Name: Vaststelling van het Central Cord Syndrome-model in C57BL/6J-muis (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-09-08T12:40:00.000+00:00
Duration: 6 min 36 s
Description: Leer een betrouwbaar protocol voor het simuleren van centraal cordsyndroom in C57BL/6J-muizen. Deze methode verbetert herhaalbaarheid en minimaliseert operatieve schade voor consistent onderzoek naar ruggenmergletselmechanismen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Deze studie werd ondersteund door het National Key Research and Development Project of Stem Cell and Transformation Research (2019YFA0112100) en het State Key Program of National Natural Science of China (81930070).

De experimenten werden goedgekeurd door het Laboratory Animal Ethical and Welfare Committee van het Cheeloo College of Medicine van de Universiteit van Shandong (goedkeuringsnummer: 22021). Ze werden uitgevoerd in overeenstemming met de Gids voor de verzorging en het gebruik van proefdieren, gepubliceerd door de National Institutes of Health (NIH-publicaties nr. 85-23, herzien in 1996). Alle muizen die in deze studie werden gebruikt, waren vrouwelijke C57BL/6J-muizen van 9-10 weken oud, gekocht bij Jinan Pengyue Experimental Animal Company (Jinan, China). In totaal waren 9 muizen die bij deze studie betrokken waren, gelijkelijk gerandomiseerd naar de controle-, milde en ernstige groepen. 7, 28 en 70 dagen na de verwonding werd één muis uit elke groep geofferd.
1. C6 laminectomie en blootstelling van het ruggenmerg
OPMERKING: De belichting is uitgevoerd onder een microscoop. Bloedingen kunnen worden voorkomen door op twee aspecten te letten: (i) Alle bloedvaten moeten worden vermeden. (ii) Spieren moeten worden gescheiden op de begin- en eindpunten van de spier.
<ol><li>Bereid chirurgische instrumenten en SCICP voor. OPMERKING: De structuur van SCICP is gerapporteerd in eerdere studie11. Het verschil met de vorige studie is dat het huidige protocol een dwarslaesie tot stand brengt door compressie. Twee verschillende gewichten (10,4 g en 20,8 g) van dit platform kunnen een compressie van respectievelijk 5 g/mm2 en 10 g/mm2 produceren (Figuur 1). De stappen voor blootstelling en compressie van het ruggenmerg zijn weergegeven in figuur 2.</li>
	<li>Dien isofluraan toe aan de muis door inhalatie met behulp van een neuskegel (inductie: 3%-5%, onderhoud: 1,5%-2%).</li>
	<li>Nadat de anesthesie in werking is getreden, onderzoekt u een kleine uitstulping op de middellijn achter de nek van muizen, het processus spinosus van de tweede borstwervel (T2).</li>
	<li>Scheer het haar rond deze uitstulping. Desinfecteer de huid met drie afwisselende toepassingen van een jodoforoplossing gevolgd door huidontsmettingsmiddelen 75% ethanol.</li>
	<li>Plaats de muis liggend op de operatietafel. Breng oogzalf aan om de ogen te beschermen.</li>
	<li>Leg een 3-4 mm dik kussen onder de borst om een gebogen kromming van de cervicale wervelkolom mogelijk te maken, waardoor de interlamina-ruimte en een onbelemmerde luchtweg tijdens de operatie gemakkelijker kunnen worden blootgesteld. Injecteer buprenorfine als preoperatieve analgesie (0,05-0,1 mg/kg, SQ).</li>
	<li>Maak een incisie in de lengterichting van 1-1,5 cm met een steriel scalpel gecentreerd op de processus spinosus thoracale wervel om de fasciale laag bloot te leggen (Figuur 2A).</li>
	<li>Verwijder een deel van het vetweefsel boven T2 met een steriele microschaar om de processus spinosus T2 te vinden.</li>
	<li>Scheid de bilaterale trapezius- en ruitvormige spieren van C5-T2 langs de middellijn met een microschaar (Figuur 2B).</li>
	<li>Scheid de spieren op de lamina van C5-T2-wervels met een microschaar en trek de spierlaag naar de zijkanten terug met steriele micro-retractors (Figuur 2C).</li>
	<li>Snijd de multifidus en cervicale spinale spieren op het oppervlak van de wervels.</li>
	<li>Lokaliseer T2 volgens het hoogste punt van de processus spinosus. Onderzoek de processus spinosus achtereenvolgens in de richting van het rostrale uiteinde van T2 om C6 te lokaliseren (Figuur 3).</li>
	<li>Til de C6-lamina op met een pincet, knip de lamina af en het ruggenmerg komt bloot te liggen (Figuur 2D).</li>
</ol>2. Compressieletsel van het cervicale ruggenmerg
<ol><li>Klem de facetgewrichten van C6-7 vast met de wervelstabilisator en vergrendel deze (Figuur 2E).</li>
	<li>Richt de steriele gewichtstip op het blootliggende ruggenmerg en zorg ervoor dat de platte onderkant van de tip evenwijdig aan het dorsale oppervlak van het ruggenmerg is geplaatst (Figuur 2F).</li>
	<li>Pas de huls aan om het gewicht het ruggenmerg te laten samendrukken. Stop met aanpassen wanneer het gewicht een constante relatieve positie ten opzichte van het ruggenmerg behoudt (Figuur 2G). NOTITIE: Maak dit proces niet te gewelddadig of te snel voor het geval het gewicht kneuzingskracht uitoefent op het ruggenmerg.</li>
	<li>Verwijder het gewicht en de wervelstabilisator na een compressie van 5 minuten.</li>
	<li>Observeer de kleurveranderingen van het ruggenmerg na compressie onder de microscoop (Figuur 2H).</li>
	<li>Spoel af met steriel PBS en gebruik zuigkracht om de operatieplaats schoon te maken.</li>
	<li>Hecht de spieren en huid in lagen met polypropyleen niet-resorbeerbare hechtdraad (maat: 6-0).</li>
	<li>Desinfecteer het operatiegebied, plaats de muis op een warm kussen totdat de muis weer volledig bij bewustzijn is en plaats de muis vervolgens terug in de muizenkooi.</li>
	<li>Injecteer buprenorfine voor analgesie (0,05-0,1 mg/kg, SQ) elke 8-12 uur gedurende 3 dagen.</li>
</ol>3. Histologische analyse
<ol><li>Verdoof de muis door intraperitoneale injectie van 1,25% tribroomethanol (0,02 ml/g lichaamsgewicht) op dag 7, 28 of 70 na het letsel. Transcardieel infuseren van de muis met 60 ml fosfaatgebufferde zoutoplossing (PBS) en 20 ml 4% paraformaldehyde11.</li>
	<li>Doorsnijd het ruggenmerg op 0,5 cm van het midden van de laesie aan beide zijden met een microschaar en behoud het 1 cm lange gedeelte.</li>
	<li>Dompel het geconserveerde ruggenmerggedeelte gedurende 48 uur onder in 30% sacharose bij 4 °C.</li>
	<li>Veranker de weefsels met OCT, snijd de weefsels in secties van 6 μm dik met een cryotoom en verzamel de secties op een glasplaatje.</li>
	<li>Hematoxyline- en eosinekleuring<ol><li>Spoel de secties van 6 μm 3 keer met 1x PBS gedurende 5 minuten om resterende OCT te verwijderen.</li>
		<li>Dompel de secties gedurende 90 s onder in hematoxyline. Was de secties gedurende 3 minuten onder stromend water.</li>
		<li>Dompel de secties gedurende 4 minuten onder in eosine. Week 30 seconden in 95% alcohol om overtollig eosine te verwijderen.</li>
		<li>Dehydrateer ten slotte de objectglaasjes met alcohol (95% alcohol en 100% alcohol twee keer achtereenvolgens) gedurende 30 seconden en leg de glaasjes gedurende 2 minuten in een xyleenbad om ze te reinigen. Sluit vervolgens de secties af met een afdekglas en harsgel.</li>
	</ol></li>
	<li>Pruisisch blauw kleuring<ol><li>Dompel de objectglaasjes gedurende 20 minuten onder in een gelijk mengsel van kaliumferrocyanide (10%) en zoutzuur (10%).</li>
		<li>Spoel 3 keer met gedestilleerd water en verpest gedurende 5 minuten met Nuclear Fast Red.</li>
		<li>Spoel drie keer met gedestilleerd water, gevolgd door één spoeling met 95% alcohol en twee spoelingen met 100% alcohol gedurende 5 minuten.</li>
		<li>Maak de secties twee keer gedurende 3 minuten in xyleen schoon en sluit ze vervolgens af met harsgel12.</li>
	</ol></li>
	<li>Immunofluorescentie kleuring<ol><li>Incubeer de objectglaasjes met de volgende primaire antilichamen gedurende 1 uur bij 37 °C: konijn anti-geïoniseerd calciumbindend adaptermolecuul 1 (Iba-1) (1:500), dat na zenuwbeschadiging in microglia werd opgereguleerd; antigliaal fibrillair zuur eiwit (GFAP) (1:300) bij muizen, dat tot expressie wordt gebracht in astrocyten in het centrale zenuwstelsel; konijn anti-neurofilament-200 (NF-200) (1:2000), dat tot expressie wordt gebracht in neurofilament.</li>
		<li>Incubeer met secundaire antilichamen gedurende 1 uur bij kamertemperatuur (RT): Alexa Fluor488 geit anti-muis en Alexa Fluor594 geit anti-konijn (1:1.000).</li>
		<li>Maak foto's en analyseer verder met een fluorescentiemicroscoop13.</li>
	</ol></li>
</ol>4. Magnetische resonantie beeldvorming
<ol><li>Verdoof de muis 7 dagen na het letsel met isofluraananesthesie (1%-2% isofluraan, 20%-30% O2) toegediend via een minimasker.</li>
	<li>Scan het cervicale ruggenmerg in sagittale oriëntatie. Gebruik de volgende instellingen voor MRI-beeldvorming: Spin-echo (SE)-sequentie in multislice en interleaved met TR/TE = 2500/12 ms, acquisitiematrix = 256 x 128 matrix over het gezichtsveld (FOV) = 12 x 8 mm2, plakdikte = 1 mm en het aantal excitaties (NEX) = 2. NOTITIE: Houd de ademhalingsfrequentie van de muis tijdens het scannen op 10-15/min om ademhalingsgerelateerde beeldartefacten te elimineren14.</li>
</ol>

<ol><li>Liu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survival+in+222+Patients+With+Severe+CSCI%3A+An+8-Year+Epidemiologic+Survey+in+Western+China%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Physical+Medicine+and+Rehabilitation%22%5BJournal%5D)">Survival in 222 Patients With Severe CSCI: An 8-Year Epidemiologic Survey in Western China.</a> Archives of Physical Medicine and Rehabilitation. 100 (10), 1872-1880 (2019).</li>
<li>Qi, C., Xia, H., Miao, D., Wang, X., Li, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+timing+of+surgery+in+the+outcome+of+spinal+cord+injury+without+radiographic+abnormality+%28SCIWORA%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Surgery+and+Research%22%5BJournal%5D)">The influence of timing of surgery in the outcome of spinal cord injury without radiographic abnormality (SCIWORA).</a> Journal of Orthopaedic Surgery and Research. 15 (1), 223(2020).</li>
<li>Brooks, N. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Central+cord+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery+Clinics+of+North+America%22%5BJournal%5D)">Central cord syndrome.</a> Neurosurgery Clinics of North America. 28 (1), 41-47 (2017).</li>
<li>Avila, M. J., Hurlbert, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Central+cord+syndrome+redefined%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery+Clinics+of+North+America%22%5BJournal%5D)">Central cord syndrome redefined.</a> Neurosurgery Clinics of North America. 32 (3), 353-363 (2021).</li>
<li>Forgione, N., Chamankhah, M., Fehlings, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+model+of+bilateral+cervical+contusion-compression+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">A mouse model of bilateral cervical contusion-compression spinal cord injury.</a> Journal of Neurotrauma. 34 (6), 1227-1239 (2017).</li>
<li>López-Dolado, E., Lucas-Osma, A. M., Collazos-Castro, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+motor+compensations+with+permanent%2C+focal+loss+of+forelimb+force+after+cervical+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Dynamic motor compensations with permanent, focal loss of forelimb force after cervical spinal cord injury.</a> Journal of Neurotrauma. 30 (3), 191-210 (2013).</li>
<li>Allen, L. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phrenic+motor+neuron+survival+below+cervical+spinal+cord+hemisection%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">Phrenic motor neuron survival below cervical spinal cord hemisection.</a> Experimental Neurology. 346, 113832(2021).</li>
<li>Reinhardt, D. R., Stehlik, K. E., Satkunendrarajah, K., Kroner, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bilateral+cervical+contusion+spinal+cord+injury%3A+A+mouse+model+to+evaluate+sensorimotor+function%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">Bilateral cervical contusion spinal cord injury: A mouse model to evaluate sensorimotor function.</a> Experimental Neurology. 331, 113381(2020).</li>
<li>Ropper, A. E., Ropper, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+spinal+cord+compression%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Acute spinal cord compression.</a> The New England Journal of Medicine. 376 (14), 1358-1369 (2017).</li>
<li>Sun, G. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+progressive+compression+model+of+thoracic+spinal+cord+injury+in+mice%3A+function+assessment+and+pathological+changes+in+spinal+cord%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Regeneration+Research%22%5BJournal%5D)">A progressive compression model of thoracic spinal cord injury in mice: function assessment and pathological changes in spinal cord.</a> Neural Regeneration Research. 12 (8), 1365-1374 (2017).</li>
<li>Elzat, E. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishing+a+mouse+contusion+spinal+cord+injury+model+based+on+a+minimally+invasive+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Establishing a mouse contusion spinal cord injury model based on a minimally invasive technique.</a> Journal of Visualized Experiments. (187), 64538(2022).</li>
<li>Lu, J., Xu, F., Lu, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LncRNA+PVT1+regulates+ferroptosis+through+miR-214-mediated+TFR1+and+p53%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sciences%22%5BJournal%5D)">LncRNA PVT1 regulates ferroptosis through miR-214-mediated TFR1 and p53.</a> Life Sciences. 260, 118305(2020).</li>
<li>Zeng, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lentivirus-mediated+downregulation+of+%CE%B1-synuclein+reduces+neuroinflammation+and+promotes+functional+recovery+in+rats+with+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroinflammation%22%5BJournal%5D)">Lentivirus-mediated downregulation of α-synuclein reduces neuroinflammation and promotes functional recovery in rats with spinal cord injury.</a> Journal of Neuroinflammation. 16 (1), 283(2019).</li>
<li>Bilgen, M., Al-Hafez, B., Berman, N. E., Festoff, B. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Magnetic+resonance+imaging+of+mouse+spinal+cord%5BTitle%5D)+AND+%22Magnetic+Resonance+in+Medicine%22%5BJournal%5D)">Magnetic resonance imaging of mouse spinal cord.</a> Magnetic Resonance in Medicine. 54 (5), 1226-1231 (2005).</li>
<li>Yilihamu, E. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+mouse+model+of+central+cord+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Regeneration+Research%22%5BJournal%5D)">A novel mouse model of central cord syndrome.</a> Neural Regeneration Research. 18 (12), 2751-2756 (2023).</li>
<li>Chikuda, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+early+vs+delayed+surgical+treatment+on+motor+recovery+in+incomplete+cervical+spinal+cord+injury+with+preexisting+cervical+stenosis%3A+A+randomized+clinical+trial%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Network+Open%22%5BJournal%5D)">Effect of early vs delayed surgical treatment on motor recovery in incomplete cervical spinal cord injury with preexisting cervical stenosis: A randomized clinical trial.</a> JAMA Network Open. 4 (11), e2133604(2021).</li>
<li>Jimenez, O., Marcillo, A., Levi, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+histopathological+analysis+of+the+human+cervical+spinal+cord+in+patients+with+acute+traumatic+central+cord+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Spinal+Cord%22%5BJournal%5D)">A histopathological analysis of the human cervical spinal cord in patients with acute traumatic central cord syndrome.</a> Spinal Cord. 38 (9), 532-537 (2000).</li>
<li>Menezes, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+mesenchymal+stromal%2Fstem+cells+recruit+resident+pericytes+and+induce+blood+vessels+maturation+to+repair+experimental+spinal+cord+injury+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Human mesenchymal stromal/stem cells recruit resident pericytes and induce blood vessels maturation to repair experimental spinal cord injury in rats.</a> Scientific Reports. 10 (1), 19604(2020).</li>
<li>Hutson, T. H., Di Giovanni, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+translational+landscape+in+spinal+cord+injury%3A+focus+on+neuroplasticity+and+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews.+Neurology%22%5BJournal%5D)">The translational landscape in spinal cord injury: focus on neuroplasticity and regeneration.</a> Nature Reviews. Neurology. 15 (12), 732-745 (2019).</li>
<li>El-Bohy, A. A., Schrimsher, G. W., Reier, P. J., Goshgarian, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+assessment+of+respiratory+function+following+contusion+injury+of+the+cervical+spinal+cord%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">Quantitative assessment of respiratory function following contusion injury of the cervical spinal cord.</a> Experimental Neurology. 150 (1), 143-152 (1998).</li>
<li>El-Bohy, A. A., Goshgarian, H. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+single+phrenic+axon+recordings+to+assess+diaphragm+recovery+after+cervical+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">The use of single phrenic axon recordings to assess diaphragm recovery after cervical spinal cord injury.</a> Experimental Neurology. 156 (1), 172-179 (1999).</li>
<li>Gonzalez-Rothi, E. J., Lee, K. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intermittent+hypoxia+and+respiratory+recovery+in+preclinical+rodent+models+of+incomplete+cervical+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">Intermittent hypoxia and respiratory recovery in preclinical rodent models of incomplete cervical spinal cord injury.</a> Experimental Neurology. 342, 113751(2021).</li>
<li>Locke, K. C., Randelman, M. L., Hoh, D. J., Zholudeva, L. V., Lane, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Respiratory+plasticity+following+spinal+cord+injury%3A+perspectives+from+mouse+to+man%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Regeneration+Research%22%5BJournal%5D)">Respiratory plasticity following spinal cord injury: perspectives from mouse to man.</a> Neural Regeneration Research. 17 (10), 2141-2148 (2022).</li>
<li>Forgione, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bilateral+contusion-compression+model+of+incomplete+traumatic+cervical+spinal+cord+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Bilateral contusion-compression model of incomplete traumatic cervical spinal cord injury.</a> Journal of Neurotrauma. 31 (21), 1776-1788 (2014).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Van de vele soorten ruggenmergletsel is CCS een van de meest potentieel behandelbare soorten letsel 3,4. Vanwege het gebrek aan laboratoriumonderzoeksmodellen concentreerde het onderzoek naar CCS vanaf de jaren 1950 zich op klinische studies en onderzoek naar kadaverdissectie 3,16,17. De huidige studie toont het gebruik van compatibele tools en minimaal invasieve procedures om het CCS-model van muizen vast te stellen. Vanuit technisch oogpunt heeft dit platform een sterke operabiliteit en een goede reproduceerbaarheid. Gezien het feit dat de resultaten van experimenten de validiteit aantonen, is onze techniek om het model vast te stellen dat het dichtst bij de standaard ligt die eerdere studies voor CCS4 hebben gedefinieerd.
Eerdere onderzoeken naar compressieletsel hebben voornamelijk gebruik gemaakt van aneurysmaclips, ballonnen en gekalibreerde pincetten 9,10,18. Bovendien deden de meeste verwondingen zich voor ter hoogte van het thoracale ruggenmerg18. Het ruggenmerg op C6-niveau werd gekozen als het gewonde segment in deze studie om de kenmerken van CCS te onderzoeken. Het is de moeite waard om op te merken dat de overlevingskans van het CCS-model ook een essentiële factor is om de experimentele consistentie te waarborgen. De huidige studie meldt het veroorzaken van bilateraal compressieletsel aan het cervicale ruggenmerg van de muis, terwijl traumatisch letsel op hoog niveau van het ruggenmergletsel, met name bilateraal letsel, dodelijk kan zijn voor proefdieren als het te ernstig is. Volgens El-Bohy heeft het C4/5-ruggenmerg meer kans om het dalende bulbospinale kanaal en ademhalingsgerelateerde motorneuronen aan te tasten, wat leidt tot ademhalingsdepressie en de dood van proefdieren 18,19,20,21,22,23., In deze studie hebben muizen met verschillende graden van compressie op het C6 cervicale ruggenmerg significant gedifferentieerde letselkenmerken die worden gesuggereerd door histologische tests. Hoewel er significante gedrags- en histologische verschillen waren in het door Forgione gerapporteerde model voor het vastklemmen van het cervicale ruggenmerg van de muis, was verstoring van de steeltjes, gewrichtsprocessen, laminae en zelfs zenuwwortels nodig om het ruggenmerg vast te klemmen met de gemodificeerde klemmen, wat een significante invloed had op de stabiliteit van de cervicale structuren24. Een andere studie van cervicale letsels meldde het gebruik van het transversale proces als fixatieplaats5. Hoewel de gewrichtsprocessen niet beschadigd raakten, kon overmatige afbraak van spierweefsel ook leiden tot een impact op de stabiliteit van het ruggenmerg. In de huidige studie werd alleen de 6ecervicale lamina verwijderd om de stabiliteit van het cervicale ruggenmerg te behouden, waarbij de aangrenzende gewrichtsgewrichten behouden bleven en overmatige spierbeschadiging werd vermeden. Tegelijkertijd voorkomt compressie van boven het ruggenmerg schade aan de zenuwwortels.
De HE-resultaten suggereren dat het gebied van schade aan het cervicale ruggenmerg van de muizen in elke groep voornamelijk in de grijze stof nabij het centrale merg lag, wat CCS kenmerkte, met significante verschillen in de omvang van het letsel tussen de verschillende groepen. Met name de pathologische secties die we hebben weergegeven, kunnen de manifestatie van letsel hebben verlicht omdat de monsters een paar dagen na het letsel werden verzameld. Immunofluorescentie (NF-200) vertoonde minder schade aan de neurale banen in het witte stofgebied van het ruggenmerg, wat ook bevestigde dat de schade bij CCS voornamelijk geconcentreerd was rond het centrale merg. Het resultaat van immunofluorescentie werd verergerd door eerdere histologische resultaten van pathologie. Eerdere studies hebben aangetoond dat CCS leidt tot oedeem in de buurt van het centrale koord, wat leidt tot hematoom en uiteindelijk disfunctie in het mediale deel van het laterale corticospinale kanaal3. Bloeding is gerapporteerd als een typisch onderdeel van CCS, maar wordt zelden gezien in daaropvolgende beeldvormings- enautopsiestudies17. In deze studie suggereerden HE-resultaten 7 dagen na het letsel tekenen van weefseloedeem in alle groepen; Er werden echter geen resterende rode bloedcellen gevonden in het verwondingsgebied. Daarom werd Pruisisch blauw gebruikt om het verwondingsgebied te onderzoeken op bloedingen, en de resultaten kwamen overeen met hemosiderose die 7 dagen na het letsel werd waargenomen in het verwondingsgebied van de groep met ernstig letsel, terwijl de milde groep dat niet deed. MRI T2-beelden toonden aan dat zowel milde als ernstige verwondingen 7 dagen na het letsel gebieden met een laag signaal hadden in het beschadigde gebied van het letsel, wat hier de afzetting van reticulocytlysaat aangeeft. Deze resultaten leveren indirect bewijs dat de discrepantie tussen de eerder gerapporteerde bevindingen waarschijnlijk te wijten is aan het feit dat de MRI-test mogelijk gevoeliger is dan de histologische test14, naast de ernst van het letsel, wat ook van invloed kan zijn op de hoeveelheid bloeding in het gebied van het letsel. GFAP werd ook uitgebreid tot expressie gebracht in het beschadigde gebied. Tegelijkertijd werd ook Iba-1-expressie gezien in intacte gebieden, wat wijst op de persistentie van een ontstekingsreactie, consistent met de MRI-resultaten, waarbij een ring van hyperintens signaal rond het hypo-intense signaalgebied in de laesie de aanwezigheid van een ontstekingsreactie suggereert. Uiteindelijk, op basis van de resultaten van de huidige studie, was het verwondingsgebied in het model gericht op de grijze stof rond het centrale koord, wat over het algemeen consistent is met de eerder gerapporteerde beschrijvingen13. Helaas hebben we niet bij elk proefdier herhaaldelijk MRI uitgevoerd om te laten zien hoe de plaats van de verwonding dynamisch verandert met de tijd. Toekomstige onderzoekers kunnen dit meenemen in hun werk voor beter onderzoek naar CCS. Ook immunolabeling met neuronale markers zoals NeuN, die de grijze stof definiëren, kan in het onderzoek worden opgenomen.
Concluderend kunnen we stellen dat de kenmerken van de bevindingen op pathologie en MRI-scans sterke overeenkomsten vertonen met die beschreven voor CCS in eerdere studies4. Het huidige protocol maakt het mogelijk om CCS verder te onderzoeken en te begrijpen.

De afgelopen jaren zijn we getuige geweest van een voortdurend stijgende incidentie van dwarslaesie (dwarslaesie), met meer verwondingen bij oudere mensen door minder gewelddadige tauma1. Deze verwondingen hebben vaker betrekking op de cervicale wervelkolom en leiden vaker tot een onvolledige neurologische disfunctie2.
In de eenentwintigste eeuw is CCS het meest voorkomende type dwarslaesie, goed voor meer dan de helft van alle dwarslaesie. Vergeleken met conventionele onvolledige dwarslaesie wordt CCS gekenmerkt door onevenredig meer aantasting van de bovenste dan van de onderste ledematen3. Het wordt gekenmerkt door overwegend zwakte van de bovenste ledematen met minder significante sensorische en blaasdisfunctie. CCS wordt verondersteld te worden veroorzaakt door posttraumatische bloeding en oedeem in de centrale regio of, zoals onlangs voorgesteld, door Walleriaanse degeneratie door compressie van het ruggenmerg bij wervelkanaalstenose. Het beheer van CCS mist bewijs op hoog niveau om te begeleiden, wat een uitgebreid begrip van de pathofysiologie vereist4. Er zijn echter geen modellen van CCS gerapporteerd. Geschikte diermodellen zijn essentieel voor het begrip van pathofysiologie, die een onderzoeksbasis kunnen bieden voor klinische en preklinische studies 5,6,7,8,9,10.
In deze studie wordt een CCS-model bij muizen opgesteld met een coaxiaal platform voor dwarslaesie (SCICP) en een minimaal invasief operatieplan, dat verder onderzoek naar en begrip van CCS mogelijk maakt. Het model is in de loop van het onderzoeksproces valide gebleken door histologische, magnetische resonantiebeeldvorming (MRI) en immunofluorescentieanalyse.

<table><tbody><tr><td>4% fixatieoplossing</td><td>Solarbio</td><td>P1110</td><td>4%</td></tr><tr><td>Anti-Neurofilament heavy polypeptide antilichaam</td><td>Abcam</td><td>ab8135</td><td>Verdunningsverhouding (1:2000)</td></tr><tr><td>Eosine kleuringsoplossing (oplosbaar in water)</td><td>Biosharp</td><td>BL727B</td><td></td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>Fuyu Reagent</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Fluorescentiemicroscoop</td><td>KEYENCE</td><td>BZ-X800</td><td></td></tr><tr><td>Bevroren snijder</td><td>Leica</td><td></td><td></td></tr><tr><td>GFAP (GA5) Muis mAb </td><td>Cell Signaling TECHNOLOGY</td><td>#3670</td><td>Verdunningsverhouding (1:600)</td></tr><tr><td>Geit anti-Muis IgG (H+L) Sterk Geadsorbeerd Secundair Antilichaam, Alexa Fluor Plus 488</td><td>ThermoFisher SCIENTIFIC</td><td>A32723TR</td><td>Verdunningsverhouding (1:1000)</td></tr><tr><td>Geit anti-Konijn IgG (H+L) Sterk Geadsorbeerd Secundair Antilichaam, Alexa Fluor Plus 594</td><td>ThermoFisher SCIENTIFIC</td><td>A32740</td><td>Verdunningsverhouding (1:1000)</td></tr><tr><td>Hematoxyline kleuringsoplossing</td><td>Biosharp</td><td>BL702A</td><td></td></tr><tr><td>Muizen</td><td>Jinan Pengyue Experimentele Dierenbedrijf </td><td>C57BL/6J </td><td></td></tr><tr><td>Microchirurgietoestel </td><td>Shandong ULT Biotechnology Co., Ltd</td><td>Alle chirurgische instrumenten zijn op maat gemaakt</td><td>Oftalmische schaar, micro-muggentang, microchirurgietang, micro-schaar</td></tr><tr><td>Normaal schapen serum voor blokkering (werkoplossing)</td><td>Zhong Shan Jin Qiao</td><td>ZLI-9022</td><td>werkoplossing</td></tr><tr><td>O.C.T. Compound</td><td>SAKURA</td><td>4583</td><td></td></tr><tr><td>Fosfaat gebufferde oplossing (PBS) </td><td>Solarbio</td><td>P1020</td><td>pH 7.2–7.4</td></tr><tr><td>Pruisisch Blauw Ijzerkleuringskit (met Eosine)</td><td>Solarbio</td><td>G1424</td><td></td></tr><tr><td>RWD Laboratorium inhalatieanesthesiestation</td><td>RWD Life Science Co., Ltd</td><td>R550</td><td></td></tr><tr><td>Klein dier in vivo microCT beeldvormingssysteem</td><td>PerkinElmer </td><td>Quantum GX2</td><td></td></tr><tr><td>Spinale verwonding coaxiale platform</td><td>Shandong ULT Biotechnology Co., Ltd</td><td>Op maat gemaakt (Feng's standaard)</td><td>https://shop43957633.m.youzan.com/wscgoods/detail/367x5ovgn69q18g?banner_id=f.81386274~goods.7~ 1~b0yRFKOq&amp;alg_id= 0&amp;slg=tagGoodList-default%2COpBottom%2Cuuid% 2CabTraceId&amp;components_ style_layout =1&amp;reft=1659409105184&amp;spm= g.930111970_f.81386274&amp;alias= 367x5ovgn69q18g&amp;from_uuid= 1362cc46-ffe0-6886-2c65-01903 dbacbba&amp;sf=qq_sm&amp;is_share= 1&amp;shopAutoEnter=1&amp;share_cmpt =native_wechat&amp;is_silence_auth=1</td></tr><tr><td>Chirurgisch microscoop </td><td>Zumax Medical Co., Ltd.</td><td>zumax, OMS2355</td><td></td></tr><tr><td>Tris Gebufferde Saline+Tween (TBST)</td><td>Solarbio</td><td>T1082</td><td>Verdunningsverhouding (1:19)</td></tr><tr><td>XYleen</td><td>Fuyu Reagent</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

vaststelling van het central cord syndrome-model in c57bl/6j-muis

Establishment of Central Cord Syndrome Model in C57BL/6J Mouse

Diermodellen van het centrale navelstrengsyndroom (CCS) kunnen preklinisch onderzoek aanzienlijk ten goede komen. Identificeerbare anatomische routes kunnen minimaal invasieve blootstellingsbenaderingen bieden en extra letsel aan proefdieren tijdens bedrijf verminderen, waardoor het behoud van consistente en stabiele anatomische morfologie tijdens experimenten mogelijk wordt om gedrags- en histologische verschillen tussen individuen te minimaliseren om de reproduceerbaarheid van experimenten te verbeteren. In deze studie werd het ruggenmerg op C6-niveau blootgelegd met behulp van een coaxiaal platform voor ruggenmergletsel (SCICP) en gecombineerd met een minimaal invasieve techniek. Met behulp van een wervelstabilisator hebben we de wervels gefixeerd en het ruggenmerg van C57BL/6J-muizen samengedrukt met gewichten van 5 g/mm2 en 10 g/mm2 met SCICP om verschillende gradaties van C6-ruggenmergletsel te induceren. In lijn met de eerdere beschrijving van CCS, laten de resultaten zien dat de laesie in dit model geconcentreerd is in de grijze stof rond het centrale koord, waardoor verder onderzoek naar CCS mogelijk is. Ten slotte worden histologische resultaten verstrekt als referentie voor de lezers.

De sagittale HE-sectie suggereert dat, hoewel het beschadigde gebied in de grijze stof breder was in de ernstige groep, continuïteit over de witte stof aanwezig was. Bovendien ondersteunt het verschil in beschadigd grijze stofgebied tussen de ernstige en milde groepen de redelijkheid van de groepsinstelling in het protocol (Figuur 4).
De coronale HE-secties laten zien dat de laesie in beide groepen voornamelijk in de grijze stof voorkomt. In de ernstige groep was de kans groter dat de structuur van de witte stof rond de grijze stof werd beïnvloed, maar de omtrek van de witte stof bleef behouden (Figuur 5). NF-200 immunofluorescentie suggereert dat, hoewel de witte stof rond grijze stof werd aangetast in de ernstige groep, de witte stof nog steeds relatief intact was. Deze resultaten komen overeen met de kenmerken die in de vorige studie4 voor CCS zijn beschreven (figuur 6).
Er werden geen rode bloedcellen gevonden in sagittale HE-secties 7 dagen na het letsel in de milde of de ernstige groep. De Pruisisch blauwe kleuring vertoonde geen hemosiderose in de milde groep, maar in de ernstige groep. Deze resultaten geven aan dat het induceren van bloedingen een relatief ernstige mate van schade kan vereisen (Figuur 7).
Immunofluorescentie onthulde gebieden met verhoogde GFAP- en Iba-1-expressie bij zowel licht als ernstig letsel, wat wijst op een ontstekingsreactie en de vorming van een glialitteken in de laesie. Ook vertoonde de ernstige groep een groter laesiegebied dan de milde groep (Figuur 8).
MRI is een relatief minimaal invasieve methode om het ruggenmerg te observeren. De resultaten suggereren dat er in zowel de milde als de ernstige groep een hypo-intense signaalverandering is in de laesie met een hoge signaalomtrek. De ernstige groep vertoonde een significant groter hypo-intens signaalgebied (Figuur 9). Het hypo-intense signaal suggereert een neerslag van het reticulocytlysaat in dit gebied, en het omringende hyperintense signaal suggereert een ontstekingsreactie. In ons vorige onderzoek hebben we verschillende gedragstesten uitgevoerd. De grijpkrachttest in de voorpoten laat bijvoorbeeld een significant verschil zien15.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65028/65028fig01.jpg"> Figuur 1: De huls en gewichten van SCICP. Het oppervlak van de punt is ontworpen om 1,3 mm x 1,6 mm te zijn op basis van het blootgestelde gebied van het ruggenmerg, gemeten na de C6-laminectomie. Het gewicht is gecoat met PTFE, wat de wrijving tussen de binnenwand van de huls en het gewicht effectief vermindert. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65028/65028fig01large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65028/65028fig02.jpg"> Figuur 2: Belichting en compressie van het ruggenmerg. (A) Longitudinale incisie van de huid; (B) Scheid de spieren rostraal van de processus spinosus T2; (C) Scheid de spieren boven de laminae; (D) C6 laminectomie; (E) Fixeren van het wervellichaam; (F) het bepalen van de plaats van compressie; (G) Compressie van het ruggenmerg; (H) Geen significante schade aan de witte stof boven het ruggenmerg na compressie van het ruggenmerg. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65028/65028fig02large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65028/65028fig03.jpg"> Figuur 3: Anatomie van het cervicale skelet van de muis. De plaats aangegeven door de pijl is de processus spinosus T2. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65028/65028fig03large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65028/65028fig04.jpg"> Figuur 4: De sagittale HE gekleurde secties. (A) Sagittale doorsnede van het cervicale ruggenmerg. (B,C) De Ernstige groep had meer ernstige schade dan de Milde groep, maar beide concentreerden zich op de grijze stof rond het centrale koord. De beelden van 7, 28 en 70 dpi suggereren geen significant verschil in de expressie van letsel in dezelfde letselgroep in verschillende perioden en dat de continuïteit van de witte stof in het superieure en inferieure ruggenmerg behouden blijft. Schaalbalk: 1 mm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65028/65028fig04large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65028/65028fig05.jpg"> Figuur 5: Cervicale dwarslaesie coronale HE gekleurde secties. (A-C) De verwonding treft vooral de grijze stof rond het centrale koord, zoals te zien is in panelen B en C. De groep met ernstig letsel lijdt aan een uitgebreider scala aan schade dan de groep met milde verwondingen, die meer kans heeft om de witte stof aan te tasten. Schaalbalk: 400 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65028/65028fig05large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65028/65028fig06.jpg"> Figuur 6: NF-200 coronale immunofluorescentie na letsel. NF-200-respons zonder significant verschil bij de omtrek van de witte stof. Schaalbalk: 400 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65028/65028fig06large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65028/65028fig07.jpg"> Figuur 7: Pruisisch blauwe kleuring. (A-C) Hemosiderose werd waargenomen in de ernstige groep, maar niet in de milde groep. Schaalbalk: 400 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65028/65028fig07large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65028/65028fig08.jpg"> Figuur 8: Sagittale GFAP en Iba-1 immunofluorescentie na verwonding. (A-C) Naarmate de mate van letsel toeneemt, neemt het gebied van GFAP- en Iba-1-respons toe. Schaalbalk: 1 mm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65028/65028fig08large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>
<img alt="Figure 9" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65028/65028fig09.jpg"> Figuur 9: Sagittale MRI na cervicale dwarslaesie (T2-gewogen beelden). Het letselgebied werd waargenomen als een hypo-intens signaal in de milde en ernstige letselgroepen, met een significant groter gebied van hypo-intens signaal in de groep met ernstig letsel. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65028/65028fig09large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>

Het huidige protocol dat het centrale navelstrengsyndroom (CCS) bij muizen simuleert, heeft de herhaalbaarheid verbeterd en de operatieschade aan de proefdieren geminimaliseerd, waardoor de anatomische structuur niet overmatig wordt verstoord. De strategie in deze studie is voordelig omdat het onderzoek naar letselmechanismen mogelijk maakt door consistente resultaten te produceren.

Vaststelling van het Central Cord Syndrome-model in C57BL/6J-muis

Animal models of central cord syndrome (CCS) could substantially benefit preclinical research. Identifiable anatomical pathways can give minimally ...

Diermodellen van het centrale navelstrengsyndroom zouden vervolgens preklinisch onderzoek ten goede kunnen komen. De strategie in deze studie is voordelig omdat het het onderzoek naar letselmechanismen mogelijk heeft gemaakt door consistente resultaten te produceren. Het huidige protocol voor het simuleren van het centrale navelstrengsyndroom bij muizen heeft de herhaalbaarheid verbeterd en de operationele schade aan proefdieren geminimaliseerd.Verstoring van hun anatomische structuur voorkomen. Begin met het organiseren van de chirurgische instrumenten en het coaxiale platform voor dwarslaesie. Zodra de muis goed is verdoofd, identificeert u het kleine uitsteeksel langs de middellijn achter de nek van het dier, het processus spinosus van de tweede borstwervel, of T2. Scheer het haar rond de processus spinosus T2 achter de nek en desinfecteer de huid met drie afwisselende rondes Iota 4-oplossing en 75% ethanol.Plaats vervolgens de muis in buikligging op de operatietafel. Breng een oogzalf aan om de ogen te beschermen. Plaats een kussen van 3 tot 4 millimeter dik onder de borst van het dier om de kromming van de cervicale wervelkolom te vergemakkelijken, waardoor de interlaminaire ruimte kan worden blootgesteld en ook een ongehinderde luchtdoorgang tijdens de operatie.Gebruik vervolgens, terwijl u onder een microscoop werkt, een scalpel om een longitudinale incisie van 1 tot 1,5 centimeter te maken, gecentreerd op de processus spinosus T2, en leg de fasciale laag bloot. Verwijder met behulp van een microschaar een deel van het vetweefsel boven T2 om de processus spinosus T2 duidelijk bloot te leggen. Scheid met behulp van de microschaar de bilaterale trapezius- en ruitvormige spieren van C5 naar T2 langs de middellijn.Scheid vervolgens de spieren op de lamina van C5 tot T2-wervels en gebruik micro-retractors om de spierlaag naar de zijkanten in te trekken. Snijd de multifidus en cervicale spinale spieren die aanwezig zijn op het oppervlak van de wervels. Lokaliseer de T2-wervel door het hoogste punt van de processus spinosus te identificeren.Ga vervolgens door met het achtereenvolgens onderzoeken van de processus spinosus vanaf T2, in de richting van het rostrale uiteinde, totdat de zesde halswervel of C6 is gelokaliseerd. Til met een pincet de C6-lamina op om het ruggenmerg bloot te leggen voordat u de lamina afsnijdt. Klem de facetgewrichten van C6 tot C7 vast met de wervelstabilisator en vergrendel deze.Lijn de gewichtstip uit met het blootliggende ruggenmerg en zorg ervoor dat de onderkant van de tip evenwijdig is aan het dorsale oppervlak van het ruggenmerg. Pas de mouw aan om het gewicht het ruggenmerg te laten samendrukken. Stop met aanpassen wanneer het gewicht een constante relatieve positie ten opzichte van het ruggenmerg behoudt.Verwijder het gewicht en de wervelstabilisator na een compressie van vijf minuten. Observeer onder de microscoop eventuele kleurveranderingen in het ruggenmerg als gevolg van de compressie. Spoel de operatieplaats af met steriele fosfaatgebufferde zoutoplossing.Gebruik vervolgens zuigkracht om het gebied schoon te maken. Hecht de spieren en huid in lagen met een polypropyleen niet-resorbeerbare 6-0 hechtdraad. Na het desinfecteren van het operatiegebied, plaatst u de muis op een warm kussentje totdat hij weer volledig bij bewustzijn is voordat u hem terugbrengt naar zijn kooi.De hematoxyline- en eosine- of H&E-kleuring van de sagittale sectie van het ruggenmerg suggereerde dat het beschadigde gebied in de grijze stof breder was in de groep met ernstig letsel dan dat in de groep met milde verwondingen. De coronale HE-secties toonden aan dat in beide groepen de laesie voornamelijk in grijze stof bestond. In de ernstige groep, hoewel de structuur van de witte stof rond de grijze stof meer werd beïnvloed, werd de omtrek nog steeds gehandhaafd.Immunofluorescerende kleuring onthulde ook dat, hoewel de witte stof rond grijze stof in de ernstige groep was aangetast, deze nog steeds relatief intact was. Zeven dagen na het letsel werden geen rode bloedcellen gevonden in sagittale HE-secties in de milde of de ernstige groep. De Pruisisch blauwe kleuring onthulde hemosiderose alleen in de ernstige groep.Immunofluorescentie onthulde gebieden met verhoogde GFAP- en Iba1-expressie bij zowel milde als ernstige verwondingen, wat wijst op een ontstekingsreactie en de vorming van een glialitteken. Ook vertoonde de ernstige groep een groter laesiegebied dan de milde groep. Magnetische resonantiebeeldvorming suggereerde dat er in beide groepen een hypo-intense signaalverandering was in de laesie met een hoge signaalomtrek.De ernstige groep vertoonde een significant groter hypo-intens signaalgebied. Door de zachte weefsels voor en achter de lamina zoveel mogelijk te verwijderen, wordt de ontspanning van de lamina en de bewezen schade aan de spansnede bij parallel snijden vergemakkelijkt. Het huidige protocolfasevolume modelleert het centrale navelstrengsyndroom en maakt een verder begrip en verkenning van het signaal mogelijk.

establishment-of-central-cord-syndrome-model-in-c57bl6j-mouse

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurowetenschap

Door de eenvoud van de ingreep en de robuuste gedrag dat eruit voortkomt, chronische vernauwing van de nervus ischiadicus is een van de vooraanstaande dierlijke modellen van neuropathische pijn. Binnen 24 uur na een operatie, wordt de pijn overgevoeligheid vastgesteld en kan kwantitatief gemeten worden met een von Frey aesthesiometer (mechanische test) en plantaire analgesie meter (thermische test).

Chronische Vernauwing van de nervus ischiadicus en Pijn Overgevoeligheid Testen bij ratten

Source: Lakshman, N., et al. A Neurosphere Assay to Evaluate Endogenous Neural Stem Cell Activation in a Mouse Model of Minimal Spinal Cord Injury. J. Vis. Exp. (2018).This video demonstrates the activation and migration of neural stem cells (NSCs) in a mouse spinal cord injury model. To expose the spinal cord, a vertebra from the thoracic region of the spine is removed from an anesthetized mouse. A superficial injury is then created in the white matter of the spinal cord using a bent needle,...

 A Minimal Spinal Cord Injury Model to Study Neural Stem Cell Activation and Migration

Een nieuwe techniek om een ​​reproduceerbare...

Gecontroleerde Cervicale Laceration Letsel in Muizen

Demyeliniserende ziekten kunnen worden gemodelleerd bij dieren door lokale toepassing van lysolecithin in het CZS. Een enkele injectie van lysolecithin in het ruggenmerg van muizen produceert een laesie die zich na verloop van tijd spontaan herstelt. Het doel is om factoren te bestuderen die betrokken zijn bij de- en remyelinisatie en middelen te testen om het herstel te verbeteren.

Experimentele Demyelinisatie en Remyelinisatie van Muriene Spinal Cord door Focal Injectie van lysolecithine

Fototrombose is een minimaal invasieve en zeer reproduceerbare procedure om focale ischemie in het ruggenmerg te induceren en dient als een model voor ruggenmergletsel bij muizen.

Photothrombosis-geïnduceerde focale ischemie als een model van Spinal Cord Injury in Muizen

Dit artikel beschrijft een methode voor het genereren van een reproduceerbare spinale cord compressie letsel (SCI) in de neonatale muis. Het model biedt een voordelige platform voor het bestuderen van mechanismen van adaptieve plasticiteit die ten grondslag liggen aan spontane functionele herstel.

Een Neonatale Mouse Spinal Cord Injury Compressie Model

Dit protocol beschrijft hoe u een nauwkeurige laminectomie voor inductie van stabiele transsectie-type dwarslaesie in het muismodel, met minimale bijkomende schade voor het onderzoek van de dwarslaesie te creëren.

Inductie van volledige transsectie-type ruggenmergletsel bij muizen

Minimaal invasieve technieken en een eenvoudig laboratoriumapparaat verbeteren de reproduceerbaarheid van het ruggenmergletselmodel door operatieve schade aan de proefdieren te verminderen en anatomisch morfologisch onderhoud mogelijk te maken. De methode is de moeite waard omdat de betrouwbare resultaten en reproduceerbare procedure het onderzoek naar de mechanismen van ziekteherstel vergemakkelijken.

Het opzetten van een muiskneuzingsletselmodel op basis van een minimaal invasieve techniek

Dit protocol demonstreert een uniek muizenslagmodel met een middelgroot infarct en een uitstekende overlevingskans. Dit model stelt preklinische beroerte-onderzoekers in staat om de duur van de ischemie te verlengen, verouderde muizen te gebruiken en functionele resultaten op lange termijn te beoordelen.

Een aangepast transcraniaal occlusiemodel voor de middelste cerebrale slagader om de uitkomsten van een beroerte bij oudere muizen te bestuderen

De naaldmethode van asymmetrische bilaterale stenose van de gemeenschappelijke halsslagaderstenose wordt voorgesteld om een muismodel te creëren voor vasculaire cognitieve stoornissen en dementie. Het resulteert in resultaten op langere termijn in vergelijking met eerder gevestigde modellen en is compatibel met live MRI. Visuele weergave die de procedure demonstreert, biedt een leidraad voor het beheersen van de operatie.

Een muismodel voor vasculaire cognitieve stoornissen en dementie op basis van naaldgeleide asymmetrische bilaterale stenose van de gemeenschappelijke halsslagader

Leer een betrouwbaar protocol voor het simuleren van centraal cordsyndroom in C57BL/6J-muizen. Deze methode verbetert herhaalbaarheid en minimaliseert operatieve schade voor consistent onderzoek naar ruggenmergletselmechanismen.

Vaststelling van het Central Cord Syndrome-model in C57BL/6J-muis

Meer video's verkennen