Name: O-ring aortabanding versus traditionele transversale aortavernauwing voor het modelleren van drukoverbelasting-geïnduceerde cardiale hypertrofie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-10-06T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 24 s
Description: Leer een nieuwe O-ring aortabandtechniek voor het induceren van drukoverbelasting-geïnduceerde cardiale hypertrofie bij muizen. Deze methode biedt verbeterde reproduceerbaarheid en consistentie in cardiovasculair onderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd ondersteund door het Bundesministerium für Bildung und Forschung (BMBF) aan L.L., N.F., en O.J.M. (IVOLADMT-HF; FKZ 01KC2006A).

De dierproeven werden uitgevoerd volgens de principes van het regionaal comité (Ministerium für Energiewende, Landwirtschaft, Umwelt, Natur und Digitalisierung des Landes Schleswig-Holstein, vergunningsnummer: V242-21249/2020 [38-4/20]). De muizen die voor dit onderzoek werden gebruikt, werden verkregen uit een commerciële bron (zie Materiaaltabel). De dieren werden gehouden onder standaardomstandigheden met een 12 uur lichte, 12 uur nachtcyclus; water en voedsel werden ad libitum aangeboden.
1. Verzorging van dieren
<ol><li>Huis de muizen in gespecialiseerde kooien met beddengoed, nestmateriaal, een schuilplaats en goede toegang tot drinkwater en voedsel.</li>
	<li>Houd de dieren onder continue gespecialiseerde veterinaire controle en behandeling. OPMERKING: Voor muizen die door externe leveranciers zijn besteld, moet u 7 dagen acclimatisatie garanderen voordat u de procedure start.</li>
</ol>2. Voorbereiding van de o-ring
OPMERKING: Een o-ring met een vaste diameter van 0,4 mm wordt aanbevolen om na 2 weken cardiale hypertrofie te induceren. De omvang en ernst van het geïnduceerde cardiale fenotype zijn afhankelijk van de grootte van de o-ringdiameter.
<ol><li>Voer eerst één snede van de o-ring (zie Tabel van materialen) onder de microscoop uit met een schaar of een scalpel om de plaatsing rond de aorta mogelijk te maken (figuur 1A, B).</li>
	<li>Prik elke ringzijde dicht bij de snede met een naald verbonden met een 8-0 niet-absorbeerbare hechting en trek aan de draad. Snijd en laat 2-3 cm aan de ene kant en 2 cm aan de andere kant om de o-ring rond de aorta in de laatste stap vast te maken (figuur 1C, D).</li>
	<li>Neem vóór de operatie het ligatiehulpmiddel (soortinstrument, zie Tabel met materialen) en trek het uiteinde van de draad (dat langer wordt bewaard) van één ringzijde door het gat van de vernauwing (figuur 1E, F). Leg de ligatiehulp met de bevestigde o-ring opzij voor plaatsing in de volgende stap (stap 6).</li>
	<li>Voor de desinfectie van de ring met de draden, plaats de ring gedurende een half uur in een alcoholoplossing. Leg het daarna op cellulose om te drogen. Bewaar de gedroogde ring in een gesloten kuip of hoesje tot gebruik. Tijdens de operatie, nadat u de draad door het ligatiehulpmiddel hebt getrokken, plaatst u de ring op een schoon oppervlak tot gebruik.</li>
</ol><img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64455/64455fig01.jpg"> Figuur 1: Het uitvoeren van de o-ringvoorbereiding voor ligatie. (A) Een o-ring met een vaste diameter wordt aan één kant met een schaar of een scalpel gesneden. (B) Afbeelding van een o-ring. (C) Elke o-ringzijde wordt doorboord met een 8-0 prolene draad. (D) O-ring doorboord met twee draden. (E) De draden van één ringzijde van de o-ring worden door het gat van het ligatiehulpmiddel getrokken. (F) Definitieve positie vóór plaatsing: de draden van de ene zijde worden door het gat van het ligatiehulpmiddel geplaatst, terwijl de draden van de andere zijde los worden gehouden. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64455/64455fig01large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
3. Premedicatie van de muizen en voorbereiding van het werkveld
<ol><li>Om voldoende analgesie te ontvangen tijdens de operatie, injecteert u de pijnstillende buprenorfine (0,1 mg/kg, zie materiaaltabel) intraperitoneaal 20 minuten voordat u doorgaat naar de operatie. OPMERKING: Voor deze studie werd de pijnmedicatie gebruikt volgens de aanbevelingen van de Gesellschaft für Versuchstierkunde /Society of Laboratory Animal Science (GV-SOLAS).</li>
	<li>Na premedicatie verdooft u de muis in een inductiekamer met 2% -4% isofluraan gemengd met 0,5-1,0 l / min van 100% O2.</li>
	<li>Scheer de vacht aan de linker thoraxzijde van de verdoofde muis. Plaats de muis na het scheren terug in de met isofluraan gevulde kamer en wacht op voldoende sedatie voordat u het dier intubeert. OPMERKING: Het juiste tijdstip van de sedatie toont een langzame ademhaling, maar vermijdt snap breathing. Afhankelijk van de isofluraangasinstelling duurt het 2-3 minuten om het juiste niveau van sedatie te bereiken.</li>
	<li>Zet het verwarmingskussen voor de operatie aan om de lichaamstemperatuur van het dier (37 °C) te handhaven. Sluit het verwarmingskussen aan op een rectale sonde (zie Materiaaltabel) om de lichaamstemperatuur van de muis automatisch te handhaven.</li>
</ol>4. Intubatie van de muizen
<ol><li>Bereid de vereiste instrumenten voor (figuur 2A). Desinfecteer de laryngoscoop vóór de operatie door deze ongeveer 1-3 minuten in alcohol te plaatsen en vervolgens een nacht te drogen.</li>
	<li>Rek een elastiekje rond het verwarmingskussen om de muis met de voortanden op de plaat te bevestigen. Plaats de verdoofde muis in rugligging op het verwarmingskussen.</li>
	<li>Plaats het elastiekje over de voortanden van het dier om de nek op de plaat te verlengen.</li>
	<li>Richt een lichtbron op de keel voor een goede zichtbaarheid van de opening van de luchtpijp voor de endotracheale intubatie (figuur 2B).</li>
	<li>Open de mond voorzichtig met één hand en plaats een intubatiehulpmiddel (handgemaakte laryngoscoop, zie Materiaaltafel) (figuur 2A[3]).</li>
	<li>Beweeg met de andere hand en kleine tang voorzichtig de tong om de opening van de luchtpijp vrij te maken.</li>
	<li>Gebruik deze hand ook om de endotracheale buis in de luchtpijp te brengen. Aan de andere kant, houd nog steeds de intubatiehulp vast. Gebruik voor intubatie een canule van 22 G (zie materiaaltabel) (figuur 2A[1]).</li>
	<li>Sluit de positie van de endotracheale buis via een driewegstopkraan aan op een ventilator (zie Materiaaltabel) voor muizen om de juiste endotracheale buispositie (endotracheal) te bevestigen.</li>
	<li>Bewaak de juiste ventilatie volgens de instructies van de fabrikant (getijdenvolume van 200 μL en ademhalingsfrequentie tussen 100-150 ademhalingen/min) (figuur 2C).</li>
	<li>Bevestig voldoende anesthetische diepte door een teenknijflexcontrole (geen reflexrespons).</li>
	<li>Zet de anesthesie-instelling op 2% isofluraan gemengd met 0,5-1,0 l/min 100% O2.</li>
	<li>Breng oogheelkundige zalf aan op de ogen om droogheid tijdens de operatie te voorkomen.</li>
	<li>Desinfecteer met behulp van een wattenstaafje het operatiegebied 3 keer met een in de handel verkrijgbare desinfectiemiddeloplossing (zie Materiaaltabel).</li>
</ol><img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64455/64455fig02.jpg"> Figuur 2: Intubatie van de muis. (A) Intubatie-instrumenten: (1) Een 22 G i.v. canule wordt gebruikt als endotracheale buis (zonder mandarijn); (2) Tang; (3) Handgemaakte laryngoscoop (vervormde / afgeplatte canule gelijmd met houten stokken en tape). (B) Het uitvoeren van intubatie op het geplaatste verwarmingskussen. (C) Geïntubeerde muis aangesloten op een ventilator. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64455/64455fig02large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
5. Chirurgie en voorbereiding voor ringpositionering
OPMERKING: Gebruik steriele materialen en instrumenten om infecties te voorkomen.
<ol><li>Gebruik een schaar om een 0,5-1 cm lange huidincisie te maken in het midden van een lijn tussen het xyfusproces en de linker oksel. Gebruik een tang om de spierlaag van de onderliggende ribben te scheiden en plaats twee retractors (5 mm lengte, zie materiaaltabel) in de incisie om de ribbenkast bloot te leggen.</li>
	<li>Om de linker thoracotomie te starten, voert u een kleine incisie (~ 1-2 mm) uit in de intercostale spieren tussen de tweede en derde rib met behulp van een microveerschaar. Open de thoracale holte en verdeel de incisie met een schuine tang van 45°.</li>
	<li>Plaats drie borstterugtrekkingen (1,0-2,5 mm lang) in de incisie voor het openen van de thoracale holte om de visualisatie te verbeteren.</li>
	<li>Om de aortaboog bloot te leggen, probeer de thymus en het vetweefsel op te tillen en voorzichtig van de boog te scheiden met een fijne punt 45 ° schuine tang.</li>
</ol>6. Ligatie van de transversale aorta met de o-ring
<ol><li>Leg de aortaboog bloot met een 45° schuine tang in één hand. Plaats met de andere hand de o-ring verbonden met de ligatiehulp via de draden van één zijde (stap 2).</li>
	<li>Passeer de draden met behulp van het ligatiehulpmiddel onder de aortaboog van de caudale kant naar de schedelzijde van de transversale aorta tussen de brachiocephalische en linker gemeenschappelijke halsslagaders (figuur 3A).</li>
	<li>Neem beide draden tussen het ligatiehulpmiddel en de aortaboog voorzichtig met de tang. Trek de ligatiehulp in en verwijder deze en plaats de o-ring voorzichtig rond de boog door aan de draden aan elke kant te trekken (figuur 3B).</li>
	<li>Na succesvolle positionering bevestigt u de o-ring met de draden en een chirurgische knoop. Maak een extra om te voorkomen dat de knoop aan elke kant wordt geopend (figuur 3C).</li>
</ol><img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64455/64455fig03.jpg"> Figuur 3: Uitvoeren van de o-ringimplantatie. (A) De aortaboog wordt blootgesteld door drie retractoren van 1,0-2,5 mm. Beide lange draden van één ringzijde worden onder de aorta doorgegeven. (B) De o-ring wordt geplaatst door zachtjes op de ring te duwen en aan de draden te trekken. (C) De is o-ring bevindt zich in de juiste positie en één schedeldraad is aan elke kant geknoopt met caudale draad. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64455/64455fig03large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
7. Hechting en postoperatief herstel
<ol><li>Verwijder de drie borstoprolmechanismen (2,5 mm lang) van de incisie.</li>
	<li>Verwijder indien nodig de resterende lucht uit de thorax door deze te vullen met een warme 0,9% isotone zoutoplossing.</li>
	<li>Om de thoraxincisie bloot te leggen voor hechting, neemt u opnieuw twee retractors (5 mm lang) om de huid aan de zijkant te houden.</li>
	<li>Sluit de thorax met twee of drie 6-0 niet-absorbeerbare hechtingen (zie Materiaaltabel) en knijp de uitstroom van de ventilator gedurende 2 s af om de longen opnieuw op te blazen.</li>
	<li>Verwijder de twee retractors en sluit de huid met drie tot vijf 4-0- absorbeerbare hechtingen.</li>
	<li>Schakel de isofluraan en monitor uit. Wanneer het dier zichzelf begint te ademen, bewegen de snorharen en kunnen de teenknijpreflexen worden geactiveerd, de muis uitbannen. Leg de muis aan de linkerkant onder de warmtelamp in zijn verzorgingseenheid en observeer hem totdat hij helemaal wakker is.</li>
	<li>Laat een dier niet onbeheerd achter totdat het weer voldoende bij bewustzijn is. OPMERKING: Een dier dat een operatie heeft ondergaan, moet zijn eigen zorgeenheid (kooi) krijgen voor een beter herstel.</li>
	<li>Voer pijnbestrijding uit met tramadol (1 mg / ml) in drinkwater gedurende 7 dagen en buprenorfine (0,1 mg / kg, 3x daags) door intraperitoneale injectie gedurende 3 dagen na de operatie indien nodig. OPMERKING: Volg de aanbevelingen van de lokale commissie voor dierethiek voor postoperatieve analgesie.</li>
	<li>Controleer medicatie door de waterflessen dagelijks te wegen en het gedrag van het dier in de gaten te houden.</li>
</ol>8. Bevestiging van succesvolle vernauwing en juiste positie van de ring
<ol><li>Controleer een dag na de operatie de stenose met behulp van echografie door de maximale stroomsnelheid over de stenose te meten.</li>
	<li>Gebruik voor metingen echocardiografie met een echografiesysteem en een transducersonde met een frequentie van 30 MHz (zie Materiaaltabel).</li>
	<li>Zoals hierboven beschreven, onderhoud anesthesie met behulp van een masker op 1,5% -2% isofluraan met 0,5-1,0 l / min van 100% O2.</li>
	<li>Plaats het verdoofde dier in rugligging op het verwarmingskussen. Sluit het verwarmingskussen aan op een rectale sonde om de lichaamstemperatuur op 37 °C ± 1 °C te houden en controleer de hartslag met een ECG met behulp van vier muispootsensoren (zie Materiaaltabel).</li>
	<li>Gebruik voor een betere visualisatie ontharingscrème.</li>
	<li>Een succesvol uitgevoerde ORAB resulteert in een verhoogde stroomsnelheid over de stenose zoals gemeten door echografie (~ 2.400 mm / s) (figuur 4C). Plaats voor deze meting de transducerkop parasternaal aan de rechterkant van de thorax om de aortaboog te lokaliseren door middel van tweedimensionale (2D) beeldvorming ("B-modus").<ol><li>Gebruik de kleur Doppler om de bloedstroom in de aorta te visualiseren en meet met de gepulste golf Doppler bloedstroomsnelheid over de stenose. OPMERKING: Schijngeoperatiede muizen (controlechirurgie zonder vernauwing) vertonen een bloedstroomsnelheid van ~ 600-900 mm / s. Daarnaast resulteert een succesvolle ORAB ook in een verhoogde snelheidsstroomverhouding tussen de rechter halsslagader (~150 mm/s) (RC, Figuur 4A) en de linker halsslagader (~300 mm/s) LC, Figuur 4B) in de muis.</li>
	</ol></li>
	<li>Visualiseer de rechter en linker arteria carotis interna door middel van tweedimensionale (2D) beeldvorming (B-modus). Plaats de transducerkop horizontaal aan de linker- en rechterkant van de nek in een hoek van 45° en gebruik de gepulseerde golf Doppler om de bloedstroomsnelheid te bepalen. OPMERKING: Bij schijnmuizen is de snelheidsstroom in beide slagaders vergelijkbaar.</li>
</ol><img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64455/64455fig04.jpg"> Figuur 4: Bevestiging van transversale aortaligatie met behulp van pulsgolf Dopplersnelheidsmeting in de halsslagaders. (A) Representatieve gepulseerde golf Dopplersnelheidssignalen van de rechter halsslagader. (B) De stenose resulteert in een hogere stroomsnelheid in de rechter halsslagader dan in de linker. (C) De door vernauwing geïnduceerde stenose resulteert in een stroomsnelheid in de dalende aorta van meer dan 2.400 mm/s. Schijnmuizen vertonen een stroomsnelheid van 600-900 mm/s. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64455/64455fig04large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.</a>

<ol><li>Frey, N., Olson, E. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+hypertrophy%3A+The+good%2C+the+bad%2C+and+the+ugly%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Cardiac hypertrophy: The good, the bad, and the ugly.</a> Annual Review of Physiology. 65, 45-79 (2003).</li>
<li>Bui, A. L., Horwich, T. B., Fonarow, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+and+risk+profile+of+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Epidemiology and risk profile of heart failure.</a> Nature Reviews Cardiology. 8 (1), 30-41 (2011).</li>
<li>Bolli, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+initiatives+to+improve+the+rigor+and+reproducibility+of+articles+published+in+Circulation+Research%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">New initiatives to improve the rigor and reproducibility of articles published in Circulation Research.</a> Circulation Research. 121 (5), 472-479 (2017).</li>
<li>Dunlay, S. M., Weston, S. A., Jacobsen, S. J., Roger, V. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Risk+factors+for+heart+failure%3A+A+population-based+case-control+study%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Risk factors for heart failure: A population-based case-control study.</a> The American Journal of Medicine. 122 (11), 1023-1028 (2009).</li>
<li>Riehle, C., Bauersachs, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Small+animal+models+of+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Small animal models of heart failure.</a> Circulation Research. 115 (13), 1838-1849 (2019).</li>
<li>Rockman, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Segregation+of+atrial-specific+and+inducible+expression+of+an+atrial+natriuretic+factor+transgene+in+an+in+vivo+murine+model+of+cardiac+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 88 (18), 8277-8281 (1991).</li>
<li>Hu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minimally+invasive+aortic+banding+in+mice%3A+effects+of+altered+cardiomyocyte+insulin+signaling+during+pressure+overload%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Minimally invasive aortic banding in mice: effects of altered cardiomyocyte insulin signaling during pressure overload.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 285 (3), 1261-1269 (2003).</li>
<li>Mohammed, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variable+phenotype+in+murine+transverse+aortic+constriction%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Pathology%22%5BJournal%5D)">Variable phenotype in murine transverse aortic constriction.</a> Cardiovascular Pathology. 21 (3), 188-198 (2012).</li>
<li>Nakao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((O-ring-induced+transverse+aortic+constriction+%28OTAC%29+is+a+new+simple+method+to+develop+cardiac+hypertrophy+and+heart+failure+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">O-ring-induced transverse aortic constriction (OTAC) is a new simple method to develop cardiac hypertrophy and heart failure in mice.</a> Scientific Reports. 12, 85(2022).</li>
<li>Melleby, A. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+method+for+high+precision+aortic+constriction+that+allows+for+generation+of+specific+cardiac+phenotypes+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Research%22%5BJournal%5D)">A novel method for high precision aortic constriction that allows for generation of specific cardiac phenotypes in mice.</a> Cardiovascular Research. 114 (12), 1680-1690 (2018).</li>
<li>Lindsey, M. L., Kassiri, Z., Virag, J. A. I., de Castro Bras, L. E., Scherrer-Crosbie, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+measuring+cardiac+physiology+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Guidelines for measuring cardiac physiology in mice.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 314 (4), 733-752 (2018).</li>
<li>Garcia-Menendez, L., Karamanlidis, G., Kolwicz, S., Tian, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Substrain+specific+response+to+cardiac+pressure+overload+in+C57BL%2F6+mice%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Substrain specific response to cardiac pressure overload in C57BL/6 mice.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 305 (3), 397-402 (2013).</li>
<li>deAlmeida, A. C., van Oort, R. J., Wehrens, X. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transverse+aortic+constriction+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Transverse aortic constriction in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (38), e1729(2010).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Op schroefdraad/hechting gebaseerde aortabanding wordt al vele jaren gebruikt om cardiale hypertrofie met drukoverbelasting bij muizen te induceren. Het is een gevestigde methode om de pathomechanismen van cardiale remodellering en ziekteprogressie in vivo te onderzoeken. De beperkingen zijn de relatief hoge variantie in de mate van stenose en bijgevolg de verbouwing. De onlangs geïntroduceerde ORAB-techniek die voor het eerst werd beschreven door Melleby et al.10 optimaliseert de conven...

Terwijl fysiologische cardiale hypertrofie kan worden waargenomen tijdens ontwikkeling, lichaamsbeweging en zwangerschap, reageert pathologische cardiale hypertrofie op hemodynamische stressaandoeningen zoals arteriële hypertensie, hartklepaandoeningen of genmutaties. Aanvankelijk ondergaat het hart een remodellering die wordt gekenmerkt door een verhoogde cardiomyocytengrootte en verdikking van de ventriculaire wanden om de hartfunctie te behouden 1,2. Aan de andere kant wordt pathologische cardiale remodellering geassocieerd met een verhoogd risico op aritmie, plotselinge dood en hoge mortaliteit. Ten slotte resulteert het na verloop van tijd in ventriculaire verwijding, een sterke afname van de contractiele functie en uiteindelijke progressie naar hartfalen (HF), wat geassocieerd is met hoge morbiditeit, mortaliteit en maatschappelijke kosten3. Daarom is er een dringende behoefte om de moleculaire achtergrond te begrijpen om nieuwe therapeutische strategieën te ontwikkelen4.
Aortabanding is een model dat drukoverbelasting-geïnduceerde linkerventrikel (LV) hypertrofie en hartfalen bij muizen5 nabootst. Met deze methode is het mogelijk om de pathhomemechanismen van door drukoverbelasting geïnduceerde cardiale remodellering in vivo te onderzoeken. De eerste aortabandingsprocedure bij muizen werd gemeld door Rockman et al.6. Drukoverbelasting wordt geïnduceerd door een op draadverbinding gebaseerde ligatie rond de aorta (tussen de brachiocephalische en linker gemeenschappelijke halsslagader). Om een stenose met een diameter van 0,4 mm te creëren, wordt een hechtdraad rond een naald van 27 G en de aorta geplaatst. Na ligatie wordt de naald verwijderd 6,7.
Hoewel de naalddiameter vast is, is de strakheid van de draad sterk afhankelijk van de chirurg en beïnvloedt daarom het geïnduceerde fenotype van cardiale hypertrofie. Bovendien is er in de op draad/hechtingen gebaseerde methode een variabele mate van stenosediameter na de operatie, geassocieerd met een hoge variantie in mortaliteit 8,9. Bovendien is het trainen van deze methode een uitdaging, vooral met betrekking tot het vinden van het juiste niveau en consistentie in het aanspannen van de draad. Ten slotte treedt aan het begin van de training een hoge intra- en postoperatieve mortaliteit op als gevolg van verstoring van de aorta of ander weefselletsel, evenals een hoge variatie in de mate van stenose bij de overlevende dieren.
Onlangs werd een geoptimaliseerde procedure van aortabanding beschreven door Melleby et al.10. Ze presenteerden de ORAB-methode (o-ring aortabanding) met minder variatie in stenose en zeer reproduceerbare niveaus van drukoverbelasting door gebruik te maken van een antislip rubberen o-ring met een vaste binnendiameter van 0,71 mm, 0,66 mm en 0,61 mm. Kortom, de o-ring wordt opengesneden, rond de opgaande boog geplaatst en weer gesloten door draden. Andere wetenschappers die deze o-ringen gebruikten, rapporteerden minder variabiliteit in de geïnduceerde cardiale hypertrofie9. Ze observeerden ook intra- en postoperatieve mortaliteit, evenals een betere reproduceerbaarheid en minder variantie in het geïnduceerde hypertrofische fenotype 9,11. Dit artikel beschrijft de procedure van deze unieke strategie in een stap-voor-stap protocol. De expertise die in dit rapport wordt gedeeld, zal andere wetenschappers helpen hun technieken op dit gebied te verbeteren.
Om cardiale hypertrofie te induceren die resulteert in hartfalen na 6 weken, worden 12 weken oude C57BL / 6N mannelijke muizen aanbevolen voor een operatie. Een vergelijking 2 weken na aortabanding tussen de muissubstrains C57BL/6N en C57BL/6J toonde ernstige cardiale disfunctie en geassocieerde verhoogde mortaliteit bij C57BL/6N muizen. Daarom zijn deze beter geschikt voor modellen van hartfalen12. Twaalf weken oude mannelijke en vrouwelijke muizen hebben een optimale grootte voor blootstelling van de aorta en plaatsing van de o-ring met speciale instrumenten.

<table><tbody><tr><td>1 x long Fixators, 6 cm</td><td></td><td>&nbsp;18200-01</td><td></td></tr><tr><td>2 x Blunt Retractors, 5 mm wide&nbsp;</td><td></td><td>18200-11</td><td></td></tr><tr><td>2 x Short Fixators, 3 cm</td><td></td><td>&nbsp;18200-02</td><td></td></tr><tr><td>2 x fine tip 45&deg; angled forceps&nbsp;</td><td>FST (fine sience tools)</td><td>11160-10</td><td></td></tr><tr><td>3 x Blunt Retractors, 2.5 mm wide&nbsp;</td><td></td><td>18200-10</td><td></td></tr><tr><td>3 x Retractor Wires&nbsp;</td><td></td><td>18200-05</td><td></td></tr><tr><td>4-0 absorbable suture (Vicryl)</td><td>ETHICON</td><td>SABBKLT0</td><td>Wordt gebruikt om de huid te hechten</td></tr><tr><td>6-0 suture (Prolene), needle size:13 mm</td><td>ETHICON</td><td>JDP879</td><td>Wordt gebruikt om de borstspier te hechten</td></tr><tr><td>8-0 suture (Prolene), needle size: 6.5 mm</td><td>ETHICON</td><td>RHBECH</td><td>Wordt gebruikt om de Ring te bevestigen&nbsp;</td></tr><tr><td>Anesthetizing Box, Small</td><td>Havard apparatus&nbsp;</td><td>50-0108</td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6N mice</td><td>Charles River</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fluosorber Activated Charcoal Filter Canister</td><td>Havard apparatus&nbsp;</td><td>34-0415</td><td>Wordt gebruikt om anesthesie te induceren en te onderhouden</td></tr><tr><td>Handmade laryngsopcope&nbsp;</td><td></td><td></td><td>Hulp bij intubatie</td></tr><tr><td>Harvard Apparatus Anesthetic Vaporizer</td><td>Havard apparatus&nbsp;</td><td></td><td>Wordt gebruikt om anesthesie te induceren en te onderhouden</td></tr><tr><td>Heating pad + rectal probe (LSI Letica Scientific Instruments:Temperature control unit HB 101/2 )</td><td>Panlab/ Havard apparatus&nbsp;</td><td></td><td>Wordt gebruikt om de lichaamstemperatuur te regelen en te handhaven&nbsp;</td></tr><tr><td>i.v. cannula blue 22-gauge (Vasofix Braun&uuml;le 0.9 x 25 mm)</td><td>B/Braunsharing Expertise&nbsp;</td><td>4268091B</td><td>intubatie&nbsp;</td></tr><tr><td>isofluran</td><td>Baxter</td><td></td><td>Anesthesie</td></tr><tr><td>Kodan (betadine solution)</td><td>Sch&uuml;lke</td><td>20003960-A</td><td>Desinfectie&nbsp;</td></tr><tr><td>ligation aid</td><td>FST (fine sience tools)</td><td>18062-12</td><td>Wordt gebruikt om ligatie uit te voeren met O-ring&nbsp;</td></tr><tr><td>Microscope Lighting: Schott VisiLED Set MC1500/S80-55 (+ controller)</td><td>SCHOTT</td><td></td><td>Licht</td></tr><tr><td>Microscope&nbsp;camera&nbsp;(Leica IC80 HD)</td><td>Leica</td><td></td><td>Wordt gebruikt voor visualisatie van het operatieveld&nbsp;</td></tr><tr><td>MiniVac Complete Anesthesia Systems&nbsp;for small rodents</td><td>Havard apparatus&nbsp;</td><td>75-0233</td><td>Wordt gebruikt om anesthesie te induceren en te onderhouden</td></tr><tr><td>Mouse Ventilator MiniVent Type 845</td><td>Havard Apparatus&nbsp;</td><td>73-0044</td><td>Wordt gebruikt voor ventilatie tijdens de chirurgie&nbsp;</td></tr><tr><td>Needle holder&nbsp;</td><td>FST (fine sience tools)</td><td>&nbsp;TE-10804</td><td></td></tr><tr><td>O-ring, non-slip rubber (0.0018 mm x 0.020 mm)</td><td>Apple Rubber Products&nbsp;</td><td></td><td>Liagte van de aortaboog</td></tr><tr><td>Scissors</td><td>FST (fine sience tools)</td><td>14040-09</td><td>Wordt gebruikt om de huid en draden te snijden&nbsp;</td></tr><tr><td>Small Animal Retraction System (Kit for Animals up to 200 g)</td><td>FST (fine sience tools)</td><td>18200-20</td><td></td></tr><tr><td>Small Base Plate, 20 x 30 cm&nbsp;</td><td></td><td>&nbsp;18200-03</td><td></td></tr><tr><td>Table intgerated with heating pad + rectal probe + ECG and&nbsp; transducer tripod</td><td>FujiFilm Visual Sonics Imaging System</td><td></td><td>Echocardiografie&nbsp;</td></tr><tr><td>Temgesic (Buprenorphin)</td><td>Indivior UK Limited</td><td>997.00.00</td><td>Pijnpre-medicatie&nbsp;</td></tr><tr><td>three-way stop cock (blue)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tramal (Tamadol)</td><td>Gr&uuml;nental</td><td></td><td>Pijnpost-medicatie&nbsp;</td></tr><tr><td>transducer probe MS400 (Visual Sonics)&nbsp;</td><td>FujiFilm Visual Sonics Imaging System</td><td></td><td>Echocardiografie&nbsp;</td></tr><tr><td>Ultrasound system with cardioligy package&nbsp;</td><td>FujiFilm Visual Sonics Imaging System</td><td></td><td>Echocardiografie&nbsp;</td></tr><tr><td>Vannas Spring Scissors - 2.5 mm Cutting Edge</td><td>FST (fine sience tools)</td><td>15000-08</td><td>Wordt gebruikt om het intercostale borstspier te snijden&nbsp;</td></tr><tr><td>vet ointment&nbsp;</td><td>Bepanten</td><td></td><td>Wordt gebruikt om te voorkomen dat de ogen uitdrogen</td></tr></tbody></table>

o-ring aortabanding versus traditionele transversale aortavernauwing voor het modelleren van drukoverbelasting-geïnduceerde cardiale hypertrofie

O-Ring Aortic Banding Versus Traditional Transverse Aortic Constriction for Modeling Pressure Overload-Induced Cardiac Hypertrophy

Aortabanding bij muizen is een van de meest gebruikte experimentele modellen voor cardiale drukoverbelasting-geïnduceerde cardiale hypertrofie en de inductie van hartfalen. De eerder gebruikte techniek is gebaseerd op een schroefdraadverbinding rond de aortaboog die over een stompe naald van 27 G is gebonden om stenose te creëren. Deze methode is afhankelijk van de chirurg die de draad handmatig aanspant en leidt dus tot een hoge variantie in de diametergrootte. Een nieuw verfijnde methode beschreven door Melleby et al. belooft minder variantie en meer reproduceerbaarheid na de operatie. De nieuwe techniek, o-ring- aortabanding (ORAB), maakt gebruik van een antislip rubberen ring in plaats van een hechtdraad, wat resulteert in verminderde variatie in drukoverbelasting en reproduceerbare fenotypen van cardiale hypertrofie. Tijdens de operatie wordt de o-ring geplaatst tussen de brachiocephalische en linker halsslagaders. Succesvolle vernauwing wordt bevestigd door echocardiografie. Na 1 dag resulteert de juiste plaatsing van de ring in een verhoogde stroomsnelheid in de transversale aorta over de o-ring-geïnduceerde stenose. Na 2 weken wordt een verminderde hartfunctie bewezen door een verminderde ejectiefractie en een verhoogde wanddikte. Belangrijk is dat, naast minder variatie in de diametergrootte, ORAB geassocieerd is met lagere intra- en postoperatieve sterftecijfers in vergelijking met transversale aortavernauwing (TAC). ORAB vertegenwoordigt dus een superieure methode voor de veelgebruikte TAC-chirurgie, wat resulteert in meer reproduceerbare resultaten en een mogelijke vermindering van het aantal benodigde dieren.

Over het algemeen bootst aortabanding menselijke aortastenose na en induceert cardiale hypertrofie bij muizen. Een succesvolle procedure wordt gekenmerkt door hartweefselremodellering weerspiegeld door cardiale hypertrofie en verminderde hartfunctie 5,6.
Direct 1 dag na de operatie kan het effect van o-ringvernauwing van de transversale aorta in vivo worden bepaald door echocardiografie13. Succesvolle i...

Het huidige protocol beschrijft een nieuwe techniek van aortabanding bij muizen om drukoverbelasting cardiale hypertrofie te induceren. Voor het banderen wordt een rubberen ring met een vaste binnendiameter gebruikt. Deze nieuwe techniek belooft minder variantie en meer reproduceerbare gegevens voor toekomstige experimenten.

O-ring aortabanding versus traditionele transversale aortavernauwing voor het modelleren van drukoverbelasting-geïnduceerde cardiale hypertrofie

Aortic banding in mice is one of the most commonly used experimental models for cardiac pressure overload-induced cardiac hypertrophy and the induction of ...

Deze nieuwe techniek van aortabanding maakt inductie van drukoverbelasting cardiale hypertrofie mogelijk bij muizen met minder variantie en hogere reproduceerbaarheid. Het plaatsen van een rubberen ring met een vaste diameter rond de aorta induceert een consistente verhoogde stroomsnelheid in de transversale aorta, waardoor reproduceerbare cardiale hypertrofie wordt gegenereerd. Deze procedure moet worden uitgevoerd door iemand die al ervaring heeft met anesthesie- en microchirurgietechnieken bij knaagdieren, of iemand met ervaring heeft die kan begeleiden.Begin met het uitvoeren van een snede van de O-ring onder de microscoop met behulp van een schaar of een scalpel om de plaatsing rond de aorta mogelijk te maken. Prik elke ringzijde dicht bij de snede met een naald verbonden met een 8-0 niet-absorbeerbare hechting en trek aan de draad. Snijd en laat twee tot drie centimeter aan de ene kant en twee centimeter aan de andere kant om de O-ring rond de aorta in de laatste stap vast te maken.Neem vóór de operatie het ligatiehulpmiddel en trek het uiteinde van de draad van één ringzijde door het gat van het ligatiehulpmiddel. Leg de ligatiehulp met de bevestigde O-ring opzij voor plaatsing. Scheer de vacht aan de linkerkant van de thoraxzijde van de verdoofde muis.Plaats de muis vervolgens terug in de met isofluraan gevulde kamer voor voldoende sedatie vóór intubatie. Zet het verwarmingskussen voor de operatie aan om de lichaamstemperatuur van het dier op 37 graden Celsius te houden. Sluit het verwarmingskussen aan op een rectale sonde om de lichaamstemperatuur van de muis automatisch te handhaven.Rek een elastiekje rond het verwarmingskussen om de muis met de voortanden op de plaat te bevestigen. Plaats de verdoofde muis in rugligging op het verwarmingskussen. Plaats het elastiekje over de voortanden van het dier om de nek op de plaat te verlengen.Richt een lichtbron op de keel voor een goede zichtbaarheid van de opening van de luchtpijp voor endotracheale intubatie. Open de mond voorzichtig met één hand en plaats een intubatiehulpmiddel met de andere hand en een kleine tang. Beweeg de tong voorzichtig om de opening van de luchtpijp vrij te maken.Breng de endotracheale buis in de luchtpijp en blijf daarentegen het intubatiehulpmiddel vasthouden. Verbind de positie van de endotracheale buis via een driewegstopkraan met een ventilator voor muizen om de juiste endotracheale buispositie te bevestigen. Bewaak de juiste ventilatie volgens de instructies van de fabrikant.Bevestig voldoende anesthetische diepte door een teenknijflexcontrole. Breng oogheelkundige zalf aan op de ogen om droogheid tijdens de operatie te voorkomen. Desinfecteer het operatiegebied met behulp van een in de handel verkrijgbare desinfecterende oplossing.Maak met een schaar een 0,5 tot een centimeter lange huidincisie in het midden van een lijn tussen het xiphoid-proces en de linker oksel. Gebruik een tang om de spierlaag van de onderliggende ribben te scheiden en plaats twee retractors van vijf millimeter in de incisie om de ribbenkast bloot te leggen. Om de linker thoracotomie te starten, voert u een incisie van één tot twee millimeter uit in de intercostale spieren tussen de tweede en derde rib met behulp van een microveerschaar.Open de thoracale holte en verdeel de incisie met een schuine tang van 45 graden. Plaats drie borstterugtrekkingen in de incisie voor het openen van de thoracale holte om de visualisatie te verbeteren. Om de aortaboog bloot te leggen, probeer de thymus en het vetweefsel voorzichtig op te tillen en voorzichtig te scheiden van de boog met een fijnpuntige 45 graden schuine tang.Belicht de aortaboog met een schuine tang van 45 graden in één hand. Aan de andere kant plaatst u de O-ring verbonden met de ligatiehulp via de draden van één kant die eerder zijn bevestigd. Passeer de draden met behulp van het ligatiehulpmiddel onder de aortaboog van caudale naar de schedelzijde van de transversale aorta tussen de brachiocephalische en linker gemeenschappelijke halsslagaders.Neem beide draden tussen het ligatiehulpmiddel en de aortaboog voorzichtig met de tang. Verwijder de ligatiehulp en plaats de O-ring voorzichtig rond de boog door aan de draden aan elke kant te trekken. Na succesvolle positionering bevestigt u de O-ring met de draden en een chirurgische knoop.Maak een extra knoop om te voorkomen dat deze aan elke kant wordt geopend. Verwijder na ligatie van de O-ring de drie borstterugtrekkingen van de incisie. Verwijder indien nodig de resterende lucht uit de thorax door deze te vullen met een warme 0,9% isotone zoutoplossing.Om de thoraxincisie bloot te leggen voor hechting, neemt u opnieuw twee retractors van vijf millimeter om de huid aan de zijkant te houden. Sluit de thorax met twee of drie 6-0 niet-absorbeerbare hechtingen. Verwijder de twee retractors en sluit de huid met drie tot vijf 4-0 absorbeerbare hechtingen.Schakel vervolgens de isofluraan en monitor uit. Knijp de uitstroom van de ventilator gedurende twee seconden af om de longen opnieuw op te blazen. Controleer een dag na de operatie de stenose met behulp van echografie door de maximale stroomsnelheid over de stenose te meten.Gebruik voor metingen echocardiografie met een echografiesysteem en een transducersonde met een frequentie van 30 megahertz. Plaats het verdoofde dier in rugligging op het verwarmingskussen en verbind het verwarmingskussen met een rectale sonde om de lichaamstemperatuur op 37 graden Celsius te houden en controleer de hartslag met een ECG met behulp van vier muispootsensoren. Een succesvol uitgevoerde O-ring aorta banding resulteert in een verhoogde stroomsnelheid over de stenose zoals gemeten door echografie.Plaats voor deze meting de transducerkop parasternaal aan de rechterkant van de thorax om de aortaboog te lokaliseren door middel van tweedimensionale beeldvorming. Gebruik de kleur doppler om de bloedstroom in de aorta te visualiseren en meet met de gepulste golf doppler de bloedstroomsnelheid over de stenose. Visualiseer de rechter en linker gemeenschappelijke halsslagaders door middel van tweedimensionale beeldvorming.Plaats de transducerkop horizontaal aan de linker- en rechterkant van de nek in een hoek van 45 graden en gebruik de gepulseerde golfdoppler om de bloedstroomsnelheid te bepalen. Succesvolle inductie van aortastenose werd gezien door verhoogde bloedstroomsnelheid over de stenose in de aorta gemeten door gepulseerde golf doppler echografie. Bovendien werd de bloedstroomsnelheidsverhouding tussen de rechter en linker gemeenschappelijke halsslagaders bepaald als een functionele marker van O-ring aortabanding.Twee weken na de operatie werden verhoogde linkerventrikel achterwand en intraventriculaire septumdiameters in diastole waargenomen. Bovendien werd een progressieve verslechtering van de hartfunctie gedocumenteerd door het meten van een verminderde linkerventrikelejectiefractie. Tijdens het vastzetten van de O-ring rond de aortaboog is het belangrijk om de ring aan beide zijden te sluiten met een knoop om een optimaal resultaat te krijgen.

o-ring-aortic-banding-versus-traditional-transverse-aortic

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

In this video, we demonstrate an experimental protocol for minimally invasive transverse aortic constriction in mice to examine pressure overload-induced heart failure.

Transverse Aortic Arch Banding in Mouse Model: A Minimally Invasive Technique in Mice for Induction of High Pressure in the Left Ventricle

We beschrijven een stapsgewijze procedure voor het creëren van druk overbelasting en linker ventrikel hypertrofie in Wistarratten door vernauwing van de aorta ascendens met een kleine metalen clip. Dit model wordt veel gebruikt voor het bestuderen remodelleren veranderingen tijdens cardiale hypertrofie en voor het identificeren en evalueren van strategieën voor regressie van dergelijke veranderingen.

Oplopend Aorta Vernauwing in ratten voor de schepping van druk overbelasting cardiale hypertrofie Model

Een rattenmodel van abdominale aortaconstrictie dat cardiale hypertrofie en remodellering induceert, wordt beschreven. Een efficiënte, zeer reproduceerbare en minimaal invasieve methode wordt gebruikt om een eenvoudige maar nuttige platform te bieden voor onderzoek naar myocardiale hypertrofie en disfunctie.

Een model van remodellering Door vernauwing van de abdominale aorta bij ratten

Minimaal invasieve dwarse aorta vernauwing (MTAC) behoudt de essentie van de reguliere dwarse aorta vernauwing (TAC), terwijl het elimineren van het gebruik van een ventilator met tracheale intubatie. Het blijkt een zeer wenselijke werkwijze voor high-throughput studies linker ventrikel overbelasting, met name translationele studies.

Minimaal Invasieve Transversale Aorta Vernauwing in Muizen

Het doel van dit protocol is te beschrijven stap voor stap de techniek van minimaal invasieve dwarse aorta vernauwing (TAC) in muizen. Door eliminatie van intubatie en ventilatie die verplicht is voor de gebruikte standaardprocedure zijn, minimaal invasieve TAC vereenvoudigt de operatieve procedure en vermindert de stam het dier op te zetten.

Techniek van minimaal invasieve dwarse aorta vernauwing in muizen voor inductie van links ventriculaire hypertrofie

Hier presenteren we een protocol van Transverse aorta vernauwing (TAC) via een laterale Thoracotomie. Deze techniek is een minimaal invasieve, gesloten borst chirurgische ingreep gericht om overbelasting van de druk en hartfalen in muizen met behulp van TAC laboratorium standaardinstellingen te simuleren.

Een gesloten-borst-Model voor het opwekken van transversale aorta vernauwing in muizen

We presenteren een chirurgische methode om te induceren Rechter ventrikelhypertrofie en falen bij ratten.

Een pulmonaire Trunk "banding" Model van druk overbelasting veroorzaakte Rechter ventrikelhypertrofie en falen

Hier beschrijven we een stapsgewijs protocol van chirurgische aorta-debanding in het gevestigde muizenmodel van aorta-vernauwing. Deze procedure maakt het niet alleen mogelijk om de mechanismen te bestuderen die ten grondslag liggen aan de linker ventriculaire omgekeerde remodellering en regressie van hypertrofie, maar ook om nieuwe therapeutische opties te testen die myocardherstel kunnen versnellen.

Het bestuderen van Linker Ventriculaire Omgekeerde Remodeling door Aorta Debanding in Knaagdieren

We beschrijven de creatie van een rat model van druk overbelasting geïnduceerde matige remodelleren en vroege systolische disfunctie waar signaal transductie trajecten die betrokken zijn bij de inleiding van het remodelleren proces worden geactiveerd. Dit diermodel zal helpen bij het identificeren van moleculaire doelen voor het toepassen van vroege therapeutische anti-remodelleren strategieën voor hartfalen.

Een Rat Model van Pressure Overload Geïnduceerde Matige Remodeling en Systolische disfunctie in tegenstelling tot Openlijke Systolische hartfalen

Dit protocol beschrijft een minimaal invasieve chirurgische ingreep voor het opstijgen van aortabanden bij varkens.

Een minimaal invasief model van aortastenose bij varkens

We beschrijven een muizenmodel van overbelasting van de rechterventrikeldruk geïnduceerd door pulmonale rompbanden. Gedetailleerde protocollen voor intubatie, chirurgie en fenotypering door middel van echocardiografie zijn opgenomen in de paper. Op maat gemaakte instrumenten worden gebruikt voor intubatie en chirurgie, waardoor het model snel en goedkoop kan worden gereproduceerd.

Een muizenmodel van door drukoverbelasting geïnduceerde rechterventrikelhypertrofie en falen door pulmonale rompbanden

Leer een nieuwe O-ring aortabandtechniek voor het induceren van drukoverbelasting-geïnduceerde cardiale hypertrofie bij muizen. Deze methode biedt verbeterde reproduceerbaarheid en consistentie in cardiovasculair onderzoek.

O-ring aortabanding versus traditionele transversale aortavernauwing voor het modelleren van drukoverbelasting-geïnduceerde cardiale hypertrofie (Video) | JoVE Journal

O-ring aortabanding versus traditionele transversale aortavernauwing voor het modelleren van drukoverbelasting-geïnduceerde cardiale hypertrofie

Meer video's verkennen