Extrahepatische galwegen en galblaasdissectie bij negen dagen oude muisverwijders

Veel rapporten die het extrahepatische galsysteem beoordeelden, meldden dat ze de monsters verkregen, maar niet hoe ze ze verkregen, waardoor problemen met betrekking tot vergelijkbaarheid ontstonden. Het grote voordeel van deze techniek is dat het gehele extrahepatische galsysteem kan worden ontleed en verontreinigende cellen atraumatisch kunnen worden verwijderd. Ons dissectieprotocol kan in het algemeen worden toegepast op experimentele benaderingen die werken aan muizennenatale galwegaandoeningen, gericht op de dissectie van het extrahepatische galsysteem.

Sommige kenmerken van het protocol, bijvoorbeeld het achterlaten van de maag gehecht aan de twaalfvingerige darm, kunnen nuttig zijn bij onderzoek naar duodenale atresie om een juiste oriëntatie mogelijk te maken door de gedeeltelijk verteerde melk die door de maag wordt uitgedrukt. In het begin kan de techniek enige tijd nodig hebben voor training. Het oefenen en volgen van de stapsgewijze aanpak zal de snelheid en het resultaat verhogen.

Plaats om te beginnen de gedesinfecteerde en geautoclaveerde instrumenten op een steriel oppervlak naast de operatietafel. Nadat u een snede in het peritoneum hebt gemaakt, breidt u de snede uit naar de locatie van de onthoofding, volgens de linker frontale oksellijn. Verwijder de huid van links naar rechts met een atraumatische tang.

Houd onder een microscoop het peritoneum rond de milt vast. Til het voorzichtig op totdat het peritoneum op een tentachtige structuur lijkt en snijd een gat van één millimeter in het midden. Wacht tot de peritoneale tent gevuld is met lucht.

Snijd het peritoneum af in een venster omlijst door de onderste ribben, zowel laterale buikgebieden als het onderste blaasgebied. Zorg voor volledige toegang tot de lever, galwegen, maag, dunne darm en dikke darm. Onderzoek de galblaas en galwegen door het xiphoid-proces voorzichtig in een craniale ventrale positie te trekken.

Vermijd scheuren van het falciforme ligament dat kan leiden tot scheuren van de galblaas uit het galwegsysteem. Laat vervolgens de aantrekkingskracht van het xiphoid-proces los. Trek de twaalfvingerige darm voorzichtig naar beneden om het galwegsysteem te bevrijden.

Voer vervolgens de lagere En-bloc mobilisatie uit door de duodenale papilla te identificeren, die het galwegsysteem verbindt met de twaalfvingerige darm. Snijd door de twaalfvingerige darm ongeveer twee centimeter naar de rechter laterale kant van de papilla. Snijd vervolgens door het pylorische gebied.

Zorg ervoor dat de inhoud van de maag aanwezig is in het pylorische gebied tussen de snijlocatie en de duodenale papilla. Om de bovenste En-bloc mobilisatie uit te voeren, trekt u voorzichtig aan het xiphoid-proces en krijgt u toegang tot het falciforme ligament. Maak een snede van een centimeter door het falciforme ligament tussen de galblaas en dicht bij het xiphoid-proces.

Snijd door de verbindingsstructuren tussen de lever en de thorax, zoals de slokdarm, inferieure vena cava, thoracale aorta en alle ligamenten die het kale gebied van de lever omringen. Knip ook alle dorsaal resterende weefselverbindingen door. Plaats het En-bloc monstermonster minder dan 20 keer microscopisch klein en op een schuimkussen.

Monteer het monster door het in de juiste anatomische positie te reorganiseren. Maak met zachte beweging het orale en abanale deel van de twaalfvingerige darm plat. Start met een atraumatische tang de afvlakkende beweging bij de duodenale papilla en ga verder naar de snijkanten.

Strijk vervolgens de witte pulpachtige inhoud van de maag glad in het orale deel van de twaalfvingerige darm. Identificeer het orale en het aborale deel van de twaalfvingerige darm om een waarschijnlijke galwegrotatie uit te sluiten. Snijd grote resten van leverweefsel weg voordat u het galkanaal ontleedt.

Breng het monster na een paar schraapbewegingen over naar een schonere positie op de schuimmat. Gebruik het minder geperste leverweefsel op de achtergrond om het beeld te optimaliseren voor differentiatie tussen EBDS en ongewenste cellen. Verwerk het hepatoduodenale ligament totdat de geïsoleerde EBDS overblijft.

Observeer de leverslagader en poortader die ontstaan als wit en zeer delicaat filament, ongeveer drie tot vijf millimeter oraal van de duodenale papilla. Verwijder voorzichtig dit delicate filament met een zachte trek naar de linker laterale kant. Zorg ervoor dat de schraapbewegingen beginnen bij het galwegsysteem en leiden naar de levergrenzen.

Met behulp van dit protocol werd EBDS ontleed van negen dagen oude muizenne neonaten. De lengte van de geïsoleerde EBDS van galblaas tot duodenale papilla was minder dan 10 millimeter en de diameter van de delicate ductus choledochus varieerde van 0,05 tot 0,2 millimeter. Hematoxyline eosine kleuring werd uitgevoerd op het longitudinale gedeelte van de EBDS met een open lumen.

De cholangiocyten werden rond het lumen geïdentificeerd als een monolaag en werden donkerder geverfd. Onderzoekers moeten operatietechnieken zoals dissectie- en injectieprotocollen delen en standaardiseren om de vergelijkbaarheid en snelle bruikbaarheid van hun studies en resultaten te verbeteren. Voorafgaande dissectie zal voordelig zijn voor histologische en eencellige benaderingen, zoals de isolatie van intra- en extraperi-cholangiocyten, omdat het resulteert in de vermindering van celkweekbesmetting.