Een in vitro oplossing bepaling van multi-index componenten in de Tibetaanse geneeskunde Rhodiola korrels

In vitro maatregel is een geschikte maatregel voor het inspecteren van het oplossen van oplossingen van vast Chinees medicijnpreparaat die rekening houden met de effecten van desintegratie van geneesmiddelen, en het oplosgedrag en de inhoud van het actieve ingrediënt. De detectie van multi-index componenten kan de neutrale invloed en het oplossingsverschil van verschillende componenten beter weerspiegelen. De procedure wordt gedemonstreerd door Quinyun Du, een buitengewone student uit mijn laboratorium.

Bereid om te beginnen de stamoplossing van de referentiestof door 10,6 milligram salidrocide, 5,24 milligram galluszuur en 5,21 milligram ethylgalluszuur afzonderlijk op een elektronische analytische balans te wegen. Voeg ze vervolgens afzonderlijk toe in een maatkolf van vijf milliliter. Voeg vervolgens methanol van HPLC-kwaliteit toe om op te lossen en verdun tot vijf milliliter.

En ten slotte, schud goed om de referentiestof-stamoplossing te verkrijgen met massaconcentraties van respectievelijk 2,120, 1,048 en 1,042 milligram per milliliter. Om de testmonsteroplossing te bereiden, extraheert u 2,8 gram rhodiola-korrels met 10 milliliter methanol van HPLC-kwaliteit, met behulp van een ultrasone reinigingsmachine gedurende 30 minuten. Filter het vervolgens met een filter van 0,22 micrometer voor de systeemaanpassingstest.

Bereid vervolgens een gemengde referentieoplossing die 0,590 milligram per milliliter salidrocide, 2,030 milligram per milliliter galluszuur en 1,930 milligram per milliliter ethylgallaat bevat. Om het theoretische gehalte van elk karakteristiek bestanddeel van rhodiola-korrels te verkrijgen, plaatst u 2,8 gram rhodiola-korrels in een erlenmeyer van 500 milliliter. Voeg 200 milliliter ultrapuur water toe en extraheer ultrasoon gedurende 60 minuten.

Filter het vervolgens met een filter van 0,22 micrometer. Nadat de inhoud van de testoplossing is bepaald, stelt u de chromatografische voorwaarden in voor vloeistofchromatografie met hoge prestaties zoals beschreven in het manuscript. Om de lineaire relatie te onderzoeken, verdunt u de referentiestamoplossingen van galluszuur en ethylgallaat en de referentievoorraadoplossingen van salidrocide om de gradiëntconcentratieoplossing voor het tekenen van een standaardcurve te verkrijgen.

Injecteer vervolgens zes keer per dag 10 microliter van de gemengde referentieoplossing in het HPLC-systeem en voer de monsters uit met dezelfde HPLC-omstandigheden, terwijl het piekoppervlak van elke functiecomponent wordt geregistreerd. Injecteer vervolgens 10 microliter van de bereide monsteroplossing en bepaal de piekgebieden van de HPLC volgens de chromatografische omstandigheden met verschillende tijdsintervallen. Neem zes monsters van dezelfde partij rhodiolakorrels om de testmonsteroplossing te bereiden zoals eerder gedemonstreerd, en injecteer 10 microliter van elk monster in het HPLC-systeem.

Voer de monsters uit zoals eerder gedemonstreerd om de reproduceerbaarheid te bepalen. Na het bereiden van zes porties van dezelfde partij rhodiola-korrels voor de testoplossing, voegt u ongeveer 50% van het referentiesubstraat van elke indexcomponent toe. Voer deze monsters uit in het HPLC-systeem, zoals eerder gedemonstreerd, om het herstelpercentage te berekenen zoals beschreven in het manuscript.

Om de oplostest uit te voeren, voegt u 100 milliliter ultrapuur water toe aan de oplosbeker van het oplosapparaat voor geneesmiddelen en houdt u de temperatuur op 37 graden Celsius met een rotatiesnelheid van 100 tpm. Voeg vervolgens 2,8 gram rhodiola-korrels toe aan een oplossingsbeker en begin onmiddellijk met het registreren van de duur van het oplossen. Verzamel in totaal één milliliter van het monster met een injector met verschillende tijdsintervallen en vul het volume in de oplosbeker onmiddellijk aan met een oplosmedium bij dezelfde temperatuur.

Vul de verzamelde monsters onmiddellijk door een microporeus membraan van 0,22 micrometer en neem het daaropvolgende filtraat. Na het bepalen van de inhoud van elk onderdeel, op elk tijdstip door HPLC, berekent u de oplossing van elk tijdspunt en de cumulatieve oplossing zoals beschreven in het manuscript. Het chromatogram van het monster en de referentieoplossing werden verkregen.

Drie verschillende pieken die overeenkomen met galluszuur, salidrocide en ethylgallaat laten zien dat de elutiegradiënt een goede resolutie had voor de drie indexcomponenten in rhodiolakorrels. De oplossingscurven van elke component laten zien dat de cumulatieve oplossing van galluszuur na één minuut meer dan 80% was. Terwijl het voor salidrocide en ethylgalluszuur na vijf minuten meer dan 65% was.

De cumulatieve ontbinding van elke indexcomponent nam echter na 30 minuten af. Door het verdunningsprobleem van de standaardcurve aan te passen, moeten volgens het voorlopige experiment van de monsterbehandeling monsters snel worden verzameld om te voorkomen dat ze een speciaal verzameltijdstip missen.