Name: Bioluminescente monitoring van transplantaatoverleving in een adoptief transfermodel van auto-immuundiabetes bij muizen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-11-18T15:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 3 s
Description: Leer een minimaal invasieve methode voor celtransplantatie en bioluminescente beeldvorming bij NOD-SCID muizen. Deze techniek helpt onderzoekers bij het bestuderen van auto-immuunreacties en therapeutische doelwitten voor diabetes type 1.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Wij danken Dr. Erica P. Cai en Dr. Yuki Ishikawa voor het ontwikkelen van de methode beschreven in dit protocol (zie ref. 11). Onderzoek in de laboratoria van S.K. en P.Y. wordt ondersteund door subsidies van de National Institutes of Health (NIH) (R01DK120445, P30DK036836), JDRF, het Harvard Stem Cell Institute en de Beatson Foundation. T.S. werd ondersteund door een postdoctoraal fellowship van het National Institute of Diabetes and Digestive and Kidney Diseases (NIDDK) (T32 DK007260-45), en K.B. werd gedeeltelijk ondersteund door een fellowship van de Mary K. Iacocca Foundation.

<ol><li>Katsarou, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Type+1+diabetes+mellitus%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Disease+Primers%22%5BJournal%5D)">Type 1 diabetes mellitus.</a> Nature Reviews Disease Primers. 3, 17016(2017).</li>
<li>Shapiro, A. M., Pokrywczynska, M., Ricordi, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+pancreatic+islet+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Clinical pancreatic islet transplantation.</a> Nature Reviews Endocrinology. 13 (5), 268-277 (2017).</li>
<li>Pagliuca, F. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+functional+human+pancreatic+beta+cells+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Generation of functional human pancreatic beta cells in vitro.</a> Cell. 159 (2), 428-439 (2014).</li>
<li>Russ, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlled+induction+of+human+pancreatic+progenitors+produces+functional+beta-like+cells+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+Journal%22%5BJournal%5D)">Controlled induction of human pancreatic progenitors produces functional beta-like cells in vitro.</a> EMBO Journal. 34 (13), 1759-1772 (2015).</li>
<li>Rezania, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversal+of+diabetes+with+insulin-producing+cells+derived+in+vitro+from+human+pluripotent+stem+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Reversal of diabetes with insulin-producing cells derived in vitro from human pluripotent stem cells.</a> Nature Biotechnology. 32 (11), 1121-1133 (2014).</li>
<li>Vertex Announces Positive Day 90 Data for the First Patient in the Phase 1_2 Clinical Trial Dosed With VX-880, a Novel Investigational Stem Cell-Derived Therapy for the Treatment of Type 1 Diabetes. Businesswire. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.businesswire.com/news/home/20211018005226/en/Vertex-Announces-Positive-Day-90-Data-for-the-First-Patient-in-the-Phase-12-Clinical-Trial-Dosed-With-VX-880-a-Novel-Investigational-Stem-Cell-Derived-Therapy-for-the-Treatment-of-Type-1-Diabetes">https://www.businesswire.com/news/home/20211018005226/en/Vertex-Announces-Positive-Day-90-Data-for-the-First-Patient-in-the-Phase-12-Clinical-Trial-Dosed-With-VX-880-a-Novel-Investigational-Stem-Cell-Derived-Therapy-for-the-Treatment-of-Type-1-Diabetes</a> (2021).</li>
<li>Gamble, A., Pepper, A. R., Bruni, A., Shapiro, A. M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+journey+of+islet+cell+transplantation+and+future+development%5BTitle%5D)+AND+%22Islets%22%5BJournal%5D)">The journey of islet cell transplantation and future development.</a> Islets. 10 (2), 80-94 (2018).</li>
<li>Pearson, J. A., Wong, F. S., Wen, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+importance+of+the+Non+Obese+Diabetic+%28NOD%29+mouse+model+in+autoimmune+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Autoimmunity%22%5BJournal%5D)">The importance of the Non Obese Diabetic (NOD) mouse model in autoimmune diabetes.</a> Journal of Autoimmunity. 66, 76-88 (2016).</li>
<li>Hamaguchi, K., Gaskins, R. H., Leiter, E. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NIT-1%2C+a+pancreatic+%CE%B2-cell+line+established+from+a+transgenic+NOD%2FLt+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">NIT-1, a pancreatic β-cell line established from a transgenic NOD/Lt mouse.</a> Diabetes. 40 (7), 842-849 (1991).</li>
<li>Christianson, S. W., Shultz, L. D., Leiter, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adoptive+transfer+of+diabetes+into+immunodeficient+NOD-scid%2Fscid+mice%3A+Relative+contribution+of+CD4%2B+and+CD8%2B+T-cells+from+diabetogenic+versus+prediabetic+NOD.NON-Thy1a+donors%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Adoptive transfer of diabetes into immunodeficient NOD-scid/scid mice: Relative contribution of CD4+ and CD8+ T-cells from diabetogenic versus prediabetic NOD.NON-Thy1a donors.</a> Diabetes. 42 (1), 44-55 (1993).</li>
<li>Cai, E. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genome-scale+in+vivo+CRISPR+screen+identifies+RNLS+as+a+target+for+beta+cell+protection+in+type+1+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Genome-scale in vivo CRISPR screen identifies RNLS as a target for beta cell protection in type 1 diabetes.</a> Nature Metabolism. 2 (9), 934-945 (2020).</li>
<li>Parent, A. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+deletion+of+human+leukocyte+antigens+protects+stem+cell-derived+islets+from+immune+rejection%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Reports%22%5BJournal%5D)">Selective deletion of human leukocyte antigens protects stem cell-derived islets from immune rejection.</a> Cell Reports. 36 (7), 109538(2021).</li>
<li>Brehm, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lack+of+acute+xenogeneic+graft-versus-host+disease%2C+but+retention+of+T-cell+function+following+engraftment+of+human+peripheral+blood+mononuclear+cells+in+NSG+mice+deficient+in+MHC+class+I+and+II+expression%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+Journal%22%5BJournal%5D)">Lack of acute xenogeneic graft-versus-host disease, but retention of T-cell function following engraftment of human peripheral blood mononuclear cells in NSG mice deficient in MHC class I and II expression.</a> FASEB Journal. 33 (3), 3137-3151 (2019).</li>
<li>Abdulreda, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+imaging+of+type+1+diabetes+immunopathology+using+eye-transplanted+islets+in+NOD+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">In vivo imaging of type 1 diabetes immunopathology using eye-transplanted islets in NOD mice.</a> Diabetologia. 62 (7), 1237-1250 (2019).</li>
</ol>

De auteurs verklaren dat ze geen belangenconflicten hebben.

T1D is een verwoestende ziekte waarvoor momenteel geen remedie bestaat. Bètacelvervangingstherapie biedt een veelbelovende behandeling voor patiënten met deze ziekte, maar de kritieke barrière voor deze strategie is het potentieel voor terugkerende auto-immuunaanvallen tegen de getransplanteerde bètacellen. De genetische manipulatie van SC-bètacellen om hun immuunzichtbaarheid of gevoeligheid te verminderen, is een mogelijke oplossing voor dit probleem. Hier wordt een protocol beschreven voor niet-invasieve beeldvorming ...

Type 1 diabetes (T1D) wordt veroorzaakt door de auto-immuunvernietiging van de insulineproducerende bètacellen van de alvleesklier. Het verlies van bètacelmassa resulteert in insulinedeficiëntie en hyperglycemie. T1D-patiënten vertrouwen op meerdere dagelijkse injecties met exogene insuline en ervaren episodes van ernstige hyperglykemie en hypoglykemie gedurende hun hele leven. De complicaties die verband houden met deze episodes omvatten diabetische retinopathie, verminderde nierfunctie en neuropathie1.
Insuline-injecties zijn een behandeling, maar geen remedie voor T1D. Het vervangen van de verloren bètacelmassa heeft echter het potentieel om de ziekte om te keren door patiënten in staat te stellen hun eigen insuline te produceren. Het aanbod van kadaverische donoreilandjes is echter beperkt2. Stamcel-afgeleide eilandjes (SC-eilandjes) kunnen een vrijwel onbeperkte voorraad bètacellen voor transplantatie bieden. Verschillende groepen hebben aangetoond dat menselijke embryonale stamcellen (SER's) en geïnduceerde pluripotente stamcellen (iPSC's) kunnen worden gedifferentieerd om functionele bèta-achtige cellen te genereren 3,4,5. Veelbelovende vroege klinische onderzoeksgegevens geven aan dat deze cellen hun functie behouden na transplantatie en patiënten in staat kunnen stellen insulineonafhankelijk te worden6. Chronische immunosuppressie is echter vereist, waardoor hun gevoeligheid voor kanker en infectie toeneemt. Bovendien kunnen immunosuppressiva op lange termijn cytotoxisch zijn voor grafts7. Om de noodzaak van immunosuppressie te elimineren, kunnen SC-eilandjes genetisch worden gemodificeerd om ze te beschermen tegen terugkerende auto-immuniteit en allo-immuniteit na transplantatie.
Stamcelonderzoek is zeer veeleisend in kosten en arbeid. Muiscellijnen en diermodellen zijn nuttige hulpmiddelen voor de initiële identificatie en experimentele validatie van strategieën om getransplanteerde cellen te beschermen tegen auto-immuniteit. De NOD-muis ontwikkelt spontane auto-immuundiabetes met veel overeenkomsten met menselijke T1D8, en de NIT-1 insulinoomcellijn deelt een genetische achtergrond met deze muizenstam9. Diabetes kan adoptief worden overgedragen op de gerelateerde immunodeficiënte NOD-scid muizenstam via de injectie van diabetische splenocyten van NOD-muizen om het begin van diabetes tijdelijk te synchroniseren bij replicerende experimentele muizen10. Dit model kan worden gebruikt om genetische doelen relatief snel en goedkoop te identificeren voor verdere validatie in SC-eilandjes. Onlangs werd de methode toegepast om RNLS te identificeren en te valideren, een doelwit dat primaire menselijke eilandjes bleek te beschermen tegen auto-immuniteit in vivo en iPSC-afgeleide eilandjes tegen bètacelstress in vitro11. Hier wordt een eenvoudig protocol beschreven om genetisch gemanipuleerde NIT-1-cellen te transplanteren en niet-invasief hun overleving te controleren in een adoptief overdrachtsmodel van auto-immuundiabetes bij muizen.

<table><tbody><tr><td>0.05% Trypsin, 0.53 mM EDTA</td><td>Corning</td><td>25-052-CI</td><td></td></tr><tr><td>293FT</td><td>Invitrogen</td><td>R70007</td><td>Fast-growing, highly transfectable clonal isolate derived from human embryonal kidney cells transformed with the SV40 large T antigen</td></tr><tr><td>ACK Lysing Buffer</td><td>Gibco</td><td>A10492-01</td><td></td></tr><tr><td>Alcohol prep pads, 70% Isopropyl alcohol</td><td>Amazon/Ever Ready First Aid</td><td>B08NWF31DX</td><td></td></tr><tr><td>BD 5ml Syringe Luer-Lok Tip</td><td>BD</td><td>309646</td><td></td></tr><tr><td>BD PrecisionGlide Needle 26G x 5/8 (0.45 mm x 16 mm) Sub-Q</td><td>BD</td><td>305115</td><td></td></tr><tr><td>BD 1 mL TB Syringe Slip Tip</td><td>BD</td><td>309659</td><td></td></tr><tr><td>Blasticidin S HCl</td><td>Corning</td><td>&nbsp;30-100-RB</td><td></td></tr><tr><td>Cell strainer premium SureStrain, 70 &micro;m, sterile</td><td>Southern Labware</td><td>C4070</td><td>Or use similar sterile strainer with 40-70um pore size</td></tr><tr><td>CellDrop automated cell counter</td><td>Denovix</td><td>CellDrop BF-PAYG</td><td>Or use similar cell counter device</td></tr><tr><td>Corning 100 mL Penicillin-Streptomycin Solution, 100x</td><td>Corning</td><td>30-002-CI</td><td></td></tr><tr><td>Disposable Aspirating Pipets, Polystyrene, Sterile, Capacity=2 mL</td><td>VWR</td><td>414004-265</td><td>Or use similar aspirating pipette</td></tr><tr><td>D-Luciferin, Potassium Salt, Molecular Biology Grade, Powder, >99%</td><td>Goldbio</td><td>LUCK-100</td><td></td></tr><tr><td>DMEM, high glucose, pyruvate, no glutamine</td><td>Gibco</td><td>10313039</td><td></td></tr><tr><td>Falcon BD tubes, 50 mL</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-959-49A</td><td></td></tr><tr><td>Fetal Bovine Serum</td><td>Gibco</td><td>10437-028</td><td></td></tr><tr><td>Forceps premium for tissues, 1 x 2 teeth 5 in, German Steel</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-820-074</td><td></td></tr><tr><td>Glucose urine test strip</td><td>California Pet Pharmacy</td><td>u-tsg100</td><td>Or use similar test strip for glucose measurments in urine/blood</td></tr><tr><td>GlutaMAX&ndash;1 (100x)</td><td>Gibco</td><td>35050-061</td><td></td></tr><tr><td>Infrared heating lamp</td><td>Cole Parmer</td><td>03057-00</td><td>Or use similar infrared lamp&nbsp;</td></tr><tr><td>Insulin syringe 0.5 mL, U-100 29 G 0.5 in</td><td>Becton Dickinson</td><td>309306</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane, USP</td><td>Piramal Critical Care</td><td>6679401725</td><td></td></tr><tr><td>IVIS Spectrum in vivo imaging system</td><td>Perkin Elmer</td><td>124262</td><td>Instrument for non-invasively collecting bioluminescent images of transplanted cells</td></tr><tr><td>Living Image Analysis Software</td><td>Perkin Elmer</td><td>128113</td><td>Software for collecting and quantifying bioluminescent signal</td></tr><tr><td>Microcentrifuge tubes seal-rite, 1.5 mL</td><td>USA Scientific</td><td>1615-5510</td><td>Or use similar sterile microcentrifuge tubes</td></tr><tr><td>NIT-1</td><td>ATCC</td><td>CRL-2055</td><td>Pancreatic beta-celll line derived from NOD/Lt mice</td></tr><tr><td>NOD.Cg-Prkdcscid/J</td><td>The Jackson Laboratory</td><td>001303</td><td>Mice homozygous for the severe combined immune deficiency spontaneous mutation&nbsp;Prkdcscid, commonly referred to as&nbsp;scid, are characterized by an absence of functional T cells and B cells, lymphopenia, hypogammaglobulinemia, and a normal hematopoietic microenvironment.</td></tr><tr><td>NOD/ShiLtJ</td><td>The Jackson Laboratory</td><td>001976</td><td>The NOD/ShiLtJ strain of mice (commonly called NOD) is a polygenic model for autoimmune type 1 diabetes</td></tr><tr><td>PBS, pH 7.4</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>10010031</td><td>No calcium, no magnesium, no phenol red</td></tr><tr><td>pCMV-VSV-G</td><td>Addgene</td><td>8454</td><td></td></tr><tr><td>pLenti-luciferase-blast</td><td>Made in-house</td><td>Plasmid available upon request</td><td>See Supplemental File 1</td></tr><tr><td>pMD2.G</td><td>Addgene</td><td>12259</td><td></td></tr><tr><td>pMDLg/pRRE</td><td>Addgene</td><td>12251</td><td></td></tr><tr><td>Polyethylenimine, Linear, MW 25,000, Transfection Grade (PEI 25K)</td><td>Fisher Scientific</td><td>NC1014320</td><td></td></tr><tr><td>pRSV-Rev</td><td>Addgene</td><td>12253</td><td></td></tr><tr><td>Restrainer for rodents, broome-style round 1 in</td><td>Fisher Scientific</td><td>01-288-32A</td><td></td></tr><tr><td>Scissors, sharp-pointed</td><td>Fisher Scientific</td><td>08-940</td><td>Or use other scissors made of surgical-grade stainless steel</td></tr><tr><td>Tissue-culture treated culture dishes</td><td>Millipore Sigma</td><td>CLS430167-20EA</td><td>Or use other sterile cell culture-treated Petri dishes</td></tr><tr><td>Tweezers/Forceps, fine precision medium tipped</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-000-157</td><td></td></tr></tbody></table>

bioluminescente monitoring van transplantaatoverleving in een adoptief transfermodel van auto-immuundiabetes bij muizen

Bioluminescent Monitoring of Graft Survival in an Adoptive Transfer Model of Autoimmune Diabetes in Mice

Type 1 diabetes wordt gekenmerkt door de auto-immuunvernietiging van de insulineproducerende bètacellen van de alvleesklier. Een veelbelovende behandeling voor deze ziekte is de transplantatie van van stamcellen afgeleide bètacellen. Genetische modificaties kunnen echter nodig zijn om de getransplanteerde cellen te beschermen tegen aanhoudende auto-immuniteit. Diabetische muismodellen zijn een nuttig hulpmiddel voor de voorlopige evaluatie van strategieën om getransplanteerde cellen te beschermen tegen auto-immuunaanvallen. Hier wordt een minimaal invasieve methode beschreven voor het transplanteren en afbeelden van celtransplantaten in een adoptief overdrachtsmodel van diabetes bij muizen. In dit protocol worden cellen van de murine pancreas bètacellijn NIT-1 die de vuurvlieg luciferase transgen luc2 tot expressie brengt, subcutaan getransplanteerd in immunodeficiënte niet-obese diabetische (NOD) -ernstige gecombineerde immunodeficiënte (scid) muizen. Deze muizen worden tegelijkertijd intraveneus geïnjecteerd met splenocyten van spontaan diabetische NOD-muizen om auto-immuniteit over te dragen. De grafts worden met regelmatige tussenpozen in beeld gebracht via niet-invasieve bioluminescente beeldvorming om de celoverleving te volgen. De overleving van gemuteerde cellen wordt vergeleken met die van controlecellen die in dezelfde muis zijn getransplanteerd.

Een overzicht van het protocol is weergegeven in figuur 1. De overleving van twee cellijnen, zoals een mutant en een niet-gerichte controle, kan worden vergeleken, of de overleving van één cellijn kan worden gemeten in meerdere groepen muizen, zoals met geneesmiddelen behandelde muizen versus met voertuigen behandelde controles. Figuur 3A toont drie 8 weken oude vrouwelijke NOD-scid muizen getransplanteerd met een niet-gerichte controle (links) en een mutante (r...

Dit protocol beschrijft een eenvoudige en minimaal invasieve methode voor het transplanteren en afbeelden van NIT-1-cellen in niet-obese diabetische (NOD) -ernstige gecombineerde immunodeficiënte muizen die worden uitgedaagd met splenocyten gezuiverd van spontaan diabetische NOD-muizen.

Bioluminescente monitoring van transplantaatoverleving in een adoptief transfermodel van auto-immuundiabetes bij muizen

Type 1 diabetes is characterized by the autoimmune destruction of the insulin-producing beta cells of the pancreas. A promising treatment for this disease ...

Dit protocol kan helpen om de mechanismen van bescherming tegen auto-immuunaanvallen te begrijpen en therapeutische doelen voor bètacelvervanging bij type één diabetes te identificeren. Het belangrijkste voordeel van deze techniek is de relatief lage kosten, de eenvoud van de celkweek-, transplantatie- en beeldvormingsmethoden, evenals de minimale invasiviteit van de muistechnieken. Personen die nog nooit eerder een staartaderinjectie hebben uitgevoerd, kunnen moeite hebben om de naald in de ader in te brengen.Vraag om een demonstratie door een expert voor uw eerste injectie. Om te beginnen, neem de verdoofde muis en verwijder het haar van de dorsale kant met behulp van een elektrisch scheerapparaat met een beschermer, waardoor ongeveer een centimeter bij twee centimeter van de huid wordt blootgesteld. Breng de geschoren muis terug naar de knockdown-kamer.Breng vóór de transplantatie één muis tegelijk over van de kamer naar een schoon oppervlak dat is uitgerust met een isofluraan neuskegel en leid de kop van de muis voorzichtig in de neuskegel. Veeg het geschoren gebied af met een isopropylalcoholvoorbereidingspad om los haar te verwijderen en de huid te desinfecteren. Trek vervolg

bioluminescent-monitoring-graft-survival-an-adoptive-transfer-model

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

Een methode voor het betrouwbaar enten van luciferase-gemerkte menselijke maligne perifere zenuwschede tumorcellen in de heupzenuw van immunodeficiënte muizen wordt beschreven. Het gebruik van bioluminescentie imaging om een ​​goede invoering van de tumor enten en criteria voor willekeurige scheiding van dieren in studiegroepen aan te tonen worden ook besproken.

Orthotope Xenografting van de Mens Luciferase-label maligne perifere zenuwschede tumorcellen voor In vivo Het testen van de kandidaat-therapeutische middelen

Bioluminescentie Imaging voor beoordeling van immuunreacties na implantatie van Engineered hartweefsel (EHT)

Murine beenmergtransplantatie is een veel gebruikte techniek om immunologische mechanismen voor graft-versus-host ziekte bij mensen bestuderen. De mogelijkheid om T-cel mensenhandel patronen te...

Inductie van Graft-versus-host ziekte en<em&gt; In Vivo</em&gt; T-cel monitoren door gebruik van een MHC-matched muizenmodel

This video demonstrates an orthotopic model of pancreatic cancer that utilizes Matrigel for localized cell delivery and in vivo bioluminescence imaging for non-invasive monitoring of tumor progression. The orthotopic model is suited to both syngeneic and xenograft models and could be used in pre-clinical trials to investigate the impact of novel anti-cancer therapeutics on the growth of the primary pancreatic tumor and metastasis.

Bioluminescent Orthotopic Pancreatic Cancer Mouse Model: A Non-invasive Technique to Monitor Cancer Progression in Mice

This video demonstrates an imaging-based method to visualize transplanted luciferase-expressing beta cells into a non-obese diabetic immunodeficient mouse. The introduction of splenocytes from a diabetic mouse leads to progressive beta cell destruction, visually confirmed by declining luminescence after substrate introduction.

Imaging Transgenic Beta-Cells in an Immunodeficient Mouse Challenged with Diabetic Splenocytes

Source: Clark, A.J., et al. Bioluminescence Imaging of an Immunocompetent Animal Model for Glioblastoma. J. Vis. Exp. (2016)This video demonstrates bioluminescence imaging to track glioblastoma progression in an immunocompetent mouse model, using luciferase-expressing tumor cells and luciferin to quantify tumor growth non-invasively.

Bioluminescence Imaging of an Immunocompetent Mouse Model for Glioblastoma

Beter begrip van alvleesklierkanker biologie is kritisch nodig om de ontwikkeling van betere therapeutische opties om pancreaskanker te behandelen mogelijk te maken. Om aan deze behoefte te pakken, zien we een orthotopic model van pancreaskanker die niet-invasieve monitoring van de progressie van kanker maakt gebruik...

Bioluminescent Orthotope Model van pancreaskanker Progression

GL261-glioomcellen bieden een bruikbaar immunocompetent diermodel van glioblastoom. De doelen van dit protocol zijn om de juiste technieken te demonstreren voor het monitoren van intracraniële tumorgroei met behulp van in vivo bioluminescentie-beeldvorming, en om de bruikbaarheid van luciferase-gemodificeerde GL261-cellen te verifiëren voor het bestuderen van tumorimmunologie en immunotherapeutische benaderingen voor de behandeling van glioblastoom.

Bioluminescentie beeldvorming van een Immunocompetente diermodel voor Glioblastoma

Hier gebruiken we bioluminescente, X-ray, en het positron-emissie tomografie/berekend tomography imaging te bestuderen hoe remmende mTOR activiteit beïnvloedt het beenmerg-geaccepteerd myeloma tumoren in een xenograft model. Dit zorgt voor fysiologisch relevante, niet-invasieve en multimodale analyses van het effect van de anti-myeloma van therapieën gericht op beenmerg-geaccepteerd myeloma tumoren in vivo.

Multimodale bioluminescente en positronisch-emissie tomografie/computationele Tomography Imaging van Multiple Myeloma beenmerg Xenografts in NOG muizen

Graft-versus-host ziekte is een belangrijke complicatie na allogene beenmergtransplantatie. Dendritische cellen spelen een cruciale rol in de pathogenese van graft-versus-host ziekte. Het huidige artikel beschrijft een nieuw beenmergtransplantatieplatform om de rol van dendritische cellen te onderzoeken bij de ontwikkeling van graft-versus-host ziekte en het graft-versus-leukemie-effect.

Beenmergtransplantatie Platform om de rol van dendritische cellen in graft-versus-host ziekte te onderzoeken

Het doel van dit protocol is om continu de dynamiek van het menselijke alvleesklier eilandje engraftment proces en de bijdragende gastheer versus donorcellen te controleren. Dit wordt bereikt door het transplanteren van menselijke eilandjes in de voorste kamer van het oog (ACE) van een NOD. (Cg)-Gt(ROSA)26Sortm4-Rag2-/-muisontvanger gevolgd door herhaalde 2-foton beeldvorming.

Longitudinale In Vivo Beeldvorming en kwantificering van menselijke alvleesklier eilandjes en bijdragende gastheercellen in de oogkamer van het voorste oog

Leer een minimaal invasieve methode voor celtransplantatie en bioluminescente beeldvorming bij NOD-SCID muizen. Deze techniek helpt onderzoekers bij het bestuderen van auto-immuunreacties en therapeutische doelwitten voor diabetes type 1.

Bioluminescente monitoring van transplantaatoverleving in een adoptief transfermodel van auto-immuundiabetes bij muizen

Meer video's verkennen