Chirurgie en gedragstesten in het tibiale neuroomtranspositiemodel bij ratten

Deze methode helpt bij het vinden van betere behandelingen voor neuroompijn. Het voordeel van deze techniek is dat je zowel neuroompijn als gegeneraliseerde pijn onafhankelijk van elkaar kunt meten in hetzelfde rep-model. Het TNT-model is bijzonder geschikt voor het testen van neuroompijn, omdat het neuroom zelf mechanisch kan worden gestimuleerd met de Von Frey-monofilamenten.

Begin met het plaatsen van de verdoofde rat op zijn rug met zijn kop naar links of rechts. Plaats het te opereren been in de buurt van de chirurg. Exoroteer de onderste achterpoot zodat de mediale malleolus naar boven is gericht.

Voordat u de rat onder een stereochirurgische microscoop met 6x vergroting plaatst, desinfecteert u het geschoren gebied met ten minste drie afwisselende rondes scrub op basis van jodium en alcohol. Lokaliseer de knie en maak voorzichtig een longitudinale incisie van twee tot drie centimeter over de mediale kant van de achterpoot van midcalf tot enkel met behulp van een scalpel. Open indien nodig de huid en subcutis verder met een microschaar totdat de spierlagen zichtbaar zijn.

Identificeer de oppervlakkige neurovasculaire bundel als twee tot drie witte, paarse of rode lijnen die vrij over de spierlagen kunnen bewegen. Houd de neurovasculaire bundel intact. Ontleed het achterste uit deze bundel.

Ontleed vervolgens om de fascia tussen de gastrocnemiusspieren te openen. Tussen de fascia van de spieren bevindt zich de diepere neurovasculaire bundel met de tibiale zenuw, die ongeveer drie keer zo groot is als de oppervlakkige neurovasculaire bundel. Gebruik het tibiale bot als een extra oriëntatiepunt, omdat de tibiale zenuw net achter het tibiale bot vliegt.

Om de tibiale zenuw vrij van de omliggende vaatbundels te ontleden, beweegt u de tibiale zenuw botweg en snijdt u het blootgestelde weefsel af dat enige rek vertoont tijdens het bewegen van de tibiale zenuw. Zodra de hele tibiale zenuw is blootgesteld, plaatst u de spierlagen terug om uitdroging van de zenuw te voorkomen tot de dissectie van de pretibiale huid uit de onderhuidse spier. Om de pretibiale huid van de onderhuidse spierlaag te ontleden en een onderhuidse tunnel te maken, houdt u de huid omhoog en duwt u de stompe punt in het weefsel parallel aan de huid met behulp van een stomp microchirurgisch hulpmiddel.

Zorg ervoor dat het einde van de tunnel zich pretibiaal of lateraal bevindt voor gemakkelijke toegankelijkheid van het gebied voor het testen van het neuroom. Na het doorsnijden van de tibiale zenuw aan het distale uiteinde bij de enkel, verandert u de microscoopvergroting in 10x of 16x en identificeert u het epineurium van de tibiale zenuw proximaal aan de snee in de buurt van de enkel. Of, in het geval van een meer proximale bifurcatie van de tibiale zenuw, identificeer het epineurium van zowel de mediale als de laterale plantertakken proximaal aan de snede gemaakt in de buurt van de enkel.

Plaats voorzichtig een 8-0 nylon hechting door het epineurium van het proximale zenuwuiteinde door het epineurium met een pincet vast te houden en de naald tussen de zenuw en het epineurium te plaatsen met een beet van ongeveer 0,5 millimeter. Neem een beet met de naald subcutaan aan het einde van de onderhuidse tunnel en trek aan de hechtdraad om de zenuw lateraal in de onderhuidse tunnel te transponeren. Repareer de hechting door een knoop te maken.

Plaats een dikkere hechting van 4-0 met een donkere kleur die naar het gefixeerde zenuwuiteinde wordt gespoeld zonder de huid te penetreren. Zorg ervoor dat de hechting buiten de huid zichtbaar is. Controleer of de zenuw op zijn plaats blijft na het bewegen van de poot en spieren.

Snijd de hechtingseinden af met een iets langer hechtingseind op de 4-0, dan op de 8-0 hechting. Verander de vergroting van de microscoop terug naar 6x en sluit de huid met intra-epidermale hechtingen met behulp van de 8-0 hechting. Reinig de huid voorzichtig met 0,9% natriumchloride met een wattenstaafje.

Als de kamer koud is, plaats dan een verwarmingskussen onder een deel van een schone kooi en plaats de rat in de kooi onder een papieren handdoek in een comfortabele positie. Zorg voor gemakkelijke toegang tot voedsel en water. Om de steriele zenuw te stimuleren voor overgevoeligheid, brengt u het monofilament aan de zijkant dicht bij de haarrand aan zonder de voetkussens aan te raken.

Om de tibiale zenuw te stimuleren voor hyposensitiviteit, brengt u het monofilament aan in het midden van het planteroppervlak van de achterpoot. Voor het testen van neuroomlocaties houdt u de ratten vast met hun neus naar de elleboogplooi gericht. Als de rat in de rechterhand wordt gehouden, moet zijn linkerachterpoot vrij tussen de rechterduim en wijsvinger hangen.

Nadat u hebt gecontroleerd of de rat kalm en comfortabel is tijdens het vasthouden, plaatst u bij het opstarten het monofilament van 15 gram voorzichtig op het pretibiale oppervlak van de blootgestelde achterpoot. Plaats na de operatie het monofilament van 15 gram op de zichtbare hechtdraad en oefen voldoende kracht uit op het monofilament om het haar te buigen en een seconde vast te houden. Von Frey van de neuroomsite toonde aan dat ratten bij baseline reageerden op 10% tot 15% van de toepassingen van een monofilament van 15 gram.

Een week na de tibiale neuroomtranspositieoperatie steeg het responspercentage van 45% naar 50%Aan de contralaterale kant waren de reacties na de operatie vergelijkbaar met de baseline. Ongeveer 20% van de ratten ontwikkelde geen pijnlijk neuroom en het responspercentage nam niet toe ten opzichte van de uitgangswaarde. Aan het einde van de getransecteerde en getransponeerde tibiale zenuwstomp 12 weken na de operatie ontwikkelden alle ratten een neuroom.

Transsectie van de tibiale zenuw verminderde de mechanische gevoeligheid in het midden van de plantenbakzijde van de achterpoot geïnnerveerd door de tibiale zenuw. Hyposensitiviteit die één week na de operatie aanwezig was, verschilde significant van de contralaterale zijde en baseline vanaf drie weken na de operatie en bleef tot 12 weken na de operatie. Aan het laterale deel van de plantenbakzijde van de achterpoot, geïnnerveerd door de intacte nervus sural, ontwikkelden de ratten significant verschillende mechanische overgevoeligheid van de contralaterale kant en baseline vanaf een week na de operatie.

Het hield 12 weken na de operatie aan. Bij de contralaterale poot werd de mechanische gevoeligheid niet beïnvloed in vergelijking met de uitgangswaarde in de gebieden die geïnnerveerd werden door de surale of tibiale zenuw. Vergeet niet om een off-length van de tibiale zenuw te creëren voor bewegingsbereik voor laterale transpositie.

Vergeet ook niet om deze neuroomplaats te markeren met een donkere hechting.