Name: Niet-invasief compressie-geïnduceerd letsel aan de voorste kruisband (VKB) en in vivo beeldvorming van protease-activiteit bij muizen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-09-29T14:10:00.000+00:00
Duration: 6 min 27 s
Description: Leer een niet-invasieve compressiemethode voor VKB-letsel bij muizen met in vivo beeldvorming van protease-activiteit. Deze techniek ondersteunt onderzoek naar vroege gewrichtsreacties en posttraumatische artrose.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Onderzoek dat in deze publicatie wordt gerapporteerd, werd ondersteund door het National Institute of Arthritis and Musculoskeletal and Skin Diseases, onderdeel van de National Institutes of Health, onder toekenningsnummer R01 AR075013.

Alle beschreven procedures zijn goedgekeurd door de Institutional Animal Care and Use Committee van de University of California Davis. Voor de huidige studie werden mannelijke C57BL/6J-muizen van 3 maanden oud gebruikt.
1. Niet-invasief ACL-letsel
OPMERKING: ACL-letsel veroorzaakt door een extern uitgeoefende drukbelasting is een eenvoudige en reproduceerbare methode die ACL-letsels bij mensen nauwkeurig recapituleert. Dit protocol is geschreven voor een in de handel verkrijgbaar instrument met een belastingsframe (zie Materiaaltabel), maar kan worden aangepast voor vergelijkbare systemen.
<ol><li>Open de software die compatibel is met het load frame-instrument (zie Materiaaltabel) en selecteer een bestaand besturingsbestand of maak een nieuw bestand aan.</li>
	<li>Schakel de stroom van de actuator in.</li>
	<li>Tarreer in het kalibratiemenu de krachtmeting van de loadcel en stel de verplaatsing van de actuator in op 0.</li>
	<li>Gebruik 1%-4% geïnhaleerde isofluraan in zuurstof om de muizen te verdoven en zorg ervoor dat de dieren volledig worden verdoofd door teenknijp en/of staartknijpen.</li>
	<li>Plaats de muis in buikligging op het platform. Plaats het onderbeen verticaal tussen twee laadinrichtingen (Figuur 1) (zie Materiaaltabel). Plaats de voet in de uitsparing van het bovenste armatuur en de knie in de beker van het onderste armatuur.</li>
	<li>Pas de hoogte van het onderste armatuur handmatig aan om een voorspanning van 1-2 N toe te passen (in realtime gecontroleerd op het computerscherm) en draai de stelschroef vast om de positie vast te houden. De voorspanning is nodig om het been in de juiste positie te houden voordat de blessurebelasting wordt toegepast.</li>
	<li>Oefen een enkele drukbelasting uit op een doelkracht (~12-15 N) of doelverplaatsing (~1.5-2.0 mm). NOTITIE: Het toepassen van de belasting met een lagere laadsnelheid (~1 mm/s) zorgt voor een hoger niveau van real-time monitoring en controle, maar zal waarschijnlijk resulteren in een avulsiefout van de ACL. Het toepassen van een snellere laadsnelheid (~200 mm/s) zal meer kans hebben op een ACL-letsel in het midden van de stof22. Als wordt vastgesteld dat er een scheenbeenfractuur of ander buitensporig letsel is opgetreden, euthanaseer het dier dan met behulp van een door IACUC goedgekeurde methode voordat het dier herstelt van de anesthesie.<ol><li>Stel de beladingssnelheid in het softwarebesturingsbestand in en bevestig met behulp van de krachtverplaatsingsgegevens. OPMERKING: Botbreuk tijdens tibiale compressiebelasting is meestal geen probleem, aangezien de fractuurkracht (~20 N) aanzienlijk hoger is dan de ACL-letselkracht. Dit moet echter worden gecontroleerd met palpatie en beeldvorming (d.w.z. röntgenfoto's) kan worden gebruikt om te bevestigen dat er geen scheenbeenfracturen zijn opgetreden.</li>
	</ol></li>
	<li>Letsel wordt meestal aangegeven met een geluid ("klik" of "crunch") en een vrijkomende kracht die herkenbaar is op de krachtverplaatsingsgrafieken (figuur 1C). Als een langzamere belasting wordt gebruikt, stop dan onmiddellijk na het letsel met de drukbelasting om verdere belasting en mogelijke schade aan andere gewrichtsweefsels te voorkomen. OPMERKING: ACL-letsel treedt meestal op bij 8-15 N, afhankelijk van de lichaamsmassa34. Het is belangrijk om een doelkracht in te stellen die groter is dan de verwachte ACL-blessurekracht.</li>
	<li>Bevestig de ACL-verwonding met behulp van een anterieure-posterieure ladetest35,36 of een vergelijkbare beoordeling van gewrichtsinstabiliteit.</li>
	<li>Dien een dierlijke, gewichtsafhankelijke dosis (bijv. 0,05-0,1 mg/kg SC of IP van buprenorfine, zie materiaaltabel) toe aan muizen na verwonding, met duur en dosis zoals aanbevolen en goedgekeurd door de thuisinstelling IACUC. OPMERKING: NSAID's kunnen de progressie van PTOA na letsel veranderen, dus het wordt niet aanbevolen om NSAID's te gebruiken voor pijnbestrijding in dit letselmodel, tenzij dit een specifiek doel van het onderzoek is.</li>
</ol>2. Voorbereiding van dieren voor FRI-beeldvorming
OPMERKING: Voor optische beeldvorming is dierenbont (met name donkere vacht) zeer effectief in het blokkeren, absorberen en verstrooien van licht, daarom moet vacht zoveel mogelijk uit het gebied rond de kniegewrichten worden verwijderd voordat het wordt afgebeeld. Een ontharingscrème is doorgaans effectiever voor het verwijderen van vacht dan een tondeuse. Naakte of haarloze muizen hoeven hun vacht niet te verwijderen. Het verwijderen van de vacht is echter noodzakelijk voor de meest gebruikte muizenstammen (bijv. C57BL/6). Voer muizen indien mogelijk met gezuiverd voedsel met een lage fluorescentie voordat u beeldvorming maakt. Standaard muizenvoer bevat chlorofyl, dat automatisch fluoresceert met een golflengte van ongeveer 700 nm en de gegevensverzameling van het nabij-infrarood FRI-systeem kan beïnvloeden.
<ol><li>Verdoof muizen met 1%-4% geïnhaleerd isofluraan in zuurstof. Houd muizen zoveel mogelijk op een verwarmingskussen en breng oogzalf aan om irritatie van de ogen te voorkomen.</li>
	<li>Gebruik een wattenstaafje om ontharingscrème (zie Materiaaltabel) aan te brengen op het voorste (craniale) aspect van de poten van de muizen rond het kniegewricht.</li>
	<li>Laat de crème ~1 minuut staan en gebruik dan doekjes om de crème en vacht van het been te verwijderen. Herhaal indien nodig.</li>
	<li>Zodra de kniegewrichten volledig zichtbaar zijn zonder dat er vacht op het gebied zit, reinigt u de benen met alcoholdoekjes om eventuele resterende ontharingscrème te verwijderen. OPMERKING: Ontharingscrème kan tijdens een onderzoek meerdere keren op dezelfde muizen worden gebruikt, maar deze toepassingen moeten ten minste een week uit elkaar liggen om onnodige irritatie van de huid te voorkomen.</li>
</ol>3. Bereiding van de sondeoplossing
<ol><li>Verdun indien nodig de fluorescentie-activeerbare sonde volgens de instructies van de fabrikant in steriele 1x fosfaatgebufferde zoutoplossing (PBS). Eén injectieflacon van de in de handel verkrijgbare sonde (zie Materiaaltabel) bevat doorgaans 20 nmol in 0,15 ml 1x PBS. Om de oplossing in de injectieflacon te verdunnen, voegt u 1,35 ml 1x PBS toe om 20 nmol te maken in 1,5 ml 1x PBS. OPMERKING: Na verdunning kan één injectieflacon worden gebruikt om tien muizen af te beelden bij het injecteren van 0,15 ml per muis.</li>
	<li>Draai de oplossing met een minimale snelheid (~2000 tpm) gedurende 30 s om ervoor te zorgen dat de sonde in oplossing is opgelost en centrifugeer vervolgens kort om ervoor te zorgen dat alle vloeistof uit het deksel is. NOTITIE: De oplossing kan worden bewaard bij 2-8 °C op een plaats die maximaal 12 maanden beschermd is tegen licht.</li>
</ol>4. Retro-orbitale injectie
OPMERKING: Zie Yardeni et al. voor de details van deze procedure37.
<ol><li>Gebruik 1%-4% geïnhaleerde isofluraan in zuurstof om muizen te verdoven en leg de muis op zijn zij met de snuit in een neuskegel.</li>
	<li>Gebruik insulinespuiten van ~29 G voor injectie van sondeoplossing (bereid in stap 3).</li>
	<li>Houd de spuit voor gebruik afgedekt om blootstelling aan licht te voorkomen.</li>
	<li>Bij het toedienen van de injectie:<ol><li>Injecteer aan de binnenkant van het oog (traancaruncula) en zorg ervoor dat de schuine kant van de spuit naar het oog is gericht. Voor rechtshandige mensen wordt aanbevolen om in het rechteroog van de muis te injecteren met het dier naar rechts gericht.</li>
		<li>Trek met de niet-injecterende hand voorzichtig de huid rond het oog terug om het hoofd te stabiliseren en het oog uit te laten steken.</li>
		<li>Kantel de spuit evenwijdig aan het lichaam van de muis.</li>
		<li>Beweeg de spuit voorzichtig langs het oog totdat deze op stijve weerstand stuit; Probeer niet voorbij dit punt te duwen.</li>
		<li>Injecteer de sondeoplossing langzaam in de retro-orbitale sinus en trek vervolgens langzaam de naald uit de oogkas. Als er geen oplossing met de naald uitkomt, is de injectie succesvol.</li>
		<li>Breng zoutoplossing of oogzalf aan op het geïnjecteerde oog. OPMERKING: Op basis van de documentatie die bij de beeldvormingssondes is geleverd, is de optimale beeldvormingstijd doorgaans tussen 1 en 2 dagen na injectie van de sondeoplossing. Indien mogelijk wordt aanbevolen om een eerste tijdscreening uit te voeren om de optimale beeldvormingstijd voor elke specifieke toepassing te bepalen. Muizen zullen de geïnjecteerde sonde binnen ongeveer 7 dagen metaboliseren, waarna een nieuwe dosis sondeoplossing moet worden geïnjecteerd als extra tijdstippen gewenst zijn.</li>
	</ol></li>
</ol>5. Fluorescentiereflectie beeldvorming
OPMERKING: De procedures in dit gedeelte zijn specifiek voor een in de handel verkrijgbaar optisch beeldvormingssysteem (zie Materiaaltabel). Vergelijkbare beeldvorming kan worden uitgevoerd met vergelijkbare systemen.
<ol><li>Verdoof muizen met 1%-4% geïnhaleerde isofluraan in zuurstof en plaats het dier in rugligging in het beeldvormingssysteem met de snuit in een neuskegel.</li>
	<li>Plaats de muis met de onderbenen gestrekt zodat de knieën iets in de lucht staan (het kan nodig zijn om de voeten af te plakken). Het is van cruciaal belang dat voor alle dieren een consistente positionering wordt gebruikt.</li>
	<li>Open de compatibele software (zie Materiaaltabel) op de computer van het beeldvormingssysteem; het "Acquisition Control Panel" verschijnt.</li>
	<li>Om het systeem op te warmen, klikt u op Initialiseren en wacht u tot het temperatuurlampje groen wordt.</li>
	<li>Klik op Imaging Wizard en zorg ervoor dat het venster "Imaging Wizard" verschijnt.</li>
	<li>Klik op Filter Pair en zorg ervoor dat de instelling op 'Epi-Illumination' staat en druk vervolgens op Volgende.</li>
	<li>Om de juiste excitatie-/emissie-instellingen te selecteren, zoekt u de betreffende sonde in de vervolgkeuzelijst. Als men de juiste sonde niet kan vinden, zoek dan de naam 'Input Ex/Em' en typ handmatig de waarde van Excitatie Piek en Emissiepiek in op basis van de eigenschap van de sonde die moet worden gebruikt (bijv. voor Excitatie Piek, voer 675 in, en voor Emissie Piek, voer 720 in). Klik op Volgende.</li>
	<li>Kies Muis voor "Beeldvormingsonderwerp". Zorg ervoor dat in "Belichtingsparameters" de automatische instellingen zijn aangevinkt en dat de opties Fluorescerend en Foto zijn geselecteerd. Selecteer D-22.6 cm in de checklist van "Gezichtsveld". Druk op Volgende.</li>
	<li>De beeldvormingsinstelling is te zien en te wijzigen op het rechterpaneel van het "Acquisition Control Panel". Zorg ervoor dat alle instellingen correct zijn en druk op de knop Volgorde verkrijgen . Nadat de afbeelding is weergegeven, controleert u of de afbeelding voldoende is belicht. Als dit niet het geval is, wijzigt u de instelling voor de belichtingstijd en klikt u nogmaals op Sequentie verkrijgen .</li>
	<li>Om het beeld te analyseren, plaatst u een cirkel van belang (ROI) met een consistente grootte over elk kniegewricht op het zwart-witbeeld (dit voorkomt een bevooroordeelde positionering op basis van gebieden met een fluorescerend signaal).</li>
	<li>Bereken het totale stralingsrendement en/of het gemiddelde stralingsrendement voor elk kniegewricht. Als de stralingsefficiëntie ook wordt berekend op de contralaterale benen, normaliseer dan de gegevens door de stralingsefficiëntiemeting voor het geblesseerde been te delen door de stralingsefficiëntiemeting van het contralaterale been. OPMERKING: Als voor alle knieën een interessegebied met een consistent gebied wordt gebruikt, zullen zowel de totale stralingsefficiëntie als de gemiddelde stralingsefficiëntie vergelijkbare resultaten opleveren. Het gebruik van een gemiddelde stralingsefficiëntie wordt aanbevolen als interessegebieden met verschillende groottes worden gebruikt. Het normaliseren van stralingsefficiëntiegegevens van het geblesseerde gewricht met de gegevens van de niet-gewonde contralaterale knie zal een interne controle bieden om rekening te houden met eventuele verschillen in de hoeveelheid geïnjecteerde sonde en de toedieningsefficiëntie tussen verschillende dieren.</li>
</ol>

Impact van niet-invasief ACL-letsel en chirurgie op protease-activiteit bij muizen

<ol><li>Deshpande, B. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Number+of+persons+with+symptomatic+knee+osteoarthritis+in+the+us%3A+impact+of+race+and+ethnicity%2C+age%2C+sex%2C+and+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Care+%26+Research+%28Hoboken%22%5BJournal%5D)">Number of persons with symptomatic knee osteoarthritis in the us: impact of race and ethnicity, age, sex, and obesity.</a> Arthritis Care & Research (Hoboken. 68 (12), 1743-1750 (2016).</li>
<li>Carbone, A., Rodeo, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Review+of+current+understanding+of+post-traumatic+osteoarthritis+resulting+from+sports+injuries%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Research%22%5BJournal%5D)">Review of current understanding of post-traumatic osteoarthritis resulting from sports injuries.</a> Journal of Orthopaedic Research. 35 (3), 397-405 (2017).</li>
<li>Thomas, A. C., Hubbard-Turner, T., Wikstrom, E. A., Palmieri-Smith, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+of+posttraumatic+osteoarthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Athletic+Training%22%5BJournal%5D)">Epidemiology of posttraumatic osteoarthritis.</a> Journal of Athletic Training. 52 (6), 491-496 (2017).</li>
<li>Wang, L. J., Zeng, N., Yan, Z. P., Li, J. T., Ni, G. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Post-traumatic+osteoarthritis+following+ACL+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+Research+%26+Therapy%22%5BJournal%5D)">Post-traumatic osteoarthritis following ACL injury.</a> Arthritis Research & Therapy. 22 (1), 57(2020).</li>
<li>Glasson, S. S., Blanchet, T. J., Morris, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+surgical+destabilization+of+the+medial+meniscus+%28DMM%29+model+of+osteoarthritis+in+the+129%2FSvEv+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+Cartilage%22%5BJournal%5D)">The surgical destabilization of the medial meniscus (DMM) model of osteoarthritis in the 129/SvEv mouse.</a> Osteoarthritis Cartilage. 15 (9), 1061-1069 (2007).</li>
<li>Kamekura, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteoarthritis+development+in+novel+experimental+mouse+models+induced+by+knee+joint+instability%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+Cartilage%22%5BJournal%5D)">Osteoarthritis development in novel experimental mouse models induced by knee joint instability.</a> Osteoarthritis Cartilage. 13 (7), 632-641 (2005).</li>
<li>Ma, H. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteoarthritis+severity+is+sex+dependent+in+a+surgical+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+Cartilage%22%5BJournal%5D)">Osteoarthritis severity is sex dependent in a surgical mouse model.</a> Osteoarthritis Cartilage. 15 (6), 695-700 (2007).</li>
<li>Malfait, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ADAMTS-5+deficient+mice+do+not+develop+mechanical+allodynia+associated+with+osteoarthritis+following+medial+meniscal+destabilization%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+Cartilage%22%5BJournal%5D)">ADAMTS-5 deficient mice do not develop mechanical allodynia associated with osteoarthritis following medial meniscal destabilization.</a> Osteoarthritis Cartilage. 18 (4), 572-580 (2010).</li>
<li>Yang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia-inducible+factor-2alpha+is+a+catabolic+regulator+of+osteoarthritic+cartilage+destruction%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">Hypoxia-inducible factor-2alpha is a catabolic regulator of osteoarthritic cartilage destruction.</a> Nature Medicine. 16 (6), 687-693 (2010).</li>
<li>Moodie, J. P., Stok, K. S., Muller, R., Vincent, T. L., Shefelbine, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multimodal+imaging+demonstrates+concomitant+changes+in+bone+and+cartilage+after+destabilisation+of+the+medial+meniscus+and+increased+joint+laxity%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+Cartilage%22%5BJournal%5D)">Multimodal imaging demonstrates concomitant changes in bone and cartilage after destabilisation of the medial meniscus and increased joint laxity.</a> Osteoarthritis Cartilage. 19 (2), 163-170 (2011).</li>
<li>Li, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Knockout+of+ADAMTS5+does+not+eliminate+cartilage+aggrecanase+activity+but+abrogates+joint+fibrosis+and+promotes+cartilage+aggrecan+deposition+in+murine+osteoarthritis+models%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Research%22%5BJournal%5D)">Knockout of ADAMTS5 does not eliminate cartilage aggrecanase activity but abrogates joint fibrosis and promotes cartilage aggrecan deposition in murine osteoarthritis models.</a> Journal of Orthopaedic Research. 29 (4), 516-522 (2011).</li>
<li>Shapiro, F., Glimcher, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+osteoarthrosis+in+the+rabbit+knee+joint%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Orthopaedics+and+Related+Research%22%5BJournal%5D)">Induction of osteoarthrosis in the rabbit knee joint.</a> Clinical Orthopaedics and Related Research. 147, 287-295 (1980).</li>
<li>Meacock, S. C., Bodmer, J. L., Billingham, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+osteoarthritis+in+guinea-pigs%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Pathology+%28Oxford%29%22%5BJournal%5D)">Experimental osteoarthritis in guinea-pigs.</a> Journal of Experimental Pathology (Oxford). 71 (2), 279-293 (1990).</li>
<li>Armstrong, S. J., Read, R. A., Ghosh, P., Wilson, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Moderate+exercise+exacerbates+the+osteoarthritic+lesions+produced+in+cartilage+by+meniscectomy%3A+a+morphological+study%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+Cartilage%22%5BJournal%5D)">Moderate exercise exacerbates the osteoarthritic lesions produced in cartilage by meniscectomy: a morphological study.</a> Osteoarthritis Cartilage. 1 (2), 89-96 (1993).</li>
<li>Pastoureau, P., Leduc, S., Chomel, A., De Ceuninck, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+assessment+of+articular+cartilage+and+subchondral+bone+histology+in+the+meniscectomized+guinea+pig+model+of+osteoarthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+Cartilage%22%5BJournal%5D)">Quantitative assessment of articular cartilage and subchondral bone histology in the meniscectomized guinea pig model of osteoarthritis.</a> Osteoarthritis Cartilage. 11 (6), 412-423 (2003).</li>
<li>Wancket, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anatomical+localization+of+cartilage+degradation+markers+in+a+surgically+induced+rat+osteoarthritis+model%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicologic+Pathology%22%5BJournal%5D)">Anatomical localization of cartilage degradation markers in a surgically induced rat osteoarthritis model.</a> Toxicologic Pathology. 33 (4), 484-489 (2005).</li>
<li>Karahan, S., Kincaid, S. A., Kammermann, J. R., Wright, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+the+rat+stifle+joint+after+transection+of+the+cranial+cruciate+ligament+and+partial+medial+meniscectomy%5BTitle%5D)+AND+%22Comparative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Evaluation of the rat stifle joint after transection of the cranial cruciate ligament and partial medial meniscectomy.</a> Comparative Medicine. 51 (6), 504-512 (2001).</li>
<li>Kamekura, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteoarthritis+development+in+novel+experimental+mouse+models+induced+by+knee+joint+instability%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+and+cartilage+%2F+OARS%2C+Osteoarthritis+Research+Society%22%5BJournal%5D)">Osteoarthritis development in novel experimental mouse models induced by knee joint instability.</a> Osteoarthritis and cartilage / OARS, Osteoarthritis Research Society. 13 (7), 632-641 (2005).</li>
<li>Jones, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+microfocal+computed+tomography+and+micro-magnetic+resonance+imaging+evaluation+of+antiresorptive+and+antiinflammatory+drugs+as+preventive+treatments+of+osteoarthritis+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Arthritis+%26+Rheumatology%22%5BJournal%5D)">In vivo microfocal computed tomography and micro-magnetic resonance imaging evaluation of antiresorptive and antiinflammatory drugs as preventive treatments of osteoarthritis in the rat.</a> Arthritis & Rheumatology. 62 (9), 2726-2735 (2010).</li>
<li>Christiansen, B. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+mouse+models+of+post-traumatic+osteoarthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+Cartilage%22%5BJournal%5D)">Non-invasive mouse models of post-traumatic osteoarthritis.</a> Osteoarthritis Cartilage. 23 (10), 1627-1638 (2015).</li>
<li>Christiansen, B. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Musculoskeletal+changes+following+non-invasive+knee+injury+using+a+novel+mouse+model+of+post-traumatic+osteoarthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+Cartilage%22%5BJournal%5D)">Musculoskeletal changes following non-invasive knee injury using a novel mouse model of post-traumatic osteoarthritis.</a> Osteoarthritis Cartilage. 20 (7), 773-782 (2012).</li>
<li>Lockwood, K. A., Chu, B. T., Anderson, M. J., Haudenschild, D. R., Christiansen, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+loading+rate-dependent+injury+modes+in+a+murine+model+of+post-traumatic+osteoarthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Research%22%5BJournal%5D)">Comparison of loading rate-dependent injury modes in a murine model of post-traumatic osteoarthritis.</a> Journal of Orthopaedic Research. 32 (1), 79-88 (2014).</li>
<li>Satkunananthan, P. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+fluorescence+reflectance+imaging+of+protease+activity+in+a+mouse+model+of+post-traumatic+osteoarthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+Cartilage%22%5BJournal%5D)">In vivo fluorescence reflectance imaging of protease activity in a mouse model of post-traumatic osteoarthritis.</a> Osteoarthritis Cartilage. 22 (10), 1461-1469 (2014).</li>
<li>Hsia, A. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Post-traumatic+osteoarthritis+progression+is+diminished+by+early+mechanical+unloading+and+anti-inflammatory+treatment+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+Cartilage%22%5BJournal%5D)">Post-traumatic osteoarthritis progression is diminished by early mechanical unloading and anti-inflammatory treatment in mice.</a> Osteoarthritis Cartilage. 29 (12), 1709-1719 (2021).</li>
<li>Zhang, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biochromoendoscopy%3A+molecular+imaging+with+capsule+endoscopy+for+detection+of+adenomas+of+the+GI+tract%5BTitle%5D)+AND+%22Gastrointestinal+Endoscopy%22%5BJournal%5D)">Biochromoendoscopy: molecular imaging with capsule endoscopy for detection of adenomas of the GI tract.</a> Gastrointestinal Endoscopy. 68 (3), 520-527 (2008).</li>
<li>Gounaris, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+imaging+of+cysteine-cathepsin+activity+reveals+dynamics+of+focal+inflammation%2C+angiogenesis%2C+and+polyp+growth%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Live imaging of cysteine-cathepsin activity reveals dynamics of focal inflammation, angiogenesis, and polyp growth.</a> PLoS One. 3 (8), e2916(2008).</li>
<li>Sheth, R. A., Mahmood, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+molecular+imaging+and+its+emerging+role+in+colorectal+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology-Gastrointestinal+and+Liver+Physiology%22%5BJournal%5D)">Optical molecular imaging and its emerging role in colorectal cancer.</a> American Journal of Physiology-Gastrointestinal and Liver Physiology. 299 (4), G807-G820 (2010).</li>
<li>Clapper, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Detection+of+colorectal+adenomas+using+a+bioactivatable+probe+specific+for+matrix+metalloproteinase+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Neoplasia%22%5BJournal%5D)">Detection of colorectal adenomas using a bioactivatable probe specific for matrix metalloproteinase activity.</a> Neoplasia. 13 (8), 685-691 (2011).</li>
<li>Nahrendorf, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dual+channel+optical+tomographic+imaging+of+leukocyte+recruitment+and+protease+activity+in+the+healing+myocardial+infarct%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Dual channel optical tomographic imaging of leukocyte recruitment and protease activity in the healing myocardial infarct.</a> Circulation Research. 100 (8), 1218-1225 (2007).</li>
<li>Jaffer, F. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+visualization+of+cathepsin+K+activity+in+atherosclerosis+with+a+novel%2C+protease-activatable+fluorescence+sensor%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Optical visualization of cathepsin K activity in atherosclerosis with a novel, protease-activatable fluorescence sensor.</a> Circulation. 115 (17), 2292-2298 (2007).</li>
<li>Jaffer, F. A., Libby, P., Weissleder, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optical+and+multimodality+molecular+imaging%3A+insights+into+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Arteriosclerosis%2C+Thrombosis%2C+and+Vascular+Biology%22%5BJournal%5D)">Optical and multimodality molecular imaging: insights into atherosclerosis.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 29 (7), 1017-1024 (2009).</li>
<li>Razansky, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multispectral+optoacoustic+tomography+of+matrix+metalloproteinase+activity+in+vulnerable+human+carotid+plaques%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Imaging+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Multispectral optoacoustic tomography of matrix metalloproteinase activity in vulnerable human carotid plaques.</a> Molecular Imaging and Biology. 14 (3), 277-285 (2012).</li>
<li>Hsia, A. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteophytes+and+fracture+calluses+share+developmental+milestones+and+are+diminished+by+unloading%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Research%22%5BJournal%5D)">Osteophytes and fracture calluses share developmental milestones and are diminished by unloading.</a> Journal of Orthopaedic Research. 36 (2), 699-710 (2018).</li>
<li>Blaker, C. L., Little, C. B., Clarke, E. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Joint+loads+resulting+in+ACL+rupture%3A+Effects+of+age%2C+sex%2C+and+body+mass+on+injury+load+and+mode+of+failure+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Orthopaedic+Research%22%5BJournal%5D)">Joint loads resulting in ACL rupture: Effects of age, sex, and body mass on injury load and mode of failure in a mouse model.</a> Journal of Orthopaedic Research. 35 (8), 1754-1763 (2017).</li>
<li>Murata, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlling+joint+instability+delays+the+degeneration+of+articular+cartilage+in+a+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+Cartilage%22%5BJournal%5D)">Controlling joint instability delays the degeneration of articular cartilage in a rat model.</a> Osteoarthritis Cartilage. 25 (2), 297-308 (2017).</li>
<li>Murata, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlling+Abnormal+joint+movement+inhibits+response+of+osteophyte+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Cartilage%22%5BJournal%5D)">Controlling Abnormal joint movement inhibits response of osteophyte formation.</a> Cartilage. 9 (4), 391-401 (2018).</li>
<li>Yardeni, T., Eckhaus, M., Morris, H. D., Huizing, M., Hoogstraten-Miller, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retro-orbital+injections+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals+%28NY%29%22%5BJournal%5D)">Retro-orbital injections in mice.</a> Laboratory Animals (NY). 40 (5), 155-160 (2011).</li>
<li>Kokubun, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+changing+the+joint+kinematics+of+knees+with+a+ruptured+anterior+cruciate+ligament+on+the+molecular+biological+responses+and+spontaneous+healing+in+a+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Sports+Medicine%22%5BJournal%5D)">Effect of changing the joint kinematics of knees with a ruptured anterior cruciate ligament on the molecular biological responses and spontaneous healing in a rat model.</a> The American Journal of Sports Medicine. 44 (11), 2900-2910 (2016).</li>
<li>Bhatti, F. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+non-invasively+induced+post-traumatic+osteoarthritis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Antioxidants+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">Characterization of non-invasively induced post-traumatic osteoarthritis in mice.</a> Antioxidants (Basel). 11 (9), 1783(2022).</li>
<li>Steel, C. D., Stephens, A. L., Hahto, S. M., Singletary, S. J., Ciavarra, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+the+lateral+tail+vein+and+the+retro-orbital+venous+sinus+as+routes+of+intravenous+drug+delivery+in+a+transgenic+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animals+%28NY%29%22%5BJournal%5D)">Comparison of the lateral tail vein and the retro-orbital venous sinus as routes of intravenous drug delivery in a transgenic mouse model.</a> Laboratory Animals (NY). 37 (1), 26-32 (2008).</li>
</ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

Dit protocol heeft een reproduceerbare, niet-invasieve methode voor het induceren van ACL-letsel bij muizen vastgesteld en rigoureus beschreven 20,21,24,33. Deze eenvoudige en efficiënte verwondingsmethode kan in slechts enkele minuten worden uitgevoerd, wat high-throughput studies van PTOA mogelijk maakt. Deze letselmethode geeft ook nauwkeurig een samenvatting van letselomstandigheden die rel...

Artrose is een alomtegenwoordig gezondheidsprobleem dat miljoenen mensen in deVerenigde Staten treft. Posttraumatische artrose (PTOA) is een subset van artrose die wordt geïnitieerd door een gewrichtsblessure zoals een voorste kruisband (ACL) ruptuur, meniscusletsel of intra-articulaire fractuur2. Het percentage symptomatische artrosepatiënten dat als PTOA kan worden geclassificeerd, is ten minste 12%3, en deze etiologie treft doorgaans een jongere populatie dan idiopathische artrose4. Muismodellen van artrose zijn cruciale hulpmiddelen voor het onderzoeken van de etiologie van de ziekte en mogelijke artrosebehandelingen op een veel kortere tijdlijn (4-12 weken in muismodellen vergeleken met 10-20 jaar bij mensen). De methoden om artrose bij muizen te initiëren omvatten echter gewoonlijk invasieve chirurgische technieken zoals ACL-doorsnede 5,6, verwijdering of destabilisatie van de mediale meniscus 5,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16, of een combinatie van beide 17,18,19, die geen klinisch relevante letselaandoeningen reproduceren. Chirurgische modellen verergeren ook ontstekingen in het gewricht als gevolg van verstoring van het gewrichtskapsel, wat de progressie van artrose zou kunnen versnellen.
Niet-invasieve muismodellen met knieletsel bieden de mogelijkheid om biologische en biomechanische veranderingen op vroege tijdstippen na het letsel te bestuderen en kunnen meer klinisch relevante resultaten opleveren20. Ons laboratorium heeft een niet-invasief letselmodel ontwikkeld dat gebruik maakt van een enkele extern aangebrachte overbelasting van de tibiale compressie om een voorste kruisband (ACL) te induceren bij muizen 21,22,23,24. Deze niet-invasieve letselmethode is in staat om een aseptisch gewrichtsletsel te veroorzaken zonder de huid of het gewrichtskapsel te verstoren.
Fluorescentiereflectiebeeldvorming (FRI) is een optische beeldvormingsmethode waarbij een doelwit wordt opgewekt met infrarood licht op een specifieke golflengte en het gereflecteerde licht dat op een andere golflengte wordt uitgezonden, wordt gekwantificeerd. In de handel verkrijgbare protease-specifieke sondes kunnen in diermodellen worden geïnjecteerd en FRI kan vervolgens worden gebruikt om de protease-activiteit op specifieke plaatsen zoals het kniegewricht te kwantificeren. Deze methode wordt veel gebruikt voor in vivo detectie van biologische activiteiten zoals ontstekingen. De sondes die voor deze toepassing worden gebruikt, worden fluorescerend gedoofd totdat ze relevante proteasen tegenkomen. Die proteasen zullen dan een enzymsplitsingsplaats op de sondes breken, waarna ze een nabij-infrarood fluorescerend signaal zullen produceren. Deze sondes en deze beeldvormingsmethode zijn uitgebreid gevalideerd en gebruikt in onderzoeken naar kanker 25,26,27,28 en atherosclerose 29,30,31,32, en onze groep heeft ze gebruikt voor studies van het bewegingsapparaat om markers van ontsteking en matrixafbraak te meten 23,24,33.
Samen bieden niet-invasieve gewrichtsletsels in combinatie met in vivo FRI- en protease-activeerbare sondes een uniek vermogen om ontstekingen en protease-activiteit na een traumatisch gewrichtsletsel te volgen. Deze analyse kan al uren of zelfs minuten na de verwonding worden uitgevoerd en hetzelfde dier kan meerdere keren worden beoordeeld om het tijdsverloop van protease-activiteit in het gewricht te bestuderen. Belangrijk is dat deze beeldvormingsmethode mogelijk niet haalbaar is in combinatie met chirurgische modellen van artrose, omdat verstoring van de huid en het gewrichtskapsel resulteert in een fluorescentiesignaal dat het signaal van binnenuit het gewricht zou verwarren.

<table><tbody><tr><td>10x Phosphate-Buffered Saline</td><td>Tissue Protech</td><td>PBS01-32R</td><td>of gelijkwaardig</td></tr><tr><td>Air Anesthetia System</td><td></td><td></td><td>Isoflurane vervluchter met inductiekamer en neuskoker</td></tr><tr><td>Buprenorfine</td><td></td><td></td><td>Pijnstiller post-letsel&nbsp;</td></tr><tr><td>Depilatoire Crème</td><td>Veet</td><td>B001KYPZ4G</td><td>of gelijkwaardig</td></tr><tr><td>Fixaties</td><td></td><td></td><td>Op maat gemaakte kniefixatie, enkelfixatie en platform</td></tr><tr><td>IVIS Spectrum</td><td>Perkin Elmer</td><td>124262</td><td>Kan ook een vergelijkbaar optisch beeldvormingssysteem gebruiken</td></tr><tr><td>Kimwipes</td><td>Kimberly-Clark Corporation</td><td>06-666</td><td>of gelijkwaardig</td></tr><tr><td>Living Image software&nbsp;</td><td>Perkin Elmer</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Materiaaltestsystemen&nbsp;</td><td>TA Instruments</td><td></td><td>Electroforce 3200 of gelijkwaardig</td></tr><tr><td>ProSense680</td><td>Perkin Elmer</td><td>NEV10003</td><td>Kan ook andere sondes gebruiken zoals OsteoSense, MMPSense, Cat K, AngioSense, enz.</td></tr><tr><td>Steriele Spuit met Naald</td><td>Spectrum Chemical Mfg. Corp.</td><td>550-82231-CS</td><td>Covidien 1 mL TB-spuit met 28 G x 1/2 inch naald, steriele of gelijkwaardig</td></tr><tr><td>Uniaxiale krachtsensor</td><td>TA Instruments</td><td></td><td>20 N capaciteit</td></tr><tr><td>Vortex-Genie 2</td><td>Scientific Industries, Inc.</td><td>SI-0236</td><td>of gelijkwaardig</td></tr><tr><td>WinTest software&nbsp;</td><td>TA Instruments</td><td></td><td>compatibel met Electroforce 3200</td></tr></tbody></table>

niet-invasief compressie-geïnduceerd letsel aan de voorste kruisband (vkb) en in vivo beeldvorming van protease-activiteit bij muizen

Non-Invasive Compression-Induced Anterior Cruciate Ligament (ACL) Injury and In Vivo Imaging of Protease Activity in Mice

Traumatische gewrichtsletsels zoals voorste kruisband (ACL) ruptuur of meniscusscheuren leiden vaak tot posttraumatische artrose (PTOA) binnen 10-20 jaar na letsel. Inzicht in de vroege biologische processen die worden geïnitieerd door gewrichtsletsels (bijv. ontsteking, matrix metalloproteïnasen (MMP's), cathepsineproteasen, botresorptie) is cruciaal voor het begrijpen van de etiologie van PTOA. Er zijn echter weinig opties voor in vivo meting van deze biologische processen, en de vroege biologische reacties kunnen worden verstoord als invasieve chirurgische technieken of injecties worden gebruikt om artrose te initiëren. In onze onderzoeken naar PTOA hebben we in de handel verkrijgbare nabij-infrarood protease-activeerbare sondes gebruikt in combinatie met fluorescentiereflectiebeeldvorming (FRI) om protease-activiteit in vivo te kwantificeren na niet-invasieve compressie-geïnduceerde ACL-schade bij muizen. Deze niet-invasieve ACL-letselmethode recapituleert nauwkeurig klinisch relevante letselaandoeningen en is volledig aseptisch omdat de huid of het gewrichtskapsel niet wordt verstoord. De combinatie van deze letsel- en beeldvormingsmethoden stelt ons in staat om het tijdsverloop van protease-activiteit op meerdere tijdstippen na een traumatisch gewrichtsletsel te bestuderen.

Na het uitoefenen van een enkele drukkracht (1 mm/s tot verwonding) op de onderbenen van mannelijke C57BL/6J-muizen van 3 maanden oud, werd bij alle muizen consequent ACL-letsel geïnduceerd. De gemiddelde drukkracht bij knieletsel was ongeveer 10 N (figuur 1).
FRI-analyse toonde een significant grotere protease-activiteit in de gewonde gewrichten van muizen die 7 dagen na het letsel werden onderworpen aan niet-invasieve ACL-schade (Figuur 2</s...

Niet-invasief ACL-letsel is een betrouwbare en klinisch relevante methode voor het initiëren van posttraumatische artrose (PTOA) bij muizen. Deze letselmethode maakt het ook mogelijk om in vivo kwantificering van protease-activiteit in het gewricht op vroege tijdstippen na het letsel met behulp van protease-activeerbare nabij-infraroodsondes en fluorescentiereflectiebeeldvorming.

Niet-invasief compressie-geïnduceerd letsel aan de voorste kruisband (VKB) en in vivo beeldvorming van protease-activiteit bij muizen

Traumatic joint injuries such as anterior cruciate ligament (ACL) rupture or meniscus tears commonly lead to post-traumatic osteoarthritis (PTOA) within ...

Ons lab gebruikt muismodellen van posttraumatische artrose om vroege processen na gewrichtsblessures zoals voorste kruisband- of VKB-rupturen te onderzoeken, en hoe deze vroege gebeurtenissen kunnen leiden tot weefseldegeneratie en progressie van artrose. We zijn met name geïnteresseerd in hoe lichaamsbeweging of rust na een blessure de gezondheid van de gewrichten op de lange termijn kan beïnvloeden. Er zijn veel diermodellen van artrose beschikbaar, en ze zijn allemaal nuttig voor het onderzoeken van bepaalde onderzoeksvragen.Enkele van de experimentele uitdagingen op dit gebied zijn het selecteren van de juiste modellen van uw onderzoek, het bepalen welke technieken u moet gebruiken om de progressie van artrose te beoordelen en op welk tijdstip u deze analyse gaat uitvoeren. Deze knieblessuremethode is zeer snel en eenvoudig uit te voeren. Het gebruik van niet-invasieve compressie-geïnduceerde verwonding stelt ons ook in staat om de gewrichtsrespons op vroege tijdstippen te bestuderen, en aangezien er geen chirurgische ingreep is, kunnen we in vivo optische beeldvorming gebruiken om de activiteit van proteus in hun gewricht te volgen.In de toekomst zijn we van plan om verschillende genetische stammen van muizen te gebruiken, sommige die kwetsbaar zijn voor artrose en sommige die resistent zijn tegen artrose om te bepalen hoe bepaalde aspecten van de ontstekingsreactie bijdragen aan gewrichtsgenezing of gewrichtsdegeneratie na letsel.

non-invasive-compression-induced-anterior-cruciate-ligament-acl

Research

JoVE Journal

Medicine

Geneeskunde

Voor toekomstige toepassingen als een patch om gedeeltelijke scheuren van de voorste kruisband (VKB) te herstellen, werden menselijke ACL afgeleide cellen geïsoleerd uit weefsel verkregen tijdens reconstructieve procedures, uitgebreid in vitro en geteeld op tissue engineered steigers. Cellulaire adhesie en morfologie werd vervolgens uitgevoerd om biocompatibiliteit bevestigen op steiger oppervlak.

Chirurgische Retrieval, Isolatie en<em&gt; In vitro</em&gt; Uitbreiding van de Mens Voorste kruisband-afgeleide cellen voor Tissue Engineering Applications

Diermodellen zijn belangrijke hulpmiddelen voor de evaluatie van door weefseltechniek ontwikkelde grafts. Dit artikel presenteert het protocol voor het bereiden van een elektrospunnend biologisch afbreekbaar polymeer graft voor gebruik in weefseltechniek van het voorste kruisband, evenals een chirurgisch protocol voor implantatie in een rattenmodel.

Athymische Rat Model voor de Evaluatie van Engineered voorste kruisband Grafts

Hier presenteren we het cyclische belasting-geïnduceerde intra-articulaire kraakbeenlaesiemodel van de rattenknie, gegenereerd door 60 cyclische compressies over 20 N, resulterend in schade aan het femorale condylaire kraakbeen bij ratten.

Een niet-invasieve methode voor het genereren van het cyclische belastingsgeïnduceerde intra-articulaire kraakbeenlaesiemodel van de rattenknie

Het huidige protocol beschrijft de gecontroleerde microblade krassen op het oppervlak van het gewrichtskraakbeen na het destabiliseren van de muizenknie door het snijden van het mediale miniscotibiale ligament. Dit diermodel presenteert een versnelde vorm van artrose (OA) die geschikt is voor het bestuderen van osteofytvorming, osteosclerose en pijn in een vroeg stadium.

Destabilisatie van het mediale meniscus- en kraakbeenkrab murinemodel van versnelde artrose

Hierin beschrijven we een chirurgische methode om de voorste kruisband (ACL) te transecteren als een betrouwbaar model om knieartrose bij knaagdieren te induceren en methodologieën voor het oogsten van gewrichtsvloeistof van de knie, het meten van knie-oedeem en het beoordelen van de ernst van artrose.

Transsectie van de voorste kruisband en lavage van gewrichtsvloeistof in een knaagdiermodel om gewrichtsontsteking en posttraumatische artrose te bestuderen

Een In vivo Knaagdieren Model van krimp veroorzaakte letsel en niet-invasieve monitoring van de Recovery

We combineerden frequentie-domein nabij-infrarood spectroscopie maatregelen van de cerebrale oxygenatie hemoglobine met diffuse correlatie spectroscopie maatregelen van de cerebrale doorbloeding index om een ​​index van zuurstof metabolisme te schatten. We testten het nut van deze maatregel als een bed screening instrument om de gezondheid en ontwikkeling van de pasgeborene hersenen te evalueren.

Niet-invasieve optische meting van Cerebral Metabolisme en Hemodynamica bij zuigelingen

Een nieuwe techniek om een ​​reproduceerbare...

Gecontroleerde Cervicale Laceration Letsel in Muizen

Een nieuwe benadering van het combineren van de intra-oculaire transplantatie en confocale microscopie maakt longitudinale, niet-invasieve real-time beeldvorming met single-cell resolutie binnen geënt...

Transplantatie in de voorste kamer van het oog voor Longitudinaal, niet-invasieve<em&gt; In vivo</em&gt; Beeldvorming met Single-cell resolutie in real-time

We beschrijven modellen van matige en ernstige ischemie-reperfusie geïnduceerde nierschade waarin de muizen ondergaan unilaterale renale pedicle klemmen gevolgd door gelijktijdige of vertraagde contralaterale nefrectomie, respectievelijk. Deze modellen consequent aanleiding geven tot nierinsufficiëntie en na het letsel fibrose, maar letselernst en overleving afhankelijk zijn van de muis achtergrond, leeftijd en chirurgische apparatuur.

Ischemie-reperfusie model van Acute Kidney Injury en Post Letsel Fibrosis in Muizen

Leer een niet-invasieve compressiemethode voor VKB-letsel bij muizen met in vivo beeldvorming van protease-activiteit. Deze techniek ondersteunt onderzoek naar vroege gewrichtsreacties en posttraumatische artrose.

Niet-invasief compressie-geïnduceerd letsel aan de voorste kruisband (VKB) en in vivo beeldvorming van protease-activiteit bij muizen (Video) | JoVE Journal

Niet-invasief compressie-geïnduceerd letsel aan de voorste kruisband (VKB) en in vivo beeldvorming van protease-activiteit bij muizen

Meer video's verkennen