Name: Een calciumfosfaat-geïnduceerd muis abdominaal aorta-aneurysma model (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-11-18T13:50:00.000+00:00
Duration: 5 min 14 s
Description: Leer een calciumfosfaat-geïnduceerd abdominaal aorta-aneurysma muismodel met C57BL6J muizen. Deze snelle, kosteneffectieve methode ondersteunt onderzoek naar pathologische mechanismen en therapeutische strategieën.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit onderzoek werd ondersteund door financiering van de National Natural Science Foundation of China (NSFC, 81730010, 91839302, 81921001, 31930056 en 91529203) en het National Key R &D Program of China (2019YFA 0801600).

Dierstudies werden uitgevoerd in overeenstemming met de richtlijnen van de Institutional Animal Care and Use Committee van het Peking University Health Science Center en werden goedgekeurd door de Biomedical Ethics Committee van de Universiteit van Peking (LA2015142). Alle muizen voor een operatie werden verdoofd met isofluraan (1,5% -2%) en de anesthesie werd zorgvuldig gecontroleerd om pijn of ongemak voor de muizen te voorkomen.
1. Voorbereiding
<ol><li>Snijd 0,3 cm brede stroken poedervrije rubberen handschoenen en gaas.</li>
	<li>Koop 8-10 weken oude C57BL / 6J mannelijke muizen. Huis de dieren in een omgeving met airconditioning met een licht-donkercyclus van 12 uur en gratis toegang tot voedsel en water.</li>
	<li>Autoclaaf het gaas, wattenstaafjes, scharen en tang voorafgaand aan de operatie.</li>
	<li>Verkrijg betadine, 70% ethanol en antiseptische handwas.</li>
	<li>Zet een masker, toga en steriele handschoenen op.</li>
</ol>2. Chirurgische ingreep
<ol><li>Voer kauwtabletten (dosis van 5 mg/kg) 2-4 uur vóór de operatie aan een 8-10 weken oude C57BL/6J-muis. Plaats de muis vervolgens in een inductiekamer (206 mm x 210 mm x 140 mm) met isofluraan met een stroomsnelheid van 1,5% -2%.<ol><li>Houd de muis ongeveer 5 minuten in de gaten totdat de ademhaling zichtbaar is vertraagd. Zorg ervoor dat de muis geen reactie heeft op pijnstimulatie vóór de operatie.</li>
	</ol></li>
	<li>Breng een oogzalf aan op de ogen en zorg voor thermische ondersteuning met een verwarmingskussen of deken. Bevestig de diepte van de anesthesie met een teenknijper om de 15 minuten tijdens de chirurgische procedure.</li>
	<li>Scheer de buikhaar van de muis met een elektrische tondeuse of ontharingscrème. Wattenstaaf en veeg het geschoren gebied af met betadine, gevolgd door 70% ethanol, meerdere keren in een cirkelvormige beweging. Wissel handschoenen om de steriliteit te behouden.</li>
	<li>Gebruik een schaar om een incisie van ~ 1,5 cm te maken in de onderbuik langs de middellijn van de buik.</li>
	<li>Gebruik een steriel wattenstaafje bevochtigd met normale zoutoplossing om de darm voorzichtig te verwijderen totdat de infraroodaorta zichtbaar is.</li>
	<li>Ontleed het bindweefsel en vet uit de infraroodaorta gedurende een sectie van ongeveer 0,5 cm. Let op de kleine vaten aan de dorsale kant en vermijd scheuren. Het is niet nodig om de abdominale aorta te scheiden van de abdominale hoofdader.</li>
	<li>Verpak een stuk van de met zoutoplossing doordrenkte rubberen handschoenentrip onder de abdominale aorta en de abdominale hoofdader. Gebruik een wattenstaafje om overtollige vloeistof af te vegen.</li>
	<li>Verpak een stuk gaas gedrenkt met 0,5 M CaCl2 op de adventitia van de infrarood buikvaculatuur gedurende 10 min. Vervang voor de schijnmuisgroep de 0,5 M CaCl2 door een normale zoutoplossing.</li>
	<li>Verwijder het gaas en pak nog een stuk gaas gedrenkt in PBS-oplossing gedurende 5 minuten om CaPO4-kristallen in situ te genereren in de adventitia van de aorta.</li>
	<li>Verwijder voorzichtig de rubberen handschoenentrip en het gaas. Reset het darmkanaal van de muis.</li>
	<li>Hecht de buikincisie en de huid met een 5-0 hechting.</li>
	<li>Plaats de muis op een verwarmingskussen totdat de muis weer bij bewustzijn is. Zorg voor postoperatieve pijnherstelhuisvesting en analgesie, volgens de lokale commissie voor dierenethiek.</li>
	<li>Huis de muis nog 14 dagen. Houd de muis na de operatie nauwlettend in de gaten en observeer daarna minstens 1x per dag. Voer onmiddellijk een obductie uit als er muizen sterven tijdens deze periode.</li>
</ol>3. Oogsten voor beeldvorming van aorta's
<ol><li>Offer 14 dagen na de operatie de muizen op met CO2.</li>
	<li>Knip de thoracale en buikholtes van de muis ventraal open en snijd het rechter atrium open.</li>
	<li>Perfuseer de muizen met PBS-buffer door de linker ventrikel van het hart om bloed in de aorta te verwijderen en perfuseer vervolgens met 4% paraformaldehyde zoals eerder beschreven8.</li>
	<li>Oogst de aorta onder de stereoscoop.</li>
	<li>Plaats geoogste aorta's in buizen met 5 ml 4% paraformaldehyde gedurende 48 uur.</li>
	<li>Verwijder adventsweefsel en vet voorzichtig onder de stereoscoop en speld de aorta op een zwarte wasplaat met insectennaalden.</li>
	<li>Verkrijg aortabeelden.</li>
</ol>4. Evaluatie van de afbraak van de elastische vezels
<ol><li>Snijd de aorta-aneurysmaweefsels in seriële cryosecties (7 μm dik).</li>
	<li>Analyseer de elastische vezels met behulp van een commerciële elastische van Gieson (EVG) kleuringskit volgens het protocol van de fabrikant.</li>
	<li>Beoordeel de elastineafbraak. Graad 1: <25% afbraak; graad 2: 25% tot 50% afbraak; graad 3: 50% tot 75% afbraak; of graad 4: > 75% afbraak.</li>
</ol>

<ol><li>Kent, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Abdominal+aortic+aneurysms%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Abdominal aortic aneurysms.</a> The New England Journal of Medicine. 371, 2101-2108 (2014).</li>
<li>Patelis, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+in+the+research+of+abdominal+aortic+aneurysms+development%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Research%22%5BJournal%5D)">Animal models in the research of abdominal aortic aneurysms development.</a> Physiological Research. 66 (6), 899-915 (2017).</li>
<li>Gertz, S. D., Kurgan, A., Eisenberg, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aneurysm+of+the+rabbit+common+carotid+artery+induced+by+periarterial+application+of+calcium-chloride+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Aneurysm of the rabbit common carotid artery induced by periarterial application of calcium-chloride in vivo.</a> Journal of Clinical Investigation. 81 (3), 649-656 (1988).</li>
<li>Yamanouchi, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accelerated+aneurysmal+dilation+associated+with+apoptosis+and+inflammation+in+a+newly+developed+calcium+phosphate+rodent+abdominal+aortic+aneurysm+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Vascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Accelerated aneurysmal dilation associated with apoptosis and inflammation in a newly developed calcium phosphate rodent abdominal aortic aneurysm model.</a> Journal of Vascular Surgery. 56 (2), 455-461 (2012).</li>
<li>Wang, Y. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+apolipoprotein+E%2C+age+and+aortic+site+on+calcium+phosphate+induced+abdominal+aortic+aneurysm+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">Influence of apolipoprotein E, age and aortic site on calcium phosphate induced abdominal aortic aneurysm in mice.</a> Atherosclerosis. 235 (1), 204-212 (2014).</li>
<li>Zhao, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unspliced+xbp1+confers+VSMC+homeostasis+and+prevents+aortic+aneurysm+formation+via+foxo4+interaction%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Unspliced xbp1 confers VSMC homeostasis and prevents aortic aneurysm formation via foxo4 interaction.</a> Circulation Research. 121 (12), 1331-1345 (2017).</li>
<li>Jia, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+macrophage+TFEB-14-3-3+epsilon+interface+by+naringenin+inhibits+abdominal+aortic+aneurysm%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Discovery%22%5BJournal%5D)">Targeting macrophage TFEB-14-3-3 epsilon interface by naringenin inhibits abdominal aortic aneurysm.</a> Cell Discovery. 8 (1), 21(2022).</li>
<li>Gage, G. J., Kipke, D. R., Shain, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole+animal+perfusion+fixation+for+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Whole animal perfusion fixation for rodents.</a> Journal of Visualized Experiments. (65), e3564(2012).</li>
<li>Yu, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CYLD+deubiquitinates+nicotinamide+adenine+dinucleotide+phosphate+oxidase+4+contributing+to+adventitial+remodeling%5BTitle%5D)+AND+%22Arteriosclerosis%2C+Thrombosis%2C+and+Vascular+Biology%22%5BJournal%5D)">CYLD deubiquitinates nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase 4 contributing to adventitial remodeling.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 37 (8), 1698-1709 (2017).</li>
<li>Altobelli, E., Rapacchietta, L., Profeta, V. F., Fagnano, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Risk+factors+for+abdominal+aortic+aneurysm+in+population-based+studies%3A+A+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Environmental+Research+and+Public+Health%22%5BJournal%5D)">Risk factors for abdominal aortic aneurysm in population-based studies: A systematic review and meta-analysis.</a> International Journal of Environmental Research and Public Health. 15 (12), 2805(2018).</li>
<li>Theivacumar, N. S., Stephenson, M. A., Mistry, H., Valenti, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabetes+mellitus+and+aortic+aneurysm+rupture%3A+A+favorable+association%5BTitle%5D)+AND+%22Vascular+and+Endovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Diabetes mellitus and aortic aneurysm rupture: A favorable association.</a> Vascular and Endovascular Surgery. 48 (1), 45-50 (2014).</li>
<li>Tanaka, T., Takei, Y., Yamanouchi, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperglycemia+suppresses+calcium+phosphate-induced+aneurysm+formation+through+inhibition+of+macrophage+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Heart+Association%22%5BJournal%5D)">Hyperglycemia suppresses calcium phosphate-induced aneurysm formation through inhibition of macrophage activation.</a> Journal of the American Heart Association. 5 (3), 003062(2016).</li>
<li>Lu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subcutaneous+angiotensin+II+infusion+using+osmotic+pumps+induces+aortic+aneurysms+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Subcutaneous angiotensin II infusion using osmotic pumps induces aortic aneurysms in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (103), e53191(2015).</li>
<li>Urry, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neutral+sites+for+calcium+ion+binding+to+elastin+and+collagen%3A+A+charge+neutralization+theory+for+calcification+and+its+relationship+to+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Neutral sites for calcium ion binding to elastin and collagen: A charge neutralization theory for calcification and its relationship to atherosclerosis.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 68 (4), 810-814 (1971).</li>
<li>Li, Z. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Runx2+%28runt-related+transcription+factor+2%29-mediated+microcalcification+is+a+novel+pathological+characteristic+and+potential+mediator+of+abdominal+aortic+aneurysm%5BTitle%5D)+AND+%22Arteriosclerosis%2C+Thrombosis%2C+and+Vascular+Biology%22%5BJournal%5D)">Runx2 (runt-related transcription factor 2)-mediated microcalcification is a novel pathological characteristic and potential mediator of abdominal aortic aneurysm.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 40 (5), 1352-1369 (2020).</li>
<li>Kelly, M. J., Igari, K., Yamanouchi, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteoclast-like+cells+in+aneurysmal+disease+exhibit+an+enhanced+proteolytic+phenotype%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Osteoclast-like cells in aneurysmal disease exhibit an enhanced proteolytic phenotype.</a> International Journal of Molecular Sciences. 20 (19), 4689(2019).</li>
</ol>

Periaortische toepassing van CaPO4 is een robuuste aanpak om AAA bij muizen te induceren. Verschillende studies hebben het CaPO4-model gebruikt en consequent gemeld dat dit een snelle en reproduceerbare methode is om AAA te bestuderen bij muizen 7,9. Dit model wordt beschouwd als een samenvatting van een deel van de kenmerken van menselijk aorta-aneurysma en biedt mechanistische inzichten in AAA-pathogenese, waaronder ontsteking en extracell...

Een abdominaal aorta-aneurysma (AAA) is een dodelijke hart- en vaatziekte die wordt gekenmerkt door permanente verwijding van de abdominale aorta, met hoge sterftecijfers zodra breuk optreedt. AAA wordt geassocieerd met veroudering, roken, mannelijk geslacht, hypertensie en hyperlipidemie1. Van verschillende pathologische processen is aangetoond dat ze bijdragen aan AAA-vorming, waaronder extracellulaire matrixvezelproteolyse, immuuncelinfiltratie en verlies van vasculaire gladde spiercellen. Momenteel blijven de pathologische mechanismen van AAA ongrijpbaar en zijn er geen bewezen geneesmiddelen voor de behandeling van AAA1. Onderzoek naar menselijke AAA is beperkt vanwege het bestaan van weinig menselijke aortamonsters; daarom zijn verschillende door chemische modificatie geïnduceerde dierlijke AAA-modellen vastgesteld en op grote schaal toegepast, waaronder subcutane angiotensine II (AngII) infusie, perivasculaire of intraluminale elastase-incubatie en perivasculaire calciumfosfaattoepassing2. Een veelgebruikt muismodel is de toepassing van calciumfosfaat (CaPO4) op de adventitia van de infrarood abdominale aorta, die kosteneffectief is en geen genetische modificatie vereist.
Directe periaortische toepassing van CaCl2 op de halsslagader van konijnen om aneurysmale verandering te induceren werd aanvankelijk gemeld door Gertz et al.3 en werd later toegepast op de abdominale aortatas van muizen. Het model is ontwikkeld door Yamanouchi et al. om de aortadilatatie te versnellen door CaPO4-kristallen in muizen4 te gebruiken. Infiltratie van CaPO4 in muizenaortavat veel pathologische kenmerken die zijn waargenomen in menselijke AAAs, waaronder diepgaande macrofaaginfiltratie, extracellulaire matrixafbraak en calciumafzetting. De risicofactoren van menselijke AAA, zoals hyperlipidemie, vergroten ook CaPO 4-geïnduceerde AAA bij muizen5. In tegenstelling tot AngII perfusie-geïnduceerde AAA bij ApoE-/- of LDLR-/- muizen, komt CaPO 4-geïnduceerde AAA voor in het infraroodaortagebied, dat menselijke AAA nabootst. Momenteel is deze methode op grote schaal toegepast om de gevoeligheid voor AAA-ontwikkeling bij genetisch gemodificeerde muizen te beoordelen en de anti-AAA-effecten van geneesmiddelente evalueren 6,7.

<table><tbody><tr><td>CaCl2</td><td>MECKLIN</td><td>C805225</td><td></td></tr><tr><td>NaCl</td><td>Biomed</td><td>SH5001-01</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>HARVEYBIO</td><td>MB5051</td><td></td></tr><tr><td>Small animal ventilator</td><td>RWD</td><td>H1550501-012</td><td></td></tr></tbody></table>

een calciumfosfaat-geïnduceerd muis abdominaal aorta-aneurysma model

A Calcium Phosphate-Induced Mouse Abdominal Aortic Aneurysm Model

Een abdominaal aorta-aneurysma (AAA) is een levensbedreigende hart- en vaatziekte die wereldwijd voorkomt en wordt gekenmerkt door onomkeerbare verwijding van de abdominale aorta. Momenteel worden verschillende chemisch geïnduceerde murine AAA-modellen gebruikt, die elk een ander aspect van de pathogenese van AAA simuleren. Het calciumfosfaat-geïnduceerde AAA-model is een snel en kosteneffectief model in vergelijking met de angiotensine II- en elastase-geïnduceerde AAA-modellen. De toepassing van CaPO4-kristallen op de aorta van de muis resulteert in elastische vezelafbraak, verlies van gladde spiercellen, ontsteking en calciumafzetting geassocieerd met aortaverwijding. Dit artikel introduceert een standaardprotocol voor het CaPO 4-geïnduceerde AAA-model. Het protocol omvat materiaalvoorbereiding, de chirurgische toepassing van de CaPO4 op de adventitia van de infrarood abdominale aorta, het oogsten van aorta's om aorta-aneurysma's te visualiseren en histologische analyses bij muizen.

14 dagen na capo4-toepassing werden de C57BL/6J-mannetjesmuizen geëuthanaseerd en hun aorta's geoogst en gereinigd. De morfologie van de aorta's werd in beeld gebracht om AAA-formatie te visualiseren. Zoals te zien is in figuur 1A-B, leidde de toepassing van CaPO4 tot verwijding van de infrarood abdominale aorta. Histologisch resulteerde CaPO4 in een dramatische afbraak van elastische vezels, zoals geïllustreerd door elastine...

Dit protocol beschrijft een calciumfosfaat-geïnduceerd abdominaal aorta-aneurysma (AAA) muismodel om de pathologische kenmerken en moleculaire mechanismen van AAAs te bestuderen.

Een calciumfosfaat-geïnduceerd muis abdominaal aorta-aneurysma model

An abdominal aortic aneurysm (AAA) is a life-threatening cardiovascular disease that occurs worldwide and is characterized by irreversible dilation of the ...

Dit protocol beschrijft het calciumfosfaat geïnduceerde abdominale aorta-aneurysma triple A muismodel om de pathologische kenmerken in de moleculaire mechanismen van abdominaal aorta-aneurysma te bestuderen. Het calciumfosfaat geïnduceerde abdominale aorta-aneurysmamodel is een snel en kosteneffectief model in vergelijking met de angiotensinebuis en de door elastase geïnduceerde abdominale aorta-aneurysmamodellen. Het demonstreren van de procedure zal Zeyu Cai zijn, post-arts hier, een fellow van ons laboratorium.Snijd om te beginnen 0,3 centimeter brede stroken poedervrije rubberen handschoenen en gaas. Koop vervolgens acht tot tien weken oude C57BL6J Mayo-muizen en huisvest de dieren in een omgeving met airconditioning met een 12 uur durende lichte donkere cyclus en gratis toegang tot voedsel en water. Autoclaaf vervolgens het gaas, wattenstaafjes, scharen en tang voorafgaand aan de operatie en verkrijg Betadine, 70% ethanol en antiseptische handwas.Scheer de buikhaar van de verdoofde muis met een elektrische tondeuse of ontharingscrème. Veeg vervolgens het geschoren gebied af met Betadine, gevolgd door 70% ethanol meerdere keren in een cirkelvormige beweging. Maak vervolgens een incisie van ongeveer 1,5 centimeter bij de onderbuik langs de middellijn van de buik met behulp van een schaar.Gebruik een steriel wattenstaafje bevochtigd met normale zoutoplossing en verwijder voorzichtig de darm totdat de infraroodaorta zichtbaar is. Ontleed vervolgens het bindweefsel en vet uit de infraroodaorta voor een gedeelte van ongeveer 0,5 centimeter terwijl u scheuren in de kleine bloedvaten naar de dorsale kant vermijdt. Pak vervolgens een stuk van de met zoutoplossing doordrenkte rubberen handschoenentrip onder de abdominale aorta en de abdominale hoofdader terwijl je overtollige vloeistof afveegt met een wattenstaafje.Pak daarna een stuk gaas gedrenkt met 0,5 molair calciumchloride op de adventitia van de infrarood abdominale vasculatuur gedurende 10 minuten. Verwijder het gaas en pak een ander stuk gaas gedrenkt in PBS-oplossing gedurende vijf minuten om calciumorthopetumen in C2 te genereren in de adventitia van de aorta. Verwijder vervolgens voorzichtig de rubberen handschoenentrip en het gaas.Na het resetten van het darmkanaal van de muis, hecht de buikincisie en de huid met een hechting van vijf nul. Plaats de muis vervolgens op een verwarmingskussen totdat de muis weer bij bewustzijn komt. Huis de muis nog 14 dagen en houd de muis na de operatie nauwlettend in de gaten en observeer daarna minstens elke dag.Snijd na 14 dagen van de operatie de geëuthanaseerde thoracale en buikholtes van de muis ventraal open en snijd het rechter atrium open. Overvloedig de muizen met PBS-buffer door de linker ventrikel van het hart om bloed in de aorta te verwijderen en vervolgens te perfuseren met 4% paraformaldehyde zoals beschreven in het manuscript. Verwijder adventsweefsel en vet voorzichtig onder een stereomicroscoop.Oogst vervolgens de aorta en plaats deze gedurende 48 uur in een buis met vijf milliliter 4% paraformaldehyde. Speld de aorta vervolgens op een zwarte wasplaat met insectennaalden en ga verder met het verkrijgen van aortabeelden. Na 14 dagen calciumorthopfosfaattoepassing werd de morfologie van de aorta's in beeld gebracht om de vorming van abdominale aorta-aneurysma's te visualiseren.Er werd waargenomen dat calciumorthopfosfaat leidde tot verwijding van de infrarood abdominale aorta en resulteerde in een dramatische afbraak van elastische vezels zoals geïllustreerd door elastinebreuken. Gebruik een steriel wattenstaafje bevochtigd met normale zoutoplossing om de darm te verwijderen totdat de infraroodaorta zichtbaar is en extraheert vervolgens het bindweefsel en het vet uit de infraroodaorta. Over het algemeen is het door calciumfosforaat geïnduceerde muizen abdominale aorta-aneurysmamodel een snelle en kosteneffectieve benadering om moleculaire mechanismen en de therapeutische strategieën van abdominaal aorta-aneurysma te onderzoeken en kan parallel met de andere modellen worden toegepast om de kenmerken van menselijk abdominaal aorta-aneurysma volledig te imiteren.

a-calcium-phosphate-induced-mouse-abdominal-aortic-aneurysm-model

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

Deze video laat zien hoe u abdominale aorta-aneurysma (AAA) te induceren in muizen via voorbijgaande intraluminale infusie van varkens pancreas elastase in de infrarenale segment van de abdominale aorta. Het model heeft de mogelijkheid om breed inzicht toe te voegen in de pathobiologie van AAA te wijten aan de opkomst van tal van transgene en knockout muizen.

Creatie van Muizen Experimentele abdominale aorta-aneurysma met Elastase

Dit artikel beschrijft een gedetailleerde methodologie van het gebruik van een radiopaak loodhoudende silicone rubber te perfuse de lymfkliertest therapieën voor de diameter van de aorta kwantificering in een muismodel van aorta aneurysma en dissectie.

Kwantitatieve analyse van de Micro-CT van Aortopathy in een muismodel van β-aminopropionitrile-geïnduceerde aorta aneurysma en dissectie

Dit nieuwe model creëert robuuste infrarenal abdominale aneurysmata in varkens met behulp van een combinatie van ballon angioplastiek, elastase/Collagenase perfusie, actuele elastase toepassing, en mondelinge samengestelde β-aminopropionitrile administratie, die interfereert met de cross-linking van collageen.

Varkens model van Infrarenal abdominaal aorta aneurysma

Het huidige protocol beschrijft een gestandaardiseerde chirurgische methode voor het elastase-geïnduceerde AAA-model door de directe toepassing van elastase op de adventitia van infrarode abdominale aorta bij muizen.

Muis Abdominale Aorta Aneurysma Model Geïnduceerd door Perivasculaire Toepassing van Elastase

Dit manuscript presenteert een protocol voor het opstellen van een abdominaal aorta-aneurysmamodel van muizen met behulp van calciumchloride en elastase, waarbij de voordelen van eerdere modelleringsmethoden worden gecombineerd. Dit model kan worden gebruikt om de pathofysiologische mechanismen te onderzoeken die ten grondslag liggen aan abdominale aorta-aneurysma's.

Een abdominaal aorta-aneurysmamodel van muizen door periadventitiële infiltratie van calciumchloride en elastase

Dit protocol beschrijft een methodische chirurgische benadering voor het modelleren van geavanceerde abdominale aorta-aneurysma's bij muizen door een combinatie van het rechtstreeks aanbrengen van elastase op de infrarenale aorta en het toedienen van ß-aminopropionitril via drinkwater.

Geavanceerde modellering van abdominale aorta-aneurysma's bij muizen door combinatie van topisch elastase en oraal ß-aminopropionitril

Dit protocol biedt een herhaalbare en betrouwbare methode om abdominale aorta-aneurysma's (AAA's) in C57BL/6-muizen op te wekken met behulp van elastine-sensitisatie en perivasculaire elastase-toepassing, als een AAA-model dat een immuunsensitisatiecomponent bevat.

Betrouwbare creatie van een model voor muriene abdominale aorta-aneurysma met behulp van elastine-sensitisatie en perivasculaire elastase

Angiogenese, is het kiemen van de bloedvaten van de reeds bestaande vaatstelsel, verbonden aan zowel natuurlijke en pathologische processen. Hier laten we zien een aorta-ring-test die het mogelijk maakt angiogene potentiators en remmers direct worden toegevoegd aan aorta-ringen in cultuur. Kieming en uitgroei neovessel kan worden bepaald door het inspecteren van de aorta-ringen over een periode van 6-12 dagen.

Aorta Ring Assay

Orthotope diermodellen van kanker van de eierstokken te repliceren beter mens-en vaatziekten en daardoor meer inzicht in de progressie van kanker en tumor respons op therapie. Een muis model krijgt een intrabursale injectie van luciferase-expressie ovarium tumorcellen. De behandeling wordt toegediend via orale sondevoeding. Tumorgroei wordt bewaakt...

In vivo beeldvorming en therapeutische behandelingen in een orthotope Muis Model van eierstokkanker

De vasculaire endotheelcellen spelen een belangrijke rol bij veel belangrijke cardiovasculaire aandoeningen. Dit artikel beschrijft een eenvoudige methode om endotheelcellen te isoleren en uit te breiden van de muisaorta zonder het gebruik van speciale apparatuur. Ons protocol biedt een effectieve manier om mechanismen in de fysiopathologie van endotheelcellen te identificeren.

Isolatie en Primaire Cultuur van de muis endotheelcellen

Leer een calciumfosfaat-geïnduceerd abdominaal aorta-aneurysma muismodel met C57BL6J muizen. Deze snelle, kosteneffectieve methode ondersteunt onderzoek naar pathologische mechanismen en therapeutische strategieën.

Een calciumfosfaat-geïnduceerd muis abdominaal aorta-aneurysma model

Meer video's verkennen