Name: Inductie van parodontitis via een combinatie van ligatuur en lipopolysaccharide-injectie in een rattenmodel (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-02-17T14:10:00.000+00:00
Duration: 6 min 14 s
Description: Leer een rattenmodel voor parodontitis opzetten met ligatuur en lipopolysaccharide-injecties. Deze methode induceert snel ziekteprogressie en alveolaire botresorptie voor evaluatie van behandelingen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd ondersteund door Fundació Universitat-Empresa de les Illes Balears (Proof of concept call 2020), door het Instituto de Salud Carlos III, Ministerio de Economía y Competividad, medegefinancierd door het ESF Europees Sociaal Fonds en het EFRO Europees Fonds voor Regionale Ontwikkeling (contract met M.M.B; FI18/00104) en door de Direcció General d'Investigació, Conselleria d'Investigació, Govern Balear (contract met M.M.F.C; FPI/040/2020). De auteurs bedanken Dr. Anna Tomás en Maria Tortosa voor hun hulp bij de experimentele chirurgie en het platform van IdISBa. Tot slot, dank aan ADEMA School of Dentistry voor de toegang tot de CBCT-scanner.

OPMERKING: Het experimentele protocol van de studie werd goedgekeurd door het Ethisch Comité voor dierproeven van het Gezondheidsonderzoeksinstituut van de Balearen (CEEA-UIB; referentienummer 163/03/21).
1. Dieranesthesie en procedurevoorbereiding
<ol><li>Steriliseer alle chirurgische instrumenten (aluminium mondgags, dental explorer, diamantlans, chirurgische schaar, microchirurgische tang, een micronaaldhouder, een hollenbackcarver, een periostale microchirurgische lift en microchirurgische schaar) (5 min bij 135 °C) vóór de operatie.</li>
	<li>Bereid alle oplossingen voor die nodig zijn voor de procedure in steriele omstandigheden, zoals beschreven:<ol><li>Bereid een mix van Ketamine (60 mg / ml) en Xylazine (8 mg / ml) door 1,6 ml ketamine te mengen met 1 ml Xylazine verdund in fosfaatbufferoplossing (PBS) / zoutoplossing. Bewaar de bouillon bij 4 °C.</li>
		<li>Verdun atipamezole tot een eindconcentratie van 0,25 mg/ml in PBS/zoutoplossing. Bewaar de bouillon bij 4 °C.</li>
		<li>Verdun Buprenorfine tot een eindconcentratie van 0,03 mg/ml in PBS/zoutoplossing. Bewaar de bouillon bij 4 °C.</li>
		<li>Bereid 1 ml Pg-LPS (1 mg/ml) in een steriele zoutoplossing. Bewaar de bouillon bij -20 °C.</li>
	</ol></li>
	<li>Gebruik voor het experiment vrouwelijke en mannelijke Wistar-ratten, 12 weken oud en met een gewicht van 210-350 g op het moment van de operatie. Houd de dieren gehuisvest in groepen onder de juiste omgeving en constante omstandigheden (20-24 °C, 12 uur per dag licht-donker cycli), met voedsel en standaard water, aangeboden ad libitum.</li>
	<li>Om anesthesie te induceren, weegt u de rat en dient u het mengsel van ketamine / xylazine toe in een concentratie van 80/10 mg / kg intraperitoneaal (IP), met behulp van een 25 G steriele hypodermische naald en 1 ml spuit.</li>
	<li>Nadat de rat is verdoofd, plaatst u het dier op zijn rug op een verwarmd chirurgisch platform; Bedek tijdens de procedure het lichaam van het dier om warmteverlies te voorkomen. OPMERKING: De anesthesiediepte wordt beoordeeld door het verlies van de pedaalreflex tijdens de procedure en door vitale functies te controleren. Gebruik indien nodig een kleine neuskegel om de anesthesie met 2% isofluraan in 100% zuurstof te behouden. Breng steriele oftalmische zalf aan op beide ogen na anesthesie-inductie om de hoornvliezen te beschermen en uitdroging te voorkomen.</li>
	<li>Dien tijdens de procedures 100% zuurstof toe met behulp van een kleine neuskegel en controleer de polsslag en zuurstofverzadiging door pulsoximetrie. OPMERKING: Als de zuurstofverzadiging en polsslag onder respectievelijk 95% en 190 bpm dalen, stop dan de procedure en plaats het dier in de laterale decubituspositie totdat de normale waarden zijn bereikt.</li>
	<li>Open de rattenmond met behulp van een aluminium mondgag rond de snijtanden (boven en onder), trek de tong ermee in en stabiliseer de maxilla en onderkaak in een open, comfortabele werkpositie, waardoor toegang tot mandibulaire kiezen mogelijk is. OPMERKING: Als het dier in laterale decubitus moet worden geplaatst, verwijder dan de mondgag voordat u van positie verandert om herstel te bevorderen. Zodra het dier is verdoofd, verzamelt u gingivale creviculaire vloeistof (GCF) vóór de operatie (monster in basale omstandigheden) (dag 0).</li>
	<li>GCF verzamelen zoals beschreven in de volgende stappen:<ol><li>Plaats het dier op zijn rug op een chirurgisch platform en stabiliseer de maxilla en onderkaak in een open positie met aluminium mondgags.</li>
		<li>Verzamel GCF met in totaal vier (twee voor elk M1) absorberend papierpunt nº 30 (0,03 cm diameter x 3 cm lengte), door het in de gingivale spleet (ruimte tussen gingivaal epitheel en aangrenzend glazuur) rond het mesio-palatale van de M1 in te brengen tot een lichte weerstand. Houd het papierpunt in totaal 30 s op dezelfde positie voordat u het onmiddellijk verwijdert.</li>
		<li>Breng na het verzamelen het papierpunt onmiddellijk over in een plastic injectieflacon en bewaar bij -80 °C tot de testprestaties.</li>
	</ol></li>
</ol>2. Retentieve ligatuurtechniek en intragingivale Pg -LPS-injectie
OPMERKING: Het ligatuurmodel is gemaakt (dag 0) door een steriele gevlochten zijden ligatuur (5/0) bilateraal rond de M1 in de gingivale sulcus te plaatsen met behulp van microchirurgische instrumenten en deze vast te zetten met de knopen van de chirurg op het palatale oppervlak. De gebruikte microchirurgische instrumenten waren een microchirurgische tang, een micronaaldhouder, een hollenbackcarver, een periostale microchirurgische lift en een microchirurgische schaar. Er werden ook chirurgische loepen met een LED-lichtbron gebruikt (3,6x vergroting).
<ol><li>Plaats de distale staart van de hechting aan de palatale zijde van het gebit en plaats het proximale segment tussen het contact van M1 en tweede maxillaire kiezen (M2).</li>
	<li>Gebruik de periostale microchirurgische lift om de hechtdraad in de sulcus in te brengen. Wikkel de ligatuur heel voorzichtig rond het buccale oppervlak van de M1, omdat de weefsels op dit niveau een smalle zone van aangehechte gingiva vertonen. Wat het palatale aspect betreft, moet u ervoor zorgen dat de hechtdraad aan beide uiteinden wordt aangespannen om ervoor te zorgen dat deze in de gingivale sulcus wordt gedreven. OPMERKING: Als weerstand wordt waargenomen bij het inbrengen van de hechtdraad tussen de M1 en de M2, kan het contact enigszins worden geopend met behulp van een tandheelkundige ontdekkingsreiziger en diamantlansvormige bur.</li>
	<li>Bind de uiteinden van de hechting vast met de knoop van een chirurg en knip de staarten zo kort mogelijk in. Steek de knoop in de sulcus. OPMERKING: Tips van chirurgische instrumenten kunnen oraal trauma en bloedingen veroorzaken. Bereid kleine stukjes gaas of een wattenstaafje voor om bloed uit de mondholte te verwijderen en druk uit te oefenen om een bloeding te stoppen. Zorgvuldig beheer van zacht weefsel met een microchirurgische aanpak minimaliseert chirurgische complicaties en leidt tot minder weefseltrauma.</li>
	<li>Injecteer na ligatuurpositionering 40 μL Pg-LPS in steriele zoutoplossing met een steriele hypodermische naald van 25 G en een spuit van 1 ml in het subgingivale weefsel (tussen de wortel of hals van een tand en de tandvleesrand) aan de mesio-palatale zijde van de M1 bilateraal (dag 0).</li>
</ol>3. Einde van de procedure
<ol><li>Na ligatiepositionering en Pg-LPS-toepassing, laat de rat los uit de chirurgische toestand en plaats hem in een schone individuele kooi onder een warmtelamp.</li>
	<li>Injecteer de antagonist Atipamezole (0,5 mg/kg subcutaan (SC)) met een steriele injectienaald van 25 G en een spuit van 1 ml.</li>
	<li>Voor pijnverlichting, injecteer 0,03 mg / kg Buprenorfine, SC.</li>
	<li>Volg het herstel van het dier totdat de effecten van de operatie volledig zijn omgekeerd. Plaats elke rat individueel in de juiste omgeving onder constante omstandigheden (20-24 °C, 12 uur per dag licht-donkercycli). Bied voedsel en gedeïoniseerd water ad libitum aan.</li>
	<li>Weeg de dieren gedurende de eerste 2 dagen na de procedure en injecteer Buprenorfine SC tweemaal daags voor pijnverlichting. OPMERKING: Buprenorfine kan worden toegediend voordat de procedure wordt gestart om het opwindeffect te elimineren.</li>
	<li>Controleer gedurende de tijd van het experiment de dieren op gewicht en algemene gedragsbeoordeling een of twee keer per week.</li>
</ol>4. Follow-up na de procedure
OPMERKING: De inductie van PD werd gedurende 14 dagen gehandhaafd om de accumulatie van biofilm van bacteriën en de daaruit voortvloeiende ontsteking te bevorderen. De ligaturen moeten worden onderzocht en aangepast en Pg-LPS wordt drie keer per week geïnjecteerd (dag 2, dag 4, dag 6, dag 8, dag 10 en dag 12).
<ol><li>Onderzoek en pas de ligatuur (dag 2, dag 4, dag 6, dag 8, dag 10 en dag 12) als volgt aan:<ol><li>Verdoving met 2% isofluraan in 100% zuurstof met behulp van een anesthesie-inductiekamer.</li>
		<li>Nadat de rat is verdoofd, plaatst u het dier op zijn rug en gebruikt u tijdens de procedure een kleine neuskegel met 1% isofluraan in 100% zuurstof voor onderhoud van de anesthesie van het dier.</li>
		<li>Open de rattenmond met behulp van de aluminium mondgag rond de snijtanden (boven en onder), trek de tong ermee in en stabiliseer de maxilla en onderkaak in een open, comfortabele werkpositie, waardoor toegang tot ligaturen mogelijk is.</li>
		<li>Span de ligaturen tegen de gingiva aan met behulp van een periostale microchirurgische lift en zorg ervoor dat de hechting van de ligaturen wordt ingebracht, waardoor ontstekingen rond de gingiva ontstaan. OPMERKING: Het is mogelijk dat 7-10 dagen na de operatie ligaturen verloren gaan. Als dit gebeurt, volgt u het protocol zoals uitgelegd voor de injectie van Pg-LPS (stap 2.4).</li>
	</ol></li>
	<li>Injecteer na de ligatuuraanpassing bilateraal 40 μl Pg-LPS met een steriele hypodermische naald van 25 G en een spuit van 1 ml in het subgingivale weefsel aan de mesio-palatale zijde van de M1 (dag 2, dag 4, dag 6, dag 8, dag 10 en dag 12).</li>
	<li>Verwijder de neuskegel voor anesthesie en plaats de rat in zijn kooi. Controleer het herstel van het dier totdat de effecten van de anesthesie volledig zijn omgekeerd.</li>
</ol>5. Opoffering en analyse van dieren
OPMERKING: Er zijn verschillende opties voor het evalueren van de progressie van PD. Hier bestaat de beschreven analyse uit een evaluatie van pro-inflammatoire cytokines bij de gingivale creviculaire vloeistof (GCF) en een evaluatie van het verlies van alveolair bot.
<ol><li>Offer op dag 14 van het onderzoek (dag 14) de dieren met CO2 in een kooldioxidekamer. Een verplaatsingspercentage van 30% tot 70% van het kamervolume / min wordt aanbevolen voor knaagdieren. OPMERKING: Gebrek aan reactie van dieren op pedaalreflex en afwezigheid van vitale functies moeten worden geverifieerd om euthanasie te bevestigen.</li>
	<li>GCF verzamelen zoals beschreven in de volgende stappen: OPMERKING: GCF wordt verzameld vóór PD-inductie (vóór de operatie) (dag 0) en na PD-inductie (na opoffering) (dag 14).<ol><li>Plaats het dier op zijn rug op een chirurgisch platform en stabiliseer de maxilla en onderkaak in een open positie met aluminium mondgags.</li>
		<li>Verzamel de GCF met adsorberende papierpunt nº 30 (0,03 cm diameter x 3 cm lengte) door deze in de tandvleesspleet rond het mesio-palatale van de M1 te plaatsen tot een lichte weerstand. Houd het papierpunt in totaal 30 s op dezelfde positie voordat u het onmiddellijk verwijdert.</li>
		<li>Breng na het verzamelen het papierpunt onmiddellijk over in een plastic injectieflacon en bewaar bij -80 °C tot de testprestaties.</li>
	</ol></li>
	<li>Om eiwitten binnen de GCF te evalueren, bereidt u de volgende oplossingen voor en volgt u de stappen van de elutiemethode zoals beschreven: OPMERKING: IL-1β wordt geëvalueerd op de GCF (dag 14) met behulp van een immunoassay, volgens het protocol van de fabrikant.<ol><li>Bereid de elutiebuffer vers voor en houd deze gedurende het hele extractieproces op ijs om de proteaseactiviteit te remmen.</li>
		<li>Bereid alle oplossingen voor die nodig zijn voor de elutiebuffer zoals beschreven:<ol><li>Bereid 1 ml aprotina (1 mg / ml) in ultrapuur water.</li>
			<li>Bereid 10 ml fenylmethylsulfonylfluoride (PMSF) (200 mM) in methanol.</li>
			<li>Voeg 125 μL PMSF en 250 μL Aprotinin toe aan 24,5 ml PBS-oplossing (pH = 7,4) om de elutiebuffer te bereiden.</li>
		</ol></li>
		<li>Los één commerciële fosfataseremmertablet op met 10 ml vers bereide elutiebuffer gedurende 10 minuten onder roeren bij 4 °C. OPMERKING: De duur van GCF-elutie is beperkt; Gebruik onmiddellijk voor centrifugaties na toevoeging van fosfataseremmertablet binnen de eerste 30 minuten.</li>
		<li>Voeg na het toevoegen van de fosfataseremmer 11 μL volledige elutiebuffer rechtstreeks toe aan de buis met de papieren punten.</li>
		<li>Centrifugeer de buis op 452 x g gedurende 5 minuten bij 4 °C.</li>
		<li>Breng de geëlueerde inhoud over in een nieuwe plastic injectieflacon. Herhaal dit proces nog vier keer om een totaal volume van 50 μL te verkrijgen.</li>
		<li>Voeg na de laatste centrifugatie een totaal volume van 60 μL rechtstreeks toe aan het papierpunt en centrifugeer nog een laatste keer bij 452 x g gedurende 5 minuten bij 4 °C.</li>
		<li>Gebruik het vereiste volume geëlueerd voor eiwitevaluatie.</li>
	</ol></li>
	<li>Na euthanasie en GCF-verzameling, met behulp van een chirurgische schaar, knipt u de superieure kaak van de ratten uit. Probeer het masker van de rat af te pellen en laat zo min mogelijk zacht weefsel achter.</li>
	<li>Plaats de kaak in het microscoopstadium voor visualisatie en maak een foto met de gewenste vergroting.</li>
	<li>Plaats de kaak direct in 4% paraformaldehyde (PFA) verdund in PBS. Ververs twee keer per week met nieuwe PFA gedurende 12 dagen voor een volledige fixatie. LET OP: Stappen met PFA moeten worden uitgevoerd in een zuurkast volgens de aanbevelingen van het veiligheidsinformatieblad.</li>
	<li>Evalueer na volledige kaakfixatie het botverlies met behulp van een cone-beam computertomografie (CBCT) scanner, als volgt:<ol><li>Open de pc.</li>
		<li>Open het CBCT-analyseprogramma.</li>
		<li>Selecteer Scanprotocol > Scanmodus voor kunstgebit.</li>
		<li>Selecteer Field of View (FOV) > ( 11x8) HIRes ( 90 kV spanning en 3 mA stroom).</li>
		<li>Plaats de vaste bovenste maxilla van de ratten in het portaal.</li>
		<li>Klik op Volgende.</li>
		<li>Klik op de röntgenafvurende knop (druk op de röntgenafstandsbediening om de emissie uit te voeren en houd deze gedurende de gehele duur van de scan ingedrukt).</li>
		<li>Verplaats indien nodig de bovenste maxilla in het midden van het frontale vlak door op de bedieningsknop te drukken en klik vervolgens op de röntgenafvurende knop (druk op de röntgenafstandsbediening om de emissie te maken en houd deze gedurende de gehele duur van de scan ingedrukt).</li>
		<li>Klik op Volgende.</li>
		<li>Klik op de röntgenafvurende knop (druk op de röntgenafstandsbediening om de emissie uit te voeren en houd deze gedurende de gehele duur van de scan ingedrukt).</li>
		<li>Verplaats indien nodig de prothese in het midden van het sagittale vlak door op de bedieningsknop te drukken en klik vervolgens op de röntgenafvurenknop (druk op de röntgenafstandsbediening om de emissie te maken en houd deze gedurende de gehele duur van de scan ingedrukt).</li>
		<li>Klik op Volgende.</li>
		<li>Klik op de knop Start (druk op de röntgenafstandsbediening om de uitzending uit te voeren en houd deze gedurende de gehele duur van het examen ingedrukt). Wacht totdat u een verwerkingsbericht ontvangt en volg de weergegeven instructies.</li>
		<li>Er verschijnt een vensterweergave. Stel het grijs in op 65% en klik op Toepassen.</li>
		<li>Om de scan op te slaan, klikt u op Bestand en slaat u deze op in DICOM-indeling. Klik vervolgens op Alle afbeeldingen en selecteer in het DICOM-exportselectievenster alle weergegeven parameters (initiële afbeelding, originele axiale, opnieuw geformatteerde axiale, multiplanaire) en selecteer vooraf gedefinieerd type.</li>
	</ol></li>
	<li>Verwerk de tweedimensionale en sagittale representatieve beelden van de maxillaire kiezen met behulp van een analyseprogramma, als volgt:<ol><li>Open de software.</li>
		<li>Klik op Bestand en openen en selecteer vervolgens de map met afbeeldingen in DICOM-indeling en klik op Openen.</li>
		<li>Wacht tot het venster "Converteren naar 8-bits" verschijnt, selecteer het bereik van 0 tot 6.000 en klik op OK.</li>
		<li>Klik op Raw-afbeeldingen.</li>
		<li>Definieer de boven- en onderkant van de selectie om het interessegebied te beperken. Zoek naar de eerste en laatste afbeelding waar alveolaire bone wordt weergegeven en selecteer deze met de bovenkant van de selectie en de onderkant van de selectieopdrachten . OPMERKING: Representatieve tweedimensionale afbeeldingen van het alveolaire bot van de kiezen kunnen worden geëxporteerd, zoals in figuur 3A, B.</li>
		<li>Voor sagittale representatieve afbeeldingen klikt u op De profielbalk in-/uitschakelen.</li>
		<li>Teken een sagittale lijn in het midden van het gehemelte en klik op Reslice-model. Bepaal parameters voor het afbakenen van het gewenste gebied (segmentafstand: 1; aantal segmenten: 100) en klik op OK. Wacht tot het relicing-model is afgelopen. Klik ten slotte op Opnieuw gesneden afbeeldingen opslaan. OPMERKING: Representatieve sagittale beelden van het alveolaire bot van de kiezen kunnen worden geëxporteerd, zoals in figuur 3C, D.</li>
	</ol></li>
</ol>

<ol><li>Carvalho, J. D. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+citrus+flavonoid+supplementation+on+inflammation+in+lipopolysaccharide-induced+periodontal+disease+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Food+and+Function%22%5BJournal%5D)">Impact of citrus flavonoid supplementation on inflammation in lipopolysaccharide-induced periodontal disease in mice.</a> Food and Function. 12 (11), 5007-5017 (2021).</li>
<li>Nazir, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+periodontal+disease%2C+its+association+with+systemic+diseases+and+prevention%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Health+Sciences%22%5BJournal%5D)">Prevalence of periodontal disease, its association with systemic diseases and prevention.</a> International Journal of Health Sciences. 1 (2), 72-80 (2017).</li>
<li>Dumitrescu, A. L., El-Aleem, S. A., Morales-Aza, B., Donaldson, L. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+model+of+periodontitis+in+the+rat%3A+Effect+of+lipopolysaccharide+on+bone+resorption%2C+osteoclast+activity%2C+and+local+peptidergic+innervation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Periodontology%22%5BJournal%5D)">A model of periodontitis in the rat: Effect of lipopolysaccharide on bone resorption, osteoclast activity, and local peptidergic innervation.</a> Journal of Clinical Periodontology. 31 (8), 596-603 (2004).</li>
<li>Wang, H. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preventive+effects+of+the+novel+antimicrobial+peptide+Nal-P-113+in+a+rat+Periodontitis+model+by+limiting+the+growth+of+Porphyromonas+gingivalis+and+modulating+IL-1%CE%B2+and+TNF-%CE%B1+production%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Complementary+and+Alternative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Preventive effects of the novel antimicrobial peptide Nal-P-113 in a rat Periodontitis model by limiting the growth of Porphyromonas gingivalis and modulating IL-1β and TNF-α production.</a> BMC Complementary and Alternative Medicine. 17 (1), 1-10 (2017).</li>
<li>Guan, J., Zhang, D., Wang, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identifying+periodontitis+risk+factors+through+a+retrospective+analysis+of+80+cases%5BTitle%5D)+AND+%22Pakistan+Journal+of+Medical+Sciences%22%5BJournal%5D)">Identifying periodontitis risk factors through a retrospective analysis of 80 cases.</a> Pakistan Journal of Medical Sciences. 38 (1), 293-296 (2021).</li>
<li>Khajuria, D. K., Patil, O. N., Karasik, D., Razdan, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+evaluation+of+novel+biodegradable+chitosan+based+metformin+intrapocket+dental+film+for+the+management+of+periodontitis+and+alveolar+bone+loss+in+a+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Oral+Biology%22%5BJournal%5D)">Development and evaluation of novel biodegradable chitosan based metformin intrapocket dental film for the management of periodontitis and alveolar bone loss in a rat model.</a> Archives of Oral Biology. 85, 120-129 (2018).</li>
<li>Nishida, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bone+resorption+and+local+interleukin-1alpha+and+interleukin-1beta+synthesis+induced+by+Actinobacillus+actinomycetemcomitans+and+Porphyromonas+gingivalis+lipopolysaccharide%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Periodontal+Research%22%5BJournal%5D)">Bone resorption and local interleukin-1alpha and interleukin-1beta synthesis induced by Actinobacillus actinomycetemcomitans and Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide.</a> Journal of Periodontal Research. 36 (1), 1-8 (2001).</li>
<li>Graves, D. T., Kang, J., Andriankaja, O., Wada, K., Rossa, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+to+study+host-bacteria+interactions+involved+in+periodontitis%5BTitle%5D)+AND+%22Bone%22%5BJournal%5D)">Animal models to study host-bacteria interactions involved in periodontitis.</a> Bone. 23 (1), 1-7 (2008).</li>
<li>Struillou, X., Boutigny, H., Soueidan, A., Layrolle, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+animal+models+in+periodontology%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22The+Open+Dentistry+Journal%22%5BJournal%5D)">Experimental animal models in periodontology: a review.</a> The Open Dentistry Journal. 4 (1), 37-47 (2010).</li>
<li>Mustafa, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+periodontal+disease+via+retentive+ligature%2C+lipopolysaccharide+injection%2C+and+their+combination+in+a+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Polish+Journal+of+Veterinary+Sciences%22%5BJournal%5D)">Induction of periodontal disease via retentive ligature, lipopolysaccharide injection, and their combination in a rat model.</a> Polish Journal of Veterinary Sciences. 24 (3), 365-373 (2021).</li>
<li>Chadwick, J. W., Glogauer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Robust+ligature-induced+model+of+murine+periodontitis+for+the+evaluation+of+oral+neutrophils%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Robust ligature-induced model of murine periodontitis for the evaluation of oral neutrophils.</a> Journal of Visualized Experiments. 2020 (155), 6-13 (2019).</li>
<li>Cheng, R., Wu, Z., Li, M., Shao, M., Hu, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interleukin-1%CE%B2+is+a+potential+therapeutic+target+for+periodontitis%3A+a+narrative+review%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Oral+Science%22%5BJournal%5D)">Interleukin-1β is a potential therapeutic target for periodontitis: a narrative review.</a> International Journal of Oral Science. 12 (1), 1-9 (2020).</li>
<li>Abe, T., Hajishengallis, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+the+ligature-induced+periodontitis+model+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunological+Methods%22%5BJournal%5D)">Optimization of the ligature-induced periodontitis model in mice.</a> Journal of Immunological Methods. 394 (1-2), 49-54 (2013).</li>
<li>Jeong-Hyon, K., Bon-Hyuk, G., Sang-Soo, N., Yeon-Cheol, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+rat+models+of+periodontitis+treated+with+natural+extracts%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Traditional+Chinese+Medical+Sciences%22%5BJournal%5D)">A review of rat models of periodontitis treated with natural extracts.</a> Journal of Traditional Chinese Medical Sciences. 7 (2), 95-103 (2020).</li>
<li>Marchesan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+experimental+murine+model+to+study+periodontitis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">An experimental murine model to study periodontitis.</a> Nature Protocols. 13 (10), 2247-2267 (2018).</li>
<li>Lin, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+ligature-induced+periodontitis+in+mice+to+explore+the+molecular+mechanism+of+periodontal+disease%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Application of ligature-induced periodontitis in mice to explore the molecular mechanism of periodontal disease.</a> International Journal of Molecular Sciences. 22 (16), 8900(2021).</li>
<li>Irie, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+micro-computed+tomography+for+bone+evaluation+in+dentistry%5BTitle%5D)+AND+%22Brazilian+Dental+Journal%22%5BJournal%5D)">Use of micro-computed tomography for bone evaluation in dentistry.</a> Brazilian Dental Journal. 29 (3), 227-238 (2018).</li>
<li>Haas, L. F., Zimmermann, G. S., De Luca Canto, G., Flores-Mir, C., Corrêa, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Precision+of+cone+beam+CT+to+assess+periodontal+bone+defects%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Dentomaxillofacial+Radiology%22%5BJournal%5D)">Precision of cone beam CT to assess periodontal bone defects: a systematic review and meta-analysis.</a> Dentomaxillofacial Radiology. 47 (2), 20170084(2018).</li>
<li>Kamburoğlu, K., Ereş, G., Akgün, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Qualitative+and+quantitative+assessment+of+alveolar+bone+destruction+in+adult+rats+using+CBCT%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Veterinary+Dentistry%22%5BJournal%5D)">Qualitative and quantitative assessment of alveolar bone destruction in adult rats using CBCT.</a> Journal of Veterinary Dentistry. 36 (4), 245-250 (2019).</li>
<li>Sousa Melo, S. L., Rovaris, K., Javaheri, A. M., de Rezen de Barbosa, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cone-beam+computed+tomography+%28CBCT%29+imaging+for+the+assessment+of+periodontal+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Oral+Health+Reports%22%5BJournal%5D)">Cone-beam computed tomography (CBCT) imaging for the assessment of periodontal disease.</a> Current Oral Health Reports. 7 (4), 376-380 (2020).</li>
</ol>

De auteurs verklaren geen belangenverstrengeling.

Deze methode beschrijft de inductie van PD bij ratten na een gecombineerde techniek van Pg-LPS-injecties en ligatuurplaatsing rond de M1, waaruit blijkt dat significante veranderingen in de parodontale weefsels en het alveolaire bot binnen 14 dagen na deze methode kunnen worden geïnduceerd.
Tijdens deze procedure moet aandacht worden besteed aan verschillende kritieke stappen. Tijdens de anesthesie en de voorbereiding van de procedure is het beoordelen van de juiste anesthesie tijdens...

Parodontitis (PD) is de zesde meest voorkomende volksgezondheidsaandoening wereldwijd, die ongeveer 11% van de totale bevolking treft, een geavanceerde, onomkeerbare en destructieve vorm van parodontitis 1,2. PD is een ontstekingsproces dat de gingivale en parodontale weefsels aantast, wat resulteert in gingivarecessie, apicale migratie van het junctionele epitheel met pocketontwikkeling en het verlies van alveolair bot3. Bovendien wordt PD geassocieerd met verschillende systemische ziekten, waaronder hart- en vaatziekten, obesitas, diabetes en reumatoïde artritis, waarvoor omgevings- en gastheerspecifieke factoren een belangrijke rol spelen 4,5.
Vandaar dat PD een multifactoriële ziekte is die voornamelijk wordt geïnitieerd door de accumulatie van microbiële plaque - als gevolg van dysbiose van microbiële gemeenschappen - en door een overdreven immuunrespons van de gastheer op parodontale pathogenen, wat leidt tot de afbraak van parodontaal weefsel 4,6. Onder verschillende parodontale bacteriën is de gramnegatieve anaerobe bacterie Porphyromonas gingivalis een van de belangrijkste pathogenen in PD4. P. gingivalis bevat een complex lipopolysaccharide (LPS) in de wanden, een molecuul waarvan bekend is dat het polymorfonucleaire leukocyteninfiltratie en vasculaire dilatatie induceert in ontstoken parodontale weefsels7. Dit resulteert in de productie van ontstekingsmediatoren, zoals interleukine 1 (IL-1), IL-6 en IL-8, tumornecrosefactor (TNF) of prostaglandinen, met een daaropvolgende osteoclastische activering en botresorptie, wat leidt tot weefselvernietiging en uiteindelijk tandverlies3.
Een van de verschillende voordelen van diermodellen is het vermogen om cellulaire complexiteiten na te bootsen zoals bij mensen, of om nauwkeuriger te zijn dan in vitro studies, die worden uitgevoerd op plastic oppervlakken met beperkte celtypen8. Voor het experimenteel modelleren van PD in vivo zijn verschillende diersoorten gebruikt, zoals niet-menselijke primaten, honden, varkens, fretten, konijnen, muizen en ratten9. Ratten zijn echter het meest uitgebreid bestudeerde diermodel voor de pathogenese van PD omdat ze goedkoop en gemakkelijk te hanteren zijn10. Hun tandtandvlees heeft vergelijkbare structurele kenmerken als menselijk tandvleesweefsel, met een ondiepe gingivale sulcus en junctioneel epitheel bevestigd aan het tandoppervlak. Bovendien vergemakkelijkt het junctionele epitheel, net als bij mensen, de doorgang van bacteriële, vreemde materialen en exsudaten uit ontstekingscellen 9.
Een van de meest gerapporteerde experimentele modellen van PD-inductie bij ratten is de plaatsing van ligaturen rond de tanden, wat technisch uitdagend maar betrouwbaar is10. De ligatuurplaatsing vergemakkelijkt tandplak en bacteriële accumulatie, waardoor een dysbiose in de gingivale sulci ontstaat, die parodontale weefselontsteking en -vernietiging veroorzaakt11. Verlies van parodontale aanhechting en resorptie van alveolair bot kon in 7 dagen optreden bij deze rat model8.
Een ander diermodel voor PD bestaat uit de injectie van LPS in het tandvleesweefsel. Hierdoor worden osteoclastogenese en botverlies gestimuleerd. De histopathologische kenmerken van dit model zijn vergelijkbaar met door de mens vastgestelde PD, gekenmerkt door hogere niveaus van pro-inflammatoire cytokines, collageenafbraak en alveolaire botresorptie 6,8.
Het doel van deze studie was dus om een eenvoudig rattenmodel van experimentele PD te beschrijven op basis van de technieken van P. gingivalis-LPS (Pg-LPS) injecties, gecombineerd met ligatuurplaatsing rond de eerste maxillaire kiezen (M1). Dit is een model met vergelijkbare kenmerken als die waargenomen bij menselijke PD-ziekte, die kan worden gebruikt in de studie van ziekteprogressiemechanismen en toekomstige mogelijke behandelingen.

<table><tbody><tr><td>Adsorbent paper point n&ordm;30&nbsp;</td><td>Proclinc</td><td>8187</td><td></td></tr><tr><td>Aprotinine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A1153</td><td></td></tr><tr><td>Atipamezole</td><td>Dechra</td><td>573751.5</td><td>Revanzol 5 mg/mL</td></tr><tr><td>Gevlochten zijden ligatuur (5/0)&nbsp;</td><td>Laboratorio Arago Sl</td><td>613112</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfine&nbsp;</td><td>Richter pharma</td><td>578816.6</td><td>Bupaq 0.3 mg/mL</td></tr><tr><td>Cone-beam computed tomografie (CBCT) Scanner&nbsp;</td><td>MyRay</td><td>hyperion X9</td><td>Model Hyperion X9</td></tr><tr><td>CTAn software</td><td>SkyScan</td><td></td><td>Versie 1.13.4.0</td></tr><tr><td>Tandheelkundig explorer&nbsp;</td><td>Proclinc</td><td>99743</td><td></td></tr><tr><td>Diamanten lancetvormige slijpsteen&nbsp;</td><td>Dentaltix</td><td>IT21517</td><td></td></tr><tr><td>Dieet voor voedingsonderhoud</td><td>Sodispain research</td><td>ROD14&nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Verwarmd chirurgisch platform</td><td>PetSavers</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Hollenback mes</td><td>Hu-FRIEDY&nbsp;</td><td>HF45234</td><td></td></tr><tr><td>Hypodermische naald&nbsp;&nbsp;</td><td>BD&nbsp;</td><td>300600</td><td>25G X 5/8&rdquo; - 0,5 X 16 MM</td></tr><tr><td>Isofluraan&nbsp;</td><td>Karizoo</td><td></td><td>Isoflutek 1000mg/g</td></tr><tr><td>Ketamine&nbsp;&nbsp;</td><td>Dechra</td><td>581140.6</td><td>Anesketin 100 mg/mL</td></tr><tr><td>Lipopolysaccharide&nbsp; afgeleid van P.Gingivalis&nbsp;</td><td>InvivoGen</td><td>TLRL-PGLPS</td><td></td></tr><tr><td>Methanol</td><td>Fisher Scientific</td><td>M/4000/PB08</td><td></td></tr><tr><td>Micro naald holter</td><td>Fehling Surgical Instruments</td><td>KOT-6</td><td></td></tr><tr><td>Microchirurgische pincet</td><td>KLS Martin</td><td>12-384-06-07</td><td></td></tr><tr><td>microchirurgische schaar&nbsp;</td><td>S&amp;T microsurgical instruments</td><td>SDC-15 RV</td><td></td></tr><tr><td>Monitor iMEC 8 Vet</td><td>Mindray&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Multiplex bead immunoassay</td><td>Procartaplex, Thermo fisher Scientific</td><td>PPX-05</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldehyde (PFA)&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>8187151000</td><td></td></tr><tr><td>Periostale microchirurgische elevator&nbsp;</td><td>Dentaltix</td><td>CU19112468</td><td></td></tr><tr><td>Fenylmethylsulfonylfluoride (PMSF)&nbsp;</td><td>Roche</td><td>10837091001</td><td></td></tr><tr><td>Fosfaat buffer oplossing (PBS)</td><td>Capricorn Scientific</td><td>PBS-1A</td><td></td></tr><tr><td>PhosSTOP&nbsp;</td><td>Roche</td><td>4906845001</td><td>Commerciële fosfatase remmer tablet&nbsp;</td></tr><tr><td>Kunststof injectieflacon</td><td>SPL Lifesciencies</td><td>60015</td><td>1.5mL</td></tr><tr><td>Zoutoplossing</td><td>Cinfa</td><td>204024.3</td><td></td></tr><tr><td>Stereo Microscoop&nbsp;</td><td>Zeiss</td><td></td><td>Model SteREO Discovery.V12</td></tr><tr><td>Chirurgische loep met led licht</td><td>Zeiss</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Chirurgische schaar&nbsp;</td><td>Zepf Surgical</td><td>08-1701-17</td><td></td></tr><tr><td>Spuit&nbsp;</td><td>BD plastipak</td><td>303172</td><td>1mL</td></tr><tr><td>Veeterinaire tandheelkundige micromotor</td><td>Eickemeyer</td><td>174028</td><td></td></tr><tr><td>Xylazin</td><td>Calier</td><td>20102-003</td><td>Xilagesic 20 mg/mL</td></tr></tbody></table>

inductie van parodontitis via een combinatie van ligatuur en lipopolysaccharide-injectie in een rattenmodel

Induction of Periodontitis via a Combination of Ligature and Lipopolysaccharide Injection in a Rat Model

Parodontitis (PD) is een veel voorkomende, chronische immuunontstekingsziekte van het parodontium, die resulteert in een verlies van gingivaal zacht weefsel, parodontale ligament, cementum en alveolair bot. In deze studie wordt een eenvoudige methode van PD-inductie bij ratten beschreven. We geven gedetailleerde instructies voor het plaatsen van het ligatuurmodel rond de eerste maxillaire kiezen (M1) en een combinatie van injecties met lipopolysaccharide (LPS), afgeleid van Porphyromonas gingivalis aan de mesio-palatale kant van de M1. De inductie van parodontitis werd gedurende 14 dagen gehandhaafd, waardoor de accumulatie van bacteriën, biofilm en ontsteking werd bevorderd. Om het diermodel te valideren, werd IL-1β, een belangrijke ontstekingsmediator, bepaald door een immunoassay in de gingivale creviculaire vloeistof (GCF) en werd het alveolaire botverlies berekend met behulp van cone beam computed tomography (CBCT). Deze techniek was effectief in het bevorderen van gingivarecessie, alveolair botverlies en een toename van IL-1β-niveaus in de GCF aan het einde van de experimentele procedure na 14 dagen. Deze methode was effectief in het induceren van PD en kon dus worden gebruikt in studies naar ziekteprogressiemechanismen en toekomstige mogelijke behandelingen.

Een tijdlijn van de experimentele stappen is weergegeven in figuur 1. Figuur 2A toont een afbeelding van het mandibula na chirurgische ingreep, met ligatuurplaatsing rond de sulcus van de M1 op tijdstip 0 van het experiment. Figuur 2B laat zien hoe, na 14 dagen van de procedure, de ligatuur rond de M1 de gingivale sulcus binnendringt, waardoor ontsteking van de gingiva en infiltrerende accumulatie ontstaat.
<p class="jove_conten...

In deze studie wordt een rattenmodel van inductie van parodontitis gepresenteerd via een combinatie van retentieve ligatuur en repetitieve injecties van lipopolysaccharide afgeleid van Porphyromonas gingivalis, gedurende 14 dagen rond de eerste maxillaire kiezen. De ligatie- en LPS-injectietechnieken waren effectief in het induceren van peridontitis, resulterend in alveolair botverlies en ontsteking.

Inductie van parodontitis via een combinatie van ligatuur en lipopolysaccharide-injectie in een rattenmodel

Periodontitis (PD) is a highly prevalent, chronic immune-inflammatory disease of the periodontium, that results in a loss of gingival soft tissue, ...

Dit is een rattenmodel van experimentele parodontitis, gebaseerd op de technieken van lipopolysaccharide-injecties in combinatie met ligatuurplaatsing, en biedt een effectieve methode om ziekteprogressie te bestuderen en behandelingen voor parodontitis te evalueren. Het combineren van beide technieken met individuele methoden culmineert in een snelle ziekte-inductie, het versterken van destructieve ontstekingsreactie en het toenemende verlies van bindweefsel en alveolaire botresorptie. Deze methode biedt een waardevolle gelegenheid om de impact van parodontitisbehandelingen te beoordelen.Het demonstreren van de procedure zal Dr. Oscar Villa, PhD. Begin met het steriliseren van alle chirurgische instrumenten vóór de operatie. Bereid een mix van ketamine en xylazine door 1,6 milliliter ketamine te mengen met één milliliter xylazine, verdund in PBS of zoutoplossing, en bewaar de bouillon bij vier graden Celsius.Verdun atipamezool tot een eindconcentratie van 0,25 milligram per milliliter en buprenorfine tot een eindconcentratie van 0,03 milligram per milliliter in PBS of zoutoplossing en bewaar de voorraden bij vier graden Celsius. Bereid een milliliter PG-LPS in steriele zoutoplossing en bewaar de bouillon bij min 20 graden Celsius. Gebruik vrouwelijke en mannelijke Wistar-ratten voor het experiment.Houd de dieren in groepen gehuisvest onder de juiste omgeving, met voedsel en standaard water dat ad libitum wordt aangeboden. Nadat de rat is verdoofd, plaatst u het dier op zijn rug op een verwarmd chirurgisch platform. Bedek het lichaam van het dier tijdens de procedure om warmteverlies te voorkomen.Dien 100% zuurstof toe met behulp van een kleine neuskegel en controleer de polsslag en zuurstofverzadiging door pulsoximetrie. Open nu de rattenmond met behulp van een aluminium mondgag rond de snijtanden. Trek de tong ermee in en stabiliseer de maxilla en onderkaak in een open, comfortabele werkpositie, waardoor toegang tot mandibulaire kiezen mogelijk is.Verzamel GCF met in totaal vier absorberende papierpunten nummer 30, door het in de tandvleesspleet rond het mesiopalatale van de M1 in te brengen tot een lichte weerstand. Houd het papierpunt 30 seconden in dezelfde positie voordat u het onmiddellijk verwijdert. Breng na het verzamelen het papierpunt onmiddellijk over in een plastic injectieflacon en bewaar bij min 80 graden Celsius tot de testprestaties.Plaats de distale staart van de hechting aan de palatale zijde van het gebit en plaats het proximale segment tussen het contact van M1 en tweede maxillaire kiezen. Gebruik de periostale microchirurgische lift om de hechtdraad in de sulcus in te brengen. Wikkel de ligatuur heel voorzichtig rond het buccale oppervlak van de M1, omdat de weefsels op dit niveau een smalle zone van aangehechte gingiva vertonen.Zorg ervoor dat de hechtdraad aan beide uiteinden wordt aangedraaid om in de gingivale sulcus te worden gedreven. Bind vervolgens de uiteinden van de hechting vast met de knoop van een chirurg en knip de staarten zo kort mogelijk in. Steek de knoop in de sulcus.Injecteer na ligatuurpositionering 40 microliter PG-LPS in steriele zoutoplossing in het subgingivale weefsel aan de mesiopalatale zijde van de M1 bilateraal. Om de ligatuur te onderzoeken en aan te passen, plaatst u het verdoofde dier op zijn rug en gebruikt u tijdens de procedure een kleine neuskegel met 1% isofluraan en 100% zuurstof voor onderhoud van de anesthesie bij dieren. Open de wikkelmond met behulp van de aluminium mondgag rond de snijtanden, trek de tong ermee in en stabiliseer de maxilla en onderkaak in een open, comfortabele werkpositie, waardoor toegang tot ligaturen mogelijk is.Span de ligaturen tegen de gingiva aan met behulp van een periostale microchirurgische lift en zorg ervoor dat de hechting van de ligaturen wordt ingebracht, waardoor ontstekingen rond de gingiva ontstaan. Injecteer na de ligatuuraanpassing bilateraal 40 microliter PG-LPS in het subgingivale weefsel aan de mesiopalatale zijde van de M1, zoals eerder aangetoond. Nadat je het dier op de 14e dag hebt geofferd, verzamel je GCF zoals eerder getoond.Breng het papierpunt onmiddellijk over in een plastic injectieflacon en bewaar bij min 80 graden Celsius tot de testprestaties. De tweedimensionale beelden van het alveolaire bot van maxillaire kiezen tonen meer botvolume in de basale controle en hoger alveolair botverlies na het vaststellen van parodontitis. Analyse van de sagittale beelden wijst op een significanter alveolair botverlies in het interradiculaire botgebied van de M1 en M2 na parodontitisvorming, vergeleken met de basale controlegroep.Na opoffering vertoonde het gehemelte verschillen in gingivale recessie in de M1 tussen verschillende groepen. De parodontitisgroep vertoont een meer opmerkelijke apicale gingivale migratie en ontsteking van de gingiva rond de maxillaire kiezen in vergelijking met de basale controlegroep. Ook vertoonde de parodontitisgroep een significant hogere afgifte van pro-inflammatoir cytokine 1L-1 bèta uit GCF dan de controlegroep.Cruciale stappen in de procedure zijn de juiste plaatsing van de hechting en knoop in de sulcus, de juiste aanpassing van de ligatuur en nauwkeurige lipopolysaccharide-injectie tijdens het 14-daagse protocol.

induction-periodontitis-via-combination-ligature-lipopolysaccharide

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie en Infectie

Hier presenteren we een protocol voor het lokaal opwekken van apicale parodontitis bij muizen. We laten zien hoe we een gat in de tand van de muis boren en de pulp ervan blootstellen, om lokale ontstekingen te veroorzaken. Analysemethoden om de aard van deze ontsteking te onderzoeken, zoals micro-CT en histologie, worden ook aangetoond.

Het inducerende apicale periodontitis bij muizen

Dit artikel presenteert een protocol voor de vaststelling van een ligatuur-geïnduceerde model van de parodontitis Murine met meerdere maxillaire Molars, resulterend in grotere gebieden van de betrokken gingivale weefsel en bot voor latere analyse, alsmede verminderde dierlijke gebruik. Een techniek om orale neutrofielen te beoordelen op een manier die analoog is aan menselijke proefpersonen wordt ook beschreven.

Robuust, ligatuur-geïnduceerde model van lymfklier-periodontitis voor de evaluatie van orale neutrofielen

Dit is een rapport over een experimenteel model van ligatuur-geïnduceerde peri-implantitis bij muizen. We beschrijven alle chirurgische stappen, van pre- en postoperatieve behandeling van de dieren, extracties, plaatsing van implantaten en ligatuurgeïnduceerde peri-implantitis.

Experimenteel model van ligatuur-geïnduceerde peri-implantitis bij muizen

Deze studie beschrijft een aangepaste 6-0 nylon ligatiemethode voor het induceren van parodontitis bij muizen, die zeer reproduceerbaar is en een alternatief vormt voor onderzoekers om parodontitis te bestuderen, van de ontwikkeling tot de pathologische gevolgen.

muismodel van gevorderde parodontitis geïnduceerd door nylon ligatuur in de tweede bovenkies

Auto-immune hypophysitis kan worden gereproduceerd bij muizen door het injecteren van een uittreksel van de muis hypofyse eiwitten.

Voorbereiding van de muis hypofyse Immunogeen voor de inductie van experimentele auto-immune Hypophysitis

Deze video laat zien hoe u auto-immune hypophysitis induceren in SJL muizen en hoe u de ernst ervan te beoordelen door de histopathologie.

Inductie van experimentele auto-immune Hypophysitis in SJL Muizen

Murine beenmergtransplantatie is een veel gebruikte techniek om immunologische mechanismen voor graft-versus-host ziekte bij mensen bestuderen. De mogelijkheid om T-cel mensenhandel patronen te...

Inductie van Graft-versus-host ziekte en<em&gt; In Vivo</em&gt; T-cel monitoren door gebruik van een MHC-matched muizenmodel

We beschrijven een werkwijze voor het induceren neutrofiele longontsteking door uitdaging om vernevelde lipopolysacharide door verneveling, te modelleren acute longbeschadiging. Daarnaast worden fundamentele chirurgische technieken long isolatie, tracheale intubatie en bronchoalveolaire lavage beschreven.

Een methode voor het genereren van Pulmonale neutrofilie behulp Aerosolized Lipopolysaccharide

Hier wordt een procedure beschreven voor de oprichting van systemische infectie in de neonatale rat met culturen van Escherichia coli K1. Deze niet-invasieve procedure toestaat kolonisatie van het maagdarmkanaal, translocatie van het pathogeen in de systemische circulatie, en invasie van het centraal zenuwstelsel bij de choroid plexus.

Non-Invasive Model van Neuropathogenic Escherichia coli Infectie in de Neonatale Rat

Hier beschrijven we een werkwijze snel evenwicht dialyse (RED) drug binding aan ca- seum longtuberculose laesies en holtes meten. Het protocol wordt ook gebruikt met een schuimige-macrofaag afgeleide matrix met een effectieve surrogaat voor ca- seum.

Een<em&gt; In Vitro</em&gt; Caseum Binding Assay die de penetratie van drugs in tuberculose-lesingen voorspelt

Leer een rattenmodel voor parodontitis opzetten met ligatuur en lipopolysaccharide-injecties. Deze methode induceert snel ziekteprogressie en alveolaire botresorptie voor evaluatie van behandelingen.

Inductie van parodontitis via een combinatie van ligatuur en lipopolysaccharide-injectie in een rattenmodel

Meer video's verkennen