Het induceren van pseudopregnancy bij vrouwelijke muizen zonder de noodzaak van vasectomie bij mannen voorafgaand aan niet-chirurgische embryotransfer of kunstmatige inseminatie
7 juli 2023
De gepresenteerde cervicale manipulatiemethode kan pseudozwangerschap bij muizen induceren zonder dat het nodig is om vrouwtjes te fokken met vasectomie mannetjes. De inductie van pseudozwangerschap is vereist voor het succes van niet-chirurgische embryotransfer en niet-chirurgische kunstmatige inseminatie, die beide ook worden gepresenteerd.
Onze primaire onderzoeksfocus is de ontwikkeling van geassisteerde voortplantingstechnieken die verfijningen en reducties bieden in overeenstemming met de 3V's van dierproeven. We hebben niet-chirurgische embryotransfer- en niet-chirurgische kunstmatige inseminatieprocedures voor muizen en een niet-chirurgische embryotransferprocedure voor ratten ontwikkeld. Met de toevoeging van de cervicale manipulatieprocedure om pseudo-zwangere vrouwen te bieden, creëren we 3V-verbeteringen en geassisteerde voortplanting bij knaagdieren.
De hier beschreven protocollen bieden gestroomlijnde methoden voor het herstellen van pups met behulp van niet-chirurgische embryotransfermethoden en kunstmatige inseminatie bij muizen. Het cervicale manipulatieprotocol biedt een verfijning van procedures die pseudo-zwangere vrouwelijke ontvangers produceren voor geassisteerde voortplantingstechnieken. Het vermindert het aantal vrouwtjes dat nodig is als pseudo-zwangere ontvangers en het elimineert de noodzaak voor vasectomie mannen.
De hier beschreven protocollen kunnen worden gebruikt voor strategisch vivariumbeheer. De protocollen kunnen worden gebruikt bij cryobehoud, in-vitrofertilisatie, rederivatie, de productie van leeftijdsmatchcohorten en de productie van genetisch gemodificeerde dieren.
Overzicht
Deze studie introduceert een methode voor cervicale manipulatie die schijnzwangerschap bij muizen induceert, wat noodzakelijk is voor een succesvolle niet-chirurgische embryotransfer en kunstmatige inseminatie. Deze vooruitgang vermindert de noodzaak voor fokken en verbetert het dierenwelzijn door naleving van de principes van de 3V's.
Belangrijkste studiecomponenten
Onderzoeksgebied
- Geassisteerde reproductietechnieken
- Dierenwelzijn en de 3V's
- Knaagdiermodellen
Achtergrond
- Huidige uitdagingen bij fokmethoden voor pseudodrachtige vrouwtjes
- Belang van het verminderen van het aantal fokdieren
- Noodzaak van efficiënte procedures bij embryotransfer bij knaagdieren
Gebruikte methoden
- Cervicale manipulatie voor het induceren van schijnscheuwdracht
- Muizen (CD1-stam)
- Niet-chirurgische embryotransfer- en kunstmatige inseminatietechnieken
Belangrijkste resultaten
- De cervixmanipulatie creëert succesvol pseudodrachtige vrouwtjes zonder dat hiervoor gevasectomeerde mannetjes nodig zijn.
- Gestroomlijnde protocollen verbeteren de overleving van pups door middel van niet-chirurgische technieken.
- De methoden zijn waardevol voor cryopreservatie, in vitro fertilisatie en het produceren van genetisch gemodificeerde dieren.
Conclusies
- De studie demonstreert een effectieve methode voor het produceren van pseudodrongere vrouwelijke muizen, wat voortplantingsondersteuning verbetert.
- De bevindingen zijn significant voor het verbeteren van de efficiëntie van het vivariumbeheer en het bieden van betere welzijnsnormen in het onderzoek.
Veelgestelde vragen
Industriële relevantie voor directie
Efficiënte inductie van schijnzwangerschap bij vrouwelijke muizen is cruciaal voor schaalbare, reproduceerbare workflows voor geassisteerde reproductie in preklinisch onderzoek. De gestandaardiseerde techniek voor cervicale manipulatie elimineert de noodzaak van gevasectomeerde mannetjes, waardoor de operaties in het vivarium worden gestroomlijnd en de 3V-principes worden ondersteund. Deze vooruitgang verhoogt de betrouwbaarheid en voorspelbaarheid bij het genereren van schijnzwangere ontvangers voor embryotransfer en kunstmatige inseminatie, wat een directe impact heeft op de toewijzing van middelen en de experimentele doorvoer.
Strategische Toepassingen in Biofarmaceutische R&D
Vroege Ontdekking & Target Validatie
- Maakt een snelle generatie van ontvangercohorten mogelijk voor genetisch gemodificeerde en op leeftijd gematchte diermodellen.
- Ondersteunt efficiënte rederivatie- en cryopreservatieworkflows door tijdige beschikbaarheid van pseudodrachtige vrouwtjes te garanderen.
- Vermindert biologische variabiliteit door de voorbereiding van ontvangers over verschillende experimenten te standaardiseren.
Screening & Assayontwikkeling
- Vergemakkelijkt de preparatie van gevalideerde diermodellen voor downstream fenotypische screening en functionele assays.
- Verbetert de reproduceerbaarheid en schaalbaarheid van protocollen voor embryotransfer en kunstmatige inseminatie.
- Maakt consistente kwantitatieve output mogelijk voor het evalueren van reproductieve en ontwikkelingsparameters.
Translationeel & Preklinisch Onderzoek
- Draagt bij aan translationele continuïteit door de productie van genetisch gemanipuleerde modellen voor ziektestudies te ondersteunen.
- Vermindert operationele knelpunten bij de generatie van preklinische modellen en de uitbreiding van cohorten.
- Ondersteunt risico-gecorrigeerde vooruitgang door procedurele fouten en het gebruik van dieren te minimaliseren.
Integratie van Pijplijn & Workflow
Dit protocol voor cervicale manipulatie is geïntegreerd in het continuüm van assisterende voortplanting, van vroege ontdekking tot de ontwikkeling van preklinische modellen en cohortbeheer.
- Discovery Biology: Stroomlijnt hypothesetoetsing en modelvalidatie door betrouwbare voorbereiding van de ontvanger te waarborgen.
- Screening: Standaardiseert de gereedheid van diermodellen voor high-throughput reproductieve en ontwikkelingsassays.
- Analytics: Levert kwantitatieve gegevens over zwangerschap en nestgrootte ter ondersteuning van het experimentele ontwerp en de resourceplanning.
- Translationeel onderzoek: Maakt continuïteit mogelijk bij het genereren en onderhouden van ziekterelateerde diermodellen.
- Enterprise hergebruik: Biedt een herbruikbare, niet-chirurgische capaciteit voor meerdere toepassingen van geassisteerde voortplanting binnen onderzoeksprogramma's.
Operationele & Bedrijfsimpact
- Wetenschappelijke waarde: Verhoogt het voorspellende vertrouwen in reproductieve resultaten en vermindert mechanistische ambiguïteit bij het genereren van modellen.
- Operationele waarde: Verbetert de standaardisatie, reproduceerbaarheid en schaalbaarheid van workflows voor geassisteerde reproductie.
- Strategische waarde: Verbetert de go/no-go besluitvorming en de kapitaalefficiëntie door het gebruik van dieren en de procedurele complexiteit te verminderen.
- Impact op portfolio: Ondersteunt risico-gecorrigeerde prioritering en de verdere ontwikkeling van genetisch gemodificeerde en ziekterelevante modellen.
Overwegingen voor Implementatie
- Vereist technische expertise in procedures voor oestrus synchronisatie en cervicale manipulatie.
- Vereist toegang tot basisinstrumentarium zoals pipetten, specula en microscopie voor cytologische evaluatie.
- Vereist standaardisatie tussen teams om reproduceerbaarheid te waarborgen en variabiliteit te minimaliseren.
- Aanpasbaar voor verschillende muizenstammen en potentieel andere knaagdiermodellen door optimalisatie van het protocol.
- Beperkingen omvatten de noodzaak van nauwkeurige vaststelling van het oestrusstadium en training van de operator om de efficiëntie te maximaliseren.
