Name: Ligatie van de linker kransslagader: een chirurgisch muizenmodel van myocardinfarct (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-08-09T14:45:00.000+00:00
Duration: 5 min 48 s
Description: Leer de permanente ligatie van de linker kransslagader bij muizen voor hartinfarctonderzoek. Deze chirurgische methode onderzoekt pathofysiologie en ontstekingsreacties in vivo.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd ondersteund door subsidies van het National Institute of Health (R01HL143967, R01HL142629, R01AG069399 en R01DK129339), AHA Transformational Project Award (19TPA34910142), AHA Innovative Project Award (19IPLOI34760566) en ALA Innovation Project Award (IA-629694) (aan PD).

Het huidige studieprotocol werd beoordeeld en goedgekeurd door de Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) van de Universiteit van Pittsburgh. Acht (sham n = 4 en MI n = 4) 1-jarige vrouwelijke C57BL / 6J-muizen met een gewicht van 24-30 g werden gebruikt voor deze experimenten. Ongeveer 100% en ten minste 80% van de muizen overleefden respectievelijk in de eerste 24 uur en 28 dagen.
1. Voorbereiding en endotracheale intubatie van de muizen
<ol><li>Verwarm een kralensterilisator (zie materiaaltabel) voor op 250 °C en plaats er enkele minuten geautoclaveerde chirurgische instrumenten in.</li>
	<li>Verdoof de muis in een inductiekamer met 3% isofluraan en 1 L/min zuurstof gedurende 5 min.</li>
	<li>Zorg voor de diepte van de anesthesie in de muis door de reactie op een stevige teenknijp te controleren.</li>
	<li>Weeg de muis om de dosering van het preoperatieve analgeticum, buprenorfine, (0,1 mg / kg) te schatten. Injecteer het medicijn intraperitonisch.</li>
	<li>Trim de vacht aan de linkerkant van de thorax met een elektrisch scheermes.</li>
	<li>Desinfecteer de operatieplaats daarna drie keer met povidon-jodium en 70% ethanol.</li>
	<li>Plaats de muis in rugligging op een hellend bord. Bevestig de kop en ledematen van de muis met behulp van een elastische band die respectievelijk aan de bovenste snijtanden en plakband is bevestigd. Breng steriel oftalmisch glijmiddel aan op de ogen om uitdroging te voorkomen terwijl u onder narcose bent.</li>
	<li>Open de kaak en trek de tong voorzichtig uit de mondholte.</li>
	<li>Identificeer de opening van het strottenhoofd door de orofarynx te verlichten met behulp van een laryngoscoop (zie tabel met materialen).</li>
	<li>Snijd ongeveer 0,5 cm van een katheternaald van 24 G af en steek de stompe naald in het plastic schild. Richt de stompe naald met het plastic schild in de luchtpijp. Haal de naald eruit en laat het plastic schild in de luchtpijp zitten.</li>
	<li>Stel de ventilator (zie tabel met materialen) in op een ademhalingsfrequentie van 137 slagen per minuut (geoptimaliseerd voor de muizen die in deze studie worden gebruikt) en getijdenvolume 0,18 cc. Sluit de ademhalingsbuizen aan op het katheterschild en bevestig de juiste intubatie door te zoeken naar een gesynchroniseerde borstbeweging met de beademingsmachine.</li>
	<li>Koppel de beademingsbuis los van het katheterschild en plaats het dier in rugligging op een voorverwarmde temperatuurgecontroleerde operatieplaat. Sluit de muis opnieuw aan op de ventilator.</li>
</ol>2. Permanente ligatie van de linker kransslagader
<ol><li>Desinfecteer de operatieplaats met povidon-jodium en 70% alcohol. Breng een steriel gordijn aan met een gat van een kwart formaat in het midden om de chirurgische plaats te beveiligen. Til de huid voorzichtig op met een tang en maak een kleine (1,5-2 cm) cutane transversale incisie langs de lijn tussen de linker pectoralis major en minor spieren met behulp van een chirurgische schaar. OPMERKING: Er werd een schaar gebruikt om de incisie te maken, omdat deze de vereiste controle biedt over de diepte en richting van de snede.</li>
	<li>Scheid de onderliggende borstspieren met een tang en een ontleedschaar. De spieren werden gescheiden met behulp van retractors bevestigd aan elastische banden.</li>
	<li>Maak een incisie in de derde intercostale ruimte met een microschaar volgens de natuurlijke hoek van de ribbenkast. In deze fase moet uiterste voorzichtigheid worden betracht om letsel aan het hart en de longen te voorkomen.</li>
	<li>Rek de ribben voorzichtig uit elkaar met behulp van retractors om de linker ventrikel bloot te leggen. Beweeg het pericardvet opzij en lokaliseer de LCA, die van de rand van het linkeratrium naar de top van het hart loopt.</li>
	<li>Pass een 8-0 nylon hechting onder de LCA met behulp van een naaldhouder. Ligate de LCA met een dubbele knoop gevolgd door een tweede knoop (een gemodificeerde chirurgenknoop). OPMERKING: Blancheren van de linker linker ventrikel bevestigt een succesvolle LCA-ligatie. Daarnaast worden ook troponinemeting, ECG-monitoring (ST-elevatie), echo/in vivo cardiale gated MRI of micro-CT-beelden geadviseerd om de vergelijkbare MI-laesies te bevestigen.</li>
	<li>Verwijder de oprolmechanismen en breng een katheternaald van 22 G in de borstholte in. Verwijder de naald en laat de punt van het plastic schild in de thoracale holte. Sluit de ribbenkast met een 4-0 nylon hechting.</li>
	<li>Sluit een spuit aan op de plastic afscherming van 22 G en verwijder langzaam overtollige lucht die vastzit in de borstholte door zachtjes op de borstkas te drukken om een negatieve luchtdruk vast te stellen. Verwijder het plastic schild.</li>
	<li>Sluit de huid met een 4-0 nylon hechting.</li>
	<li>Schakel de isofluraantoevoer uit. In dit stadium bevindt de muis zich op de ventilator die zuurstof levert.</li>
</ol>3. Postoperatieve zorg
<ol><li>Schakel de ventilator uit zodra de spontane ademhaling begint. OPMERKING: De procedure duurt ongeveer 30-35 minuten per dier vanaf de voorbereiding van de muizen tot deze stap.</li>
	<li>Houd de muis onder een warmtelamp en controleer deze totdat deze wakker is. Het dier mag niet onbeheerd worden achtergelaten totdat het voldoende bewustzijn heeft hersteld om sternale lighouding te behouden.</li>
	<li>Plaats het dier na de operatie in een aparte kooi en breng het pas terug naar de oorspronkelijke kooi met andere dieren nadat het volledig is hersteld.</li>
	<li>Controleer de muis dagelijks op tekenen van pijn of ongemak.</li>
	<li>Ga door met intraperitoneale injectie van buprenorfine (0,1 mg/kg) om de 6-8 uur gedurende nog eens 2 dagen na de operatie.</li>
</ol>4. Echocardiografische evaluatie
OPMERKING: Echocardiografie werd uitgevoerd om de parameters van hartfalen op dag 28 na MI te evalueren.
<ol><li>Na 28 dagen na de operatie, verdoven de muizen met 3% isofluraan en 1 l / min zuurstof, steriele oftalmische glijmiddel op de ogen aanbrengen en borsthaar verwijderen met ontharingscrème. Desinfecteer het borstgebied drie keer met povidon-jodium en 70% ethanol.</li>
	<li>Beveilig de verdoofde muizen bovenop het beeldvormingsplatform (zie tabel met materialen) in rugligging en handhaaf een stabiel niveau van anesthesie gedurende de hele procedure met behulp van een neuskegel die is aangesloten op het anesthesiesysteem (1% -2% isofluraan en 1 l / min zuurstof).</li>
	<li>Plak de vier poten met elektrodegel op de ECG-elektroden (zie materiaaltabel). Controleer de temperatuur van het dier door een rectale sonde in te brengen (zie materiaaltabel).</li>
	<li>Breng de scangel (zie Materiaaltabel) aan op de borst, plaats de transducer verticaal, laat deze zakken naar de parasternale lijn (parallel aan de thorax) en draai 35° tegen de klok in om het parasternale lange asbeeld van de linker ventrikel te verkrijgen.</li>
	<li>Tik op de B-mode beeldvormingsknop op de beeldbewerkingssoftware (zie Materiaaltabel) om een volledig beeld van de lange as van het hart te krijgen. Pas de grootte en helderheid van de poort aan en sla de afbeeldingen op met Clip opslaan of Frame opslaan voor latere metingen16.</li>
	<li>Schakel over naar de M-modus (bewegingsmodus) en plaats de M-modus-as ter hoogte van de papillaire spier. Pas de grootte van de poort aan en tik op de startknop van de M-modus. Sla de afbeeldingen op met Clip opslaan of Frame16,17 opslaan.</li>
	<li>Aangezien het beeldacquisitieproces in de 4D-modus is geautomatiseerd, controleert u of het ECG- en ademhalingssignaal actief zijn (figuur 1) voordat u de gegevens ophaalt.</li>
	<li>Begin met het verkrijgen van de gegevens in B-modus. Open het 4D-scanpaneel en start de 3D-motor. Stel de afbeeldingsparameters in het 4D-scanvenster in en tik op de knop Scannen om het scannen te starten. Nadat u de afbeeldingen in de 2D-weergave hebt bekeken, laadt u de afbeeldingen in de 4D-modus met de knop Laden in 4D .</li>
</ol>

<ol><li>Virani, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+disease+and+stroke+statistics-2021+update%3A+a+report+from+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart disease and stroke statistics-2021 update: a report from the American Heart Association.</a> Circulation. 143 (8), 254(2021).</li>
<li>Mendis, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((World+Health+Organization+definition+of+myocardial+infarction%3A+2008-09+revision%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Epidemiology%22%5BJournal%5D)">World Health Organization definition of myocardial infarction: 2008-09 revision.</a> International Journal of Epidemiology. 40 (1), 139-146 (2011).</li>
<li>Frangogiannis, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiology+of+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Comprehensive+Physiology%22%5BJournal%5D)">Pathophysiology of myocardial infarction.</a> Comprehensive Physiology. 5 (4), 1841-1875 (2011).</li>
<li>Smit, M., Coetzee, A., Lochner, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pathophysiology+of+myocardial+ischemia+and+perioperative+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiothoracic+and+Vascular+Anesthesia%22%5BJournal%5D)">The pathophysiology of myocardial ischemia and perioperative myocardial infarction.</a> Journal of Cardiothoracic and Vascular Anesthesia. 34 (9), 2501-2512 (2020).</li>
<li>Johny, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platelet+mediated+inflammation+in+coronary+artery+disease+with+Type+2+Diabetes+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Inflammation+Research%22%5BJournal%5D)">Platelet mediated inflammation in coronary artery disease with Type 2 Diabetes patients.</a> Journal of Inflammation Research. 14, 5131(2021).</li>
<li>Martin, T. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+models+of+myocardial+infarction%3A+from+mechanism+to+translation%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Preclinical models of myocardial infarction: from mechanism to translation.</a> British Journal of Pharmacology. 179 (5), 770-791 (2022).</li>
<li>De Villiers, C., Riley, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+models+of+myocardial+infarction%3A+comparing+permanent+ligation+and+ischaemia-reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Disease+Models+%26+Mechanisms%22%5BJournal%5D)">Mouse models of myocardial infarction: comparing permanent ligation and ischaemia-reperfusion.</a> Disease Models & Mechanisms. 13 (11), (2020).</li>
<li>Vasamsetti, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Apoptosis+of+hematopoietic+progenitor-derived+adipose+tissue-resident+macrophages+contributes+to+insulin+resistance+after+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Apoptosis of hematopoietic progenitor-derived adipose tissue-resident macrophages contributes to insulin resistance after myocardial infarction.</a> Science Translational Medicine. 12 (553), (2020).</li>
<li>Fernandez, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+coronary+arteries+of+the+C57BL%2F6+mouse+strains%3A+implications+for+comparison+with+mutant+models%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Anatomy%22%5BJournal%5D)">The coronary arteries of the C57BL/6 mouse strains: implications for comparison with mutant models.</a> Journal of Anatomy. 212 (1), 12-18 (2008).</li>
<li>van Amerongen, M. J., Harmsen, M. C., Petersen, A. H., Popa, E. R., van Luyn, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cryoinjury%3A+a+model+of+myocardial+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Pathology%22%5BJournal%5D)">Cryoinjury: a model of myocardial regeneration.</a> Cardiovascular Pathology. 17 (1), 23-31 (2008).</li>
<li>Lam, N. T., Sadek, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neonatal+heart+regeneration%3A+comprehensive+literature+review%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Neonatal heart regeneration: comprehensive literature review.</a> Circulation. 138 (4), 412-423 (2018).</li>
<li>Heusch, G., Gersh, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pathophysiology+of+acute+myocardial+infarction+and+strategies+of+protection+beyond+reperfusion%3A+a+continual+challenge%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">The pathophysiology of acute myocardial infarction and strategies of protection beyond reperfusion: a continual challenge.</a> European Heart Journal. 38 (11), 774-784 (2017).</li>
<li>Srikanth, G., Prakash, P., Tripathy, N., Dikshit, M., Nityanand, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+a+rat+model+of+myocardial+infarction+with+a+high+survival+rate%3A+A+suitable+model+for+evaluation+of+efficacy+of+stem+cell+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Stem+Cells+%26+Regenerative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Establishment of a rat model of myocardial infarction with a high survival rate: A suitable model for evaluation of efficacy of stem cell therapy.</a> Journal of Stem Cells & Regenerative Medicine. 5 (1), 30-36 (2009).</li>
<li>Lugrin, J., Parapanov, R., Krueger, T., Liaudet, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+myocardial+infarction+model+using+permanent+ligation+of+left+anterior+descending+coronary+artery%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Murine myocardial infarction model using permanent ligation of left anterior descending coronary artery.</a> Journal of Visualized Experiments. (150), e59591(2019).</li>
<li>Muthuramu, I., Lox, M., Jacobs, F., De Geest, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Permanent+ligation+of+the+left+anterior+descending+coronary+artery+in+mice%3A+a+model+of+post-myocardial+infarction+remodelling+and+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Permanent ligation of the left anterior descending coronary artery in mice: a model of post-myocardial infarction remodelling and heart failure.</a> Journal of Visualized Experiments. (94), e52206(2014).</li>
<li>Pistner, A., Belmonte, S., Coulthard, T., Blaxall, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+echocardiography+and+ultrasound+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Murine echocardiography and ultrasound imaging.</a> Journal of Visualized Experiments. (42), e2100(2010).</li>
<li>Li, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+cardiac+morphological+and+functional+changes+in+mouse+model+of+transverse+aortic+constriction+by+echocardiographic+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Assessment of cardiac morphological and functional changes in mouse model of transverse aortic constriction by echocardiographic imaging.</a> Journal of Visualized Experiments. (112), e54101(2016).</li>
<li>Vasamsetti, S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sympathetic+neuronal+activation+triggers+myeloid+progenitor+proliferation+and+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Sympathetic neuronal activation triggers myeloid progenitor proliferation and differentiation.</a> Immunity. 49 (1), 93-106 (2018).</li>
<li>Reichert, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+left+anterior+descending+%28LAD%29+coronary+artery+ligation%3A+an+improved+and+simplified+model+for+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Murine left anterior descending (LAD) coronary artery ligation: an improved and simplified model for myocardial infarction.</a> Journal of Visualized Experiments. (122), e55353(2017).</li>
<li>Alwardt, C. M., Redford, D., Larson, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((General+anesthesia+in+cardiac+surgery%3A+a+review+of+drugs+and+practices%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Extra-Corporeal+Technology%22%5BJournal%5D)">General anesthesia in cardiac surgery: a review of drugs and practices.</a> The Journal of Extra-Corporeal Technology. 37 (2), 227-235 (2005).</li>
<li>Kolk, M. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LAD-ligation%3A+a+murine+model+of+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">LAD-ligation: a murine model of myocardial infarction.</a> Journal of Visualized Experiments. (32), e1438(2009).</li>
<li>Wu, Y., Yin, X., Wijaya, C., Huang, M. -H., McConnell, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+myocardial+infarction+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Acute myocardial infarction in rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (48), e2464(2011).</li>
<li>Kalogeris, T., Baines, C., Krenz, M., Korthuis, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chapter+six-cell+biology+of+ischemia%2Freperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22International+Review+of+Cell+and+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Chapter six-cell biology of ischemia/reperfusion injury.</a> International Review of Cell and Molecular Biology. , Academic Press. 229-317 (2012).</li>
<li>Scofield, S. L., Singh, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Confirmation+of+myocardial+ischemia+and+reperfusion+injury+in+mice+using+surface+pad+electrocardiography%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Confirmation of myocardial ischemia and reperfusion injury in mice using surface pad electrocardiography.</a> Journal of Visualized Experiments. (117), e54814(2016).</li>
<li>Yan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temporal+dynamics+of+cardiac+immune+cell+accumulation+following+acute+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Molecular+and+Cellular+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Temporal dynamics of cardiac immune cell accumulation following acute myocardial infarction.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 62, 24-35 (2013).</li>
<li>Xu, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effects+of+fentanyl+preconditioning+on+cardiomyocyte+apoptosis+induced+by+ischemia-reperfusion+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brazilian+Journal+of+Medical+and+Biological+Research%22%5BJournal%5D)">Protective effects of fentanyl preconditioning on cardiomyocyte apoptosis induced by ischemia-reperfusion in rats.</a> Brazilian Journal of Medical and Biological Research. 50 (2), 5286(2017).</li>
<li>Leuschner, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+monocyte+kinetics+in+acute+myocardial+infarction+are+sustained+by+extramedullary+monocytopoiesis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Medicine%22%5BJournal%5D)">Rapid monocyte kinetics in acute myocardial infarction are sustained by extramedullary monocytopoiesis.</a> Journal of Experimental Medicine. 209 (1), 123-137 (2012).</li>
<li>Leuschner, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Silencing+of+CCR2+in+myocarditis%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Silencing of CCR2 in myocarditis.</a> European Heart Journal. 36 (23), 1478-1488 (2015).</li>
<li>Dutta, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((E-selectin+inhibition+mitigates+splenic+HSC+activation+and+myelopoiesis+in+hypercholesterolemic+mice+with+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Arteriosclerosis%2C+Thrombosis%2C+and+Vascular+Biology%22%5BJournal%5D)">E-selectin inhibition mitigates splenic HSC activation and myelopoiesis in hypercholesterolemic mice with myocardial infarction.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 36 (9), 1802-1808 (2016).</li>
<li>Jiang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+simple+method+for+induction+of+myocardial+infarction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A modified simple method for induction of myocardial infarction in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (178), e63042(2021).</li>
</ol>

De auteurs hebben geen belangenconflicten bekend te maken.

Het muizenmodel van MI wint aan populariteit in cardiovasculaire onderzoekslaboratoria en deze studie beschrijft een reproduceerbaar en klinisch relevant MI-model. Dit protocol verbetert het LCA-ligatieproces op verschillende manieren. Om te beginnen wordt het gebruik van injecteerbare preoperatieve anesthetica zoals xylazine/ketamine of natriumpentobarbital14,15 vermeden. Alleen isofluraananesthesie werd gebruikt, wat helpt de overlevingskansen van dieren te ver...

Hart- en vaatziekten zijn een groot probleem voor de volksgezondheid dat elk jaar 17,9 miljoen levens eist, goed voor 31 procent van de wereldwijde sterfte1. Het meest voorkomende type cardiovasculaire anomalie is coronaire hartziekte en myocardinfarct (MI) is een van de belangrijkste manifestaties van coronaire hartziekten2. MI wordt meestal veroorzaakt door trombotische occlusie van een kransslagader als gevolg van het scheuren van een kwetsbare plaque3. De resulterende ischemie veroorzaakt diepgaande ionische en metabole veranderingen in het aangetaste myocardium, evenals een snelle afname van de systolische functie. MI resulteert in de dood van cardiomyocyten, wat verder kan leiden tot ventriculaire disfunctie en hartfalen4.
Onderzoek naar MI bij patiënten is beperkt vanwege de schaarste aan weefsels verkregen van patiënten met MI5. Als zodanig zijn muizenmodellen van MI nuttig bij zowel het bestuderen van ziektemechanismen als het ontwikkelen van potentiële therapeutische doelen. Momenteel beschikbare muizenmodellen van MI omvatten irreversibele ischemiemodellen (LCA en ablatiemethoden) en reperfusiemodellen (ischemie/reperfusie, I/R)6. Permanente ligatie van de linker kransslagader (LCA) bij muizen is de meest gebruikte methode en imiteert de pathofysiologie en immunologie van MI bij patiënten 7,8,9. Permanente MI kan ook worden geïnduceerd door ablatiemethoden, waarbij elektrische schade of cryoletsel met zich meebrengt. Ablatiemethoden zijn in staat om een infarct van uniforme grootte te genereren op de exacte locatie10. Aan de andere kant kunnen littekenvorming, infarctmorfologie en moleculaire signaleringsmechanismen variëren tussen de ablatiemethoden10,11. De murine I/R-methode is een ander belangrijk MI-model omdat het het klinische scenario van reperfusietherapievertegenwoordigt 12. Het I/R-model wordt geassocieerd met uitdagingen zoals een variabele infarctgrootte, moeilijkheid bij het onderscheiden van reacties van initieel letsel en reperfusie6.
Hoewel veel gebruikt, worden LCA-ligatiemethoden geassocieerd met lage overlevingskansen en postoperatieve pijn13. Dit protocol demonstreert het murine chirurgische MI-model van LCA-ligatie dat de voorbereiding en intubatie van muizen, LCA-ligatie, postoperatieve zorg en validatie van MI omvat. In plaats van een invasieve tracheotomie14 te gebruiken, maakt deze methode gebruik van endotracheale intubatie. Het dier wordt geïntubeerd door de orofarynx te verlichten met behulp van een laryngoscoop, waardoor de procedure gemakkelijker, veiliger en minder traumatisch wordt15. De muis wordt gedurende de hele procedure op beademingsondersteuning en onder isofluraananesthesie gehouden. Verder worden echocardiografie en Masson's trichrome kleuring uitgevoerd om respectievelijk de hartfunctie en hartfibrose na MI te evalueren. Over het algemeen biedt deze methode een betrouwbaar en reproduceerbaar chirurgisch muizenmodel van MI dat kan worden gebruikt om pathofysiologie en ontsteking na MI te bestuderen.

<table><tbody><tr><td>22 G catheter needle</td><td>Exel INT</td><td>26741</td><td>Thoracentesis</td></tr><tr><td>24 G catheter needle</td><td>Exel INT</td><td>26746</td><td>Endotracheale intubatie</td></tr><tr><td>4-0 nylon suture</td><td>Covetrus</td><td>29263</td><td>Sutureren van spieren en huid</td></tr><tr><td>8-0 nylon suture</td><td>S&amp;T</td><td>3192</td><td>Ligatie van LAD</td></tr><tr><td>Anesthetic Vaporizers</td><td>Vet equip</td><td>VE-6047</td><td>Anesthetisch ondersteuning</td></tr><tr><td>Animal physiology monitor</td><td>Fujifilm</td><td>VEVO 3100</td><td>Hartslag, ademhalingssnelheid en lichaamstemperatuur controleren</td></tr><tr><td>Betadine solution</td><td>PBS animal health</td><td>11205</td><td>Antiseptisch</td></tr><tr><td>Buprenorphine</td><td>Covetrus</td><td>55175</td><td>Analgeticum</td></tr><tr><td>Disecting microscope</td><td>OMANO</td><td>OM2300S-V7</td><td>Binoculair</td></tr><tr><td>Electric razor</td><td>Wahl</td><td>79300-1001M</td><td>Scheren</td></tr><tr><td>Electrode gel</td><td>Parker Laboratories</td><td>W60698L</td><td>Elektrisch geleidend gel</td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>Decon Laboratories</td><td>22-032-601</td><td>Ontsmettingsmiddel</td></tr><tr><td>Forceps</td><td>FST</td><td>11065-07</td><td>Roestvrij staal</td></tr><tr><td>Gauze</td><td>Curity</td><td>CAR-6339-PK</td><td>Steriele</td></tr><tr><td>Heat lamp</td><td>Satco</td><td>S4998</td><td>Postoperatieve zorg</td></tr><tr><td>Heating pad</td><td>Kent scientific</td><td>Surgi-M</td><td>Temperatuurcontrole</td></tr><tr><td>Hot Bead sterilizer</td><td>Germinator 500</td><td>11503</td><td>Steriliseren van chirurgische instrumenten</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Covetrus</td><td>29405</td><td>Anesthesie</td></tr><tr><td>Masson&rsquo;s trichrome staining kit</td><td>Thermoscientific</td><td>87019</td><td>Meting van cardiale fibrose</td></tr><tr><td>Micro Needle Holder</td><td>FST</td><td>12500-12</td><td>Roestvrij staal</td></tr><tr><td>Micro scissors</td><td>FST</td><td>15000-02</td><td>Roestvrij staal</td></tr><tr><td>Ophthalmic ointment</td><td>Dechra</td><td>Puralube Vet</td><td>Steriele oculaire smeermiddel</td></tr><tr><td>Scanning Gel</td><td>Parker Laboratories</td><td>Aquasonic 100</td><td>Waterige ultrasone transmissiegel</td></tr><tr><td>Scissors</td><td>FST</td><td>14060-11</td><td>Roestvrij staal</td></tr><tr><td>Small Animal Laryngoscope</td><td>Penn-Century</td><td>Model LS-2-M</td><td>Verlichting van de orofarynx</td></tr><tr><td>Small animal ventilator</td><td>Harvard apparatus</td><td>557058</td><td>Ventilatorondersteuning</td></tr><tr><td>Surgical light</td><td>Cole parmer</td><td>41723</td><td>Verlichter Breedte (in): 7</td></tr><tr><td>Vevo 3100 preclinical imaging platform</td><td>Fujifilm</td><td>VEVO 3100</td><td>Echocardiografie</td></tr><tr><td>VevoLAB software</td><td>Fujifilm</td><td>VevoLAB 3.2.6</td><td>Echocardiografie dataanalyse</td></tr></tbody></table>

ligatie van de linker kransslagader: een chirurgisch muizenmodel van myocardinfarct

Left Coronary Artery Ligation: A Surgical Murine Model of Myocardial Infarction

Ischemische hartziekte en het daaropvolgende myocardinfarct (MI) is een van de belangrijkste oorzaken van sterfte in de Verenigde Staten en over de hele wereld. Om de pathofysiologische veranderingen na een hartinfarct te onderzoeken en toekomstige behandelingen te ontwerpen, zijn onderzoeksmodellen van MI vereist. Permanente ligatie van de linker kransslagader (LCA) bij muizen is een populair model om de hartfunctie en ventriculaire remodellering na MI te onderzoeken. Hier beschrijven we een minder invasief, betrouwbaar en reproduceerbaar chirurgisch murine MI-model door permanente ligatie van de LCA. Ons chirurgisch model bestaat uit een gemakkelijk omkeerbare algemene anesthesie, endotracheale intubatie waarvoor geen tracheotomie nodig is en een thoracotomie. Elektrocardiografie en troponinemeting moeten worden uitgevoerd om MI te garanderen. Echocardiografie op dag 28 na MI zal hartfunctie- en hartfalenparameters onderscheiden. De mate van hartfibrose kan worden geëvalueerd door Masson's trichrome kleuring en cardiale MRI. Dit MI-model is nuttig voor het bestuderen van de pathofysiologische en immunologische veranderingen na MI.

Figuur 1 toont de representatieve actieve ECG- en ademhalingssignalen tijdens de echocardiografische evaluatie van sham (figuur 1A) en MI (figuur 1B) muizen. Verificatie van actieve ECG- en ademhalingssignalen zijn belangrijk voordat de echocardiografische gegevens worden verkregen. Figuur 2 toont echocardiografische meting van cardiale functionele parameters na 28 dagen na LCA-ligatie...

Hier wordt een chirurgische procedure gepresenteerd voor permanente ligatie van de linker kransslagader bij muizen. Dit model kan worden gebruikt om de pathofysiologie en bijbehorende ontstekingsreactie na een hartinfarct te onderzoeken.

Ligatie van de linker kransslagader: een chirurgisch muizenmodel van myocardinfarct

Ischemic heart disease and subsequent myocardial infarction (MI) is one of the leading causes of mortality in the United States and around the world. In ...

Het chirurgische model permanente ligatie van linkerslagader bij muizen kan worden gebruikt om de pathofysiologie en bijbehorende ontstekingsreactie na een hartinfarct te onderzoeken. Deze methode biedt een betrouwbaar en produceerbaar muismodel van MI, dat eenvoudig, veilig en minder invasief is. Verwarm om te beginnen een kraalsterilisator voor op 250 graden Celsius en plaats er een paar minuten geautoclaveerde chirurgische instrumenten in.Zorg voor de diepte van de anesthesie in de muis door de reactie op een stevige teenknijp te controleren. Weeg de muis om de dosering van het preoperatieve analgetische medicijn buprenorfine te schatten en injecteer het medicijn intraperitoneaal. Trim de vacht aan de linkerkant van de thorax met een elektrisch scheermes.Na het desinfecteren van de operatieplaats, plaatst u de muis in rugligging op een hellend bord. Bevestig de kop en ledematen van de muis met behulp van een elastische band die respectievelijk aan de bovenste snijtanden en plakband is bevestigd. Breng steriel oftalmisch glijmiddel aan op de ogen om uitdroging te voorkomen terwijl u onder narcose bent.Open de kaak en trek de tong voorzichtig uit de mondholte. Identificeer de open

left-coronary-artery-ligation-surgical-murine-model-myocardial

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Deze video laat zien hoe u een snelle en betrouwbare model te gebruiken om pathobiological en pathofysiologische processen van myocardischemie te bestuderen.

LAD-Ligatie: een muizenmodel van myocardinfarct

Tal van genetische manipulaties en / of intramyocardial injecties van genen, eiwitten, cellen en / of biomaterialen wordt toegevoegd aan de dimensie van de tijd in studies van de acute ischemie / reperfusie schade en chronische remodeling bij muizen. Deze video illustreert de microchirurgische procedures voor ischemie / reperfusie, permanent coronaire ligatie, en intramyocardial injectie studies.

Kransslagader Ligatie en Intramyocardial Injectie in een muizenmodel van Infarction

De chirurgische procedure gebruikt om experimentele myocardinfarct bij de muis begint met linker thoractomie tussen de derde en vierde ribben om visualiseren het voorste oppervlak van het hart en linker long. De linker coronaire arterie geligeerd, wordt de borst gesloten en de muis mag spontaan herstellen.

Gewijzigd Techniek voor Coronary Artery Ligatie in Muizen

In this video, we describe a surgical procedure to generate a mouse model of myocardial infarction by permanently ligating the left anterior descending coronary artery.

Generating Murine Model of Myocardial Infarction: A Surgical Procedure for Permanent Ligation of Left Anterior Descending Coronary Artery in Mouse Model

We introduceren een chirurgische methode experimentele ischemie / reperfusie (I / R) letsel veroorzaken simuleren myocardiaal infarct (MI) in muismodellen die zorgt voor meer duidelijkheid in positionering van de ligatie van de LAD (LAD) om de reproduceerbaarheid te verhogen MI van experimenten in muizen.

Een muizenmodel van myocard ischemie-reperfusie schade door de eileiders van de LAD

Hartfalen is de belangrijkste oorzaak van ziekenhuisopname en een belangrijke doodsoorzaak. Een model van permanente ligatie van de linker voorste afdalende kransslagader bij muizen wordt toegepast om ventriculaire remodellering en cardiale disfunctie na een myocardinfarct te onderzoeken. De techniek van invasieve hemodynamische metingen bij muizen wordt gepresenteerd.

Permanente Ligatie van de linker anterior Aflopend Kransslagader in Muizen: Een model van Post-myocardinfarct Remodelling en hartfalen

We bieden een betrouwbare methode voor ligatie van de linker voorwaartse dalende slagader (LAD) in een muismodel. Deze methode is relatief minder invasief dan andere methoden, waarbij endotracheale intubatie, een linkszijdige thoracotomie-aanpak en thoracentese betrokken zijn. Deze methode kan worden gebruikt als model voor zowel acuut als chronisch myocardinfarct (MI).

Murine Left Anterior Descending (LAD) coronaire Ligatie: een verbeterde en vereenvoudigd model voor myocardinfarct

Hierin beschrijven we een chirurgische ingreep die laat zien hoe u permanente ligatie van de linker-anterieure aflopende coronaire slagader bij muizen bereikt. Dit model is van groot belang om de pathofysiologie van myocardiaal infarct en de gelijktijdige biologische processen te onderzoeken.

Murine myocardinfarct model met behulp van permanente Ligatie van linker anterieure aflopende coronaire slagader

Dit protocol schetst de stappen voor het induceren van een hartinfarct bij muizen met behoud van het hartzakje en de inhoud ervan.

Een intact pericardium ischemisch knaagdiermodel

Hier beschrijven we een eenvoudige en reproduceerbare methode die myocardinfarct of myocardischemie-reperfusieletsel bij muizen kan induceren door precisieligatie van de linker voorste dalende kransslagader door middel van micromanipulatie.

Inductie van myocardinfarct en myocardischemie-reperfusieletsel bij muizen

Leer de permanente ligatie van de linker kransslagader bij muizen voor hartinfarctonderzoek. Deze chirurgische methode onderzoekt pathofysiologie en ontstekingsreacties in vivo.

Ligatie van de linker kransslagader: een chirurgisch muizenmodel van myocardinfarct

Meer video's verkennen