Name: Met behulp van een combinatie van indirecte calorimetrie, infraroodthermografie en bloedglucosespiegels om de thermogenese van bruin vetweefsel bij mensen te meten (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-06-02T13:30:00.000+00:00
Duration: 4 min 54 s
Description: Leer hoe u bruin vetweefselthermogenese bij mensen meet met indirecte calorimetrie, infraroodthermografie en bloedglucosespiegels. Deze niet-invasieve methode combineert koolhydraatbelasting met cafeïne-interventie.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

We willen alle onderzoeksvrijwilligers bedanken voor hun deelname aan ons onderzoek. Dit werk werd ondersteund door het Holsworth Research Initiative, La Trobe University en het Defence Science Institute (DSI, Australië).

Alle deelnemers (n = 8) gaven schriftelijke geïnformeerde toestemming en alle experimenten werden goedgekeurd door de Universitaire Commissie voor Menselijke Ethiek; gegevens zijn afgeleid van Van Schaik et al.27.
1. Installatie van apparatuur en software
<ol><li>Meet de vetmassa via dual-energy X-ray absorptiometry (DXA) volgens Van Schaik et al.27.</li>
	<li>Schat het substraatgebruik en het energieverbruik van verlopen gas; Meet dit met behulp van een ademhalingsgasanalysator volgens de richtlijnen van de fabrikant.</li>
	<li>Verzamel bloedmonsters via vingerpunctie (capillair) en bepaal de bloedglucosewaarden met behulp van een glucometer volgens de richtlijnen van de fabrikant.</li>
	<li>Gebruik een contactloze infraroodthermometer om de kerntemperatuurmetingen te bepalen volgens de richtlijnen van de fabrikant (de fout van dit apparaat is ±0,2 °C).</li>
</ol>2. Procedures voorafgaand aan de bezoeken van de deelnemers
<ol><li>Screen alle deelnemers op hun gezondheidstoestand.</li>
	<li>Stel de volgende uitsluitingscriteria in: een body mass index van >30 kg/m2 (omdat BAT-activiteit omgekeerd gecorreleerd is met adipositas34,35, deelnemers die voorgeschreven medicijnen gebruiken en diabetes mellitus.</li>
	<li>Zorg ervoor dat deelnemers voor of na de testsessie een DXA-scan ondergaan om hun vetmassa te meten, omdat BAT-activiteit omgekeerd gecorreleerd is met adipositas34,35.</li>
	<li>Zorg er gedurende 24 uur voorafgaand aan aankomst voor het onderzoek voor dat de deelnemers zich onthouden van inspannende oefeningen of activiteiten en 10 uur watervasten voordat ze in het laboratorium aankomen.</li>
</ol>3. Procedures op de studiedag
<ol><li>Zorg ervoor dat de kamertemperatuur waarbij de gegevens worden verzameld, is ingesteld op een constante temperatuur om externe verstoringen als gevolg van verschillen in kamertemperatuur te minimaliseren. OPMERKING: Dit kan leiden tot onjuiste thermische of metabole metingen. Voor dit experiment werd een temperatuurgeregelde ruimte gebruikt die onder thermisch neutrale omstandigheden op 22 °C werd gehouden.</li>
	<li>Vraag de deelnemers om om 08:00 uur bij het lab aan te komen om rekening te houden met de dagelijkse hormoonritmes.</li>
	<li>Meet de lengte en het gewicht van de deelnemers.</li>
	<li>Vraag de deelnemers om minimaal 30 minuten op een sokkel te liggen voordat de nulmetingen worden uitgevoerd.</li>
	<li>Meet gedurende een periode van 120 minuten de IRT, indirecte calorimetrie, bloedglucose en kerntemperatuur van de deelnemers elke 15 minuten na de verlopen O 2- en CO2-bemonstering(figuur 1).</li>
	<li>Zorg er na de nulmetingen voor dat de deelnemers koolhydraatrijk zijn door de consumptie van drie koolhydraatgels (elk 90 g glucose) tussen de tijdstippen van 0 min en 15 min.</li>
	<li>Zorg ervoor dat de deelnemers de behandeling 45 minuten na de koolhydraatbelasting innemen. Om dit protocol te volgen, gebruikt u 100 mg cafeïnecapsules als interventie27. OPMERKING: Een uitwasperiode van 7 dagen tussen interventie en placebo is vereist, wat betekent dat een periode van 7 dagen vereist is tussen cafeïne en placebobehandeling.</li>
</ol>4. Indirecte calorimetrie
<ol><li>Schat het energieverbruik en de substraatgebruikswaarden van het verlopen gas, zoals gemeten met een ademhalingsgasanalysator. Voltooi de kalibratie van de ademhalingsgasanalysator volgens de instructies van de fabrikant.</li>
	<li>Plaats het koud gesteriliseerde siliconenmasker op de deelnemer om de levering van kamerlucht en de verwerving van metabole gegevens mogelijk te maken. Zorg ervoor dat het masker is uitgerust met een voorgesteriliseerde niet-reademingsklep (tweeweg niet-reademingsklep) en bevestig deze op het gezicht van de deelnemer met een gaasbevestiging en controleer op lekken.</li>
	<li>Zorg ervoor dat de inspiratoire en expiratoire buizen zijn aangesloten.</li>
	<li>Exporteer het digitale gegevensbestand in een spreadsheetindeling.</li>
	<li>Proef de verlopen O 2 en CO2 met 5 s middeling. Dit meet het energieverbruik en de ademhalingsuitwisselingsverhouding (figuur 1). Verwijder het mondkapje om de extra maatregelen te voltooien.</li>
	<li>Bereken de oxidatiesnelheden van het substraat (koolhydraat- en lipideoxidatie) en het totale energieverbruik met behulp van de niet-eiwit stuwvergelijkingen 1-331,36: Vetoxidatiesnelheid (g/min−1) = (1.695 VO 2)-(1.701 VCO 2) (1) Oxidatiesnelheid koolhydraten (g/min−1) = (4.585 VCO 2) -(3.226 VO 2) (2) Energieverbruik (kcal/min) = (3,94 × VO 2)+ (1,1 × VCO2) (3)</li>
</ol>5. Plasma bloedglucosemetingen
<ol><li>Voer bloedglucosemetingen uit via vingerprik en een glucometer na elke ronde van verlopen gasmetingen (figuur 2).</li>
</ol>6. Kerntemperatuur
<ol><li>Noteer de kerntemperatuur (Tcore) na elke ronde van verlopen gasmetingen. Meet idealiter de kerntemperatuur rectaal of intra-auditief (figuur 2). OPMERKING: Vanwege covid-19-veilige praktijken, minimaliseer persoonlijk contact.</li>
	<li>Zorg ervoor dat de deelnemers rugligging hebben en hun hoofd in een neutrale positie staat. Richt de contactloze thermometer consequent naar het midden van het voorhoofd van de deelnemer.</li>
</ol>7. Infrarood thermografie
<ol><li>Voer het IRT uit na elke ronde van verlopen gasmetingen (figuur 2).</li>
	<li>Vraag de deelnemers om rechtop te zitten in een rechtopstaande houding en recht vooruit te kijken, met het borstgebied naar het nekgebied bloot (figuur 3).</li>
	<li>Gebruik een warmtebeeldcamera om infraroodbeelden van de voorste nek en het bovenste borstgebied te verkrijgen.<ol><li>Plaats de camera op een statief ter hoogte van de nek op 1 m van het gezicht van het onderwerp (figuur 4D). Gebruik de volgende instellingen: detectortype = ongekoelde microbolometer; detector pitch = 17 μm; spectraal bereik van de camera = 7,5-14,0 μm; thermische gevoeligheid = 20 mK bij 30 °C; lenzen = 36 mm; resolutie = 1.024 pixels x 768 pixels.</li>
		<li>Schakel de camera in.</li>
		<li>Pas de scherpstelling van de camera aan door aan de scherpstelring te draaien. OPMERKING: Het is erg belangrijk om de focus correct aan te passen. Onjuiste scherpstelaanpassing heeft invloed op de temperatuurmeting.</li>
		<li>Richt de laseraanwijzer op de middellijn van de nek van de deelnemer.</li>
		<li>Neem de afbeelding. OPMERKING: De afbeelding wordt automatisch opgeslagen als een geheugenkaart wordt gebruikt.</li>
	</ol></li>
</ol>8. Beeldanalyse
<ol><li>Kies drie regio's van de voorste thorax en nek voor de analyse van de oppervlaktetemperatuur: bilateraal de huid boven de BBT in de supraclaviculaire fossa (SCF) en het laterale gebied van de nek, waarbij het sternale gebied wordt beschouwd als een controlereferentiepunt (Tref), omdat dit gebied geen BBT bevat (figuur 4A-C).</li>
	<li>Plaats driehoekige gebieden van belang (ROIs) in de linker en rechter SCF-gebieden en een cirkelvormige ROI over het sternale gebied.</li>
	<li>Wanneer de vereiste regio's zich kruislings hebben geplaatst, controleert u of de software het gemiddelde en de standaarddeviatie van de temperatuur voor elke geselecteerde regio weergeeft.</li>
</ol>9. Data-analyse
<ol><li>Gebruik een dubbelblinde benadering voor de analyse van de interventies met behulp van de beschreven technieken. Laat een onderzoeker die niet betrokken is bij de gegevensverzameling of -analyse de interventies generiek coderen.</li>
	<li>Voer de statistische analyse uit.<ol><li>Bereken gemiddelden voor de IRT, kerntemperatuur en bloedglucosegegevens vanaf het gemeten enkele tijdstip.</li>
		<li>Bereken gemiddelden voor de RER, vetoxidatie, koolhydraatoxidatie en energieverbruik in tijdperken van 10 minuten.</li>
		<li>Voor energie-uitgaven, som het tempo van het energieverbruik voor elke groep en scheid het in pre- en post-interventie. OPMERKING: Raadpleeg Van Shaik et al. voor statistische tests om de gegevens te analyseren27.</li>
	</ol></li>
</ol>

De auteurs hebben geen belangenconflicten bekend te maken.

De methode die we hier hebben laten zien, is een technisch eenvoudig, veilig en kosteneffectief protocol voor het meten van BBT-thermogenese bij mensen. Het protocol pakt zorgen aan met betrekking tot de betrouwbaarheid van het gebruik van IRT op zichzelf om onderscheid te maken tussen lokale opwarming als gevolg van veranderde doorbloeding van de huid en diepere opwarming als gevolg van thermogenese door IRT te correleren met zowel metingen van energieverbruik (EE) als substraatgebruik. Omdat deze techniek geen ioniserende straling gebruikt, maakt het analyse met herhaalde metingen mogelijk, wat niet mogelijk is met PET-beeldvormingstechnieken. Ten slotte, hoewel PET-beeldvormingstechnieken BBT-activering kunnen identificeren, rapporteren ze niet over de fysiologische uitkomsten (verhoogde temperatuur en EE) die dit protocol meet.
De kracht van het hier beschreven protocol is dat er vier bewijslijnen zijn die de conclusie van de opgewekte BBT-thermogenese ondersteunen: (1) verhoogde gemeten Tscf, parallel aan onveranderde kerntemperatuur en stabiele huidtemperatuur over het aangrenzende referentiegebied; (2) verhoogd energieverbruik; (3) een verandering in het gebruik van het substraat; en (4) een daling van de bloedglucosespiegels. De convergerende waarnemingen komen allemaal overeen met de voorspelde uitkomsten voor BBT-thermogenese. Het essentiële onderdeel van het protocol is de koolhydraatbelasting van de deelnemers om het koolhydraatmetabolisme vóór interventie te waarborgen. BBT-thermogenese schakelt het substraatmetabolisme over van koolhydraten naar vrije vetzuren, zoals blijkt uit de daling van de RER. Hoewel het voorkeurssubstraat voor BBT-thermogenese vrije vetzuren is, is een significante opname van glucose in actieve BBT goed vastgesteld 5,6,7. Daarom zien we een daling van de bloedglucosespiegels gelijktijdig met BBT-thermogenese. Het zou niet mogelijk zijn om de wederzijdse verschuiving in substraatgebruik (RER) en de daling van de bloedglucosespiegels in nuchtere toestand waar te nemen.
Eerdere studies hebben geconcludeerd dat verhoogde Tscf (gemeten door IRT) voldoende is om BBT-thermogenese te concluderen. Deze conclusie is echter alleen zeker als de Tscf de kerntemperatuur overschrijdt. Als de Tscf lager is dan of gelijk is aan de kerntemperatuur, kan een lokale temperatuurverandering als gevolg van een verhoogde doorbloeding van de huid niet worden uitgesloten. Een systematische review concludeerde dat IRT alleen niet in staat is om te bepalen of verhogingen van de supraclaviculaire huidtemperatuur te wijten zijn aan BBT-thermogenese37. In de review werd opgemerkt dat de meest voorkomende methode (18F-FDG PET/CT) de opname van glucose in BBT37 meet. Het voorkeurssubstraat voor BBT-thermogenese is echter vetzuren13. Deze methodologische kwestie verhindert een zinvolle vergelijking tussen PET/CT-gegevens bij het valideren van IRT-gegevens, aangezien een van deze metingen alleen geen geschikte maat is voor de werkelijke metabole activiteit van de BBT, aangezien deze de verandering in energieverbruik en substraatgebruik als gevolg van BBT-thermogenese niet kan aangeven. Niettemin kunnen we met het hier beschreven protocol niet alleen de verandering in temperatuur kwantificeren, maar we kunnen ook een toename van het energieverbruik bevestigen - een belangrijk fysiologisch resultaat van BBT-thermogenese. IRT is een contactloze, niet-invasieve en relatief goedkope methode voor het meten van temperatuur en temperatuurveranderingen geassocieerd met BBT-thermogenese. PET-CT daarentegen is duur en stelt individuen bloot aan ioniserende straling, waardoor de toepasbaarheid van deze methode wordt beperkt tot kleine retrospectieve analyses van klinische beeldvormingsstudies. De toepassing van het huidige protocol op grootschalige, gerandomiseerde klinische onderzoeken zou relatief eenvoudig en kosteneffectief zijn.
Het is belangrijk op te merken dat de afname van koolhydraatoxidatie na cafeïne-interventie kan worden verklaard door de schakelaar in substraatgebruik als gevolg van verhoogde BAT-thermogenese als gevolg van de interventie. Metingen van insulinesignalering zouden de resultaten van deze studie robuuster maken. Het is echter niet duidelijk op basis van de resultaten van deze studie of cafeïne de insulinesignalering zou beïnvloeden via actie op de BBT of dat de daling van de bloedglucose het gevolg is van het feit dat de BBT meer energiesubstraten opneemt.
De 18F-FDG PET/CT-methode heeft verschillende inherente beperkingen wanneer deze wordt gebruikt om de fysiologische activiteit van BBT te kwantificeren en te meten, met name bij het onderzoeken van de invloed van voedingsstoffen of voedingsingrediënten op de BBT-activiteit. De 18F-FDG PET/CT-methode vereist dat proefpersonen nuchter zijn om door voeding geïnduceerde verhogingen van de glucoseopname door het spierweefsel te voorkomen, wat de detectie van zowel de BBT- als de BAT-functie aanzienlijk kan verminderen38. Bovendien kan deze techniek alleen de fysiologische impact of omvang van BBT-activering niet meten. Bovendien is het gebruik van ioniserende straling in PET-beeldvormingsstudies een ethische en gezondheids- en veiligheidshindernis voor het ontwerpen van cross-overstudies met herhaalde maatregelen. Bovendien vertegenwoordigt 18F-FDG alleen glucoseopname, wat niet hetzelfde is als het meten van glucosemetabolisme. Deze methode van koolhydraatbelasting voorafgaand aan het meten van de BBT-temperatuur en het combineren van bloedglucosewaarden met indirecte calorimetrie stelt ons in staat om de fysiologische impact van thermogenese en veranderd substraatgebruik rigoureus te meten, wat anders niet beschikbaar zou zijn in een nuchtere toestand.
Sterke punten en beperkingen Dit protocol heeft bredere implicaties dan alleen het bestuderen van BBT. Door koolhydraat-ladende deelnemers voorafgaand aan de interventie, kan de oscillatie van de bloedglucosespiegels als reactie op zowel koolhydraatbelasting als de cafeïne-interventie, evenals veranderingen in het gebruik van het substraat, worden waargenomen. Daarom kan deze techniek worden gebruikt om indirecte calorimetriestudies en metabole metingen bij mensen te verbeteren. Het is nog niet bekend of de resultaten van deze studie kunnen worden gerepliceerd na andere interventies, zoals blootstelling aan koude of adrenerge stimulatie. De resultaten van deze studie zijn echter gerepliceerd na interventie met een ander voedingsingrediënt, namelijk Capsicum annuum27. Extra striktheid en vertrouwen in de resultaten kunnen worden verkregen met behulp van een dubbelblinde benadering voor de analyse van interventies met behulp van de beschreven technieken, en dit kan gemakkelijk worden geïmplementeerd27.
De mogelijke confound van gevarieerde kamertemperatuur is niet relevant in dit protocol, omdat de kamertemperatuur stabiel werd gehouden van deelnemer tot deelnemer. Bovendien werd rekening gehouden met de vochtigheid tijdens de kalibratie van de ademhalingsgasanalysator. Dit wordt afgeleid uit de installatie van dit apparaat, omdat de kalibratie wordt voltooid volgens de instructies van de fabrikant.
De tijdsintervallen voor de meting en behandeling werden bepaald na een kleine pilotstudie waarin probleemoplossing van het protocol werd uitgevoerd. In wezen werden de tijdsintervallen voor meting bepaald op basis van de tijd die de onderzoeker nodig had om de metingen uit te voeren en voor het comfort van de deelnemer. De tijd voor de interventie werd bepaald op basis van de tijd die nodig was voor het koolhydraatmetabolisme na de koolhydraatbelasting om te onderzoeken of de interventie de vrije vetzuuroxidatie (d.w.z. BAT-thermogenese) verhoogde en de koolhydraatoxidatie verlaagde.
Met name zijn er verschillen tussen capillaire en veneuze glucosespiegels39. In de context van zorg buiten het ziekenhuis is de meest gebruikelijke manier waarop bloedglucosespiegels worden gemeten echter via een bloedmonster van capillaire oorsprong geanalyseerd door een handbediende, point-of-care glucometer40. Bovendien is er bij gezonde personen (vergelijkbaar met die in dit protocol) in een niet-klinische setting een statistisch significant, maar niet klinisch significant verschil tussen capillaire en veneuze bloedglucosespiegels wanneer gemeten met behulp van een point-of-care, capillaire glucometer41. In deze context zou capillaire bemonstering de optimale aanpak blijven vanwege het feit dat de meeste point-of-care glucometers die op de markt verkrijgbaar zijn, zijn ontworpen om capillaire bloedmonsters te analyseren41. Vanuit een klinisch perspectief kan worden gesteld dat veneuze bloedglucose de superieure analysemethode is. Veneuze bloedafname is echter niet alleen duur en vereist gespecialiseerde apparatuur (ibid), maar het is ook invasief. De ethische overwegingen van het verhogen van het risico op bijwerkingen tijdens het protocol moeten worden afgewogen tegen de gerapporteerde literatuur die de hoge correlatie en betrouwbaarheid van capillaire bloedglucose als proxymaat voor veneuze bloedglucoseaantoont 42. De sleutel hier is natuurlijk dat we niet zijn begonnen met het diagnosticeren van diabetes, maar met het meten van veranderingen in de bloedsuikerspiegel, waarvoor capillaire bloedglucosemonitoring een meer dan geschikt protocol is.
Glucose kan thermogenese induceren en enkele maaltijden kunnen de BBT43 activeren. Echter, en nogal belangrijk, de gegevens in dit manuscript tonen geen significant effect van glucosebelasting in de interventiegroep of de placebogroep. Bovendien zijn de gegevens in het manuscript afgeleid van de resultaten van Van Schaik et al., waaronder een derde interventie (Capsicum annuum), en de glucosebelasting had geen significant effect op de metingen27.
Opgemerkt moet worden dat dit protocol alleen is gebruikt bij mannelijke deelnemers met een laag lichaamsvet en actieve BAT (om het aantal controleerbare variabelen te verminderen, werden vrouwen uitgesloten van het onderzoek). Er is een bekende omgekeerde correlatie tussen adipositas en BAT-massa bij mensen44. Bovendien is bekend dat eerder zwaarlijvige mensen die zijn afgevallen door middel van dieet en lichaamsbeweging een lagere basale stofwisseling hebben en caloriearme diëten moeten consumeren om een normaal gewicht te behouden45,46. Bovendien kan BBT-activiteit de BBT-groei stimuleren8. De hier beschreven methode zal langetermijnstudies mogelijk maken om veranderingen in BBT-activiteit geassocieerd met metabole ziekten te onderzoeken op een manier die niet wordt geboden door andere technieken.
Conclusie Tot slot demonstreren we een meetbenadering om de activiteit van menselijk bruin vetweefsel te kwantificeren met behulp van IRT en indirecte calorimetrie na een koolhydraatbelasting. De kritieke stappen omvatten 1) het laden van koolhydraten van de deelnemers die zich in een nuchtere toestand bevinden voorafgaand aan het meten van de BBT-temperatuur, terwijl indirecte calorimetrie en bloedglucosespiegels worden gecombineerd om de kwantificering van de fysiologische omvang van BBT-thermogenese en veranderd substraatgebruik mogelijk te maken; 2) het beoordelen van relevante IRT-BBT-depots en -temperaturen vanaf een referentiepunt en kerntemperatuur om een eventuele toename van Tscf aan te tonen die indicatief zou zijn voor BBT-activering op basis van de anatomische locatie. Wij zijn van mening dat deze kwantitatieve metingen een nauwkeurigere evaluatie mogelijk maken van de bijdrage van BBT aan het energiemetabolisme en de thermoregulatie van volwassen mensen. Deze grondige aanpak moet door onderzoekers worden gebruikt om de fysiologie van BBT te bestuderen en te dienen als een nieuwe standaard voor het ontwikkelen van menselijke BBT-activeringsbenaderingen in de toekomst.

Bruin vetweefsel (BAT) verschilt met name van wit vetweefsel (WAT) in zijn mitochondriale inhoud, sympathische innervatie, multiloculaire lipidedruppels, warmtegenererend vermogen en anatomische distributie. BBT werd geacht alleen te bestaan bij zuigelingen en kleine zoogdieren tot de bevestiging van de aanwezigheid ervan bij menselijke volwassenen in 2009 1,2,3. Tot voor kort was de rol van BBT in de menselijke fysiologie en metabole homeostase dus slecht begrepen. Uitgebreide studies bij kleine dieren hebben aangetoond dat tijdens blootstelling aan koude meer dan de helft van het metabolisme te wijten is aan het niet-rillende thermogene vermogen van BBT4. Verschillende studies hebben aangetoond dat bij milde blootstelling aan koude (17-18 °C), toename van het energieverbruik en glucoseopname in de BBT sterk correleren met BBT-thermogenese bij de mens 5,6,7. Bovendien kan BBT-thermogenese tot 10% van het energieverbruik in rust bij mensen tijdens blootstelling aan koude bijdragen (voor een overzicht, zie Van Schaik et al.8). Het bestuderen van de fysiologie en impact van BBT op de gezondheid en ziekte van de mens wordt momenteel beperkt door protocolbeperkingen. Het is daarom essentieel om een nauwkeurige methode te hebben voor het meten van de werkelijke metabole impact van BBT om de impact van BBT-thermogenese op obesitas en de metabole complicaties ervan bij de mens beter te begrijpen.
De anatomische verdeling van menselijke BBT maakt het verkrijgen van nauwkeurige metingen van de BBT een uitdaging. Bij mensen wordt de BAT verdeeld in de depots van WAT in de buik, thorax en, met name, de nek9. Autopsie en cadaverische studies zijn gebruikt om de BBT anatomisch10,11 te karakteriseren, maar deze methoden kunnen geen functionele informatie opleveren. Het is een uitdaging om de BBT te onderscheiden met behulp van conventionele beeldvormingstechnieken vanwege de vergelijkbare dichtheden van WAT en BBT8. Een bijkomend verwarrend probleem is dat beige vetdepots zich ook binnen dezelfde smalle lagen van fascia of in bepaalde depots bevinden met de WAT8, waardoor het een uitdaging is om onderscheid te maken met behulp van conventionele beeldvormingstechnieken.
Om dit probleem op te lossen, wordt het BBT-volume meestal gemeten door positronemissietomografie (PET) en computertomografie (CT) te combineren. Het radioactief gelabelde glucose-analoog 18 F-fluourodeoxyglucose (18F-FDG) is de meest gebruikte tracer voor het bestuderen van BBT12. Het lijdt echter aan verschillende beperkingen, zoals het blootstellen van proefpersonen aan ioniserende straling en invasief en duur zijn. Bovendien is de grootste beperking van de 18F-FDG-tracer dat deze de opname van een glucose-analoog meet, wat niet ideaal is gezien het feit dat vrije vetzuren de voorkeurssubstraten zijn voor BAT-thermogenese13. De 18F-FDG PET/CT-techniek meet niet de opname van vrije vetzuren als substraat voor thermogenese en meet daarom niet het fysiologische belang van BBT-thermogenese. Er zijn alternatieve technieken die worden gebruikt om menselijke BBT te beoordelen, waaronder de meting van de opname van zuurstof-15 gelabeld water (15 O-O2) 14,11 C-acetaat 15, een vetzuur met lange keten (18 F-fluor-6-thia-heptadecanoic acid)16 of adenosine 17, evenals magnetische resonantiespectroscopie 18 en magnetische resonantiebeeldvorming 19, maar deze zijn nog steeds extreem duur en stellen onderwerpen bloot aan ioniserende straling. Daarom ontbreekt een betrouwbare, goedkope en vooral veilige gouden standaard voor de kwantificering van menselijke BBT.
Infraroodthermografie (IRT) is een alternatieve niet-invasieve beeldvormingstechniek20,21 die de huidtemperatuur meet die een bekend BAT-depot bedekt. Hoewel dit een verhoogd energieverbruik afleidt, als de gemeten temperatuur de kerntemperatuur niet overschrijdt, kan niet worden vastgesteld of de gemeten verandering in temperatuur eenvoudigweg een gevolg is van een veranderde bloedstroom. Verder levert een gemeten stijging van de lokale temperatuur geen waarden op van veranderd energieverbruik, wat vaak het gewenste eindpunt is. Een aantal onderzoeksgroepen heeft IRT gebruikt om een temperatuurstijging te meten in depots van menselijke BBT na een cafeïne-interventie of koudeprikkel; Dit depot is de supraclaviculaire fossa 22,23,24,25,26,27.
Het is echter niet duidelijk of de werking van cafeïne op BAT direct is of wordt gemedieerd via neurale circuits. Er zijn aanwijzingen dat cafeïne bruiningskenmerken induceert in adipocyten in vitro22, en eerder werk heeft aangetoond dat cafeïne (100 mg) de hartslagvariabiliteit verhoogt, wat een indicator kan zijn van een toename van sympathische zenuwaandrijving systemisch in het lichaam27. Dit is in overeenstemming met het bewijs bij knaagdieren, waarbij cafeïne via het centrale zenuwstelsel de thermogenese verhoogt zonder een nadelige cardiodynamische impact28.
Aangezien het voorkeurssubstraat voor BBT-thermogenese vrije vetzuren is die zijn afgeleid van triglyceriden13, en actieve BBT-sequesters circulerende lipiden om thermogenese29 te ondersteunen, zijn metingen van substraatgebruik belangrijk bij het beoordelen van de fysiologische activering van BAT. De respiratoire uitwisselingsverhouding (RER) is de verhouding tussen het volume verbruikte zuurstof (V̇O 2) en geproduceerde kooldioxide (V̇CO2)30. Een RER van 0,7 is indicatief voor het vetzuurmetabolisme en een RER van 1,0 is indicatief voor het koolhydraatmetabolisme31. Daarom is bewijs van een voorkeur voor vetzuurgebruik boven een toename van het energieverbruik een belangrijke correlatie van BBT-thermogenese.
Bovendien, gezien het feit dat de opname van glucose een bekende correlatie is van BBT-activiteit (zie hierboven), zijn een daling van de bloedglucose parallel aan de verandering in substraatgebruik belangrijke correlaties van BBT-thermogenese. Eerdere studies met behulp van indirecte calorimetrie alleen, of samen met temperatuurregistratie bij nuchtere personen, hebben weinig tot geen acute verandering in substraatgebruik gemeld32,33. Omdat dit waarschijnlijk wordt gemaskeerd door de nuchtere toestand (waarbij preabsorptieve stofwisseling het vetgebruik bevordert), stellen we voor om IRT en indirecte calorimetrie te combineren met koolhydraatbelasting.
Dit artikel is bedoeld om een stapsgewijze aanpak te bieden die klinische onderzoekers kunnen gebruiken om het fysiologische belang van BAT bij mensen betrouwbaar en, belangrijker nog, veilig te kwantificeren door IRT, indirecte calorimetrie en bloedglucosespiegels te combineren. Deze techniek wordt het best gebruikt nadat proefpersonen met koolhydraten zijn geladen en zijn blootgesteld aan farmacologische BBT-middelen of omgevingsstimuli. De resultaten van deze aanpak kunnen worden gebruikt om BBT-activiteit, substraatgebruik en energieverbruik te bestuderen na activering van de BBT bij individuele proefpersonen27.

<table><tbody><tr><td>Automated Sphygmomanometer</td><td>Omron SEM-2 advanced, Omron, Kyoto, Japan</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dual-energy X-ray absorptiometry scanner&nbsp;</td><td>Hologic Horizon, Hologic Inc., Bedford, MA, USA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ECG-elektroden</td><td>Ambu Blue Sensor R, Maleisië</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Vijf-lead ECG</td><td>Medilog AR12 plus; Schiller, Duitsland</td><td></td><td></td></tr><tr><td>FLIR E60-camera</td><td>FLIR Systems Australia, Melbourne, Australië</td><td></td><td></td></tr><tr><td>FLIR Research Studio Professional Edition</td><td>FLIR Systems Australia, Melbourne, Australië</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Freestyle Optium Xceed</td><td>Abbott Diabetes Care, Alameda, Canada</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Glucose Gel</td><td>Winners Sports Nutrition, Mt Martha, Victoria, Australië</td><td></td><td></td></tr><tr><td>MaskA koudgesteriliseerde siliconen masker</td><td>7400 series Oro-Nasale Masker, Hans Rudolph</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Medilog Darwin2-software</td><td>Professional; Schiller, Duitsland</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Niet-contact Infrarood Thermometer&nbsp;</td><td>Berrcom, JXB-178, Guangdong, China</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Optium Glucose Strip Xceed</td><td>Abbott Diabetes Care, Alameda, Canada</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ParvoMedics TrueOne 2400 ademhalingsgasanalysator</td><td>ParvoMedics Inc, East Sandy, UT, USA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Voor-gesteriliseerde Niet-ademhalingsklep</td><td>Tweerichtings niet-ademhalingsklep T-vormige configuratie, 2600 Medium of 2700 Large, Hans Rudolph</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

met behulp van een combinatie van indirecte calorimetrie, infraroodthermografie en bloedglucosespiegels om de thermogenese van bruin vetweefsel bij mensen te meten

Using a Combination of Indirect Calorimetry, Infrared Thermography, and Blood Glucose Levels to Measure Brown Adipose Tissue Thermogenesis in Humans

Bij zoogdieren wordt bruin vetweefsel (BAT) snel geactiveerd als reactie op kou om de lichaamstemperatuur te handhaven. Hoewel BBT sterk is onderzocht bij kleine dieren, is het moeilijk om de activiteit van BBT bij mensen te meten. Daarom is er weinig bekend over de warmtegenererende capaciteit en fysiologische betekenis van BBT bij mensen, inclusief de mate waarin componenten van het dieet BBT kunnen activeren. Dit is te wijten aan de beperkingen in de momenteel meest gebruikte methode om de activering van BAT-radioactief gelabelde glucose (fluorodeoxyglucose of 18FDG) te beoordelen, gemeten met positronemissietomografie-computertomografie (PET-CT).
Deze methode wordt meestal uitgevoerd bij nuchtere proefpersonen, omdat voeding glucoseopname door de spieren induceert, wat de glucoseopname in de BAT kan maskeren. Dit artikel beschrijft een gedetailleerd protocol voor het kwantificeren van het totale menselijke energieverbruik en substraatgebruik van BAT-thermogenese door indirecte calorimetrie, infraroodthermografie en bloedglucosemonitoring te combineren bij volwassen mannen met koolhydraten. Om de fysiologische betekenis van BBT te karakteriseren, zijn metingen van de impact van BBT-activiteit op de menselijke gezondheid van cruciaal belang. We demonstreren een protocol om dit te bereiken door koolhydraatbelasting en indirecte calorimetrie te combineren met metingen van supraclaviculaire temperatuurveranderingen. Deze nieuwe benadering zal helpen om de fysiologie en farmacologie van BBT-thermogenese bij mensen te begrijpen.

Figuur 1 en figuur 2 geven een stroomdiagram van de onderzoeksopzet weer. Afbeeldingen van de protocolopstelling zijn weergegeven in figuur 3. De kenmerken van de deelnemers zijn te vinden in tabel 1. Representatieve voorbeelden van IRT van de beelden van een deelnemer, inclusief baseline (figuur 4A), post-koolhydraatbelasting (figuur 4B) en 60 minuten na cafeïnesuppletie (figuur 4C), met een representatief beeld van de camera-instelling, worden weergegeven in figuur 4D. Met name figuur 4A-C geeft een visuele weergave van de veranderingen in supraclaviculaire fossatemperatuur (Tscf) na de interventie; de temperatuurverschillen zijn bijzonder groot tussen figuur 4B en figuur 4C.
In figuur 5A-C tonen de resultaten van Van Schaik et al. de Tscf (figuur 5A), de temperatuur van een referentiepunt (Tref; Figuur 5C) en de kerntemperatuur (Tcore; Figuur 5B) van baseline (0 min) tot voltooiing van de dataverzameling (120 min). De gegevens tonen een cafeïne-interventie in vergelijking met placebo27. De resultaten beschreven in dit manuscript zijn puur representatief voor dit gepubliceerde artikel. Bovendien tonen de gegevens op Tscf geen groepseffect. De statistieken zijn te vinden in de aanvullende gegevens van Van Schaik et al.27.
De duidelijke toename van de supraclaviculaire temperatuur valt samen met veranderingen in het substraatgebruik en de snelle verlaging van de bloedglucosespiegels na de interventie, zoals weergegeven in figuur 6. Deze resultaten, in combinatie met het ontbreken van temperatuurverandering voor de Tref- en Tcore-temperaturen (figuur 5B,C), zijn indicatief voor BBT-thermogenese. Naarmate het energieverbruik toeneemt (figuur 6E), neemt de RER bovendien af (figuur 6A), wat samenvalt met een toename van de vetoxidatie (figuur 6B) na de interventie.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64451/64451fig01.jpg"> Figuur 1: Schema van maatregelen met tijd om te voltooien in elke periode van 15 minuten. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64451/64451fig01large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64451/64451fig02.jpg"> Figuur 2: Stroomschema van de onderzoeksopzet. Experimenteel proces. Zwart vierkant = tijd van koolhydraatbelasting; zwarte cirkel = tijdstip van interventie. Afkortingen: IRT = infraroodthermografie; BGL = bloedglucosewaarden. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64451/64451fig02large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64451/64451fig03.jpg"> Figuur 3: Representatieve beelden van het protocol. (A) Instellen zonder dat de deelnemer aanwezig is; B) gegevensverzameling van de deelnemers bij baseline; C) computer voor indirecte calorimetrie; (D) deelnemer die de koolhydraatbelasting na de basislijnmetingen consumeert. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64451/64451fig03large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64451/64451fig04.jpg"> Figuur 4: Representatieve voorbeelden van het IRT en de camera-instelling. Warmtebeelden van een deelnemer, bij (A) baseline, (B) na koolhydraatbelasting en (C) 60 min na de interventie van cafeïne, met (D) een representatief beeld van de camera-instelling. Afkorting: IRT = infrarood thermografie. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64451/64451fig04large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64451/64451fig05.jpg"> Figuur 5: Effecten van de ingreep op de temperatuurmetingen. Baseline ruwe temperatuurveranderingen van (A) Tscf, (B) Tcore en (C) Tref bij deelnemers na een koolhydraatbelasting (tijdstip = 0) en de toediening van een cafeïne-interventie of een placebocapsule (tijd = 45 min tot 120 min)27. Dit cijfer is aangepast van Van Schaik et al.27. (A-C) Lichtgrijze doos 1 = tijdstip van koolhydraatbelasting; vak 2 = pre-interventie; donkergrijs vak 3 = postinterventie; blauwe cirkels = cafeïne interventie; zwarte driehoeken = placebo-interventie. De gegevens worden uitgedrukt als het minimum tot het maximum, waarbij alle punten worden weergegeven in het vak en de snorharen. De variantie wordt uitgedrukt als gemiddelde ± SD, n = 8 per interventie; * vertegenwoordigt het cafeïne-interactie-effect (*p < 0,05). De gegevenswaarden werden geanalyseerd met behulp van een drieweganalyse van variantie met herhaalde metingen. Afkortingen: Tscf = temperatuur in de supraclaviculaire fossa; Tcore = kerntemperatuur; Tref = controlereferentiepunt. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64451/64451fig05large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64451/64451fig06.jpg"> Figuur 6: Effecten van de interventie op metabole maatregelen. Veranderingen in (A) RER, (B) de vetoxidatiesnelheid, (C) de koolhydraatoxidatiesnelheid, (D) bloedglucosespiegels en (E) energieverbruik bij deelnemers na een koolhydraatbelasting (tijd = 0) en de toediening van een cafeïnecapsule of een placebocapsule (tijd = 45 min tot 120 min). Lichtgrijze doos 1 = tijdstip van koolhydraatbelasting; vak 2= pre-interventie; donkergrijs vak 3 = postinterventie; blauwe cirkels = cafeïne interventie; zwarte driehoeken = placebo-interventie. De gegevens worden uitgedrukt als het minimum tot het maximum, waarbij alle punten worden weergegeven in het vak en de snorharen. e) pre- en post-toediening van de interventies; grijze balk = placebo-interventie; blauwe staaf = cafeïne interventie. De variantie wordt uitgedrukt als gemiddelde ± SD, n = 8 per interventie; * vertegenwoordigt het cafeïne-interactie-effect (*p < 0,05). De gegevenswaarden werden geanalyseerd met behulp van een drieweganalyse van variantie met herhaalde metingen. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64451/64451fig06large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td></td>
			<td>Alle deelnemers</td>
		</tr><tr><td>n</td>
			<td>8</td>
		</tr><tr><td>Leeftijd, jaren</td>
			<td>22 ± 2</td>
		</tr><tr><td>Hoogte, cm</td>
			<td>176 ± 5</td>
		</tr><tr><td>Gewicht, kg</td>
			<td>74 ± 8</td>
		</tr><tr><td>BMI, kg/m2 </td>
			<td>23 ± 2</td>
		</tr><tr><td>Lichaamsvet, %</td>
			<td>20 ± 8</td>
		</tr></tbody></table>Tabel 1: Demografie van de deelnemers. De waarden zijn middelen ± SD, tenzij anders aangegeven. Deze tabel is van Van Schaik et al.27.

Hier presenteren we een protocol om de fysiologische betekenis van de impact van bruin vetweefsel (BAT) activiteit op het menselijk metabolisme te kwantificeren. Dit wordt bereikt door koolhydraatbelasting en indirecte calorimetrie te combineren met metingen van supraclaviculaire temperatuurveranderingen. Deze nieuwe aanpak kan helpen bij het ontwikkelen van een farmacologisch doelwit voor BBT-thermogenese bij mensen.

Met behulp van een combinatie van indirecte calorimetrie, infraroodthermografie en bloedglucosespiegels om de thermogenese van bruin vetweefsel bij mensen te meten

In mammals, brown adipose tissue (BAT) is activated rapidly in response to cold in order to maintain body temperature. Although BAT has been studied ...

Dit protocol kwantificeert de fysiologische betekenis van menselijke bruine vetweefselactiviteit door koolhydraatbelasting te combineren met indirecte calorimetrie en veranderingen in supraclaviculaire temperatuur. Dit protocol stelt deelnemers niet bloot aan ioniserende straling. Het detecteert veranderingen in de gemeten supraclaviculaire temperatuur, gecombineerd met de kerntemperatuur en de temperatuur van een referentiegebied.Begin op de dag van het onderzoek met het meten van de lengte en het gewicht van de deelnemers. Vraag de deelnemers om op een sokkel te gaan liggen. Noteer na 30 minuten hun basislijnparameters.Laat de deelnemers hierna drie koolhydraatoefeningen van elk 90 gram consumeren tussen nul en 15 minuten. Na 45 minuten na het laden van koolhydraten, laat de deelnemers de 100 milligram cafeïnebehandelingscapsules innemen. Om indirecte calorimetrie uit te voeren, gebruikt u een gekalibreerde ademhalingsgasanalysator.Monteer het koud gesteriliseerde siliconenmasker uitgerust met een voorgesteriliseerde niet-rebreathing klep op de deelnemer om kamerlucht af te geven. Bevestig het op het gezicht van de deelnemer met een gaasbevestiging en controleer op lekken. Zorg ervoor dat de inspiratoire en expiratoire buizen zijn aangesloten.Na het bemonsteren van de verlopen gassen, verwijdert u het masker om de aanvullende metingen te voltooien en meet u de oxidatiesnelheden van het substraat zoals beschreven in het tekstmanuscript. Gebruik na elke ronde van verlopen gasmetingen een glucometer om de bloedglucosewaarden te meten. Richt een contactloze thermometer naar het midden van het voorhoofd van de deelnemer.Om infraroodthermografie uit te voeren, laat je de deelnemers rechtop zitten en recht vooruit kijken met hun nek naar borstgebied blootgesteld. Plaats de warmtebeeldcamera op een statief op nekhoogte op ongeveer een meter van het gezicht van het onderwerp. Nadat je de camera hebt ingeschakeld, pas je de scherpstelling aan door aan de scherpstelring te draaien.Richt een laserpointer op de middellijn van de nek van de deelnemer. En klik op een foto. Om de infraroodbeelden te analyseren, beoordeelt u de oppervlaktetemperaturen van het thoraxgebied dat bruin vetweefsel bevat door driehoekige gebieden van belang in de supraclaviculaire fossa en een cirkelvormig gebied van belang op het borstbeen te plaatsen.Beschouw het sternale gebied als het controlereferentiepunt, omdat dit gebied geen bruin vetweefsel bevat. Zodra de regio's zijn gekruist, verkrijgt u de gemiddelde en standaarddeviatie van de temperatuur voor elke regio met behulp van de software. De effecten van cafeïne-interventie op de temperatuurmetingen van de kern en het supraclaviculaire fossa-gebied zijn indicatief voor de thermogenese van bruin vetweefsel.De interventie vertoonde een duidelijk effect in de metabole metingen met de toename van de supraclaviculaire temperatuur en snelle verlaging van de bloedglucosespiegels. Deze bevindingen, gecombineerd met een gebrek aan temperatuurveranderingen in de kern- en referentiegebiedtemperatuur, wijzen op thermogenese van bruin vetweefsel. Verhoogd energieverbruik resulteerde in een verminderde ademhalingsuitwisselingsverhouding en toevallig een verhoogde vetoxidatie.Het is belangrijk om ervoor te zorgen dat de kamer op een stabiele temperatuur wordt gehouden; het siliconenmasker is goed gemonteerd; en de warmtebeeldcamera bevindt zich op nekhoogte, op minstens een meter afstand van de deelnemer. Het zou raadzaam zijn om bloedmarkers voor insuline te meten. De snelle terugkeer van de bloedglucosespiegels na de interventie suggereert dat de interventie zelf de insulinesignalering kan hebben verbeterd.Deze techniek maakt analyse van herhaalde metingen mogelijk. Dit is iets dat niet kan worden gedaan met PET-beeldvormingsstudies. De mate waarin voedingsingrediënten en farmacologische middelen de activiteit van bruin vetweefsel bij mensen kunnen beïnvloeden, kan nu op een veilige, toegankelijke manier worden beoordeeld.

using-combination-indirect-calorimetry-infrared-thermography-blood

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Werkwijze van functionele beeldvorming van muis bruin vetweefsel (BAT) beschreven waarin koud-gestimuleerde opname van 18F-Fluorodeoxyglucose (FDG) in BAT niet-invasief gemeten met een gestandaardiseerd protocol micro-PET/CT. Deze methode is robuust en gevoelig zijn voor verschillen in BAT activiteiten in muismodellen detecteren.

Functionele Beeldvorming van bruin vet in Muizen met FDG micro-PET/CT

In dit videoverslag tonen we de toepassing van Cerenkov Luminescentie Beeldvorming (CLI) voor interscapulair bruin vetweefsel bij muizen onder geactiveerde en depressieve omstandigheden.

Cerenkov luminescentiebeeldvorming van interscapular Brown VetWeefsel

De hier gepresenteerde methode gebruikt 18F-Fluorodeoxyglucose (18F-FDG) positron emissie tomografie / computertomografie (PET-CT) en vet-water gescheiden magnetische resonantie beeldvorming (MRI), elk afgetast na 2 uur blootstelling aan thermisch (24 ° C ) en koude omstandigheden (17 ° C) om bruin vetweefsel (BAT) bij volwassen proefpersonen kaart.

Human Brown VetWeefsel Depots automatisch gesegmenteerd op basis van Positron Emissie Tomografie / Computed Tomography en geregistreerde Magnetic Resonance Images

Met behulp van gratis, open-source software, hebben we een analytische aanpak om te kwantificeren van totale en regionale bruin vetweefsel (BAT) volume en metabole activiteit van BBT met 18F-FDG PET/CT.

Hele lichaam en regionale kwantificering van actieve mens bruin vetweefsel met 18F-FDG PET/CT

Functionele beeldvorming en kwantificering van thermogene vetdepots bij muizen met behulp van een micro-PET / MR-beeldvormingsgebaseerde benadering.

Visualisatie en kwantificering van bruine en beige vetweefsels bij muizen met behulp van [18F] FDG Micro-PET / MR Imaging

Dit manuscript beschrijft een protocol om de basale stofwisseling en de oxidatieve capaciteit van thermogene adipocyten bij zwaarlijvige muizen te meten.

Het bepalen van het basale energieverbruik en de capaciteit van thermogene adipocyten om energie te besteden aan zwaarlijvige muizen

Hier presenteren we een protocol voor het meten van bruine vetweefselactiviteit na een maaltijd bij mensen en proefdieren.

Infraroodthermografie voor de detectie van veranderingen in de activiteit van bruin vetweefsel

Preadipocyten worden geïsoleerd uit de stromale vasculaire fractie van interscapulier bruin vetweefsel van pasgeboren muizen en gedifferentieerd tot cellen die lipidedruppeltjes accumuleren, moleculaire markers tot expressie brengen en de mitochondriale morfologie van volwassen bruine vetcellen vertonen. Deze cellen worden verder geanalyseerd door middel van immunofluorescentie en transmissie-elektronenmicroscopie.

Differentiatie en beeldvorming van bruine vetcellen uit de stromale vasculaire fractie van interscapulier vetweefsel van pasgeboren muizen

In dit protocol worden methoden geschetst die relevant zijn voor BAT-geoptimaliseerde arterioveneuze metabolomics met behulp van GC-MS in een muismodel. Deze methoden maken het mogelijk om waardevolle inzichten te verwerven in de uitwisseling van BBT-gemedieerde metabolieten op organismaal niveau.

Arterioveneuze metabolomics om in vivo metabolietuitwisseling in bruin vetweefsel te meten

Spectral Karyotypering (SKY) is een geavanceerde cytogenetica techniek om genomische en chromosomale afwijkingen te identificeren. Deze techniek profiteert van chromosoom schilderkunst probes, waarmee indeling van alle chromosomen. SKY kan ook worden aangegeven complexe chromosoomafwijkingen en de segregatie defecten in muizen en mensen met diverse ziekten, waaronder polycystische nierziekte.

Spectral Karyotypering naar chromosoomafwijkingen bij mensen en muizen Studie met polycysteuze nierziekte

Leer hoe u bruin vetweefselthermogenese bij mensen meet met indirecte calorimetrie, infraroodthermografie en bloedglucosespiegels. Deze niet-invasieve methode combineert koolhydraatbelasting met cafeïne-interventie.

Met behulp van een combinatie van indirecte calorimetrie, infraroodthermografie en bloedglucosespiegels om de thermogenese van bruin vetweefsel bij mensen te meten (Video) | JoVE Journal

Met behulp van een combinatie van indirecte calorimetrie, infraroodthermografie en bloedglucosespiegels om de thermogenese van bruin vetweefsel bij mensen te meten

Meer video's verkennen