Name: Dynamische continue bloedextractie uit het rattenhart via niet-invasieve microdialysetechniek (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-09-13T15:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 52 s
Description: Leer een niet-invasieve microdialysetechniek voor continue bloedextractie uit het rattenhart. Deze methode maakt real-time monitoring van bloedcomponenten mogelijk voor cardiovasculair onderzoek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd ondersteund door de National Natural Science Foundation of China (82104533), de China Postdoctoral Science Foundation (2020M683273), de Science &; Technology Department van de provincie Sichuan (2021YJ0175) en het Key R&D-project van het Sichuan Provincial Science and Technology Plan (2022YFS0438). Ondertussen willen de auteurs de heer Yuncheng Hong bedanken, een senior equipment engineer bij TRI-ANGELS D&H TRADING PTE. LTD. (Singapore city, Singapore), voor het verlenen van technische diensten voor microdialysetechnieken.

Het dierprotocol is goedgekeurd door het Administratief Comité van de Chengdu University of Traditional Chinese Medicine (Recordnummer: 2021-11). Specifieke pathogeenvrije mannelijke Sprague Dawley (SD) ratten (8-10 weken, 260-300 g) werden grootgebracht in onafhankelijke ventilatiekooien, waarbij de laboratoriumomgeving op 22 °C en 65% relatieve vochtigheid werd gehouden, en werden gebruikt voor deze studie. De dieren werden verkregen uit een commerciële bron (zie tabel met materialen). Alle ratten waren gewend aan adaptieve voeding gedurende 1 week met gratis water en dieet gedurende de periode.
1. Experimentele voorbereiding
<ol><li>Verzamel de apparatuur die betrokken is bij microdialyse van bloedafname (zie tabel met materialen), zoals weergegeven in figuur 1.</li>
	<li>Bereid antistollingscitraat dextrose-oplossing (ACD's), die 3,50 mmol / L citraat, 7,50 mmol / L natriumcitraat en 13,60 mmol / L glucose bevat, als de perfusievloeistof voor microdialysebloedafname (zie tabel met materialen).</li>
	<li>Filter voor gebruik de ACD's met een membraanfiltratie-eenheid van 0,22 μm en verwijder bellen ultrasoon. Houd ACD's op 37 °C om de stimulatie voor SD-ratten te verminderen.</li>
</ol>2. Doeorganeninspectie van microdialyseleidingsysteem
<ol><li>Bevestig de inlaat van de sonde van de dialyse-eenheid met de naald van de spuit, de slangadapter en de fep-slang (zie materiaaltabel). OPMERKING: Het blauwe uiteinde van de microdialysesonde is voor de vloeistofinstroom en het transparante uiteinde is voor de vloeistofuitstroom.</li>
	<li>Controleer de doorgankelijkheid van het microdialyseleidingsysteem door ACD18 met een snelheid van 2 μL/min in het leidingsysteem te perfuseren. OPMERKING: Als ACD's uit de monsterverzamelingsplaats stromen, kan het ongehinderde microdialysesysteem worden gebruikt voor verdere hartbloedafname. Zo niet, dan moet de bloedsonde worden gecontroleerd op gebroken lekken of dat de pijp-pijpverbinding is afgedicht.</li>
</ol>3. Microdialyse sonde implantatie
<ol><li>Verdoof de ratten met 2% isofluraan in een lucht-zuurstofmengsel van 0,6 l/min, bevestig de volledig bewusteloze ratten op de operatietafel en houd de lichaamstemperatuur op 37 °C met behulp van een dierlijke temperatuurregelaar (zie materiaaltabel).</li>
	<li>Verwijder de vacht uit de nek met een elektrisch scheerapparaat en desinfecteer de operatieplaats met drie afwisselende rondes betadine en 70% alcohol. Injecteer bupivacaïne (1,5 mg/kg) in de rat. Leg de rechter halsader bloot door stompe dissectie van zacht weefsel en perivasculaire fascia via een incisie van 1,5 cm langs de middellijn van de nek. OPMERKING: Alle chirurgische instrumenten en gereedschappen die in het experiment worden gebruikt, moeten van tevoren worden gesteriliseerd door autoclaveren. Gebruik steriele handschoenen en chirurgische gordijnen. De hele experimentele operatie moet worden uitgevoerd in een steriele omgeving. Volg de lokale richtlijnen voor diergebruik voor anesthesie en analgesieregime.</li>
	<li>Maak een afneembare slipknot met behulp van een 4-0 chirurgische hechting in de rechter halsader aan het distale uiteinde van het hart om de bloedstroom tijdelijk te blokkeren en maak een incisie van 1,5 cm in de rechter halsader bij het hart.</li>
	<li>Breng een naaldvormige katheter (lengte 25 mm, diameter 0,7 mm, zie Tabel met materialen) in de rechter halsader naar het proximale uiteinde van het rattenhart, breng de bloedmicrodialysesonde (totale sondelengte 24 mm, membraanlengte 10 mm) in een katheter in en implanteer de sonde met een oogheelkundige tang langs de schuine incisie van de katheterstijl19.</li>
	<li>Verwijder de geleide katheterstijl en dompel het semi-permeabele membraan van de sonde (membraanlengte 10 mm, membraandiameter 0,5 mm) volledig onder in de rechter halsader. Ontrafel de afneembare slipknot aan het distale uiteinde van het hart om de bloedstroom in de rechter halsader te herstellen.</li>
	<li>Ligatuur de sonde met de rechter halsader met behulp van 4-0 chirurgische hechtingen en onderhuids rijg de sondestaartbuis door de achterkant van de nek. Zie figuur 2 voor specifieke implantatiestappen van de sonde. OPMERKING: De moleculaire afsnijding door de bloedmicrodialysesonde die in deze studie wordt gebruikt, is >20 kD. De afgenomen bloedmonsters bevatten stoffen met een molecuulgewicht van minder dan 20 kD.</li>
</ol>4. Microdialyse bemonstering
<ol><li>Een week na de implantatie van de microdialysesonde ondergaan ratten die herstellen van een chirurgisch trauma microdialysebemonstering. Plaats de wakkere rat in een vrij bewegende tank (zie materiaaltabel) en sluit de sonde aan op het microdialysesysteem. Breng het dialysemembraan van de sonde in evenwicht door ACD's met een snelheid van 2 μL/min gedurende 1 uur te irrigeren.</li>
	<li>Verzamel microdialysebloedmonsters met een stroomsnelheid van 2 μL/min en bewaar ze tijdelijk in een fractionele container van 4 °C. OPMERKING: De verkregen bloedmonsters kunnen direct worden getest door centrifugeren bij 20.000 x g gedurende 10 minuten bij kamertemperatuur. Of het kan worden bewaard bij -80 °C voor de volgende tests. Bij het nemen van monsters is het belangrijk om altijd te observeren of de sonde verzakt en/of lekt.</li>
</ol>5. Nabemonstering
<ol><li>Verdoof de SD-ratten met 2% isofluraan in een lucht-zuurstofmengsel bij 0,6 l/min.</li>
	<li>Ontleed om opnieuw te bevestigen dat de sonde zich in de juiste halsader bevindt. Verwijder de microdialysesonde uit de rechter halsader en plaats deze in ultrapuur water.</li>
	<li>Euthanaseer ten slotte de ratten door inademing van 5% isofluraan.</li>
	<li>Sluit de sonde aan op de leiding en spoel een nacht met een snelheid van 2 μL/min met ultrapuur water om het resterende zout in de pijp en sonde volledig weg te spoelen.</li>
	<li>Verwijder de sonde en week deze in ultrapuur water. Bewaren bij 4 °C om te voorkomen dat het dialysemembraan van de sonde samentrekt. OPMERKING: Als het volume dialysevloeistof niet consistent is met het volume perfusievloeistof, kan de sonde worden geblokkeerd door gecoaguleerd bloed. De sonde kan in de pancreaseiwitoplossing worden geplaatst totdat de zichtbare stof afbladdert van de punt van het sondemembraan.</li>
</ol>

<ol><li>van Rensburg, W. J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Post-mortem+evidence+of+a+diverse+distribution+pattern+of+atherosclerosis+in+the+South+African+population%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Post-mortem evidence of a diverse distribution pattern of atherosclerosis in the South African population.</a> Scientific Reports. 12 (1), 11366(2022).</li>
<li>Katz, A. J., Chen, R. C., Usinger, D. S., Danus, S. M., Zullig, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiovascular+disease+prevention+and+management+of+pre-existent+cardiovascular+disease+in+a+cohort+of+prostate+cancer+survivors%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cancer+Survivorship%22%5BJournal%5D)">Cardiovascular disease prevention and management of pre-existent cardiovascular disease in a cohort of prostate cancer survivors.</a> Journal of Cancer Survivorship. , (2022).</li>
<li>Rødevand, L., Tesli, M., Andreassen, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiovascular+disease+risk+in+people+with+severe+mental+disorders%3A+an+update+and+call+for+action%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Cardiovascular disease risk in people with severe mental disorders: an update and call for action.</a> Current Opinion in Psychiatry. 35 (4), 277-284 (2022).</li>
<li>Izumi, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+circulating+cathepsin+K+on+the+coronary+calcification+and+the+clinical+outcome+in+chronic+kidney+disease+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+and+Vessels%22%5BJournal%5D)">Impact of circulating cathepsin K on the coronary calcification and the clinical outcome in chronic kidney disease patients.</a> Heart and Vessels. 31 (1), 6-14 (2016).</li>
<li>Wang, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whey+protein+hydrolysate+alleviated+atherosclerosis+and+hepatic+steatosis+by+regulating+lipid+metabolism+in+apoE-%2F-+mice+fed+a+Western+diet%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Research+International%22%5BJournal%5D)">Whey protein hydrolysate alleviated atherosclerosis and hepatic steatosis by regulating lipid metabolism in apoE-/- mice fed a Western diet.</a> Food Research International. 157, 111419(2022).</li>
<li>Angelone, T., Rocca, C., Pasqua, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nesfatin-1+in+cardiovascular+orchestration%3A+From+bench+to+bedside%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacological+Research%22%5BJournal%5D)">Nesfatin-1 in cardiovascular orchestration: From bench to bedside.</a> Pharmacological Research. 156, 104766(2020).</li>
<li>Bernardi, P. M., Barreto, F., Dalla Costa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+a+LC-MS%2FMS+method+for+evaluating+lung+penetration+of+tobramycin+in+rats+by+microdialysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmaceutical+and+Biomedical+Analysis%22%5BJournal%5D)">Application of a LC-MS/MS method for evaluating lung penetration of tobramycin in rats by microdialysis.</a> Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 134, 340-345 (2017).</li>
<li>Anderzhanova, E., Wotjak, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+microdialysis+and+its+applications+in+experimental+neurochemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+and+Tissue+Research%22%5BJournal%5D)">Brain microdialysis and its applications in experimental neurochemistry.</a> Cell and Tissue Research. 354 (1), 27-39 (2013).</li>
<li>Joukhadar, C., Müller, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microdialysis%3A+current+applications+in+clinical+pharmacokinetic+studies+and+its+potential+role+in+the+future%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Pharmacokinetics%22%5BJournal%5D)">Microdialysis: current applications in clinical pharmacokinetic studies and its potential role in the future.</a> Clinical Pharmacokinetics. 44 (9), 895-913 (2005).</li>
<li>Stangler, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microdialysis+and+microperfusion+electrodes+in+neurologic+disease+monitoring%5BTitle%5D)+AND+%22Fluids+and+Barriers+of+the+CNS%22%5BJournal%5D)">Microdialysis and microperfusion electrodes in neurologic disease monitoring.</a> Fluids and Barriers of the CNS. 18 (1), 52(2021).</li>
<li>Young, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+microdialysis%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Care+Nursing+Clinics+of+North+America%22%5BJournal%5D)">Cerebral microdialysis.</a> Critical Care Nursing Clinics of North America. 28 (1), 109-124 (2016).</li>
<li>O'Connell, M. T., Krejci, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microdialysis+techniques+and+microdialysis-based+patient-near+diagnostics%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+and+Bioanalytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Microdialysis techniques and microdialysis-based patient-near diagnostics.</a> Analytical and Bioanalytical Chemistry. 414 (10), 3165-3175 (2022).</li>
<li>Hammarlund-Udenaes, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microdialysis+as+an+important+technique+in+systems+pharmacology-a+historical+and+methodological+review%5BTitle%5D)+AND+%22The+AAPS+Journal%22%5BJournal%5D)">Microdialysis as an important technique in systems pharmacology-a historical and methodological review.</a> The AAPS Journal. 19 (5), 1294-1303 (2017).</li>
<li>Stahl, M., Bouw, R., Jackson, A., Pay, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+microdialysis%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Pharmaceutical+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Human microdialysis.</a> Current Pharmaceutical Biotechnology. 3 (2), 165-178 (2002).</li>
<li>Pierce, C. F., Kwasnicki, A., Lakka, S. S., Engelhard, H. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+microdialysis+as+a+tool+for+assessing+the+delivery+of+chemotherapy+in+brain+tumor+patients%5BTitle%5D)+AND+%22World+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Cerebral microdialysis as a tool for assessing the delivery of chemotherapy in brain tumor patients.</a> World Neurosurgery. 145, 187-196 (2021).</li>
<li>Sørensen, M., Jacobsen, S., Petersen, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microdialysis+in+equine+research%3A+a+review+of+clinical+and+experimental+findings%5BTitle%5D)+AND+%22Veterinary+Journal%22%5BJournal%5D)">Microdialysis in equine research: a review of clinical and experimental findings.</a> Veterinary Journal. 197 (3), 553-559 (2013).</li>
<li>Dmitrieva, N., Rodríguez-Malaver, A. J., Pérez, J., Hernández, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+release+of+neurotransmitters+from+superficial+and+deep+layers+of+the+dorsal+horn+in+response+to+acute+noxious+stimulation+and+inflammation+of+the+rat+paw%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pain%22%5BJournal%5D)">Differential release of neurotransmitters from superficial and deep layers of the dorsal horn in response to acute noxious stimulation and inflammation of the rat paw.</a> European Journal of Pain. 8 (3), 245-252 (2004).</li>
<li>Li, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microdialysis+sampling+and+HPLC-MS%2FMS+quantification+of+sinomenine%2C+ligustrazine%2C+gabapentin%2C+paracetamol%2C+pregabalin+and+amitriptyline+in+rat+blood+and+brain+extracellular+fluid%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Pharmaceutica+Sinica%22%5BJournal%5D)">Microdialysis sampling and HPLC-MS/MS quantification of sinomenine, ligustrazine, gabapentin, paracetamol, pregabalin and amitriptyline in rat blood and brain extracellular fluid.</a> Acta Pharmaceutica Sinica. 55 (9), 2198-2206 (2020).</li>
<li>Chauzy, A., Lamarche, I., Adier, C., Couet, W., Marchand, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microdialysis+study+of+Aztreonam-Avibactam+distribution+in+peritoneal+fluid+and+muscle+of+rats+with+or+without+experimental+peritonitis%5BTitle%5D)+AND+%22Antimicrobial+Agents+and+Chemotherapy%22%5BJournal%5D)">Microdialysis study of Aztreonam-Avibactam distribution in peritoneal fluid and muscle of rats with or without experimental peritonitis.</a> Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 62 (10), 01228(2018).</li>
<li>Fang, X. X., Ardehali, H., Min, J. X., Wang, F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+molecular+and+metabolic+landscape+of+iron+and+ferroptosis+in+cardiovascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews.+Cardiology%22%5BJournal%5D)">The molecular and metabolic landscape of iron and ferroptosis in cardiovascular disease.</a> Nature Reviews. Cardiology. , 1-17 (2022).</li>
<li>Samson, R., Ennezat, P. V., Le Jemtel, T. H., Oparil, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiovascular+disease+risk+reduction+and+body+mass+index%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Hypertension+Reports%22%5BJournal%5D)">Cardiovascular disease risk reduction and body mass index.</a> Current Hypertension Reports. , (2022).</li>
<li>Kim, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((School+racial+segregation+and+long-term+cardiovascular+health+among+Black+adults+in+the+US%3A+A+quasi-experimental+study%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Medicine%22%5BJournal%5D)">School racial segregation and long-term cardiovascular health among Black adults in the US: A quasi-experimental study.</a> PLoS Medicine. 19 (6), 1004031(2022).</li>
<li>Qin, Y. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+m6A+RNA+methylation+in+cardiovascular+disease+%28Review%29%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Medicine%22%5BJournal%5D)">Role of m6A RNA methylation in cardiovascular disease (Review).</a> International Journal of Molecular Medicine. 46 (6), 1958-1972 (2020).</li>
<li>Xu, C. M., Liu, C. J., Xiong, J. H., Yu, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiovascular+aspects+of+the+%28pro%29renin+receptor%3A+Function+and+significance%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+Journal%22%5BJournal%5D)">Cardiovascular aspects of the (pro)renin receptor: Function and significance.</a> FASEB Journal. 36 (4), 22237(2022).</li>
<li>Guvenc-Bayram, G., Yalcin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+intermediary+role+of+the+central+cyclooxygenase+%2F+lipoxygenase+enzymes+in+intracerebroventricular+injected+nesfatin-1-evoked+cardiovascular+effects+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">The intermediary role of the central cyclooxygenase / lipoxygenase enzymes in intracerebroventricular injected nesfatin-1-evoked cardiovascular effects in rats.</a> Neuroscience Letters. 756, 135961(2021).</li>
<li>Ahrens Kress, A. P., Zhang, Y. D., Kaiser-Vry, A. R., Sauer, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+blood+collection+techniques+in+mice+and+their+effects+on+welfare%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Association+for+Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">A comparison of blood collection techniques in mice and their effects on welfare.</a> Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 61 (3), 287-295 (2022).</li>
<li>Joshi, A., Patel, H., Joshi, A., Stagni, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacokinetic+applications+of+cutaneous+microdialysis%3A+Continuous%2Bintermittent+vs+continuous-only+sampling%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacological+and+Toxicological+Methods%22%5BJournal%5D)">Pharmacokinetic applications of cutaneous microdialysis: Continuous+intermittent vs continuous-only sampling.</a> Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 83, 16-20 (2017).</li>
<li>Reyes-Garcés, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+brain+sampling+using+a+microextraction+probe+reveals+metabolic+changes+in+rodents+after+deep+brain+stimulation%5BTitle%5D)+AND+%22Analytical+Chemistry%22%5BJournal%5D)">In vivo brain sampling using a microextraction probe reveals metabolic changes in rodents after deep brain stimulation.</a> Analytical Chemistry. 91 (15), 9875-9884 (2019).</li>
<li>Kho, C. M., Enche Ab Rahim, S. K., Ahmad, Z. A., Abdullah, N. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+on+microdialysis+calibration+methods%3A+the+theory+and+current+related+efforts%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">A review on microdialysis calibration methods: the theory and current related efforts.</a> Molecular Neurobiology. 54 (5), 3506-3527 (2017).</li>
<li>Zhuang, L. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Theory+and+application+of+microdialysis+in+pharmacokinetic+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Drug+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Theory and application of microdialysis in pharmacokinetic studies.</a> Current Drug Metabolism. 16 (10), 919-931 (2015).</li>
<li>Zhang, Y. F., Huang, X. X., Zhu, L. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabonomics+research+strategy+based+on+microdialysis+technique%5BTitle%5D)+AND+%22China+Journal+of+Chinese+Materia+Medica%22%5BJournal%5D)">Metabonomics research strategy based on microdialysis technique.</a> China Journal of Chinese Materia Medica. 45 (1), 214-220 (2020).</li>
<li>Carpenter, K. L., Young, A. M., Hutchinson, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advanced+monitoring+in+traumatic+brain+injury%3A+microdialysis%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Critical+Care%22%5BJournal%5D)">Advanced monitoring in traumatic brain injury: microdialysis.</a> Current Opinion in Critical Care. 23 (2), 103-109 (2017).</li>
<li>Brunner, M., Langer, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microdialysis+versus+other+techniques+for+the+clinical+assessment+of+in+vivo+tissue+drug+distribution%5BTitle%5D)+AND+%22The+AAPS+Journal%22%5BJournal%5D)">Microdialysis versus other techniques for the clinical assessment of in vivo tissue drug distribution.</a> The AAPS Journal. 8 (2), 263-271 (2006).</li>
<li>Tettey-Amlalo, R. N., Kanfer, I., Skinner, M. F., Benfeldt, E., Verbeeck, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+dermal+microdialysis+for+the+evaluation+of+bioequivalence+of+a+ketoprofen+topical+gel%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmaceutical+Sciences%22%5BJournal%5D)">Application of dermal microdialysis for the evaluation of bioequivalence of a ketoprofen topical gel.</a> European Journal of Pharmaceutical Sciences. 36 (2-3), 219-225 (2009).</li>
<li>Dhanani, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recovery+rates+of+combination+antibiotic+therapy+using+in+vitro+microdialysis+simulating+in+vivo+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmaceutical+Analysis%22%5BJournal%5D)">Recovery rates of combination antibiotic therapy using in vitro microdialysis simulating in vivo conditions.</a> Journal of Pharmaceutical Analysis. 8 (6), 407-412 (2018).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

CVD's zijn een veel voorkomende chronische ziekte in klinieken met een geleidelijk toenemende incidentie in China, en de aanvangsleeftijd is meestal jonger, waardoor de bezorgdheid en paniek van de meeste patiënten20,21 is. Omdat het de belangrijkste doodsoorzaak ter wereld is, kunnen HVZ's herseninfarcten en andere ziekten met een hoge mortaliteit veroorzaken, waardoor het gezonde leven van patiënten ernstig wordt bedreigd22. CVD's, waaro...

Met de versnelling van het levenstempo en de toename van psychologische druk, komen hart- en vaatziekten (CVD's) vaak voor bij jongeren, mensen van middelbare leeftijd en ouderen 1,2. De morbiditeit en mortaliteit van HVZ zijn hoog, met de kenmerken van acuut begin, snelle progressie en een lang verloop van de ziekte, die de veiligheid van patiënten ernstig beïnvloeden3. Het optreden van HVZ kan nauw verband houden met de veranderingen in sommige bloedbestanddelen, zoals cholesterol, serumlipiden, bloedglucose, myocardiale enzymen en eiwitkinase K 4,5,6. De relevante situatie van de patiënt kan het snelst worden beheerd door routinematige bloedonderzoeken te analyseren. De kwaliteit van de bloedmonsters bepaalt dus de nauwkeurigheid van de testresultaten. Conventionele methoden voor bloedafname hebben echter enkele onvermijdelijke nadelen, die de experimentele resultaten ernstig beïnvloeden, zoals een groot traumagebied, een klein bloedafnamevolume, hoge eisen aan operators, onvermogen om veranderingen in geneesmiddelen in realtime weer te geven, omslachtige voorbehandeling van bloedmonsters, grote consumptie van proefdieren en het niet voldoen aan dierethische vereisten 7,8,9 . Met de voortdurende vooruitgang in de medische technologie heeft de kwaliteit van de bloedafname ook hogere eisen gesteld. Daarom is het dringend noodzakelijk om een nieuwe bloedafnametechnologie te ontwikkelen om de bovenstaande tekortkomingen te verhelpen.
Microdialyse is een in vivo bemonsteringstechniek gebaseerd op dialyseprincipes10. Onder niet-evenwichtsomstandigheden worden de te meten verbindingen verspreid en doordrenkt van het weefsel langs de concentratiegradiënt naar de microdialysesonde die in het weefsel is ingebed in het dialysaat, dat continu samen met het dialysaat wordt verwijderd, waardoor het doel van bemonstering uit het levende weefsel wordt bereikt11,12. In vergelijking met traditionele bemonsteringsmethoden heeft de microdialysetechniek prachtige voordelen op de volgende aspecten13,14,15: continue real-time tracking van de veranderingen van verschillende verbindingen in het bloed; bemonstering vereist geen vervelende voorbewerking en kan echt de concentratie van de doelverbinding op de bemonsteringsplaats weergeven; sondes kunnen in verschillende delen van het lichaam worden geïmplanteerd om de absorptie, distributie, metabolisme, uitscheiding en toxiciteit van de doelverbindingen te onderzoeken; het verkregen monster bevat geen biologische macromoleculen (>20 kD). Daarom zorgen de bloedmonsters van hogere kwaliteit voor een betere interpretatie van HVZ en het mechanisme dat door etnische geneeskunde wordt behandeld.
Microdialysebemonsteringssystemen bestaan over het algemeen uit micro-injectiepompen, verbindingsbuizen, diervrije bewegingstanks, microdialysesondes en monsterverzamelaars16. Als het meest kritieke onderdeel van het apparaat van het microdialysesysteem bestaan gemeenschappelijke microdialysesondes uit concentrische sondes, flexibele sondes, lineaire sondes en shuntsonde17. Onder deze, flexibele sondes zijn zachte en niet-metalen sondes, voornamelijk gebruikt om monsters te verzamelen van bloedvaten en perifere weefsels zoals hart, spieren, huid en vet van wakkere en vrij bewegende of verdoofde dieren13. Bij contact met bloedvaten of weefsels kan de sonde flexibel worden gebogen, waardoor onomkeerbare schade aan de sonde of bemonsteringsplaats wordt vermeden. Met de voortdurende ontwikkeling van sondetechnologie wordt ook de toepassing van microdialysetechnologie op verschillende gebieden verdiept. In dit artikel werd het hartbloed van de rat dynamisch en continu verkregen door de niet-invasieve microdialysetechnologie via de flexibele sonde die is ontworpen voor bloedafname.

```html
<table><tbody><tr><td>Animal anesthesia system</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>R500IE</td><td></td></tr><tr><td>Animal temperature maintainer</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>69020</td><td></td></tr><tr><td>Blood microdialysis probe</td><td>&nbsp;CMA Microdialysis AB</td><td>T55347</td><td></td></tr><tr><td>Catheter</td><td>&nbsp;CMA Microdialysis AB</td><td>T55347</td><td></td></tr><tr><td>Citrate</td><td>Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd</td><td>251275</td><td></td></tr><tr><td>Electric shaver</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>CP-5200</td><td></td></tr><tr><td>Fep tubing</td><td>&nbsp;CMA Microdialysis AB</td><td>3409501</td><td></td></tr><tr><td>Free movement tank for animals</td><td>&nbsp;CMA Microdialysis AB</td><td>CMA120</td><td></td></tr><tr><td>Glucose</td><td>Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd</td><td>G8270</td><td></td></tr><tr><td>Hemostatic forceps</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>F21020-16</td><td></td></tr><tr><td>Isofluran</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>R510-22</td><td></td></tr><tr><td>Micro scissors</td><td>Beyotime Biotechnology Co., Ltd</td><td>FS221</td><td></td></tr><tr><td>Microdialysis collection tube</td><td>&nbsp;CMA Microdialysis AB</td><td>7431100</td><td></td></tr><tr><td>Microdialysis collector</td><td>&nbsp;CMA Microdialysis AB</td><td>CMA4004</td><td></td></tr><tr><td>Microdialysis in vitro stand</td><td>&nbsp;CMA Microdialysis AB</td><td>CMA130</td><td></td></tr><tr><td>Microdialysis microinjection pump</td><td>&nbsp;CMA Microdialysis AB</td><td>788130</td><td></td></tr><tr><td>Microdialysis syringe (1.0 mL)</td><td>&nbsp;CMA Microdialysis AB</td><td>8309020</td><td></td></tr><tr><td>Microdialysis tubing adapter</td><td>&nbsp;CMA Microdialysis AB</td><td>3409500</td><td></td></tr><tr><td>Microporous filter membrane</td><td>Merck Millipore Ltd.</td><td>R0DB36622</td><td></td></tr><tr><td>Non-absorbable surgical sutures</td><td>Shanghai Tianqing Biological Materials Co., Ltd</td><td>S19004</td><td></td></tr><tr><td>Operating table</td><td>Yuyan Scientific Instrument Co., Ltd</td><td>30153</td><td></td></tr><tr><td>Ophthalmic forceps</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>F12016-15</td><td></td></tr><tr><td>Sodium citrate</td><td>Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd</td><td>1613859</td><td></td></tr><tr><td>Sprague Dawley&nbsp; (SD) rats</td><td>Chengdu Dossy Experimental Animals Co., Ltd</td><td>SYXK(<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/64531/64531eq01.jpg" style="margin: auto;"/>)2019-049</td><td></td></tr><tr><td>Surgical scissors</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>S14014-15</td><td></td></tr><tr><td>Surgical scissors</td><td>Shanghai Bingyu Fluid technology Co., Ltd</td><td>BY-103</td><td></td></tr><tr><td>Syringe needle</td><td>&nbsp;CMA Microdialysis AB</td><td>T55347</td><td></td></tr><tr><td>Ultrasonic cleaner</td><td>Guangdong Goote Ultrasonic Co., Ltd</td><td>KMH1-240W8101</td><td></td></tr></tbody></table>
```

dynamische continue bloedextractie uit het rattenhart via niet-invasieve microdialysetechniek

Dynamic Continuous Blood Extraction from Rat Heart via Noninvasive Microdialysis Technique

Dynamische analyse van bloedbestanddelen is van groot belang bij het begrijpen van hart- en vaatziekten en hun gerelateerde ziekten, zoals myocardinfarct, aritmie, atherosclerose, cardiogeen longoedeem, longembolie en hersenembolie. Tegelijkertijd is het dringend noodzakelijk om de continue hartbloedafnametechniek bij levende ratten te doorbreken om de effectiviteit van onderscheidende etnische geneeskundetherapie te evalueren. In deze studie werd een bloedmicrodialysesonde geïmplanteerd in de rechter halsader van ratten in een nauwkeurige en niet-invasieve chirurgische procedure. Hartbloedmonsters werden vervolgens verzameld met een snelheid van 2,87 nL / min tot 2,98 ml / min door verbinding te maken met een online microdialysemonsterverzamelingssysteem. Nog belangrijker is dat de verkregen bloedmonsters tijdelijk kunnen worden opgeslagen in microdialysecontainers bij 4 °C. Het op microdialyse gebaseerde online continue bloedafnameprogramma van rattenhart heeft de kwaliteit van bloedmonsters enorm gegarandeerd, de wetenschappelijke rationaliteit van het onderzoek naar systemische hart- en vaatziekten bevorderd en versterkt en etnomedische therapie geëvalueerd vanuit het perspectief van hematologie.

Het huidige protocol maakte het mogelijk om het hartbloed van bewuste ratten te verkrijgen volgens bemonsteringsparameters die in de microdialyseapparatuur waren ingesteld. Normale bloedmonsters moeten helderrood zijn, terwijl dieren met hypoxie, potentiële bloedstolsels of bloedarmoede donkerpaars of donkerrood kunnen zijn. Monsters verkregen via de bloedmicrodialysetechniek zijn kleurloos, helder en transparant, die kunnen worden gebruikt om de serummarkers van verschillende ziekten en de bloedverdeling van geneesmidde...

Het huidige protocol beschrijft een eenvoudige en efficiënte methode voor de real-time en dynamische verzameling van rattenhartbloed met behulp van de microdialysetechniek.

Dynamische continue bloedextractie uit het rattenhart via niet-invasieve microdialysetechniek

Dynamic analysis of blood components is of great importance in understanding cardiovascular diseases and their related diseases, such as myocardial ...

Onze dynamische continue bloedafnametechniek van een rattenhart is erg belangrijk voor het analyseren van de bloedcomponenten en draagt bij aan het begrijpen van hart- en vaatziekten en hun gerelateerde ziekten. In vergelijking met traditionele bemonsteringsmethoden heeft deze techniek de voordelen van in vivo, real-time, dynamisch en is niet-invasief, zonder biologische micromoleculaire en titermonster voorbewerking voor een buitenlandse test. Deze techniek is niet alleen toepasbaar op hart- en vaatziekten, maar moet ook werken voor ziektediagnose en -behandeling door bloedbiomarkers te detecteren in combinatie met hoogfasevloeistofchromatografie en massaspectrometrie.Deze methode kan worden gebruikt om hart- en vaatziekten zoals hartinfarct, apneu en atherosclerose te onderzoeken. Daarnaast is het ook van toepassing op cardiogeen longoedeem en long- en hersenembolie. Na het uitvoeren van de experimentele voorbereiding, bevestigt u de inlaat van de dialyse-eenheidsonde met de spuitnaald, de slangadapter en de FEP-slang.Controleer de doorgankelijkheid van het microdialyseleidingsysteem door antistollingscitraat dextrose-oplossing in het leidingsysteem te perfuseren. Maak een incisie om de rechter halsader bloot te leggen door stompe dissectie van zacht weefsel en perivasculaire fascia. Maak met behulp van een 4-0 chirurgische hechting een afneembare slipknoop in de rechter halsader aan het distale uiteinde van het hart om de bloedstroom tijdelijk te blokkeren.Maak vervolgens een incisie in de rechter halsader bij het hart. Breng een naaldvormige katheter in de rechter halsader naar het proximale uiteinde van het rattenhart. Breng de bloedmicrodialysesonde in een katheter in en implanteer de sonde met een oogheelkundige tang langs de schuine incisie van de katheterstijl.Verwijder de geleide katheterstijl en dompel het semipermeabele membraan van de sonde volledig onder in de rechter halsader. Ontrafel de afneembare slipknoop aan het distale uiteinde van het hart om de bloedstroom in de rechter halsader te herstellen. Gebruik vervolgens 4-0 chirurgische hechtingen om de sonde met de juiste halsader te ligateren.Plaats de wakkere rat in een vrij bewegende tank en sluit de sonde aan op het microdialysesysteem. Irrigeer vervolgens de antistollingscitraat dextrose-oplossing met een snelheid van twee microliter per minuut gedurende één uur om het dialysemembraan van de sonde in evenwicht te brengen. Verzamel microdialyse bloedmonsters en bewaar ze tijdelijk in een fractionele container van vier graden Celsius.Om opnieuw te bevestigen dat de sonde zich in de juiste halsader bevindt, ontleedt u de rat. Verwijder de microdialysesonde uit de rechter halsader en plaats deze in ultrapuur water. Sluit de sonde aan op de pijpleiding en spoel 's nachts met ultrapuur water om het resterende zout in de pijp en sonde grondig uit te spoelen.De normale bloedmonsters zagen er felrood uit, terwijl potentiële bloedstolsels werden waargenomen in hypoxische monsters. Monsters verkregen door de bloedmicrodialysetechniek waren kleurloos, helder en transparant. Om de vernietiging van het membraan en de sonde van glijden of verplaatsing te voorkomen, moeten we opletten wanneer we de sonde in de halsader van de rat plaatsen en onderdompelen.De bloedmonsters verkregen via de microdialysetechniek kunnen worden gebruikt om de biomarkers van verschillende ziekten en de bloedverdeling van geneesmiddelen en zeldzame metabolieten te analyseren.

dynamic-continuous-blood-extraction-from-rat-heart-via-noninvasive

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Dit protocol beschrijft een methode om hart interstitiële vloeistof uit het geïsoleerde, geperfuseerde rat hart te verzamelen. Om het interstitiële transudaat fysisch te scheiden van coronaire veneuze effluentperfusaat, wordt het geperfereerde hart van Langendorff omgekeerd en wordt de transudaat (interstitiële vloeistof) gevormd op het hartoppervlak verzameld met behulp van een zachte latexdop.

Het omgekeerde hartmodel voor de interstitiële transudate-collectie van het Geïsoleerde Rat Hart

Hier beschrijven we een methode voor in vivo microdialysis analyseren aspartaat en glutamaat release in de ventrale hippocampus voor epileptische en niet-epileptische rats, in combinatie met EEG-opnames. Extracellulair concentraties aspartaat of glutamaat kunnen worden gecorreleerd met de verschillende fasen van de ziekte.

Microdialysis van Excitatory aminozuren tijdens EEG opnames in vrij bewegende ratten

Hier beschrijven we een setup voor gelijktijdige opname elektrocardiogram en intra-arteriële bloeddruk (BP) in experimentele ratten, die kunnen worden gedaan met standaard uitrusting in dierlijke voorzieningen en kunnen worden toegepast op de fysiologische of farmacologische studies om te onderzoeken van pathogene of therapeutische mechanismen in cardiovasculaire geneeskunde.

Gelijktijdige electrocardiografie opname en invasieve bloed druk meting bij ratten

Dit artikel presenteert een efficiënte methode om myocardiale ischemie en de daaropvolgende chronische reperfusie bij ratten uit te voeren met behulp van een minimaal invasieve aanpak. Bovendien wordt de linker ventriculaire hemodynamische functie van ratten beoordeeld door echocardiografie en geïsoleerde werkhartmethoden.

Semi-minimale invasieve methode om myocardiaal infarct induceren bij ratten en de beoordeling van de cardiale functie door een geïsoleerd werkend hartsysteem

De gouden standaard in de cardiologie voor cellulaire en moleculaire functionele experimenten zijn cardiomyocyten. Dit artikel beschrijft aanpassingen aan de niet-Langendorff-techniek om cardiomyocyten bij muizen te isoleren.

Een eenvoudige en effectieve methode om cardiomyocyten van muizen consequent te isoleren

Het huidige protocol beschrijft aortacantnulatie en retrograde perfusie van het ex-vivo neonatale muizenhart.  Een tweepersoonsstrategie, met behulp van een ontleedmicroscoop en een stompe kleine naald, maakt betrouwbare cannulatie mogelijk. Kwantificering van longitudinale contractiele spanning wordt bereikt met behulp van een krachttransducer die is verbonden met de top van de linker ventrikel.

Aangepaste techniek voor het gebruik van neonatale muizenharten in het Langendorff-preparaat

Het protocol hier biedt een gedetailleerde real-time dynamische bemonstering van extracellulaire vloeistof uit de hippocampus van wakkere ratten met behulp van een microdialysesysteem.

Real-time dynamische verzameling van hippocampale extracellulaire vloeistof van bewuste ratten met behulp van een microdialysesysteem

Het protocol toont herhaalde cerebrospinale vocht- en bloedafname van epileptische ratten die parallel worden uitgevoerd met continue video-elektro-encefalogram (EEG)-monitoring. Deze zijn van groot belang voor het onderzoeken van mogelijke verbanden tussen veranderingen in verschillende lichaamsvloeistofmoleculen en epileptische activiteit.

Bemonstering van hersenvocht en bloed uit laterale staartader bij ratten tijdens EEG-opnames

Dit protocol beschrijft een methode voor het meten van de druk en het volume van de linkerventrikel met behulp van de druk-volume geleidingstechniek. Deze methode maakt het mogelijk om continu real-time de effecten van medicijnen op het hart te monitoren.

Real-time detectie van ferulazuureffecten op de linker hartkamer van ratten met behulp van een druk-volume geleidbaarheidskatheter

Dit protocol schetst geavanceerde materiaalfabricage en ex vivo rattenhartmethoden voor optische en elektrische bidirectionele bio-interfacing, waardoor nauwkeurige hartstimulatie, registratie en infarctmodellering voor bio-elektronicaonderzoek mogelijk zijn.

Bidirectionele elektrische en opto-elektronische interfaces in gezonde en ischemische ex vivo rattenharten

Leer een niet-invasieve microdialysetechniek voor continue bloedextractie uit het rattenhart. Deze methode maakt real-time monitoring van bloedcomponenten mogelijk voor cardiovasculair onderzoek.

Dynamische continue bloedextractie uit het rattenhart via niet-invasieve microdialysetechniek

Meer video's verkennen