsel, als een alternatieve cryopreservatiemethode voor het veelgebruikte langzame invriesprotocol, wordt gepresenteerd.

Verglazing van het weefsel van de eierstokschors om een glazige staat van aggregatie te bereiken

Hier presenteren we een geoptimaliseerde methode voor het onmiddellijk verwijderen van een deel van de cumulus-eicelcomplexen na het ophalen van eieren om het IVF-observatieproces te versnellen, de tijd die nodig is voor het verwijderen van granulosacellen te verkorten, de blootstelling van eicellen aan externe elementen te minimaliseren en de ontwikkeling van embryo's niet te belemmeren, wat uiteindelijk de efficiëntie van IVF-laboratoriumprocedures verbetert.

De onmiddellijke gedeeltelijke verwijdering van cumulus-eicelcomplexen: een verfijnde aanpak voor snelle observatie van in-vitrofertilisatie

We beschrijven een protocol om humane amnion-epitheelcellen (hAEC's) te isoleren en te kweken met behulp van dierlijk productvrije reagentia in overeenstemming met de richtlijnen voor goede fabricagepraktijken (cGMP).

Isolatie, cryopreservatie en cultuur van de mens Amnion epitheelcellen voor klinische toepassingen

Dit protocol beschrijft een procedure om de evolutie van mesiale netwerkmaatregelen bij patiënten met temporale lobe epilepsie (TLE) te volgen. Het is gebaseerd op de combinatie van intracraniale opnamen met een nieuwe numerieke techniek voor gegevensanalyse. Specifiek presenteren we een protocol voor netwerkanalyses van foramen ovale opnamen.

Network Analysis van foramen Ovale elektrode Recordings in Resistente temporale lob epilepsiepatiënten

Hier presenteren we een protocol van de transaxillaire resectie van de eerste rib voor de behandeling van het thoracic outlet-syndroom veroorzaakt door compressie van de plexus brachialis, de ader subclavia en de slagader.

Transaxillaire eerste ribresectie voor de behandeling van het thoracic outlet syndroom

Hier presenteren we een protocol om het chirurgische gezichtsveld te verhogen en de moeilijkheid van totale transperitoneale laparoscopische nephroureterectomie-chirurgie te verminderen door het navelstreng te behandelen voordat de Terminal ureter wordt behandeld.

Technische modificatie van de Terminal ureter tijdens totale transperitoneale laparoscopische Nephroureterectomie voor de bovenste urinewegen Urotheelcarcinoom

Leer een gecombineerde laparoscopische vaginoplastiek met oöcytenopvang en cryopreservatie voor MRKH-patiënten. Deze methode vermindert invasieve ingrepen en behoudt toekomstige vruchtbaarheidsopties met slechts één anesthesie.

Laparoscopische oöcyten ophalen en cryopreservatie tijdens vaginoplastiek voor de behandeling van mayer-rokitansky-kuster-hauser syndroom (Video) | JoVE Journal

Laparoscopische oöcyten ophalen en cryopreservatie tijdens vaginoplastiek voor de behandeling van mayer-rokitansky-kuster-hauser syndroom

Meer video's verkennen