Name: Een workflow voor het kwantitatief bepalen van leeftijdsgebonden maculadegeneratielaesiespecifieke variaties in fundus-autofluorescentie (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-05-26T12:45:00.000+00:00
Duration: 8 min 54 s
Description: Leer een workflow voor kwantitatieve autofluorescentie-analyse bij leeftijdsgebonden maculadegeneratie. Deze methode meet specifieke regio's in het netvlies en onthult verlaagde intensiteiten in AMD-laesies zoals drusen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dit werk werd gefinancierd door de beurs van de Duitse Oogheelkundige Vereniging (DOG) voor doctoraatsstudenten (MW) en de NIH/NEI 1R01EY027948 (TA).

Onderzoek naar kwantitatieve autofluorescentie bij leeftijdsgebonden maculaire degeneratie

<ol><li>Schmitz-Valckenberg, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fundus+autofluorescence+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Retinal+and+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Fundus autofluorescence imaging.</a> Progress in Retinal and Eye Research. 81, 100893(2021).</li>
<li>Bermond, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autofluorescent+granules+of+the+human+retinal+pigment+epithelium%3A+phenotypes%2C+intracellular+distribution%2C+and+age-related+topography%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Autofluorescent granules of the human retinal pigment epithelium: phenotypes, intracellular distribution, and age-related topography.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 61 (5), 35(2020).</li>
<li>Bermond, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autofluorescent+organelles+within+the+retinal+pigment+epithelium+in+human+donor+eyes+with+and+without+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Autofluorescent organelles within the retinal pigment epithelium in human donor eyes with and without age-related macular degeneration.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 63 (1), 23(2022).</li>
<li>Delori, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+measurements+of+autofluorescence+with+the+scanning+laser+ophthalmoscope%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Quantitative measurements of autofluorescence with the scanning laser ophthalmoscope.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 52 (13), 9379-9390 (2011).</li>
<li>Fleckenstein, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Disease+Primers%22%5BJournal%5D)">Age-related macular degeneration.</a> Nature Reviews Disease Primers. 7 (1), 31(2021).</li>
<li>Greenberg, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence+in+healthy+eyes%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence in healthy eyes.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 54 (8), 5684-5693 (2013).</li>
<li>Sparrow, J. R., Boulton, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RPE+lipofuscin+and+its+role+in+retinal+pathobiology%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">RPE lipofuscin and its role in retinal pathobiology.</a> Experimental Eye Research. 80 (5), 595-606 (2005).</li>
<li>vonder Emde, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Natural+history+of+quantitative+autofluorescence+in+intermediate+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Retina%22%5BJournal%5D)">Natural history of quantitative autofluorescence in intermediate age-related macular degeneration.</a> Retina. 41 (4), 694-700 (2021).</li>
<li>Reiter, G. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Longitudinal+changes+in+quantitative+autofluorescence+during+progression+from+intermediate+to+late+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Retina%22%5BJournal%5D)">Longitudinal changes in quantitative autofluorescence during progression from intermediate to late age-related macular degeneration.</a> Retina. 41 (6), 1236-1241 (2021).</li>
<li>Gliem, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence+in+early+and+intermediate+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence in early and intermediate age-related macular degeneration.</a> JAMA Ophthalmology. 134 (7), 817-824 (2016).</li>
<li>Hussain, R. M., Gregori, N. Z., Ciulla, T. A., Lam, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacotherapy+of+retinal+disease+with+visual+cycle+modulators%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opinion+on+Pharmacotherapy%22%5BJournal%5D)">Pharmacotherapy of retinal disease with visual cycle modulators.</a> Expert Opinion on Pharmacotherapy. 19 (5), 471-481 (2018).</li>
<li>Ammar, M. J., Hsu, J., Chiang, A., Ho, A. C., Regillo, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+macular+degeneration+therapy%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Age-related macular degeneration therapy: a review.</a> Current Opinion in Ophthalmology. 31 (3), 215-221 (2020).</li>
<li>Ach, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipofuscin+redistribution+and+loss+accompanied+by+cytoskeletal+stress+in+retinal+pigment+epithelium+of+eyes+with+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Lipofuscin redistribution and loss accompanied by cytoskeletal stress in retinal pigment epithelium of eyes with age-related macular degeneration.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 56 (5), 3242-3252 (2015).</li>
<li>Zanzottera, E. C., Messinger, J. D., Ach, T., Smith, R. T., Curcio, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subducted+and+melanotic+cells+in+advanced+age-related+macular+degeneration+are+derived+from+retinal+pigment+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Subducted and melanotic cells in advanced age-related macular degeneration are derived from retinal pigment epithelium.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 56 (5), 3269-3278 (2015).</li>
<li>Cao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperreflective+foci%2C+optical+coherence+tomography+progression+indicators+in+age-related+macular+degeneration%2C+include+transdifferentiated+retinal+pigment+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Hyperreflective foci, optical coherence tomography progression indicators in age-related macular degeneration, include transdifferentiated retinal pigment epithelium.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 62 (10), 34(2021).</li>
<li>Zanzottera, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Project+MACULA+retinal+pigment+epithelium+grading+system+for+histology+and+optical+coherence+tomography+in+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">The Project MACULA retinal pigment epithelium grading system for histology and optical coherence tomography in age-related macular degeneration.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 56 (5), 3253-3268 (2015).</li>
<li>Sparrow, J. R., Duncker, T., Schuerch, K., Paavo, M., de Carvalho, dR. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lessons+learned+from+quantitative+fundus+autofluorescence%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Retinal+and+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Lessons learned from quantitative fundus autofluorescence.</a> Progress in Retinal and Eye Research. 74, 100774(2020).</li>
<li>Schmitz-Valckenberg, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Correlation+between+the+area+of+increased+autofluorescence+surrounding+geographic+atrophy+and+disease+progression+in+patients+with+AMD%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Correlation between the area of increased autofluorescence surrounding geographic atrophy and disease progression in patients with AMD.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 47 (6), 2648-2654 (2006).</li>
<li>Ach, T., Bermond, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autofluorescence+of+the+human+retinal+pigment+epithelium+in+normal+aging+and+in+age-related+macular+degeneration%3A+histology+and+clinical+correlation%5BTitle%5D)+AND+%22Klinische+Monatsblatter+Fur+Augenheilkunde%22%5BJournal%5D)">Autofluorescence of the human retinal pigment epithelium in normal aging and in age-related macular degeneration: histology and clinical correlation.</a> Klinische Monatsblatter Fur Augenheilkunde. 236 (5), 672-681 (2017).</li>
<li>Pollreisz, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualizing+melanosomes%2C+lipofuscin%2C+and+melanolipofuscin+in+human+retinal+pigment+epithelium+using+serial+block+face+scanning+electron+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Visualizing melanosomes, lipofuscin, and melanolipofuscin in human retinal pigment epithelium using serial block face scanning electron microscopy.</a> Experimental Eye Research. 166, 131-139 (2018).</li>
<li>Bernstein, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((meso-zeaxanthin%3A+The+basic+and+clinical+science+underlying+carotenoid-based+nutritional+interventions+against+ocular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Retinal+and+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">meso-zeaxanthin: The basic and clinical science underlying carotenoid-based nutritional interventions against ocular disease.</a> Progress in Retinal and Eye Research. 50, 34-66 (2016).</li>
<li>Göbel, A. P., Fleckenstein, M., Heeren, T. F. C., Holz, F. G., Schmitz-Valckenberg, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In-vivo+mapping+of+drusen+by+fundus+autofluorescence+and+spectral-domain+optical+coherence+tomography+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Graefe%27s+Archive+for+Clinical+and+Experimental+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">In-vivo mapping of drusen by fundus autofluorescence and spectral-domain optical coherence tomography imaging.</a> Graefe's Archive for Clinical and Experimental Ophthalmology. 254 (1), 59-67 (2016).</li>
<li>Pfau, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesopic+and+dark-adapted+two-color+fundus-controlled+perimetry+in+geographic+atrophy+secondary+to+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Retina%22%5BJournal%5D)">Mesopic and dark-adapted two-color fundus-controlled perimetry in geographic atrophy secondary to age-related macular degeneration.</a> Retina. 40 (1), 169-180 (2020).</li>
<li>vonder Emde, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesopic+and+dark-adapted+two-color+fundus-controlled+perimetry+in+choroidal+neovascularization+secondary+to+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Vision+Science+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Mesopic and dark-adapted two-color fundus-controlled perimetry in choroidal neovascularization secondary to age-related macular degeneration.</a> Translational Vision Science and Technology. 8 (1), 7(2018).</li>
<li>Aumann, S., Donner, S., Fischer, J., Müller, F. Optical coherence tomography (OCT): principle and technical realization. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aAumann%2C+S+%22High+Resolution+Imaging+in+Microscopy+and+Ophthalmology%3A+New+Frontiers+in+Biomedical+Optics%22">High Resolution Imaging in Microscopy and Ophthalmology: New Frontiers in Biomedical Optics</a>. , Cham (CH), Springer. 59-85 (2019).</li>
<li>Schindelin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FIJI%3A+an+open-source+platform+for+biological-image+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">FIJI: an open-source platform for biological-image analysis.</a> Nature Methods. 9 (7), 676-682 (2012).</li>
<li>Kleefeldt, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence%3A+advanced+analysis+tools%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Vision+Science+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence: advanced analysis tools.</a> Translational Vision Science and Technology. 9 (8), 2(2020).</li>
<li>Hong, I. H., Jung, W. H., Lee, J. H., Chang, I. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macular+pigment+optical+density+in+the+Korean+population%3A+a+cross+sectional+study%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Korean+Medical+Science%22%5BJournal%5D)">Macular pigment optical density in the Korean population: a cross sectional study.</a> Journal of Korean Medical Science. 35 (5), e30(2020).</li>
<li>Putnam, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+imaging+of+macular+pigment+optical+density+and+spatial+distribution%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+and+Experimental+Optometry%22%5BJournal%5D)">Clinical imaging of macular pigment optical density and spatial distribution.</a> Clinical and Experimental Optometry. 100 (4), 333-340 (2017).</li>
<li>Zweifel, S. A., Spaide, R. F., Curcio, C. A., Malek, G., Imamura, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reticular+pseudodrusen+are+subretinal+drusenoid+deposits%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Reticular pseudodrusen are subretinal drusenoid deposits.</a> Ophthalmology. 117 (2), 303-312 (2010).</li>
<li>Curcio, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subretinal+drusenoid+deposits+in+non-neovascular+age-related+macular+degeneration%3A+morphology%2C+prevalence%2C+topography%2C+and+biogenesis+model%5BTitle%5D)+AND+%22Retina%22%5BJournal%5D)">Subretinal drusenoid deposits in non-neovascular age-related macular degeneration: morphology, prevalence, topography, and biogenesis model.</a> Retina. 33 (2), 265-276 (2013).</li>
<li>Spaide, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Outer+retinal+atrophy+after+regression+of+subretinal+drusenoid+deposits+as+a+newly+recognized+form+of+late+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Retina%22%5BJournal%5D)">Outer retinal atrophy after regression of subretinal drusenoid deposits as a newly recognized form of late age-related macular degeneration.</a> Retina. 33 (9), 1800-1808 (2013).</li>
<li>Reiter, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+lens+opacities+and+cataract+severity+on+quantitative+fundus+autofluorescence+as+a+secondary+outcome+of+a+randomized+clinical+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Influence of lens opacities and cataract severity on quantitative fundus autofluorescence as a secondary outcome of a randomized clinical trial.</a> Scientific Reports. 11 (1), 12685(2021).</li>
<li>Gliem, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence+in+pseudoxanthoma+elasticum%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence in pseudoxanthoma elasticum.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 58 (14), 6159-6165 (2017).</li>
<li>Burke, T. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence+in+recessive+Stargardt+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence in recessive Stargardt disease.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 55 (5), 2841-2852 (2014).</li>
<li>Armenti, S. T., Greenberg, J. P., Smith, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence+for+the+evaluation+of+retinal+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence for the evaluation of retinal diseases.</a> Journal of Visualized Experiments. (109), 53577(2016).</li>
<li>Pröbster, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence+in+the+developing+and+maturing+healthy+eye%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Vision+Science+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence in the developing and maturing healthy eye.</a> Translational Vision Science and Technology. 10 (2), 15(2021).</li>
<li>Duncker, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence+and+optical+coherence+tomography+in+PRPH2%2FRDS-+and+ABCA4-associated+disease+exhibiting+phenotypic+overlap%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence and optical coherence tomography in PRPH2/RDS- and ABCA4-associated disease exhibiting phenotypic overlap.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 56 (5), 3159-3170 (2015).</li>
</ol>

Leon von der Emde meldt betalingen te hebben ontvangen van Heidelberg Engineering. Merten Mallwitz meldt geen financiële bekendmakingen. Kenneth R. Sloan meldt ook geen financiële bekendmakingen. Frank G. Holz rapporteert consulting/persoonlijke betalingen voor Acucela, Alcon (C), Gyroscoop Allergan Apellis, Bayer Bioeq/Formycon, CenterVue, Roche/Genentech, Geuder, Ivericbio, NightStarX, Novartis, Optos, Oxurion, Pixium Vision, Stealth BioTherapeutics, Zeiss en GRADE Reading center. Thomas Ach rapporteert consulting/persoonlijke betalingen voor Bayer, Apellis, Roche en Novartis.

Deze workflow biedt een stapsgewijze handleiding voor het gebruik van open-source FIJI-plug-intools om AF van AMD-specifieke laesies te bepalen en te vergelijken. De plug-ins bieden gebruiksvriendelijke sjablonen die geen codeerkennis vereisen en die door artsen kunnen worden toegepast zonder technische ondersteuning27. Voor zover wij weten, zijn deze tools uniek in hun soort voor laesie-specifieke AF-kwantificering.
QAF-waarden variëren van nature over het netvlies, met waarden die hoger zijn aan de periferie en lager in de macula als gevolg van ongelijke verdeling van lipofuscine en melanolipofuscine in het netvlies, de lage AF van bloedvaten en ongelijke verdeling van maculaire pigmenten. Vanwege de grote variatie van natuurlijk voorkomende QAF-niveaus in het netvlies, is het rechtstreeks analyseren van absolute QAF-waarden van laesies geen veelbelovende benadering. Een hypoautofluorescerende laesie in de periferie kan bijvoorbeeld nog steeds hogere absolute QAF-waarden hebben dan de fysiologische fluorescentieniveaus van de macula. Het gebruik van een StandardRetina en het gebruik van z-scores om de fluorescentieniveaus van drusen te meten, corrigeren voor deze natuurlijk voorkomende variantie van QAF-waarden.
Een z-score is een numerieke meting van de relatie van een interessegebied met het gemiddelde in de StandardRetina. Het wordt berekend door het gemiddelde van een individu af te trekken van het gemiddelde van de StandardRetina op dezelfde locatie en vervolgens het resultaat te delen door de standaarddeviatie. Deze standaardisatie maakt het mogelijk om verschillende QAF-beelden met elkaar te vergelijken, omdat de z-score aangeeft hoeveel standaarddeviaties een waarde afwijkt van het gemiddelde. Een positieve z-score geeft aan dat de waarde boven het gemiddelde ligt, terwijl een negatieve z-score aangeeft dat deze onder het gemiddelde ligt.
Het is belangrijk op te merken dat er mogelijke valkuilen kunnen zijn waarmee rekening moet worden gehouden. Hoewel deze methode rekening houdt met de variërende hoeveelheid AF-niveaus in de fundus, is het misschien nog steeds niet de meest nauwkeurige manier om de AF van een RPE te meten en te vergelijken. Individuen hebben verschillende niveaus en topografie van maculaal luteaal pigment, en laesies kunnen ook de doorschijnendheid van het bovenliggende netvlies beïnvloeden28,29. Het is daarom aannemelijk dat de gemeten verminderde AF in gebieden met SDD's (zie representatieve resultaten) een gevolg is van schaduweffecten in plaats van verminderde fluoroforen in de RPE30,31,32.
We werken momenteel aan een workflow om rekening te houden met retinale reflectiviteit, dikte en gekwantificeerd maculapigment (met behulp van groene en blauwe AF) met lineaire gemengde modellen. Bovendien gebruikt QAF tot nu toe een leeftijdsafhankelijke correctiefactor om rekening te houden met lenticulaire troebeling die geen rekening houdt met interindividuele verschillen in de lenticulaire troebeling van deelnemers van een vergelijkbare leeftijdvan 33 jaar. Daarom werken we momenteel aan een workflow voor een gepersonaliseerde correctiefactor van lenticulaire autofluorescentie en vertroebeling. Om op betrouwbare wijze informatie over AF uit kleine laesies te extraheren, is een adequate test-hertestbetrouwbaarheid van QAF-beelden nodig. Om verder onderscheid te maken tussen die QAF-beelden waarbij een meer gedetailleerde analyse haalbaar is, onderzoeken we "QAF-beeldbetrouwbaarheidsindices" die de test-hertestbetrouwbaarheid van QAF-beelden kunnen voorspellen. In het huidige stadium is de voorzichtige aanpak om dubbele beelden te verkrijgen en de betrouwbaarheid van laesiespecifieke AF opnieuw te testen.
De gepresenteerde methode voor het aanvullend analyseren van de iso-hulls van laesies was technisch moeilijk te implementeren, omdat iso-hulls van naburige laesies samensmelten. Gebieden met gefuseerde iso-rompen kunnen verschillend worden gekarakteriseerd, afhankelijk van welke laesie wordt overwogen. Onze oplossing was om alle laesies van één type als één laesie te beschouwen en hun periferie te analyseren als een gezamenlijke iso-romp. Deze methode vermindert echter drastisch de mogelijkheid om de iso-hulls van individuele drusen te meten en kan worden beschouwd als een verdere valkuil van deze techniek. Meer technisch geavanceerde methoden om rekening te houden met gefuseerde iso-hulls of opgeschorte rapportage van AF in gebieden met gefuseerde iso-hulls zouden de analyse van AF in de omtrek van laesies in de toekomst kunnen vergemakkelijken.
We gebruikten LMD als modelziekte voor deze studie. De workflow kan ook worden aangepast om laesies bij andere ziekten te bestuderen. Tot nu toe is QAF gebruikt bij veel chorioretinale aandoeningen, waaronder recessieve ziekte van Stargardt, Bestrophin-1-geassocieerde ziekten, verschillende vormen van retinitis pigmentosa, acute zonale occulte uiterlijke retinopathie, pseudoxanthoma elasticum en andere 17,33,34,35,36,37 . Aangezien deze workflow gebruikmaakt van open-source software, moedigen we anderen aan om dit werk te dupliceren bij het bepalen van laesiespecifieke AF en onze kennis van netvliesaandoeningen uit te breiden. Samenvattend presenteren we een workflow om AF-niveaus van verschillende retinale laesies in de macula te bepalen en te vergelijken. Deze workflow maakt de weg vrij voor een meer diepgaande analyse van AF en zou de ontwikkeling van nieuwe biomarkers in AMD en daarbuiten kunnen vergemakkelijken.

Fundus autofluorescentie (FAF) beeldvorming biedt een niet-invasieve mapping van natuurlijk en pathologisch voorkomende fluoroforen van de oculaire fundus1. De meest voorkomende blauwe (488 nm excitatie) autofluorescentie (AF) exciteert lipofuscine en melanolipofuscinekorrels van het retinale pigmentepitheel (RPE)2,3,4. De verdeling en toename/afname van korrels spelen een centrale rol bij normale veroudering en verschillende netvliesaandoeningen, waaronder leeftijdsgebonden maculadegeneratie (AMD)5.
Een verdere ontwikkeling van FAF, kwantitatieve fundus autofluorescentie (QAF), maakt het nu mogelijk om topografisch opgeloste retinale AF-intensiteiten 4,6 nauwkeurig te bepalen. Door een referentie op te nemen in het optische pad van het FAF-beeldvormingsapparaat, kunnen AF-intensiteiten worden vergeleken tussen apparaten, tijdstippen en onderwerpen. Deze techniek heeft geresulteerd in een paradigmaverschuiving met betrekking tot een veronderstelde pathogenetische factor in LMD, waarvan lange tijd werd gespeculeerd dat deze te wijten was aan overmatige accumulatie van lipofuscine in RPE-cellen7. Histologische en klinische kwantificering van AF heeft echter een afname van AF bij AMD aangetoond (als gevolg van de herverdeling en het verlies van autofluorescerende lipofuscine en melanolipofuscinekorrels), in plaats van de voorgestelde toename van AF 8,9,10.
Het monitoren van AF heeft klinische implicaties. Von der Emde et al. en anderen hebben aangetoond dat AF niet alleen afneemt, maar ook verder afneemt in het beloop van AMD in intermediaire AMD-ogen met een hoog risico 8,9. Bovendien suggereren histologische studies dat de meeste door AMD aangetaste RPE-cellen een karakteristiek gedrag vertonen met granulaataggregatie en extrusie voorafgaand aan RPE-celverlies via subductie, vervelling, migratie of atrofie 13,14,15,16. Dit geeft verder aan dat AF-verlies een trigger of een surrogaatsignaal kan zijn van dreigende ziekteprogressie.
QAF-studies hebben tot nu toe alleen AF globaal geëvalueerd aan de achterste pool, met behulp van geprefabriceerde rasterpolaire coördinatensystemen (bijv. QAF8/Delori Grid)17. Het gebruik van geprefabriceerde rasters om AF te meten, resulteert in meerdere AF-waarden op vooraf bepaalde gebieden per oog van een onderwerp. Door AF-waarden op deze manier te onderzoeken, kunnen lokale veranderingen in gebieden met pathologisch veranderde AF over het hoofd worden gezien, bijvoorbeeld in AMD bovenop of in de buurt van drusen of subretinale drusenoïde afzettingen (SDD's). Drusen, en in hogere mate SDD's, worden in verband gebracht met een hoog risico op het ontwikkelen van late LMD en verlies van gezichtsvermogen. Drusen in het bijzonder hebben een typische cyclus van toename in omvang gedurende vele jaren en kunnen snel verslechteren voorafgaand aan atrofie. Het is denkbaar dat bijvoorbeeld globaal AF afneemt bij LMD, maar toeneemt of zelfs verder afneemt in en rond deze specifieke ziektegerelateerde focale laesies.
Verschillende lokale AF-patronen kunnen ook prognostische relevantie hebben voor ziekteprogressie. Autofluorescentieniveaus kunnen bijvoorbeeld worden gebruikt om te beoordelen of drusen in omvang toenemen of al in regressie zijn naar atrofie. Het is al aangetoond dat veranderde AF-perilesiepatronen bij geografische atrofie een grote invloed hebben op de progressie van atrofie in de loop van de tijd18. Bovendien zouden lokale autofluorescentiepatronen meer details kunnen onthullen over de gezondheid van de RPE. Vaak toont de optische coherentietomografie (OCT) hyperreflectie in de choriocapillaris, hoewel de RPE-laag intact lijkt. Een multimodale aanpak die lokale QAF-waarden en OCT combineert, kan helpen bij het differentiëren van laesies met een hoog risico op RPE-verstoring en dreigende atrofie.
Een van de redenen waarom ruimtelijk opgeloste analyses in studies niet zijn uitgevoerd, is omdat de meest gebruikte software van de fabrikant geen hulpmiddel biedt voor dit soort analyses. AF-eigenschappen van verschillende laesies, afhankelijk van het stadium van de LMD-ziekte, zouden de pathogenese van AMD verder kunnen verklaren. Daarom zou een instrument om regionale, laesiespecifieke AF te meten wenselijk zijn. Om laesies die zich over het hele netvlies bevinden nauwkeurig te vergelijken, heeft de workflow een manier nodig om rekening te houden met verschillende gradaties van AF in de menselijke fundus19. Het meest centraal is AF karakteristiek lager vanwege de schaduweffecten van maculapigment en verschillende korreltellingen20,21.
AF bereikt zijn piek bij ~9° (afstand tot de fovea in alle richtingen) en neemt perifeer in grotere mate af4. Daarom, als men de absolute waarden van AF-niveaus van zachte drusen (gelokaliseerd in de fovea en parafovea in gebieden met lage AF) en SDD's (paracentraal in gebieden met hoge AF) zou vergelijken, zouden de resultaten niet vergelijkbaar zijn22. Geïnspireerd door het werk van Pfau et al. en het concept van gevoeligheidsverlies (het corrigeren van gevoeligheid gemeten in AMD voor de heuvel van het gezichtsvermogen [afnemende gevoeligheid van het netvlies met afstand tot de fovea] van gezonde controles) voor fundusgecontroleerde perimetrie, wordt AF vergeleken met gestandaardiseerde AF-waarden in de macula23,24. De resultaten worden gerapporteerd als z-scores (numerieke meting van de relatie van een interessegebied met het gemiddelde).
Het doel van deze studie is het evalueren van het gebruik van een nieuw hulpmiddel voor het meten van lokale QAF-niveaus in verschillende soorten laesies bij patiënten met AMD. Deze tool is ontworpen om autofluorescentieniveaus te meten van laesies die zijn geïdentificeerd op OCT-scans. Dit maakt het mogelijk om lokale autofluorescentieniveaus in laesies, zoals zachte drusen of SDD's, te beoordelen en maakt het mogelijk om AF-veranderingen van laesies in de loop van de tijd te volgen. Het potentiële nut van deze tool is om een nieuwe structurele biomarker mogelijk te maken die de gezondheid van de RPE schat en mogelijk prognostische waarde heeft voor de onderzochte laesies.

<table><tbody><tr><td>BatchStandardRetina plugin</td><td>n.v.t.</td><td>n.v.t.</td><td>n.v.t.</td></tr><tr><td>FIJI (Image J)</td><td>n.v.t.</td><td>n.v.t.</td><td>n.v.t.</td></tr><tr><td>Mark_Bscans_OCT plugin</td><td>n.v.t.</td><td>n.v.t.</td><td>n.v.t.</td></tr><tr><td>Microspft office</td><td>Microsoft</td><td>n.v.t.</td><td>n.v.t.</td></tr><tr><td>QAF_xml_reader plugin</td><td>n.v.t.</td><td>n.v.t.</td><td>n.v.t.</td></tr><tr><td>Register_OCT_2 plugin</td><td>n.v.t.</td><td>n.v.t.</td><td>n.v.t.</td></tr><tr><td>Spectralis</td><td>Heidelberg Engineering</td><td>n.v.t.</td><td>QAF-extensie</td></tr><tr><td>StandardRetina plugin</td><td>n.v.t.</td><td>n.v.t.</td><td>n.v.t.</td></tr></tbody></table>

een workflow voor het kwantitatief bepalen van leeftijdsgebonden maculadegeneratielaesiespecifieke variaties in fundus-autofluorescentie

A Workflow to Quantitatively Determine Age-Related Macular Degeneration Lesion-Specific Variations in Fundus Autofluorescence

Fundus autofluorescentie (FAF) beeldvorming maakt het mogelijk om intrinsieke fluoroforen van de oculaire fundus niet-invasief in kaart te brengen, met name het retinale pigmentepitheel (RPE), nu kwantificeerbaar met de komst van confocale scanning laser oftalmoscopie gebaseerde kwantitatieve autofluorescentie (QAF). Het is aangetoond dat QAF over het algemeen afneemt aan de posterieure pool bij leeftijdsgebonden maculadegeneratie (AMD). De relatie tussen QAF en verschillende AMD-laesies (drusen, subretinale drusenoïde afzettingen) is nog onduidelijk.
Dit artikel beschrijft een workflow voor het bepalen van laesiespecifieke QAF in AMD. Er wordt gebruik gemaakt van een multimodale in vivo beeldvormingsbenadering, met inbegrip van, maar niet beperkt tot, spectrale domein, optische coherentietomografie (SD-OCT), maculavolumescanning en QAF. Met behulp van aangepaste FIJI-plug-ins wordt het bijbehorende QAF-beeld uitgelijnd met het nabij-infraroodbeeld van de SD-OCT-scan (karakteristieke oriëntatiepunten; d.w.z. vertakkingen van vaten). De foveola en de rand van de oogzenuwkop worden gemarkeerd in de OCT-beelden (en overgebracht naar het geregistreerde QAF-beeld) voor een nauwkeurige positionering van de analyseroosters.
AMD-specifieke laesies kunnen vervolgens worden gemarkeerd op individuele OCT BScans of het QAF-beeld zelf. Normatieve QAF-kaarten worden gemaakt om rekening te houden met het variërende gemiddelde en de standaarddeviatie van QAF-waarden gedurende de fundus (QAF-beelden van een representatieve AMD-groep werden gemiddeld om normatieve standaard retinale QAF AMD-kaarten te maken). De plug-ins registreren de X- en Y-coördinaten, de z-score (een numerieke meting die de QAF-waarde beschrijft in relatie tot het gemiddelde van AF-kaarten in termen van standaarddeviatie van het gemiddelde), de gemiddelde intensiteitswaarde, de standaarddeviatie en het aantal gemarkeerde pixels. De tools bepalen ook z-scores uit de grenszone van gemarkeerde laesies. Deze workflow en de analysetools zullen het begrip van de pathofysiologie en de interpretatie van klinische AF-beelden bij AMD verbeteren.

De uitvoer weergeven Om de resultaten adequaat te analyseren en er conclusies uit te trekken, is het belangrijk om het uitvoerbestand van Mark_Bscans_OCT te begrijpen. De eerste drie kolommen zijn gelabeld na de case-ID, de lateraliteit van het bestand en de gekozen beeldvormingsmodaliteit. De vierde kolom wordt aangeduid met de modus en heeft het label z-score. Merk op dat op het moment van schrijven van deze tekst Mark BScans alle laesies slechts in één keer kan berekenen; De rijen verwijzen naar iso-hulls, waarvan de afstanden tot de buitenrand van de laesie worden gespecificeerd in de onderste en bovenste kolommen van de spreadsheet. Iso-hulls meten AF in z-scores (in het geval van QAF) in een gespecificeerde omtrek rond de laesie. Merk op dat de minimumwaarde van een pixel in een iso-hull kan worden gevonden in de kolommen met het label min, de kolommen met het label mediaan, max, gemiddelde en stdev, respectievelijk de mediaan, het maximum, het gemiddelde en de standaarddeviatie van het gemiddelde van de pixelwaarden in eeniso-hull. De kolom n bevat het totaal aantal pixels in een iso-hull. Figuur 1 toont een enkelvoudig gemarkeerde zachte drusen van een 84-jarige mannelijke patiënt met intermediaire leeftijdsgebonden maculadegeneratie (iAMD).
Figuur 2 toont het linkeroog van een representatieve patiënt met SDD's gemarkeerd met de QAF-Workflow tool (Figuur 3). SDD's bij deze patiënt waren geassocieerd met verlaagde AF (z-score = -0,4 ± 0,2). Evenzo vertoonden de iso-hulls rond de SDD een verminderde AF (bijv. de dichtstbijzijnde iso-hull = -0,3 ± 0,3) in vergelijking met de StandardRetina. Een plausibele verklaring voor dit fenomeen zou schaduweffecten (verminderde doorschijnendheid) van SDD-laesies op de RPE kunnen zijn. Het gebruik van SDD's was voorbeeldig. De tool maakt het ook mogelijk om lokale AF-niveaus in andere laesies, zoals drusen, te beoordelen. Bovendien maakt de tool het mogelijk om AF-veranderingen van laesies in de loop van de tijd te volgen.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65238/65238fig01.jpg"> Figuur 1: Een enkelvoud gemarkeerde zachte drusen van een 84-jarige mannelijke patiënt met intermediaire leeftijdsgebonden maculadegeneratie (iAMD). (A) Het QAF-beeld van een linkeroog met de gemarkeerde drusen. (B) Close-up van de drusen: bruin centrum dat de gemarkeerde drusen vertegenwoordigt en gekleurde banden die de omringende iso-rompen voorstellen. De onderstaande tabel geeft het uitvoerbestand weer. QAF-drusenwaarden worden vergeleken met overeenkomstige QAF-waarden van de overeenkomstige excentriciteit van de StandardRetina. Dit resulteert in z-scores die de afwijking van het gemiddelde van niet-getroffen gebieden vertegenwoordigen. Het blauwe kader toont van links naar rechts: de casus-ID, lateraliteit van het oog, gebruikte modaliteit en de gewenste output (in dit geval z-scores). Kolommen binnen het oranje vak geven de grenzen van het gemeten gebied in millimeters aan (ondergrens = ondergrens, bovengrens = bovengrens). Het groene vak labelt de kolommen met de QAF-metingen. Van links naar rechts bevatten deze het minimum, de mediaan, het maximum, het aantal pixels, het gemiddelde en de standaarddeviatie van het gemiddelde. Elke rij vertegenwoordigt een iso-hull, rijen binnen het blauwe vak vertegenwoordigen waarden binnen de laesie en rijen binnen het paarse vak tonen de iso-hulls rond elke laesie (van boven naar beneden met toenemende afstand tot de laesie). Schaalbalk = 1 mm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65238/65238fig01large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze afbeelding te bekijken.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65238/65238fig02.jpg"> Figuur 2: Gemarkeerde SDD's in een QAF-afbeelding van een 80-jarige vrouwelijke patiënt met vroege AMD. (A) SDD's zijn te zien in de QAF-afbeelding. Dezelfde QAF-afbeelding wordt weergegeven met ingedrukte annotaties van SDD's. (B) Rond elke gemarkeerde laesie zijn de iso-hulls afgebeeld met kleurcodering (lichtgroen, donkergroen en rood). (C) Een vergrote versie van de blauwe rechthoek. De buitenrand van elke SDD is blauw gemarkeerd. Afkortingen: QAF = kwantitatieve autofluorescentie; LMD = leeftijdsgebonden maculadegeneratie; SDD = subretinale drusenoïde afzetting. Schaalbalk = 1 mm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65238/65238fig02large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze afbeelding te bekijken.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65238/65238fig03.jpg"> Figuur 3: Workflow om de AF van laesies te bepalen. Deze afbeelding visualiseert de softwareplug-ins die nodig zijn om laesiespecifieke AF te bepalen. (A) Afbeelding toont een kleurgecodeerd QAF-beeld dat kan worden gebruikt om de verdeling van QAF-waarden te visualiseren, maar mag niet worden gebruikt voor verdere analyse. (B) Op de voorgrond wordt een QAF-beeld getoond, met op de achtergrond het infraroodbeeld van de SD-OCT-scan. Dit wordt verondersteld de uitlijning te visualiseren met behulp van vertakkingen van bloedvaten. Dit kan met behulp van de Register_OCT_2 plug-in. (C) Een StandardRetina die wordt gebruikt om de z-scorewaarden van laesies te meten. StandardRetinas kunnen worden gemaakt met behulp van StandardRetina/BatchStandardRetina. (D) Een BScan met blauwe pijlen die naar SDD's wijzen, die worden gemarkeerd door gele lijnen (let op: laesies worden altijd gemarkeerd onder de RPE, onafhankelijk van de locatie in de z-richting) wordt afgebeeld. (E) Alle gemarkeerde laesies zijn afgedrukt op een QAF-afbeelding (zie figuur 1). De laatste twee stappen worden uitgevoerd met behulp van de Mark_BScans_OCT plug-in. Afkortingen: AF = autofluorescentie; QAF = kwantitatieve autofluorescentie; SDD = subretinale drusenoïde afzetting; IR = infrarood; RPE = retinaal pigmentepitheel; SD-OCT = spectraal domein optische coherentietomografie. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65238/65238fig03large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.</a>

Dit onderzoek beschrijft een workflow om autofluorescentieniveaus te bepalen en te vergelijken uit individuele interessegebieden (bijv. drusen en subretinale drusenoïde afzettingen bij leeftijdsgebonden maculadegeneratie [AMD]), rekening houdend met variërende autofluorescentieniveaus in de fundus.

Een workflow voor het kwantitatief bepalen van leeftijdsgebonden maculadegeneratielaesiespecifieke variaties in fundus-autofluorescentie

Fundus autofluorescence (FAF) imaging allows the noninvasive mapping of intrinsic fluorophores of the ocular fundus, particularly the retinal pigment ...

Tot nu toe was kwantitatieve autofluorescentie- of QAF-analyse beperkt tot geprefabriceerde roosters die globale autofluorescentie van de achterste pool van het oog analyseerden. Ons protocol maakt het mogelijk om autofluorescentie-intensiteiten van specifieke interessegebieden te meten en te vergelijken. QAF onthulde verminderde autofluorescentie-intensiteiten bij leeftijdsgebonden maculadegeneratie.In feite was deze belangrijke bevinding in tegenspraak met de historische kijk op pathologische lipofuscine-accumulaties in de AMD. Tegenwoordig kunnen de klinische bevindingen mooi worden bevestigd door nieuwe histologische gegevens over het retinale pigmentepitheel op cellulair niveau. De karakteristieke autofluorescentieniveaus van de oculaire fundus vertonen sterke regionale verschillen.Er lijkt een sterke relatie te zijn tussen autofluorescentie en de dichtheid van de fotoreceptoren van de staafjes. Voor een nauwkeurige vergelijking van autofluorescentie moet rekening worden gehouden met regionale verschillen, wat een uitdaging is. We konden voor het eerst aantonen dat de typische AMD-laesies zoals drusen verder verminderde autofluorescentie-intensiteiten vertonen naast de over het algemeen verlaagde autofluorescentieniveaus bij deze patiënten.We richten ons momenteel op spectrale analyse van het uitgezonden licht van fluoroforen van het retinale pigmentepitheel in zowel in vivo als ex vivo settings. Met deze aanpak hopen we betere informatie te krijgen over de fysiologie en pathofysiologie van fotoreceptoren en het retinale pigmentepitheel in gezonde en overleden ogen.

a-workflow-to-quantitatively-determine-age-related-macular

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Het retinale pigmentepitheel (RPE) ondersteunt de sensorische retina door het recyclen van bijproducten van de visuele cyclus, die zich ophopen als lipofuscine. Deze producten zijn autofluorescent en kunnen kwalitatief in vivo worden geïmaged. Hier beschrijven we een methode om RPE lipofuscine kwantitatief te beeldvormen met behulp van confocale scanlaser oftalmoscopie.

Kwantitatieve fundus autofluorescentie voor de beoordeling van Netvliesaandoeningen

Laboratoriumtests kunnen gebruikmaken van de prognostische waarde van de longitudinale optische coherentietomografie (OCT) -gebaseerde multimodale beeldvorming van leeftijdsgebonden maculaire degeneratie (AMD). Menselijke donorogen met en zonder AMD worden in beeld gebracht met behulp van OCT, kleur, nabij-infrarood reflectantie scanning laser oftalmoscopie, en autofluorescentie op twee excitatie golflengten voorafgaand aan weefselsectie.

Ex Vivo OCT-gebaseerde multimodale beeldvorming van menselijke donorogen voor onderzoek naar leeftijdsgebonden maculaire degeneratie

Het bepalen van donorcel innesteling vormt een uitdaging in de muis beenmerg transplantatie modellen die goed gedefinieerde fenotypische merkers missen. We beschreven een methode om mannelijke donor cel innesteling te kwantificeren in vrouwelijke transplantatie ontvangende muizen. Deze methode kan worden gebruikt in alle muizenstammen voor de studie van HSC functies.

Met behulp van kwantitatieve real-time PCR voor donorcel Engraftment bepalen in een concurrerende Murine beenmergtransplantatie Model

Indocyaninegroen angiografie (of ICGA) uitgevoerd door staartaderinjectie biedt een hoge kwaliteit ICGA tijdsverloop afbeeldingen om afwijkingen karakteriseren muis choroidea.

Detecteren van afwijkingen in Choroïdale vaatstelsel in een muismodel van Leeftijdsgebonden Macula Degeneratie door Time-cursus indocyaninegroen angiografie

De Focus Formation Assay verschaft een eenvoudige methode om de transformerende potentieel van een kandidaat oncogen beoordelen.

Focus Formation: A-cel gebaseerde test om de oncogene potentiaal van een Gene bepalen

Retinale beeldanalyse is een onopvallende procedure voor het visualiseren van de microcirculatie. De gevolgen van hart-en vaatziekten risicofactoren kunnen leiden tot veranderingen van het netvlies kalibers vaartuig. De procedures voor fundus foto en stappen te nemen voor het berekenen van het vaartuig kalibers worden beschreven.

Fundus fotografie als een handig hulpmiddel om microvasculaire Reacties op hart-en vaatziekten Risicofactoren in epidemiologische studies Studie

Microbiële populaties bevatten aanzienlijke cel heterogeniteit, die de algehele gedrag kan dicteren. Moleculaire probe analyse door middel van flowcytometrie kan fysiologische staten van cellen te bepalen, maar de toepassing ervan varieert tussen soorten. Deze studie geeft een protocol naar cel sterfte binnen een cyanobacterie bevolking nauwkeurig bepalen, zonder onderschatten of opname vals positieve resultaten.

Moleculaire Probe Optimization to Cell Sterfte Bepaal in een fotosynthetische organisme (<em&gt; Microcystis aeruginosa</em&gt;) Met behulp van flowcytometrie

Hier presenteren we een protocol om permanent distale middelste cerebrale slagader occlusie bij oudere vrouwelijke ratten te produceren met gelijktijdige afsluiting van de halsslagaders om grote corticale infarcten en aanhoudende tekorten te genereren. We tonen de bevestiging van de laesie grootte met behulp van structurele MRI bij 24 uur en 8 weken na een beroerte.

Het uitvoeren van permanente distale midden cerebrale met Common occlusie van de halsslagader in oude ratten te studeren Cortical ischemie met Aanhoudende Disability

Artrose (OA) of degeneratieve gewrichtsaandoening, is een invaliderende aandoening geassocieerd met pijn die slechts gedeeltelijk blijft bestuurd door de beschikbare pijnstillers. Diermodellen worden ontwikkeld om ons begrip van OA-gerelateerde pijn mechanismen te verbeteren. Hier beschrijven we de methode voor de monoiodoacetate model OA pijn in de muis.

De Monoiodoacetate Model van Artrose Pijn in de muis

Fundus fotografie vereist normaal gesproken gespecialiseerde fundus camera's die niet altijd beschikbaar zijn in alle klinische instellingen. Hier wordt een eenvoudige methode beschreven om oculaire fundusbeelden op te nemen met behulp van een smartphone camera en een conventionele high-plus handheld indirecte oftalmocopie lens.

Smartphone Fundus Photography

Leer een workflow voor kwantitatieve autofluorescentie-analyse bij leeftijdsgebonden maculadegeneratie. Deze methode meet specifieke regio's in het netvlies en onthult verlaagde intensiteiten in AMD-laesies zoals drusen.

Een workflow voor het kwantitatief bepalen van leeftijdsgebonden maculadegeneratielaesiespecifieke variaties in fundus-autofluorescentie (Video) | JoVE Journal

Een workflow voor het kwantitatief bepalen van leeftijdsgebonden maculadegeneratielaesiespecifieke variaties in fundus-autofluorescentie

Meer video's verkennen